一種亮綠乳酸培養(yǎng)基及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明為微生物領(lǐng)域，特別涉及一種亮綠乳酸培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基的組分包括EC肉湯、2.0g/L牛膽鹽、0.012g/L亮綠、3.0g/L硫酸錳、15.0g/L瓊脂，pH值為7.1-7.3；所述EC肉湯為每升EC肉湯中含有胰蛋白胨20.0g、乳糖10.0g、磷酸二氫鉀2.0g、氯化鈉5.0g、三號膽鹽1.5g、磷酸氫二鉀4.0g，其余為蒸餾水。本發(fā)明培養(yǎng)基組方簡單，制備操作方便，成本低，利于推廣應(yīng)用；菌生長迅速，變異率低；便于觀察，分析。
【專利說明】一種亮綠乳酸培養(yǎng)基及其應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明為微生物領(lǐng)域，特別涉及一種亮綠乳酸培養(yǎng)基及其應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002] 世界上微生物間的多樣化和變異性及物種生境的生態(tài)復(fù)雜性，帶來了探討、了解 微生物的廣泛性、復(fù)雜性和長久性。微生物的一個物種就是一個獨特的基因庫，微生物的新 陳代謝是錯綜復(fù)雜的生命活動，在長期的生物進化中，形成了一套完整統(tǒng)一的靈敏調(diào)節(jié)系 統(tǒng)，依靠這種調(diào)節(jié)系統(tǒng)，嚴格控制各種代謝活動。有條不紊協(xié)調(diào)進行并靈活適應(yīng)環(huán)境。不同 培養(yǎng)基，因培養(yǎng)基配方不同，影響其生長和變異情況。
[0003] 培養(yǎng)基（Medium)是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料， 一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機鹽（包括微量元素）以及維生素和水等。有的培養(yǎng) 基還含有抗菌素和色素，用于單種微生物培養(yǎng)和鑒定。培養(yǎng)基由于配制的原料不同，使用要 求不同，而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后，易被細菌污染或分解變 質(zhì)，因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。對一些需嚴格滅菌的培養(yǎng)基（如組織培 養(yǎng)基），較長時間的貯存，必須放在3?6°C的冰箱內(nèi)。由于液體培養(yǎng)基不易長期保管，現(xiàn)在 均改制成粉末。
[0004] 培養(yǎng)基根據(jù)化學(xué)分類為天然培養(yǎng)基、組合培養(yǎng)基和半組合培養(yǎng)基；根據(jù)物理分類 為液體培養(yǎng)基、固定培養(yǎng)基和脫水培養(yǎng)基；根據(jù)微生物分類為選擇性培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基。
[0005] 目前還不能完全從生化反應(yīng)的基本原理來推斷和計算出適合某一菌種的培養(yǎng)基 配方，只能用生物化學(xué)、細胞生物學(xué)、微生物學(xué)等的基本理論，參照前人所使用的較適合某 一類菌種的經(jīng)驗配方，再結(jié)合所用菌種和產(chǎn)品的特性，采用搖瓶、玻璃罐等小型發(fā)酵設(shè)備， 按照一定的實驗設(shè)計和實驗方法選擇出較為適合的培養(yǎng)基。
[0006] 培養(yǎng)基設(shè)計的基本步驟是：
[0007] 根據(jù)前人的經(jīng)驗和培養(yǎng)基成分確定時一些必須考慮的問題，初步確定可能的培養(yǎng) 基成分
[0008] 通過單因子實驗最終確定出最為適宜的培養(yǎng)基成分
[0009] 當(dāng)培養(yǎng)基成分確定后，剩下的問題就是各成分最適的濃度，由于培養(yǎng)基成分很多， 為減少實驗次數(shù)常采用一些合理的實驗設(shè)計方法。這些實驗往往基于多因子實驗，包含均 勻設(shè)計、正交實驗設(shè)計、響應(yīng)面分析等。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0010] 本發(fā)明克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供一種亮綠乳酸培養(yǎng)基及其應(yīng)用。
[0011] 本發(fā)明運用生物化學(xué)，微生物學(xué)及無機、有機、分析化學(xué)和熒光技術(shù)的原理，對不 同的碳源、氮源、無機鹽類、維生素、生長促進劑等諸類營養(yǎng)組分的組合進行篩選，對培養(yǎng)基 的PH值、離子強度、氧化-還原電勢、表面張力、氣體環(huán)境等物化因子進行了比較，研究出了 本發(fā)明的培養(yǎng)基。
[0012] 本發(fā)明所采用的技術(shù)方案為：
[0013] 一種亮綠乳酸培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基的組分包括EC肉湯、2. Og/L牛膽鹽、0. 012g/L 亮綠、3. Og/L硫酸錳、15. Og/L瓊脂，pH值為7. 1-7. 3 ;
[0014] 在以上方案基礎(chǔ)上，所述EC肉湯為每升EC肉湯中含有胰蛋白胨20. 0g、乳糖 10. 〇g、磷酸二氫鉀2. 0g、氯化鈉5. 0g、三號膽鹽I. 5g、磷酸氫二鉀4. 0g，其余為蒸餾水。
[0015] 本發(fā)明還公開了所述的亮綠乳酸培養(yǎng)基，用于飲用天然礦泉水中大腸桿菌的檢 驗。
[0016] 稱取本品22. 0g，加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中，分裝到帶有小導(dǎo)管的試管中， 每管10ml，115°C高壓滅菌20分鐘，備用。
[0017] 本發(fā)明的有益效果：
[0018] 1、培養(yǎng)基組方簡單，制備操作方便，成本低，利于推廣應(yīng)用；
[0019] 2、菌生長迅速，變異率低；
[0020] 3、便于觀察，分析。

【具體實施方式】
[0021] 實施例1 :
[0022] -種亮綠乳酸培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基的組分包括EC肉湯、2. 0g/L牛膽鹽、0. 012g/L 亮綠、3. 0g/L硫酸錳、15. 0g/L瓊脂，pH值為7. 1-7. 3 ;
[0023] 在以上方案基礎(chǔ)上，所述EC肉湯為每升EC肉湯中含有胰蛋白胨20. 0g、乳糖 10. 〇g、磷酸二氫鉀2. 0g、氯化鈉5. 0g、三號膽鹽I. 5g、磷酸氫二鉀4. 0g，其余為蒸餾水。
[0024] 本發(fā)明還公開了所述的亮綠乳酸培養(yǎng)基，用于飲用天然礦泉水中大腸桿菌的檢 驗。
[0025] 稱取本品22. 0g，加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中，分裝到帶有小導(dǎo)管的試管中， 每管10ml，115°C高壓滅菌20分鐘，備用。
[0026] 在 36 ±1°C 培養(yǎng) 18-24 小時
[0027]

【權(quán)利要求】
1. 一種亮綠乳酸培養(yǎng)基，其特征在于所述培養(yǎng)基的組分包括EC肉湯、2. Og/L牛膽鹽、 0· 012g/L 亮綠、3. Og/L 硫酸錳、15. Og/L 瓊脂，pH 值為 L 1-7. 3。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的亮綠乳酸培養(yǎng)基，其特征在于所述EC肉湯為每升EC肉湯中 含有胰蛋白胨20. Og、乳糖10. Og、磷酸二氫鉀2. Og、氯化鈉5. Og、三號膽鹽1. 5g、磷酸氫二 鉀4. 0g，其余為蒸餾水。
3. -種根據(jù)權(quán)利要求1所述的亮綠乳酸培養(yǎng)基的應(yīng)用，其特征在于用于飲用天然礦泉 水中大腸桿菌的檢驗。
【文檔編號】C12Q1/10GK104293881SQ201410515219
【公開日】2015年1月21日 申請日期:2014年9月29日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月29日
【發(fā)明者】王玉靜, 劉永祥 申請人:青島康合偉業(yè)商貿(mào)有限公司