技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明為一種qPCR鑒定牛肉的方法，涉及食品檢測(cè)和動(dòng)物分子生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，通過(guò)設(shè)計(jì)1組特異性識(shí)別牛細(xì)胞色素b基因片段的引物，上游引物序列：5′?aatacactacacatccgacac?3′，下游引物序列：5′?gacccgtaatataagcctcg?3′，濃度均為2?pmol/μL；將牛肉總DNA的濃度調(diào)至2?ng/μL作為檢測(cè)模板；制備10μL?qPCR反應(yīng)體系：2×KAPA?SYBR?Fast?qPCR?Master?mix：5μL；上、下游引物各0.5μL；模板DNA：0.5μL；滅菌純水3.5μL。再按照反應(yīng)程序：95℃變性/3?s，63℃退火/30?s，72℃延伸反應(yīng)/25?s，40次循環(huán)，實(shí)施qPCR。根據(jù)qPCR的結(jié)果分析，若在Ct值在16～29時(shí)出現(xiàn)特異性SYBR熒光信號(hào)，則判斷樣品為牛肉或是含有牛肉或牛的其他組織成份；反之不是或不含有牛肉或牛的其他組織成份。本發(fā)明為快速、準(zhǔn)確地鑒定牛肉的方法，可直接用于鑒定牛肉或牛其他組織成份的試劑盒生產(chǎn)。

技術(shù)研發(fā)人員：宋勝辰;楊仙玉;蔣桂瑾;章勝楠;李淑杰;李磊磊;宋源普
受保護(hù)的技術(shù)使用者：宋勝辰
文檔號(hào)碼：201611017651
技術(shù)研發(fā)日：2016.11.19
技術(shù)公布日：2017.01.04