一種快速檢測高粱中塑化劑的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種快速檢測高粱中塑化劑的方法，包括對高粱樣品進行預處理得樣品待測液，利用GC?MS對所述樣品待測液進行檢測；所述預處理步驟包括：1)將均質(zhì)后的高粱樣品懸浮于水中，調(diào)節(jié)pH至6?8，浸泡后向其中加入與所述水等體積的乙腈，渦旋振蕩；添加無水硫酸鎂、氯化鈉，離心，取上清液為提取液；2)取所得提取液，依次加入無水硫酸鎂、PSA、C18，渦旋振蕩，離心，取上清液即為樣品待測液。實驗表明，本方法對14種鄰苯二甲酸酯類塑化劑的分離效果良好，操作簡單、準確性高，可有效解決高粱樣品中脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和色素等復雜基質(zhì)的干擾，顯著提高檢測精度，適用于高粱中鄰苯二甲酸酯類化合物的定性、定量以及日常篩查。
【專利說明】
一種快速檢測高粱中塑化劑的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于食品安全檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種快速檢測高粱中塑化劑的方 法。
【背景技術(shù)】
[0002] 白酒是我國獨有的蒸餾酒，目前有十二大香型，其傳統(tǒng)釀造工藝遵循：以高粱、玉 米、糯米等谷物為原料，大曲、小曲或麩曲為糖化發(fā)酵劑，經(jīng)蒸煮、糖化、發(fā)酵、蒸餾而成，具 有"多糧、多微、自然發(fā)酵"的特點，因此，在生產(chǎn)過程中往往容易形成或由環(huán)境迀移、溶入多 種不確定性化學污染物，特別是環(huán)境雌激素類物質(zhì)。
[0003] 鄰苯二甲酸酯類塑化劑(Phthalate Esters，PAEs)是一類具有類似雌激素作用的 環(huán)境激素，具有慢性生殖毒性，因此包括白酒在內(nèi)的所有食品生產(chǎn)中，PAEs塑化劑是被嚴格 禁止添加的。但自2012年在酒鬼酒中檢測出鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)等3種PAEs塑化劑，其 含量超過國家標準，加強對白酒中塑化劑污染的監(jiān)測與控制成為了高度重視的焦點。
[0004] 目前可造成白酒塑化劑污染的迀移途徑主要包括釀酒原料、生產(chǎn)或加工環(huán)節(jié)中迀 移，以及塑料包裝材料這三個方面。目前大量文獻研究表明在釀酒過程中造成PAEs污染的 主要來源于塑料盛酒桶、塑料運酒管、酒栗進出乳膠管、封酒缸塑料膜等，同時通過對白酒 中的"塑化劑"事件的多角度分析，得出包裝材料也是造成白酒塑化劑污染的重要原因之 〇
[0005] 高粱作為一種高淀粉，蛋白質(zhì)，脂質(zhì)和單寧含量的谷物，早在中唐時期便作為主要 原料參與到白酒的釀造中。為了保證其質(zhì)量和高產(chǎn)量，在種植的過程中會使用到塑料膜。由 于塑化劑在乙醇中有很好的溶解性，一旦高粱吸收了環(huán)境中的塑化劑或被含有塑化劑的材 料污染，難免會隨著后期的釀造、蒸餾等環(huán)節(jié)進入白酒中，造成白酒中鄰苯二甲酸酯類塑化 劑的污染。由于高粱是一種富含脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和色素等多種基質(zhì)的混合物，因此應用直接溶 劑萃取法往往很難從中提取、富集、萃取和檢測PAEs。
[0006] QuEChERS方法是2003年4仙8七&881&(168和1^11(^&7開發(fā)的一種簡單、快速的農(nóng)藥殘 留分析的分散固相萃取前處理方法，即快速（Quick)、簡單（Easy)、便宜（Cheap)、高效 (Effective)、穩(wěn)定(Rugged)和安全(Safe)。該方法是采用分散固相萃取凈化法，將固相萃 取吸附劑的顆粒分散到樣品萃取液中，進行固相萃取的技術(shù)。其包括萃取和凈化兩部分。He 等研究者指出QuEChERS方法常用來檢測含水量大于75%的水果蔬菜樣品，但對于含水量低 于25%和高脂肪酸含量的谷物類，仍需要通過加水、優(yōu)化萃取溶劑體積、萃取時間等條件優(yōu) 化QuEChERS方法。Yin等研究者應用優(yōu)化的QuEChERS方法結(jié)合GC-MS/MS，對茶葉中16種PAEs 進行檢測，其依次使用乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)、石墨化碳黑（GCB)和無水硫酸鎂進行凈 化，該方法回收率在84.7%-112.7%，檢出限達到0 ? 6-36 ? Oppb，定量限達到2 ? 0-120 ? Oppb， 有效解決了茶葉中色素等復雜基質(zhì)干擾的影響。
[0007] 因高粱樣品中脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和色素等復雜基質(zhì)對檢測存在干擾，影響檢測精度。因 此，建立一種快速高效準確簡便的高粱中塑化劑的檢測方法是非常有必要的。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 為解決現(xiàn)有技術(shù)缺陷，本發(fā)明目的在于提供一種快速檢測高粱中塑化劑的方法。 本發(fā)明以QuEChERS作為前處理方法，利用GC-MS作為分析檢測手段，可有效解決高粱樣品中 脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和色素等復雜基質(zhì)的干擾，檢出限（S/N>3)可達到0.1-2.5yg/L之間，定量限為 0.13-5.Oyg/Lo
[0009] 本發(fā)明技術(shù)方案如下：
[0010] -種快速檢測高粱中塑化劑的方法，該方法包括對待測高粱樣品進行預處理得樣 品待測液，以及利用GC-MS對所述樣品待測液進行檢測的步驟;其中，所述預處理包括：
[0011] 1)提取:將均質(zhì)后的待測高粱樣品懸浮于水中，調(diào)節(jié)pH至6-8,浸泡后向其中加入 與所述水等體積的乙腈，渦旋振蕩；添加無水硫酸鎂、氯化鈉，離心后取上清液，即為提取 液；
[0012] 2)凈化:向所述提取液中依次加入無水硫酸鎂、PSA(即N-丙基乙二胺）、C18(即C18 烷基-硅膠），渦旋振蕩，離心，取上清液即為樣品待測液。
[0013] 上述方法步驟1)提取過程中，
[0014] 優(yōu)選地，所述均質(zhì)后的高粱樣品的粒徑為10-20目。研究發(fā)現(xiàn)在此粒徑范圍更有利 于提取出塑化劑，且接近于工業(yè)化生產(chǎn)過程(如生產(chǎn)高粱酒）；
[0015] 優(yōu)選地，所述高粱樣品與水的用量以g/ml計比為1:2-4,優(yōu)選為1:2;即將每lg高粱 樣品懸浮于2-4mL水(優(yōu)選為2mL)中；研究發(fā)現(xiàn)在此加水量范圍更有利于提取出塑化劑；
[0016] 優(yōu)選地，所述浸泡時間為10-15min;
[0017]優(yōu)選地，所述禍旋振蕩時間為2-5min;進一步優(yōu)選為2min;
[0018] 優(yōu)選地，所述離心溫度為20-25°C，離心轉(zhuǎn)速為8000-10000rpm，離心時間為3-5min；
[0019] 優(yōu)選地，所述高粱樣品與無水硫酸鎂、氯化鈉的重量比分別為1:1-2，1:0.5-1。
[0020] 上述方法步驟2)凈化過程中：
[0021] 所述提取液中無水硫酸鎂、PSA、C18的加入量分別為100-150mg/mL、50-100mg/mL、 50-100mg/mL;優(yōu)選地，所述提取液中PSA、C18的加入量分別為50mg/mL。
[0022]優(yōu)選地，所述渦旋振蕩時間為1 _2min。
[0023] 優(yōu)選地，所述離心溫度為20-25°C，離心轉(zhuǎn)速為8000-10000rpm，離心時間為3-5min〇
[0024] 本發(fā)明所述pH調(diào)節(jié)劑包括HC1和NaOH等;例如lmol/L的HC1和lmol/L的NaOH。
[0025] 本發(fā)明方法既可實現(xiàn)對高粱樣品中塑化劑定性檢測，也可實現(xiàn)定量檢測。
[0026] 其中所述定性檢測包括，將所述樣品待測液的GC-MS色譜圖與塑化劑的GC-MS色譜 圖進行比較，以判斷高粱樣品中是否含有塑化劑；即若所述樣品待測液中未檢測到塑化劑， 則判斷高粱樣品中無塑化劑；即若所述樣品待測液中檢測到塑化劑，則判斷高粱樣品中有 塑化劑。
[0027] 若檢測到所述樣品待測液(或高粱樣品）中有塑化劑，則繼續(xù)進行定量檢測，即：使 用GC-MS法，通過與塑化劑標準溶液對比，定量檢測塑化劑含量。
[0028] 本發(fā)明所述GC-MS法即氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法，可采用本領(lǐng)域常用氣相色譜-質(zhì)譜 聯(lián)用儀。
[0029] 具體地，本發(fā)明所述塑化劑包括如下14種：鄰苯二甲酸二甲酯、鄰苯二甲酸二乙 酯、鄰苯二甲酸二丙酯、鄰苯二甲酸二異丁酯、鄰苯二甲酸二丁酯、鄰苯二甲酸二（2-甲氧 基）乙酯、鄰苯二甲酸(4-甲基-2-戊基)酯、鄰苯二甲酸二(2-乙氧基）乙酯、鄰苯二甲酸二戊 酯、鄰苯二甲酸二己酯、鄰苯二甲酸丁基芐基酯、鄰苯二甲酸二環(huán)己酯、鄰苯二甲酸二(2-乙 基）己酯、鄰苯二甲酸二正辛酯。本發(fā)明所述各塑化劑標準品均可以從市場上購買得到。上 述塑化劑中文名稱與英文縮寫見表2。
[0030] 具體地，本發(fā)明所述快速檢測高粱中塑化劑的方法，該方法包括如下步驟：
[0031] S1高粱樣品的預處理
[0032] 1)提取:將均質(zhì)后的高粱樣品lg(粒徑為10-20目）懸浮于2-4mL水中，調(diào)節(jié)pH至6-8，浸泡10_15min后，向其中加入與所述水等體積的乙腈，禍旋振蕩2-5min;添加無水硫酸鎂 1.0-2.0g，氯化鈉0.5-1.0g，離心8000rpm，3-5min;離心后取上清液即為提取液；
[0033] 2)凈化:取所述提取液l-2mL，依次加入無水硫酸鎂100-150mg，PSA50-100mg，C18 50-100mg，禍旋振蕩l-2min，離心8000rpm，3-5min;離心后取上清液即為樣品待測液；
[0034] S2定性檢測
[0035]取上述14種塑化劑標準品，用乙腈配制成混合標準溶液;分別取上述樣品待測液 和上述混合標準溶液進行GC-MS分析，將所得樣品待測液的GC-MS色譜圖與塑化劑的GC-MS 色譜圖進行比較，判斷高粱樣品中是否含有塑化劑；
[0036] S3定量檢測
[0037] 若檢測到所述樣品待測液(或高粱樣品）中有塑化劑，則繼續(xù)進行定量檢測：根據(jù) 步驟S2所得塑化劑的GC-MS色譜圖，以塑化劑質(zhì)量濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，得到14 種塑化劑的標準曲線；
[0038] 根據(jù)步驟S2所得樣品待測液的GC-MS色譜圖和所述14種塑化劑的標準曲線計算不 同塑化劑的含量。
[0039]其中，所述混合標準溶液的制備方法包括稱取上述14種塑化劑標準品各100mg于 100mL容量瓶中用乙腈定容。
[0040] 所述標準曲線的繪制方法包括將所述混合標準溶液用乙腈稀釋至濃度分別為 5.0，50.0，125.0，250.0，500.0yg/L的系列混合標準溶液(此處濃度是指混合標準溶液中每 一種塑化劑的濃度）；進行GC-MS分析得到色譜圖，以塑化劑質(zhì)量濃度為橫坐標，峰面積為縱 坐標，得到14種塑化劑的標準曲線。
[0041] 14種鄰苯二甲酸酯類塑化劑(PAEs)的標準曲線，線性范圍，檢出限以及定量限如 下表1所示。
[0042] 表1 14種鄰苯二甲酸酯類塑化劑的標準曲線，線性范圍，檢出限以及定量限
[0044] 上表中，y表示色譜圖中待測化合物的峰面積，x待測化合物的質(zhì)量濃度，R2表示線 性關(guān)系。
[0045] 本發(fā)明所述樣品待測液中塑化劑的含量計算公式如下：
[0046 ] 卿口=細測觸/細觀X _觀！
[0047] nffis:表示樣品待測液中塑化劑的含量;財承隹g:表示標準品的塑化劑含量;A待uf錦i :表 示色譜圖中待測化合物的峰面積;Asms:表示色譜圖中標準品所測得的峰面積。
[0048] 本發(fā)明所述GC-MS檢測采用S頂掃描模式。
[0049] 優(yōu)選地，本發(fā)明所述GC-MS檢測條件如下：
[0050]色譜條件：色譜柱:HP-5MS石英毛細管柱;載氣：氦氣;流速1. OmL/min;升溫程序： 初始柱溫60°C，保持lmin，以20°C/min升至220°C，保持5min，再以5°C/min升至280°C，最后 以 10°C/min升至320°C，保持2min;
[0051 ]質(zhì)譜條件:電離方式:電子轟擊源(EI);監(jiān)測方式:選擇離子掃描模式(SIM)。
[0052] 進一步優(yōu)選地，本發(fā)明所述GC-MS檢測條件如下：
[0053] 色譜條件：色譜柱:HP-5MS石英毛細管柱（30m X 0.25mm X 0.25_);進樣口溫度： 250°C;升溫程序:初始柱溫60°C，保持lmin，以20°C/min升至220°C，保持5min，再以5°C/min 升至280°(：，最后以10°(：/111111升至320°(：，保持2111111 ;載氣：氦氣（純度彡99.999%)，流速 1 .OmL/min;進樣方式:分流進樣;分流比：20:1;進樣量:lyL;
[0054] 質(zhì)譜條件：電離方式：電子轟擊源(EI);監(jiān)測方式:選擇離子掃描模式(SIM);接口 溫度:300°C ;電離子能量:70eV;溶劑延遲:7.5min。
[0055] 本發(fā)明GC-MS檢測過程中，上述14種鄰苯二甲酸酯類塑化劑選擇的定性定量離子 及保留時間如下表2所示(根據(jù)上述500.0yg/L的混合標準溶液GC-MS色譜圖確定的）：
[0056] 表2 14種鄰苯二甲酸酯類塑化劑定性定量選擇離子表
[0059] 本發(fā)明所述的高粱樣品可選自任何地域，包括東北，山東，河北，安徽等。
[0060] 本發(fā)明通過對高粱樣品粉碎粒度、加水量、凈化劑種類以及用量等萃取條件的優(yōu) 化，利用GC-MS作為分析檢測手段，可有效解決檢測干擾等問題，顯著提高檢測精度。與現(xiàn)有 的技術(shù)相比，本發(fā)明的方法操作簡單、準確度高、溶劑時用量小，可有效降低高粱自身所含 有的糖、脂肪酸、色素等復雜基質(zhì)對塑化劑提取的干擾。每個樣品的分析時間僅為32min。另 外，本方法對14種鄰苯二甲酸酯類塑化劑的分離效果良好，檢出限（S/N>3)在0.1-2.5yg/L 之間，定量限為〇.13-5.0邱/1，實際高粱樣品中的回收率85%-114%之間。本發(fā)明適用于高 粱中鄰苯二甲酸酯類化合物塑化劑的定性、定量以及日常篩查。
【附圖說明】
[0061] 圖1為14種鄰苯二甲酸酯類塑化劑標準物質(zhì)的典型GC-MS選擇離子色譜圖（500.0y g/L的混合標準溶液）。
[0062] 圖2為實驗例中萃取溶劑類型對萃取效果的影響圖。
[0063] 圖3為實驗例中萃取方法對萃取效果的影響圖。
[0064] 圖4為實驗例中凈化劑的選擇對萃取效率的影響圖。
[0065] 圖5為實驗例中高粱樣品pH值對萃取效果的影響圖。
[0066] 圖1-5中各塑化劑中文名稱的英文縮寫與表2-致。
【具體實施方式】
[0067] 以下實施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。實施例中未注明具體 技術(shù)或條件者，按照本領(lǐng)域內(nèi)的文獻所描述的技術(shù)或條件，或者按照產(chǎn)品說明書進行。所用 試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可通過正規(guī)渠道商購買得到的常規(guī)產(chǎn)品。
[0068] 實施例1高粱中塑化劑含量的測定 [0069] S1高粱樣品的預處理
[0070]高粱樣品均質(zhì)處理:為了保證此方法更接近于工業(yè)化生產(chǎn)，高粱樣品粉碎后過，選 用10-20目的粉末。
[0071 ] 1)提取:將lg上述高粱樣品懸浮于2mL水中，調(diào)節(jié)pH至6，浸泡10-15min后，向其中 加入與所述水等體積的乙腈(2mL)，禍旋振蕩2min。添加無水硫酸鎂1.0g，氯化鈉0.5g，在20 °C的溫度下，離心8000rpm，3-5min;取上清液即為提取液；
[0072] 2)凈化:取所述提取液lmL，依次加入無水硫酸鎂100mg，PSA 50mg，C18 50mg，渦旋 振蕩2min，在20 °C的溫度下，離心8000rpm，3-5min;取上清液即為樣品待測液，用作GC-MS分 析；
[0073] S2定性檢測
[0074]稱取14種鄰苯二甲酸酯類塑化劑標準品：鄰苯二甲酸二甲酯、鄰苯二甲酸二乙酯、 鄰苯二甲酸二丙酯、鄰苯二甲酸二異丁酯、鄰苯二甲酸二丁酯、鄰苯二甲酸二(2-甲氧基）乙 酯、鄰苯二甲酸(4-甲基-2-戊基)酯、鄰苯二甲酸二(2-乙氧基）乙酯、鄰苯二甲酸二戊酯、鄰 苯二甲酸二己酯、鄰苯二甲酸丁基芐基酯、鄰苯二甲酸二環(huán)己酯、鄰苯二甲酸二(2-乙基）己 酯、鄰苯二甲酸二正辛酯各100mg于100mL容量瓶中用乙腈定容，配制成100mg/L的儲備液， 測定時將標準儲備液用乙腈稀釋至濃度5.0，50.0，125.0，250.0，500yg/L的標準系列溶液 待用(此處濃度是指混合標準溶液中每一種塑化劑的濃度）。
[0075]取上述配制好的500yg/標準溶液進行GC-MS分析，得到色譜圖，根據(jù)色譜圖信息， 選擇鄰苯二甲酸酯類塑化劑的定量和定性離子。14種鄰苯二甲酸酯類塑化劑定性定量選擇 離子如說明書表2及圖1所示。
[0076]將所得樣品待測液的GC-MS色譜圖與上述14種塑化劑的GC-MS色譜圖進行比較，判 斷高粱樣品中是否含有塑化劑。
[0077] S3定量檢測
[0078]若檢測到所述樣品待測液(或高粱樣品）中有塑化劑，則繼續(xù)進行定量檢測：將定 性測定中稀釋好的5.0，50.0，125.0，250.0，500yg/L系列混合標準溶液，根據(jù)確定的14種鄰 苯二甲酸酯類塑化劑定量和定性離子，采用SIM掃描模式，以質(zhì)量濃度為橫坐標，峰面積為 縱坐標，得到14種塑化劑的標準曲線，如說明書表1所示。
[0079]隨機從市場購買不同地域的高粱一斤，按上述步驟S1相同方法預處理后，制得樣 品待測液進行GC-MS分析，在相同SM掃描模式下進行GC-MS分析，得到色譜圖，根據(jù)14種塑 化劑的標準曲線，計算待測樣品中不同塑化劑的含量。檢測結(jié)果如下表3所示。
[0080] GC-MS檢測條件如下：
[0081 ] 色譜條件：色譜柱:HP-5MS石英毛細管柱（30m X 0.25mm X 0.25_);進樣口溫度： 250°C;升溫程序:初始柱溫60°C，保持lmin，以20°C/min升至220°C，保持5min，再以5°C/min 升至280°(：，最后以10°(：/111111升至320°(：，保持2111111;載氣：氦氣（純度彡99.999%)，流速 1 .OmL/min;進樣方式:分流進樣;分流比：20:1;進樣量:lyL;
[0082]質(zhì)譜條件：電離方式：電子轟擊源(EI);監(jiān)測方式:選擇離子掃描模式(SIM);接口 溫度:300°C ;電離子能量:70eV;溶劑延遲:7.5min。
[0083] 表3不同地區(qū)高粱樣品中檢測到的鄰苯二甲酸酯類塑化劑含量
[0085] 上表3括號中的百分數(shù)表示RSD值(即相對標準偏差），例如16.8(8.8%)表示:測得 的含量為16.8yg kg'相對標準偏差為8.8%。
[0086] 實驗例
[0087] 本實驗例對高粱樣品預處理方法進行了優(yōu)化，具體如下。
[0088] 1.1萃取率評價
[0089] 本研究采取回收率(ERs)對萃取效率的有效性進行評價，其計算公式如下：
[0090] ERs = nt〇/ns〇X 100
[0091] m。:樣品中待測化合物的理論濃度
[0092] ns。:萃取溶劑中測得待測化合物的實際濃度
[0093] 1.2加水量的優(yōu)化
[0094]傳統(tǒng)的QuEChERS方法通常是用來萃取含水量大于75%的樣品，但是對于含水量低 于25%，且脂肪酸含量尚的尚梁樣品的處理上，優(yōu)化加水量對提尚實驗的萃取效率起著至 關(guān)重要的作用。采用與實施例1相同的檢測方法，本研究考察了0.5-2.5mL，5種加水量對高 粱樣品中PAEs類塑化劑萃取效能的影響，結(jié)果如圖2所示（圖2中橫坐標表示塑化劑，縱坐標 Recoveries表示回收率）。隨著水量的增加，回收率從66.2-103.9 %小幅度增加至62.9_ 110.5%，隨后降低。因此選擇2.OmL的加水量為最佳條件。
[0095] 1.3萃取溶劑乙腈體積的優(yōu)化
[0096]萃取溶劑乙腈直接影響萃取效率，采用與實施例1相同的檢測方法，本研究考察了 1.0-6. OmL等5個不同溶劑乙腈體積對PAEs的萃取效率的影響。當溶劑體積從1. OmL增加到 6. OmL的過程中，PAEs的回收率呈顯著降低趨勢;為了方便操作和提高重現(xiàn)性，選擇2-4mL作 為最優(yōu)萃取溶劑體積。
[0097] 1.4萃取方法的優(yōu)化
[0098]選擇對目標待測物的不同提取過程，對最終萃取效果的影響顯著。采用與實施例1 相同的檢測方法，本研究考察了渦旋萃取2min，超聲萃取lOmin以及超聲萃取lOmin后渦旋 萃取2min對PAEs萃取率的影響，結(jié)果如圖3所示（圖3中橫坐標表示塑化劑，縱坐標 Recoveries表示回收率），通過渦旋混合器的劇烈振搖2min后，目標待測物在樣品溶液及萃 取溶劑之間迅速達到萃取平衡而達到完全萃取，其回收率最高，達到64.7%-97.1 %。最終 選擇以渦旋萃取2min為最優(yōu)萃取方法。
[0099] 1.5凈化劑方法的優(yōu)化
[0100]對于傳統(tǒng)的QuEChERS方法，PSA主要用來除去有機酸、糖類、色素等雜質(zhì)；C18可以 除去脂類以及非極性化合物對目標待測物的干擾;GCB(即石墨化碳黑)對于色素有較強的 吸附能力。為了有效去除基質(zhì)效應對目標待測物的干擾，采用與實施例1相同的檢測方法， 本研究分別考察了PSA、C18以及GCB，3種凈化劑對PAEs萃取率的影響，結(jié)果如圖4所示。結(jié)果 表明選擇PSA以及C18兩種凈化劑可顯著降低基質(zhì)的干擾，14種PAEs的回收率可達到 63.6%-90.8%。但當加入608后，0從^的回收率顯著降低到38.7%，最終選擇添加?3六、(：18。 [0101] PSA與C18添加量的不同，對最終萃取效果的影響存在差異。采用與實施例1相同的 檢測方法，本研究分別考察了 50-200mg，4個不同添加量對PAEs的萃取效率的影響。結(jié)果表 明，隨著C18添加量的增加，目標待測物的回收率顯著降低，特別對于DPP，DHP，BBP，DCHP， DEHP和DN0P這六種PAEs類塑化劑，其回收率低于60 %。另外對于PSA，當添加量低于50mg時， 14種PAEs類塑化劑的回收率可達到79.3%-95.7 %的范圍。因此最終選擇添加PSA與C18各 5 0 -10 Omg、5 0 -10 Omg為優(yōu)選的凈化方法，以各5 Omg為最優(yōu)的凈化方法。
[0102] 1.6高粱樣品pH值的優(yōu)化
[0103] PAEs屬于酯類化合物，在不同pH條件下可影響其在水相-溶劑相的分配。采用與實 施例1相同的檢測方法，本研究考察了2、4、6、8、10等5個pH條件對萃取率的影響，結(jié)果如圖5 所示，當pH處于堿性條件時，DEHP以及DN0P的回收率僅為77.2%和68.5%。在pH值為6.0的 環(huán)境下，萃取率明顯高于其他pH條件，回收率可達83.7%-109.4%故選擇將水相-溶劑相的 酸堿度調(diào)為6.0作為最優(yōu)pH。
[0104] 雖然，上文中已經(jīng)用一般性說明及具體實施方案對本發(fā)明作了詳盡的描述，但在 本發(fā)明基礎(chǔ)上，可以對之作一些修改或改進，這對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。因 此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎(chǔ)上所做的這些修改或改進，均屬于本發(fā)明要求保護的范圍。
【主權(quán)項】
1. 一種快速檢測高梁中塑化劑的方法，其特征在于，包括對待測高梁樣品進行預處理 得樣品待測液，W及利用GC-MS對所述樣品待測液進行檢測的步驟;其中，所述預處理包括： 1) 提取:將均質(zhì)后的待測高梁樣品懸浮于水中，調(diào)節(jié)pH至6-8,浸泡后向其中加入與所 述水等體積的乙臘，滿旋振蕩;添加無水硫酸儀、氯化鋼，離屯、后取上清液，即為提取液； 2) 凈化：向所述提取液中依次加入無水硫酸儀、PSA、C18,滿旋振蕩，離屯、取上清液即為 樣品待測液。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述塑化劑包括如下14種：鄰苯二甲酸二 甲醋、鄰苯二甲酸二乙醋、鄰苯二甲酸二丙醋、鄰苯二甲酸二異下醋、鄰苯二甲酸二下醋、鄰 苯二甲酸二(2-甲氧基）乙醋、鄰苯二甲酸(4-甲基-2-戊基)醋、鄰苯二甲酸二(2-乙氧基）乙 醋、鄰苯二甲酸二戊醋、鄰苯二甲酸二己醋、鄰苯二甲酸下基芐基醋、鄰苯二甲酸二環(huán)己醋、 鄰苯二甲酸二(2-乙基)己醋、鄰苯二甲酸二正辛醋。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟2)中所述提取液中無水硫酸儀、PSA、 C18的加入量分別為100-150111邑/1111^、50-100111邑/1111^、50-100111邑/1]1]^;優(yōu)選地，所述提取液中？5八、 〇18的加入量分別為5〇111旨/1111^。4. 根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項所述的方法，其特征在于，步驟1)所述高梁樣品的粒徑為 10-20 目。5. 根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項所述的方法，其特征在于，步驟1)所述高梁樣品與水的用量 Wg/ml計比為1:2-4,優(yōu)選為1:2。6. 根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項所述的方法，其特征在于，步驟1)所述滿旋振蕩時間為2- Smin;優(yōu)選為2min。7. 根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項所述的方法，其特征在于，步驟1)中所述高梁樣品與無水硫 酸儀、氯化鋼的重量比分別為1:1-2，1:0.5-1。8. 根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項所述的方法，其特征在于，所述GC-MS檢測條件如下： 色譜條件:色譜柱:HP-5MS石英毛細管柱;載氣：氮氣;流速1. OmL/min;升溫程序:初始 柱溫60°C，保持Imin, W20°C/min升至220°C，保持5min，再W5°C/min升至280°C，最后 WlO °C/min升至320°C，保持2min; 質(zhì)譜條件：電離方式:電子轟擊源;監(jiān)測方式:選擇離子掃描模式； 優(yōu)選地，所述GC-MS檢測過程中，選擇的定性定量離子及保留時間如下所示O9. 根據(jù)權(quán)利要求1-8任一項所述的方法，其特征在于，該方法包括定性檢測，或進一步 還包括定量檢測； 其中所述定性檢測包括，將所述樣品待測液的GC-MS色譜圖與塑化劑的GC-MS色譜圖進 行比較，W判斷高梁樣品中是否含有塑化劑；即若所述樣品待測液中未檢測到塑化劑，則判 斷高梁樣品中無塑化劑；即若所述樣品待測液中檢測到塑化劑，則判斷高梁樣品中有塑化 劑； 所述定量檢測包括使用GC-MS法，通過與塑化劑標準溶液對比，定量檢測塑化劑含量。10. 根據(jù)權(quán)利要求1-9任一項所述的方法，其特征在于，該方法包括如下步驟： Sl高梁樣品的預處理 1) 提取:將均質(zhì)后的高梁樣品Ig懸浮于2-4mL水中，調(diào)節(jié)抑至6-8,浸泡IO-ISmin后，向 其中加入與所述水等體積的乙臘，滿旋振蕩2-5min;添加無水硫酸儀1.0-2. Og，氯化鋼0.5- 1. Og，離屯、8000巧m，3-5min;取上清液即為提取液； 2) 凈化:取所述提取液l-2mL，依次加入無水硫酸儀100-150mg，PSA 50-100mg，C18 50- IOOmg，滿旋振蕩l-2min，離屯、8000巧m，3-5min;取上清液即為樣品待測液； S2定性檢測 取所述14種塑化劑標準品各IOOmg于IOOmL容量瓶中用乙臘定容，制成混合標準溶液； 分別取所述樣品待測液和混合標準溶液進行GC-MS分析，將所得樣品待測液的GC-MS色譜圖 與塑化劑的GC-MS色譜圖進行比較，判斷高梁樣品中是否含有塑化劑； S3定量檢測 若檢測到所述樣品待測液中有塑化劑，則繼續(xù)根據(jù)與所述混合標準溶液進行對比，定 量檢測所述樣品待測液中塑化劑含量； 其中，標準曲線的繪制方法包括將所述混合標準溶液用乙臘稀釋至濃度分別為5.0， 50.0，125.0，250.0，500.0 iig/L的系列混合標準溶液;進行GC-MS分析得到色譜圖，W塑化劑 質(zhì)量濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，得到14種塑化劑的標準曲線。
【文檔編號】G01N30/06GK105911172SQ201610230694
【公開日】2016年8月31日
【申請日】2016年4月14日
【發(fā)明人】孫嘯濤, 孫金沅, 孫寶國, 鄭福平, 黃明泉, 李賀賀, 董蔚
【申請人】北京工商大學