專(zhuān)利名稱(chēng)：抗變態(tài)反應(yīng)劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及抗變態(tài)反應(yīng)劑。更具體地說(shuō)，本發(fā)明涉及可用作對(duì)變應(yīng)性鼻炎等變態(tài)反應(yīng)疾病有效的藥物、指定保健用食品、健康食品等的抗變態(tài)反應(yīng)劑。
背景技術(shù)：
變態(tài)反應(yīng)根據(jù)其機(jī)理的不同，可以分為I型至IV型共4種類(lèi)型。其中變應(yīng)性鼻炎、支氣管哮喘和蕁麻疹等變態(tài)反應(yīng)疾病通常由I型變態(tài)反應(yīng)引起。I型變態(tài)反應(yīng)也稱(chēng)為速發(fā)型變態(tài)反應(yīng)，是通過(guò)變應(yīng)原特異性IgE抗體與組織內(nèi)的肥大細(xì)胞和血液中嗜堿粒細(xì)胞表面的受體結(jié)合，然后變應(yīng)原與IgE抗體結(jié)合，從肥大細(xì)胞和嗜堿粒細(xì)胞中釋放出過(guò)剩的組胺和白三烯等化學(xué)介質(zhì)，從而激發(fā)各種變態(tài)反應(yīng)的機(jī)體反應(yīng)。因此在I型變態(tài)反應(yīng)疾病的治療中，采用抗組胺藥和具有抑制從肥大細(xì)胞中游離化學(xué)介質(zhì)作用的抗變態(tài)反應(yīng)藥。但是，這樣的抗組胺藥和抗變態(tài)反應(yīng)藥大多有副作用，長(zhǎng)時(shí)間連續(xù)使用會(huì)出現(xiàn)安全性問(wèn)題。
另外，變應(yīng)性接觸性皮炎等疾病是由通常被稱(chēng)為遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)的IV型變態(tài)反應(yīng)引起的。IV型變態(tài)反應(yīng)性疾病的治療使用類(lèi)固醇藥。類(lèi)固醇藥抑制細(xì)胞因子的產(chǎn)生，對(duì)于濕疹的治療特別有效，但大量或長(zhǎng)時(shí)間使用時(shí)，引發(fā)嚴(yán)重副作用的可能性高，安全性上會(huì)出現(xiàn)問(wèn)題。
上述變態(tài)反應(yīng)疾病中，變應(yīng)性鼻炎是以噴嚏、鼻溢分泌亢進(jìn)和鼻阻塞為三大主要癥狀的具代表性的I型變態(tài)反應(yīng)疾病。噴嚏和鼻溢分泌亢進(jìn)顯示與抗原-抗體反應(yīng)的結(jié)果即游離的組胺有很大關(guān)系，而鼻阻塞則可能是以血管擴(kuò)張和血管通透性亢進(jìn)引起的浮腫為起因而發(fā)病的。不過(guò)，其詳細(xì)的機(jī)理尚有許多不明之處。
本發(fā)明人在此之前曾經(jīng)通過(guò)將吸附在Al(OH)3上的雪松花粉提取抗原給予豚鼠的鼻腔內(nèi)，經(jīng)鼻致敏，之后通過(guò)使其反復(fù)吸入雪松花粉顆粒，建立可認(rèn)為是與人的病態(tài)類(lèi)似的變應(yīng)性鼻炎的模型動(dòng)物。該模型動(dòng)物中，主要是在引起反應(yīng)后的1小時(shí)內(nèi)，不僅觀察到出現(xiàn)噴嚏，也觀察到作為鼻阻塞指標(biāo)的特殊氣道阻力(specific airwayresistance(sRaw))在引起反應(yīng)1和4小時(shí)后上升出現(xiàn)峰值的雙相性。而且，該模型動(dòng)物中，在引起反應(yīng)4小時(shí)到2天后，可觀察到對(duì)組胺和白三烯D4的滴鼻有顯著反應(yīng)的鼻過(guò)敏性亢進(jìn)。
通過(guò)以前的研究，本發(fā)明人報(bào)告了縮合度為3～20的環(huán)狀和/或鏈狀聚L-乳酸混合物可用作抗惡性腫瘤劑(特開(kāi)平9-227388號(hào)公報(bào)以及特開(kāi)平10-130153號(hào)公報(bào))。但對(duì)于縮合度為3～20的環(huán)狀和/或鏈狀聚乳酸混合物具有的抗變態(tài)反應(yīng)作用的評(píng)價(jià)卻未有報(bào)告。
發(fā)明的公開(kāi)本發(fā)明要解決的課題是提供可用于例如治療和預(yù)防變應(yīng)性鼻炎等變態(tài)反應(yīng)疾病的新型抗變態(tài)反應(yīng)劑。本發(fā)明的另一個(gè)要解決的課題是提供利用上述抗變態(tài)反應(yīng)劑的抗變態(tài)反應(yīng)飲料食品。
本發(fā)明人為了進(jìn)行以解決上述課題為目的的研究，將縮合度為3～20的環(huán)狀和/或鏈狀聚乳酸混合物給予變應(yīng)性鼻炎模型動(dòng)物，就上述聚乳酸混合物對(duì)引起抗原抗體反應(yīng)后出現(xiàn)的噴嚏、雙相性鼻阻塞以及組胺引起的鼻過(guò)敏性表現(xiàn)的影響進(jìn)行了研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn)本發(fā)明中使用的聚乳酸混合物抑制雙相性鼻阻塞，也抑制組胺引起的鼻過(guò)敏性表現(xiàn)。本發(fā)明基于該認(rèn)識(shí)而完成。
即，根據(jù)本發(fā)明，可提供包含縮合度為3～20的環(huán)狀和/或鏈狀聚乳酸混合物的抗變態(tài)反應(yīng)劑。
本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑可作為變態(tài)反應(yīng)疾病的治療藥或預(yù)防藥使用，變態(tài)反應(yīng)疾病可例舉變應(yīng)性鼻炎等I型變態(tài)反應(yīng)疾病。
優(yōu)選聚乳酸中的重復(fù)單元乳酸實(shí)質(zhì)上由L-乳酸構(gòu)成。
優(yōu)選縮合度為3～20的環(huán)狀和/或鏈狀聚乳酸混合物是如下制備的成分將乳酸在惰性氣氛下進(jìn)行脫水縮合，將得到的反應(yīng)液中可溶于乙醇和甲醇的部分進(jìn)行反相柱層析，用pH為2～3的25～50％重量的乙腈水溶液洗脫后，用pH為2～3的90％重量以上的乙腈水溶液洗脫而得到所需的部分。
優(yōu)選在氮?dú)鈿夥障?，通過(guò)逐級(jí)減壓和升溫進(jìn)行脫水縮合。
優(yōu)選反相柱層析通過(guò)ODS柱層析進(jìn)行。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供含有上述本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑的抗變態(tài)反應(yīng)飲料食品。
根據(jù)本發(fā)明的又一個(gè)方面，提供縮合度為3～20的環(huán)狀和/或鏈狀聚乳酸混合物在抗變態(tài)反應(yīng)劑或抗變態(tài)反應(yīng)飲料食品制造中的應(yīng)用。
根據(jù)本發(fā)明的又一個(gè)方面，提供用于抑制變態(tài)反應(yīng)的方法，該方法包括將有效量的縮合度為3～20的環(huán)狀和/或鏈狀聚乳酸混合物給予人等哺乳動(dòng)物。
附圖簡(jiǎn)述

圖1表示制備例1得到的聚乳酸混合物的質(zhì)譜。
圖2表示試驗(yàn)例1的試驗(yàn)流程圖。圖2中，(A)表示通過(guò)鼻腔吸入雪松花粉提取物引起的致敏(0.6μg蛋白質(zhì)/0.6mgAl(OH)3/動(dòng)物)，(B)表示通過(guò)吸入雪松花粉的給予/致敏(約3.6mg/動(dòng)物/次)，(C)表示CPL(100mg/2ml/kg)或媒介物(2ml/kg)的經(jīng)口給予，(D)表示分為2組(A和B)，(E)表示CPL對(duì)通過(guò)給予抗原而誘發(fā)的雙相性鼻腔抵抗和噴嚏的影響評(píng)價(jià)，(F)表示CPL對(duì)組胺引起的鼻過(guò)敏性表現(xiàn)的影響評(píng)價(jià)。
圖3表示致敏豚鼠通過(guò)第22次給予吸入雪松花粉而誘發(fā)的特殊氣道阻力(specific airway resistance(sRaw))隨時(shí)間的變化。
圖4表示CPL對(duì)致敏豚鼠通過(guò)第23次給予吸入雪松花粉而誘發(fā)的特殊氣道阻力(specific airway resistance(sRaw))的雙相性增加的影響。
圖5表示CPL對(duì)致敏豚鼠通過(guò)第23次給予吸入雪松花粉而誘發(fā)的噴嚏的影響。
圖6表示CPL對(duì)致敏豚鼠由組胺引起的鼻過(guò)敏性表現(xiàn)的影響。
實(shí)施發(fā)明的最佳形式下面，對(duì)本發(fā)明的實(shí)施方式和實(shí)施方法進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。
本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑含有縮合度為3～20的環(huán)狀和/或鏈狀聚乳酸混合物作為有效成分，例如可作為變應(yīng)性鼻炎等變態(tài)反應(yīng)疾病的治療藥或預(yù)防藥使用。
變態(tài)反應(yīng)疾病是以基于外來(lái)性抗原和與其對(duì)應(yīng)的特異抗體或致敏淋巴細(xì)胞反應(yīng)的組織障礙為病因的疾病。變態(tài)反應(yīng)根據(jù)其反應(yīng)形態(tài)分類(lèi)為I型、II型、III型和IV型共4種類(lèi)型。I型變態(tài)反應(yīng)是與IgE抗體有關(guān)的反應(yīng)，稱(chēng)為速發(fā)型、IgE依賴(lài)型或過(guò)敏型。II型變態(tài)反應(yīng)也稱(chēng)為細(xì)胞障礙型或溶細(xì)胞型，與輸血不合、自身免疫性溶血性貧血、特發(fā)性血小板減少等疾病的發(fā)病有關(guān)。針對(duì)于外來(lái)抗原或自身抗原而產(chǎn)生的IgG抗體或IgM抗體與靶細(xì)胞結(jié)合，引起補(bǔ)體系統(tǒng)的激活，使靶細(xì)胞受損。III型變態(tài)反應(yīng)被稱(chēng)為免疫復(fù)合物型或阿爾圖斯氏(Arthus)型，血清病、腎小球性腎炎、全身性紅斑狼瘡、超敏性肺炎等為主要疾病。是血液中的IgG抗體或IgM抗體通過(guò)與可溶性抗原結(jié)合形成免疫復(fù)合物而引起的組織障礙。IV型變態(tài)反應(yīng)也稱(chēng)為遲發(fā)型或細(xì)胞免疫型。如結(jié)核菌素反應(yīng)中見(jiàn)到的，注射抗原48～72小時(shí)后，呈現(xiàn)以風(fēng)團(tuán)紅暈、硬結(jié)為特征的炎癥反應(yīng)。
I型變態(tài)反應(yīng)中，在發(fā)病前的機(jī)體內(nèi)，屋內(nèi)塵土、螨、花粉、真菌、動(dòng)物的毛發(fā)皮屑等為抗原，經(jīng)由氣道、消化管、皮膚等侵入體內(nèi)，產(chǎn)生IgE抗體。IgE抗體與肥大細(xì)胞、嗜堿粒細(xì)胞上的高親和性IgE受體結(jié)合，使這些細(xì)胞致敏。之后再暴露于抗原，抗原與IgE抗體結(jié)合，引起高親和性IgE受體的交聯(lián)、細(xì)胞的激活，發(fā)生脫顆粒以及化學(xué)介質(zhì)從細(xì)胞膜脂質(zhì)中產(chǎn)生、游離出來(lái)。組胺、嗜酸粒細(xì)胞趨化因子、中性粒細(xì)胞趨化因子等從顆粒中游離出來(lái)、新產(chǎn)生出作為化學(xué)介質(zhì)的前列腺素、血栓烷、白三烯、血小板激活因子等。炎癥細(xì)胞通過(guò)這些化學(xué)介質(zhì)和細(xì)胞因子向患部移動(dòng)、浸潤(rùn)。
以I型變態(tài)反應(yīng)為病因的疾病多為常見(jiàn)疾病，例如特應(yīng)性皮炎、支氣管哮喘、花粉病、蕁麻疹、變應(yīng)性鼻炎等。本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑可以廣泛用于變態(tài)反應(yīng)疾病的治療和預(yù)防，特別可用于治療和預(yù)防以I型變態(tài)反應(yīng)為病因的疾病。
本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑或者含有該劑的飲料食品不僅用于變態(tài)反應(yīng)癥狀的治療，也可以作為預(yù)防性治療用途使用，該用途包括用于預(yù)防變態(tài)反應(yīng)癥狀的發(fā)生和/或減輕該癥狀。
本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑和抗變態(tài)反應(yīng)飲料食品中，使用縮合度為3～20的環(huán)狀和/或鏈狀聚乳酸混合物作為有效成分。
本說(shuō)明書(shū)中所說(shuō)的“聚乳酸混合物”是指縮合度為3～20的環(huán)狀和/或鏈狀聚乳酸以任意比例存在的混合物。即，“混合物”這一用語(yǔ)是指具有縮合度為3～20其中的任意一個(gè)的聚乳酸混合物，同時(shí)也作為包含環(huán)狀和鏈狀聚乳酸的混合物的概念應(yīng)用。如本說(shuō)明書(shū)中所述，這樣的“聚乳酸混合物”可以將乳酸進(jìn)行脫水縮合，以適當(dāng)?shù)姆椒ㄌ峒兌玫健１菊f(shuō)明書(shū)中為了方便，使用了“聚乳酸混合物”這一用語(yǔ)，但其中也包括由具有一定縮合度的環(huán)狀聚乳酸或具有一定縮合度的鏈狀聚乳酸這樣單一成分構(gòu)成的聚乳酸。
縮合度是指聚乳酸中的重復(fù)單元即乳酸單元的數(shù)量。例如推測(cè)環(huán)狀聚乳酸有下述的結(jié)構(gòu)式，式中的n即表示縮合度(即n＝3～20)。
本說(shuō)明書(shū)中，如果稱(chēng)為“乳酸”，則該乳酸包括所有L-乳酸、D-乳酸或它們的任意比例的混合物。本發(fā)明中，優(yōu)選乳酸實(shí)質(zhì)上由L-乳酸構(gòu)成。這里所說(shuō)的“實(shí)質(zhì)上”是指聚乳酸混合物中L-乳酸單元的比例[即，(L-乳酸單元數(shù)/L-乳酸單元數(shù)+D-乳酸單元數(shù))×100]為例如70％以上，優(yōu)選80％以上，更優(yōu)選85％以上，進(jìn)一步優(yōu)選90％以上，特別優(yōu)選95％以上。聚乳酸混合物中L-乳酸單元的比例取決于作為原料使用的乳酸中存在的L-乳酸和D-乳酸的比例。
對(duì)縮合度為3～20的環(huán)狀和/或鏈狀聚乳酸混合物的制備方法并沒(méi)有特別限定，例如可通過(guò)特開(kāi)平9-227388號(hào)公報(bào)、特開(kāi)平10-130153號(hào)公報(bào)、或者特愿平11-39894號(hào)說(shuō)明書(shū)(將這些專(zhuān)利說(shuō)明書(shū)中記載的內(nèi)容全部引用作為本說(shuō)明書(shū)的公開(kāi)內(nèi)容。)等記載的制備方法來(lái)獲得。
更具體地說(shuō)，例如縮合度為3～20的環(huán)狀和/或鏈狀聚乳酸混合物可根據(jù)下述方法A獲得。
方法A首先，使乳酸(優(yōu)選實(shí)質(zhì)上由L-乳酸構(gòu)成的乳酸)在惰性氣氛下進(jìn)行脫水縮合。惰性氣氛可以例舉氮?dú)?、氬氣等，?yōu)選使用氮?dú)狻?br> 脫水縮合反應(yīng)在常壓～1mmHg左右的低壓下，在110～210℃，優(yōu)選130～190℃的溫度下進(jìn)行，特別優(yōu)選通過(guò)逐級(jí)減壓和逐級(jí)升溫來(lái)進(jìn)行。反應(yīng)時(shí)間可以適當(dāng)設(shè)定，例如可以進(jìn)行1～20小時(shí)的反應(yīng)。采用逐級(jí)減壓和逐級(jí)升溫時(shí)，將反應(yīng)時(shí)間分為2部分以上的反應(yīng)時(shí)間，對(duì)每部分分別設(shè)定壓力和溫度進(jìn)行反應(yīng)。采用逐級(jí)減壓時(shí)，例如可以按照常壓→150mmHg→3mmHg減壓，采用逐級(jí)升溫時(shí)，例如可以按照145℃→155℃→185℃升溫。實(shí)際上也可以將其組合，例如按照145℃常壓下3小時(shí)、145℃150mmHg下3小時(shí)、155℃3mmHg下3小時(shí)，然后185℃3mmHg下1.5小時(shí)進(jìn)行反應(yīng)。
接著，向脫水縮合反應(yīng)得到的反應(yīng)混合物中加入乙醇和甲醇，過(guò)濾，干燥濾液，得到可溶于乙醇和甲醇的部分。即，本說(shuō)明書(shū)中所述的“可溶于乙醇和甲醇的部分”是指可溶于乙醇和甲醇的混合液的成分。得到可溶于乙醇和甲醇的部分時(shí)，是將脫水縮合反應(yīng)的反應(yīng)混合物與乙醇和甲醇混合，但此時(shí)的乙醇和甲醇的比例可以適當(dāng)設(shè)定，例如乙醇∶甲醇＝1∶9。對(duì)向反應(yīng)混合物中添加乙醇和甲醇的順序、方法等并沒(méi)有特別限定，可以適當(dāng)選擇，例如可以先向脫水縮合反應(yīng)的反應(yīng)混合物中添加乙醇，然后添加甲醇。
將上述得到的可溶于乙醇·甲醇的部分進(jìn)行反相柱層析，特別是使用十八烷基硅烷(ODS)柱的層析，首先除去用pH為2～3的25～50％重量的乙腈水溶液洗脫的部分，然后取用pH為2～3的90％重量以上的乙腈水溶液、優(yōu)選99％重量以上的乙腈水溶液洗脫得到的部分，這樣可得到縮合度為3～20的環(huán)狀和/或鏈狀聚乳酸混合物。
如上所述得到的環(huán)狀和/或鏈狀聚乳酸混合物可用氫氧化鈉等堿性物質(zhì)中和，減壓干燥，然后通過(guò)常規(guī)方法制成如下所述的所需形態(tài)的制劑。
作為制備本發(fā)明中使用的縮合度為3～20的環(huán)狀和/或鏈狀聚乳酸混合物的另一個(gè)方法，可以例舉特愿平11-265715號(hào)說(shuō)明書(shū)中記載的方法(方法B)或特愿平11-265732號(hào)說(shuō)明書(shū)中記載的方法(將這些專(zhuān)利說(shuō)明書(shū)中記載的內(nèi)容全部引用作為本說(shuō)明書(shū)的公開(kāi)內(nèi)容。)。下面對(duì)方法B和方法C進(jìn)行具體說(shuō)明。
方法B該方法是通過(guò)使丙交酯在以RYLi(式中，R表示脂族基或芳族基，Y表示氧原子或硫原子)表示的鋰化合物存在下聚合，制備環(huán)狀乳酸低聚物的方法。進(jìn)行聚合反應(yīng)時(shí)，鋰化合物(RYLi)的使用比例為每1摩爾丙交酯使用1～0.1摩爾，優(yōu)選0.2～0.3摩爾的比例。反應(yīng)溫度為-100～0℃，優(yōu)選-78～-50℃。優(yōu)選反應(yīng)以-78～-50℃的溫度開(kāi)始，慢慢升溫至室溫。優(yōu)選反應(yīng)在反應(yīng)溶劑存在下進(jìn)行。反應(yīng)溶劑除四氫呋喃等環(huán)醚之外，可以使用二乙醚、二甲氧基乙烷等。反應(yīng)氣氛采用氮?dú)?、氬氣等惰性氣體氣氛。對(duì)反應(yīng)壓力并無(wú)特別限制，優(yōu)選常壓。
如上所述得到的乳酸低聚物的組成(即環(huán)狀乳酸低聚物和鏈狀乳酸低聚物的混合比例)隨著作為反應(yīng)助劑使用的鋰化合物而變動(dòng)。使用碳原子數(shù)為1～3的烷基醇的鋰化合物(ROLi)(式中，R為碳原子數(shù)1～3的烷基)作為鋰化合物時(shí)，可得到環(huán)狀乳酸低聚物和鏈狀低聚物的混合物(環(huán)狀乳酸低聚物的比例80～85％重量)。而使用叔丁醇等碳原子數(shù)為4以上烷基醇的鋰化合物或苯硫酚化合物作為鋰化合物時(shí)，可以實(shí)質(zhì)上只選擇性地得到環(huán)狀乳酸低聚物。
方法C該方法的特征是包含(i)第1加熱步驟，在350～400mmHg的壓力條件下，將乳酸加熱到120～140℃范圍的溫度，使之進(jìn)行脫水縮合反應(yīng)，同時(shí)，并不餾出丙交酯，而只餾出并除去副產(chǎn)物水；(ii)第2加熱步驟，該第1加熱步驟結(jié)束后，將反應(yīng)產(chǎn)物加熱到150～160℃的溫度，將該反應(yīng)壓力以0.5～1mmHg/分鐘的減壓速度降到15～20mmHg，在減壓的同時(shí)一邊避免餾出丙交酯，一邊只餾出并除去副產(chǎn)物水，該反應(yīng)壓力降到15～20mmHg后，在相同壓力條件和150～160℃反應(yīng)溫度下，再繼續(xù)反應(yīng)，使之生成以鏈狀乳酸低聚物為主要成分的脫水縮合物。
(iii)第3加熱步驟，該第2加熱步驟結(jié)束后，在0.1～3mmHg的壓力條件下在150～160℃加熱，使該鏈狀乳酸低聚物環(huán)化，生成環(huán)狀低聚物。
該方法首先在第1加熱步驟中于減壓下加熱乳酸，使之進(jìn)行脫水縮合反應(yīng)。此時(shí)的反應(yīng)時(shí)間為3～12小時(shí)，優(yōu)選5～6小時(shí)。為了使該第1加熱步驟下進(jìn)行的反應(yīng)順利進(jìn)行，要餾去乳酸脫水縮合而生成的副產(chǎn)物水，但此時(shí)并不餾去2分子乳酸的脫水縮合物丙交酯。因此，將反應(yīng)壓力保持低壓，優(yōu)選300～500mmHg，更優(yōu)選保持350～400mmHg，在該壓力條件下，可以加熱到100～140℃，優(yōu)選130～140℃的范圍。通過(guò)該第1加熱步驟的反應(yīng)，主要生成以乳酸的3～23分子脫水縮合物為主要成分的反應(yīng)產(chǎn)物。
上述第1加熱步驟結(jié)束后，在第2加熱步驟中，為了得到平均聚合度更高的低聚物，要加熱到比上述第1加熱步驟中的反應(yīng)溫度高的溫度，優(yōu)選145～180℃，更優(yōu)選150～160℃，同時(shí)使反應(yīng)壓力降到10～50mmHg，優(yōu)選15～20mmHg的壓力，再繼續(xù)進(jìn)行脫水縮合反應(yīng)。
該反應(yīng)也與上述第1加熱步驟的反應(yīng)情形相同，為使反應(yīng)順利進(jìn)行，要在餾去副產(chǎn)物水而不餾去丙交酯的條件下進(jìn)行。為了避免餾出丙交酯，且提高反應(yīng)效率，通常需將把反應(yīng)壓力降到上述范圍壓力的速度(減壓速度)保持在0.25～5mmHg/分鐘，優(yōu)選0.5～1mmHg/分鐘的范圍。如果是比上述范圍低的減壓速度，則減壓到規(guī)定壓力所需的時(shí)間就延長(zhǎng)，因而不優(yōu)選，另一方面，如果是比上述范圍高的減壓速度，則丙交酯會(huì)與副產(chǎn)物水一同餾去，因而不優(yōu)選。
反應(yīng)壓力下降到規(guī)定壓力后，在該反應(yīng)壓力下再繼續(xù)反應(yīng)。此時(shí)的加熱時(shí)間為3～12小時(shí)，優(yōu)選5～6小時(shí)。
通過(guò)上述第2加熱步驟的反應(yīng)，可得到平均聚合度為3～30，優(yōu)選3～23的乳酸低聚物，此時(shí)低聚物中的環(huán)狀低聚物的比例通常為70～80％重量左右。
上述第2加熱步驟結(jié)束后，在第3加熱步驟中，將反應(yīng)壓力保持在0.25～5mmHg，優(yōu)選0.5～1mmHg，在145～180℃，優(yōu)選150～160℃的溫度再繼續(xù)反應(yīng)。反應(yīng)時(shí)間為3～12小時(shí)，優(yōu)選5～6小時(shí)。此時(shí)也要餾去副產(chǎn)物水。此時(shí)也優(yōu)選避免丙交酯的餾去，但由于反應(yīng)產(chǎn)物中幾乎不含丙交酯，因此無(wú)需特別降低減壓速度。
通過(guò)上述第3加熱步驟的反應(yīng)，可生成平均聚合度為3～30，優(yōu)選3～23，且環(huán)狀低聚物的比例為90％重量以上，優(yōu)選99％重量以上的乳酸低聚物。
上述方法A、B和C只是表示本發(fā)明所采用的聚乳酸混合物的制備方法的部分具體例，本發(fā)明中，也可使用以其他方法制備的聚乳酸混合物。
在上述必須成分之外，可以根據(jù)需要，在無(wú)損本發(fā)明效果的范圍內(nèi)，任意選擇、同時(shí)使用藥物類(lèi)、準(zhǔn)藥物類(lèi)、化妝品類(lèi)等制劑中使用的成分和添加劑來(lái)制造本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑。本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑除可單獨(dú)作為藥物類(lèi)使用之外，也可以混合到藥物類(lèi)、準(zhǔn)藥物類(lèi)、皮膚·頭發(fā)用化妝品類(lèi)等中使用。
對(duì)本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑的形態(tài)并無(wú)特別限定，可以從經(jīng)口給藥或非經(jīng)口給藥的劑型中選擇最符合目的的適當(dāng)?shù)男问健?br> 適合經(jīng)口給藥的劑型可以例舉片劑、膠囊劑、散劑、口服液、顆粒劑、細(xì)粒劑、糖漿劑、溶液劑、乳劑、混懸劑、咀嚼劑等，適合非經(jīng)口給藥的劑型可以例舉注射劑(皮下注射、肌肉注射或靜脈注射)、外用劑、輸液、吸入劑、噴霧劑、滴鼻劑、滴眼劑等，但并不限于這些。
適合經(jīng)口給藥的液體制劑例如溶液劑、乳劑或糖漿劑等可以用水、蔗糖、山梨糖醇、果糖等糖類(lèi)，聚乙二醇、丙二醇等二醇類(lèi)，芝麻油、橄欖油、豆油等油類(lèi)，對(duì)羥基苯甲酸酯類(lèi)等防腐劑，草莓香料、薄荷香料等香料類(lèi)等來(lái)制造。另外膠囊劑、片劑、散劑或顆粒劑等固體制劑的制造可以使用乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露醇等賦形劑，淀粉、藻酸鈉等崩解劑，硬脂酸鎂、滑石粉等潤(rùn)滑劑，聚乙烯醇、羥丙基纖維素、明膠等粘合劑，脂肪酸酯等表面活性劑，甘油等增塑劑等。
適合非經(jīng)口給藥的注射用或輸液用制劑優(yōu)選將作為有效成分的上述物質(zhì)以溶解或懸浮狀態(tài)包含在與受藥者的血液等張的滅菌水性介質(zhì)中。例如，如果是注射劑，則可用由鹽溶液、葡萄糖溶液、或鹽水與葡萄糖溶液的混合物構(gòu)成的水性介質(zhì)等配制溶液。用于腸內(nèi)給藥的制劑可以用例如可可豆脂、氫化脂或氫化羧酸等基質(zhì)來(lái)配制，作為栓劑提供。另外，噴霧劑的制造中，可以使用可使作為有效成分的上述物質(zhì)分散為微粒，不刺激受藥者的口腔和氣道粘膜，且易于吸收有效成分的基質(zhì)。作為基質(zhì)，可具體例舉乳糖或甘油等?？筛鶕?jù)作為有效成分的物質(zhì)和所用基質(zhì)的性質(zhì)，配制成氣霧劑或干粉等形式的制劑。這些非經(jīng)口給藥的制劑中可以添加選自二醇類(lèi)、油類(lèi)、香料類(lèi)、防腐劑、賦形劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑、粘合劑、表面活性劑、增塑劑等的1種或多種的飲料食品。
將本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑用于治療或預(yù)防變應(yīng)性鼻炎時(shí)，可以以滴鼻劑的形態(tài)使用。本發(fā)明的滴鼻劑中，除了作為上述有效成分的聚乳酸混合物之外，可以在無(wú)損本發(fā)明的前提下混合通常滴鼻劑所用的物質(zhì)，例如抗炎癥劑(甘草酸二鉀、水楊酸甲酯、對(duì)乙酰氨基酚、乙酰水楊酸、水楊酸乙二醇酯、吲哚美辛等)、局部麻醉劑(利多卡因、鹽酸利多卡因、地布卡因、鹽酸地布卡因、苯佐卡因、氨基苯甲酸乙酯等)、殺菌劑(依沙吖啶、西吡氯銨、芐索氯銨、苯扎氯銨、鹽酸氯己定、葡萄糖酸氯己定等)、維生素類(lèi)(維生素A、維生素C、維生素B12等)、清涼劑(薄荷醇、樟腦、桉油等)、增稠劑(明膠、聚丙烯酸、聚丙烯酸鈉、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚氧化乙烯、羧甲基纖維素、羥丙基纖維素、聚乙烯基羧基共聚物、聚乙烯吡咯烷酮·醋酸乙烯酯共聚物、甲基乙烯基醚·馬來(lái)酸酐共聚物、天然橡膠等)、穩(wěn)定劑等。
本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑的給藥量和給藥次數(shù)可根據(jù)包括給藥目的、給藥方式、攝取者年齡、體重或性別等條件的各種因素而適當(dāng)設(shè)定，通常有效成分的給藥量為每天1～10,000mg/kg，優(yōu)選10～2000mg/kg，更優(yōu)選10～200mg/kg。優(yōu)選將上述給藥量的制劑分為每天1～4次左右給藥。
本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑的給藥時(shí)間并沒(méi)有特別限定，在抗原侵入體內(nèi)前或后均可，還可以是由侵入體內(nèi)的抗原引發(fā)的抗原抗體反應(yīng)(變態(tài)反應(yīng))前、反應(yīng)中或反應(yīng)后的任意階段，也可以跨期間連續(xù)給藥。
本發(fā)明還涉及包含縮合度為3～20的環(huán)狀和/或鏈狀聚乳酸混合物的抗變態(tài)反應(yīng)飲料食品。即，本發(fā)明中使用的縮合度為3～20的環(huán)狀和/或鏈狀聚乳酸混合物不僅以上述單獨(dú)劑型使用，還可以混合到飲料食品中使用。
本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)飲料食品只要混合后不使聚乳酸混合物分解即可，對(duì)混合形式并沒(méi)有特別限定。
本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)飲料食品產(chǎn)品的具體例子有通常稱(chēng)為清涼飲料、口服液、健康食品、指定保健用食品、功能食品、活性功能食品、營(yíng)養(yǎng)輔助食品、添加劑、飼料、飼料添加劑等的包括飲料在內(nèi)的健康食品或輔助食品。
飲料食品的具體例子有香口膠、巧克力、糖果、糖片、果凍、曲奇、餅干、酸奶等糖果點(diǎn)心類(lèi)；冰淇淋、果汁冰棍等的冰點(diǎn)類(lèi)；茶；清涼飲料(包括果汁、咖啡、可可等)；營(yíng)養(yǎng)口服液、美容口服液等飲料；面包；火腿；湯；果醬；意大利粉；冷凍食品類(lèi)等任意的飲料食品。或者，也可以將本發(fā)明中使用的聚乳酸混合物添加于調(diào)味料或食品添加劑等中使用。通過(guò)攝取本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)飲料食品，能夠發(fā)揮抗變態(tài)反應(yīng)的效果，提供實(shí)質(zhì)上不顯示有害副作用的安全的飲料食品。
本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)飲料食品可以將聚乳酸混合物直接混合、分散到食品所使用的通常的原料中，通過(guò)公知的方法加工成期望的形態(tài)而獲得。
本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)飲料食品包含所有形式的飲料食品，其種類(lèi)并無(wú)特別限定，可以將本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑混合到如上所述的各種飲料食物或各種營(yíng)養(yǎng)組合物，例如各種經(jīng)口或經(jīng)腸營(yíng)養(yǎng)劑、飲料等中，作為飲料食品提供。這樣的飲料食品的組成中除了縮合度為3～20的環(huán)狀和/或鏈狀聚乳酸混合物之外，還可以包含蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、糖類(lèi)、維生素和/或礦物質(zhì)類(lèi)等。飲料食品的形式并無(wú)特別限定，只要是容易攝取的形式即可，可以是固體、粉末、液體、膠狀、漿狀等任意形式。
飲料食品中的聚乳酸混合物的含量并無(wú)特別限定，通常為約0.1～20％重量，更優(yōu)選約0.1～10％重量。
飲料食品中含有的聚乳酸混合物的量?jī)?yōu)選含有可發(fā)揮作為本發(fā)明目的的抗變態(tài)反應(yīng)作用的量，優(yōu)選在攝取的每份飲料食物中含有約0.1g至10g，更優(yōu)選含有約0.5g至3g。
將本申請(qǐng)所要求的優(yōu)先權(quán)基礎(chǔ)即日本專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)卦?001-4823號(hào)的說(shuō)明書(shū)中所記載的內(nèi)容全部引用到本說(shuō)明書(shū)中，作為本說(shuō)明書(shū)的通過(guò)以下實(shí)施例更具體地說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明的任何一點(diǎn)均不受實(shí)施例限制。
實(shí)施例制備例1聚乳酸混合物(以下稱(chēng)為CPL)的制備將500ml L-乳酸(混有D-乳酸)加入置于加熱套中的分離式燒瓶中。通入300ml/分鐘的氮?dú)獠⑦M(jìn)行攪拌，一邊將餾出的水通過(guò)保溫的、由高向低的連接管導(dǎo)入具有回流冷卻器的燒瓶，一邊在145℃加熱3小時(shí)。再減壓至150mmHg，在相同溫度下加熱3小時(shí)，然后減壓至3mmHg，在155℃溫度下加熱3小時(shí)，最后在3mmHg下185℃加熱1.5小時(shí)，得到反應(yīng)產(chǎn)物聚乳酸。
將得到的聚乳酸保持在100℃，先后加入100ml乙醇和400ml甲醇，然后冷卻。將該液加入到500ml甲醇中，充分?jǐn)嚢?、靜置，然后過(guò)濾、提純。將該濾液減壓干燥，溶解于乙腈，配制為200ml(原液)。
將該原液通過(guò)事先已平衡的ODS柱(TSK gel ODS-80TM)，用含0.01M鹽酸的30％、50％和100％乙腈(pH2.0)逐級(jí)洗脫，得到作為100％乙腈洗脫部分的聚乳酸(縮合度3～20)。所得物質(zhì)的質(zhì)譜表示在圖1中。從圖1中有規(guī)律的碎片離子峰可知得到的聚乳酸混合物為以環(huán)狀縮合物為主體，混有少量直鏈縮合物的狀態(tài)。
試驗(yàn)例1(試驗(yàn)方法)1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用4周齡的Hartley系雄性豚鼠(日本SLC)。
2、藥物所用藥物是由制備例1制備的聚乳酸混合物(CPL)。用甘油溶解CPL，使CPL為100mg/ml，然后添加純水，配制成100mg/2ml。
3、抗原和輔助劑使用根據(jù)已報(bào)告的(Takeshi Nabe等，Jpn.J.Pharmacol.75243-251(1997)；以及Takeshi Nabe等，Inflamm.Res.47369-374(1998))方法制作的雪松花粉提取抗原進(jìn)行致敏。直接使用雪松花粉進(jìn)行吸入抗原引起反應(yīng)。使用根據(jù)以前報(bào)告的方法(Takeshi Nabe等，Allergol.Intl.46261-267(1997))制備的氫氧化鋁凝膠(Al(OH)3)作為輔助劑。
雪松花粉提取抗原與Al(OH)3的吸附根據(jù)已報(bào)告的方法(TakeshiNabe等，Jpn.J.Pharmacol.75243-251(1997)；以及Takeshi Nabe等，Inflamm.Res.47369-374(1998))，通過(guò)將雪松花粉提取抗原(200μg蛋白質(zhì)/ml)的生理鹽水溶液等量滴加到攪拌下的Al(OH)3的生理鹽水懸浮液中(200mg/ml)來(lái)進(jìn)行。
4、致敏和反應(yīng)的引起致敏和吸入抗原引起反應(yīng)按照?qǐng)D2所示的方法進(jìn)行。即，通過(guò)每天2次，連續(xù)7天將吸附在Al(OH)3上的雪松花粉提取抗原滴于豚鼠的兩鼻孔進(jìn)行致敏，之后，每周1次使用定量的花粉吸入器(TakeshiNabe等，Jpn.J.Pharmacol.75243-251(1997)中記載)，通過(guò)使自主呼吸下的豚鼠反復(fù)吸入雪松花粉顆粒引起反應(yīng)，重復(fù)至第23次。
5、噴嚏的測(cè)定在吸入雪松花粉后的1小時(shí)內(nèi)，通過(guò)觀察豚鼠的癥狀來(lái)測(cè)定噴嚏的次數(shù)。噴嚏的表現(xiàn)在1小時(shí)以后幾乎未見(jiàn)，結(jié)果與已報(bào)告相同(Takeshi Nabe等，Inflamm.Res.47369-374(1998))。
6、呼吸機(jī)能的測(cè)定吸入雪松花粉引起反應(yīng)后，使用多功能呼吸測(cè)定裝置(Pulmos-I，M.I.P.S)測(cè)定作為鼻腔抵抗指標(biāo)的特殊氣道阻力(sRaw)，該裝置采用了雙腔(two-chambered)、雙流式體積描記(double-flow plethysmograph)方法。
7、對(duì)用組胺滴鼻的反應(yīng)性測(cè)定對(duì)用組胺滴鼻的反應(yīng)性測(cè)定按照已報(bào)告的方法(Nobuaki，Mizutani等，Eur.Respir.J.，14，1368-1375(1999))進(jìn)行。即，在第23次引起反應(yīng)的2天后，將10-4和10-2M的組胺溶液以10μl/鼻孔(20μl/動(dòng)物)20分鐘間隔向鼻腔內(nèi)依次滴鼻。分別在滴鼻10分鐘后測(cè)定反應(yīng)指標(biāo)sRaw。
8、藥物的給予(圖2)從第23次引起反應(yīng)之前6天開(kāi)始，每天1次連續(xù)經(jīng)口給予CPL(100mg/2ml/kg)。最后的給藥是在第23次引起反應(yīng)之前2小時(shí)。對(duì)對(duì)照組同樣經(jīng)口給予50％甘油溶液。
通過(guò)觀察第22次引起反應(yīng)時(shí)sRaw的上升程度，可以將對(duì)照組和CPL給藥組分成2組，使每組的反應(yīng)程度為相同程度(表1和圖3)。圖3中，各點(diǎn)表示15或16只模型動(dòng)物的平均±S.E.。
表1對(duì)致敏豚鼠第22次給予抗原后的前期(0～3小時(shí))和后期(3～6小時(shí))時(shí)特殊氣道阻力(sRaw)上升的反應(yīng)曲線下面積(AUC)

各值表示15或16只模型動(dòng)物的平均±S.E.。
9、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用Bonferroni’s multiple test，以顯著水平小于5％為顯著。
(評(píng)價(jià)結(jié)果)1.CPL對(duì)雙相性鼻腔抵抗上升的影響圖4表示CPL對(duì)作為引起反應(yīng)后鼻腔抵抗指標(biāo)的sRaw上升的影響結(jié)果。圖4中，連續(xù)7天經(jīng)口給予CPL(100mg/kg/次/天)。最后給藥在給予第23次吸入抗原之前2小時(shí)進(jìn)行。各點(diǎn)表示15或16只模型動(dòng)物的平均±S.E.。對(duì)照組的顯著性差異中，1個(gè)星號(hào)代表p＜0.05，2個(gè)星號(hào)代表p＜0.01。
由圖4可知，對(duì)照組中，在引起反應(yīng)1小時(shí)后，可見(jiàn)顯示sRaw上升的速發(fā)型鼻阻塞，3～4小時(shí)后可見(jiàn)顯示sRaw再次上升的遲發(fā)型反應(yīng)。對(duì)于該雙相性鼻阻塞，CPL均在整個(gè)時(shí)間段內(nèi)顯示出對(duì)速發(fā)型和遲發(fā)型反應(yīng)的抑制或這樣的傾向。
表2表示將圖3的結(jié)果分別以引起反應(yīng)后立即～3小時(shí)后以及3～10小時(shí)后的鼻腔抵抗上升的反應(yīng)曲線下面積(AUC)表示的結(jié)果。CPL對(duì)于速發(fā)相和遲發(fā)相的鼻阻塞分別顯示了約60％和50％的顯著的(p＜0.01)抑制。
表2CPL對(duì)第23次給予致敏豚鼠吸入抗原后的前期(0～3小時(shí))和后期(3～10小時(shí))時(shí)特殊氣道阻力(sRaw)的反應(yīng)曲線下面積(AUC)的增加

連續(xù)7天經(jīng)口給予CPL(100mg/kg/次/天)。最后給藥在第23次給予吸入抗原之前2小時(shí)進(jìn)行。各值表示15或16只模型動(dòng)物的平均±S.E.。對(duì)照組的顯著性差異中，2個(gè)星號(hào)代表p＜0.01。
2.CPL對(duì)噴嚏表現(xiàn)的影響圖5表示CPL對(duì)致敏豚鼠引起反應(yīng)后至1小時(shí)的噴嚏表現(xiàn)的影響結(jié)果。圖5中，連續(xù)7天經(jīng)口給予CPL(100mg/kg/次/天)。最后給藥在第23次給予吸入抗原之前2小時(shí)進(jìn)行。各柱表示15或16只模型動(dòng)物的平均±S.E.。
如圖5所示，對(duì)照組中，在引起反應(yīng)0～10分鐘和10分鐘～1小時(shí)期間，均可見(jiàn)約6次的噴嚏表現(xiàn)。而CPL給予組只不過(guò)多少顯示了抑制傾向。
3.CPL對(duì)組胺引起的鼻過(guò)敏性表現(xiàn)的影響圖6表示CPL對(duì)組胺引起的鼻過(guò)敏性表現(xiàn)的影響結(jié)果。試驗(yàn)在第23次給予吸入花粉的2天后進(jìn)行。連續(xù)7天經(jīng)口給予CPL(100mg/kg/次/天)。最后給藥在第23次給予吸入抗原之前2小時(shí)進(jìn)行。各點(diǎn)表示11～16只模型動(dòng)物的平均±S.E.。非致敏組的顯著性差異中，1個(gè)星號(hào)表示p＜0.05，2個(gè)星號(hào)表示p＜0.01，十字符號(hào)表示對(duì)照組的顯著性差異為p＜0.05。
如圖6所示，對(duì)于非致敏豚鼠，以10-2M的組胺滴鼻，只不過(guò)多少顯示了sRaw的上升，而對(duì)于致敏-引起豚鼠，顯示了從10-4M開(kāi)始sRaw隨濃度上升而上升的相關(guān)性。對(duì)于該鼻過(guò)敏性亢進(jìn)，CPL顯著(p＜0.05)抑制10-4M時(shí)的反應(yīng)，對(duì)10-2M時(shí)的反應(yīng)也顯示了抑制傾向。
(試驗(yàn)例總結(jié))試驗(yàn)例研究了CPL對(duì)于豚鼠變應(yīng)性鼻炎模型中的噴嚏、雙相性鼻阻塞以及組胺滴鼻引發(fā)的鼻過(guò)敏性表現(xiàn)的影響。連續(xù)7天經(jīng)口給予CPL(100mg/2ml/kg、po)對(duì)于噴嚏的表現(xiàn)并未顯示明確的抑制效果，但對(duì)于雙相性鼻阻塞，對(duì)速發(fā)型和遲發(fā)型均明顯地抑制，對(duì)組胺引起的鼻過(guò)敏性表現(xiàn)也有抑制。
工業(yè)可利用性本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑可以用于治療和預(yù)防變應(yīng)性鼻炎等變態(tài)反應(yīng)疾病。
另外，本發(fā)明中用作有效成分的聚乳酸混合物是來(lái)源于生物體成分的乳酸低縮合物，因此生物適合性高，沒(méi)有見(jiàn)于一直以來(lái)治療變態(tài)反應(yīng)病所用抗組胺藥、具有抑制化學(xué)介質(zhì)自肥大細(xì)胞游離的作用的抗變態(tài)反應(yīng)藥、或類(lèi)固醇激素等的副作用。
權(quán)利要求
1.一種抗變態(tài)反應(yīng)劑，該抗變態(tài)反應(yīng)劑含有縮合度為3～20的環(huán)狀和/或鏈狀聚乳酸混合物。
2.權(quán)利要求1的抗變態(tài)反應(yīng)劑，該抗變態(tài)反應(yīng)劑作為變態(tài)反應(yīng)疾病的治療藥或預(yù)防藥使用。
3.權(quán)利要求2的抗變態(tài)反應(yīng)劑，其中變態(tài)反應(yīng)疾病是I型變態(tài)反應(yīng)疾病。
4.權(quán)利要求2或3的抗變態(tài)反應(yīng)劑，其中變態(tài)反應(yīng)疾病是變應(yīng)性鼻炎。
5.權(quán)利要求1～4的任一項(xiàng)所述的抗變態(tài)反應(yīng)劑，其中聚乳酸中的重復(fù)單元乳酸實(shí)質(zhì)上由L-乳酸構(gòu)成。
6.權(quán)利要求1～5的任一項(xiàng)所述的抗變態(tài)反應(yīng)劑，其中縮合度為3～20的環(huán)狀和/或鏈狀聚乳酸混合物是如下制備的部分將乳酸在惰性氣氛下進(jìn)行脫水縮合，將所得反應(yīng)液中可溶于乙醇和甲醇的部分進(jìn)行反相柱層析，用pH為2～3的25～50％重量的乙腈水溶液洗脫后，用pH為2～3的90％重量以上的乙腈水溶液洗脫，從而得到所需部分。
7.權(quán)利要求6的抗變態(tài)反應(yīng)劑，其中在氮?dú)鈿夥障?，通過(guò)逐級(jí)減壓和升溫進(jìn)行脫水縮合。
8.權(quán)利要求6或7的抗變態(tài)反應(yīng)劑，其中的反相柱層析通過(guò)ODS柱層析進(jìn)行。
9.一種抗變態(tài)反應(yīng)飲料食品，該抗變態(tài)反應(yīng)飲料食品包含權(quán)利要求1～8的任一項(xiàng)所述的抗變態(tài)反應(yīng)劑。
全文摘要
本發(fā)明的目的是提供可用于治療和預(yù)防變應(yīng)性鼻炎等變態(tài)反應(yīng)疾病的新型抗變態(tài)反應(yīng)劑。根據(jù)本發(fā)明，可提供包含縮合度為3～20的環(huán)狀和/或鏈狀聚乳酸混合物的抗變態(tài)反應(yīng)劑。
文檔編號(hào)A23L1/30GK1496266SQ02806188
公開(kāi)日2004年5月12日 申請(qǐng)日期2002年1月10日 優(yōu)先權(quán)日2001年1月12日
發(fā)明者村上正裕, 河野茂勝, 奈邊健, 勝 申請(qǐng)人:天藤制藥株式會(huì)社