免疫核糖核酸組合物凍干粉針的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種免疫核糖核酸組合物凍干粉針，涉及藥品及藥品制造【技術(shù)領(lǐng)域】，包含以下重量份原料成分：免疫核糖核酸100g～500g，殼聚糖納米粒20g～100g，10mmol/L的硫酸鈉1000mL，海藻糖100g～500g，注射用水1000mL。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是：（1）此發(fā)明為臨床開發(fā)的藥物新制劑；（2）靶向制劑，延長藥物吸收的有效時(shí)間，降低給藥量；（3）見效快，在特定吸收部位藥物濃度高，提高生物利用度和療效；（4）毒副作用小、使用安全、療效確切、質(zhì)量可控；(5)劑量準(zhǔn)確、使用方便。
【專利說明】免疫核糖核酸組合物凍干粉針
【技術(shù)領(lǐng)域】:
[0001]本發(fā)明涉及藥品及藥品制造【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其涉及一種免疫核糖核酸組合物凍干粉針。
【背景技術(shù)】:
[0002]免疫核糖核酸，又名免疫增強(qiáng)劑，主要用于惡性腫瘤如腎癌、肺癌、消化道癌及神經(jīng)母細(xì)胞瘤和骨肉瘤等的輔助治療，也曾試用于慢性乙型肝炎和流行性乙腦，可使部分細(xì)胞免疫功能低下的病人恢復(fù)正常，除直接可用于臨床藥物外，核糖核酸還是其它許多藥物的前體，經(jīng)過加工、修飾、改造可直接作用于靶細(xì)胞，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，能與靶細(xì)胞的RNA或DNA雜交。與DNA結(jié)合可抑制DNA的復(fù)制，達(dá)到阻止靶細(xì)胞增殖的目的；與mRNA相結(jié)合，可阻斷蛋白質(zhì)的合成，干擾基因的正常表達(dá)，從基因水平上控制腫瘤或病毒的繁殖與擴(kuò)散，達(dá)到治療疾病的目的。
[0003]免疫核糖核酸(Immune RNA，iRNA)是動(dòng)物體內(nèi)一種具有轉(zhuǎn)移免疫性功能的生物大分子，是一種重要的免疫觸發(fā)劑或免疫調(diào)節(jié)劑。1967年Alexander通過用肉瘤免疫綿羊制取的淋巴細(xì)胞核糖核酸對(duì)大鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)核糖核酸能抑制大鼠同一腫瘤的生長，甚至消除，首次證實(shí)了免疫核糖核酸能傳遞免疫信息，1982年林單坤等人把從免疫羊肝中提取得到的免疫核糖核酸做成制劑注入體內(nèi)，發(fā)現(xiàn)對(duì)腫瘤與癌癥有明顯的療效并能提高機(jī)體的免疫功能，而且未出現(xiàn)不良的副作用；作為臨床藥物，只要能解決好其在體內(nèi)的運(yùn)載及透膜能力，藥物在細(xì)胞內(nèi)的穩(wěn)定性、親和力等問題，其應(yīng)用前景十分誘人。
[0004]殼聚糖又稱可溶性甲殼素、甲殼胺，由蟹、蝦等水產(chǎn)加工廢棄物提取精制甲殼素后經(jīng)過脫乙?；迫?，是天然多糖中唯一的堿性多糖，具有許多獨(dú)特的物理化學(xué)特性和生物功能。殼聚糖無毒、來源豐富、有良好生物相容性及生物可降解性。近年來，隨著新型藥物給藥系統(tǒng)的發(fā)展，殼聚糖作為一種新輔料取得了良好的效果，尤其是在藥物控釋、緩釋、靶向智能釋藥中的應(yīng)用受到廣泛關(guān)注。殼聚糖在酸性條件下膨脹形成凝膠，結(jié)構(gòu)中游離氨基結(jié)合氫離子成為帶正電荷的多聚物，能成為核酸分子的載體材料，與帶有負(fù)電荷的RNA分子形成納米復(fù)合物，目前文獻(xiàn)報(bào)道的殼聚糖載體藥物粒徑均較大，藥物包封率和含量均較低。

【發(fā)明內(nèi)容】
:
[0005]本發(fā)明經(jīng)過試驗(yàn)摸索，研制成可以靶向給藥、易于攜帶和運(yùn)輸、臨床使用方便的免疫核糖核酸組合物的凍干乳劑，降低臨床給藥劑量，保證了臨床用藥的安全性。
[0006]本發(fā)明所述的免疫核糖核酸組合物為凍干乳劑，包括以下組分:免疫核糖核酸，殼聚糖納米粒、海藻糖，其中海藻糖用于凍干時(shí)保護(hù)殼聚糖納米粒，pH調(diào)節(jié)劑為氫氧化鈉，免疫核糖核酸與殼聚糖的比重為1:0.2~1:0.5。
[0007]一種免疫核糖核酸組合物凍干粉針，其特征在于，包含以下重量份原料成分:
[0008]免疫核糖核酸l()0g~500g
殼聚糖納米粒20g~100g
10mmol/L 的硫酸鈉1000mL
海藻糖K)()g~5()0g
注射用水1000mU
[0009]一種免疫核糖核酸組合物凍干粉針的制備方法，其特征在于，包括如下步驟:
[0010](一)殼聚糖納米粒的制備:
[0011](I)將殼聚糖粉末粉碎后經(jīng)過100目篩網(wǎng)過篩；
[0012](2)稱取上述過100目篩網(wǎng)的殼聚糖粉末100g，室溫下加入0.lmol/L乙酸溶液40L，磁力攪拌，使殼聚糖完全溶解，得殼聚糖乙酸溶液；
[0013](3 )用 l%Na0H 調(diào)節(jié) ρΗ=5.0 ；
[0014](4)攪拌下加入1%三聚磷酸鈉1667g至殼聚糖乙酸溶液中，得膠體溶液，使殼聚糖/三聚磷酸鈉質(zhì)量比為6: 1，通過陰陽離子的靜電作用交聯(lián)成納米粒；
[0015](5)將上述膠體溶液4°C高速離心30min，收集下層沉淀，用純水洗滌3次后，冷卻并置減壓干燥箱中干燥得到殼聚糖納米粒，水分低于2%，粒徑< lOOnm，zeta電位約為15mv ；
[0016](二)免疫核糖核酸組合物凍干粉針的制備:
[0017](I)依照上述處方比例稱取免疫核糖核酸100g~500g，緩慢加入1000mL的50 V~70 °C注射用水，60 V條件下攪拌至溶解并用醋酸調(diào)節(jié)pH至4~6，然后加入0.05%~
0.15%的活性炭攪拌30min，濾除活性炭，藥液再經(jīng)0.45 μ m和0.22 μ m微孔濾膜過濾；
[0018](2)將配制的10mmol/L的硫酸鈉溶液1000mL,加入殼聚糖納米粒20g~100g和海藻糖100g~500g,保溫20min,混合兩組溶液,繼續(xù)攪拌20min ；
[0019](3)按每瓶2mL裝入5mL西林瓶中，半壓塞后送入冷凍干燥機(jī)中，降溫至-40°C ±2°C，保溫2h~4h，然后抽真空至冷凍干燥箱壓強(qiáng)低于20Pa，然后緩慢升溫至-25°C ±2°C升華干燥，保溫6~8h，升溫至25°C~30°C，保溫3h，冷凍干燥結(jié)束，出箱。
[0020]本發(fā)明的有益效果為:
[0021]本發(fā)明提供一種粒徑極小的殼聚糖納米粒與免疫核糖核酸的組合物凍干粉針，殼聚糖納米粒是一種粒徑小于IOOnm的微粒，以它作為藥物載體粒子，連接免疫核糖核酸，從而實(shí)現(xiàn)癌細(xì)胞特異性識(shí)別，進(jìn)行靶向和緩控釋作用。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是:(1)此發(fā)明為臨床開發(fā)的藥物新制劑；(2)靶向制劑，延長藥物吸收的有效時(shí)間，降低給藥量；(3)見效快，在特定吸收部位藥物濃度高，提高生物利用度和療效；(4)毒副作用小、使用安全、療效確切、質(zhì)量可控；(5)劑量準(zhǔn)確、使用方便。
【具體實(shí)施方式】:
[0022]下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作詳細(xì)說明，但本發(fā)明的范圍非限于這些實(shí)施例的范圍。
[0023]實(shí)施例1免疫核糖核酸組合物凍干粉針的制備(以1000支)[0024]1.處方
[0025]
免疫核糖核酸100g
殼聚糖納米粒20g
硫酸鈉適量
海藻糖100g
注射川水2000mL
[0026]2.制備工藝
[0027](I)依照上述處方比例稱取免疫核糖核酸100g，緩慢加入1000mL的60°C注射用水，邊加入邊攪拌至溶解并用醋酸調(diào)節(jié)pH至5.5，然后加入0.05%的活性炭攪拌30min，濾除活性炭，藥液再經(jīng)0.45 μ m和0.22 μ m微孔濾膜過濾；
[0028](2)采用同樣注射用水配制10mmol/L的硫酸鈉溶液1000mL,加入殼聚糖納米粒20g和海藻糖100g,保溫20min,混合兩組溶液,繼續(xù)攪拌20min。
[0029](3)按每瓶2mL裝入5mL西林瓶中，半壓塞后送入冷凍干燥機(jī)中，降溫至-40°C ±2°C，保溫3h，然后抽真空至冷凍干燥箱壓強(qiáng)低于20Pa，然后緩慢升溫至-25°C ±2°C升華干燥，保溫6h，升溫至25°C~30°C，`保溫3h，冷凍干燥結(jié)束，出箱。
[0030]實(shí)施例2免疫核糖核酸組合物凍干粉針的制備(以1000支)
[0031]1.處方
[0032]
免疫核糖核酸300g
殼聚糖納米粒60g
硫酸鈉適量
海藻糖300g
注射川水2()00mL
[0033]2.制備工藝
[0034](I)依照上述處方比例稱取免疫核糖核酸300g，緩慢加入1000mL的60°C注射用水，邊加入邊攪拌至溶解并用醋酸調(diào)節(jié)pH至5.5，然后加入0.05%的活性炭攪拌30min，濾除活性炭，藥液再經(jīng)0.45 μ m和0.22 μ m微孔濾膜過濾；
[0035](2)采用同樣注射用水配制10mmol/L的硫酸鈉溶液1000mL,加入殼聚糖納米粒60g和海藻糖300g,保溫20min,混合兩組溶液,繼續(xù)攪拌20min。
[0036](3)按每瓶2mL裝入5mL西林瓶中，半壓塞后送入冷凍干燥機(jī)中，降溫至-40°C ±2°C，保溫3h，然后抽真空至冷凍干燥箱壓強(qiáng)低于20Pa，然后緩慢升溫至-25°C ±2°C升華干燥，保溫7h，升溫至25°C~30°C，保溫3h，冷凍干燥結(jié)束，出箱
[0037]實(shí)施例3免疫核糖核酸組合物凍干粉針的制備(以1000支)
[0038]1.處方
[0039]
【權(quán)利要求】
1.一種免疫核糖核酸組合物凍干粉針，其特征在于，包含以下重量份原料成分:免疫核糖核酸100g~500g殼聚糖納米粒20g~100g.10mmol/L 的硫酸鈉1000mL海藻糖100g~500g注射川水lOOOmL.
2.—種權(quán)利要求1所述免疫核糖核酸組合物凍干粉針的制備方法，其特征在于，包括如下步驟: (一)殼聚糖納米粒的制備: (1)將殼聚糖粉末粉碎后經(jīng)過100目篩網(wǎng)過篩； (2)稱取上述過100目篩網(wǎng)的殼聚糖粉末100g，室溫下加入0.lmol/L乙酸溶液40L，磁力攪拌，使殼聚糖完全溶解，得殼聚糖乙酸溶液；
(3)用l%NaOH 調(diào)節(jié) pH=5.0 ； (4)攪拌下加入1%三聚磷酸鈉1667g至殼聚糖乙酸溶液中，得膠體溶液，使殼聚糖/三聚磷酸鈉質(zhì)量比為6:1， 通過陰陽離子的靜電作用交聯(lián)成納米粒； (5)將上述膠體溶液4°C高速離心30min，收集下層沉淀，用純水洗滌3次后，冷卻并置減壓干燥箱中干燥得到殼聚糖納米粒，水分低于2%,粒徑< lOOnm, zeta電位約為15mv ； (二)免疫核糖核酸組合物凍干粉針的制備: (1)依照上述處方比例稱取免疫核糖核酸100g~500g，緩慢加入1000mL的50°C~70°C注射用水，60°C條件下攪拌至溶解并用醋酸調(diào)節(jié)pH至4~6，然后加入0.05%~0.15%的活性炭攪拌30min，濾除活性炭，藥液再經(jīng)0.45 μ m和0.22 μ m微孔濾膜過濾； (2)將配制的10mmol/L的硫酸鈉溶液1000mL,加入殼聚糖納米粒20g~100g和海藻糖100g~500g,保溫20min,混合兩組溶液,繼續(xù)攪拌20min ； (3)按每瓶2mL裝入5mL西林瓶中，半壓塞后送入冷凍干燥機(jī)中，降溫至_40°C±2°C，保溫2h~4h，然后抽真空至冷凍干燥箱壓強(qiáng)低于20Pa，然后緩慢升溫至-25V ±2°C升華干燥，保溫6~8h，升溫至25°C~30°C，保溫3h，冷凍干燥結(jié)束，出箱。
【文檔編號(hào)】A61K9/19GK103536553SQ201310481656
【公開日】2014年1月29日 申請(qǐng)日期:2013年10月15日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月15日
【發(fā)明者】汪六一, 汪金燦, 郝結(jié)兵 申請(qǐng)人:海南衛(wèi)康制藥(潛山)有限公司