專利名稱：一種從紅茶色素溶液中分離高純度茶黃素的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種生物化學(xué)提取技術(shù)，尤其涉及一種利用大孔樹脂柱層析從紅茶色素溶液中分離高純度茶黃素的方法。
背景技術(shù)：
紅茶色素是茶多酚的氧化產(chǎn)物，是天然色素，目前為食品添加劑和醫(yī)藥中間體。 茶色素主要成分為茶黃素、茶紅素和茶褐素。紅茶色素的獲得一般有體內(nèi)氧化(紅茶加工)、化學(xué)氧化和酶促氧化等幾種方法。茶鮮葉中含有大量的多酚類化合物，占其干重的 18%-36%。鮮葉中多酚主要為兒茶素(黃烷-3-醇)，其占多酚總量的80%左右。在紅茶加工過程中，鮮茶葉的兒茶素在內(nèi)源多酚氧化酶和過氧化物酶的作用下，氧化生成茶黃素和茶紅素，從而形成紅茶“紅湯紅葉”的品質(zhì)特征?；瘜W(xué)氧化主要是利用無機(jī)氧化劑氧化兒茶素制得茶色素?；瘜W(xué)氧化根據(jù)氧化的PH條件可分為堿性氧化(pH>7)和酸性氧化(pH < 7)。化學(xué)法缺乏底物專一性，副產(chǎn)品復(fù)雜，產(chǎn)品純度受到一定限制。體外酶促氧化是利用多酚氧化酶、過氧化物酶等組成的氧化酶體系在體外可控條件下，催化茶浸提液中的多酚類物質(zhì)氧化生成茶色素。茶黃素是多酚物質(zhì)氧化形成的一類能溶于乙酸乙酯的、具有苯駢卓酚酮的化合物的總稱?，F(xiàn)研究表明茶黃素有觀種組分，其中茶黃素(TFl)、茶黃素-3-沒食子酸酯 (TF2A)、茶黃素-3 ‘-沒食子酸酯(TF2B)和茶黃素_3，3 ‘-雙沒食子酸酯OK3)是4種最主要的茶黃素。茶黃素具有良好的醫(yī)藥保健功能，諸如抗氧化、預(yù)防心腦血管疾病、預(yù)防齲齒、防癌抗癌、抗菌抗病毒等，其藥用開發(fā)具有十分廣闊和誘人的前景。另外茶黃素還應(yīng)用于食品著色劑。以往分離高純度的茶黃素以及茶黃素的單體得率低，分離難，所以研究和應(yīng)用均受到了不同程度的制約。分離茶色素混合液中的茶黃素、茶紅素和茶褐素，一般采用柱層析法和高效逆流色譜法，并且沒有采用自動(dòng)分離技術(shù)。茶色素分離技術(shù)是近年來研究的熱點(diǎn)，除了傳統(tǒng)的纖維素層析、硅膠層析、葡聚糖凝膠(Sephadex LH-20)層析等分離方法外，聚酰胺層析和高速逆流色譜等技術(shù)也都引入到這個(gè)領(lǐng)域，并逐漸從小批量的實(shí)驗(yàn)室制備向規(guī)?；墓I(yè)化分離制備深入發(fā)展。但這些方法都存在制備量較小、儀器或填料昂貴等缺點(diǎn)，無法進(jìn)行大批量生產(chǎn)的缺陷。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種從紅茶色素溶液中分離高純度茶黃素的方法，該方法利用大孔樹脂柱的吸附能力和分子篩效應(yīng)，從紅茶色素溶液中分離高純度茶黃素，高效、低耗、環(huán)保。本發(fā)明采用以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)該發(fā)明目的一種從紅茶色素溶液中分離高純度茶黃素的方法，該方法包含如下步驟(1)將大孔樹脂裝柱；
(2)按柱體積50% 150%的上柱量，將紅茶色素溶液上柱，上柱流速2BV/h ；(3)用體積百分比為20% 60%的乙醇進(jìn)行梯度洗脫，洗脫速率為lBV/h、2BV/h 或3BV/h，洗脫體積為2BV 5BV ；(4)收集高純度茶黃素洗脫液；(5)噴霧干燥或冷凍干燥，得到高純度茶黃素。本發(fā)明的有益效果是，由于大孔吸附樹脂法分離化合物具有吸附和分子篩雙重效果，因此，應(yīng)用本發(fā)明的方法，填料價(jià)格較便宜，具有吸附能力強(qiáng)、解吸容易、穩(wěn)定性高、可再生、反復(fù)使用等特點(diǎn)，而且工藝簡(jiǎn)單、能耗較低、操作簡(jiǎn)便、安全，有利于實(shí)現(xiàn)大規(guī)模連續(xù)生產(chǎn)。
具體實(shí)施例方式紅茶色素溶液為紅茶浸提液或茶多酚氧化液，溶液中富含為茶黃素、茶紅素、茶褐素等紅茶色素。高純度茶黃素，茶黃素含量達(dá)80%以上。本發(fā)明利用紅茶色素各組分在一定洗脫條件下對(duì)于大孔樹脂柱的不同的吸附及解析性質(zhì)，進(jìn)行分離。所用大孔樹脂為AB-8， NKA-9，Mitsubishi sp-207中的一種，具有吸附能力強(qiáng)、解吸容易、穩(wěn)定性高、可再生、反復(fù)使用等特點(diǎn)。具體來說，本發(fā)明從紅茶色素溶液中分離高純度茶黃素的方法包含如下步驟a:將大孔樹脂裝柱；b 按柱體積50% 150%的上柱量，將紅茶色素溶液上柱，上柱流速2BV/h (柱體積/小時(shí))；c 用體積百分比為20% 60%的乙醇進(jìn)行梯度洗脫，洗脫速率為lBV/h、2BV/h或 3BV/h，洗脫體積為2BV 5BV ；d 收集高純度茶黃素洗脫液；e 噴霧干燥或冷凍干燥得到高純度茶黃素。下面根據(jù)實(shí)施例詳細(xì)描述本發(fā)明，本發(fā)明的目的和效果將變得更加明顯。實(shí)施例1取1份AB-8，裝柱，柱體積為N(ml)。將紅茶色素溶液上柱，上柱體積為N(ml)。用 20%，30%，40%，50%，60%的乙醇各N (ml)洗脫，洗脫速率為2BV/h。收集洗脫液，冷凍干燥得高純度茶黃素。實(shí)施例2取1份AB-8，裝柱，柱體積為N(ml)。將紅茶色素溶液上柱，上柱體積為0. 6N(ml)。 用20^,40^,60%的乙醇各N(ml)洗脫，洗脫速率為!3BV/h。收集洗脫液，噴霧干燥得高純度茶黃素。實(shí)施例3取1份NKA-9，裝柱，柱體積為N(ml)。將紅茶色素溶液上柱，上柱體積為0. 5N(ml)。 用20%，60%的乙醇各N(ml)洗脫，洗脫速率為2BV/h。收集洗脫液，冷凍干燥得高純度茶黃素。實(shí)施例4取1份Mitsubishi sp-207，裝柱，柱體積為N(ml)。將紅茶色素溶液上柱，上柱體積為1.5N(ml)。用20%，30%，40%，50%，60%的乙醇各0.8N (ml)洗脫，洗脫速率為2BV/ h。收集洗脫液，冷凍干燥得高純度茶黃素。實(shí)施例5取1份Mitsubishi sp-207，裝柱，柱體積為N(ml)。將紅茶色素溶液上柱，上柱體積為1.2N(ml)。用20%，33%，45%，60%的乙醇各N (ml)洗脫，洗脫速率為2BV/h。收集洗脫液，噴霧干燥得高純度茶黃素。上述實(shí)施例用來解釋說明本發(fā)明，而不是對(duì)本發(fā)明進(jìn)行限制，在本發(fā)明的精神和權(quán)利要求的保護(hù)范圍內(nèi)，對(duì)本發(fā)明作出的任何修改和改變，都落入本發(fā)明的保護(hù)范圍。
權(quán)利要求
1.一種從紅茶色素溶液中分離高純度茶黃素的方法，其特征在于，該方法包含如下步驟(1)將大孔樹脂裝柱。(2)按柱體積50% 150%的上柱量，將紅茶色素溶液上柱，上柱流速2BV/h。(3)用體積百分比為20% 60%的乙醇進(jìn)行梯度洗脫，洗脫速率為lBV/h、2BV/h或 3BV/h，洗脫體積為2BV 5BV。(4)收集高純度茶黃素洗脫液。(5)噴霧干燥或冷凍干燥，得到高純度茶黃素。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述從紅茶色素溶液中分離高純度茶黃素的方法，其特征在于，所述步驟(1)中，所述大孔樹脂為AB-8、NKA-9或Mitsubishi sp-207。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種從紅茶色素溶液中分離高純度茶黃素的方法，以紅茶浸提或茶多酚氧化所得紅茶色素溶液為原料，以AB-8或NKA-9或Mitsubishisp-207等大孔樹脂為分離介質(zhì)，以乙醇水溶液為洗脫溶液，分離得到高純度茶黃素；本發(fā)明的方法工藝簡(jiǎn)單、能耗較低、操作簡(jiǎn)便、安全，有利于實(shí)現(xiàn)大規(guī)模連續(xù)生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C07D311/62GK102229591SQ20101057759
公開日2011年11月2日 申請(qǐng)日期2010年12月3日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月3日
發(fā)明者屠幼英 申請(qǐng)人:杭州英仕利生物科技有限公司