本國際申請要求于2014年6月4日提交的瑞典專利申請1450678-6和2014年11月4日提交的瑞典專利申請1451315-4的優(yōu)先權(quán)，通過引證將其全部內(nèi)容明確合并于此。
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明總體上涉及免疫學(xué)領(lǐng)域并且具體地免疫療法領(lǐng)域。更具體地，本發(fā)明涉及如1型糖尿病或自身免疫糖尿病的自身免疫性疾病的預(yù)防和/或治療。本發(fā)明提供了在這種疾病的預(yù)防和/或治療中特別有用的組合物和組合。還提供了用于自身免疫性疾病的治療和/或預(yù)防的聯(lián)合治療的方法。
背景技術(shù)：
：免疫防御系統(tǒng)與許多防御系統(tǒng)一樣由許多和大部分相互作用的部分組成。存在基本上認(rèn)為通過如Toll樣受體的模式識別受體對眾所周知且常見的微生物抗原(ag)反應(yīng)的先天系統(tǒng)；以及存在可以適應(yīng)于對各種各樣的外來入侵者的響應(yīng)并生成和保持在與相同ag的新的遭遇發(fā)生的情況下快速反應(yīng)的記憶細(xì)胞的獲得性系統(tǒng)。在自身免疫性疾病中，適應(yīng)性免疫系統(tǒng)常對至少一種本身的抗原(自身抗原，aag)反應(yīng)。盡管沒有完全理解，但是自身免疫可以由若干方式引發(fā)。討論的可能的引發(fā)的實例包括但不限于對病毒、飲食、維生素、壓力、微生物、疫苗、抗生素和其他藥物的先天響應(yīng)。遺傳傾向是另外的重要因素。在內(nèi)源產(chǎn)生的自身抗原的情況下，這些在細(xì)胞內(nèi)被加工且其肽被運輸至與MHC-I分子關(guān)聯(lián)的細(xì)胞表面并呈遞至多種細(xì)胞，包括幼稚CD8+T細(xì)胞；已經(jīng)成熟的細(xì)胞毒性CD8+T細(xì)胞；和/或CD8+記憶效應(yīng)T細(xì)胞。為了活化幼稚CD8+T細(xì)胞以成熟為細(xì)胞毒性T細(xì)胞，需要與CD28有關(guān)的二次共刺激信號。不在細(xì)胞內(nèi)的自身抗原一般被如樹突狀細(xì)胞(DC)或巨噬細(xì)胞的抗原呈遞細(xì)胞(APC)吸收，且加工的肽將與MHC-II分子關(guān)聯(lián)運輸并呈遞至幼稚的、成熟的或記憶CD4+T細(xì)胞。此處也存在活化幼稚CD4+T細(xì)胞至輔助型T(Th)細(xì)胞形式所需的包括CD28的第二共刺激信號。通常討論Th細(xì)胞的兩種形式：Thl；Th2。在APC-MHCII-aag復(fù)合體和CD4+T細(xì)胞受體(TC)相遇時生成什么類型的Th細(xì)胞取決于若干因素，包括呈遞時DC的成熟度和周圍環(huán)境，包括但不限于IL-10的可用性。而Thl細(xì)胞分泌包括IFNg的炎性細(xì)胞因子，并刺激炎性細(xì)胞介導(dǎo)的響應(yīng)，Th2細(xì)胞一般分泌IL4并刺激其中BC產(chǎn)生非溶胞性和中和抗體的體液響應(yīng)。用于“包覆”和補體結(jié)合(抗體依賴的細(xì)胞毒性)的抗體通常是由先天系統(tǒng)刺激的。每種B淋巴細(xì)胞(BC)以固定的抗體分子的形式表達(dá)其獨特的和特異性的B細(xì)胞受體(BC)。而TC識別同源ag-作為MHC分子背景下的加工的肽，B細(xì)胞識別處于它們的天然形式的抗原(如不正常地與T細(xì)胞活化相互作用的未加工的抗原)，并且以大部分來自Th2信號的幫助，它們分化為產(chǎn)生漿細(xì)胞的短壽命抗體，認(rèn)為其10％變?yōu)殚L壽命的抗原特異性記憶BC。通常認(rèn)為在該領(lǐng)域中，胰島素和胰島素相關(guān)分子是在導(dǎo)致包括成人中的1型糖尿病和隱性自身免疫糖尿病的自身免疫糖尿病的過程中涉及的早期分子。已經(jīng)進(jìn)行了，且目前使用不同的源自胰島素的制劑進(jìn)行大規(guī)模的臨床試驗以誘導(dǎo)耐受且停止或防止疾病進(jìn)展。對相同目的，嘗試了包括但不限于GAD65的許多其他β細(xì)胞抗原分子及其肽，以及正在制備其他，不限于胰島素B-鏈和胰島素原及其變體，用于臨床開發(fā)。在人的免疫系統(tǒng)發(fā)展期間，認(rèn)為自體抗原反應(yīng)性淋巴細(xì)胞被克隆刪除以區(qū)分自體和非自體。非自體反應(yīng)性T淋巴細(xì)胞被保留并繼續(xù)分化為在與它們的特異性抗原相遇時可以活化的幼稚CD4+或CD8+T細(xì)胞。然而，某些自體反應(yīng)性的淋巴細(xì)胞逃離該刪除過程。如果自體抗原是隱蔽的，例如在細(xì)胞內(nèi)，更加如此。然而，在胰島素的情況下，作為大量分子的實例，相對較少的胰島素反應(yīng)性淋巴細(xì)胞逃離刪除過程因而存在相對較少的幼稚胰島素反應(yīng)性CD4+或CD8+T細(xì)胞。天然存在的大量分子，如例如胰島素，通常不被DC吸附和呈遞，除非該過程是由活化的CD8+T細(xì)胞和/或TLR信號引發(fā)的。因此，以及本領(lǐng)域可能沒有注意到的，導(dǎo)致糖尿病的自身免疫過程在許多情況下可能是由識別與靶器官的細(xì)胞上的1類MHC直接相關(guān)的aag的逃逸的CD8+幼稚胰島素反應(yīng)性淋巴細(xì)胞引發(fā)的。在遺傳傾向的情況下，胰島素反應(yīng)性的“逃逸的”幼稚CD8+胸腺細(xì)胞因此可以觸發(fā)包括生成CD8+細(xì)胞毒性細(xì)胞的炎性過程，這進(jìn)而可以誘導(dǎo)使先天系統(tǒng)警覺，包括導(dǎo)致BC產(chǎn)生胰島素抗體的細(xì)胞因子。一些β細(xì)胞將死亡并釋放隱蔽抗原，如例如GAD65，為此存在大量的幼稚的CD4+和CD8+TC。GAD65可以另外具有與進(jìn)一步刺激TLR類信號的某些病毒結(jié)構(gòu)的共同性。在自身免疫反應(yīng)進(jìn)行的同時，反炎性機制發(fā)展，如例如CTLA4分子和IL-10分泌物的表達(dá)。由于在胰島素的情況下，對出現(xiàn)的自身免疫性疾病的ADC-MHCII貢獻(xiàn)較弱，這種補償機制以自身抗原特異性的方式誘導(dǎo)對胰島素的耐受。然而GAD分子被吸收，處理的DC和GAD肽呈遞至幼稚的CD4+TC，將它們活化為輔助T細(xì)胞。因此對胰島素的暫時免疫反應(yīng)被更穩(wěn)固的對GAD的反應(yīng)代替。這解釋了為什么在許多遺傳傾向的小兒中第一種自身抗體經(jīng)常針對胰島素，以及為什么這種抗體經(jīng)常隨疾病進(jìn)展消失。Mocellin,CytokineGrowthFactorRev.2004，ThemultifacetedrelationshipbetweenIL-10andadaptiveimmunity:puttingtogetherthepiecesofapuzzle，描述了白細(xì)胞介素-10(IL-10)如何調(diào)制若干適應(yīng)性免疫相關(guān)的細(xì)胞的功能的多效性細(xì)胞因子。盡管通?？紤]為免疫抑制分子，但是IL-10在體內(nèi)模型中擁有免疫刺激性質(zhì)。作為實例，由胰島細(xì)胞局部產(chǎn)生的IL-10在NOD小鼠中刺激自身免疫的進(jìn)展，而全身給予可以具有β細(xì)胞保留和抗炎效果。提供了IL-10和涉及適應(yīng)性免疫的傳染性疾病、自身免疫、過敏癥、癌癥和移植之間的關(guān)系的概括。Russeletal,Islets.2014，Theimpactofanti-inflammatorycytokinesonthepancreaticβ-cell，近來呈現(xiàn)了如白細(xì)胞介素(IL)-4、IL-10和IL-13的抗炎分子可以施加β-細(xì)胞功能和活性的直接影響，以及這些細(xì)胞因子的循環(huán)水平可以在1型糖尿病中降低的證據(jù)，并提出抗炎路徑的靶向可以在1型糖尿病中提供治療潛能。Calcinaroetal,Diabetologia.2005，Oralprobioticadministrationinducesinterleukin-10productionandpreventsspontaneousautoimmunediabetesinthenon-obesediabeticmouse，總結(jié)了早期口腔給予益生菌預(yù)防NOD小鼠中的糖尿病發(fā)展并與胰腺中增加的IL-10表達(dá)相關(guān)，其中檢測到IL-10-陽性的胰島浸潤單核細(xì)胞。VanDongenetal,IntJCancer.2010Aug15；127(4):899-909.doi:10.1002/ijc.25113.AntiinflammatoryM2typemacrophagescharacterizemetastasizedandtyrosinekinaseinhibitor-treatedgastrointestinalstromaltumors(GIST).報告了用酪氨酸激酶抑制劑伊馬替尼和舒尼替尼處理的腫瘤在巨噬細(xì)胞培養(yǎng)物中誘導(dǎo)抗炎IL-10的分泌，指出用這些抑制劑處理可能有助于GIST中的免疫抑制微環(huán)境?？傮w上，數(shù)據(jù)顯示出GIST作為腫瘤免疫相互作用的活性位點，其中抑制機制壓制了潛在的抗癌響應(yīng)。酪氨酸激酶抑制劑可能促進(jìn)該負(fù)平衡。Louvetetal,ProcNatlAcadSciUSA.2008，Tyrosinekinaseinhibitorsreversetype1diabetesinnonobesediabeticmice，報告了酪氨酸激酶(TK)抑制劑如何提供治療自身免疫性疾病的機會。使用伊馬替尼(Gleevec)的治療預(yù)防并逆轉(zhuǎn)了NOD小鼠中的T1D。用舒尼替尼(Sutent)觀察到類似的結(jié)果。另一種TK抑制劑PLX647僅示出了較小的療效，而源自血小板的生長因子受體(PDGFR)的可溶形式PDGFRbetalg快速地逆轉(zhuǎn)了糖尿病。伊馬替尼治療導(dǎo)致持久的緩解和長期的療效，且耐受可能取決于抑制酪氨酸激酶的組合，支持了選擇性激酶抑制劑治療用于T1D的的用途。Agostinoetetal,JOncolPharmPract.Epub2010，Effectofthetyrosinekinaseinhibitors(sunitinib,sorafenib,dasatinib,andimatinib)onbloodglucoselevelsindiabeticandnondiabeticpatientsingeneralclinicalpractice,，描述了酪氨酸激酶抑制劑(TKI)如何影響用達(dá)沙替尼、伊馬替尼、索拉非尼和舒尼替尼治療的患者的血糖(BG)濃度。全部示出BG的顯著下降。盡管不清楚這些藥物的降血糖效果的機理，但是c試劑盒和PDGFRβ是常用的靶激酶。Adorini,AnnNYAcadSci.2003，TolerogenicdendriticcellsinducedbyvitaminDreceptorligandsenhanceregulatoryTcellsinhibitingautoimmunediabetes，報告了1,25-二羥基維生素D(3)誘導(dǎo)具有耐受原表型的DC，其特征在于CD40、CD80、和CD86共刺激分子的表達(dá)降低、低IL-12和增強的IL-10分泌。使用1,25-(OH)(2)D(3)的治療誘導(dǎo)對與1型CD4(+)和CD8(+)細(xì)胞的發(fā)育受阻有關(guān)的小鼠胰島異源移植的耐受度和增加百分比的CD4(+)CD25(+)調(diào)控細(xì)胞，以及以非高鈣學(xué)劑量抑制糖尿病發(fā)展，表明維生素D是用于治療1型糖尿病的一個方式。Heineetal,EurJImmunol.2008，1,25-dihydroxyvitaminD(3)promotesIL-10productioninhumanBcells，報告了1,25-二羥基維生素D(3)(骨化三醇)抑制由B細(xì)胞的IgE的表達(dá)并增強由樹突狀細(xì)胞和T細(xì)胞的IL-10的表達(dá)。活化的B細(xì)胞中維生素D信號、IL-10的表達(dá)和它們由其前體產(chǎn)生骨化三醇的能力之間的分子聯(lián)系表明可以將25-羥基維生素D(3)用作免疫響應(yīng)的調(diào)制劑。Niiroetal,BiochemBiophysResCommun.1998，MAPkinasepathwaysasarouteforregulatorymechanismsofIL-10andIL-4whichinhibitCOX-2expressioninhumanmonocytes，描述了促分裂原活化的蛋白激酶(MAPK)如何被活化以及在調(diào)節(jié)單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞中的促炎性分子的表達(dá)中起重要作用。脂多糖(LPS)刺激的人單核細(xì)胞誘導(dǎo)COX-2蛋白質(zhì)和COX-2mRNA表達(dá)以及單核細(xì)胞中的信號調(diào)節(jié)的蛋白激酶(ERK)2和p38MAPK。COX-2mRNA、COX-2蛋白質(zhì)和前列腺素(PG)E2由LPS的誘導(dǎo)受ERK和p38MAPK的特異性抑制劑的抑制。白細(xì)胞介素(IL)-10類似地抑制COX-2表達(dá)。LPS誘導(dǎo)的磷酯化以及ERK2和p38MAPK的活化顯著受IL-10的抑制，表明IL-10對LPS誘導(dǎo)的促炎性分子的表達(dá)的抑制可以歸因于兩種細(xì)胞因子對MAPK活化的調(diào)節(jié)效果。Obermajeretal,Blood.2011，PositivefeedbackbetweenPGE2andCOX2redirectsthedifferentiationofhumandendriticcellstowardstablemyeloid-derivedsuppressorcells，描述了樹突狀細(xì)胞(DC)和源自骨髓的抑制細(xì)胞(MDSC)是如何在免疫系統(tǒng)中顯示出相反作用的。環(huán)氧酶2(COX2)是PGE(2)合成的關(guān)鍵調(diào)節(jié)子和重新定向CDla(+)DC至CD14(+)CD33(+)CD34(+)單核細(xì)胞MDSC的發(fā)展的決定因素。外源PGE(2)以及如脂多糖、IL-Ιβ和IFNy的各種COX2活化劑都誘導(dǎo)COX2的表達(dá)，阻礙它們分化為CDla(+)DC并誘導(dǎo)內(nèi)源PGE(2)、IDOl、IL-4Ra、NOS2和IL-10、典型的MDSC有關(guān)的抑制劑。使用COX2抑制劑或EP2和EP4拮抗劑破壞COX2-PGE(2)的反饋抑制了MDSC有關(guān)的抑制劑的產(chǎn)生和來自癌癥患者的充分發(fā)展的MDSC的CTL抑制功能。COX2-PGE(2)反饋在MDSC的誘導(dǎo)和持續(xù)中的中心作用突出了其增強或抑制癌癥、自身免疫或移植中的免疫響應(yīng)的操作的潛力。Lieb,MedHypotheses.2007，Antidepressants,prostaglandinsandthepreventionandtreatmentofcancer，報告了假設(shè)的致癌機制為環(huán)氧酶的上調(diào)、致癌基因的合成和表達(dá)、病毒活化、信號破壞、失效的細(xì)胞凋亡、腫瘤起始和擴(kuò)散、血管生成、轉(zhuǎn)移、免疫抑制、端粒酶活性和自身免疫。所有均由前列腺素調(diào)節(jié)。在服用如茚甲新和布洛芬的非甾體的、抗前列腺素藥物的患者中已經(jīng)記錄了癌癥的可觀察的和射線照相的衰退。Kim,etal,ImmuneNetw.2010，CyclooxygenaseInhibitors,AspirinandIbuprofen,InhibitMHC-restrictedAntigenPresentationinDendriticCells呈遞，報告了NSAID對T和B細(xì)胞具有免疫調(diào)節(jié)效果以及布洛芬抑制樹突狀細(xì)胞(DC)中的抗原的I類和II類MHC限制的呈遞。布洛芬不抑制DC的吞噬活性、總的MHC分子和共刺激分子在DC上的表達(dá)水平。布洛芬相反地增加總的MHC分子和共刺激分子在DX上的表達(dá)水平。結(jié)果證明布洛芬抑制吞噬的抗原的細(xì)胞內(nèi)加工，并表明延長的高劑量的NSAID的給予可以削弱DC呈遞與MHC分子有關(guān)的抗原的能力。Gribbenetal,Immunology1994，CTLA4mediatesantigen-specificapoptosisofhumanTcells，描述了CTLA4分子如何是通過TC或CD28活化誘導(dǎo)的T細(xì)胞限制分子。在正在進(jìn)行的免疫響應(yīng)中，促炎性和非促炎性信號之間存在平衡。CD28或CD28/CTLA4的共用結(jié)合區(qū)域通過單抗或天然配體B7-1和2的交聯(lián)提供了導(dǎo)致促炎性IL-2上調(diào)的積極共刺激信號。事實上，CTLA4的交聯(lián)可以向CD28提供弱的共刺激信號。在T細(xì)胞活化之后，CD28表達(dá)下調(diào)且CTLA4上調(diào)。這時，在不存在CD28共刺激的情況下CTLA4的交聯(lián)可以誘導(dǎo)刪除之前活化的T細(xì)胞，這表示CTLA4可以根據(jù)T細(xì)胞的活化狀態(tài)共刺激和誘導(dǎo)刪除。Posadasetal,ClinicalImmunology2009，Abataceptinthetreatmentofrheumatoidarthritis，描述了在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)中，T細(xì)胞和包括樹突狀細(xì)胞DC、巨噬細(xì)胞和成纖維細(xì)胞的若干其他細(xì)胞表達(dá)活化標(biāo)記物如CD28和細(xì)胞毒性T細(xì)胞抗原4(CTLA4)。在周圍血液中幼稚T細(xì)胞需要兩種信號來活化它們的全部功能潛能：i)在MHC分子的環(huán)境下的呈遞至T細(xì)胞上的對應(yīng)的抗原特異性T細(xì)胞受體(TCR)的抗原呈遞細(xì)胞(APC)上的抗原；和ii)T細(xì)胞上的CD28與APC上的CD80/86的配位。在沒有共刺激的情況下通過同源抗原的幼稚T細(xì)胞的刺激導(dǎo)致T細(xì)胞無免疫性，而在不存在同源抗原的情況下T細(xì)胞上的共刺激分子的配位對T細(xì)胞沒有影響。用兩種信號成功刺激之后在活化的T細(xì)胞上上調(diào)的表面分子中的一種是CTLA4。其以比CD28高的親和力結(jié)合至CD80/80。這不僅阻礙CD28結(jié)合而且CTLA4還誘導(dǎo)抑制信號至新活化的T細(xì)胞中。阿巴西普(Fc修飾的CTLA4免疫球蛋白)是由人CTLA4的細(xì)胞外部分和人IgGl的重鏈組成的T細(xì)胞去除、免疫調(diào)制的融合蛋白。其阻礙幼稚T細(xì)胞活化中涉及的共刺激信號。其與APC上的CD80/86的配位還干擾和減少CD80/86誘導(dǎo)的IL-6，這可以下調(diào)炎性細(xì)胞因子如IL-lβ、IFNγ和IL-17。阿巴西普與CD80/86的進(jìn)一步的配位可以誘導(dǎo)APC中的吲哚胺雙加氧酶(IDO)，其進(jìn)而可以誘導(dǎo)T細(xì)胞中的無免疫性，以及下調(diào)幼稚T細(xì)胞的通過活化的T細(xì)胞的旁分泌活化。關(guān)于阿巴西普影響記憶CD4+T細(xì)胞的回憶、重新刺激的能力已經(jīng)呈現(xiàn)了矛盾的看法。在B細(xì)胞上表達(dá)的CD80/86仍可以是其中阿巴西普可以進(jìn)行免疫調(diào)制功能的進(jìn)一步的路徑。Patakasetal,abstract#723AC/AHP,2013,AbataceptisHighlyEffectiveAtInhibitingTcellPrimingandInducesaUniqueTranscriptionalProfileInCD4+TCells，示出了在阿巴西普存在下使用卵清蛋白的sc激活如何產(chǎn)生大量的IL-2，從而類似于首次暴露于抗原的幼稚T細(xì)胞。這些T細(xì)胞包含比其他(未激活的或幼稚的)T細(xì)胞群體少的調(diào)節(jié)T細(xì)胞和CD4+T細(xì)胞，并且它們的狀態(tài)伴隨著樹突狀細(xì)胞在轉(zhuǎn)錄水平的活化的抑制。Patakas得出結(jié)論雖然阿巴西普顯著調(diào)制T-DC通信，導(dǎo)致有缺陷的細(xì)胞激活，但這是不同于無免疫性耐受的。Orbanetal,Lancet2011,Co-stimulationmodulationwithabataceptinpatientswithrecent-onsettype1diabetes:arandomised,double-blind,placebo-controlledtrial報告了如通過刺激的C-肽測量的阿巴西普與安慰劑相比在開始的6個月內(nèi)顯著保持內(nèi)源胰島素分泌，然后下降至與安慰劑組平行。認(rèn)為早期有利的效果是由于阿巴西普阻礙防止活化幼稚T細(xì)胞的共刺激B80/86-CD28信號。推測之后的6個月β細(xì)胞功能的連續(xù)下降是由于隨疾病進(jìn)展連續(xù)的T細(xì)胞活化減少。盡管Orban提到幼稚T細(xì)胞的活化需要兩種信號，而一種由APC上的MHC分子環(huán)境下呈遞的抗原包含；以及另一種是涉及T細(xì)胞上的CD28分子的共刺激信號，在該試驗中沒有使用特異性抗原。這可能是以下根據(jù)的理由，雖然阿巴西普最初且成功地防止幼稚T細(xì)胞活化為細(xì)胞毒性T細(xì)胞，但是這可以最終被免疫系統(tǒng)的其他部分(如例如增加的IL-2的分泌)抵消和/或補償，并且當(dāng)這發(fā)生時，誘導(dǎo)對特異性抗原的耐受的窗口丟失。Orbanetal,DiabetesCare2013,CostimulationModulationWithAbataceptinPatientsWithRecent-OnsetType1Diabetes:Follow-up1YearAfterCessationofTreatment，隨后報告了停止藥物給予之后的一年有利的效果繼續(xù)，盡管活性臂和空白對照之間的差異減少。因此，在開始治療之后36個月，與空白對照受試者的30％相比，活性臂中的患者的35％具有峰值刺激的C-肽>0.2nmol/l。指出在DR3陰性患者中用阿巴西普治療缺少效果。上述的兩個Orban研究表示在近來發(fā)作的1型糖尿病患者中阿巴西普作為單獨的療法的免疫調(diào)節(jié)不足以具有持續(xù)的β細(xì)胞功能保持效果。Verhagenetal,PLOS2014,CTLA-4ModulatestheDifferentiationofInducibleFoxp3+TregCellsbutIL-10MediatesTheirFunctioninExperimentalAutoimmuneEncephalomyelitis，得出結(jié)論IL-10的存在是用于增強調(diào)節(jié)T細(xì)胞的抑制效果的一個重要因素。GAD65(谷氨酸脫羧酶的65kd同種型)是主要的β細(xì)胞自身抗原，因為其在小島中產(chǎn)生并作為對β細(xì)胞刺激的響應(yīng)而釋放增加。已經(jīng)示出該蛋白質(zhì)深入地影響自身免疫的免疫過程。大量的研究示出GAD可以預(yù)防實驗動物的糖尿病。GAD與病毒蛋白質(zhì)的類似性對治療行為可以是重要的。即使在免疫過程開始之后，觀察的效果也表明可以在人類中預(yù)期相同的效果。在氫氧化鋁(alum)中配置重組GAD并且在LADA患者的II期研究中，一次低劑量的Diamyd20μg的給予導(dǎo)致與安慰劑治療的組相比持續(xù)高達(dá)2年的改善的β細(xì)胞功能，而沒有副作用。還嘗試了其他劑量：4μg示出無效果，100μg示出與20μg類似的效果，同時500μg示出無效果。發(fā)現(xiàn)了與CD4+CD25+/CD4-CD25-細(xì)胞的比值的變化的關(guān)聯(lián)，表明了作用機制。在該背景下，進(jìn)行了10-18歲近期發(fā)作的1型糖尿病患者的II期研究。在第1和30天隨機給予患者20μgGAD-alum(Diamyd)sc或安慰劑。30個月之后效果仍是明顯的并且明顯地是在統(tǒng)計學(xué)和臨床意義上顯著的，其中與安慰劑組相比在GAD治療的組中約一半的C-肽下降。糖尿病持續(xù)時間<3個月的患者具有明顯良好的效果，其中在后續(xù)的前15個月沒有或有最少的β細(xì)胞功能的下降。48個月之后，治療<6個月持續(xù)時間的患者仍具有顯著保持的C-肽且沒有不利現(xiàn)象。隨后，在歐洲在美國開始了III期試驗。在歐洲，將334個患者招募至三臂，一個臂在第1、30、90和270天使用GAD-alum(Diamyd)20μg，另一臂在第1和30天使用GAD-alum20μg且第90天和270天使用安慰劑，以及第三臂在第1、30、90和270天使用安慰劑。盡管看到積極的趨勢(16％療效，p＝0.1)，但是在第15個月沒有滿足在混合膳食耐受測試(MixedMealToleranceTest，MMTT)之后的主要終點，血清C-肽AUC。這促使早期終止了III期試驗。然而，歐洲III期在某些預(yù)先指定的亞組中確實示出了統(tǒng)計學(xué)上顯著的療效。而且，當(dāng)停止研究時，45個瑞典患者已經(jīng)通過了30個月的探視，并且接受了兩次劑量的GAD-alum(Diamyd)20μg那15位患者在30個月之后與安慰劑相比示出C-肽的顯著保持。注意到這些瑞典患者是在第15個月沒有療效的，而在非北歐患者中在第15個月發(fā)現(xiàn)了療效。得出結(jié)論雖然部分有效，可能需要將GAD-alum與其他化合物組合以成為用于1型糖尿病的臨床有效的治療方案的一部分。Denesetal,DiabetesTechnolTher.2010,Autoantigensplusinterleukin-10suppressdiabetesautoimmunity，報告了盡管表達(dá)融合至自身抗原谷氨酸脫羧酶(GAD65)的免疫調(diào)制霍亂毒素B亞單位(CTB)或免疫抑制細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-10(IL-10)的重組牛痘病毒(rVV)菌株能夠在NOD小鼠中獨立地僅生成低水平的1型糖尿病(TIDM)的免疫抑制，但是牛痘病毒(VV)介導(dǎo)的CTB::GAD融合蛋白和IL-10蛋白質(zhì)的組合示出是用于TIDM的更有效的和持久的免疫治療策略。Robertetal,Diabetes.2014,Oraldeliveryofglutamicaciddecarboxylase(GAD)-65andIL10byLactococcuslactisreversesdiabetesinrecent-onsetNODmice，最近示出了與短療程的低劑量抗-CD3組合的口腔遞送用于T1D自身抗原GAD65370-575肽和抗炎性細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-10的受控分泌的活的乳酸乳球菌(LL)細(xì)菌保持了近期發(fā)作的NOD小鼠中的功能性β-細(xì)胞群。Skyleretal,Diabetes2011,StoppingType1Diabetes,AttemptstoPreventorCureType1DiabetesinMan(其包括的參考文獻(xiàn)全部結(jié)合于此)，涉及免疫調(diào)制劑和抗原特異性治療的組合方案提供了持續(xù)更久的T1D治療的合理性。Staevaetal,DIABETES,VOL.62,JANUARY2013，RecentLessonsLearnedfromPreventionandRecent-OnsetType1DiabetesImmunotherapyTrials(其包括的參考文獻(xiàn)全部結(jié)合于此)，報告了目前的思考的現(xiàn)狀并推薦評估包括自體抗原和抗炎化合物的組合治療。Skyler,DIABETESTECHNOLOGY&THERAPEUTICS,Volume16,Supplement1,2014,ImmuneInterventionforType1Diabetes,2012-2013(將其全部內(nèi)容結(jié)合于此)，回顧了本領(lǐng)域近期的試驗。Rigbyetal,CurrentOpinionEndocrinolDiabetesObes2014,21:271-278,Targetedimmuneinterventionsfortype1diabetes:notaseasyasitlooks！(其包括的參考文獻(xiàn)全部結(jié)合于此)描述了對抗自身免疫糖尿病的許多努力并得出結(jié)論盡管接近數(shù)百位參與者的十二次試驗，但是沒有發(fā)現(xiàn)單藥治療并且：a)不同亞群的T1D患者似乎對免疫干涉響應(yīng)不同，表明顯著的多樣性；b)有效的療法必須組合Teff細(xì)胞的抑制(通過去除、增強抑制能力或兩者)與Treg的刺激(通過增加頻率或功能，包括促炎性環(huán)境的消除)；且這可能需要包含Teff去除試劑、Treg提高藥劑和抗原的組合。如以上參考的，若干單藥治療和包含多種化合物的組合方案在小鼠模型中示出自身免疫糖尿病的預(yù)防和治療中的有希望的效果。然而，將這種方案轉(zhuǎn)移至人都未能示出臨床上有意義的效果。因此，仍存在減輕社會和患者的破壞性疾病自身免疫糖尿病及其長期的并發(fā)癥的難以克服的需要。本發(fā)明的主題是公開用于預(yù)防和治療T1D和LADA的自身免疫成分，為用于內(nèi)源或通過其他實現(xiàn)的方法增加功能性β細(xì)胞群做準(zhǔn)備的方法和組合物。技術(shù)實現(xiàn)要素：在一方面中，本發(fā)明涉及用于預(yù)防和/或治療自身免疫性疾病的方法，包括將組合物給予至具有50納摩爾/升以上的血清維生素-D水平的受試者，所述組合物包含至少一種β細(xì)胞自身抗原。本發(fā)明公開了與方法組合使用抗炎性化合物和自身抗原以使樹突狀抗原呈遞細(xì)胞(APC)在呈遞所述自身抗原至免疫系統(tǒng)時更“耐受”的方法。本發(fā)明公開了其中可以將包含抗炎性化合物、自身抗原和維生素D的組合方案有效用作用于T1D和其他自身免疫性疾病的預(yù)防和治療方法的方法。在進(jìn)一步的方面中，本發(fā)明涉及用于預(yù)防和/或治療自身免疫性疾病的方法，包括通過淋巴管內(nèi)注射或直接注射至淋巴結(jié)中來將組合物給予至受試者，所述組合物包含至少一種β細(xì)胞自身抗原。在進(jìn)一步的方面中，本發(fā)明涉及用于預(yù)防和/或治療自身免疫性疾病的方法，包括以在數(shù)周、數(shù)月或數(shù)年的周期內(nèi)增加的劑量將至少一種β細(xì)胞自身抗原給予至受試者。在進(jìn)一步的方面中，本發(fā)明涉及包含多個顆粒的組合物，該顆粒各自具有固定在其表面上的至少一種第一和至少一種第二抗原，其中，第一抗原是β細(xì)胞自身抗原，且第二抗原是耐受原或β細(xì)胞自身抗原，該組合物進(jìn)一步可選地包含藥用的佐劑、賦形劑、溶劑和/或緩沖劑。在進(jìn)一步的方面中，本發(fā)明涉及包含以下的組合物i)至少一種β細(xì)胞自身抗原，和以下各項中的至少一種：iia)選自由維生素-D、維生素-D類似物、酪氨酸激酶抑制劑、γ-氨基丁酸和γ-氨基丁酸類似物組成的組的IL-10誘導(dǎo)化合物；和iib)降低樹突狀細(xì)胞的活化幼稚CD4+T細(xì)胞的能力的化合物，如環(huán)氧酶抑制劑、CTLA-4化合物或TNFα抑制劑；以及可選地藥用的佐劑、賦形劑、溶劑和/或緩沖劑。在進(jìn)一步的方面中，本發(fā)明涉及包含以下的藥物試劑盒：i)包含β細(xì)胞自身抗原的組合物，和以下各項中的至少一種：iia)包含選自由維生素-D、維生素-D類似物、酪氨酸激酶抑制劑、γ-氨基丁酸、和γ-氨基丁酸類似物組成的組的IL-10誘導(dǎo)化合物；和iib)包含降低樹突狀細(xì)胞的活化幼稚CD4+T細(xì)胞的能力的化合物，如環(huán)氧酶抑制劑、CTLA-4化合物或TNFα抑制劑的組合物。在進(jìn)一步的方面中，本發(fā)明涉及β細(xì)胞自身抗原用于根據(jù)本發(fā)明的方法的用途。在從屬權(quán)利要求中闡述了本發(fā)明的優(yōu)選實施方式。定義除非任何其他表達(dá)由本公開的上下文是明顯的，否則本文使用的所有術(shù)語和表達(dá)旨在具有本申請?zhí)峤蝗諘r本領(lǐng)域技術(shù)人員給定它們的含義。然而，為了清楚，在以下明確定義了某些術(shù)語和表達(dá)。“自身抗原”或“自體抗原”是具有與自身抗體相互作用并引起免疫響應(yīng)的內(nèi)源組織成分。“β細(xì)胞自身抗原”是來源于胰腺β細(xì)胞的自身抗原。“自身抗體”是與產(chǎn)生它們的有機體的自身抗原反應(yīng)的抗體。術(shù)語“維生素D生包括維生素D2和維生素D3?！熬S生素D類似物”無偏見地包括鈣化醇、二氫速甾醇、阿法骨化醇、骨化三醇、膽骨化醇、和骨化二醇、和它們的組合、以及分類在解剖學(xué)治療學(xué)及化學(xué)分類系統(tǒng)(AnatomicalTherapeuticChemicalClassificationSystem)的組A11CC中的任何其他的維生素D。術(shù)語“環(huán)氧酶抑制劑”或“抑制劑”涉及與環(huán)氧酶組合且從而防止其與花生四烯酸的底物-酶組合并形成類花生酸、前列腺素和促血栓素的化合物。環(huán)氧酶抑制劑的亞組是環(huán)氧酶-2抑制劑，其具有對環(huán)氧酶-2特異性。術(shù)語“TNFα抑制劑”涉及抑制腫瘤壞死因子α(TNFα)的作用的化合物，并包括阿達(dá)木單抗、賽妥珠單抗、依那西普、戈利木單抗、英利西單抗、以及分類在解剖學(xué)治療學(xué)及化學(xué)分類系統(tǒng)的組L04AB中的任何其他化合物?！氨砦弧笔悄軌蛞鹈庖唔憫?yīng)和能夠與產(chǎn)生的對抗該響應(yīng)的抗體或T細(xì)胞受體結(jié)合的抗原的表面部分。術(shù)語“γ-氨基丁酸類似物”包括氮己烯酸和巴氯芬。使用單數(shù)“一個”“一種”等的表達(dá)應(yīng)解釋為包括復(fù)數(shù)。如本文所使用的，“共給予”是指給予本發(fā)明的方案的化合物使得它們的給藥方案重疊。不需要同時給予它們?？s寫“寫“疊。代表“表型糖尿病”。具體實施方式在當(dāng)對胰島素的第一自身抗體出現(xiàn)在遺傳傾向的個體，如例如但不限于DR3-單體型個體中且沒有檢測到其他自身抗體時，這可能意味著GAD-反應(yīng)性CD8+和CD4+TC還沒有被活化，其提供了在不使用β細(xì)胞抗原的情況下用單獨的抗炎性和/或淋巴細(xì)胞分化抑制劑完全終止疾病的機會窗口，因為對胰島素的自身免疫可能通過抵消機制被自身消除。在該情形下，仍產(chǎn)生很少的(如果有的話)GAD-反應(yīng)性活化的CD4+T輔助細(xì)胞，重要的是引導(dǎo)活化遠(yuǎn)離促炎性Thl。在GAD抗體陽性個體和/或糖尿病患者中，可以添加配制在，通常認(rèn)為是Th2驅(qū)動佐劑的alum中的GAD和其他β細(xì)胞抗原，用于抗原特異性耐受的目的。雖然這可能產(chǎn)生比促炎性細(xì)胞更多的Th2-細(xì)胞和調(diào)節(jié)T細(xì)胞，但是包括內(nèi)部環(huán)境因素的若干因素可能使耐受效果無效。因此，將自身抗原的Th2驅(qū)動制劑用作單一療法可能是不夠的，且本發(fā)明公開了增強β細(xì)胞耐受化流程的組合物和組合方案。先前通過給予單一療法如GAD和胰島素抗原；抗炎性化合物如對CD3、CD20的抗體；胸腺球蛋白(Thymoglobulin)、阿巴西普、阿法西普、或TNFα抑制劑如依那西普在自身免疫疾病中誘導(dǎo)免疫調(diào)節(jié)的嘗試已經(jīng)示出了一些療效，但是這些效果的持續(xù)時間或它們在疾病顯現(xiàn)之后的療效限制了將這些途徑帶至臨床。本發(fā)明公開了用于治療和預(yù)防自身免疫性疾病的新策略，在維生素D強化的DC中與自身抗原和抗炎劑協(xié)同作用以提供多種程度的效果。本發(fā)明因此提供了用于預(yù)防和/或治療如自身免疫糖尿病的自身免疫性疾病的方式(例如方法，組合物和組合)。本發(fā)明利用維生素D(VitD)強化不成熟的樹突狀細(xì)胞(DC)為更致耐受性的知識，其迄今為止沒有被證明充分地改變?nèi)魏巫陨砻庖咝约膊〉那闆r，和及時的組合VitD的給予和與所述自身免疫性疾病相關(guān)的自體抗原的給予，因此強化給予的自體抗原的致耐受性免疫調(diào)節(jié)。為了進(jìn)一步增強其中在具有適當(dāng)?shù)腣itD血清濃度的受試者中DC呈遞自體抗原至免疫系統(tǒng)的耐受環(huán)境，本發(fā)明公開了共同使用常用的抗炎化合物與自身抗原的組合方案適用于治療和預(yù)防T1D的發(fā)現(xiàn)。超出其潛在的協(xié)同效應(yīng)，共同給予本發(fā)明的化合物的另一優(yōu)勢涉及自身免疫疾病經(jīng)常包括針對多種自體抗原的自身免疫響應(yīng)的問題?？赡茈y以使用直接的抗原特異性耐受化用它們所有的同源抗原嘗試無免疫性化或消除所有自身攻擊性的淋巴細(xì)胞，因為可能不是所有同源抗原是已知的。例如，認(rèn)為I型糖尿病(T1D)是由進(jìn)入胰島的自身攻擊性淋巴細(xì)胞引起的，它們在胰島中破壞β細(xì)胞。這種細(xì)胞的活化可能是多因素的，包括遺傳傾向、環(huán)境觸發(fā)如病毒，以及可能胰腺(胰島)的損傷，例如由局部促炎癥反應(yīng)導(dǎo)致。由于在通過篩選胰島細(xì)胞抗體確定前期糖尿病人類個體時，自身攻擊性過程通常有相當(dāng)?shù)倪M(jìn)展，所以可以假設(shè)在該疾病階段將正在進(jìn)行對多于一種胰島抗原的攻擊響應(yīng)。此外，不將慢性的非特異性全身免疫抑制考慮為選擇，因為糖尿病常常影響年幼的個體，且終生的免疫抑制關(guān)系到副作用，其即使與單獨的胰島素療法相比也是不可接受的。因此，具有特異性和低全身副作用的有療效的免疫類干涉是非常期望的。本方法解決了多種自體抗原靶的問題，因為本發(fā)明的化合物的共同給予可以足以重建對為自身免疫性疾病的靶的多種自體抗原的耐受。本方法還解決了慢性非特異性全身免疫抑制的問題，因為共同給予本發(fā)明的化合物可以在不需要連續(xù)的終生給藥的情況下重建長期的耐受。在不受理論約束的情況下，本發(fā)明提供了共同給予本發(fā)明的化合物具有通過誘導(dǎo)調(diào)節(jié)T細(xì)胞(以及調(diào)節(jié)抗原呈遞細(xì)胞(APC))的活化/擴(kuò)增來協(xié)同建立部分長期耐受的潛力。已經(jīng)描述了調(diào)節(jié)T細(xì)胞的許多不同的表型。它們可以在胸腺切除術(shù)之后出現(xiàn)并且可以在全身免疫調(diào)制之后被誘導(dǎo)。它們的效應(yīng)子功能不是完全已知的。它們看起來是免疫系統(tǒng)固有平衡的一部分且它們的損失導(dǎo)致嚴(yán)重的免疫的調(diào)節(jié)障礙和自身免疫。已經(jīng)描述了具有定義的抗原特異性的Th2-樣調(diào)節(jié)子。認(rèn)為它們起旁觀者抑制劑的作用并在抗原特異性免疫之后出現(xiàn)。Homannetal.,J.Immunol.(1999)163:1833-8.根據(jù)它們的效應(yīng)子功能，已經(jīng)將它們命名為Th3(TGF-β生產(chǎn)子)。這些細(xì)胞是具有特異化的效應(yīng)子功能的抗原特異性的淋巴細(xì)胞且表現(xiàn)與Th2細(xì)胞不同。因此施加所謂的Thl/Th2范式至這些細(xì)胞可以是誤導(dǎo)性的。旁觀者抑制涉及抗原擴(kuò)散的現(xiàn)象。認(rèn)為抗原擴(kuò)散是局部自身免疫過程的進(jìn)展期間的主要組成部分。因此可以假設(shè)當(dāng)患者具有若干自身抗體時，自身攻擊性響應(yīng)可以涉及許多自體抗體(或“自身抗原”)。由于對于特定的自身免疫異常，可能不能識別大部分的自身抗原，所以不可以用涉及對相應(yīng)的MHC限制元素和肽的認(rèn)識耐受各種自身攻擊性特異性。通過本方法誘導(dǎo)調(diào)節(jié)細(xì)胞在這種情形下具有若干優(yōu)點。例如已知T1D中的調(diào)節(jié)T細(xì)胞可以作為旁觀者抑制劑在淋巴結(jié)和胰島中局部作用，這意味著它們可以以其他的自身抗原特異性抑制攻擊性的淋巴細(xì)胞。這可以通過例如具有免疫調(diào)制功能的細(xì)胞因子的分泌，通過調(diào)制抗原呈遞細(xì)胞(APC)發(fā)生。因此，這種旁觀者抑制劑T調(diào)節(jié)細(xì)胞可以在不知道它們的明確特異性的情況下抑制對若干其他自身抗原的自身攻擊性。在沒有檢測到對于至少再一種隱蔽的(較少量的)第二自體抗原的自身抗體的同時，對于大量的如例如遺傳傾向個體中的胰島素的第一抗原或自體抗原的第一抗體的存在可以在其僅使用抗炎手段和/或淋巴細(xì)胞分化抑制劑的追蹤中提供終止可能出現(xiàn)的疾病過程的機會窗口。事實上，由于相對少的來自胸腺逃逸的胰島素特異性自身反應(yīng)性CD8+和CD4+T細(xì)胞(TC)中的克隆刪除過程可以刺激對這種弱的第一自體抗原的炎性響應(yīng)，所以炎癥可以減弱且在一些實施方式中可以將所述第一抗原用作誘導(dǎo)對其他(或許更隱蔽或不常見的自身抗原)的耐受度的耐受原，對于其更多逃逸的幼稚自身反應(yīng)性CD8+和CD4+T細(xì)胞可用于活化。在自身免疫被觸發(fā)至更有效的自身抗原，如例如在自身免疫糖尿病的情況下的GAD65，且其能夠驅(qū)動疾病進(jìn)程的情形下，在不使用上述有效的自身抗原用于誘導(dǎo)活性耐受化的情況下，單獨使用抗炎手段和/或淋巴細(xì)胞分化抑制劑是不夠的。另一方面，僅使用配制在如氫氧化鋁(此處物“處巴細(xì)胞分)的佐劑(往往考慮Th2驅(qū)動的佐劑)中的例如GAD65的一種有效的自身抗原可能不僅導(dǎo)致調(diào)節(jié)成分的活化，而且導(dǎo)致促炎性和/或細(xì)胞毒性分子和細(xì)胞的活化，不限于屬于天生免疫系統(tǒng)、巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、B細(xì)胞(BC)、T細(xì)胞(TC)的分子或其他因素，包括可以貢獻(xiàn)抵消耐受的環(huán)境因素。此外，可以使用其他較少的Th2驅(qū)動的佐劑制劑，如鹽水或人血清白蛋白。因此，使用單種自身抗原作為單藥治療可能是不夠的，且本發(fā)明公開了使用兩種自身抗原來增強配制在alum、鹽水或人血清白蛋白中的給予的自身抗原的特異性耐受作用的組合物和方法。本發(fā)明在一個方面提供了包含至少一種抗原的至少一種藥物組合物。根據(jù)本發(fā)明的至少一種藥物組合物因此在一些實施方式中可以包含至少兩種抗原。根據(jù)某些其他的實施方式，至少一種組合物包含至少三種自身抗原。根據(jù)某些其他的實施方式，至少一種組合物包含至少四種自身抗原。根據(jù)某些其他的實施方式，可以將抗原配制在單獨的組合物中。最優(yōu)選的是將根據(jù)本發(fā)明的所有抗原配制在相同的組合物中。在一些實施方式中，所有抗原是自身抗原，在一些其他的實施方式中，一些或所有抗原是免疫系統(tǒng)已經(jīng)對其發(fā)展了調(diào)節(jié)響應(yīng)從而能夠以耐受方式影響對其他自身抗原的反應(yīng)的抗原(耐受原)。本發(fā)明的主題是公開使得能夠誘導(dǎo)對在自身免疫性疾病中被攻擊的自體結(jié)構(gòu)的耐受的組合物、方案和方法。在一個具體的實施方式中，至少兩種抗原關(guān)聯(lián)至一種載體顆粒，因此將來自適應(yīng)性免疫系統(tǒng)的免疫細(xì)胞暴露于對所述免疫細(xì)胞具有多種影響的至少兩種抗原，導(dǎo)致對經(jīng)受自身免疫攻擊的自體結(jié)構(gòu)的改變的響應(yīng)。通過將蛋白質(zhì)或肽抗原吸附、結(jié)合或裝入免疫系統(tǒng)與其反應(yīng)的載體顆粒，并通過例如皮下注射將顆粒插入人組織中，可以靶向蛋白質(zhì)或肽用于被免疫系統(tǒng)攝取。類似地，通過樹突狀細(xì)胞或巨噬細(xì)胞(抗原呈遞細(xì)胞，APC)進(jìn)行攝取。在該過程中攝取的蛋白質(zhì)或肽中的一些將通過HLA(MHC)蛋白質(zhì)被呈遞至適應(yīng)性免疫系統(tǒng)，并且適應(yīng)性免疫反應(yīng)將隨之發(fā)生。適應(yīng)性響應(yīng)會受天生免疫系統(tǒng)的活性水平和受針對通過過程中HLA蛋白質(zhì)呈遞的任何抗原存在的免疫響應(yīng)的影響。這些影響蛋白質(zhì)可以是在相同過程中攝取和呈遞的顆粒結(jié)合肽或蛋白質(zhì)、或天然蛋白質(zhì)、自身抗原或耐受原(免疫系統(tǒng)以耐受方式與其反應(yīng)的抗原)。如果這些蛋白質(zhì)被相同的免疫細(xì)胞攝取，則它們將由細(xì)胞表面上的HLA蛋白質(zhì)一起呈遞。非天然肽向免疫系統(tǒng)的呈遞可以是受在對組織破壞的響應(yīng)中來自天生免疫系統(tǒng)的信號的影響，具有Th2特征。包含自身抗體和RNA-核苷酸等的內(nèi)源抗原可以是相同的。天然蛋白質(zhì)或?qū)ζ湟呀?jīng)存在響應(yīng)的蛋白質(zhì)將通過適應(yīng)性免疫細(xì)胞開始發(fā)信，這將影響總的免疫響應(yīng)，并可以活化耐受原信號或先前存在的Thl反應(yīng)。如果由注射過程且由幼稚免疫細(xì)胞和抗原呈遞免疫細(xì)胞的相互相用誘導(dǎo)的信號強于之前存在的響應(yīng)，則將形成包含記憶細(xì)胞的新的免疫響應(yīng)。如果注射和攝取并相同的APC呈遞置于相同的顆粒載體上的蛋白質(zhì)的組合物，則通過擴(kuò)大可能的相互作用的適應(yīng)性免疫細(xì)胞的數(shù)目，效果將是增加的，導(dǎo)致盡管與蛋白質(zhì)中的一種的可能的之前存在的反應(yīng)，但是形成新型免疫反應(yīng)的幾率增加。如果將蛋白質(zhì)自身抗原與對其已經(jīng)存在免疫響應(yīng)的相同顆粒載體上的另一種蛋白質(zhì)(天生的或外來的)一起注射，則對抗原的免疫響應(yīng)將在很大程度上受免疫系統(tǒng)已經(jīng)對伴隨抗原建立的響應(yīng)的影響。如果伴隨的抗原是對其存在中心調(diào)節(jié)T細(xì)胞的天然蛋白質(zhì)(如例如IL10、胰島素、人血清清蛋白、血紅蛋白)，則將向耐受性驅(qū)動響應(yīng)。如果這些蛋白質(zhì)是個人已經(jīng)具有免疫的抗原，如白喉或破傷風(fēng)菌疫苗經(jīng)常是這種情況，免疫響應(yīng)將受這些現(xiàn)有的反應(yīng)(大部分是炎癥反應(yīng))的影響。本發(fā)明包括用于通過共同給予本發(fā)明的化合物治療自身免疫性和/或建立或誘導(dǎo)耐受的方法。除自身免疫性疾病之外，本方法還可以用于建立對過敏原的耐受，其中共同給予過敏原肽或蛋白質(zhì)與本發(fā)明的化合物，其中抗原而非自體抗原是對過敏性疾病特異性的過敏原(抗原)。應(yīng)理解本文中相對于一個方面給出的細(xì)節(jié)、具體地關(guān)于自身抗原、影響抗原、IL-10誘導(dǎo)化合物、和降低免疫系統(tǒng)活化幼稚TC和BC并由活化的和記憶淋巴細(xì)胞回憶響應(yīng)的能力的化合物、給予的時間和模式加以必要的變更適用于本發(fā)明的所有其他方面。方法在一方面，本發(fā)明涉及用于預(yù)防和/或治療自身免疫性疾病的方法，包括將組合物給予至具有50納摩爾/升以上的血清維生素-D水平的受試者，所述組合物包含至少一種β細(xì)胞自身抗原。因此至少兩種分子各自可以影響向其呈遞抗原的適應(yīng)性免疫細(xì)胞的反應(yīng)。受試者可以具有50-150納摩爾/升、如60-100納摩爾/升、75-100納摩爾/升或100-150納摩爾/升的血清D-維生素水平。該方法可以包括預(yù)治療受試者以調(diào)節(jié)血清維生素-D水平，并且這種預(yù)治療可以包括在將包含至少一種β細(xì)胞自身抗原的組合物給予至所述受試者之前給予維生素-D和/或維生素-D類似物、和/或暴露于UVB-輻射優(yōu)選地7至90天。該方法可以進(jìn)一步包括以7000-70000lU/周的量給予維生素-D和/或維生素-D類似物3-48個月。β細(xì)胞自身抗原可以是如以下在標(biāo)題“自身抗原”下討論的β細(xì)胞自身抗原。該方法可以進(jìn)一步包括給予如以下在標(biāo)題“環(huán)氧酶抑制劑”下討論的環(huán)氧酶抑制劑。該方法可以進(jìn)一步包括給予如以下在標(biāo)題“CTLA4化合物”下討論的CTLA4化合物。該方法可以進(jìn)一步包括給予如以下在標(biāo)題“TNFα抑制劑”下討論的TNFα抑制劑。本發(fā)明提供了用于在需要其的個體中預(yù)防和/或治療自身免疫性疾病的方法，該方法包括給予所述個體以下各項：a)出于特異性的抗原耐受的目的，至少一種自身抗原或它們的片段；或涉及以上所列的自身免疫和炎性疾病中的至少一種編碼這些分子的核酸、質(zhì)?；蜉d體。在一個實施方式中，當(dāng)血清維生素D水平在50和150nM/l之間、更優(yōu)選地在75和100nM/l之間以及最優(yōu)選地在100-150nM/l之間時給予自身抗原；以及b)出于干擾APC成熟的能力的目的，給予所述個體選自由如以上所列的維生素-D、維生素-D類似物、γ-氨基丁酸、γ-氨基丁酸類似物和酪氨酸激酶抑制劑組成的組中的至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物。在一個實施方式中，通過使用UVB曝光增強或?qū)崿F(xiàn)IL-10誘導(dǎo)；以及c)出于干擾免疫系統(tǒng)的活化幼稚TC和BC以及由活化的和記憶淋巴細(xì)胞回憶響應(yīng)的能力的目的，給予如以上所列的化合物，如NSAID化合物；CTLA-4化合物；或TNFα抑制劑。本發(fā)明在一些方面涉及用于預(yù)防和/或治療如1型糖尿病(T1D)和自身免疫糖尿病的自身免疫性疾病的方法。本發(fā)明公開了用于治療如T1D和自身免疫糖尿病的自身免疫性疾病的方法，該方法包括給予患所述疾病的受試者：(a)一療程VitD，用于增強抗原呈遞樹突狀細(xì)胞以耐受化方式將抗原肽呈遞至免疫系統(tǒng)的能力；b)自身抗原，如GAD65，配制在以有效地恢復(fù)或誘導(dǎo)對自身抗原的耐受的量給予的藥物載體中；以及可選地c)治療劑量的抗炎化合物，例如環(huán)氧酶抑制劑如布洛芬、或更明確的cox-2或cox-1抑制劑。VitD的療程優(yōu)選地在給予自身抗原之前15至90天或在給予自身抗原之前7至90天開始，并以對應(yīng)于7000至70000iu/周的劑量的液體或片劑形式給予3至48個月的周期。用維生素D的預(yù)治療旨在將治療的受試者的血清維生素D水平升高至50納摩爾/升以上、或60、75或100納摩爾/升以上。如果受試者已經(jīng)具有這些水平的血清維生素D水平，則可以省去預(yù)治療。在本發(fā)明的另一個實施方式中，可以通過光療增強VitD的血清濃度。在這種情況下，在給予自身抗原之前，受試者將暴露于每天10-120分鐘之間的紫外線B輻射15至90天。光療應(yīng)持續(xù)3至48個月的周期。自身抗原的優(yōu)選的劑量在兩次和四次給予之間，至少間隔兩周、更優(yōu)選地間隔一個月，如果通過注射給予各次在10和200μg抗原之間。如果口腔給予，優(yōu)選的劑量在每天500mg和5g之間，持續(xù)三個月和48個月之間的周期。優(yōu)選地以100至800mg的日劑量給予布洛芬，持續(xù)60至150天的周期，在該周期期間進(jìn)行自身抗原的給予?？梢酝ㄟ^淋巴管內(nèi)注射、直接注射至淋巴結(jié)中、皮下注射、肌內(nèi)注射、腹膜內(nèi)注射、靜脈內(nèi)注射、皮下注射、鼻內(nèi)、跨粘膜或舌下施加；或口腔，包括作為片劑、丸劑、顆粒劑、膠囊、錠劑、水溶液或油溶液、懸浮液、乳液、噴霧或作為用液體介質(zhì)重組的干燥粉末形式給予自身抗原?？梢栽谒幱玫妮d體、賦形劑或稀釋劑中/伴隨藥用的載體、賦形劑或稀釋劑給予抗炎化合物和自身抗原。在本發(fā)明的一個實施方式中以及在T1D的治療或預(yù)防的情況下，在腹部的單側(cè)或兩側(cè)區(qū)域進(jìn)行皮下注射自身抗原以使得能夠增加呈遞自身抗原肽的APC細(xì)胞至胰腺淋巴結(jié)的運輸量。根據(jù)某些其他的實施方式，皮下(如在接近胰腺引流淋巴結(jié)的腹部)給予至少一種自身抗原。在一些實施方式中，用于皮下注射的抗原的體積在0.2和2ml之間、更優(yōu)選地在0.4和0.6ml之間。根據(jù)某些其他的實施方式，經(jīng)由皮內(nèi)注射給予至少一種自身抗原。根據(jù)某些實施方式，其中以“類疫苗”方式經(jīng)由皮下注射給予至少一種抗原，每次治療時機各自給予至少4-250ug、更優(yōu)選地10-l00ug、最優(yōu)選地10-50ug劑量的至少一種抗原。根據(jù)某些實施方式，其中以“類過敏”方式經(jīng)由皮下注射給予至少一種抗原，其中，可以使用每種使用的自身抗原的多種逐增的劑量的計劃。這種方法可以包括在幾周、幾個月或幾年的周期內(nèi)以增加的劑量給予β細(xì)胞自身抗原。在一個實施方式中，在3至4個月的初始治療周期內(nèi)間隔1-4周、如間隔2-4周或間隔2周以及可選地在6-9個月的繼續(xù)治療周期內(nèi)間隔2-3個月給予含有β細(xì)胞自身抗原的組合物。在一個實施方式中，將β細(xì)胞自身抗原的量從治療周期開始時的每次給予1-5μg增加至最后給予的每次給予約40-100μg。在一個實施方式中，該方法包括在基準(zhǔn)線(第1月)開始皮下注射增加劑量的β細(xì)胞自身抗原(例如GAD65)如下：每周0.4；0.8；2；3.2；4；6.4；8；12；16；20；24、32、40μg自身抗原，之后將從第15周至第27周以2、4和8周的間隔給予40μg自身抗原。此后將每8-12周給予40μg自身抗原持續(xù)1年。可以如上所述的給予維生素D(從第1天)。優(yōu)選的給藥方案包括1ug、5ug、20ug、50ug的逐增的自身抗原劑量，每劑量的兩次注射間隔4周，這將是28周的GAD-alum治療?？商鎿Q地，優(yōu)選的給藥計劃包括在第0、15、30、45、60天如4ug、8ug、16ug、20ug、40ug和隨后的第120、180、270天40ug的的漸增的劑量。在本發(fā)明的一個實施方式中，將自身抗原直接給予至淋巴結(jié)或淋巴系統(tǒng)中以使駐留的APC將抗原肽呈遞至免疫系統(tǒng)。如果將自身抗原直接給予至淋巴結(jié)或淋巴系統(tǒng)中，則劑量優(yōu)選地在每次給予1和15μg之間、更優(yōu)選地在每次給予2和10μg之間或每次給予2至5μg之間。在alum中配制是優(yōu)選的。根據(jù)某些實施方式，腹股溝內(nèi)、淋巴結(jié)內(nèi)或淋巴管內(nèi)給予至少一種自身抗原。在一些實施方式中，用于腹股溝內(nèi)注射的抗原的體積在0.05和0.2ml之間、更優(yōu)選地在0.05和0.15ml之間。根據(jù)某些實施方式，在通過淋巴結(jié)內(nèi)或淋巴管內(nèi)注射給予至少一種抗原的情況下，優(yōu)選的劑量在每次注射和使用的自身抗原l-15ug之間、更優(yōu)選地在2-10之間、以及最優(yōu)選地在2-5ug之間，這種給予進(jìn)行至少2次、更優(yōu)選地至少3次以及最優(yōu)選地至少4次，至少14間隔14天、更優(yōu)選地間隔至少30天。根據(jù)某些實施方式，在靜脈內(nèi)給予至少一種抗原的情況下，每次治療時機給予至少100-10000ug的每種抗原至少兩次，間隔至少一周。根據(jù)某些實施方式，在口腔給予至少一種抗原的情況下，每次治療時機給予至少0.5-5g的每種抗原，至少每周一次。根據(jù)某些實施方式，單獨地或與其他抗原一起配制至少一種抗原(視情況可以是在alum、鹽水或人血清白蛋白中)。根據(jù)某些實施方式，至少一種藥物組合物包含相同載體顆粒上的至少兩種抗原。根據(jù)某些其他的實施方式，至少一種藥物組合物包含不同載體顆粒上的至少兩種抗原。根據(jù)某些實施方式，單獨地且以適用于特定的抗原的不同的時間和頻率、方案和配方給予至少兩種抗原。更優(yōu)選地，將至少兩種抗原配制在相同的藥物組合物中并因此同時給予。在一些實施方式中，將至少一種抗原配制在如alum的佐劑中。在更具體的實施方式中，將至少一種抗原配制在鹽水或人血清白蛋白中。根據(jù)某些實施方式，同時給予至少一種抗原和至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物。根據(jù)某些實施方式，單獨給予至少一種抗原和至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物。根據(jù)某些實施方式，同時給予至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物與至少一種抗原。根據(jù)某些實施方式，在第一次給予至少一種抗原之前的1-14天之間開始給予至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物。根據(jù)某些實施方式，在第一次給予至少一種自身抗原之前至少2周、優(yōu)選地至少10周開始給予至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物。根據(jù)包括使用維生素D的治療周期的某些實施方式，每天給予500和10000IU之間、更優(yōu)選地1000和3000IU之間的維生素，如維生素D3。根據(jù)包括使用維生素D的治療周期的某些實施方式，在第一次給予至少一種抗原之前每周給予7,000-100,000IU之間的維生素D，如維生素D3，且此后給予每天500-2000IU作為維持劑量。在一些實施方式中，維生素D的治療周期在第一次給予抗原之后的60和420天之間?？梢耘c至少一種抗原和/或至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物同時或單獨給予降低免疫系統(tǒng)的活化幼稚TC和BC以及由活化的和記憶淋巴細(xì)胞回憶響應(yīng)的能力的化合物，如NSAID化合物；CTLA-4化合物；或TNFα抑制劑。在一些實施方式中，降低免疫系統(tǒng)的活化幼稚TC和BC以及由活化的和記憶淋巴細(xì)胞回憶響應(yīng)的能力的化合物是NSAID化合物，如COX-抑制劑。根據(jù)某些實施方式，用NSAID的治療周期在第一次給予至少一種抗原之前的至少2周開始。根據(jù)某些實施方式，當(dāng)COX抑制劑是布洛芬時，在NSAID治療周期期間每天給予至少一次400至1000mg劑量。NSAID治療周期至少在4和14周之間、更優(yōu)選地在4和8周之間。在本方法中，應(yīng)口腔或通過注射給予抗炎化合物。在一些實施方式中，降低免疫系統(tǒng)的活化幼稚TC和BC以及由活化的和記憶淋巴細(xì)胞回憶響應(yīng)的能力的化合物是TNFα抑制劑。阻礙TNFα降低免疫響應(yīng)的活化狀態(tài)并降低DC和其他免疫活性細(xì)胞的活性。另外，因為TNFα破壞淋巴組織中的FSC和GC結(jié)構(gòu)并削弱B細(xì)胞功能，所以抗原特異性效應(yīng)T細(xì)胞的活化和自身抗體生產(chǎn)下降。近來的糖尿病臨床前數(shù)據(jù)示出通過靜止的DC遞送的β細(xì)胞抗原可以誘導(dǎo)外周T細(xì)胞無響應(yīng)性，下調(diào)正在進(jìn)行的β細(xì)胞破壞和延遲β細(xì)胞破壞。因此，在組合的自身抗原-TNFα抑制劑治療下，自身抗體水平以及效應(yīng)T細(xì)胞活性和數(shù)量將相對下降，同時自身抗原特異性Treg數(shù)和功能將至少保持?；ㄙM數(shù)月以修改這些免疫過程和記錄這些效果，但是在該時間期間，由于其急性的β-細(xì)胞保護(hù)和代謝效應(yīng)，TNFα抑制還將直接保持β細(xì)胞。因為已知GAD65是T1DM中的初級自身抗原中的一種，所以該途徑產(chǎn)生糖尿病自身免疫響應(yīng)向充分的臨界量的調(diào)節(jié)表型的偏移，導(dǎo)致對β細(xì)胞保持顯著和延長的影響。因此，在本發(fā)明的一個方面，將不限于例如英利西單抗、阿達(dá)木單抗、戈利木單抗和依那西普的TNF-α抑制劑用作抗炎化合物。當(dāng)使用依那西普時，優(yōu)選的劑量在0.2和lmg/kgSQ之間，每周一次或兩次持續(xù)2至9個月之間的周期。根據(jù)某些實施方式，當(dāng)TNFα抑制劑是依那西普時，F(xiàn)DA批準(zhǔn)的在第0、2和6周的5mg/kg的劑量是優(yōu)選的。在另一個實施方式中，劑量與在I期TNFα抑制劑單藥治療試驗(0.4mg/kg(最大25mg)SQ兩次每周x26周)使用的相同。在最優(yōu)選的另一個實施方式中，僅使用兩種劑量，與包含維生素D和自身抗原的治療方案組合最多25mg/劑量。根據(jù)某些實施方式，在第一次給予至少一種抗原之前給予TNFα抑制劑。在一些實施方式中，降低免疫系統(tǒng)的活化幼稚TC和BC以及由活化的和記憶淋巴細(xì)胞回憶響應(yīng)的能力的化合物是CTLA-4化合物，如阿巴西普。根據(jù)具體的實施方式，當(dāng)化合物是阿巴西普時，每治療時機給予至少2-20mg/kg劑量的阿巴西普，從第一次給予至少一種抗原時左右+/-7天開始。根據(jù)某些實施方式，與至少一種抗原的第一次給予同時給予CTLA-4化合物。根據(jù)某些實施方式，視情況在第14、28和45天+/-一周重復(fù)至少一種抗原和降低免疫系統(tǒng)的活化幼稚TC和BC以及由活化的和記憶淋巴細(xì)胞回憶響應(yīng)的能力的化合物的給予以確保阻礙TC上的CD28，且其中第一天標(biāo)記至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物的第一次給予。在一方面，本發(fā)明提供了治療與T1D有關(guān)的一種或多種癥狀的方法。與T1D有關(guān)的癥狀包括但不限于胰島素產(chǎn)生減少、胰島素敏感度降低、高血液葡萄糖水平、胰島素產(chǎn)生細(xì)胞破壞和C肽水平異常。本發(fā)明的方法可以致力于不僅T1D而且通常的自身免疫性疾病和異常的治療和預(yù)防。例如，受試者患有格雷夫氏病(Grave'sdisease)、橋本甲狀腺炎(Hashimoto'sthyroiditis)、低血糖、多發(fā)性硬化、混合性冷球蛋白血癥、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)、乳糜瀉、T1D或它們的組合。在這些情況下，要將疾病相關(guān)的自身抗原作為自身抗原包含在治療方法中。在本發(fā)明的一個方面，受試者患有自身免疫響應(yīng)，其涉及具有抗原特異性的T細(xì)胞或B細(xì)胞、或具有對自身抗原的T細(xì)胞受體(TCR)或B細(xì)胞受體(BCR)特異性的T細(xì)胞受體(TCR)和/或B細(xì)胞。根據(jù)某些實施方式，根據(jù)本發(fā)明的待治療的個體是哺乳動物。根據(jù)具體的實施方式，根據(jù)本發(fā)明的待治療的個體是人類。根據(jù)某些實施方式，根據(jù)本發(fā)明的待治療的個體是嬰兒。根據(jù)具體的實施方式，根據(jù)本發(fā)明的待治療的個體是青少年人類。根據(jù)具體的實施方式，根據(jù)本發(fā)明的待治療的個體是成年人類。在一些實施方式中，治療的人類受試者的年齡在4歲以上。在其他實施方式中，治療的人類受試者是8歲或更大。在其他實施方式中，治療的人類受試者是10歲或更大。在一些實施方式中，治療的人類受試者是18歲或更小。在一些實施方式中，治療的人類受試者的年齡是4-10、或4-18、或8-18、或10-18歲。在其他實施方式中，治療的人類受試者是18歲或更大。在一些實施方式中，治療的人類受試者的年齡是18-30歲。組合物本發(fā)明還公開了包含多個顆粒的組合物，各自具有固定在其表面上的至少一種第一和至少一種第二抗原，其中，第一抗原是β細(xì)胞自身抗原，以及第二抗原是耐受原或β細(xì)胞自身抗原，該組合物進(jìn)一步可選地包含藥用的佐劑、賦形劑、溶劑和/或緩沖液。根據(jù)某些實施方式，將至少一種自身抗原配制在佐劑中。根據(jù)具體的實施方式，佐劑是alum。在其他具體的實施方式中，將至少一種抗原配制在鹽水或人血清白蛋白中。在更具體的實施方式中，自身抗原可以作為質(zhì)粒給予或由如腺相關(guān)病毒載體或單純皰疹病毒載體的病毒載體編碼。根據(jù)某些實施方式，至少一種自身抗原是如以下所討論的。根據(jù)本發(fā)明的組合物可以包含多于一種自身抗原。因此，根據(jù)某些實施方式，組合物包含至少兩種自身抗原。根據(jù)某些其他的實施方式，組合物包含至少三種自身抗原。根據(jù)某些其他的實施方式，組合物包含至少四種自身抗原。因此，根據(jù)具體的實施方式，組合物包含至少如GAD-65的GAD和胰島素。根據(jù)其他具體的實施方式，組合物包含至少胰島瘤抗原-2和胰島素。根據(jù)其他具體的實施方式，組合物包含至少ZnT8和胰島素。根據(jù)其他具體的實施方式，組合物包含至少IGRP和胰島素。根據(jù)其他具體的實施方式，組合物包含至少嗜鉻粒蛋白A和胰島素。根據(jù)其他具體的實施方式，組合物包含至少如GAD-65的GAD和B鏈胰島素。根據(jù)其他具體的實施方式，組合物包含至少胰島瘤抗原-2和B鏈胰島素。根據(jù)其他具體的實施方式，組合物包含至少ZnT8和B鏈胰島素。根據(jù)其他具體的實施方式，組合物包含至少IGRP和B鏈胰島素。根據(jù)其他具體的實施方式，組合物包含至少嗜鉻粒蛋白A和B鏈胰島素。根據(jù)其他具體的實施方式，組合物包含至少如GAD-65的GAD和胰島素原。根據(jù)其他具體的實施方式，組合物包含至少胰島瘤抗原-2和胰島素原。根據(jù)其他具體的實施方式，組合物包含至少ZnT8和胰島素原。根據(jù)其他具體的實施方式，組合物包含至少IGRP和胰島素原。根據(jù)其他具體的實施方式，組合物包含至少嗜鉻粒蛋白A和胰島素原。根據(jù)其他具體的實施方式，組合物包含至少胰島素和B鏈胰島素。根據(jù)其他具體的實施方式，組合物包含至少胰島素和胰島素原。根據(jù)其他具體的實施方式，組合物包含至少B鏈胰島素和胰島素原。根據(jù)具體的實施方式，組合物包含至少如GAD-65的GAD、胰島素和B鏈胰島素。根據(jù)其他具體的實施方式，組合物包含至少如GAD-65的GAD、胰島素和胰島素原。根據(jù)又其他具體的實施方式，組合物包含至少如GAD-65的GAD、B鏈胰島素和胰島素原。根據(jù)又其他具體的實施方式，組合物包含至少胰島素、B鏈胰島素和胰島素原。根據(jù)其他具體的實施方式，組合物包含至少如GAD-65的GAD、胰島素、B鏈胰島素和B鏈胰島素。根據(jù)某些實施方式，將至少一種自身抗原，如至少兩種自身抗原或至少三種自身抗原配制在佐劑中?？梢詫⒆陨砜乖渲圃谌鐨溲趸X、MAS-1、人血清白蛋白、脂質(zhì)-乳液的佐劑中。根據(jù)具體的實施方式，佐劑是alum。在一個實施方式中，本發(fā)明涉及包含以下的組合物：i)至少一種β細(xì)胞自身抗原，和以下各項中的至少一種：iia)選自由維生素-D、維生素-D類似物、酪氨酸激酶抑制劑、γ-氨基丁酸和γ-氨基丁酸類似物組成的組的IL-10誘導(dǎo)化合物；和iib)降低樹突狀細(xì)胞的活化幼稚CD4+T細(xì)胞的能力的化合物，如環(huán)氧酶抑制劑、CTLA-4化合物或TNFα抑制劑；以及可選地藥用的佐劑、賦形劑、溶劑和/或緩沖劑。本發(fā)明還提供了包含i)至少一種自身抗原和ii)至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物的組合物(例如藥物組合物)。更具體地，本發(fā)明提供了包含以下的組合物(例如藥物組合物)：i)選自由胰島素、B鏈胰島素、胰島素原和β細(xì)胞自身抗原組成的組的至少一種自身抗原，和ii)選自由維生素-D、維生素-D類似物和酪氨酸激酶抑制劑組成的組的至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物。根據(jù)本發(fā)明的組合物可以包含多于一種IL-10誘導(dǎo)化合物。因此，根據(jù)某些實施方式，該組合物包含至少兩種IL-10誘導(dǎo)化合物。根據(jù)某些其他的實施方式，該組合物包含至少三種IL-10誘導(dǎo)化合物。根據(jù)某些其他的實施方式，該組合物包含至少四種IL-10誘導(dǎo)化合物。因此，根據(jù)具體的實施方式，組合物包含至少維生素-D和酪氨酸激酶抑制劑。根據(jù)其他具體的實施方式，組合物包含至少維生素-D類似物和酪氨酸激酶抑制劑。根據(jù)更具體的實施方式，組合物包含至少維生素-D和達(dá)沙替尼。根據(jù)其他更具體的實施方式，組合物包含至少維生素-D和博舒替尼。根據(jù)其他更具體的實施方式，組合物包含至少維生素-D和塞卡替尼。根據(jù)其他更具體的實施方式，組合物包含至少維生素-D和伊馬替尼。根據(jù)其他更具體的實施方式，組合物包含至少維生素-D和舒尼替尼。根據(jù)更具體的實施方式，組合物包含至少維生素-D類似物和達(dá)沙替尼。根據(jù)其他更具體的實施方式，組合物包含至少維生素-D類似物和博舒替尼。根據(jù)其他更具體的實施方式，組合物包含至少維生素-D類似物和塞卡替尼。根據(jù)其他更具體的實施方式，組合物包含至少維生素-D類似物和伊馬替尼。根據(jù)其他更具體的實施方式，組合物包含至少維生素-D類似物和舒尼替尼。根據(jù)某些實施方式，組合物進(jìn)一步包含iii)降低樹突狀細(xì)胞的活化幼稚CD4+T細(xì)胞的能力的化合物，如環(huán)氧酶抑制劑、CTLA-4化合物或TNFα抑制劑。根據(jù)具體的實施方式，這種化合物是環(huán)氧酶抑制劑，如非甾體抗炎藥物(NSAID)。根據(jù)更具體的實施方式，NSAID選自由以下組成的組：布洛芬、右旋布洛芬、萘普生、非諾洛芬、酮洛芬、右旋酮洛芬、氟比洛芬、奧沙普嗪、洛索洛芬、茚甲新、拖美汀、舒林酸、依托度酸、酮咯酸、雙氯芬酸、醋氯芬酸、萘丁美酮、阿斯匹林(乙酰水楊酸)、二氟尼柳(Diflunisal，Dolobid)、水楊酸、雙水楊酸(Salsalate，Disalcid)、吡羅昔康(Piroxicam)、美洛昔康(Meloxicam)、替諾昔康(Tenoxicam)、屈昔康(Droxicam)、氯諾昔康(Lornoxicam)、伊索昔康(Isoxicam)、甲芬那酸、甲氯芬那酸、氟芬那酸、托芬那酸、塞來昔布(Celecoxib)、羅非昔布(Rofecoxib)、伐地考昔(Valdecoxib)、帕瑞考昔(Parecoxib)、羅美昔布(Lumiracoxib)、依托考昔(Etoricoxib)和尼美舒利(Nimesulide)。在本發(fā)明的一個實施方式中，將通過將個體GMP產(chǎn)生的蛋白質(zhì)/肽溶液一起混合在配制緩沖液中來配制包含蛋白質(zhì)/肽抗原或蛋白質(zhì)/肽抗原的組合的至少一種組合物。然后將組合的蛋白質(zhì)溶液伴隨恒定混合無菌過濾到密閉的配制容器中，之后將佐劑的無菌溶液添加到配制容器中。然后將含有顆粒的蛋白質(zhì)無菌添加到無菌的和去熱原的玻璃注射小瓶中或預(yù)填充的注射器中并密封?？梢詮母鱾€小瓶無菌取出吸附蛋白質(zhì)的制品，用于注射至患者或受試者的組織。制劑中組合的蛋白質(zhì)的比例可以改變，盡管最優(yōu)選的是按克重量計相等的比例。如果使用，有影響的抗原的比例應(yīng)該至少等于其他抗原蛋白質(zhì)或肽的合并的質(zhì)量。有影響的抗原的比例可以大于其他抗原的合并的質(zhì)量。配制緩沖液可以是等滲的磷酸鹽緩沖的甘露醇緩沖液。佐劑可以是氫氧化鋁(alum)、脂質(zhì)體、聚(丙交脂-共聚-乙交酯)微?；螓}水。根據(jù)本發(fā)明的藥劑、藥物組合物或治療劑組合可以是適用于施加至人類和/或動物、優(yōu)選地包括嬰兒、兒童和成人的人類的任何形式，并可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的標(biāo)準(zhǔn)流程生產(chǎn)?？梢酝ㄟ^本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的，例如來自以下目錄的標(biāo)準(zhǔn)流程生產(chǎn)藥劑、(藥物)組合物或治療劑組合："Pharmaceutics:TheScienceofDosageForms",SecondEdition,Aulton,M.E.(ED.ChurchillLivingstone,Edinburgh(2002)；"EncyclopediaofPharmaceuticalTechnology",SecondEdition,Swarbrick,J.andBoylan15J.C.(Eds.),MarcelDekker,Inc.NewYork(2002)；"ModernPharmaceutics",FourthEdition,BankerG.S.andRhodesC.T.(Eds.)MarcelDekker,Inc.NewYork2002y"TheTheoryandPracticeofIndustrialPharmacy",LachmanL,LiebermanH.AndKanigJ.(Eds.),Lea&Febiger,Philadelphia(1986)。各自的描述通過引證結(jié)合于此并形成本公開的一部分。術(shù)語“藥劑”、“藥物組合物”和“藥物制劑”可以互換使用。根據(jù)本發(fā)明的藥劑、藥物組合物或治療劑組合可以進(jìn)一步包含一種或多種藥用的賦形劑。適用于制備根據(jù)本發(fā)明的藥劑、藥物組合物或治療劑組合的載體、稀釋劑和賦形劑是本領(lǐng)域技術(shù)人員例如由"HandbookofPharmaceuticalExcipients"SixthEdition,RaymondC.Rowe,PaulJ.SheskeyandMarianEQuinn(Eds.),AmericanPharmaceuticalAssociation(July2009)眾所周知的，將其通過引證結(jié)合于此并形成本公開的一部分。自身抗原適合用于根據(jù)本發(fā)明的方法、組合物和試劑盒的自身抗原是β細(xì)胞自身抗原。這些包括：谷氨酸脫羧酶(GAD65或GAD67或GAD32)(Baekkeskovetal.,Nature(1990)347:151)；胰島素(Palmeretal.,Science(1983)222:1337)：包括包含胰島素B鏈的氨基酸9-23的B9-23肽(Danieletal.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA(1995)93:956-960；Wongetal.,Nat.Med.(1999)5:1026-1031)胰島素原；包括包含橫跨胰島素原B-鏈C-肽結(jié)點的氨基酸24-36的B24-C36肽(Chenetal.,J.Immunol.(2001)167:4926-4935；Rudyetal.,Mol.Med.,(1995)1:625-633)；HSP60(熱休克蛋白60,Razetal.,Lancet(2001),358:1749-53)；ICA512/IA-2(胰島細(xì)胞抗原512；Rabinetal.,J.Immunol.(1994)152:3183)、胰島瘤抗原-2、ZnT8、胰島特異性葡萄糖-6-磷酸催化亞基相關(guān)蛋白(IGRP)、嗜鉻粒蛋白A、B鏈胰島素、前胰島素原、胰島素原II、不含細(xì)胞毒性T-淋巴細(xì)胞表位的胰島素原肽、胰島素C13-A5肽、胰島細(xì)胞抗原p69、或包含瓜氨酸化形式iDS的任何肽、衍生物以及對應(yīng)以上的核苷酸。對于物種之間的胰島素序列的排列，參見Homannetal.,J.Immunol.(1999)63:1833-1838中的表I。根據(jù)具體的實施方式，β細(xì)胞自身抗原是GAD，如GAD-65或GAD-67，包括它們的片段、它們的衍生物或編碼它們的核酸。根據(jù)更具體的實施方式，β細(xì)胞自身抗原是GAD-65、其片段、其衍生物或編碼其的核酸。根據(jù)更具體的實施方式，β細(xì)胞自身抗原是GAD-65。根據(jù)其他具體的實施方式，β細(xì)胞自身抗原是源自GAD-65的片段(即GAD65片段。根據(jù)其他具體的實施方式，β細(xì)胞自身抗原是胰島瘤抗原-2。根據(jù)其他具體的實施方式，β細(xì)胞自身抗原是ZnT8。根據(jù)其他具體的實施方式，β細(xì)胞自身抗原是胰島特異性葡萄糖-6-磷酸催化亞單位相關(guān)蛋白質(zhì)(IGRP)。根據(jù)其他具體的實施方式，β細(xì)胞自身抗原是嗜鉻粒蛋白A。根據(jù)某些其他的實施方式，β細(xì)胞自身抗原是胰島素。根據(jù)某些其他的實施方式，β細(xì)胞自身抗原是B鏈胰島素。根據(jù)某些其他的實施方式，β細(xì)胞自身抗原是胰島素原。根據(jù)某些其他的實施方式，β細(xì)胞自身抗原是前胰島素原。在本發(fā)明的某些方面，將耐受原給予至治療的受試者。耐受原是誘導(dǎo)對隨后攻擊劑量(challengingdose)的抗原的特異性免疫學(xué)無響應(yīng)的狀態(tài)的抗原。用于本發(fā)明的合適的耐受原是可大量獲得并暴露于免疫系統(tǒng)以及通常識別為自身的天生的內(nèi)源人蛋白質(zhì)和其他分子。耐受原的實例包括IL-10、人血清白蛋白或血紅蛋白或γ-氨基丁酸?？梢宰鳛槿L蛋白質(zhì)給予用于本發(fā)明的自身抗原或耐受原，或可以可替換地作為這種全長蛋白質(zhì)的片段或變體給予它們，條件是自身抗原的片段或變體具有相對于原始自身抗原保守的至少一種表位并且在根據(jù)本發(fā)明的方法中是有效的。蛋白質(zhì)自身抗原或耐受原的片段具有與原始的自身抗原或耐受原相同的序列，但是缺少至少一個N-端或C-端氨基酸殘基。自身抗原的片段應(yīng)該包含原始的自身抗原的至少一種有關(guān)的表位。自身抗原和耐受原優(yōu)選地具有至少8個氨基酸、如至少10、15、20、30、40、50、60、70、80、90或100個氨基酸的長度。蛋白質(zhì)自身抗原或耐受原的變體可以具有與原始的自身抗原或耐受原小于100％一致、如99％、95％、90％、85％、80％、70％、60％或50％一致的氨基酸序列(如由蛋白質(zhì)序列排列工具、例如由EuropeanBioinformaticsInstitute,Hinxton,GB可獲得的ClustalOmega比較的)，而對于自身抗原，同時具有相對于原始的自身抗原保守的至少一種有關(guān)表位。變體也可以具有與原始的抗原或耐受原相比更短(即片段)或更長的氨基酸序列。在本發(fā)明中，自身抗原或耐受原的給予可以包括包含蛋白質(zhì)或原始的蛋白質(zhì)的肽片段的自身抗原或耐受原。還可以包括給予自身抗原或耐受原的變體。進(jìn)一步地，可以作為藥用的載體中的蛋白質(zhì)或肽將蛋白質(zhì)或肽引入到受試者中，或蛋白質(zhì)或肽可以由表達(dá)載體編碼，其中引入表達(dá)載體(例如參見自體抗原在受試者中通過pCMV-表達(dá)載體表達(dá)的實施例)。這種表達(dá)載體可以是核酸，如DNA或RNA，并可以通過針頭注射、基因槍、射流注射或借助于本領(lǐng)域已知的細(xì)胞轉(zhuǎn)染劑遞送?？梢詫⒑怂崤渲圃邴}水中、金珠上、脂質(zhì)體中或脂質(zhì)制劑中。關(guān)于經(jīng)由它們的表達(dá)載體給予的自體抗原(以及可以給予的特定抗原)的進(jìn)一步描述，參見美國專利公開US2002/0107210，通過引證將其結(jié)合于此。IL-10誘導(dǎo)化合物在一些方面中，本發(fā)明的方法、組合物和試劑盒使用IL-10誘導(dǎo)化合物。根據(jù)某些實施方式，至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物是維生素-D，如1,25-二羥基維生素D。根據(jù)某些其他的實施方式，至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物是維生素-D類似物，如TX527。根據(jù)某些其他的實施方式，至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物包括借助于UVB輻射增加血清維生素D。根據(jù)某些其他的實施方式，至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物是酪氨酸激酶抑制劑，如達(dá)沙替尼、博舒體尼、塞卡替尼、伊馬替尼、舒尼替尼或它們的組合。根據(jù)具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是達(dá)沙替尼。根據(jù)其他具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是博舒替尼。根據(jù)其他具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是塞卡替尼。根據(jù)其他具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是伊馬替尼。根據(jù)其他具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是舒尼替尼。根據(jù)其他具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是達(dá)沙替尼、博舒替尼、塞卡替尼、伊馬替尼和舒尼替尼中的至少兩種的組合。例如，酪氨酸激酶抑制劑可以是達(dá)沙替尼和博舒替尼的組合。根據(jù)其他更具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是達(dá)沙替尼和塞卡替尼的組合。根據(jù)其他更具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是達(dá)沙替尼和伊馬替尼的組合。根據(jù)其他更具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是達(dá)沙替尼和舒尼替尼的組合。根據(jù)其他更具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是博舒替尼和塞卡替尼的組合。根據(jù)其他更具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是博舒替尼和伊馬替尼的組合。根據(jù)其他更具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是博舒替尼和舒尼替尼的組合。根據(jù)其他更具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是伊馬替尼和舒尼替尼的組合。根據(jù)其他更具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是達(dá)沙替尼、博舒替尼和塞卡替尼的組合。根據(jù)本發(fā)明的組合物可以包含多于一種IL-10誘導(dǎo)化合物。因此，根據(jù)某些實施方式，組合物包含至少兩種IL-10誘導(dǎo)化合物。根據(jù)某些其他的實施方式，組合物包含至少三種IL-10誘導(dǎo)化合物。根據(jù)某些其他的實施方式，組合物包含至少四種IL-10誘導(dǎo)化合物。環(huán)氧酶抑制劑在一些方面，本發(fā)明的方法、組合物和試劑盒使用一種或多種環(huán)氧酶抑制劑。這些環(huán)氧酶抑制劑可以是非甾體抗炎藥物(NSAID)。根據(jù)更具體的實施方式，NSAID選自由以下組成的組：布洛芬、右旋布洛芬、萘普生、非諾洛芬、酮洛芬、右旋酮洛芬、氟比洛芬、奧沙普嗪、洛索洛芬、茚甲新、拖美汀、舒林酸、依托度酸、酮咯酸、雙氯芬酸、醋氯芬酸、萘丁美酮、阿斯匹林(乙酰水楊酸)、二氟尼柳(Diflunisal，Dolobid)、水楊酸、雙水楊酸(Salsalate，Disalcid)、吡羅昔康、美洛昔康、替諾昔康、屈昔康、氯諾昔康、伊索昔康、甲芬那酸、甲氯芬那酸、氟芬那酸、托芬那酸、塞來昔布、羅非昔布、伐地考昔、帕瑞考昔、羅美昔布、依托考昔和尼美舒利。根據(jù)某些實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是丙酸衍生物，如布洛芬、右旋布洛芬、萘普生、非諾洛芬、酮洛芬、右旋酮洛芬、氟比洛芬、奧沙普嗪或洛索洛芬。根據(jù)某些實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是乙酸衍生物，如茚甲新、拖美汀、舒林酸、依托度酸、酮咯酸、雙氯芬酸、醋氯芬酸或萘丁美酮。根據(jù)某些實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是水楊酸化合物，如阿斯匹林(乙酰水楊酸)、二氟尼柳(Diflunisal，Dolobid)、水楊酸或雙水楊酸(Salsalate)。根據(jù)某些實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是烯醇酸(昔康)衍生物，如吡羅昔康、美洛昔康、替諾昔康、屈昔康、氯諾昔康或伊索昔康。根據(jù)某些實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是鄰氨基苯甲酸衍生物，如甲芬那酸、甲氯芬那酸、氟芬那酸或托芬那酸。根據(jù)某些實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是選擇性的COX-2抑制劑，如塞來昔布、羅非昔布、伐地考昔、帕瑞考昔、羅美昔布或依托考昔。根據(jù)更具體的實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是布洛芬。根據(jù)更具體的實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是右旋布洛芬。根據(jù)更具體的實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是萘普生。根據(jù)更具體的實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是非諾洛芬。根據(jù)更具體的實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是酮洛芬。根據(jù)更具體的實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是右旋酮洛芬。根據(jù)更具體的實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是氟比洛芬。根據(jù)更具體的實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是奧沙普嗪。根據(jù)更具體的實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是洛索洛芬。根據(jù)更具體的實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是茚甲新。布洛芬主要阻礙cox-2但是在一定程度上也阻礙cox-1。布洛芬具有比較窄的IL-1阻礙劑稍微廣泛的對免疫系統(tǒng)的影響，并具有非常明確的抗炎效果而沒有沒有嚴(yán)重風(fēng)險。使用布洛芬減少β細(xì)胞炎癥并使得能夠增加VitD增強的DC以誘導(dǎo)對來自T-細(xì)胞呈遞的自身抗原的肽的耐受度，從而保護(hù)受試者的β細(xì)胞。CTLA4化合物在一些方面中，本發(fā)明的組合物和試劑盒使用CTLA-4化合物，如細(xì)胞毒性T-淋巴細(xì)胞相關(guān)的抗原4免疫球蛋白。根據(jù)更具體的實施方式，CTLA-4化合物是阿巴西普。阿巴西普(Fc修飾的CTLA4免疫球蛋白)是由人CTLA4的細(xì)胞外部分和人IgGl的重鏈組成的去除T細(xì)胞的、免疫調(diào)制的融合蛋白。其阻礙幼稚T細(xì)胞的活化中涉及的共刺激信號。其與APC上的CD80/86的連接還干擾和減少CD80/86誘導(dǎo)的IL-6，這可以下調(diào)炎性細(xì)胞因子如IL-lβ、IFNγ和IL-17。阿巴西普與CD80/86的進(jìn)一步的連接可以誘導(dǎo)APC中的吲哚胺雙加氧酶(IDO)，其進(jìn)而可以誘導(dǎo)T細(xì)胞中的無免疫性，以及通過活化的T細(xì)胞下調(diào)幼稚T細(xì)胞的旁分泌活化。在B細(xì)胞上表達(dá)的CD80/86也可以是另外的路徑，其中阿巴西普可以執(zhí)行免疫調(diào)制功能。TNFα抑制劑在一些方面，本發(fā)明的方法、組合物和試劑盒使用TNFα抑制劑，如阿達(dá)木單抗、賽妥珠單抗、依那西普、戈利木單抗或英利西單抗。根據(jù)更具體的實施方式，TNFα抑制劑是阿達(dá)木單抗。根據(jù)其他更具體的實施方式，TNFα抑制劑是賽妥珠單抗。根據(jù)其他更具體的實施方式，TNFα抑制劑是依那西普。根據(jù)其他更具體的實施方式，TNFα抑制劑是戈利木單抗。根據(jù)其他更具體的實施方式，TNFα抑制劑是英利西單抗。試劑盒本發(fā)明還提供了涉及本發(fā)明的方法的試劑盒。例如，在一方面，試劑盒可以包含：(a)抗炎化合物；(b)自身抗原；和(c)維生素D以及可選地d)本發(fā)明的方案的說明書。本發(fā)明還公開了包含以下的藥物試劑盒：i)包含β細(xì)胞自身抗原的組合物，和以下各項中的至少一種：iia)包含選自由維生素-D、維生素-D類似物、酪氨酸激酶抑制劑、γ-氨基丁酸和γ-氨基丁酸類似物組成的組的IL-10誘導(dǎo)化合物的組合物；和iib)包含降低樹突狀細(xì)胞的活化幼稚CD4+T細(xì)胞的能力的化合物，如環(huán)氧酶抑制劑、CTLA-4化合物或TNFα抑制劑的組合物。本發(fā)明還公開了包含以下的藥物試劑盒：i)包含β細(xì)胞自身抗原的組合物，和以下各項中的至少一種：iia)包含選自由維生素-D、維生素-D類似物、酪氨酸激酶抑制劑、γ-氨基丁酸、和γ-氨基丁酸類似物組成的組的IL-10誘導(dǎo)化合物的組合物；和iib)包含降低樹突狀細(xì)胞的活化幼稚CD4+T細(xì)胞的能力的化合物，如環(huán)氧酶抑制劑、CTLA-4化合物或TNFα抑制劑的組合物。本發(fā)明還公開了包含以下各項中的至少兩種的組合物：i)至少一種抗原或其片段；或編碼與本文所列的組中的自身免疫和炎性疾病中的至少一種有關(guān)的這種分子的核酸；以及ii)選自組：如1,25-二羥基維生素D的維生素-D的至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物。根據(jù)某些其他的實施方式，至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物是維生素-D類似物，如TX527。根據(jù)某些其他的實施方式，至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物是酪氨酸激酶抑制劑，如達(dá)沙替尼、博舒體尼、塞卡替尼、伊馬替尼、舒尼替尼或它們的組合；以及iii)降低免疫系統(tǒng)的活化幼稚TC和BC以及由活化的和記憶淋巴細(xì)胞回憶響應(yīng)的能力的至少一種化合物，如本文所列的COX-抑制劑；CTLA-4化合物；或TNFα抑制劑)；在制造包含至少兩種藥物組合物(即藥劑)的試劑盒的制造中的用途。至少兩種藥物組合物中的一種可以包含作為血管注射劑配制在預(yù)填充的小瓶或注射器中的alum、鹽水或人血清白蛋白中至少一種抗原，并且至少兩種藥物組合物中的另一種可以包含以用于口腔給予的片劑形式的IL-10誘導(dǎo)化合物。本發(fā)明的一些實施方式提供了包含至少兩種藥物組合物的試劑盒，包含：i)選自本文所列的組的至少一種抗原，和ii)降低樹突狀細(xì)胞的活化幼稚淋巴細(xì)胞或回憶活化的或記憶淋巴細(xì)胞的能力的選自以下組的至少一種化合物：COX-抑制劑；CTLA-4化合物；和TNFα抑制劑。作為實例，至少兩種藥物組合物中的一種可以包含作為血管注射劑配制在預(yù)填充的小瓶或注射器中的alum、鹽水或人血清白蛋白中的至少一種抗原，并且至少兩種藥物組合物中的另一種可以包含選自組COX抑制劑；CTLA-4化合物；和TNFα抑制劑的一種化合物。本發(fā)明的一些實施方式提供了包含至少三種藥物組合物的試劑盒，包含：i)選自本文所列的組的至少一種抗原；ii)選自由維生素-D、維生素-D類似物和酪氨酸激酶抑制劑組成的組的至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物，和iii)降低樹突狀細(xì)胞的活化幼稚淋巴細(xì)胞或回憶活化的或記憶淋巴細(xì)胞的能力的選自以下組的至少一種化合物：COX-抑制劑；CTLA-4化合物；和TNFα抑制劑。作為實例，至少三種藥物組合物中的一種可以包含作為血管注射劑配制在預(yù)填充的小瓶或注射器中的alum、鹽水或人血清白蛋白中的至少一種抗原，并且至少三種藥物組合物中的另一種可以包含選自由維生素-D、維生素-D類似物、γ-氨基丁酸、γ-氨基丁酸類似物和酪氨酸激酶抑制劑組成的組的至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物，并且至少三種藥物組合物中的第三種可以包含選自組COX-抑制劑；CTLA-4化合物；和TNFα抑制劑的一種化合物。醫(yī)療用途本發(fā)明的組合物可以用于治療，特別是預(yù)防和/或治療自身免疫性疾病。因此，本發(fā)明的組合物可以是藥物組合物。根據(jù)某些實施方式，該組合物用于用作藥劑，如用于預(yù)防和/或治療自身免疫性疾病。根據(jù)具體的實施方式，該組合物用于預(yù)防和/或治療1型糖尿病，如1型。根據(jù)其他具體的實施方式，該組合物用于預(yù)防和/或治療自身免疫糖尿病。根據(jù)其他具體的實施方式，該組合物用于預(yù)防和/或治療隱性自身免疫糖尿病。根據(jù)又其他的具體的實施方式，該組合物用于預(yù)防和/或治療自身免疫糖尿病的復(fù)發(fā)，如已經(jīng)經(jīng)受胰島細(xì)胞移植或包括干細(xì)胞治療的其他細(xì)胞治療的自身免疫糖尿病個體(例如人類)中的自身免疫糖尿病的復(fù)發(fā)。本發(fā)明在進(jìn)一步的方面提供了與至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物組合的自身抗原用于預(yù)防和/或治療自身免疫性疾病。更具體地，本發(fā)明提供了選自由胰島素、B鏈胰島素、胰島素原和β細(xì)胞自身抗原組成的組的自身抗原，結(jié)合至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物、如選自由維生素-D、維生素-D類似物和酪氨酸激酶抑制劑組成的組的至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物用于預(yù)防和/或治療自身免疫性疾病。根據(jù)某些實施方式，自身抗原是β細(xì)胞自身抗原，如谷氨酸脫羧酶(GAD)、胰島瘤抗原-2、ZnT8、胰島特異性葡萄糖-6-磷酸催化亞單位相關(guān)蛋白質(zhì)(IGRP)或嗜鉻粒蛋白A。根據(jù)具體的實施方式，β細(xì)胞自身抗原是GAD，如GAD-65，包括其片段、其衍生物或編碼其的核酸。根據(jù)更具體的實施方式，β細(xì)胞自身抗原是GAD-65、其片段、其衍生物或編碼其的核苷酸。根據(jù)更具體的實施方式，β細(xì)胞自身抗原是GAD-65。根據(jù)其他具體的實施方式，β細(xì)胞自身抗原是源自GAD-65的片段(即GAD65片段。根據(jù)其他具體的實施方式，β細(xì)胞自身抗原是胰島瘤抗原-2。根據(jù)其他具體的實施方式，β細(xì)胞自身抗原是ZnT8。根據(jù)其他具體的實施方式，β細(xì)胞自身抗原是胰島特異性葡萄糖-6-磷酸催化亞單位相關(guān)蛋白質(zhì)(IGRP)。根據(jù)其他具體的實施方式，β細(xì)胞自身抗原是嗜鉻粒蛋白A。根據(jù)某些實施方式，自身抗原是胰島素根據(jù)某些其他的實施方式，β細(xì)胞自身抗原是B鏈胰島素。根據(jù)某些其他的實施方式，自身抗原是胰島素原。根據(jù)某些實施方式，將自身抗原配制在佐劑中。根據(jù)具體的實施方式，佐劑是alum。根據(jù)某些實施方式，至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物是維生素-D，如1,25-二羥基維生素D。根據(jù)某些其他的實施方式，至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物是維生素-D類似物，如TX527。根據(jù)某些其他的實施方式，至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物是酪氨酸激酶抑制劑，如達(dá)沙替尼、博舒體尼、塞卡替尼、伊馬替尼、舒尼替尼或它們的組合。根據(jù)具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是達(dá)沙替尼。根據(jù)其他具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是博舒替尼。根據(jù)其他具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是塞卡替尼。根據(jù)其他具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是伊馬替尼。根據(jù)其他具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是舒尼替尼。根據(jù)其他具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是達(dá)沙替尼、博舒替尼、塞卡替尼、伊馬替尼和舒尼替尼中的至少兩種的組合。例如，酪氨酸激酶抑制劑可以是達(dá)沙替尼和博舒替尼的組合。根據(jù)其他更具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是達(dá)沙替尼和塞卡替尼的組合。根據(jù)其他更具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是達(dá)沙替尼和伊馬替尼的組合。根據(jù)其他更具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是達(dá)沙替尼和舒尼替尼的組合。根據(jù)其他更具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是博舒替尼和塞卡替尼的組合。根據(jù)其他更具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是博舒替尼和伊馬替尼的組合。根據(jù)其他更具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是博舒替尼和舒尼替尼的組合。根據(jù)其他更具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是伊馬替尼和舒尼替尼的組合。根據(jù)其他更具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是達(dá)沙替尼、博舒替尼和塞卡替尼的組合。根據(jù)某些實施方式，將自身抗原進(jìn)一步與降低樹突狀細(xì)胞的活化幼稚CD4+T細(xì)胞的能力的化合物如環(huán)氧酶抑制劑、CTLA-4化合物或TNFα抑制劑組合使用。根據(jù)具體的實施方式，這種化合物是環(huán)氧酶抑制劑，如非類固醇抗炎藥物(NSAID)。根據(jù)更具體的實施方式，NSAID選自由以下組成的組：布洛芬、右旋布洛芬、萘普生、非諾洛芬、酮洛芬、右旋酮洛芬、氟比洛芬、奧沙普嗪、洛索洛芬、茚甲新、拖美汀、舒林酸、依托度酸、酮咯酸、雙氯芬酸、醋氯芬酸、萘丁美酮、阿斯匹林(乙酰水楊酸)、二氟尼柳(Diflunisal，Dolobid)、水楊酸、雙水楊酸(Salsalate，Disalcid)、吡羅昔康、美洛昔康、替諾昔康、屈昔康、氯諾昔康、異惡噻酰胺、甲芬那酸、甲氯芬那酸、氟芬那酸、托芬那酸、塞來昔布、羅非昔布、伐地考昔、帕瑞考昔、羅美昔布、依托考昔和尼美舒利。根據(jù)某些實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是丙酸衍生物，如布洛芬、右旋布洛芬、萘普生、非諾洛芬、酮洛芬、右旋酮洛芬、氟比洛芬、奧沙普嗪或洛索洛芬。根據(jù)某些實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是乙酸衍生物，如茚甲新、拖美汀、舒林酸、依托度酸、酮咯酸、雙氯芬酸、醋氯芬酸或萘丁美酮。根據(jù)某些實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是水楊酸化合物，如阿斯匹林(乙酰水楊酸)、二氟尼柳(Diflunisal，Dolobid)、水楊酸或雙水楊酸(Salsalate)。根據(jù)某些實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是烯醇酸(昔康)衍生物，如吡羅昔康、美洛昔康、替諾昔康、屈昔康、氯諾昔康或依索昔康。根據(jù)某些實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是鄰氨基苯甲酸衍生物，如甲芬那酸、甲氯芬那酸、氟芬那酸或托芬那酸。根據(jù)某些實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是選擇性的COX-2抑制劑，如塞來昔布、羅非昔布、伐地考昔、帕瑞考昔、羅美昔布或依托考昔。根據(jù)更具體的實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是布洛芬。根據(jù)更具體的實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是右旋布洛芬。根據(jù)更具體的實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是萘普生。根據(jù)更具體的實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是非諾洛芬。根據(jù)更具體的實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是酮洛芬。根據(jù)更具體的實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是右旋酮洛芬。根據(jù)更具體的實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是氟比洛芬。根據(jù)更具體的實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是奧沙普嗪。根據(jù)更具體的實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是洛索洛芬。根據(jù)更具體的實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是茚甲新。根據(jù)其他具體的實施方式，這種化合物是CTLA-4化合物，如細(xì)胞毒性T-淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4免疫球蛋白。根據(jù)更具體的實施方式，CTLA-4化合物是阿巴西普。根據(jù)其他具體的實施方式，這種化合物是TNFα抑制劑，如阿達(dá)木單抗、賽妥珠單抗、依那單抗、戈利木單抗或英利西單抗。根據(jù)更具體的實施方式，TNFα抑制劑是阿達(dá)木單抗。根據(jù)其他更具體的實施方式，TNFα抑制劑是賽妥珠單抗。根據(jù)其他更具體的實施方式，TNFα抑制劑是依那單抗。根據(jù)其他更具體的實施方式，TNFα抑制劑是戈利木單抗。根據(jù)其他更具體的實施方式，TNFα抑制劑是英利西單抗。根據(jù)其他具體的實施方式，自身抗原用于預(yù)防和/或治療隱性自身免疫糖尿病，如GAD-抗體陽性個體中的隱性自身免疫糖尿病。根據(jù)具體的實施方式，自身免疫性疾病是1型糖尿病。根據(jù)其他具體的實施方式，自身免疫性疾病是自身免疫糖尿病。根據(jù)其他具體的實施方式，自身免疫性疾病是隱性自身免疫糖尿病。根據(jù)其他具體的實施方式，自身免疫性疾病是自身免疫糖尿病的復(fù)發(fā)，如已經(jīng)經(jīng)受胰島細(xì)胞移植或包括干細(xì)胞治療的其他細(xì)胞治療的患有自身免疫糖尿病的個體(例如人類)中的自身免疫糖尿病的復(fù)發(fā)。因此，本發(fā)明提供了包含至少一種自身抗原和至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物的組合(例如治療劑組合)。更具體地，本發(fā)明提供了包含以下的組合(例如治療劑組合)：i)選自由胰島素、B鏈胰島素、胰島素原和β細(xì)胞自身抗原組成的組的至少一種自身抗原，和ii)選自由維生素-D、維生素-D類似物和酪氨酸激酶抑制劑組成的組的至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物。根據(jù)某些實施方式，至少一種自身抗原是β細(xì)胞自身抗原，如谷氨酸脫羧酶(GAD)、胰島瘤抗原-2、ZnT8、胰島特異性葡萄糖-6-磷酸催化亞單位相關(guān)蛋白質(zhì)(IGRP)或嗜鉻粒蛋白A。根據(jù)具體的實施方式，β細(xì)胞自身抗原是GAD，如GAD-65，包括其片段、其衍生物或編碼其的核酸。根據(jù)更具體的實施方式，β細(xì)胞自身抗原是GAD-65、其片段、其衍生物或編碼其的核苷酸。根據(jù)更具體的實施方式，β細(xì)胞自身抗原是GAD-65。根據(jù)其他具體的實施方式，β細(xì)胞自身抗原是源自GAD-65的片段(即GAD65片段。根據(jù)其他具體的實施方式，β細(xì)胞自身抗原是胰島瘤抗原-2。根據(jù)其他具體的實施方式，β細(xì)胞自身抗原是ZnT8。根據(jù)其他具體的實施方式，β細(xì)胞自身抗原是胰島特異性葡萄糖-6-磷酸催化亞單位相關(guān)蛋白質(zhì)(IGRP)。根據(jù)其他具體的實施方式，β細(xì)胞自身抗原是嗜鉻粒蛋白A。根據(jù)某些其他的實施方式，至少一種自身抗原是胰島素。根據(jù)某些其他的實施方式，至少一種自身抗原是B鏈胰島素。根據(jù)某些其他的實施方式，至少一種自身抗原是胰島素原。根據(jù)本發(fā)明的組合物可以包含多于一種自身抗原。因此，根據(jù)某些實施方式，組合包含至少兩種自身抗原。根據(jù)某些其他的實施方式，組合包含至少三種自身抗原。根據(jù)某些其他的實施方式，組合包含至少四種自身抗原。因此，根據(jù)具體的實施方式，組合包含至少如GAD-65的GAD和胰島素。根據(jù)其他具體的實施方式，組合包含至少胰島瘤抗原-2和胰島素。根據(jù)其他具體的實施方式，組合包含至少ZnT8和胰島素。根據(jù)其他具體的實施方式，組合包含至少IGRP和胰島素。根據(jù)其他具體的實施方式，組合包含至少嗜鉻粒蛋白A和胰島素。根據(jù)其他具體的實施方式，組合包含至少如GAD-65的GAD和B鏈胰島素。根據(jù)其他具體的實施方式，組合包含至少胰島瘤抗原-2和B鏈胰島素。根據(jù)其他具體的實施方式，組合包含至少ZnT8和B鏈胰島素。根據(jù)其他具體的實施方式，組合包含至少IGRP和B鏈胰島素。根據(jù)其他具體的實施方式，組合包含至少嗜鉻粒蛋白A和B鏈胰島素。根據(jù)其他具體的實施方式，組合包含至少如GAD-65的GAD和胰島素原。根據(jù)其他具體的實施方式，組合包含至少胰島瘤抗原-2和胰島素原。根據(jù)其他具體的實施方式，組合包含至少ZnT8和胰島素原。根據(jù)其他具體的實施方式，組合包含至少IGRP和胰島素原。根據(jù)其他具體的實施方式，組合包含至少嗜鉻粒蛋白A和胰島素原。根據(jù)其他具體的實施方式，組合包含至少胰島素和B鏈胰島素。根據(jù)其他具體的實施方式，組合包含至少胰島素和胰島素原。根據(jù)其他具體的實施方式，組合包含至少B鏈胰島素和胰島素原。根據(jù)具體的實施方式，組合包含至少如GAD-65的GAD和B鏈胰島素。根據(jù)其他具體的實施方式，組合包含至少如GAD-65的GAD、胰島素和胰島素原。根據(jù)又其他具體的實施方式，組合包含至少如GAD-65的GAD、B鏈胰島素和胰島素原。根據(jù)又其他具體的實施方式，組合包含至少胰島素、B鏈胰島素和胰島素原。根據(jù)其他具體的實施方式，組合包含如GAD-65的GAD、胰島素、B鏈胰島素和B鏈胰島素。根據(jù)某些實施方式，將至少一種自身抗原，如至少兩種自身抗原或至少三種自身抗原配制在佐劑中。根據(jù)具體的實施方式，佐劑是alum。根據(jù)某些實施方式，至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物是維生素-D或維生素-D類似物。根據(jù)具體的實施方式，至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物是維生素-D。根據(jù)更具體的實施方式，至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物是1,25-二羥基維生素D。根據(jù)某些其他的實施方式，至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物是維生素-D類似物，如TX527。根據(jù)某些其他的實施方式，至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物是酪氨酸激酶抑制劑，如達(dá)沙替尼、博舒體尼、塞卡替尼、伊馬替尼、舒尼替尼或它們的組合。根據(jù)具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是達(dá)沙替尼。根據(jù)其他具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是博舒替尼。根據(jù)其他具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是塞卡替尼。根據(jù)其他具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是伊馬替尼。根據(jù)其他具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是舒尼替尼。根據(jù)其他具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是達(dá)沙替尼、博舒替尼、塞卡替尼、伊馬替尼和舒尼替尼中的至少兩種的組合。例如，酪氨酸激酶抑制劑可以是達(dá)沙替尼和博舒替尼的組合。根據(jù)其他更具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是達(dá)沙替尼和塞卡替尼的組合。根據(jù)其他更具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是達(dá)沙替尼和伊馬替尼的組合。根據(jù)其他更具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是達(dá)沙替尼和舒尼替尼的組合。根據(jù)其他更具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是博舒替尼和塞卡替尼的組合。根據(jù)其他更具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是博舒替尼和伊馬替尼的組合。根據(jù)其他更具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是博舒替尼和舒尼替尼的組合。根據(jù)其他更具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是伊馬替尼和舒尼替尼的組合。根據(jù)其他更具體的實施方式，酪氨酸激酶抑制劑是達(dá)沙替尼、博舒替尼和塞卡替尼的組合。根據(jù)本發(fā)明的組合可以包含多于一種IL-10誘導(dǎo)化合物。因此，根據(jù)某些實施方式，組合包含至少兩種IL-10誘導(dǎo)化合物。根據(jù)某些其他的實施方式，組合包含至少三種IL-10誘導(dǎo)化合物。根據(jù)某些其他的實施方式，組合包含至少四種IL-10誘導(dǎo)化合物。因此，根據(jù)具體的實施方式，組合包含至少維生素-D和酪氨酸激酶抑制劑。根據(jù)其他具體的實施方式，組合包含至少維生素-D類似物和酪氨酸激酶抑制劑。根據(jù)更具體的實施方式，組合包含至少維生素-D和達(dá)沙替尼。根據(jù)其他更具體的實施方式，組合包含至少維生素-D和博舒體尼。根據(jù)其他更具體的實施方式，組合包含至少維生素-D和塞卡替尼。根據(jù)其他更具體的實施方式，組合包含至少維生素-D和伊馬替尼。根據(jù)其他更具體的實施方式，組合包含至少維生素-D和舒尼替尼。根據(jù)更具體的實施方式，組合包含至少維生素-D類似物和達(dá)沙替尼。根據(jù)其他更具體的實施方式，組合包含至少維生素-D類似物和博舒替尼。根據(jù)其他更具體的實施方式，組合包含至少維生素-D類似物和塞卡替尼。根據(jù)其他更具體的實施方式，組合包含至少維生素-D類似物和伊馬替尼。根據(jù)其他更具體的實施方式，組合包含至少維生素-D類似物和舒尼替尼。根據(jù)某些實施方式，組合進(jìn)一步包含iii)降低樹突狀細(xì)胞的活化幼稚CD4+T細(xì)胞的能力的化合物，如環(huán)氧酶抑制劑、CTLA-4化合物或TNFα抑制劑。根據(jù)具體的實施方式，這種化合物是環(huán)氧酶抑制劑，如非甾體抗炎藥物(NSAID)。根據(jù)更具體的實施方式，NSAID選自由以下組成的組：布洛芬、右旋布洛芬、萘普生、非諾洛芬、酮洛芬、右旋酮洛芬、氟比洛芬、奧沙普嗪、洛索洛芬、茚甲新、拖美汀、舒林酸、依托度酸、酮咯酸、雙氯芬酸、醋氯芬酸、萘丁美酮、阿斯匹林(乙酰水楊酸)、二氟尼柳(Diflunisal，Dolobid)、水楊酸、雙水楊酸(Salsalate，Disalcid)、吡羅昔康、美洛昔康、替諾昔康、屈昔康、氯諾昔康、異惡噻酰胺、甲芬那酸、甲氯芬那酸、氟芬那酸、托芬那酸、塞來昔布、羅非昔布、伐地考昔、帕瑞考昔、羅美昔布、依托考昔和尼美舒利。根據(jù)某些實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是丙酸衍生物，如布洛芬、右旋布洛芬、萘普生、非諾洛芬、酮洛芬、右旋酮洛芬、氟比洛芬、奧沙普嗪或洛索洛芬。根據(jù)某些實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是乙酸衍生物，如茚甲新、拖美汀、舒林酸、依托度酸、酮咯酸、雙氯芬酸、醋氯芬酸或萘丁美酮。根據(jù)某些實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是水楊酸酯，如阿斯匹林(乙酰水楊酸)、二氟尼柳(Diflunisal，Dolobid)、水楊酸或雙水楊酸(Salsalate)。根據(jù)某些實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是烯醇酸(昔康)衍生物，如吡羅昔康、美洛昔康、替諾昔康、屈昔康、氯諾昔康或依索昔康。根據(jù)某些實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是鄰氨基苯甲酸衍生物，如甲芬那酸、甲氯芬那酸、氟芬那酸或托芬那酸。根據(jù)某些實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是選擇性的COX-2抑制劑，如塞來昔布、羅非昔布、伐地考昔、帕瑞考昔、羅美昔布或依托考昔。根據(jù)更具體的實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是布洛芬。根據(jù)更具體的實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是右旋布洛芬。根據(jù)更具體的實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是萘普生。根據(jù)更具體的實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是非諾洛芬。根據(jù)更具體的實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是酮洛芬。根據(jù)更具體的實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是右旋酮洛芬。根據(jù)更具體的實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是氟比洛芬。根據(jù)更具體的實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是奧沙普嗪。根據(jù)更具體的實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是洛索洛芬。根據(jù)更具體的實施方式，環(huán)氧酶抑制劑是茚甲新。根據(jù)其他具體的實施方式，這種化合物是CTLA-4化合物，如細(xì)胞毒性T-淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4免疫球蛋白。根據(jù)更具體的實施方式，CTLA-4化合物是阿巴西普。根據(jù)其他具體的實施方式，這種化合物是TNFα抑制劑，如阿達(dá)木單抗、賽妥珠單抗、依那單抗、戈利木單抗或英利西單抗。根據(jù)更具體的實施方式，TNFα抑制劑是阿達(dá)木單抗。根據(jù)其他更具體的實施方式，TNFα抑制劑是賽妥珠單抗。根據(jù)其他更具體的實施方式，TNFα抑制劑是依那單抗。根據(jù)其他更具體的實施方式，TNFα抑制劑是戈利木單抗。根據(jù)其他更具體的實施方式，TNFα抑制劑是英利西單抗。本發(fā)明的組合可以用于治療，特別是預(yù)防和/或治療自身免疫性疾病。因此，本發(fā)明的組合可以是治療劑組合。根據(jù)某些實施方式，該組合用于用作藥劑，如用于預(yù)防和/或治療自身免疫性疾病。根據(jù)具體的實施方式，該組合用于預(yù)防和/或治療1型糖尿病。根據(jù)其他具體的實施方式，該組合用于預(yù)防和/或治療自身免疫糖尿病。根據(jù)其他具體的實施方式，該組合用于預(yù)防和/或治療隱性自身免疫糖尿病。根據(jù)又其他的具體的實施方式，該組合用于預(yù)防和/或治療自身免疫糖尿病的復(fù)發(fā)，如已經(jīng)經(jīng)受胰島細(xì)胞移植或包括干細(xì)胞治療的其他細(xì)胞治療的自身免疫糖尿病個體(例如人類)中的自身免疫糖尿病的復(fù)發(fā)。本發(fā)明在進(jìn)一步的方面中提供了包含以下的組合物或組合在藥劑的制造中的用途：i)至少一種自身抗原，如以上詳細(xì)描述的至少一種自身抗原，ii)至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物，如以上詳細(xì)描述的至少一種IL-10，和可選地iii)降低樹突狀細(xì)胞的活化幼稚CD4+T細(xì)胞的能力的化合物，如以上詳細(xì)描述的降低樹突狀細(xì)胞的活化幼稚CD4+T細(xì)胞的能力的化合物。本發(fā)明在進(jìn)一步的方面提供了用于在需要其的個體中預(yù)防和/或治療自身免疫性疾病的方法，該方法包括將至少一種自身抗原，如以上詳細(xì)描述的至少一種自身抗原給予至所述個體；以及將至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物，如以上詳細(xì)描述的至少一種IL-10給予至所述個體。根據(jù)某些實施方式，該方法進(jìn)一步包括給予所述個體降低樹突狀細(xì)胞的活化幼稚CD4+T細(xì)胞的能力的化合物，如以上詳細(xì)描述的降低樹突狀細(xì)胞的活化幼稚CD4+T細(xì)胞的能力的化合物。根據(jù)某些實施方式，根據(jù)本發(fā)明的待治療的個體是哺乳動物。根據(jù)具體的實施方式，根據(jù)本發(fā)明的待治療的個體是人類。根據(jù)某些實施方式，根據(jù)本發(fā)明的待治療的個體是成人。根據(jù)具體的實施方式，根據(jù)本發(fā)明的待治療的個體是成年人類。根據(jù)本發(fā)明的藥劑、藥物組合物或治療劑組合可以是適合施加至人類和/或動物、優(yōu)選地包括嬰兒、兒童和成人的人類的任何形式，并且可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的標(biāo)準(zhǔn)流程來生產(chǎn)?？梢酝ㄟ^本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的，例如來自以下的目錄的標(biāo)準(zhǔn)流程生產(chǎn)藥劑、(藥物)組合物或治療劑組合："Pharmaceutics:TheScienceofDosageForms",SecondEdition,Aulton,M.E.(ED.ChurchillLivingstone,Edinburgh(2002)；"EncyclopediaofPharmaceuticalTechnology",SecondEdition,Swarbrick,J.andBoylanJ.C.(Eds.),MarcelDekker,Inc.NewYork(2002)；"ModernPharmaceutics",FourthEdition,BankerG.S.andRhodesC.T.(Eds.)MarcelDekker,Inc.NewYork2002y"TheTheoryandPracticeofIndustrialPharmacy",LachmanL.,LiebermanH.AndKanigJ.(Eds.),Lea&Febiger,Philadelphia(1986)。各自的描述通過引證結(jié)合于此并形成本公開的一部分。術(shù)語“藥劑”、“藥物組合物”和“藥物制劑”可以互換使用。本發(fā)明的藥物組合物可以是例如非腸道給予的，包括肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、或靜脈內(nèi)注射、跨粘膜或舌下施加；或口腔，包括作為片劑、丸劑、顆粒劑、膠囊、錠劑、水溶液或油溶液、懸浮液、乳液、噴霧或作為用液體介質(zhì)重組的干燥粉末形式給予。同樣，根據(jù)本發(fā)明使用的至少一種自身抗原可以是例如非腸道給予的，包括肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、或靜脈內(nèi)注射、跨粘膜或舌下應(yīng)用；或口腔，包括作為片劑、丸劑、顆粒劑、膠囊、錠劑、水溶液或油溶液、懸浮液、乳液、噴霧或作為用液體介質(zhì)重組的干燥粉末形式給予。同樣，根據(jù)本發(fā)明使用的至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物可以是例如非腸道給予的，包括肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、或靜脈內(nèi)注射、跨粘膜或舌下應(yīng)用；或口腔，包括作為片劑、丸劑、顆粒劑、膠囊、錠劑、水溶液或油溶液、懸浮液、乳液、噴霧或作為用液體介質(zhì)重組的干燥粉末形式給予。同樣，本發(fā)明的治療劑組合可以是例如非腸道給予的，包括肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、或靜脈內(nèi)注射、跨粘膜或舌下應(yīng)用；或口腔，包括作為片劑、丸劑、顆粒劑、膠囊、錠劑、水溶液或油溶液、懸浮液、乳液、噴霧或作為用液體介質(zhì)重組的干燥粉末形式給予。根據(jù)某些實施方式，腹股溝內(nèi)給予至少一種自身抗原。根據(jù)某些其他的實施方式，皮內(nèi)或皮下(如接近胰腺引流淋巴結(jié)的腹部)給予至少一種自身抗原。根據(jù)具體的實施方式，皮內(nèi)給予至少一種自身抗原。根據(jù)其他具體的實施方式，皮下給予至少一種自身抗原。根據(jù)本發(fā)明的藥劑、藥物組合物或治療劑組合可以進(jìn)一步包含一種或多種藥用的賦形劑。適用于制備根據(jù)本發(fā)明的藥劑、藥物組合物或治療劑組合的載體、稀釋劑和賦形劑是本領(lǐng)域技術(shù)人員由例如"HandbookofPharmaceuticalExcipients"SixthEdition,RaymondC.Rowe,PaulJ.SheskeyandMarianEQuinn(Eds.),AmericanPharmaceuticalAssociation(July2009)眾所周知的，，通過引證將其結(jié)合于此并形成本公開的一部分可以同時或單獨地給予至少一種自身抗原和至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物。根據(jù)某些實施方式，同時給予至少一種自身抗原和至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物。根據(jù)某些實施方式，單獨給予至少一種自身抗原和至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物。根據(jù)某些實施方式，在給予至少一種自身抗原之前給予至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物。根據(jù)具體的實施方式，在第一次給予至少一種自身抗原之前至少一天、如至少兩天、至少三天、至少四天、至少五天、至少六天或至少一周，給予至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物。因此，根據(jù)這樣的實施方式，在第一次給予至少一種自身抗原之前至少一天、如至少兩天、至少三天、至少四天、至少五天、至少六天或至少一周開始IL-10誘導(dǎo)化合物的療程。根據(jù)更具體的實施方式，在第一次給予至少一種自身抗原之前至少一周、如至少兩周給予至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物。因此，根據(jù)這樣的實施方式，在第一次給予至少一種自身抗原之前至少一周、如至少兩周開始IL-10誘導(dǎo)化合物的療程?？梢耘c至少一種自身抗原和/或至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物同時或單獨地給予降低樹突狀細(xì)胞的活化幼稚CD4+T細(xì)胞的能力的化合物。根據(jù)某些實施方式，同時給予CTLA-4化合物與至少一種自身抗原。根據(jù)某些其他的實施方式，單獨地給予降低樹突狀細(xì)胞的活化幼稚CD4+T細(xì)胞的能力的化合物與至少一種自身抗原。根據(jù)某些實施方式，同時給予至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物和降低樹突狀細(xì)胞的活化幼稚CD4+T細(xì)胞的能力的化合物。根據(jù)某些實施方式，單獨給予至少一種IL-10誘導(dǎo)化合物和降低樹突狀細(xì)胞的活化幼稚CD4+T細(xì)胞的能力的化合物。根據(jù)具體的實施方式，在至少一種自身抗原的第一次給予的時間左右+/-7天給予降低樹突狀細(xì)胞的活化幼稚CD4+T細(xì)胞的能力的化合物，如例如10mg/kg阿巴西普。根據(jù)某些實施方式，視情況在第14、28和45天+/-一周重復(fù)至少一種自身抗原的給予和降低樹突狀細(xì)胞的活化幼稚CD4+T細(xì)胞的能力的化合物的給予以確保阻礙T細(xì)胞上的CD28。根據(jù)某些實施方式，每治療時機給予至少一次可選地配制在alum中的2-20ug劑量的GAD，如GAD-65。根據(jù)某些實施方式，每治療時機給予至少一次1000-2000IU維生素D，如維生素D3。根據(jù)某些實施方式，通過在第一次給予至少一種自身抗原之前每周給予7,000-70,000IU之間的維生素D(如維生素D3)持續(xù)1-10周之間以及在最后一次給予至少一種自身抗原之后持續(xù)4周使APC更耐受。根據(jù)某些實施方式，在每次給予降低樹突狀細(xì)胞的活化幼稚CD4+T細(xì)胞的能力的化合物之后的大約一周進(jìn)行可選地配制在alum中的GAD(如GAD-65)的給予。根據(jù)某些實施方式，每治療時機給予至少一次400mg劑量的NSAID，如布洛芬。本發(fā)明假設(shè)分子生物學(xué)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員眾所周知的包括用于操作多核苷酸的技術(shù)的常規(guī)分子生物學(xué)方法的理解。在MolecularCloning:ALaboratoryManual2ndEdition,Sambrooketal.,ColdSpringHarbor,N.Y.(1989)中可以找到這種眾所周知的技術(shù)的實例。常規(guī)的分子生物學(xué)技術(shù)的實例包括但不限于體外連接、限制性核酸內(nèi)切酶酶切、PCR、細(xì)胞轉(zhuǎn)化、雜交、電泳、DNA測序等。本發(fā)明還假設(shè)免疫學(xué)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員眾所周知的常規(guī)的免疫生物學(xué)方法的理解。在CurrentProtocolsinImmunology,editorsBiereretal.,4volumes,JohnWiley&Sons,Inc.中可以找到基本的信息和方法，其包括關(guān)于以下的教導(dǎo)：實驗室動物的護(hù)理和處理、免疫響應(yīng)的誘導(dǎo)、淋巴細(xì)胞功能的體外試驗、淋巴細(xì)胞功能的體內(nèi)試驗、免疫熒光和細(xì)胞分選、細(xì)胞因子和它們的細(xì)胞受體、人類中的免疫學(xué)研究、蛋白質(zhì)、肽的分離和分析、分子生物學(xué)、細(xì)胞活化、互補的生物化學(xué)、先天免疫、自身免疫和炎性疾病的動物模型(其包括關(guān)于NOD小鼠模型、SLE小鼠模型(針對狼瘡)以及通過調(diào)節(jié)T細(xì)胞的消除的自身免疫疾病的誘導(dǎo)的章節(jié))、抗原加工和呈遞、工程免疫分子和受體、免疫系統(tǒng)中的配體-受體相互相用、顯微術(shù)、以及常用的免疫系統(tǒng)基因和蛋白質(zhì)的縮寫和專業(yè)詞匯，包括白細(xì)胞表面分子的CD系統(tǒng)。實施例以下實施例公開了可以進(jìn)行以建立本發(fā)明的各個方面的安全性和療效的研究。用于實施例的β細(xì)胞自身抗原是谷氨酸脫羧酶(GAD)，且其可以被本文所描述的任何其他的β細(xì)胞自身抗原替換。實施例1患有近期發(fā)作的1型糖尿病的患者的臨床試驗，研究設(shè)計：該研究是4臂、隨機、雙盲、安慰劑對照、多中心的臨床試驗。臂A中的患者每天早上口腔接受每天400mg布洛芬持續(xù)90天。從第1天，在15個月期間患者還口腔接受每天2000IU維生素D(即每天25滴)，以及在初免-加強(prime-and-boost)方案的第15和45天在腹部區(qū)域接受2次20μg(基于GAD的糖尿病治療)的皮下注射。臂B在15個月期間口腔接受每天2000IU維生素D(即每天25滴)，以及在初免-加強方案的第15和45天接受2次20μgDiamyd的皮下注射。臂C在15個月期間口腔接受每天2000IU維生素D(即每天25滴)，并在初免-加強方案的第15和45天在兩個不同的部位接受2次20μgDiamyd皮下注射(每時機總共給予40μgDiamyd)。臂D接受安慰劑。將隨訪患者總共30個月，其中6個月的盲法研究周期。治療組的描述：在開始治療之前2至4周的篩選探視(第1次探視)中評價患者的資格。在第2次探視(第1天，基準(zhǔn)線)時將有資格研究的患者隨機分到4治療組的一個中：指定15個患者接受作為口服懸浮液的布洛芬；從第1至90天每天早上400mg，以及從第1至450天還接受每天2000IU(即每天25滴)維生素D口服滴劑。另外，各自在第15和45天(即初免和加強給藥)在腹部區(qū)域的兩個不同部位用20μgDiamyd且處用安慰劑皮下注射1次(提供總共40μgDiamyd的劑量)。指定15個患者從第1至90天每天早上接受作為口服懸浮液的安慰劑以及從第1至450天還接受每天2000IU(即每天25滴)維生素D口服滴劑。另外，各自在第15和45天(即初免和加強給藥)在腹部區(qū)域的兩個不同部位用20μgDiamyd且一處用安慰劑皮下注射1次(提供總共40μgDiamyd的劑量)。指定15個患者從第1至90天每天早上接受作為口服懸浮液的安慰劑以及從第1至450天還接受每天2000IU(即每天25滴)維生素D口服滴劑。另外，各自在第15和45天(即初免和加強給藥)在腹部區(qū)域的兩個不同部位用20μgDiamyd皮下注射2次(提供總共80μgDiamyd的劑量)。指定15個患者接受從第1至90天每天早上的作為口服懸浮液的安慰劑以及從第1至450天的安慰劑口服滴劑，且各自在第15和45天的2次安慰劑注射(在腹部區(qū)域的兩個不同部位給予)。療效變量：主要和次要療效終點包括·效在MMTT期間的C-肽變化(90分鐘值和AUC平均值0-120min)?！ぞ哂?.2nmol/L以上的刺激的最大C-肽水平的患者的比例·患生物標(biāo)記，機械數(shù)據(jù)?！C基準(zhǔn)線和6個月之間的空腹C-肽變化。安全性變量：安全評估包括觀察注射部位的反應(yīng)、GAD65Ab效價、不利現(xiàn)象(AE)的出現(xiàn)、實驗室測量、生命指征、神經(jīng)學(xué)評估和受限的身體檢查。來自完成6個月研究的20個患者的結(jié)果示出與安慰劑治療的組相比，對于接受包括diamyd的治療的患者組看到改善的β細(xì)胞功能。實施例2通過給予GAD-抗原治療至淋巴結(jié)在近期發(fā)作的1型糖尿病成人中保持剩余的胰島素分泌功能的先導(dǎo)試驗。(DIAGNODE)1.1背景和基本原理全世界兒童中1型糖尿病(T1D)的發(fā)病率在瑞典僅次于最高的芬蘭，并且正在迅速升高。T1D到目前為止在我國兒童和青少年中是最常見的慢性、嚴(yán)重的、威脅生命的疾病，并且1型糖尿病的發(fā)病率在年輕成人中也較高。該疾病趨向于變?yōu)榉浅?yán)重的全球問題。該疾病的特征在于缺少胰島素。即使若干患者在診斷時具有相當(dāng)可觀的剩余β細(xì)胞功能(1)，但是缺乏很快變得非常明顯并最終變得完全缺乏(2,3)。剩余的胰島素分泌是至關(guān)重要的。在很少的情況下，β細(xì)胞功能在診斷之后不久改善很多使得葡萄糖代謝正常且暫時不需要胰島素，即患者得到所謂的完全緩解(4)。只要患者完全緩解，則不需要積極治療，更可能的是一些關(guān)于體育運動和飲食的良好生活方式的叮囑。沒有癥狀、沒有急性并發(fā)癥且如果該人保持完全緩解，則不太可能這樣的個體將再發(fā)展晚期并發(fā)癥。葡萄糖或脂質(zhì)代謝的輕微異?？赡芤耘c對于患有化學(xué)性糖尿病或受損的葡萄糖耐受的個體相同的方式增加大血管并發(fā)癥的風(fēng)險。完全緩解是罕見的，但是部份緩解不是(4)。在這期間，患者通常具有接近正常的血糖值，甚至沒有輕微的低血糖且沒有酮酸中毒的事件。因為患者感覺良好，所以生活質(zhì)量非常好，兒童正常成長，需要很少關(guān)于食物的限制(如果有的話)，患者可以在不變得低血糖的情況下多加鍛煉，并經(jīng)受非常好的家庭血糖測試。僅一些剩余的胰島素分泌功能即足以減少酮酸中毒的風(fēng)險(5)。此外，在DCCT試驗中已經(jīng)示出即使非常少的剩余胰島素分泌功能(對β細(xì)胞刺激的響應(yīng)，其中血清C肽>0.20pmol/ml)在并發(fā)癥的預(yù)防中也起到重要作用(6)。該效果可能是由于剩余的胰島素分泌使得更容易達(dá)到良好的血糖平衡的事實，但是還可能的是C肽本身具有生理功能。事實上已經(jīng)報告了C肽影響血管通透性，減少視網(wǎng)膜血管滲漏，以及尤其對神經(jīng)功能具有積極影響(7)，盡管C-肽本身的效果仍受到爭論。1.1.1影響自然進(jìn)程的因素在T1D的診斷時，已經(jīng)聲稱胰腺中β細(xì)胞的80-90％已經(jīng)破壞。然而，對于其的證據(jù)不足，并且完全可能的是主要問題是功能退化。此外，患者之間存在很大差異，因為一些具有非常良好的剩余胰島素分泌功能，而其他人沒有。診斷之后不久，尤其當(dāng)給予積極的胰島素治療時，存在C-肽產(chǎn)生的增加以及同時胰島素敏感度的改善。良好的代謝控制似乎改善β細(xì)胞的環(huán)境和代謝并保持β細(xì)胞功能，這進(jìn)而有利于更好的代謝控制，反之亦然。自身免疫過程的強度起到作用，并且看起來明顯的是兒童具有比1型糖尿病的成人更具攻擊性的免疫過程，但是仍難以預(yù)測該進(jìn)程。一些研究提出高濃度的自身抗體伴隨著胰島素分泌功能的更迅速的損失，而其他的研究沒有發(fā)現(xiàn)這種關(guān)系，或甚至相反。迄今為止沒有證明細(xì)胞介導(dǎo)的免疫的特殊標(biāo)志來預(yù)測β細(xì)胞損失，但是我們自己的研究示出該疾病過程與免疫系統(tǒng)的T-輔助細(xì)胞-1(Th-1)的偏差與某些細(xì)胞因子如IFNg的增加和IL-10、IL-13的減少有關(guān)。胰島素治療對β細(xì)胞功能的影響。疾病的第一周期過程中的活性胰島素治療延長了長時間以前的部分緩解，且通過改善的剩余胰島素分泌功能(2)可以確認(rèn)和驗證該發(fā)現(xiàn)。強化的治療似乎將剩余的β細(xì)胞功能改善至少一段時間(8)，但是其還可以具有長期的積極效果(9)。已經(jīng)示出積極治療不僅預(yù)防或推遲實驗動物的糖尿病，而且研究指出這種治療可以預(yù)防高風(fēng)險個體中的糖尿病(10)。然而，當(dāng)在糖尿病預(yù)防試驗中以較大規(guī)模嘗試時，非腸道的胰島素治療沒有預(yù)防糖尿病(11)。胰島素的口腔治療可能具有效果(12)，因此需要進(jìn)一步研究。1.1.2干預(yù)在1970年代，變得清楚的是T1D是自身免疫性疾病，并因此嘗試了免疫干預(yù)。我們進(jìn)行了全世界的第一次對糖尿病兒童的免疫干預(yù)研究，此時我們在30年前已經(jīng)在新診斷的兒童和青少年中使用了血漿置換法，具有一些積極效果(13)。治療的副作用是在血漿中發(fā)現(xiàn)了具有64kD重量的新蛋白質(zhì)(14)，之后示出其是谷氨酸脫羧酶(GAD)。被當(dāng)做是免疫干預(yù)的構(gòu)思的證據(jù)的突破是環(huán)孢菌素，其毫無疑問地減緩自身免疫破壞過程和給出改善的剩余的胰島素分泌功能，而其他使用免疫抑制的試驗具有很少的效果，尤其在兒童中(15,16,17)或示出過于嚴(yán)重的不利現(xiàn)象或風(fēng)險(18,19)。在調(diào)制免疫系統(tǒng)的努力中，我們使用了光分離置換法(photopheresis)。盡管在雙盲安慰劑對照試驗中表明了對免疫系統(tǒng)的明顯效果(20)，但是臨床效果很小且?guī)缀跤^察不到剩余的β細(xì)胞功能的改善(21)。因此，在免疫干預(yù)沒有成功的情況下，我們的興趣指向了沒有或具有瞬時效果的保護(hù)試劑如煙酰胺和二氮嗪(22,23,24)。隨著對導(dǎo)致β細(xì)胞破壞的免疫過程的越來越多的認(rèn)識，變得可以更精確地引導(dǎo)免疫干涉來靶向重要的T細(xì)胞。在阻礙破壞性免疫過程的嘗試中已經(jīng)進(jìn)行了使用抗-CD3抗體的有希望的研究。來自北美和法國的使用抗-CD3的試驗的結(jié)果示出可以阻礙破壞性自身免疫過程且從而至少推遲β細(xì)胞功能的下降(25,26)。剩余的胰島素分泌功能的下降顯著減緩，但是不幸地，看起來好像下降僅推遲一年，而此后下降的C-肽曲線與安慰劑組的下降曲線平行。此外，大部分的患者經(jīng)歷了一些細(xì)胞因子釋放綜合癥(CRS)，這可能是十分嚴(yán)重的，并且另外，在大部分的患者中看到了許多副作用。我們參與了兩個近期的III期試驗(Protegé試驗)中的一個，盡管具有最強治療的臂確實示出剩余的胰島素分泌功能的一些保持且降低胰島素需求以達(dá)到良好的HbAlc，但是其沒有成功達(dá)到主要終點(27；Sherry,Hagopian,LudvigssonetalLancet2011)。需要新的研究，但是難以相信僅這類治療將是用于通常的臨床用途的可接受的解決方案。作為從未發(fā)展過糖尿病的其他健康個體的預(yù)防治療來接受這種治療甚至是不太可能的。1.1.3使用自身抗原的免疫療法在過敏性疾病的治療中，在許多年期間已經(jīng)有效地使用了具有少量疾病特異性抗原的免疫治療。盡管已經(jīng)提出了免疫響應(yīng)的免疫調(diào)制和調(diào)節(jié)細(xì)胞的誘導(dǎo)，但是這種治療的機制仍是不清楚的。在自身免疫性疾病中，這種治療還沒有成功，但是應(yīng)該嘗試(28)。糖尿病傾向動物中的實驗示出通過熱休克蛋白質(zhì)的治療可以延遲或推遲糖尿病的發(fā)展。在成人的研究中使用Diapep277肽示出在幾乎沒有任何不良事件的情況下胰島素分泌功能的顯著保持(29)。然而，之后在患T1D兒童和青少年中的試驗(30)沒有示出效果。在所謂的LADA(成人中的隱性自身免疫糖尿病)中使用Diapep277治療的研究正在進(jìn)行，且初步結(jié)果(IDF,DubaiDec2011報告的和ADAJune2012報告的)指出用Diapep277治療可以保持患輕度1型糖尿病成人中的β細(xì)胞功能。然而，結(jié)果略微不清楚，因為僅在胰高血糖素刺激之后看到較弱的C-肽保持，但是在混合飲食耐受測試之后完全沒有效果，并且在積極治療組和安慰劑組之間的免疫標(biāo)記物上不存在差異。已經(jīng)示出用胰島素的積極治療不僅預(yù)防或推遲實驗動物的糖尿病，而且初步的開放研究指出這種治療可以預(yù)防高風(fēng)險個體中的糖尿病(10)。腸胃外給予(DPT)胰島素(其明顯是β細(xì)胞特異性自身抗原)來預(yù)防高風(fēng)險個體中的糖尿病沒有效果，同時出于相同的目的口腔給予胰島素可以具有輕微效果(12)。1.1.4之前用GAD-Alum的臨床研究1.1.4.1GAD-接種可以將GAD(谷氨酸脫羧酶)視為自身抗原，因為其在胰島中產(chǎn)生，其中釋放隨著對β細(xì)胞刺激的響應(yīng)增加。已經(jīng)示出該蛋白質(zhì)深入地影響自身免疫的免疫過程(31,32,33,34)。若干研究示出GAD確實可以預(yù)防實驗動物中的糖尿病(35-42)。GAD與病毒蛋白質(zhì)的類似性對治療行為可能是重要的。即使在免疫過程開始之后，觀察的效果表明在開始免疫過程之后可以在人類中預(yù)期相同的效果。在LADA患者的II期研究中，給予一次低劑量的Diamyd20μg導(dǎo)致與安慰劑治療的組相比在沒有副作用的情況下高達(dá)2年的β細(xì)胞功能的改善。還嘗試了其他劑量：4μg示出無效果，100μg示出與20μg類似的效果，同時500μg示出無效果。沒有劑量示出任何不良事件，在若干年的隨訪后仍如此(43)。發(fā)現(xiàn)了與CD4+CD25+/CD4-CD25-細(xì)胞的比率的變化的關(guān)聯(lián)，這表示該效果的機制。在該有希望的背景下，我們開始了在近期發(fā)作的10-18歲1型糖尿病患者中的II期研究?；谥暗闹委煂忂M(jìn)型LADA患者具有效果的想法，我們在干預(yù)時包括了T1D糖尿病持續(xù)高達(dá)18個月的患者。在第1和30天隨機給予患者20μgGAD-alum(Diamyd)sc或安慰劑。30個月之后效果仍是顯著的且明顯在統(tǒng)計學(xué)和臨床意義上是有意義的(44)，其中與安慰劑組相比在GAD治療的組中C-肽下降約一半。糖尿病持續(xù)時間<3個月的患者具有明顯良好的效果，其中在隨訪的前15個月沒有或很少的β細(xì)胞功能的下降。在接種持續(xù)時間<6個月的患者中看到幾乎全部的效果。另外，與其他干預(yù)治療不同，在完全沒有不良事件的情況下得到該效果，使治療非常鼓舞人心！48個月之后，治療<6個月持續(xù)時間的患者仍具有顯著保持的C-肽且仍不具有不良事件(45)。目前為止，GAD治療看起來非常有希望。進(jìn)行了兩個III期試驗，一個在歐洲，JohnnyLudvigsson(JL)作為PI，以及一個在美國，JerryPalmer作為PI以及JL作為共同研究者。在歐洲試驗中，將334個患者招募至三個臂，一個臂在第1、30、90和270天使用GAD-alum(Diamyd)20μg，另一臂在第1和30天使用GADalum20μg且第90和270天安慰劑，以及第三組在第1、30、90和270天使用安慰劑。在15個月混合飲食耐受測試(MMTT)之后的主要終點血清C-肽AUC沒有滿足！(C-肽AUCp＝0.1；空腹C-肽p＝0.07)(46)。這促使公司(DiamydMedical+Johnson&Johnson)較早地終止了III期試驗。然而，III期試驗確實示出了若干積極效果。即在若干預(yù)指定的亞組中看到了統(tǒng)計學(xué)上顯著的療效。此外，當(dāng)停止研究時，45個瑞典患者已經(jīng)通過了30個月的探視，以及接受了兩次劑量的GAD-alum(Diamyd)20μg的那15位患者在30個月之后與安慰劑相比示出C-肽的顯著保持！這是特別值得注意的，因為瑞典患者在15個月之后沒有療效，而在非北歐國家中15個月之后發(fā)現(xiàn)了療效。1.1.4.2II期和III期的不同結(jié)果的可能原因在III期隨機化中，患者在10-11歲的組中比在16-18歲的組中更經(jīng)常接受活性藥物，而安慰劑在更高年齡的組中比活性藥物更頻繁。這對結(jié)果可能具有影響。II期患者在三月-四月治療，其III期的在三月-四月治療的那些患者也具有GAD治療的顯著效果。在II期試驗中，沒有接受接種，但是在III期中，允許流感接種。不幸地，HINl流感的流行導(dǎo)致幾乎所有的患者接種，他們中的許多也接種了GAD。在瑞典和芬蘭，懷疑包含鯊烯的疫苗影響免疫系統(tǒng)的自身免疫，并且在這兩個國家，不存在GAD治療的療效，而在其他歐洲國家療效是顯著的。接近GAD治療沒有進(jìn)行流感接種的瑞典的患者具有更好的GAD治療的療效(46)。1.1.4.3正在進(jìn)行的DIABGAD-1試驗從2013年1月開始，瑞典正在進(jìn)行II期DIABGAD-1試驗。這是在60個患有近期發(fā)作1型糖尿病的10-18歲患者中的試驗，在雙盲安慰劑對照的隨機化研究中治療該患者，其中結(jié)合每天2000單位的維生素D450天，以30天間隔分別給予兩次GAD-alum20μg和40μg，以及每天400mg布洛芬90天。完成征募并且現(xiàn)在停止。隨機分配60個患者并篩選另4個患者，等待篩選結(jié)果。迄今為止沒有判斷為與研究藥物有關(guān)的嚴(yán)重不良事件和與治療無關(guān)的非常輕微的不良事件，除了在GAD-alum的注射部位輕微的瞬時反應(yīng)。已經(jīng)計劃了在6個月隨訪之后對所有患者的中間分析，而更擴(kuò)展的分析將在15和30個月之后進(jìn)行。1.1.5.淋巴結(jié)內(nèi)免疫治療抗原治療旨在呈遞抗原至淋巴結(jié)內(nèi)的T-細(xì)胞以得到免疫系統(tǒng)的新平衡和針對抗原的耐受度。在迄今為止的自身免疫疾病的治療中，口腔、鼻內(nèi)或皮下給予抗原以將抗原呈遞至抗原呈遞/樹突狀細(xì)胞，進(jìn)而預(yù)期其將抗原呈遞至免疫系統(tǒng)的T細(xì)胞。然而，動物研究示出淋巴管內(nèi)注射誘導(dǎo)強烈的和相關(guān)的T-細(xì)胞響應(yīng)(47,48)，并且在過敏領(lǐng)域，臨床研究示出將抗原/過敏原直接呈遞至淋巴結(jié)似乎比傳統(tǒng)的給予更有效(49)?？梢允褂幂^低劑量的過敏原，治療次數(shù)可以自由減少，且不存在與治療有關(guān)的不良事件。在患者中易達(dá)到腹股溝淋巴結(jié)，且與注射相關(guān)的疼痛被評定為低于靜脈穿刺的疼痛(50)。在該背景下，我們的目的是研究相同的途徑是否可以用于1型糖尿病的自身免疫形式的患者。出于倫理原因，我們將在成人中進(jìn)行第一次先導(dǎo)試驗。1.2假說II期GAD試驗的鼓舞人心的結(jié)果和III期歐洲試驗的部分積極的結(jié)果支持了給予GAD-alum(Diamyd)可以減少自身免疫過程并有助于剩余的胰島素分泌功能的保持的構(gòu)思。因為之前的研究已經(jīng)指出劑量應(yīng)該在20和100μgDiamyd之間的某處，所以當(dāng)直接給予至淋巴結(jié)時，給予三次3μg的較低劑量應(yīng)該是適當(dāng)?shù)?。將GAD-alum(Diamyd)直接注射至淋巴結(jié)將不會產(chǎn)生嚴(yán)重不利的現(xiàn)象，具有期望的免疫效果以及將(在未來的研究中示出)改善療效。2.風(fēng)險-益處分析1型糖尿病的發(fā)病率在瑞典(僅次于芬蘭)比世界上的任何其他國家要高。十年來發(fā)病率連續(xù)升高。該疾病不能治愈且不能預(yù)防。盡管非常重負(fù)擔(dān)的、強烈的、昂貴的治療，但是許多患者患有威脅生命的嚴(yán)重的急性且晚期的并發(fā)癥，且死亡率升高很多。在診斷時，許多患者具有輕微的剩余胰島素分泌。只要是這種情況，保持血糖穩(wěn)定容易得多，低血糖的發(fā)病率降低且酮酸中毒的風(fēng)險降低。只要存在一些剩余的胰島素分泌，則患者以及患有糖尿病的兒童的父母的生活質(zhì)量更好。成人中的1型糖尿病與兒童和青少年中的疾病不同，因為疾病過程經(jīng)常是較輕，剩余的胰島素分泌的下降緩慢，且更容易控制血糖。然而，仍存在很大的類似性，類似的治療和并發(fā)癥，且β細(xì)胞功能的保持在成人中也是非常重要的。明顯的是保持剩余的胰島素功能具有很大的益處，因而旨在保持該功能的療法證明治療是十分重負(fù)擔(dān)、甚至危險和昂貴的。因此，認(rèn)為用如針對CD3-受體的單克隆抗體的藥物在發(fā)作時治療1型糖尿病是合理的，該藥物導(dǎo)致大部分患者中的不良事件，一些甚至是十分嚴(yán)重的現(xiàn)象和風(fēng)險。即使使用了純的細(xì)胞抑制劑。在我們提出的研究中，我們使用GAD-alum(Diamyd)4μgx3，已經(jīng)以給予兒童和成人的大得多的劑量使用的治療，在數(shù)千患者的多年隨訪期間幾乎沒有看到不良事件。在我們的研究中，我們計劃使用非常低的劑量，這意味著可以預(yù)期通常的風(fēng)險甚至更低，但是將直接給予至淋巴結(jié)中，這可能產(chǎn)生局部反應(yīng)。對免疫系統(tǒng)的影響可以變得更明顯，但是不應(yīng)導(dǎo)致任何不利的影響。之前對過敏的研究(其中共同研究者中的一個HeleneZachrisson已經(jīng)給予了alum配制的過敏原的淋巴結(jié)內(nèi)注射)沒有示出全身或局部的任何不利影響。出于安全原因，由于這是使用這類至淋巴結(jié)的自身抗原治療的首次先導(dǎo)試驗，所以我們在可以給出他們自由的知情的同意的成人中嘗試。即使成人中的1型糖尿病比更年輕患者中的略輕，但是保持β細(xì)胞功能是很有價值的，并因此提出的治療對于成人患者也可以具有大的治療價值。當(dāng)匯總優(yōu)點與缺點時，對于參與患者，對于未來研究中的患者兩者而言，存在極為重要的治療益處的明顯的可能性，而風(fēng)險非常小。如果這些研究有助于良好的治療的發(fā)展，則對于多數(shù)患者將具有巨大的價值。3.本研究的目的本初步研究的我們的目的是獲得關(guān)于是否可以在沒有治療有關(guān)的嚴(yán)重不良事件的情況下將GAD-alum給予至淋巴結(jié)的信息，以使未來用相同技術(shù)的II期研究能夠改善在1型糖尿病中保持剩余的胰島素分泌的療效。因此，我們想要看到該治療是否產(chǎn)生任何不良事件，以及治療方案如何影響免疫系統(tǒng)，導(dǎo)致期望的Th-2偏差、T-調(diào)節(jié)細(xì)胞增加、以及希望保持剩余的β細(xì)胞功能的指示?；谠撓葘?dǎo)研究的短期結(jié)果(隨訪第6個月)，我們?nèi)缓罂赡芟胍O(shè)計更大的II期試驗以包括更年輕的患者并獲得更穩(wěn)固的信息。主要的長期的目的則是尋找發(fā)作1型糖尿病的年輕患者的治療，其對于患者來說是可耐受的、安全的，且其可以保持剩余的胰島素分泌并給與患者更好的生活質(zhì)量，具有較少的急性并發(fā)癥和長遠(yuǎn)來說較少的晚期并發(fā)癥的風(fēng)險。4.目標(biāo)目標(biāo)：為評估直接給予Diamyd至淋巴腺中的安全性以及評估免疫響應(yīng)(51-54)和對保持內(nèi)源胰島素分泌功能的影響，在基準(zhǔn)線以及6、15和30個月之后測量。5.群體給予林雪平大學(xué)醫(yī)院的患有近期發(fā)作1型糖尿病的成人患者關(guān)于研究的信息并請求他們參與試驗。5.1入選標(biāo)準(zhǔn)1.患者和監(jiān)護(hù)人/父母給出的知情同意2.根據(jù)ADA分類具有<6個月糖尿病持續(xù)時間的1型糖尿病3.在診斷1型糖尿病時年齡18.00-29.99歲4.空腹C-肽≥0.12nmol/ml5.陽性GADA但是<50000隨機單位6.女性必須同意避免妊娠并具有陰性的尿妊娠測試7.患者必須同意使用適當(dāng)?shù)谋茉写胧?，直到最后一次給予GAD-Alum/安慰劑1年之后5.2排除標(biāo)準(zhǔn)1.之前或目前通過免疫抑制療法治療(盡管局部或吸入類固醇是接受的)2.用任何炎性藥物連續(xù)治療(例如因為頭痛或與發(fā)燒相關(guān)的幾天的偶然治療是可接受的)3.用除胰島素之外的任何口服或注射的抗糖尿病藥物治療4.篩選時貧血史或顯著異常的血液學(xué)結(jié)果5.癲癇癥、頭部創(chuàng)傷或腦血管突發(fā)情況，或近端肌肉中的連續(xù)的運動單位活性的臨床表現(xiàn)史6.過去對疫苗或其他藥物的臨床顯著的急性反應(yīng)史7.在計劃的首次研究藥物給藥之前4個月內(nèi)用包括流感疫苗的任何疫苗治療，或最后一次注射研究藥物之后長達(dá)4個月內(nèi)用任何疫苗的計劃治療。8.之前3個月內(nèi)參與新化學(xué)個體的其他臨床試驗9.沒有能力或不愿意遵守該流程的規(guī)定10.酒精或藥物濫用史11.第一次給藥之前2周內(nèi)除糖尿病之外的顯著疾病12.已知的人類免疫缺陷性病毒(HIV)或肝炎13.哺乳或懷孕的女性(在GAD-alum治療之前24小時內(nèi)，通過現(xiàn)場尿βHCG必須排除妊娠的可能性)。14.男性或女性不愿意使用適當(dāng)?shù)谋茉写胧┲钡阶詈笠淮蜧AD-alum治療1年之后15.存在相關(guān)的嚴(yán)重疾病或病癥，包括妨礙皮下注射的活動性外皮感染，研究者認(rèn)為這使患者不適于該研究。16.研究者認(rèn)為不能遵守說明書和/或遵守研究流程5.3招募和篩選符合條件的受試者將得到研究的解釋，并將接收書面的患者信息。在具有回顧研究的性質(zhì)的時間之后，他們將有機會向研究團(tuán)隊詢問問題。這之后如果受試者同意參與，那么他們將個人簽署書面知情同意表并注明日期?；颊呷缓髮⒔邮蘸炇鸷妥⒚魅掌诘男畔?知情同意表的副本。5.4患者退出根據(jù)赫爾辛基宣言(DeclarationofHelsinki)，研究者必須向患者解釋他們具有在任何時間退出該研究的權(quán)利，而且這將絕不損害他們未來的治療。然而，除非出現(xiàn)安全問題，我們計劃在整個研究期間跟進(jìn)患者以也對于退出研究的那些患者分析療效和安全性變量。任何種類的退出原因必須被記錄在適當(dāng)?shù)腃RF上。將存在從研究中退出的不同的類別：完全退出(例如停止研究產(chǎn)物以及繼續(xù)療效和安全評估)從進(jìn)一步參與研究和隨訪探視(和<例如血液測試>)退出的標(biāo)準(zhǔn)原因可以是：·患者的決定(取消對參與的同意)·隨訪丟失患者從進(jìn)一步采用研究產(chǎn)物退出但是繼續(xù)隨訪探視和安全評估的標(biāo)準(zhǔn)原因可以是：·不可接受的不良事件·患者要求·研究者的判斷·隨訪丟失患者/不參與·中間發(fā)生的疾病·患者懷孕因此，如果包括在研究中之后患者患以下各項則不應(yīng)該淋巴結(jié)內(nèi)給予患者GAD-alum：-大腦損傷、癲癇、頭部創(chuàng)傷、神經(jīng)疾病-除1型糖尿病之外任何活動性的、嚴(yán)重的激素疾病-其他嚴(yán)重的自身免疫性疾病(除了乳糜泄是可接受入選的)-免疫抑制治療-癌癥、癌癥治療-除胰島素之外的任何其他糖尿病藥物-任何接種-藥物/酒精濫用或如果患者-懷孕或不再愿意在研究期間使用安全避孕措施。然而，無論何時患者退出研究或無論什么原因不前去任何進(jìn)一步的探視，必須對該患者完成最終的研究評估(探視<>)-陳述患者退出研究的原因。涉及患者的所有文檔必須盡可能的完整。由于不參加的退出必須由研究者隨訪以得到不參加的原因。由于中間發(fā)生的疾病或不良事件的退出必須完全記錄在記錄表格下，如果可獲得和/或適當(dāng)?shù)脑捥砑友a充信息。6.治療流程6.1研究設(shè)計和治療試驗是在任一性別、18.00至29.99歲、篩選(第1次探視)時診斷出6個月內(nèi)的TID并且空腹血糖C-肽水平等于或大于0.12nmol/L的GADA陽性TID患者中的單中心、開放標(biāo)簽的先導(dǎo)研究?？傆媽⒃谌鸬淞盅┢降囊粋€地點招募約5個患者。在開始治療之前，將在10至21天的篩選探視(第1次探視)中評定患者的資格。將為篩選的患者分配順序篩選號以及該篩選號將用于整個研究中識別患者。有資格包括在研究中的患者然后將參加研究來接受根據(jù)以下表1的隨后探視時的調(diào)查研究藥物?；颊邔⒔邮芸傆?0個月的研究周期，其包括至該地點的8次探視。參見以下用于研究探視的總覽的表1。表1患者探視、探視窗口和研究藥物給予的計劃6.2評估和流程1.用于新診斷的1型糖尿病患者的標(biāo)準(zhǔn)胰島素治療、教育和心理學(xué)支持。2.流體、電解質(zhì)和酸-堿平衡的標(biāo)準(zhǔn)化。3.其后關(guān)于研究的信息4.當(dāng)患者給出他們的知情同意書時，診斷之后最晚120天，通過來自患者的空腹靜脈樣品進(jìn)行篩選，該患者是根據(jù)除C-肽和GADA濃度之外的標(biāo)準(zhǔn)符合條件的(第1次探視)。5.在基準(zhǔn)線(第2次探視)、6、15和30個月，通過MMTT評估剩余的內(nèi)源胰島素分泌。每次研究探視時通過血樣關(guān)注HbAlc、安全性(血液學(xué)和化學(xué))、自身抗體效價(GAD65，IA-2)、免疫學(xué)。在每次研究探視時登記外源胰島素劑量/24小時、Ae和伴隨的藥物。6.在每次研究探視時登記自己報告的低血糖(定義為需要來自其他人的幫助和/或癲癇發(fā)作和/或失去意識)。7.應(yīng)該以臨床醫(yī)生的意見治療其他醫(yī)療問題的任何癥狀或跡象。將根據(jù)以下章節(jié)7的表2和病歷報告表(CRF)下闡述的順序進(jìn)行檢查。6.2.1所有探視，第1至7次探視應(yīng)注意患者應(yīng)該在空腹(>10小時，允許喝水)整夜之后在早晨參加所有研究探視。對于具有感染跡象(包括發(fā)燒)的患者，完整的探視應(yīng)該推遲5天或直到患者恢復(fù)。6.2.2給予GAD-Alum，第2、3和4次探視給予之后，接下來的一小時患者應(yīng)保持在研究點附近，且研究者/護(hù)士將在注射1小時之后檢查給予部位。6.2.3混合飲食耐受測試(MMTT)，第2、5、6和7次探視·MMTT必須根據(jù)CRF的指導(dǎo)進(jìn)行?；颊邞?yīng)該：·空腹整夜(>10hr)之后到達(dá)研究地點，即患者不能吃東西但是可以喝水?！MTT之前6小時內(nèi)不能接受短期作用的/直接作用的胰島素。允許患者在前一天/晚而不是在MMTT之前的早晨接受基礎(chǔ)胰島素?！ぞ哂蠧SII(胰島素泵)的患者必須繼續(xù)他們的基礎(chǔ)劑量的胰島素，但是在MMTT之前的最后6小時不能添加大丸劑給藥?！ぴ跍y試的早晨具有在患者的家庭血糖計上限定在4-12mmol/L范圍內(nèi)的空腹血糖水平。如果患者不能實現(xiàn)以上全部標(biāo)準(zhǔn)，則應(yīng)該重新計劃MMTT且如果可以的話患者應(yīng)在5天內(nèi)返回研究地點。如果出于安全原因，受試者需要進(jìn)食或采用胰島素，則也應(yīng)該重新安排探視。6.3實驗室測試和檢查：1.免疫測試：a.自身抗體(抗-GAD65、抗-胰島素、抗-IA-2、ZnT8)b.確定有關(guān)的細(xì)胞因子和趨化因子(參見以下)c.分類和研究T-細(xì)胞(參見以下)2.遺傳學(xué)：a.完成HLA確定以及與糖尿病發(fā)展有關(guān)的基因b.安排研究以說明糖尿病相關(guān)基因的重要性3.病毒試驗：a.可以使用遺傳學(xué)、免疫學(xué)和微生物學(xué)測試。4.糖尿病狀況：a.HbAlcb.空腹葡萄糖和空腹C-肽c.飲食刺激的葡萄糖和C-肽5.用于安全性的血液采樣：a.血液學(xué)b.化學(xué)6.4病史研究者將著手受試者過去的病史的回顧并記錄在病史CRF上。將在篩選探視(第1次探視)時在病史CRF頁報告所有之前存在的病癥/疾病。還將記錄受試者的1型糖尿病診斷日期和1型糖尿病的家族史。6.5包括神經(jīng)學(xué)檢查的身體檢查在篩選探視(第1次探視)時，患者將經(jīng)受全身的檢查和神經(jīng)學(xué)檢查，以及將任何發(fā)現(xiàn)作為之前存在的病癥報告在病史CRF頁。在隨后的研究探視期間，將針對任何新的醫(yī)療狀況或之前存在的狀況的惡化檢查患者。必須將之前存在的狀況的任何變化或新的狀況輸入CRF的AE頁，以及將給予的任何藥物治療輸入伴隨藥物頁。除由醫(yī)師的有限的身體檢查之外，患者將在篩選、0、6、15和30個月時經(jīng)受標(biāo)準(zhǔn)化的的臨床神經(jīng)學(xué)檢查。進(jìn)行神經(jīng)學(xué)測試以檢測神經(jīng)與肌肉疾病的可能的輕度跡象，如力量、平衡和協(xié)調(diào)的擾亂。神經(jīng)學(xué)檢查包括：·經(jīng)肢端反射·龍貝格(Romberg)(平衡和協(xié)調(diào))·在直線上行走，2米(平衡和協(xié)調(diào))·1條腿站立，左腿和右腿每條腿15秒(平衡和協(xié)調(diào))·指鼻(協(xié)調(diào))·模仿(腦神經(jīng))·巴賓斯基反射(中樞功能)·肌力(握手)二頭肌、三頭肌、遠(yuǎn)端伸肌和屈肌也可以按照研究者的意見在計劃的探視期間重復(fù)這些檢查。由于靈敏度和特異性低，所以不包括用腦動電流圖(EEG)的神經(jīng)疾病的篩選。然而，如果檢測到任何神經(jīng)學(xué)上機能障礙的跡象，則患者需要聯(lián)系神經(jīng)專家作進(jìn)一步評估。6.7伴隨用藥研究期間任何伴隨用藥，無論研究者認(rèn)為是否與研究有關(guān)，都必須報告在CRF的伴隨藥物治療記錄上。仍請參見以下章節(jié)8.5。7.流程的規(guī)劃表1先導(dǎo)DIAGNOPE-1研究，研究事件的計劃，T1D患者a注射之前和60分鐘之后由研究者或護(hù)士檢驗注射部位；b低血糖定義為需要其他人的幫助和/或癲癇發(fā)作和/或失去意識7.1探視應(yīng)在計劃的第2次探視(基準(zhǔn)線)之前10至21天進(jìn)行第一次探視，篩選探視(第1次探視)。然后應(yīng)該將第3和4次探視安排為±3天的探視窗口(第二和第三次給予GAD-Alum)，且對于第5、6次探視±14天，且對于第7次探視±30天。請注意必須根據(jù)探視計劃由基準(zhǔn)線探視(第2次探視)計算所有探視。還請注意必須在探視窗口內(nèi)進(jìn)行探視以遵守研究流程。對于患者探視的方案、探視窗口和研究藥物給予，請參見以上表1和2。8.研究藥物8.1研究藥物將以下藥物供應(yīng)用于研究：研究藥物：GAD-Alum(Diamyd)，4μgx3(給予三次，一個月間隔)，IMP供應(yīng)商：DiamydMedicalAB,Stockholm,Sweden。8.2供應(yīng)由DiamydMedical供應(yīng)GAD-alum(Diamyd)制劑。將作為預(yù)包裝的藥物由DiamydMedical供應(yīng)給當(dāng)?shù)厮幏?。所有給藥將在醫(yī)院進(jìn)行，并僅由受過訓(xùn)練和授權(quán)的研究人員處理。將根據(jù)當(dāng)?shù)匾?guī)范將研究藥物標(biāo)記信息。GAD-alum將存放在安全區(qū)域(例如鎖住的櫥柜或藥物貯存室)中的2-8℃的冰箱中，防止被無意使用。將根據(jù)當(dāng)?shù)匾?guī)范向所有研究藥物標(biāo)記信息。8.3劑量和給予GAD-Alum：給予至腹股溝區(qū)域的淋巴結(jié)(借助于超聲技術(shù))4μg，三次，一個月間隔8.4治療持續(xù)時間參見8.38.5伴隨用藥除胰島素之外，不允許全身的免疫調(diào)制藥物以及其他的糖尿病藥物(無論是否市售)。9.響應(yīng)變量和結(jié)果9.1療效的考察評價9.1.1.療效變量由于這是先導(dǎo)I期研究，所以不存在主要療效終點，但是我們將遵循以下·MMTT期間從基準(zhǔn)線分別至第6、15個月，至第30個月的空腹C-肽和C-肽的變化(90分鐘值和AUC平均值0-120min)?！だ缈醋雠cIFN-γ、TNF-α、IL-lβ、IL-17相比的IL-5、10、13的增加比率的細(xì)胞介導(dǎo)的免疫響應(yīng)的Th2-偏差和T-調(diào)節(jié)細(xì)胞的增加?；鶞?zhǔn)線和隨后的探視之間的變化?！せ仔詷?biāo)記物，例如TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-17?；鶞?zhǔn)線和隨后的探視之間的變化?！せt蛋白A1c(HbAlc)，基準(zhǔn)線和隨后的探視之間的變化·每kg體重和24小時的外源胰島素劑量，基準(zhǔn)線和隨后的探視之間的變化10.統(tǒng)計方法和數(shù)據(jù)管理10.1研究設(shè)計DIAGNODE-1研究是開放標(biāo)簽的先導(dǎo)I期干預(yù)研究研究參與者：新診斷的1型糖尿病患者：N＝5。年齡18-29.99歲。從瑞典的一個內(nèi)分泌診所招募10.2樣本大小的估計功效分析：對于該先導(dǎo)研究沒有進(jìn)行正式的功效分析。10.3統(tǒng)計分析計劃簡單來說，計劃了以下分析：所有連續(xù)變量將由以下描述性統(tǒng)計顯示：觀察次數(shù)(n)、平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差、最小值、中值和最大值。將用頻率和百分比顯示范疇性質(zhì)的所有變量。由探視劃分描述性統(tǒng)計的列表。適當(dāng)時，還將包括基準(zhǔn)線(篩選)描述性統(tǒng)計。人口統(tǒng)計和其他基準(zhǔn)線特征將使用描述性統(tǒng)計(匯總表)呈現(xiàn)人口統(tǒng)計和基準(zhǔn)線特征。安全性變量和療效數(shù)據(jù)將使用所有觀察的AE/SAE的頻率和發(fā)病率的標(biāo)準(zhǔn)化列表呈現(xiàn)AE/SAE?；诿總€患者計算頻率和發(fā)病率。將通過身體系統(tǒng)、因果關(guān)系和嚴(yán)重性匯總不良事件。將通過描述性統(tǒng)計呈現(xiàn)其他安全性數(shù)據(jù)。將描述性地匯總關(guān)于C-肽和免疫系統(tǒng)的療效數(shù)據(jù)以及不良事件和其他安全性數(shù)據(jù)。6個月之后，分析安全性數(shù)據(jù)。(結(jié)果將用于II期DIAGNODE試驗的設(shè)計)。10.4研究群體意向治療的群體如果他們接受該臂中至少1劑量的所有研究藥物并在之后的探視中被評估，則患者將包括在初次意向治療的群體中用于療效分析。符合方案人群為了取得嚴(yán)格的符合方案人群資格，受試者必須遵守研究流程，沒有任何較大的違背。遺漏的任何檢查將由進(jìn)行的上次觀察取代，但是可以失去不多于1次探視的檢查?？?cè)巳涸谝呀?jīng)接受了至少一次治療(第2次探視)后退出的任何患者將包括在安全性分析(不良事件和安全參數(shù))中。將列出所有患者的數(shù)據(jù)，以及將給出以所有原因退出的退出患者的列表。10.5數(shù)據(jù)收集/病例報告形式將提供病例報告表(CRF)用于記錄每個患者的數(shù)據(jù)。由于以及時的方式收集適當(dāng)?shù)臄?shù)據(jù)是重要的，所以研究者或分配的被指定人應(yīng)該準(zhǔn)時完成CRF。當(dāng)檢測者要求另外的數(shù)據(jù)或用于CRF的數(shù)據(jù)的澄清時，必須在時限內(nèi)符合要求地回應(yīng)該要求。研究者的責(zé)任是確保這些病例報告形式適當(dāng)?shù)赝瓿伞Ｑ芯空邔⒃谥付ǖ暮灻摵炞忠源_認(rèn)病例報告形式是準(zhǔn)確的和完整的。為了確保可讀性，應(yīng)該用黑色或藍(lán)色圓珠筆(非鉛筆、氈尖筆或鋼筆)以大寫印刷體完成CRF。必須由研究者或其指定人進(jìn)行CRF的任何校正。必須在原始記錄上畫上單劃線。校正必須標(biāo)記日期且首字母簽名。不正確的記錄不能被修正液覆蓋、或清除、或以任何方式使得難辨認(rèn)。即使與之前的檢查沒有變化，為了獲取數(shù)據(jù)的完整性，在CRF的各個章節(jié)重復(fù)的該問題需要被完全回答。研究者必須給出所有遺漏數(shù)據(jù)的合理解釋。10.6數(shù)據(jù)管理將數(shù)據(jù)編碼并將其輸入計算機數(shù)據(jù)庫。數(shù)據(jù)處理，包括數(shù)據(jù)質(zhì)量控制將遵守規(guī)章指南(例如國際協(xié)調(diào)會議[ICH]和藥物臨床試驗管理規(guī)范(GoodClinicalPractice)[GCP])。11.規(guī)章和管理程序開始研究之前必須滿足任何規(guī)章要求。主辦者將請求有關(guān)當(dāng)局的規(guī)章批準(zhǔn)。研究地點、設(shè)施、實驗室和所有數(shù)據(jù)(包括來源數(shù)據(jù))以及文檔必須可用于當(dāng)局檢驗。11.2患者信息/知情同意書研究者負(fù)責(zé)給予患者關(guān)于研究的性質(zhì)、目的、可能風(fēng)險和益處的全部和適當(dāng)?shù)目陬^和書面信息。還必須通知患者他們在任何時間可自由退出該研究?；颊邞?yīng)該在簽字之前具有閱讀和理解信息的合理時間。研究者負(fù)責(zé)在將患者包括在任何研究相關(guān)流程中之前，獲得所有患者的簽字的告知同意書?；颊咝畔⒑椭橥鈺母北緦⒔o予患者。11.4患者治療計劃所有患者在研究期間將繼續(xù)接受對于1型糖尿病的標(biāo)準(zhǔn)護(hù)理。在單獨完成研究之后，患者將回到參與研究之前接受的標(biāo)準(zhǔn)治療。實施例3該實施例中的治療方案具有“正交”作用并在長期緩解T1D自身免疫。免疫系統(tǒng)由依那西普下調(diào)，，其進(jìn)而下調(diào)β細(xì)胞周圍的炎癥，同時由樹突狀細(xì)胞呈遞β細(xì)胞自身抗原(GAD)的同時通過用維生素D治療樹突狀細(xì)胞的誘導(dǎo)耐受度能力增強。研究：開放標(biāo)簽試驗來評估由GAD-alum依那西普和維生素D組成的聯(lián)合治療在新診斷有1型糖尿病的兒童和青少年中的耐受性。活性成分：重組人谷氨酸脫羧酶(rhGAD65)、鈣化醇(維生素D)、依那西普。發(fā)展階段：階段IIa目標(biāo)：·評估rhGAD65、維生素D和依那西普的聯(lián)合治療的耐受度·評估上述治療如何影響免疫系統(tǒng)和內(nèi)源胰島素分泌功能研究設(shè)計：研究是多中心的、開放標(biāo)簽的、先導(dǎo)臨床試驗。所有患者將在15個月期間從第1天每天接受2000IU維生素D，并從第1-90天每周接受一次皮下注射的0.8mg/kg體重(最大50mg)的依那西普(Enbrel)，以及在第30和60天以初免-加強方案接受20μgDiamyd的2次皮下注射。將評估患者的耐受性6個月(主要研究周期，6次探視)，并跟進(jìn)另外的24個月(延長研究周期，3次探視)?？偟难芯恐芷谑?0個月。受試者的選擇：患者的年齡必須是8.00至17.99歲，且在篩選時的前100天內(nèi)診斷出1型糖尿病(T1D)。如果空腹C-肽>0.12nmol/L(0.36ng/mL)且存在升高水平的GAD65抗體，患者將有資格加入。計劃的受試者的數(shù)量：大約20個患者將加入。治療組的描述：存在單個治療組。將在開始治療之前2至4周的篩選探視(第1次探視)中評定患者的資格。在第2次探視(第1天)時，符合研究條件的患者將開始上述的治療。終點主要終點：在第6(主要研究周期)、9、15和30個月(延長研究周期)評估Diamyd、維生素D和依那西普的聯(lián)合治療的耐受性。評估耐受性的變量：·注射部位的反應(yīng)·感染·不良事件(AE)的出現(xiàn)·嚴(yán)重的不良事件的出現(xiàn)·生理學(xué)和神經(jīng)學(xué)評價·實驗室測量(生物化學(xué)和血液學(xué))，包括血清中的鈣和維生素D·GAD65AB效價(GADA)次要終點：在第6(主要研究周期)、9、15和30個月(延長研究周期)評估上述治療如何影響免疫系統(tǒng)和內(nèi)源胰島素分泌評估對免疫系統(tǒng)的影響的變量：·炎性標(biāo)記物，尤其是TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-17·例如作為與IFN-γ、TNF-α、IL-1β和IL-17相比的IL-5、10、13的增加的比率看出的細(xì)胞介導(dǎo)的免疫響應(yīng)的Th2-偏差·T-調(diào)節(jié)細(xì)胞的增加評估內(nèi)源胰島素分泌的影響的變量·MMTT期間的C-肽(90分鐘值和AUC平均值0-120min)·具有0.2nmol/L以上的刺激的最大C-肽水平的患者的比例·空腹C-肽·血紅蛋白Alc(HbAlc)·每kg體重和24小時的外源胰島素劑量樣本大?。河捎谶@是開放標(biāo)簽的先導(dǎo)研究，僅看治療是否是可耐受的以及是否不會對β細(xì)胞功能和/或免疫系統(tǒng)導(dǎo)致消極效果，所以沒有進(jìn)行實際的樣本大小計算。將描述性匯總所有的變量實施例4研究標(biāo)題：GABA或組合GABA/GAD對兒童中的1型糖尿病的進(jìn)展的影響發(fā)展階段：人類中的先導(dǎo)研究目標(biāo)：·評估用GABA的治療對近期發(fā)作1型糖尿病的剩余胰島素分泌的安全性和影響?！ぴu估用兩劑量的GAD-alum加GABA對近期發(fā)作的1型糖尿病的剩余胰島素分泌的保持的安全性和影響。研究設(shè)計：該研究是3臂、隨機化、雙盲、安慰劑對照的臨床試驗?；颊邔⒔邮芤韵氯我环Ni)口服GABA，每kg給藥，每天兩次持續(xù)12個月加在30天期間以初免-加強方案2次皮下注射20μgDiamydii)口服GABA，每kg給藥，每天兩次持續(xù)12個月iii)安慰劑。將跟進(jìn)患者總共12個月。受試者的選擇：患者必須是4至17歲，并在隨機化之前4周內(nèi)診斷為1型糖尿病(T1D)。如果呈現(xiàn)升高水平的GAD65抗體，則患者將有資格加入。計劃的受試者的數(shù)量：大約75個患者將加入。治療組的描述：在隨機化之前將評定患者的資格。在第1次探視(第1天，基準(zhǔn)線)，將適于研究的患者隨機到3治療組的一個中：·25個患者將分配為從第1天至第12個月接受每天兩次口服GABA，每kg給藥。另外，將在第1天和第1個月給予20μgDiamyd(GAD-alum)的2次皮下注射，即1次初免和1次加強給藥(提供總共40μgDiamyd)?！?5個患者將分配為從第1天至第12個月接受每天兩次口服GABA，每kg給藥。另外，將在第1天和第1個月給予安慰劑Diamyd的2次皮下注射?！?5個患者將分配為從第1天至第12個月接受每天兩次口服安慰劑GABA，每kg給藥。另外，將在第1天和第1個月給予安慰劑Diamyd的2次皮下注射。主要終點：·評估GABA和GABA+GAD-alum組合對胰腺β細(xì)胞功能的影響，如由1年的治療前后與年齡相符的安慰劑對照比較飲食刺激的C-肽分泌水平測量的。次要終點：·評估從基準(zhǔn)線至隨后的探視GABA和GABA+GAD-alum組合對自身免疫糖尿病自身抗體：GAD-65、ICA512和鋅傳輸子8(ZnT8A)的影響以及對HbAlc、空腹和刺激的葡萄糖和胰高血糖素水平、空腹C-肽和參與者每天使用的胰島素量的影響·評估GABA和GABA/GAD-alum組合的安全性安全性安全評估包括觀察注射部位的反應(yīng)、不良事件(AE)的出現(xiàn)、實驗室測量、神經(jīng)學(xué)評價和有限的身體檢查。樣本大?。禾岢龅难芯康臉颖敬笮∈?5個兒童；治療組中50人以及安慰劑組中25人。對于基準(zhǔn)線后第12個月的這些組之間的C-肽測量值的初次比較，假設(shè)0.05的α和1.0(0.4)的平均(SD)C-肽AUC，該樣本大小產(chǎn)生～40％功效來檢測25％差值以及～97％功效來檢測50％差值。將描述性匯總不良事件和其他數(shù)據(jù)。實施例5活性成分的名稱：重組人谷氨酸脫羧酶(rhGAD65)研究標(biāo)題：雙盲、隨機化的研究者發(fā)起的研究來確定對具有多種胰島細(xì)胞自身抗體的兒童的1型糖尿病的進(jìn)展的安全性和影響。目標(biāo)：·主要目標(biāo)是證明在處于1型糖尿病風(fēng)險下的兒童中是安全的。將跟進(jìn)受試者5年?！さ诙繕?biāo)是評估是否可以延遲或終止導(dǎo)致具有如由多種陽性胰島細(xì)胞自身抗體指示的正在進(jìn)行的持久性β-細(xì)胞自身免疫的兒童中的臨床1型糖尿病的自身免疫過程。研究設(shè)計：該研究是兩臂、隨機化、雙盲、安慰劑對照、單中心的臨床試驗。研究參與者將在30天周期內(nèi)以初免-加強方案接受20μg或安慰劑的2次皮下注射。將跟進(jìn)研究參與者5年。診斷后干預(yù)流程(PDIP)直到研究藥物保存期限，可以提供在研究周期內(nèi)診斷為臨床1型糖尿病的兒童繼續(xù)診斷后干預(yù)流程(PDIP)中的試驗以接受另外的2次注射，不論在研究的預(yù)防部分他們隨機到哪個治療組。受試者的選擇：受試者必須在4.00歲以上且對于GADA和至少一種另外的1型糖尿病相關(guān)自身抗體是陽性的(IA-2Ab>5，ZnT8/W/Q/AAb>72或IAA>0.8)。計劃的受試者的數(shù)量：大約50個患者將加入。治療組的描述：將在第一次注射之前的大約30天的篩選探視(第0次探視)時評定患者的資格。在第1次探視(第1天)，將符合研究條件的患者隨機到2治療組的1個中：·25個患者將分配為在第1和30天接受20μg的2次皮下注射，即1次初免和1次加強給藥。·25個患者將分配為各自在第1和30天接受安慰劑的2次皮下注射。診斷后干預(yù)流程(PDIP)從診斷糖尿病開始的4個月內(nèi)，參與者將在診斷后隨訪中以初免和加強方式在第1天接受20μg的一次注射，隨后在第30天接受的第二次注射(對于診斷前隨機接受安慰劑的參與者總接受劑量是40μg且對于診斷前隨機接受的參與者總接受劑量是80μg)。一般大?。簩⒁蟾哌_(dá)50個兒童參與DIAPREV-IT2。預(yù)期具有多于一種陽性胰島細(xì)胞自身抗體的兒童的50％將在5年內(nèi)發(fā)展1型糖尿病。分析：研究數(shù)據(jù)的分析將旨在解決治療的安全性和療效兩者。實施例6研究標(biāo)題：雙盲、隨機化的研究者發(fā)起的研究來確定與維生素D組合的對具有多種胰島細(xì)胞自身抗體的兒童的1型糖尿病的進(jìn)展的安全性和影響活性成分名稱：重組人谷氨酸脫羧酶(rhGAD65)、鈣化醇(維生素D3)目標(biāo)：·標(biāo)主要目標(biāo)是評估在用相對高劑量的維生素D治療的兒童中是否可以延遲或終止導(dǎo)致具有如由多種陽性胰島細(xì)胞自身抗體指示的正在進(jìn)行的持久性的β細(xì)胞自身免疫的兒童的臨床1型糖尿病的自身免疫過程。·次要目標(biāo)是證明在處于1型糖尿病風(fēng)險下的兒童中的安全性。研究設(shè)計：該研究是兩臂、隨機化、雙盲、安慰劑對照、單中心的臨床試驗。研究參與者將在30天周期內(nèi)以初免-加強方案接受20μg或安慰劑的2次皮下注射。在總的研究期間將以2000IE的日劑量向所有研究參與者補充維生素D(不論他們隨機到哪個治療組)。將跟進(jìn)研究參與者5年。診斷后干預(yù)流程(PDIP)直到研究藥物保存期限，可以提供在研究周期內(nèi)診斷為臨床1型糖尿病的兒童繼續(xù)診斷后干預(yù)流程(PDIP)中的試驗以接受另外的2次注射，不論他們在研究的預(yù)防部分中隨機到哪個治療組。加入PDIP的所有兒童將中斷原來的預(yù)防流程以為了安全性和根據(jù)PDIP的療效徹底跟進(jìn)或在PDIP中的第一次注射之后的15個月跟進(jìn)。受試者的選擇：受試者必須是4.00至17.99歲并且對GADA和至少一種另外的1型糖尿病相關(guān)的自身抗體(IA-2A、ZnT8R/W/QA或IAA)是陽性的。計劃的受試者的數(shù)量：大約80個患者將加入。治療組的描述：將在第一次注射之前的大約30天的篩選探視(第0次探視)時評定患者的資格。在第1次探視(第1天)，將符合研究條件的患者隨機到2治療組的1個中：·約40個患者將分配為在第1和30天接受20μg的2次皮下注射，即1次初免和1次加強給藥。·約40個患者將分配為各自在第1和30天接受安慰劑的2次皮下注射。在總共5年的研究期間，將以2000IE的日劑量向兩個治療組補充維生素D3。診斷后干預(yù)流程(PDIP)·從臨床1型糖尿病診斷開始的4個月內(nèi)，參與者將在PDIP中以初免和加強方式在第1天接受一次20μg注射，隨后在第30天接受第二次注射，不論他們隨機到研究預(yù)防部分的哪個治療組(診斷之前)。終點：主要終點：第一次注射之后5年，與安慰劑治療組相比，在治療組中診斷為臨床1型糖尿病的受試者的比例。次要終點：評估安全性和在具有基準(zhǔn)線的正常葡萄糖代謝的兒童的組中從正常至削弱的葡萄糖代謝的代謝狀況的變化，以及與用安慰劑治療的那些相比，在基準(zhǔn)線篩選中具有削弱的葡萄糖代謝的兒童中、在用治療的具有多種胰島自身抗體的非糖尿病兒童中的代謝狀況的進(jìn)展。評估安全性的變量：·注射部位反應(yīng)·不良事件(AE)的出現(xiàn)·實驗室測量(生物化學(xué)和血液學(xué)，包括全血細(xì)胞計數(shù)(CBC))，包括血清中的鈣和維生素D3·尿分析·身體檢查，包括神經(jīng)學(xué)評價·表位特異性GADA效價、同位型和亞型以及對GADA的抗個體基因型自身抗體代謝狀況：·從正常至削弱的葡萄糖代謝的變化，定義為以下中的任一種：a)F-葡萄糖>6.1mmol/Lb)OGTT中的在30、60、90分鐘的最大p-葡萄糖>11.1mmol/Lc)在OGTT上的120minp-葡萄糖>7.8mmol/Ld)HbAlcol/L/L：包括全血細(xì)胞必須在第二次探視時確認(rèn)削弱的葡萄糖代謝。該終點將用于基準(zhǔn)線篩選時具有正常葡萄糖代謝作用的兒童組?！ぴ诘诙翁揭晻r確認(rèn)的從上述變量中的一個或多個至降低的葡萄糖代謝作用的另外跡象的削弱的葡萄糖代謝作用的進(jìn)展。該終點將用于基準(zhǔn)線篩選時具有削弱的葡萄糖代謝作用的兒童組?？疾旖K點：·在隨訪的1、2、3和4年診斷為臨床1型糖尿病的受試者的比例·基準(zhǔn)線探視至診斷臨床1型糖尿病的時間·在多個時間點以下關(guān)鍵代謝變量從基準(zhǔn)線的變化：HbAlc、第一時相胰島素響應(yīng)和來自IvGTT的K值、來自O(shè)GTT的p-葡萄糖和C-肽、OGTT之后120分鐘的葡萄糖和C-肽、空腹C-肽、胰島素和葡萄糖·從基準(zhǔn)線的其他代謝變量的變化：AUCC-肽、來自IvGTT的葡萄糖和胰島素、來自O(shè)GTT的AUC胰島素、OGTT上的最大值p-葡萄糖變化。樣本大?。簩⒁蠖噙_(dá)80個兒童參與DIAPREV-IT2。預(yù)期具有多種自身抗體的未治療兒童的50％將在5年內(nèi)發(fā)展1型糖尿病。在糖尿病患者的親屬和總的人群中之前已經(jīng)報告了該頻率相等。如果治療的兒童的20％將在相同時間段內(nèi)發(fā)展1型糖尿病，對40+40＝80兒童的組我們將具有82％的功效，其中α＝5％。P值<0.05將被用作顯著水平。分析：研究數(shù)據(jù)的分析將旨在解決治療的安全性和療效兩者。在統(tǒng)計學(xué)分析之前將制訂統(tǒng)計學(xué)分析計劃(SAP)。將通過使用參數(shù)統(tǒng)計進(jìn)行分析。如果不滿足變量的正規(guī)性定則(例如Kolmogorov-Smirnov測試)，則將使用Wilcoxon型的非參數(shù)性統(tǒng)計。將使用Fisher精確測試分析四區(qū)域的表格。將使用壽命表分析如Kaplan-Meier和Cox退化來分析糖尿病的時間。也將在每個流程(PP)以及意圖治療(ITT)基礎(chǔ)上進(jìn)行療效的分析。在ITT中，將應(yīng)用上次向前進(jìn)行的觀察。將描述性匯總不良事件和其他安全性數(shù)據(jù)。實施例7研究標(biāo)題：與維生素D組合的的多重增加劑量的II期、2臂、隨機化、雙盲、安慰劑對照的多中心研究，評估在新診斷為1型糖尿病的年輕成人中的安全性、免疫響應(yīng)和糖尿病狀況?；钚猿煞置Q：重組人谷氨酸脫羧酶(rhGAD65)、鈣化醇(維生素D3)目標(biāo)：主要目標(biāo)：·評估與維生素D組合給予多重增加劑量的的安全性次要目標(biāo)·評估與維生素D組合給予多重增加劑量的對免疫系統(tǒng)的影響·比較與維生素D組合給予多重增加劑量的前后的Diamyd和安慰劑組之間的糖尿病狀況變量研究設(shè)計：該研究是2臂的、隨機、雙盲、安慰劑對照、多中心的臨床試驗。符合條件的患者將在第一次注射之前的1個月期間每天接受口服維生素D。從第1個月(基準(zhǔn)線)，所有患者將在另外5個月期間接受維持劑量的維生素D。將在13周期間從第1個月(基準(zhǔn)線)每周給予皮下注射的增加劑量的(或安慰劑)(劑量增加)，之后將以2、4和8周間隔(從第15周至第27周)給予最大劑量(維持劑量)。然后將每8-12周給予維持劑量1年。將在第6個月評估患者的安全性和免疫參數(shù)，然后將在第15和30個月評估糖尿病狀況參數(shù)?？偟难芯恐芷谑?0個月。受試者的選擇：患者必須是18至30歲，并在篩選時間之前的6個月內(nèi)診斷為1型糖尿病(T1D)。如果空腹C-肽>0.12nmol/L(0.36ng/mL)且存在升高水平的GAD65抗體，患者將有資格加入。計劃的受試者的數(shù)量：大約40個患者將加入。治療組的描述：將在隨機化之前的2至4周的篩選探視(第-14-28天)時評價患者的資格。符合條件的患者將在1個月期間從第1天每天口服接受7000IU維生素D，以確保在第一次安慰劑注射之前維生素D水平>70nM/L。從第1個月(基準(zhǔn)線)，所有患者將在另外5個月期間接受每天2000IU的維生素D。在第1天，將符合研究條件的患者隨機到2治療組的1個中：·約20個患者將分配為從基準(zhǔn)線(第1個月)開始接受如下增加劑量的的皮下注射：每周0.4；0.8；2；3.2；4；6.4；8；12；16；20；24、32、40μg的之后將從15至27周以2、4和8周間隔給予40μg此后將每8-12周給予40μg的持續(xù)1年。如上所述的給予維生素D(從第1天)?！ぜs20個患者將分配為以與以上相同的時間表接受安慰劑的皮下注射。如上所述的給予維生素D(沒有用于維生素D的安慰劑)。患者將在第6個月、15個月和30個月進(jìn)行三次隨訪探視。終點：主要終點：在第6、15和30個月評估與維生素D治療結(jié)合給予多重增加劑量的的安全性。評估安全性的變量：·注射部位的反應(yīng)·不良事件(AE)的出現(xiàn)·實驗室測量(生物化學(xué)和血液學(xué))·尿分析(微白蛋白尿，肌酸酐)·身體檢查，包括神經(jīng)學(xué)評價·GAD65AB效價(GADA)次要終點：評估第15和30個月在與維生素D治療結(jié)合給予多重增加劑量的前后的Diamyd和安慰劑之間的免疫系統(tǒng)和糖尿病狀況變量的影響。評估對免疫系統(tǒng)的影響的變量：·炎性標(biāo)記物(TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-17)·細(xì)胞介導(dǎo)的免疫響應(yīng)的Th2-偏差(作為與IFN-γ、TNF-α、IL-1β和IL-17相比的IL-5、10、13的增加比看出)·T-調(diào)節(jié)細(xì)胞增加評估對內(nèi)源胰島素分泌的影響的變量·血紅蛋白Alc(HbAlc)，基準(zhǔn)線和隨后的探視之間的變化·每kg體重和24小時的外源胰島素劑量，基準(zhǔn)線和隨后的探視之間的變化·自己報告的低血糖發(fā)作的次數(shù)·基準(zhǔn)線和隨后的探視之間的空腹C-肽變化·MMTT期間C-肽AUC平均值0-120min，基準(zhǔn)線和隨后的探視之間的變化·MMTT期間在第30、60、90和120分鐘測量的C-肽·MMTT期間的最大值C-肽，基準(zhǔn)線和隨后的探視之間的變化·具有0.2nmol/L以上的刺激的最大C-肽水平的患者的比例樣本大?。河捎谶@是僅看不同的治療是否是安全的研究且不會對β細(xì)胞功能和/或免疫系統(tǒng)導(dǎo)致消極效果，所以沒有進(jìn)行實際的樣本大小的計算。將描述性匯總不良事件和其他安全性數(shù)據(jù)。將描述性匯總免疫參數(shù)和糖尿病狀況變量。當(dāng)前第1頁1 2 3