一種重結(jié)晶降低螺旋霉素雜質(zhì)的方法
【專利摘要】一種重結(jié)晶降低螺旋霉雜質(zhì)的方法，步驟為：(1)將磷酸二氫鉀溶于水中，然后用草酸調(diào)節(jié)pH值為2～3；(2)將固態(tài)螺旋霉素投入步驟(1)所得的混合溶液中，保持溫度為25～40℃攪拌溶解；(3)向步驟(2)所得螺旋霉素溶液中加入質(zhì)量濃度為12～15％氫氧化鈉溶液，升溫60～90min，然后保持溫度為50～65℃下攪拌結(jié)晶；(4)離心分離得到濕粉，濕粉重復(fù)步驟(1)、(2)、(3)操作，再次得到濕粉干燥即可得到低雜質(zhì)螺旋霉素。本方法是通過(guò)改變磷酸二氫鉀和草酸的加量，然后把螺旋霉素成品重新溶解到磷酸二氫鉀和草酸溶液中，重新結(jié)晶，把螺旋霉素中的有關(guān)物質(zhì)進(jìn)一步的去除，進(jìn)而提高產(chǎn)品質(zhì)量。
【專利說(shuō)明】一種重結(jié)晶降低螺旋霉素雜質(zhì)的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于醫(yī)藥化工領(lǐng)域，具體涉及一種重結(jié)晶降低螺旋霉素雜質(zhì)的方法。

【背景技術(shù)】
[0002]螺旋霉素堿是由二鏈霉菌(S.ambofacienss)所產(chǎn)生的多組份大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，其分子結(jié)構(gòu)是含有十六個(gè)骨架的大環(huán)內(nèi)酯部分，為白色或淡黃色無(wú)定形物質(zhì)，味苦，為堿性抗生素。可溶于氯仿、醇類、已醇、酮、乙酸丁酯等有機(jī)溶劑，微溶于水。其硫酸鹽溶于水和低級(jí)醇類。其熔點(diǎn)為:SPMI:134 ?137°C:SPM I1:130 ?133°C:SPM II1:128 ?131。。。在231?232nm處有紫外線吸收峰。本身有發(fā)色基因，遇濃硫酸或鹽酸呈紫色反應(yīng)、麥牙酚反應(yīng)、茚三酮反應(yīng)、坂口反應(yīng)、雙縮脲反應(yīng)、斐林反應(yīng)呈陽(yáng)性。
[0003]螺旋霉素是由菌種經(jīng)過(guò)一級(jí)、二級(jí)、發(fā)酵三級(jí)培養(yǎng)，發(fā)酵液經(jīng)過(guò)板框過(guò)濾、丁酯萃取、丁酯液反萃取、酸水結(jié)晶、濕品干燥而得。由于發(fā)酵過(guò)程中會(huì)存在異常代謝，導(dǎo)致發(fā)酵液中出現(xiàn)多種雜質(zhì)，而這些雜質(zhì)經(jīng)過(guò)溶媒萃取精制后仍不能完全去除。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明針對(duì)上述技術(shù)中存在一般方法所制得螺旋霉素內(nèi)含有不易去除的雜質(zhì)，發(fā)明一種重結(jié)晶降低螺旋霉素雜質(zhì)的方法，旨在得到一種純度較高的螺旋霉素，其包括下述步驟:
[0005](I)配制磷酸二氫鉀和草酸的混合溶液:按質(zhì)量溶解量為1.0?1.5%將磷酸二氫鉀溶于水中，然后用草酸調(diào)節(jié)PH值為2?3 ;
[0006](2)固體螺旋霉素溶解反應(yīng):按固態(tài)螺旋霉素質(zhì)量溶解量為7X 14?1.2X 15 μ /ml將固態(tài)螺旋霉素投入步驟(I)所得的混合溶液中，保持溫度為25?40°C攪拌溶解；
[0007](3)氫氧化鈉溶液反應(yīng):向步驟(2)所得螺旋霉素溶液中加入質(zhì)量濃度為12?15%氫氧化鈉溶液，按升溫速率為35?55 °C /h升溫60?90min，然后保持溫度為50?65°C下攪拌30?50min進(jìn)行結(jié)晶；
[0008](4)離心分離得到濕粉，濕粉重復(fù)步驟⑴、(2)、(3)操作I?3次，再次得到濕粉干燥即可得到低雜質(zhì)螺旋霉素。
[0009]其中，步驟(3)中加入氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為9.0?9.4，氫氧化鈉溶液加入時(shí)間為30?50min。
[0010]其中，步驟⑷中所述的干燥為保持溫度為30?75°C干燥12h。
[0011]本發(fā)明的有益效果:
[0012]利用本發(fā)明中的通過(guò)改變磷酸二氫鉀和草酸的用量，然后把螺旋霉素成品重新溶解到磷酸二氫鉀和草酸溶液中，重新結(jié)晶，把螺旋霉素中的雜質(zhì)進(jìn)一步的去除，使得所得螺旋霉素內(nèi)雜質(zhì)大大降低，進(jìn)而提高產(chǎn)品質(zhì)量，最終所得螺旋霉素收率高達(dá)90?95% ;進(jìn)一步的本發(fā)明直接利用螺旋霉素溶解形成螺旋霉溶液進(jìn)行重結(jié)晶，大大增加了螺旋霉素的純度，而且，本發(fā)明工藝流程較為簡(jiǎn)捷，易操作，成本低。

【具體實(shí)施方式】
[0013]下面對(duì)本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】進(jìn)行詳細(xì)描述，但應(yīng)當(dāng)理解本發(fā)明的保護(hù)范圍并不受【具體實(shí)施方式】的限制。
[0014]實(shí)施例1
[0015](I)按質(zhì)量溶解量為1.0%將磷酸二氫鉀溶解于去離子水中，然后用草酸將磷酸二氫鉀溶液PH值調(diào)節(jié)為2.0? (2)按固態(tài)螺旋霉素質(zhì)量溶解量為7 X 14 μ /ml向所得混合溶液中加入固體螺旋霉素，25°C攪拌溶解，所得為螺旋霉素溶液。(3)向螺旋霉素溶液中加入質(zhì)量濃度為12%的氫氧化鈉溶液，控制氫氧化鈉溶液加入過(guò)程時(shí)間為30?50min，直至將PH值調(diào)節(jié)為9.0，然后按升溫速率為35°C /h升溫90min，保持溫度為50°C攪拌50min進(jìn)行結(jié)晶。(4)離心分離得到濕粉，濕粉重復(fù)步驟(I)、(2)、(3)操作I次，再次得到濕粉保持溫度為30°C干燥12h即可得到低雜質(zhì)螺旋霉素，其收率是90%。
[0016]實(shí)施例2
[0017](I)按質(zhì)量溶解量為1.3%將磷酸二氫鉀溶解于純化水中，然后用草酸將磷酸二氫鉀溶液PH值調(diào)節(jié)為2.5。(2)按固態(tài)螺旋霉素質(zhì)量溶解量為9.5 X 14 μ /ml向所得混合溶液中加入固體螺旋霉素，33 0C攪拌溶解，所得為螺旋霉素溶液。(3)向螺旋霉素溶液中加入質(zhì)量濃度為13%的氫氧化鈉溶液，控制氫氧化鈉溶液加入過(guò)程時(shí)間為30?50min，直至將PH值調(diào)節(jié)為9.2，然后按升溫速率為45°C /h升溫75min，保持溫度為65°C攪拌40min進(jìn)行結(jié)晶。(4)離心分離得到濕粉，濕粉重復(fù)步驟(I)、(2)、(3)操作2次，再次得到濕粉保持溫度為53°C干燥12h即可得到低雜質(zhì)螺旋霉素，其收率是93%。
[0018]實(shí)施例3
[0019](I)按質(zhì)量溶解量為1.5%將磷酸二氫鉀溶解于去離子水中，然后用草酸將磷酸二氫鉀溶液PH值調(diào)節(jié)為2.0? (2)按固態(tài)螺旋霉素質(zhì)量溶解量為1.2 X 15 μ /ml向所得混合溶液中加入固體螺旋霉素，40°C攪拌溶解，所得為螺旋霉素溶液.(3)向螺旋霉素溶液中加入質(zhì)量濃度為15%的氫氧化鈉溶液，控制氫氧化鈉溶液加入過(guò)程時(shí)間為30?50min，直至將PH值調(diào)節(jié)為9.4，然后按升溫速率為55°C /h升溫60min，保持溫度為55°C攪拌30min進(jìn)行結(jié)晶。(4)離心分離得到濕粉，濕粉重復(fù)步驟(I)、(2)、(3)操作3次，再次得到濕粉保持溫度為75°C干燥12h即可得到低雜質(zhì)螺旋霉素，其收率是95%。
[0020]對(duì)比實(shí)施例1
[0021](I)發(fā)酵液預(yù)處理:產(chǎn)二素鏈霉菌發(fā)酵液加熱至30?40°C，用氫氧化鈉溶液調(diào)pH至7.0±0.3，加入氯化鋁溶液，然后繼續(xù)用氫氧化鈉溶液將發(fā)酵液調(diào)pH8.1±0.5，然后進(jìn)行板框過(guò)濾，取濾液。
[0022](2)萃取:濾液升溫至溫度30?40°C、ρΗ9.3±0.5，加入丁酯(按丁酯液效價(jià)100000 μ /ml控制)，萃取后重液效價(jià)彡1000 μ/ml。丁酯液過(guò)高機(jī)，然后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)40%磷酸二氫鉀和草酸PH3.7 ± 0.3緩沖液洗滌、質(zhì)量分?jǐn)?shù)30%飽和鹽水洗滌、質(zhì)量分?jǐn)?shù)30%純化水洗滌。
[0023](3)反萃取:洗滌后的丁酯液用0.lmol/L的磷酸二氫鉀和草酸pH2.6±0.2緩沖液、溫度31±2°C反萃取，當(dāng)pH在6.1±0.5攪拌20min，靜置40min得酸水、效價(jià)50000?70000 μ/ml ο
[0024](4)結(jié)晶:往酸水里面加堿時(shí)間控制在30min以上，緩慢調(diào)結(jié)晶液pH到9.2±0.2。用熱水罐內(nèi)熱水進(jìn)行夾層升溫，結(jié)晶罐初溫不能高于30°C以上。升溫時(shí)間60?90min，緩慢升溫至57±5°C停止加熱，保溫30min。用30% pH9.2±0.2的稀堿液、57±5°C混洗結(jié)晶液，攪拌20min。最后離心分離得濕粉，母液效價(jià)< 2000 μ /ml。
[0025](5)干燥:濕粉放入真空干燥機(jī)，真空度彡0.080Mpa，夾層起始溫度彡30°C，冷抽時(shí)間90?120min，真空干燥機(jī)內(nèi)溫度30?75°C干燥12h。總收率:80?85%。
[0026]對(duì)比實(shí)施例中，螺旋霉素經(jīng)過(guò)萃取、反萃取，所得到的螺旋霉素中仍舊含有大量雜質(zhì)，所得螺旋霉素收率也不高，利用本發(fā)明中的通過(guò)改變磷酸二氫鉀和草酸的用量，然后把螺旋霉素成品重新溶解到磷酸二氫鉀和草酸溶液中，重新結(jié)晶，把螺旋霉素中的雜質(zhì)進(jìn)一步的去除，使得所得螺旋霉素內(nèi)雜質(zhì)大大降低，進(jìn)而提高產(chǎn)品質(zhì)量，最終所得螺旋霉素收率高達(dá)90?95% ;進(jìn)一步的本發(fā)明直接利用螺旋霉素溶解形成螺旋霉溶液進(jìn)行重結(jié)晶，大大增加了螺旋霉素的純度，而且，本發(fā)明工藝流程較為簡(jiǎn)捷，易操作，成本低。
[0027]以上公開(kāi)的僅為本發(fā)明的具體實(shí)施例，但是，本發(fā)明并非局限于此，任何本領(lǐng)域的技術(shù)人員能思之的變化都應(yīng)落入本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【權(quán)利要求】
1.一種重結(jié)晶降低螺旋霉素雜質(zhì)的方法，其特征在于，其包括下述步驟: (1)配制磷酸二氫鉀和草酸的混合溶液:按質(zhì)量溶解量為1.0?1.5%將磷酸二氫鉀溶于水中，然后用草酸調(diào)節(jié)PH值為2?3 ; (2)固體螺旋霉素溶解反應(yīng):按固態(tài)螺旋霉素質(zhì)量溶解量為7X14?1.2X10 5 μ/ml將固態(tài)螺旋霉素投入步驟(I)所得的混合溶液中，保持溫度為25?40°C攪拌溶解； (3)氫氧化鈉溶液反應(yīng):向步驟(2)所得螺旋霉素溶液中加入質(zhì)量濃度為12?15%氫氧化鈉溶液，按升溫速率為35?55 °C /h升溫60?90min，然后保持溫度為50?65 °C下攪拌30?50min進(jìn)行結(jié)晶； (4)離心分離得到濕粉，濕粉重復(fù)步驟(I)、(2)、(3)操作I?3次，再次得到濕粉干燥即可得到低雜質(zhì)螺旋霉素。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述重結(jié)晶降低螺旋霉素雜質(zhì)的方法，其特征在于:步驟(3)中加入氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為9.0?9.4，氫氧化鈉溶液加入時(shí)間為30?50min。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述重結(jié)晶降低螺旋霉素雜質(zhì)的方法，其特征在于:步驟(4)中所述的干燥為保持溫度為30?75°C干燥12h。
【文檔編號(hào)】C07H1/06GK104478973SQ201410704355
【公開(kāi)日】2015年4月1日 申請(qǐng)日期:2014年11月27日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月27日
【發(fā)明者】朱德育, 杜占彬, 宋玉忠, 祝立新, 蘇瑜, 袁崗, 徐俊奇, 趙嚴(yán)博 申請(qǐng)人:天方藥業(yè)有限公司