本發(fā)明屬于農(nóng)產(chǎn)品深加工領(lǐng)域，特別涉及一種同時(shí)提取多酚和黃酮的方法。

背景技術(shù)：

多酚和黃酮類物質(zhì)具有很強(qiáng)抗腫瘤、抗氧化、抗菌、抗癌、清除自由基和預(yù)防心腦血管疾病等生理活性，是一類值得去開(kāi)發(fā)的天然抗氧化劑。

橄欖在我國(guó)有2000多年的種植歷史，目前主要分布在隴南、福建、廣東、廣西和海南等省份。大量研究表明橄欖中有許多對(duì)人體有益的物質(zhì)，從果肉到果仁對(duì)人體健康都有極大的價(jià)值。目前對(duì)橄欖的利用，主要用于壓榨橄欖油，然而對(duì)于橄欖核、橄欖仁的深度開(kāi)發(fā)利用幾乎空白，例如橄欖核中的橄欖仁紅皮。因此開(kāi)發(fā)一項(xiàng)經(jīng)濟(jì)可行的橄欖紅皮的加工技術(shù)，并在橄欖產(chǎn)業(yè)鏈中加以利用，提高產(chǎn)品的附加值，對(duì)增加農(nóng)民的經(jīng)濟(jì)收入具有重要的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)意義。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明提供了一種同時(shí)提取多酚和黃酮的方法，步驟如下：

(1)橄欖核脫殼后，將紅皮與果仁進(jìn)行分離，并將分離出來(lái)的紅皮進(jìn)行干燥、粉碎，過(guò)篩，

其中，粉碎后過(guò)60目篩；

(2)將步驟(1)得到的過(guò)篩后的紅皮加入到乙醇和水的混合液中，加熱提取后過(guò)濾，收集濾液，

其中，乙醇和水的混合液中，乙醇與水的體積比為3：1，

將紅皮加入到混合液中后，于恒溫水浴振蕩器中在50℃下進(jìn)行提取，提取在攪拌狀態(tài)下進(jìn)行，提取時(shí)間為30min；

(3)將步驟(2)中得到的濾液濃縮、干燥，得到黃酮和多酚，

其中，濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上進(jìn)行脫溶濃縮30min，濃縮液進(jìn)行真空冷凍干燥。

本發(fā)明的有益效果在于：橄欖仁紅皮的多酚和黃酮得率高、純度較高；提取方法操作簡(jiǎn)單、方便快捷、成本低，利于產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。

附圖說(shuō)明

圖1為本發(fā)明實(shí)施例1中，清除率檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的具體結(jié)果。

圖2為本發(fā)明實(shí)施例1中，橄欖仁紅皮提取物的吸收光譜圖。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

(1)橄欖核脫殼后，將紅皮與果仁進(jìn)行分離，并將分離出來(lái)的紅皮室溫(25℃)下自然干燥，粉碎，過(guò)60目篩；

(2)取50g步驟(1)得到的過(guò)篩后的紅皮置于燒杯中，并加入乙醇和水體積比為3：1的混合液500mL，將該燒杯置于50℃恒溫水浴振蕩器中，對(duì)紅皮攪拌提取30min，離心過(guò)濾，收集濾液，

檢測(cè)手段：

將收集到的上述濾液稀釋定容到1000mL，取1mL樣液于干凈的10mL的容量瓶中，加入4mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30％的乙醇水溶液，再加入4mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1％的氯化鋁水溶液，最后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30％的乙醇水溶液定容至10mL，蓋緊，顛倒搖勻。在波長(zhǎng)415nm處，以空白試劑為對(duì)照，測(cè)定吸光度，通過(guò)計(jì)算得知：黃酮的得率為1.5％(所得黃酮相對(duì)于原料紅皮的質(zhì)量百分比)；

或者將收集到的上述濾液稀釋定容到1000mL，取1mL樣液于干凈的10mL的容量瓶中，加入5mL蒸餾水，再加入1mL的福林酚試劑(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)，最后以質(zhì)量濃度為7.5％的碳酸鈉溶液定容至10mL，蓋緊，顛倒搖勻。在波長(zhǎng)765nm處，以空白試劑為對(duì)照，測(cè)定吸光度，通過(guò)計(jì)算得知：多酚的得率為3％(所得多酚相對(duì)于原料紅皮的質(zhì)量百分比)；

(3)將步驟(2)中收集到的濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上進(jìn)行脫溶濃縮30min，濃縮液再進(jìn)行真空冷凍干燥，即得到多酚和黃酮，干燥后的產(chǎn)品中多酚和黃酮的總含量達(dá)40％(黃酮和多酚相對(duì)于干燥后產(chǎn)品的質(zhì)量比)。

取7支10ml的比色管(編號(hào)為1、2、3、4、5、6、7)，分別依次加入0.3mL的7.5mmol/L的硫酸亞鐵銨溶液、0.3ml的7.5mmol/L的鄰二氮菲溶液、1ml pH為7.4的Tris-HCl緩沖溶液，在2、3、4、5、6、7號(hào)比色管中各加入0.2ml的7.5mmol/L的H₂O₂水溶液，然后在3、4、5、6、7號(hào)比色管中分別加入0.3ml的由步驟(3)所得的干燥后的混合物所配成的分散液，濃度依次為1.0μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL、40.0μg/mL，用重蒸水定容至刻度10ml，在37℃的水浴中反應(yīng)1h后，在520nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，根據(jù)下式計(jì)算對(duì)羥自由基(·OH)的清除率：

清除率＝[(OD樣品-OD損)/(OD空白-OD損)]*100％

(式中，“OD樣品”為加入提取液的比色管3、4、5、6、7所檢測(cè)到的吸光度；“OD空白”為未加入H₂O₂水溶液的比色管1所檢測(cè)到的吸光度；“OD損”為加入H₂O₂水溶液的比色管2所檢測(cè)到的吸光度。)

具體清除率計(jì)算結(jié)果請(qǐng)見(jiàn)附圖1，其中，橫坐標(biāo)代表相關(guān)比色管中所加入的步驟(3)干燥物所配成的0.3ml分散液的具體濃度；縱坐標(biāo)代表清除率的百分?jǐn)?shù)?？梢?jiàn)橄欖仁紅皮提取物具有很好的抗氧化活性。

產(chǎn)品的光譜性質(zhì)測(cè)定：

稱取0.01g步驟(3)所得干燥后的橄欖仁紅皮提取物，用體積含量為70％的乙醇水溶液配制成0.10g/L的溶液，以相同的溶劑(體積含量為70％的乙醇水溶液)為參比，在紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)上，進(jìn)行200～800nm范圍內(nèi)的掃描，得到橄欖仁紅皮提取物的吸收光譜圖。

由附圖2可見(jiàn)，在紫外光區(qū)波長(zhǎng)300nm和360nm附近有兩個(gè)較為明顯的吸收峰，為多酚、黃酮的典型吸收峰。