乳酸桿菌發(fā)酵方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種乳酸桿菌發(fā)酵方法，由葡萄糖20g，酵母浸膏4g，蛋白胨10g，牛肉膏8g，吐溫801ml，KH2PO42g，NaAc5g，檸檬酸二銨2g，MgSO40.2g，MnSO40.04g，蒸餾水1000ml配置而成活化培養(yǎng)基，經(jīng)過(guò)菌種活化，菌種擴(kuò)大培養(yǎng)和發(fā)酵培養(yǎng)完成乳酸桿菌的發(fā)酵過(guò)程。提供了一種優(yōu)化的乳酸桿菌發(fā)酵條件和發(fā)酵方法，使得乳酸桿菌的生產(chǎn)能力大大提高。
【專利說(shuō)明】乳酸桿菌發(fā)酵方法
[0001]
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0002]本發(fā)明屬于發(fā)酵【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及乳酸桿菌發(fā)酵方法。
[0003]【背景技術(shù)】
[0004]乳酸細(xì)菌多屬于兼性厭氧菌，發(fā)酵過(guò)程一般為厭氧高溫發(fā)酵，不需通風(fēng)攪拌。乳酸菌屬于化能異養(yǎng)型微生物，它們?nèi)狈?duì)許多有機(jī)化合物的合成功能，必須提供多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)因子。乳酸菌由于蛋白酶活性較弱甚至缺乏必要的蛋白酶，因此，需要以蛋白水解物、氨基酸、肽和蛋白質(zhì)等物質(zhì)作為氮源。乳酸菌大多需要某些維生素和氨基酸等生長(zhǎng)因子，如核黃素、煙酸、生物素、嘧啶等。由于乳酸菌比較復(fù)雜的營(yíng)養(yǎng)需求及原料成本的問(wèn)題，在目前的乳酸研究中，發(fā)酵培養(yǎng)基的研究是重中之重。通過(guò)發(fā)酵培養(yǎng)基的研究，可以有效的提高產(chǎn)量，大大降低生產(chǎn)成本。發(fā)酵培養(yǎng)基一般應(yīng)包含有足夠的碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽和水，某些合成能力差的微生物還需添加適當(dāng)?shù)纳L(zhǎng)輔助類物質(zhì)，才能維持其正常的生長(zhǎng)。在乳酸細(xì)菌的氮源研究中，酵母膏仍是目前發(fā)酵產(chǎn)量最高的氮來(lái)源，研究者們認(rèn)為，酵母膏中的某些B族維生素、小肽類物質(zhì)對(duì)乳酸的生產(chǎn)起著重要的作用。但由于酵母膏價(jià)格較高，酵母膏成本約占整個(gè)乳酸生產(chǎn)成本的1/3以上，使得乳酸菌的生產(chǎn)成本一直居高不下。對(duì)生產(chǎn)中廉價(jià)氮源的篩選也已成為近年來(lái)研究的熱點(diǎn)?，F(xiàn)人們多傾向于選擇廉價(jià)輔料(麥芽提取物、玉米漿、甜菜糖蜜、廚房垃圾等)部分替代酵母膏，從而達(dá)到高產(chǎn)、低成本的目的。
[0005]發(fā)酵是一種復(fù)雜的生化過(guò)程，受很多因素的影響，如菌體自身的生產(chǎn)性能、培養(yǎng)基的配比、種子的質(zhì)量、發(fā)酵條件和發(fā)酵過(guò)程控制等都與目的產(chǎn)物的產(chǎn)出有密切的關(guān)系。在工業(yè)生產(chǎn)中，為 了最大限度的發(fā)揮菌體的生產(chǎn)能力，應(yīng)該提供最優(yōu)的生產(chǎn)培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件。因此，探索菌株高產(chǎn)特性充分表達(dá)的最優(yōu)培養(yǎng)條件是發(fā)酵生產(chǎn)的基礎(chǔ)與關(guān)鍵。
[0006]
【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]為了克服現(xiàn)有【技術(shù)領(lǐng)域】存在的上述缺陷，本發(fā)明的目的在于，提供一種乳酸桿菌發(fā)酵方法，解決現(xiàn)有技術(shù)乳酸桿菌的生產(chǎn)培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件無(wú)法滿足菌體發(fā)揮最大生產(chǎn)能力的問(wèn)題。
[0008]本發(fā)明提供的乳酸桿菌發(fā)酵方法，包括以下步驟:
(1)菌種活化，從乳酸桿菌菌種斜面上挑取菌種，接種至活化培養(yǎng)基中，37°c培養(yǎng)48小
時(shí)；
(2)菌種擴(kuò)大培養(yǎng)，以無(wú)菌吸管按5%比例將MRS培養(yǎng)液轉(zhuǎn)接于種子培養(yǎng)基中，37°C密封培養(yǎng)24小時(shí)；
(3)發(fā)酵培養(yǎng)，將菌種液按10%比例接入裝有150ml發(fā)酵培養(yǎng)基的250 ml的鹽水瓶中37°C靜置培養(yǎng)72小時(shí)，發(fā)酵初期加入一定量的碳酸鈣。
[0009]所述步驟(1)中活化培養(yǎng)基是由葡萄糖20g，酵母浸膏4g，蛋白胨10g，牛肉膏Sg，吐溫 801 ml, KH2PO4 2g，NaAc5g，檸檬酸二銨 2g，MgSO40.2g，MnSO40.04g，蒸餾水 1000 ml 配置而成。
[0010]本發(fā)明提供的乳酸桿菌發(fā)酵方法，其有益效果在于，提供了一種優(yōu)化的乳酸桿菌發(fā)酵條件和發(fā)酵方法，使得乳酸桿菌的生產(chǎn)能力大大提高。
[0011]
【具體實(shí)施方式】
[0012]下面結(jié)合一個(gè)實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明提供的乳酸桿菌發(fā)酵方法進(jìn)行詳細(xì)的說(shuō)明。
[0013]
實(shí)施例
[0014]本實(shí)施例的乳酸桿菌發(fā)酵方法，包括以下步驟:
(1)菌種活化，從乳酸桿菌菌種斜面上挑取菌種，接種至活化培養(yǎng)基中，37°c培養(yǎng)48小
時(shí)；
(2)菌種擴(kuò)大培養(yǎng)，以無(wú)菌吸管按5%比例將MRS培養(yǎng)液轉(zhuǎn)接于種子培養(yǎng)基中，37°C密封培養(yǎng)24小時(shí)；
(3)發(fā)酵培養(yǎng)，將菌種液按10%比例接入裝有150ml發(fā)酵培養(yǎng)基的250 ml的鹽水瓶中37°C靜置培養(yǎng)72小時(shí)，發(fā)酵初期加入一定量的碳酸鈣。 [0015]所述步驟(1)中活化培養(yǎng)基是由葡萄糖20g,酵母浸膏4g,蛋白胨IOg,牛肉膏8g,吐溫 801 ml, KH2PO4 2g，NaAc5g，檸檬酸二銨 2g，MgSO40.2g，MnSO40.04g，蒸餾水 1000 ml 配置而成。
【權(quán)利要求】
1.一種乳酸桿菌發(fā)酵方法，其特征在于:包括以下步驟: (1)菌種活化，從乳酸桿菌菌種斜面上挑取菌種，接種至活化培養(yǎng)基中，37°c培養(yǎng)48小時(shí)； (2)菌種擴(kuò)大培養(yǎng)，以無(wú)菌吸管按5%比例將MRS培養(yǎng)液轉(zhuǎn)接于種子培養(yǎng)基中，37°C密封培養(yǎng)24小時(shí)； (3)發(fā)酵培養(yǎng)，將菌種液按10%比例接入裝有150ml發(fā)酵培養(yǎng)基的250 ml的鹽水瓶中37°C靜置培養(yǎng)72小時(shí)，發(fā)酵初期加入一定量的碳酸鈣。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的乳酸桿菌發(fā)酵方法，其特征在于:所述步驟(1)中活化培養(yǎng)基是由葡萄糖20g，酵母浸膏4g，蛋白胨10g，牛肉膏8g，吐溫801 ml, KH2P04 2g，NaAc5g，檸檬酸二銨 2g，MgS040.2g，MnS040.`04g，蒸餾水 1000 ml 配置而成。
【文檔編號(hào)】C12R1/225GK103865831SQ201210550694
【公開日】2014年6月18日 申請(qǐng)日期:2012年12月18日 優(yōu)先權(quán)日:2012年12月18日
【發(fā)明者】張述智, 夏偉, 朱紹輝, 張 浩, 王曉麗, 徐權(quán)汗, 李之詳, 許團(tuán)輝 申請(qǐng)人:青島中仁藥業(yè)有限公司