專(zhuān)利名稱(chēng)：同時(shí)制備異戊酰螺旋霉素Ⅱ和Ⅲ的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種同時(shí)制備高純度異戊酰螺旋霉素Il和異戊酰螺旋霉素 II的方法，具體地說(shuō)，涉及一種采用高速逆流色譜(High-Speed Counter-Current Chromatography, HSCCC)由必特螺旋霉素(Bitespiramycin)原料中同時(shí)分離制備高純度 異戊酰螺旋霉素II和異戊酰螺旋霉素III的方法。
背景技術(shù)：
必特螺旋霉素(Bitespiramycin)是由轉(zhuǎn)基因的螺旋霉素(Spiramycin，SPM)產(chǎn)生 菌發(fā)酵得到的一種主要組分為異戊酰螺旋霉素I、II、III的多組分全新型抗生素，其結(jié)構(gòu) 見(jiàn)如式1所示
權(quán)利要求
1.一種同時(shí)制備高純度異戊酰螺旋霉素II和異戊酰螺旋霉素III的方法，其主要步 驟是以必特螺旋霉素為原料，采用高速逆流色譜法從必特螺旋霉素原料中分離得到目標(biāo) 物；其中，配制高速逆流色譜的固定相和流動(dòng)相的溶劑體系由正己烷、乙酸乙酯、甲醇或 乙醇和水組成，且正己烷、乙酸乙酯、甲醇或乙醇和水的體積比為(1. 4 2.0) (0.1 0. 4) 1.0 (0. 8 1. 7)；所制得的異戊酰螺旋霉素II的純度為90%以上，所制得的異戊酰螺旋霉素III的純度 為96%以上。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，其中形成所用高速逆流色譜的固定相和流 動(dòng)相的溶劑體系由正己烷、乙酸乙酯、乙醇和水組成，且正己烷、乙酸乙酯、乙醇和水的體積 比為2.0 0.2 1.0 1. 2,2.0 0.2 1.0 1.4 或 2.0 0.1 1.0 1.4。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，其中形成所用高速逆流色譜的固定相和流 動(dòng)相的溶劑體系由正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水組成，且正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水的體積 比為1.4 0. 4 1.0 0. 8,1. 5 0. 3 1. 0 1. 7 或 1. 6 0. 4 1. 0 0. 8。
4.如權(quán)利要求1 3中任意一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述的方法包括如下步驟(1)按權(quán)利要求1 3中任意一項(xiàng)所述溶劑比例配制構(gòu)成高速逆流色譜的固定相和流 動(dòng)相；(2)將固定相泵入高速逆流色譜儀內(nèi)直至充滿(mǎn)螺旋管；(3)開(kāi)啟主機(jī)使螺旋管高速轉(zhuǎn)動(dòng)，同時(shí)泵入流動(dòng)相；(4)待螺旋管內(nèi)建立動(dòng)態(tài)平衡后，將必特螺旋霉素注入分離體系中；(5)根據(jù)檢測(cè)器譜圖收集流出液，濃縮、干燥或凍干后獲得異戊酰螺旋霉素II和異戊 酰螺旋霉素III ；其中所說(shuō)的檢測(cè)器是紫外檢測(cè)器或蒸發(fā)光散射檢測(cè)器，干燥溫度不高于50°C。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種同時(shí)制備高純度異戊酰螺旋霉素II和異戊酰螺旋霉素III的方法，即以必特螺旋霉素為原料，采用高速逆流色譜方法分離得到異戊酰螺旋霉素II(純度為90％以上)和異戊酰螺旋霉素III(純度為96％以上)目標(biāo)物。其中，高速逆流色譜的固定相和流動(dòng)相均由正己烷、乙酸乙酯、甲醇或乙醇和水組成，且正己烷、乙酸乙酯、甲醇或乙醇和水的體積比為(1.4～2.0)∶(0.1～0.4)∶1.0∶(0.8～1.7)。本發(fā)明具有高效、快速和樣品無(wú)損失等優(yōu)點(diǎn)，且是一種適合于規(guī)模化制備異戊酰螺旋霉素II和III的方法。
文檔編號(hào)C07H17/08GK102127132SQ20101057812
公開(kāi)日2011年7月20日 申請(qǐng)日期2010年12月8日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月8日
發(fā)明者吳艷陽(yáng), 張曉勇, 朱家文, 武斌, 王維娜, 紀(jì)利俊, 陳葵, 顧芨芨 申請(qǐng)人:上海同田生化技術(shù)有限公司, 華東理工大學(xué)