乳化法制備硫酸軟骨素的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種硫酸軟骨素的制備方法,軟骨本發(fā)明公開了一種硫酸軟骨素的制備方法,軟骨加水浸沒,加堿調(diào)pH,加入堿性蛋白酶攪拌,升溫至沸騰,過濾得硫酸軟骨素溶液;向硫酸軟骨素溶液中加入氯化鈉,再加入酒精,靜止,過濾得硫酸軟骨素沉淀;將硫酸軟骨素沉淀加入水中溶解,同時向水中加入氯化鈉,調(diào)pH,加入雙氧水氧化,過濾得濾液;調(diào)節(jié)硫酸軟骨素濾液pH,加入酒精二次沉淀,得硫酸軟骨素沉淀;將二次硫酸軟骨素沉淀倒入裝有乳化機(jī)的脫水罐中,將酒精泵入脫水罐,抽濾,收集沉淀,干燥,得硫酸軟骨素成品。本發(fā)明獲得的硫酸軟骨素質(zhì)地疏松、顆粒細(xì)小、容易脫水和烘干,能耗低,有機(jī)溶劑殘留極低,生產(chǎn)周期短。
【專利說明】乳化法制備硫酸軟骨素
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物【技術(shù)領(lǐng)域】,具體涉及一種硫酸軟骨素的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]硫酸軟骨素是以動物(豬、牛、馬、羊、雞、鯊魚等)的軟骨為原料的一種高分子酸性粘多糖,其分子結(jié)構(gòu)為β-D-葡萄糖醛酸和N-乙酰氨基半乳糖通過β I — 3糖苷鍵形成的重復(fù)二糖單位所組成的多糖鏈。它是一種白色或微黃色粉末,吸水性強,易溶于水而成粘稠液體,不溶于酒精、丙酮、乙醚和氯仿等有機(jī)溶劑,其鹽類對熱較穩(wěn)定。
[0003]目前,硫酸軟骨素通常采用堿-酶解提取法,主要包括以下步驟:
1)堿提酶解:原料軟骨加水浸沒,用氫氧化鈉調(diào)ΡΗ8.5,升溫至55-60°C,保溫4-6小時,然后加入2%的堿性蛋白酶,保持pH8.5,保溫55-60°C攪拌6_8小時,升溫至沸騰15分鐘左右,過濾,得濾液;
2)酒精沉淀:濾液中加入3%重量的氯化鈉,降溫至室溫,按體積的2.5倍加入95%酒精,靜止8小時,取沉淀;
3)氧化:按沉淀:水的重量比為1:10的比例混合水,同時加入3%重量的氯化鈉,調(diào)ρΗΙΟ-12,加入2%重量雙氧水氧化8小時,過濾,取濾液;
4)酒精沉淀干燥:濾液調(diào)pH6,加入體積的2.5倍量酒精第二次沉淀,沉淀再用95%酒精脫水兩次,干燥粉碎得到硫酸軟骨素成品。
[0004]由于硫酸軟骨素溶液比較粘稠,在醇沉?xí)r傳統(tǒng)的做法是將酒精加入到硫酸軟骨素溶液中使硫酸軟骨素結(jié)晶析出沉淀下來,這樣產(chǎn)生的硫酸軟骨素沉淀結(jié)晶體容易結(jié)塊而且粘稠,結(jié)晶體中包含的有機(jī)溶劑在脫水干燥過程中由于顆粒形狀較大且堅硬致密,不容易揮發(fā),致使產(chǎn)品的溶劑殘留偏高,多2%,影響產(chǎn)品質(zhì)量,滿足不了客戶要求。其次由于沉淀結(jié)塊粘稠,使得脫水、烘干、粉碎等操作變得困難,浪費能耗。
[0005]本 申請人:以前提交的一個發(fā)明專利申請,公開了一種反向沉淀生產(chǎn)硫酸軟骨素的方法,經(jīng)沉淀得到的硫酸軟骨素質(zhì)地酥松,容易脫水、烘干,不需要粉碎,且產(chǎn)品的色澤好,質(zhì)量穩(wěn)定,硫酸軟骨素的含量在98%以上,有機(jī)溶劑殘留低于0.2%,但該方法沉淀時間長,影響了產(chǎn)品的生產(chǎn)效率。
[0006]
【發(fā)明內(nèi)容】
本發(fā)明的目的是:提供一種硫酸軟骨素的制備方法,采用該制備方法不僅獲得的硫酸軟骨素沉淀質(zhì)地疏松、顆粒細(xì)小、容易脫水和烘干,產(chǎn)品不需要粉碎,能耗低,產(chǎn)品中有機(jī)溶劑殘留極低,產(chǎn)品質(zhì)量好,而且生產(chǎn)周期短、生產(chǎn)效率高。
[0007]本發(fā)明的技術(shù)解決方案是該制備方法包括下列步驟:
(1)堿提酶解:首先,軟骨原料加水浸沒,用堿調(diào)PH至7-10,升溫至50-70°C,保溫4_6小時;然后,按軟骨原料重量1-3%加入2709堿性蛋白酶,保持PH7-10,保溫50-70°C攪拌6-8小時,升溫至沸騰12-18分鐘,過濾得到硫酸軟骨素溶液;
(2)酒精沉淀:將步驟(I)得到的硫酸軟骨素溶液降至室溫,在攪拌狀態(tài)下,向溶液中加入氯化鈉,使溶液含氯化鈉重量濃度為1_4%,再加入溶液體積2-3倍的重量濃度為90%以上的酒精,靜止6小時以上,過濾得到硫酸軟骨素沉淀;
(3)氧化:將步驟(2)得到的硫酸軟骨素沉淀加入水中溶解,同時向水中加入氯化鈉,使溶液含氯化鈉重量濃度為1_4%、含硫酸軟骨素重量濃度為3-5%,調(diào)pH至9-13,加入溶液重量的1-3%雙氧水或過錳酸鉀氧化6小時以上,過濾得濾液;
(4)沉淀干燥:調(diào)節(jié)步驟(3)得到的硫酸軟骨素濾液pH至4-6,加入濾液體積4-6倍的、重量濃度為90%以上的酒精,進(jìn)行第二次沉淀,棄去上層酒精,得到硫酸軟骨素沉淀;
(5)乳化脫水:將步驟(4)的硫酸軟骨素沉淀倒入裝有乳化機(jī)的脫水罐中,開啟乳化機(jī),將硫酸軟骨素沉淀體積的3-5倍的重量濃度為85%以上的酒精緩慢泵入脫水罐,加料完畢后繼續(xù)乳化0.5-1.5小時,靜止沉淀2-3小時;抽濾棄去酒精,收集沉淀,干燥,即得硫酸軟骨素成品。
[0008]本發(fā)明取得的效果是:1、本發(fā)明將經(jīng)過氧化、酒精第二次沉淀得到的硫酸軟骨素沉淀物直接加入乳化機(jī)中,再緩慢向乳化機(jī)中加入酒精進(jìn)行乳化,乳化結(jié)束后僅需靜止沉淀2-3小時,即可進(jìn)行脫水烘干,乳化作用使粘稠的硫酸軟骨素沉淀在脫水過程中不容易結(jié)塊,質(zhì)地疏松;2、生產(chǎn)周期短,效率高,得到的硫酸軟骨素質(zhì)地酥松、顆粒細(xì)小,容易脫水、烘干,不需要粉碎,節(jié)約能源、生產(chǎn)成本低;3、產(chǎn)品的色澤好,質(zhì)量穩(wěn)定,硫酸軟骨素的含量在98%以上;4、產(chǎn)品的有機(jī)溶劑殘留極少,低于0.2%。
【具體實施方式】
[0009]下面結(jié)合具體實施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的技術(shù)解決方案,這些實施例不能理解為是對技術(shù)解決方案的限制。
[0010]實施例1:依以下步驟制備硫酸軟骨素
(1)堿提酶解:首先,軟骨原料10Kg加水浸沒,用堿調(diào)pH至8,升溫至55°C,保溫6小時;然后,加入lKg2709堿性蛋白酶,保持pH8,保溫55°C攪拌8小時,升溫至沸騰12分鐘,過濾得到硫酸軟骨素溶液500L ;
(2)酒精沉淀:將步驟(I)得到的硫酸軟骨素溶液降至室溫,在攪拌狀態(tài)下,向溶液中加入5Kg氯化鈉,使溶液含氯化鈉重量濃度為1%,再加入溶液體積2倍的重量濃度為90%以上的酒精1000L,靜止6小時以上,過濾得到硫酸軟骨素沉淀;
(3)氧化:將步驟(2)得到的硫酸軟骨素沉淀加入200L水中溶解,同時向水中加入2Kg氯化鈉,使溶液含氯化鈉重量濃度為1%、含硫酸軟骨素重量濃度為3%,調(diào)pH至10,加入溶液重量的1%雙氧水2Kg氧化6小時以上,過濾得濾液;
(4)沉淀干燥:調(diào)節(jié)步驟(3)得到的硫酸軟骨素濾液pH至5,加入濾液體積4倍的、重量濃度為90%以上的酒精,進(jìn)行第二次沉淀,棄去上層酒精,得到硫酸軟骨素沉淀;
(5)乳化脫水:將步驟(4)的硫酸軟骨素沉淀倒入裝有乳化機(jī)的脫水罐中,開啟乳化機(jī),將硫酸軟骨素沉淀體積的3倍的重量濃度為90%以上的酒精緩慢泵入脫水罐,使乳濁液的酒精重量濃度達(dá)到85%,加料完畢后繼續(xù)乳化0.5小時,靜止沉淀2小時;抽濾棄去酒精,收集沉淀,干燥,即得硫酸軟骨素成品。
[0011]實施例2:依以下步驟制備硫酸軟骨素
(I)堿提酶解:首先,軟骨原料10Kg加水浸沒,用堿調(diào)pH至8.5,升溫至58°0,保溫5小時;然后,加入2Kg2709堿性蛋白酶,保持pH8.5,保溫58°C攪拌7小時,升溫至沸騰15分鐘,過濾得到硫酸軟骨素溶液500L ;
(2)酒精沉淀:將步驟(I)得到的硫酸軟骨素溶液降至室溫,在攪拌狀態(tài)下,向溶液中加入13Kg氯化鈉,使溶液含氯化鈉重量濃度為2.5%,再加入溶液體積2.5倍的重量濃度為90%以上的酒精1250L,靜止6小時以上,過濾得到硫酸軟骨素沉淀;
(3)氧化:將步驟(2)得到的硫酸軟骨素沉淀加入200L水中溶解,同時向水中加入5Kg氯化鈉,使溶液含氯化鈉重量濃度為2.5%、含硫酸軟骨素重量濃度為4%,調(diào)pH至11,加入溶液重量的2%過錳酸鉀4Kg氧化6小時以上,過濾得濾液;
(4)沉淀干燥:調(diào)節(jié)步驟(3)得到的硫酸軟骨素濾液pH至5.5,加入濾液體積5倍的、重量濃度為90%以上的酒精,進(jìn)行第二次沉淀,棄去上層酒精,得到硫酸軟骨素沉淀;
(5)乳化脫水:將步驟(4)的硫酸軟骨素沉淀倒入裝有乳化機(jī)的脫水罐中,開啟乳化機(jī),將硫酸軟骨素沉淀體積的4倍的重量濃度為90%以上的酒精緩慢泵入脫水罐,使乳濁液的酒精重量濃度達(dá)到85%,加料完畢后繼續(xù)乳化I小時,靜止沉淀2.5小時;抽濾棄去酒精,收集沉淀,干燥,即得硫酸軟骨素成品。
【權(quán)利要求】
1.硫酸軟骨素的制備方法,其特征在于包括下列步驟: (1)軟骨原料加水浸沒,用堿調(diào)升溫,保溫4-6小時,按軟骨原料重量1%-3%加入2709堿性蛋白酶,攪拌6-8小時,升溫至沸騰12-18分鐘,過濾得到硫酸軟骨素溶液; (2)將步驟(1)得到的硫酸軟骨素溶液降至室溫,在攪拌狀態(tài)下,向溶液中加入氯化鈉,再加入溶液體積2-3倍重量的酒精,靜止6小時以上,過濾得到硫酸軟骨素沉淀; (3)將步驟(2)得到的硫酸軟骨素沉淀加入水中溶解,同時向水中加入氯化鈉,使溶液含氯化鈉重量濃度為1-4%、含硫酸軟骨素重量濃度為3-5%,調(diào)加入溶液重量的1-3%雙氧水或過錳酸鉀氧化6小時以上,過濾得濾液; (4)調(diào)節(jié)步驟(3)得到的硫酸軟骨素濾液加入濾液體積4-6倍的、重量濃度為90%以上的酒精,進(jìn)行第二次沉淀,棄去上層酒精,得到硫酸軟骨素沉淀; (5)將步驟(4)的硫酸軟骨素沉淀倒入裝有乳化機(jī)的脫水罐中,開啟乳化機(jī),將酒精緩慢泵入脫水罐,加料完畢后繼續(xù)乳化0.5-1.5小時,靜止沉淀2-3小時;抽濾棄去酒精,收集沉淀,干燥,即得硫酸軟骨素成品。
2.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(1)中,加堿調(diào)邱至7—10。
3.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(1)中,溶液升溫至50—701。
4.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(3)中,邱調(diào)節(jié)至9一13。
5.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(4)中,調(diào)節(jié)邱至4一6。
6.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(5)的乳濁液含酒精的重量濃度始終保持在85%、或85%以上。
【文檔編號】C08B37/08GK104497169SQ201410792521
【公開日】2015年4月8日 申請日期:2014年12月19日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月19日
【發(fā)明者】劉乃山, 安迪, 劉翠珍 申請人:青島康原藥業(yè)有限公司