本發(fā)明涉及動物膽汁有效成分的萃取方法，尤其涉及一種膽汁酸的制備方法。

背景技術(shù)：

機體內(nèi)的膽汁酸主要以膽鹽的形勢存在，膽鹽在人和動物機體中有重要的生理功能，對脂肪的消化和吸收起著重要作用。膽鹽分子的一端是極性的羧基或磺酸基，另一端則為非極性的固醇環(huán)，因而膽鹽是一種乳化劑，可在脂肪和水之間形成中間單分子層，使脂肪與水的界面張力降低，而將脂肪乳化為微粒，分散于水相中，從而增加脂肪在小腸中與脂肪酶的接觸面積，使消化作用容易進行。乳化的脂肪不僅容易消化，而且一部分高度乳化的脂肪微粒，可以直接由腸粘膜吸收。

在集約化養(yǎng)殖中，為了追求動物更高、更快地生長性能，飼料中的脂肪添加量越來越高，由于機體自身膽汁酸和胰脂肪酶分泌量不足，從而導(dǎo)致脂肪利用率很低，同時，脂肪進入腸道后段被有害菌利用會引起腹瀉、拉稀等腸道疾病。膽汁酸的添加可以提高機體對脂肪的消化吸收利用率，從而降低飼料代謝能，節(jié)約成本；提高畜禽生產(chǎn)性能，降低料肉比；改善飼料品質(zhì)，穩(wěn)定飼料質(zhì)量。 同時還可以暢通膽道，起到保肝護膽的作用。

目前，制備膽汁酸的方法主要有化學(xué)合成法和天然膽汁提取法兩類，但是出于對安全的考慮即確保無毒性物質(zhì)的殘留，大多數(shù)企業(yè)選擇天然膽汁提取法作為為研究的重點對象。專利號為CN104041678B的發(fā)明專利公開了一種膽汁組合物及其制備方法，該專利以豬膽粉為原料，經(jīng)過皂化、脫色、酸化、純化、重結(jié)晶等步驟制備得到的收率高，純度高 ( 豬膽酸和豬去氧膽酸之和的重量百分比≥ 78.0％，鵝去氧膽酸的重量百分比≥18.0％ )的膽汁酸。其中脫色工藝中單獨使用雙氧水作為脫色劑，存在著用量大，脫色速度慢，脫色率較低等缺點，不僅提高了生產(chǎn)成本，還影響了膽汁酸的純度。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種膽汁酸的制備方法，本發(fā)明脫色工藝中采用集脫色、絮凝、澄清、吸附等多種功能于一身的復(fù)合型球狀澄清脫色劑作為脫色劑，用量小，脫色效果顯著，脫色速度快，脫色率高，不僅降低了生產(chǎn)成本，還大大提高了膽汁酸的純度。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下的技術(shù)方案：

一種膽汁酸的制備方法，包括以下步驟：

（1）皂化:將提取膽紅素后的豬膽汁加入反應(yīng)釜中，然后加入相當(dāng)于豬膽汁質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3-5%的氫氧化鈉，邊加熱邊攪拌，待反應(yīng)釜中的溶液升溫至 100-110℃時計時，繼續(xù)加熱保持沸騰狀態(tài)20-24h，通入冷卻水降至常溫，虹吸上清液，下層沉淀即為游離膽汁酸；

（2）脫色澄清：向反應(yīng)釜中加入自來水至豬膽汁原體積，充分?jǐn)嚢杈鶆蚴褂坞x膽汁酸完全溶解，然后在60-70℃水浴溫度以及2000-3000r/min轉(zhuǎn)速的條件下加入相當(dāng)于豬膽汁質(zhì)量1-3‰的復(fù)合型球狀脫色澄清劑和0.5-1%的抗氧劑，繼續(xù)攪拌反應(yīng)8-14h，然后通入冷卻水降至常溫，過濾，收集濾液；

（3）濃縮：將濾液加入納濾膜中進行膜濃縮，濃縮至原質(zhì)量的20-30%，停止?jié)饪s，收集濃縮液；

（4）干燥：將上述濃縮液加入噴霧干燥機中進行干燥，至干燥失重不超過 1%，即得膽汁酸。

所述的一種膽汁酸的制備方法，步驟（2）所述的復(fù)合型球狀澄清脫色劑的制備方法如下：a、將殼聚糖溶于質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的醋酸溶液中，配成濃度為8-12g/L的殼聚糖膠體溶液，然后加入相當(dāng)于殼聚糖重量10-15%的聚合氯化鋁和5-10%的雙十八烷基二甲基氯化銨，在500-700r/min的轉(zhuǎn)速下攪拌4-7min，得膠液A；b、將藻酸丙二醇脂加水溶解制成質(zhì)量濃度為10-15%的膠體溶液，然后加入相當(dāng)于藻酸丙二醇脂質(zhì)量5-10%的活性白土和4-6%的D296陰離子交換樹脂，在600-800r/min的轉(zhuǎn)速下攪拌3-5min，得膠液B；c、將膠液A和膠液B按照等體積進行混合，充分?jǐn)嚢杈鶆?，得混合膠液；d、按照體積比2-4:1將液體石蠟和混合膠液混合，再加入相當(dāng)于混合膠液質(zhì)量2-3%的司盤20，在50-60℃水浴溫度以及700-900r/min轉(zhuǎn)速的條件下攪拌20-30min，降溫至40-50℃，再加入體積分?jǐn)?shù)為50-60%的戊二醛溶液，使得戊二醛的醛基與殼聚糖氨基摩爾比為1:2-3，在300-500r/min轉(zhuǎn)速下攪拌1-2h，然后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2-4%的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)體系pH=9-10，再在60-70℃水浴溫度以及400-600r/min轉(zhuǎn)速的條件下攪拌2-4h，冷卻至室溫，過濾，分別用丙酮、乙醇洗滌干凈后，再用去離子水水洗至中性，烘干，即得所需的復(fù)合型球狀脫色澄清劑；

所述的一種膽汁酸的制備方法，步驟（2）中所述的抗氧劑為亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉、硫代硫酸鈉中的一種或兩種組合。

所述的一種膽汁酸的制備方法，步驟（4）所述的噴霧干燥過程中，設(shè)定進風(fēng)溫度120-150℃，出風(fēng)溫度60-80℃，蒸發(fā)水量10-120L/h，最大進料量20-150L/h。

本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明采用一種以殼聚糖、聚合氯化鋁、雙十八烷基二甲基氯化銨、藻酸丙二醇脂、藻酸丙二醇脂、活性白土、D296陰離子交換樹脂等原料進行復(fù)合制得集脫色、絮凝、澄清、吸附等多種功能于一身的復(fù)合型球狀澄清脫色劑，用于膽汁酸脫色澄清工藝中，具有用量小，脫色效果顯著，脫色速度快，脫色率高的特點，10min和30min脫色率分別超過70%和90%，不僅降低了生產(chǎn)成本，還大大提高了膽汁酸的純度。本發(fā)明膽汁酸制備工藝簡單易操作，條件溫和，成本低，制得的膽汁酸收率高，純度高，可規(guī)?；I(yè)化生產(chǎn)。

具體實施方式

實施例1

一種膽汁酸的制備方法，包括以下步驟：

(1)澄清劑的制備:a、將殼聚糖溶于質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的醋酸溶液中，配成濃度為8g/L的殼聚糖膠體溶液，然后加入相當(dāng)于殼聚糖重量10%的聚合氯化鋁和5%的雙十八烷基二甲基氯化銨，在500r/min的轉(zhuǎn)速下攪拌4min，得膠液A；b、將藻酸丙二醇脂加水溶解制成質(zhì)量濃度為10%的膠體溶液，然后加入相當(dāng)于藻酸丙二醇脂質(zhì)量5%的活性白土和4%的D296陰離子交換樹脂，在600r/min的轉(zhuǎn)速下攪拌3min，得膠液B；c、將膠液A和膠液B按照等體積進行混合，充分?jǐn)嚢杈鶆?，得混合膠液；d、按照體積比2:1將液體石蠟和混合膠液混合，再加入相當(dāng)于混合膠液質(zhì)量2%的司盤20，在50℃水浴溫度以及700r/min轉(zhuǎn)速的條件下攪拌20min，降溫至40℃，再加入體積分?jǐn)?shù)為50%的戊二醛溶液，使得戊二醛的醛基與殼聚糖氨基摩爾比為1:2，在300r/min轉(zhuǎn)速下攪拌1h，然后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)體系pH=10，再在60℃水浴溫度以及400r/min轉(zhuǎn)速的條件下攪拌2h，冷卻至室溫，過濾，分別用丙酮、乙醇洗滌干凈后，再用去離子水水洗至中性，烘干，即得所需的復(fù)合型球狀脫色澄清劑；

(2)皂化:將提取膽紅素后的豬膽汁500kg加入反應(yīng)釜中，然后加入15kg的氫氧化鈉，邊加熱邊攪拌，待反應(yīng)釜中的溶液升溫至 100℃時計時，繼續(xù)加熱保持沸騰狀態(tài)24h，通入冷卻水降至常溫，虹吸上清液，下層沉淀即為游離膽汁酸；

（3）脫色澄清：向反應(yīng)釜中加入自來水至豬膽汁原體積，充分?jǐn)嚢杈鶆蚴褂坞x膽汁酸完全溶解，然后在60℃水浴溫度以及2000r/min轉(zhuǎn)速的條件下加入0.5kg步驟（2）制備復(fù)合型球狀脫色澄清劑和2.5kg亞硫酸鈉，繼續(xù)攪拌反應(yīng)8h，然后通入冷卻水降至常溫，過濾，收集濾液；

（4）濃縮：將濾液加入納濾膜中進行膜濃縮，濃縮至原質(zhì)量的20%，停止?jié)饪s，收集濃縮液；

（5）干燥：將上述濃縮液加入噴霧干燥機中進行干燥，設(shè)定進風(fēng)溫度120℃，出風(fēng)溫度60℃，蒸發(fā)水量10L/h，最大進料量20L/h。檢測干燥失重結(jié)果為0.54%，即得膽汁酸51.5kg，純度為99.2%。

實施例2

一種膽汁酸的制備方法，包括以下步驟：

(1)澄清劑的制備:a、將殼聚糖溶于質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的醋酸溶液中，配成濃度為9g/L的殼聚糖膠體溶液，然后加入相當(dāng)于殼聚糖重量11%的聚合氯化鋁和6%的雙十八烷基二甲基氯化銨，在600r/min的轉(zhuǎn)速下攪拌5min，得膠液A；b、將藻酸丙二醇脂加水溶解制成質(zhì)量濃度為11%的膠體溶液，然后加入相當(dāng)于藻酸丙二醇脂質(zhì)量6%的活性白土和5%的D296陰離子交換樹脂，在700r/min的轉(zhuǎn)速下攪拌4min，得膠液B；c、將膠液A和膠液B按照等體積進行混合，充分?jǐn)嚢杈鶆?，得混合膠液；d、按照體積比3:1將液體石蠟和混合膠液混合，再加入相當(dāng)于混合膠液質(zhì)量2.5%的司盤20，在55℃水浴溫度以及800r/min轉(zhuǎn)速的條件下攪拌25min，降溫至45℃，再加入體積分?jǐn)?shù)為52%的戊二醛溶液，使得戊二醛的醛基與殼聚糖氨基摩爾比為1:2，在400r/min轉(zhuǎn)速下攪拌1h，然后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3%的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)體系pH=9，再在65℃水浴溫度以及500r/min轉(zhuǎn)速的條件下攪拌3h，冷卻至室溫，過濾，分別用丙酮、乙醇洗滌干凈后，再用去離子水水洗至中性，烘干，即得所需的復(fù)合型球狀脫色澄清劑；

(2)皂化:將提取膽紅素后的豬膽汁500kg加入反應(yīng)釜中，然后加入20kg的氫氧化鈉，邊加熱邊攪拌，待反應(yīng)釜中的溶液升溫至 101℃時計時，繼續(xù)加熱保持沸騰狀態(tài)23h，通入冷卻水降至常溫，虹吸上清液，下層沉淀即為游離膽汁酸；

（3）脫色澄清：向反應(yīng)釜中加入自來水至豬膽汁原體積，充分?jǐn)嚢杈鶆蚴褂坞x膽汁酸完全溶解，然后在65℃水浴溫度以及2500r/min轉(zhuǎn)速的條件下加入1kg步驟（2）制備的復(fù)合型球狀脫色澄清劑和2.5kg的抗亞硫酸氫鈉，繼續(xù)攪拌反應(yīng)9h，然后通入冷卻水降至常溫，過濾，收集濾液；

（4）濃縮：將濾液加入納濾膜中進行膜濃縮，濃縮至原質(zhì)量的25%，停止?jié)饪s，收集濃縮液；

（5）干燥：將上述濃縮液加入噴霧干燥機中進行干燥，設(shè)定進風(fēng)溫度130℃，出風(fēng)溫度70℃，蒸發(fā)水量20L/h，最大進料量40L/h。檢測干燥失重結(jié)果為0.61%，即得膽汁酸50.8kg，純度為99.6%。

實施例3

一種膽汁酸的制備方法，包括以下步驟：

(1)澄清劑的制備:a、將殼聚糖溶于質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的醋酸溶液中，配成濃度為10g/L的殼聚糖膠體溶液，然后加入相當(dāng)于殼聚糖重量12%的聚合氯化鋁和7%的雙十八烷基二甲基氯化銨，在700r/min的轉(zhuǎn)速下攪拌6min，得膠液A；b、將藻酸丙二醇脂加水溶解制成質(zhì)量濃度為12%的膠體溶液，然后加入相當(dāng)于藻酸丙二醇脂質(zhì)量7%的活性白土和6%的D296陰離子交換樹脂，在800r/min的轉(zhuǎn)速下攪拌5min，得膠液B；c、將膠液A和膠液B按照等體積進行混合，充分?jǐn)嚢杈鶆?，得混合膠液；d、按照體積比4:1將液體石蠟和混合膠液混合，再加入相當(dāng)于混合膠液質(zhì)量3%的司盤20，在60℃水浴溫度以及900r/min轉(zhuǎn)速的條件下攪拌30min，降溫至50℃，再加入體積分?jǐn)?shù)為60%的戊二醛溶液，使得戊二醛的醛基與殼聚糖氨基摩爾比為1: 3，在500r/min轉(zhuǎn)速下攪拌2h，然后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4%的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)體系pH=10，再在60-70℃水浴溫度以及600r/min轉(zhuǎn)速的條件下攪拌4h，冷卻至室溫，過濾，分別用丙酮、乙醇洗滌干凈后，再用去離子水水洗至中性，烘干，即得所需的復(fù)合型球狀脫色澄清劑；

(2)皂化:將提取膽紅素后的豬膽汁800kg加入反應(yīng)釜中，然后加入32kg的氫氧化鈉，邊加熱邊攪拌，待反應(yīng)釜中的溶液升溫至 102℃時計時，繼續(xù)加熱保持沸騰狀態(tài)22h，通入冷卻水降至常溫，虹吸上清液，下層沉淀即為游離膽汁酸；

（3）脫色澄清：向反應(yīng)釜中加入自來水至豬膽汁原體積，充分?jǐn)嚢杈鶆蚴褂坞x膽汁酸完全溶解，然后在70℃水浴溫度以及3000r/min轉(zhuǎn)速的條件下加入0.8kg步驟（2）制備的復(fù)合型球狀脫色澄清劑和8kg的焦亞硫酸鈉，繼續(xù)攪拌反應(yīng)10h，然后通入冷卻水降至常溫，過濾，收集濾液；

（4）濃縮：將濾液加入納濾膜中進行膜濃縮，濃縮至原質(zhì)量的24%，停止?jié)饪s，收集濃縮液；

（5）干燥：將上述濃縮液加入噴霧干燥機中進行干燥，設(shè)定進風(fēng)溫度140℃，出風(fēng)溫度80℃，蒸發(fā)水量50L/h，最大進料量50L/h。檢測干燥失重為0.62%，即得膽汁酸88.7kg，純度為99.2%。

實施例4

一種膽汁酸的制備方法，包括以下步驟：

(1)澄清劑的制備:a、將殼聚糖溶于質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的醋酸溶液中，配成濃度為11g/L的殼聚糖膠體溶液，然后加入相當(dāng)于殼聚糖重量13%的聚合氯化鋁和8%的雙十八烷基二甲基氯化銨，在500r/min的轉(zhuǎn)速下攪拌7min，得膠液A；b、將藻酸丙二醇脂加水溶解制成質(zhì)量濃度為13%的膠體溶液，然后加入相當(dāng)于藻酸丙二醇脂質(zhì)量8%的活性白土和5%的D296陰離子交換樹脂，在600r/min的轉(zhuǎn)速下攪拌3min，得膠液B；c、將膠液A和膠液B按照等體積進行混合，充分?jǐn)嚢杈鶆颍没旌夏z液；d、按照體積比2:1將液體石蠟和混合膠液混合，再加入相當(dāng)于混合膠液質(zhì)量2%的司盤20，在50℃水浴溫度以及700r/min轉(zhuǎn)速的條件下攪拌20min，降溫至40℃，再加入體積分?jǐn)?shù)為50%的戊二醛溶液，使得戊二醛的醛基與殼聚糖氨基摩爾比為1:2，在300r/min轉(zhuǎn)速下攪拌1h，然后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)體系pH=10，再在60℃水浴溫度以及400r/min轉(zhuǎn)速的條件下攪拌2h，冷卻至室溫，過濾，分別用丙酮、乙醇洗滌干凈后，再用去離子水水洗至中性，烘干，即得所需的復(fù)合型球狀脫色澄清劑；

(2)皂化:將提取膽紅素后的豬膽汁800kg加入反應(yīng)釜中，然后加入32kg氫氧化鈉，邊加熱邊攪拌，待反應(yīng)釜中的溶液升溫至 104℃時計時，繼續(xù)加熱保持沸騰狀態(tài)21h，通入冷卻水降至常溫，虹吸上清液，下層沉淀即為游離膽汁酸；

（3）脫色澄清：向反應(yīng)釜中加入自來水至豬膽汁原體積，充分?jǐn)嚢杈鶆蚴褂坞x膽汁酸完全溶解，然后在70℃水浴溫度以及3000r/min轉(zhuǎn)速的條件下加入1.6kg步驟（2）制備的復(fù)合型球狀脫色澄清劑和8kg的硫代硫酸鈉，繼續(xù)攪拌反應(yīng)11h，然后通入冷卻水降至常溫，過濾，收集濾液；

（4）濃縮：將濾液加入納濾膜中進行膜濃縮，濃縮至原質(zhì)量的30%，停止?jié)饪s，收集濃縮液；

（5）干燥：將上述濃縮液加入噴霧干燥機中進行干燥，設(shè)定進風(fēng)溫度150℃，出風(fēng)溫度80℃，蒸發(fā)水量60L/h，最大進料量50L/h。檢測干燥失重結(jié)果為0.45%，即得膽汁酸86.5kg，純度為99.5%。

實施例5

一種膽汁酸的制備方法，包括以下步驟：

(1)澄清劑的制備:a、將殼聚糖溶于質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的醋酸溶液中，配成濃度為12g/L的殼聚糖膠體溶液，然后加入相當(dāng)于殼聚糖重量14%的聚合氯化鋁和9%的雙十八烷基二甲基氯化銨，在600r/min的轉(zhuǎn)速下攪拌4min，得膠液A；b、將藻酸丙二醇脂加水溶解制成質(zhì)量濃度為14%的膠體溶液，然后加入相當(dāng)于藻酸丙二醇脂質(zhì)量9%的活性白土和5%的D296陰離子交換樹脂，在700r/min的轉(zhuǎn)速下攪拌4min，得膠液B；c、將膠液A和膠液B按照等體積進行混合，充分?jǐn)嚢杈鶆颍没旌夏z液；d、按照體積比3:1將液體石蠟和混合膠液混合，再加入相當(dāng)于混合膠液質(zhì)量3%的司盤20，在50℃水浴溫度以及800r/min轉(zhuǎn)速的條件下攪拌25min，降溫至40℃，再加入體積分?jǐn)?shù)為55%的戊二醛溶液，使得戊二醛的醛基與殼聚糖氨基摩爾比為1:2，在400r/min轉(zhuǎn)速下攪拌2h，然后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)體系pH=9，再在65℃水浴溫度以及500r/min轉(zhuǎn)速的條件下攪拌3h，冷卻至室溫，過濾，分別用丙酮、乙醇洗滌干凈后，再用去離子水水洗至中性，烘干，即得所需的復(fù)合型球狀脫色澄清劑；

(2)皂化:將提取膽紅素后的豬膽汁1000kg加入反應(yīng)釜中，然后加入50kg的氫氧化鈉，邊加熱邊攪拌，待反應(yīng)釜中的溶液升溫至 105℃時計時，繼續(xù)加熱保持沸騰狀態(tài)20h，通入冷卻水降至常溫，虹吸上清液，下層沉淀即為游離膽汁酸；

（3）脫色澄清：向反應(yīng)釜中加入自來水至豬膽汁原體積，充分?jǐn)嚢杈鶆蚴褂坞x膽汁酸完全溶解，然后在70℃水浴溫度以及3000r/min轉(zhuǎn)速的條件下加入1kg步驟（2）制備的復(fù)合型球狀脫色澄清劑和5kg的亞硫酸鈉，繼續(xù)攪拌反應(yīng)8h，然后通入冷卻水降至常溫，過濾，收集濾液；

（4）濃縮：將濾液加入納濾膜中進行膜濃縮，濃縮至原質(zhì)量的26%，停止?jié)饪s，收集濃縮液；

（5）干燥：將上述濃縮液加入噴霧干燥機中進行干燥，設(shè)定進風(fēng)溫度120℃，出風(fēng)溫度80℃，蒸發(fā)水量100L/h，最大進料量90L/h，檢測干燥失重結(jié)果為0.81%，即得膽汁酸120.8kg，純度為99.1%。

實施例6

一種膽汁酸的制備方法，包括以下步驟：

(1)澄清劑的制備:a、將殼聚糖溶于質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的醋酸溶液中，配成濃度為8g/L的殼聚糖膠體溶液，然后加入相當(dāng)于殼聚糖重量15%的聚合氯化鋁和10%的雙十八烷基二甲基氯化銨，在700r/min的轉(zhuǎn)速下攪拌7min，得膠液A；b、將藻酸丙二醇脂加水溶解制成質(zhì)量濃度為15%的膠體溶液，然后加入相當(dāng)于藻酸丙二醇脂質(zhì)量10%的活性白土和6%的D296陰離子交換樹脂，在800r/min的轉(zhuǎn)速下攪拌5min，得膠液B；c、將膠液A和膠液B按照等體積進行混合，充分?jǐn)嚢杈鶆?，得混合膠液；d、按照體積比2-4:1將液體石蠟和混合膠液混合，再加入相當(dāng)于混合膠液質(zhì)量3%的司盤20，在60℃水浴溫度以及900r/min轉(zhuǎn)速的條件下攪拌30min，降溫至50℃，再加入體積分?jǐn)?shù)為60%的戊二醛溶液，使得戊二醛的醛基與殼聚糖氨基摩爾比為1: 3，在500r/min轉(zhuǎn)速下攪拌2h，然后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)4%的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)體系pH=10，再在70℃水浴溫度以及600r/min轉(zhuǎn)速的條件下攪拌4h，冷卻至室溫，過濾，分別用丙酮、乙醇洗滌干凈后，再用去離子水水洗至中性，烘干，即得所需的復(fù)合型球狀脫色澄清劑；

(2)皂化:將提取膽紅素后的豬膽汁1000kg加入反應(yīng)釜中，然后加40kg的氫氧化鈉，邊加熱邊攪拌，待反應(yīng)釜中的溶液升溫至 106℃時計時，繼續(xù)加熱保持沸騰狀態(tài)20h，通入冷卻水降至常溫，虹吸上清液，下層沉淀即為游離膽汁酸；

（3）脫色澄清：向反應(yīng)釜中加入自來水至豬膽汁原體積，充分?jǐn)嚢杈鶆蚴褂坞x膽汁酸完全溶解，然后在70℃水浴溫度以及3000r/min轉(zhuǎn)速的條件下加入2kg步驟（2）制備的復(fù)合型球狀脫色澄清劑和10kg的亞硫酸氫鈉，繼續(xù)攪拌反應(yīng)13h，然后通入冷卻水降至常溫，過濾，收集濾液；

（4）濃縮：將濾液加入納濾膜中進行膜濃縮，濃縮至原質(zhì)量的30%，停止?jié)饪s，收集濃縮液；

（5）干燥：將上述濃縮液加入噴霧干燥機中進行干燥，設(shè)定進風(fēng)溫度120℃，出風(fēng)溫度60℃，蒸發(fā)水量80L/h，最大進料量70L/h，檢測干燥失重結(jié)果為0.71%，即得膽汁酸110.8kg，純度為99.3%。

實施例7

一種膽汁酸的制備方法，包括以下步驟：

(1)澄清劑的制備:a、將殼聚糖溶于質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的醋酸溶液中，配成濃度為9g/L的殼聚糖膠體溶液，然后加入相當(dāng)于殼聚糖重量14%的聚合氯化鋁和9%的雙十八烷基二甲基氯化銨，在600r/min的轉(zhuǎn)速下攪拌6min，得膠液A；b、將藻酸丙二醇脂加水溶解制成質(zhì)量濃度為14%的膠體溶液，然后加入相當(dāng)于藻酸丙二醇脂質(zhì)量8%的活性白土和5%的D296陰離子交換樹脂，在700r/min的轉(zhuǎn)速下攪拌3min，得膠液B；c、將膠液A和膠液B按照等體積進行混合，充分?jǐn)嚢杈鶆颍没旌夏z液；d、按照體積比3:1將液體石蠟和混合膠液混合，再加入相當(dāng)于混合膠液質(zhì)量2%的司盤20，在50℃水浴溫度以及800r/min轉(zhuǎn)速的條件下攪拌20min，降溫至45℃，再加入體積分?jǐn)?shù)為55%的戊二醛溶液，使得戊二醛的醛基與殼聚糖氨基摩爾比為1:2，在400r/min轉(zhuǎn)速下攪拌1.5h，然后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4%的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)體系pH=10，再在60℃水浴溫度以及500r/min轉(zhuǎn)速的條件下攪拌3h，冷卻至室溫，過濾，分別用丙酮、乙醇洗滌干凈后，再用去離子水水洗至中性，烘干，即得所需的復(fù)合型球狀脫色澄清劑；

(2)皂化:將提取膽紅素后的豬膽汁2000kg加入反應(yīng)釜中，然后加入80kg的氫氧化鈉，邊加熱邊攪拌，待反應(yīng)釜中的溶液升溫至106℃時計時，繼續(xù)加熱保持沸騰狀態(tài)20h，通入冷卻水降至常溫，虹吸上清液，下層沉淀即為游離膽汁酸；

（3）脫色澄清：向反應(yīng)釜中加入自來水至豬膽汁原體積，充分?jǐn)嚢杈鶆蚴褂坞x膽汁酸完全溶解，然后在60℃水浴溫度以及2000r/min轉(zhuǎn)速的條件下加入2kg步驟（2）制備的復(fù)合型球狀脫色澄清劑和20kg的亞硫酸鈉，繼續(xù)攪拌反應(yīng)8h，然后通入冷卻水降至常溫，過濾，收集濾液；

（4）濃縮：將濾液加入納濾膜中進行膜濃縮，濃縮至原質(zhì)量的25%，停止?jié)饪s，收集濃縮液；

（5）干燥：將上述濃縮液加入噴霧干燥機中進行干燥，設(shè)定進風(fēng)溫度140℃，出風(fēng)溫度80℃，蒸發(fā)水量120L/h，最大進料量100L/h。檢測干燥失重結(jié)果為0.82%，即得膽汁酸，220.5kg，純度為99.4%。

實施例8

一種膽汁酸的制備方法，包括以下步驟：

(1)澄清劑的制備:a、將殼聚糖溶于質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的醋酸溶液中，配成濃度為10g/L的殼聚糖膠體溶液，然后加入相當(dāng)于殼聚糖重量10%的聚合氯化鋁和10%的雙十八烷基二甲基氯化銨，在700r/min的轉(zhuǎn)速下攪拌6min，得膠液A；b、將藻酸丙二醇脂加水溶解制成質(zhì)量濃度為15%的膠體溶液，然后加入相當(dāng)于藻酸丙二醇脂質(zhì)量7%的活性白土和6%的D296陰離子交換樹脂，在800r/min的轉(zhuǎn)速下攪拌5min，得膠液B；c、將膠液A和膠液B按照等體積進行混合，充分?jǐn)嚢杈鶆?，得混合膠液；d、按照體積比4:1將液體石蠟和混合膠液混合，再加入相當(dāng)于混合膠液質(zhì)量3%的司盤20，在60℃水浴溫度以及700r/min轉(zhuǎn)速的條件下攪拌30min，降溫至50℃，再加入體積分?jǐn)?shù)為60%的戊二醛溶液，使得戊二醛的醛基與殼聚糖氨基摩爾比為1:3，在500r/min轉(zhuǎn)速下攪拌2h，然后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4%的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)體系pH=10，再在70℃水浴溫度以及600r/min轉(zhuǎn)速的條件下攪拌4h，冷卻至室溫，過濾，分別用丙酮、乙醇洗滌干凈后，再用去離子水水洗至中性，烘干，即得所需的復(fù)合型球狀脫色澄清劑；

(2)皂化:將提取膽紅素后的豬膽汁1000kg加入反應(yīng)釜中，然后加入50kg的氫氧化鈉，邊加熱邊攪拌，待反應(yīng)釜中的溶液升溫至 110℃時計時，繼續(xù)加熱保持沸騰狀態(tài)24h，通入冷卻水降至常溫，虹吸上清液，下層沉淀即為游離膽汁酸；

（3）脫色澄清：向反應(yīng)釜中加入自來水至豬膽汁原體積，充分?jǐn)嚢杈鶆蚴褂坞x膽汁酸完全溶解，然后在70℃水浴溫度以及3000r/min轉(zhuǎn)速的條件下加入2kg步驟（2）制備的復(fù)合型球狀脫色澄清劑和10kg的硫代硫酸鈉，繼續(xù)攪拌反應(yīng)8h，然后通入冷卻水降至常溫，過濾，收集濾液；

（4）濃縮：將濾液加入納濾膜中進行膜濃縮，濃縮至原質(zhì)量的30%，停止?jié)饪s，收集濃縮液；

（5）干燥：將上述濃縮液加入噴霧干燥機中進行干燥，設(shè)定進風(fēng)溫度150℃，出風(fēng)溫度80℃，蒸發(fā)水量110L/h，最大進料量90L/h，檢測干燥失重結(jié)果為0.92%，即得膽汁酸122.3kg，純度為99.2%。

實施例9

一種膽汁酸的制備方法，包括以下步驟：

(1)澄清劑的制備:a、將殼聚糖溶于質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的醋酸溶液中，配成濃度為9g/L的殼聚糖膠體溶液，然后加入相當(dāng)于殼聚糖重量15%的聚合氯化鋁和5%的雙十八烷基二甲基氯化銨，在700r/min的轉(zhuǎn)速下攪拌6min，得膠液A；b、將藻酸丙二醇脂加水溶解制成質(zhì)量濃度為15%的膠體溶液，然后加入相當(dāng)于藻酸丙二醇脂質(zhì)量7%的活性白土和6%的D296陰離子交換樹脂，在800r/min的轉(zhuǎn)速下攪拌5min，得膠液B；c、將膠液A和膠液B按照等體積進行混合，充分?jǐn)嚢杈鶆?，得混合膠液；d、按照體積比2:1將液體石蠟和混合膠液混合，再加入相當(dāng)于混合膠液質(zhì)量3%的司盤20，在60℃水浴溫度以及700r/min轉(zhuǎn)速的條件下攪拌20min，降溫至50℃，再加入體積分?jǐn)?shù)為60%的戊二醛溶液，使得戊二醛的醛基與殼聚糖氨基摩爾比為1:3，在300r/min轉(zhuǎn)速下攪拌1-2h，然后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4%的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)體系pH=9，再在60℃水浴溫度以及600r/min轉(zhuǎn)速的條件下攪拌2h，冷卻至室溫，過濾，分別用丙酮、乙醇洗滌干凈后，再用去離子水水洗至中性，烘干，即得所需的復(fù)合型球狀脫色澄清劑；

(2)皂化:將提取膽紅素后的豬膽汁1000kg加入反應(yīng)釜中，然后加入120kg的氫氧化鈉，邊加熱邊攪拌，待反應(yīng)釜中的溶液升溫至 102℃時計時，繼續(xù)加熱保持沸騰狀態(tài)24h，通入冷卻水降至常溫，虹吸上清液，下層沉淀即為游離膽汁酸；

（3）脫色澄清：向反應(yīng)釜中加入自來水至豬膽汁原體積，充分?jǐn)嚢杈鶆蚴褂坞x膽汁酸完全溶解，然后在60℃水浴溫度以及2000r/min轉(zhuǎn)速的條件下加入3kg步驟（2）制備的復(fù)合型球狀脫色澄清劑和8kg的焦亞硫酸鈉，繼續(xù)攪拌反應(yīng)10h，然后通入冷卻水降至常溫，過濾，收集濾液；

（4）濃縮：將濾液加入納濾膜中進行膜濃縮，濃縮至原質(zhì)量的30%，停止?jié)饪s，收集濃縮液；

（5）干燥：將上述濃縮液加入噴霧干燥機中進行干燥，設(shè)定進風(fēng)溫度150℃，出風(fēng)溫度70℃，蒸發(fā)水量120L/h，最大進料量150L/h。檢測干燥失重結(jié)果為0.51%，即得膽汁酸105.8kg，純度為99.7%。

實施例10

一種膽汁酸的制備方法，包括以下步驟：

(1)澄清劑的制備:a、將殼聚糖溶于質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的醋酸溶液中，配成濃度為8g/L的殼聚糖膠體溶液，然后加入相當(dāng)于殼聚糖重量15%的聚合氯化鋁和10%的雙十八烷基二甲基氯化銨，在700r/min的轉(zhuǎn)速下攪拌7min，得膠液A；b、將藻酸丙二醇脂加水溶解制成質(zhì)量濃度為15%的膠體溶液，然后加入相當(dāng)于藻酸丙二醇脂質(zhì)量5%的活性白土和6%的D296陰離子交換樹脂，在800r/min的轉(zhuǎn)速下攪拌5min，得膠液B；c、將膠液A和膠液B按照等體積進行混合，充分?jǐn)嚢杈鶆?，得混合膠液；d、按照體積比4:1將液體石蠟和混合膠液混合，再加入相當(dāng)于混合膠液質(zhì)量3%的司盤20，在60℃水浴溫度以及700r/min轉(zhuǎn)速的條件下攪拌20min，降溫至50℃，再加入體積分?jǐn)?shù)為50%的戊二醛溶液，使得戊二醛的醛基與殼聚糖氨基摩爾比為1:2，在300r/min轉(zhuǎn)速下攪拌2h，然后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)體系pH=9，再在60℃水浴溫度以及400r/min轉(zhuǎn)速的條件下攪拌2h，冷卻至室溫，過濾，分別用丙酮、乙醇洗滌干凈后，再用去離子水水洗至中性，烘干，即得所需的復(fù)合型球狀脫色澄清劑；

(2)皂化:將提取膽紅素后的豬膽汁2000kg加入反應(yīng)釜中，然后加入100kg的氫氧化鈉，邊加熱邊攪拌，待反應(yīng)釜中的溶液升溫至 110℃時計時，繼續(xù)加熱保持沸騰狀態(tài)20h，通入冷卻水降至常溫，虹吸上清液，下層沉淀即為游離膽汁酸；

（3）脫色澄清：向反應(yīng)釜中加入自來水至豬膽汁原體積，充分?jǐn)嚢杈鶆蚴褂坞x膽汁酸完全溶解，然后在70℃水浴溫度以及3000r/min轉(zhuǎn)速的條件下加入3kg步驟（2）制備的復(fù)合型球狀脫色澄清劑和10kg的亞硫酸鈉，繼續(xù)攪拌反應(yīng)8h，然后通入冷卻水降至常溫，過濾，收集濾液；

（4）濃縮：將濾液加入納濾膜中進行膜濃縮，濃縮至原質(zhì)量的20%，停止?jié)饪s，收集濃縮液；

（5）干燥：將上述濃縮液加入噴霧干燥機中進行干燥，設(shè)定進風(fēng)溫度150℃，出風(fēng)溫度80℃，蒸發(fā)水量120L/h，最大進料量150L/h，檢測干燥失重結(jié)果為0.63%，即得膽汁酸220.8kg，純度為99.4%。