一種生產硫酸軟骨素的方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于生物工程領域,公開了一種動物硫酸軟骨素生產工藝,利用動物副產品?軟骨作為原料,首先經熱堿溶解;采用超聲波浸提,提高了提取效率;調酸并采用植物蛋白酶及微生物蛋白酶雙酶解,在提高產品產率的同時,降低了生產成本;經除雜脫色,并用乙醇進一步沉淀,提高了產品純度;最后經離心干燥、粉碎、包裝,即得硫酸軟骨素粉成品。本發(fā)明提供的生產工藝所生產的硫酸軟骨素,具有提取效率高、性質穩(wěn)定、生產時間短、變廢為寶的特點,同時制備了營養(yǎng)飼料,不產生任何廢料,避免了環(huán)境污染,降低了工業(yè)能耗,可應用于工業(yè)化大規(guī)模生產。
【專利說明】
一種生產硫酸軟骨素的方法
技術領域
[0001]本發(fā)明屬于屬于生物工程領域,具體涉及一種以動物為原料生產軟骨素的方法。
【背景技術】
[0002]硫酸軟骨素(Chondroitin sulfate,簡稱Chs)是自哺乳動物氣管等軟骨提取而得的酸性黏多糖。白色粉末,無臭,無味,易吸濕,易溶于水,不溶于乙醇和丙酮等有機溶劑,遇水即膨脹或成黏漿,對熱較不穩(wěn)定。需避光密封保存。軟骨素由D-葡萄糖醛酸和N-乙酰-D-半乳糖胺組成的黏多糖。硫酸軟骨素是軟骨素的硫酸酯,構成結締組織的主要成分。它具有澄清脂質,提高機體解毒功能,利尿和鎮(zhèn)痛等作用。對膠原性疾患十分有效,對由鏈霉素引起的聽覺障礙也有效果。近年來,隨著對其生理功能和生化性質研究的深入,發(fā)現(xiàn)Chs具有抗凝、抗炎、抗血栓、抗癌及降低心肌耗氧量,促進冠狀動脈循環(huán)、降血脂、抗凝血和防止血管硬化等作用;對冠心病、動脈粥樣硬化、心絞痛、心肌缺氧、心肌梗塞等心血管疾病的治療有一定療效;還對神經細胞、粘膜細胞、腎細胞等具有保護作用;還可活化脂解Chs酶,使脂肪降解,因此是防止肥胖有效物質;可與某些物質調制成化妝品用于保護皮膚Chs的健美;還具有保水性、Chs保膠性和高粘性,我國出口到日本、韓國的Chs都被用作食品添加劑。因此Chs是國內外流行的保健品和化妝品以及醫(yī)藥品的重要原料。
[0003]傳統(tǒng)的動物軟骨組織中硫酸軟骨素的提取方法多耗時長、提取工藝復雜,硫酸軟骨素純度低,不利于硫酸軟骨素的產業(yè)化生產;同時,硫酸軟骨素生產過程中,浪費了大量的原料浪費,并且造成了環(huán)境污染。如何有效地提取硫酸軟骨素同時最大限度地利用廢料,是現(xiàn)有技術亟待解決的技術問題。
【發(fā)明內容】
[0004]本發(fā)明的目的是提供一種以動物為原料生產硫酸軟骨素的方法,其有效地提高了硫酸軟骨素的產率,同時利用廢料制備營養(yǎng)飼料,降低了工業(yè)能耗,避免了環(huán)境污染。
[0005]本發(fā)明具體通過如下技術方案實現(xiàn)的:
[0006]I)原料處理
[0007]將檢疫合格的動物鼻骨、喉骨、軟肋、氣管、月牙骨以及各部位的雜軟骨,去除脂肪、結締組織后,自然風干,置于粉碎機中粉碎,過不低于80目網篩,得軟骨粉備用;
[0008]2)熱堿溶解
[0009]將軟骨粉加入到質量百分比濃度為2%?6% NaOH溶液的反應缸中,料液比為I: 4,加熱至80?97°C,攪拌均勻并保持10?30分鐘;
[0010]3)調酸酶解
[0011]將料液泵入另一反應缸中,加入體積百分比濃度為10?20%鹽酸溶液,調節(jié)浸提液pH至5?8,溫度為40?65°C,加入木瓜蛋白酶,酶液重量比為1.5: 1000?
3.0: 1000,同時再加入中性微生物蛋白酶,中性微生物蛋白酶選用枯草芽孢桿菌蛋白酶或地衣芽胞桿菌蛋白酶,酶液重量比為3: 10000?6: 10000,雙酶酶解時間1.0?2.0小時,水解結束后升溫至80?90°C,保持3?6分鐘,滅酶;
[0012]4)乙醇沉淀
[0013]在盛裝含有硫酸軟骨素的濾清液的沉淀缸中,加入氯化鈉,重量比例為濾清液:NaCl = 100: 1.5?100: 4.5,攪拌至溶解,再加入無水乙醇,至沉淀缸濾清液中乙醇體積百分比濃度達到50?80%時,沉淀析出,靜置7?14小時;
[0014]5)烘干干燥
[0015]抽出上清液,將沉淀物收集沉淀于干燥箱中65°C烘干2小時,即得。
[0016]本發(fā)明取得有益效果如下:
[0017]本發(fā)明制備硫酸軟骨素的過程中不產生廢料,避免了環(huán)境污染,降低了工業(yè)能耗,可應用于工業(yè)化生產;
[0018]本發(fā)明制備的硫酸軟骨素純度較高,可達86%,收率可達30%以上。
[0019]本發(fā)明由于大量的蛋白回收,廢水中的BOD和COD大為降低,減輕了污水處理廠的壓力;
【具體實施方式】
[0020]實施例1:
[0021]一種以動物為原料生產硫酸軟骨素的方法,包括如下步驟:
[0022]I)原料處理
[0023]將檢疫合格的動物鼻骨、喉骨、軟肋、氣管、月牙骨以及各部位的雜軟骨,去除脂肪、結締組織后,自然風干,置于粉碎機中粉碎,過不低于80目網篩,得軟骨粉備用;
[0024]2)熱堿溶解
[0025]將軟骨粉加入到質量百分比濃度為2%?6% NaOH溶液的反應缸中,料液比為I: 4,加熱至80?97°C,攪拌均勻并保持10?30分鐘;
[0026]3)調酸酶解
[0027]將料液泵入另一反應缸中,加入體積百分比濃度為10?20%鹽酸溶液,調節(jié)浸提液pH至5?8,溫度為40?65°C,加入木瓜蛋白酶,酶液重量比為1.5: 1000?
3.0: 1000,同時再加入中性微生物蛋白酶,中性微生物蛋白酶選用枯草芽孢桿菌蛋白酶或地衣芽胞桿菌蛋白酶,酶液重量比為3: 10000?6: 10000,雙酶酶解時間1.0?2.0小時,水解結束后升溫至80?90°C,保持3?6分鐘,滅酶;
[0028]4)乙醇沉淀
[0029]在盛裝含有硫酸軟骨素的濾清液的沉淀缸中,加入氯化鈉,重量比例為濾清液:NaCl = 100: 1.5?100: 4.5,攪拌至溶解,再加入無水乙醇,至沉淀缸濾清液中乙醇體積百分比濃度達到50?80%時,沉淀析出,靜置7?14小時;
[0030]5)烘干干燥
[0031]抽出上清液,將沉淀物收集沉淀于干燥箱中65°C烘干2小時,即得。
[0032]經檢測:產率31.9%,外觀為類白色粉末,略帶咸味;無臭,水溶液有粘稠性,加熱不凝結。硫酸軟骨素為90.5%,蛋白質2.1%,氨基己糖33.1%,水分7.2%,澄清度0.04,pH 值 7.2。
[0033]最后,還需要注意的是,以上列舉的僅是本發(fā)明的具體實施例。顯然,本發(fā)明不限于以上實施例,還可以有許多變形。本領域的普通技術人員能從本發(fā)明公開的內容直接導出或聯(lián)想到的所有變形,均應認為是本發(fā)明的保護范圍。
【主權項】
1.一種動物硫酸軟骨素生產工藝,其特征是該生產工藝包括以下步驟: 1)原料處理 將檢疫合格的動物鼻骨、喉骨、軟肋、氣管、月牙骨以及各部位的雜軟骨,去除脂肪、結締組織后,自然風干,置于粉碎機中粉碎,過不低于80目網篩,得軟骨粉備用; 2)熱堿溶解 將軟骨粉加入到質量百分比濃度為2%?6% NaOH溶液的反應缸中,料液比為1: 4,加熱至80?97°C,攪拌均勻并保持10?30分鐘; 3)調酸酶解 將料液泵入另一反應缸中,加入體積百分比濃度為10?20%鹽酸溶液,調節(jié)浸提液pH至5?8,溫度為40?65°C,加入木瓜蛋白酶,酶液重量比為1.5: 1000?3.0: 1000,同時再加入中性微生物蛋白酶,中性微生物蛋白酶選用枯草芽孢桿菌蛋白酶或地衣芽胞桿菌蛋白酶,酶液重量比為3: 10000?6: 10000,雙酶酶解時間1.0?2.0小時,水解結束后升溫至80?90°C,保持3?6分鐘,滅酶; 4)乙醇沉淀 在盛裝含有硫酸軟骨素的濾清液的沉淀缸中,加入氯化鈉,重量比例為濾清液:NaCl=100: 1.5?100: 4.5,攪拌至溶解,再加入無水乙醇,至沉淀缸濾清液中乙醇體積百分比濃度達到50?80%時,沉淀析出,靜置7?14小時; 5)烘干干燥 抽出上清液,將沉淀物收集沉淀于干燥箱中65°C烘干2小時,即得。2.根據權利要求1所述的動物硫酸軟骨素生產工藝,其特征是:所述步驟4)中使用過的乙醇用蒸餾法回收循環(huán)利用。
【文檔編號】C08B37/08GK105884931SQ201410645955
【公開日】2016年8月24日
【申請日】2014年11月5日
【發(fā)明人】管桂義
【申請人】管桂義