一種基于指紋圖譜的無錫毫茶摻假的檢測方法
【專利摘要】一種基于指紋圖譜的無錫毫茶摻假的檢測方法，屬于無錫毫茶質量檢測【技術領域】。本發(fā)明利用頂空-固相微萃取(HS-SPME)技術富集無錫毫茶香氣，通過氣相色譜-質譜聯(lián)用(GC-MS)分析，構建無錫毫茶香氣GC-MS標準指紋圖譜，根據(jù)其共有特征峰的相對峰面積，應用化學計量學方法（夾角余弦相似度法或聚類分析），對模擬分別摻入無錫毫茶陳茶或摻入其他品種茶葉的無錫毫茶摻假樣品進行香氣成分GC-MS指紋分析和摻假鑒別試驗。結果表明：兩種化學計量學方法對摻入10%（占樣品質量的百分含量）及以上無錫毫茶陳茶或其他品種茶葉的無錫毫茶摻假樣品都可以予以鑒別。方法準確、靈敏且簡便，可用于摻入陳茶與其他品種茶葉的無錫毫茶偽劣樣品的檢測。
【專利說明】一種基于指紋圖譜的無錫毫茶摻假的檢測方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種基于指紋圖譜的無錫毫茶摻假的檢測方法，特別是一種通過構建 無錫毫茶香氣GC-MS標準指紋圖譜以判定無錫毫茶是否摻假的方法。屬于GC-MS用于無錫 毫茶質量檢測【技術領域】。
【背景技術】
[0002] 中國是茶的發(fā)源地及產茶大國，茶葉不僅是人們日常生活中的健康飲品，也是旅 游產業(yè)中的一個特色主題。"無錫毫茶"產于太湖之濱，是無錫特有的茶葉品種。獨特的氣候 與地質條件賦予無錫毫茶卓越的品質，其外形多白毫、肥壯卷曲、香高、色綠、味醇厚，曾多 次榮獲"中茶杯"名優(yōu)茶評比金獎，并于2010年被認定為無錫市非物質文化遺產。近年來， 在高額利潤的驅動下國內市場上充斥著大量假冒無錫毫茶，嚴重制約了無錫毫茶的市場化 進程，也影響了正規(guī)無錫毫茶廠家的利益。但是目前尚沒有無錫毫茶真?zhèn)舞b別方法的論文 或專利公開。
[0003] 指紋圖譜技術是國際上公認的中藥質量控制的最有效手段，但其在茶葉中的應用 尚處于起步階段。本發(fā)明將GC-MS分析與化學計量學數(shù)據(jù)處理方法相結合，建立無錫毫茶 香氣GC-MS指紋圖譜用于無錫毫茶摻假檢測，方法簡便、靈敏且重復性好，可為地方標志茶 品無錫毫茶的質量檢測方法和質量標準的建立提供科學依據(jù)與參考，從而維護無錫毫茶產 品的穩(wěn)定，更好地規(guī)范無錫毫茶市場，維護消費者權益。
【發(fā)明內容】
[0004] 本發(fā)明要解決的技術問題是提供一種準確、靈敏且簡便，可用于無錫毫茶摻假的 檢測方法。
[0005] 本發(fā)明的技術方案是：一種基于指紋圖譜的無錫毫茶摻假的檢測方法，首先，構建 無錫毫茶香氣GC-MS標準指紋圖譜，包括無錫毫茶香氣的提取、GC-MS指紋分析及其標準指 紋圖譜的確定； 然后，根據(jù)無錫毫茶香氣GC-MS標準指紋圖譜的獲得方法，測定模擬摻假樣品的香氣 組成； 最后，根據(jù)無錫毫茶樣品和模擬摻假樣品香氣組分的相對含量組成的矩陣，應用化學 計量學方法(夾角余弦相似度法或聚類分析法）進行分析，判定待測樣品是否摻假。
[0006] 本發(fā)明的具體步驟為： (1)構建無錫毫茶香氣GC-MS標準指紋圖譜，提取若干批次不同來源的當年產正宗無 錫毫茶樣品香氣后進行香氣成分的GC-MS指紋分析，并確定共有特征峰，具體包括如下步 驟： (a)無錫毫茶香氣的提?。簾o錫毫茶香氣的提?。簩o錫毫茶粉碎，過40~100目篩，稱 取2.0g樣品于15mL頂空瓶中，密封瓶口，置于40°C~90°C水浴鍋內預熱2~8min后，將 老化好的固相微萃取頭插入頂空瓶頂空部分，吸附30~50min后抽回，立即插入GC-MS儀的 GC進樣口，于250°C解吸3min，進行數(shù)據(jù)采集分析； (b)GC-MS分析：GC條件：DB-WAX色譜柱（30mXO. 25mmXO. 25μπι);載氣He，流速為 0. 8mL/min，不分流進樣；進樣口溫度250°C;程序升溫：柱溫起始溫度45°C，維持2min，隨 后以8°C/min升溫至80°C，接著以5°C/min升溫至150°C，再以10°C/min升溫至230°C， 維持10min;MS條件：接口溫度250°C，離子源溫度200°C，電離方式ΕΓ，電子能量70eV， 燈絲發(fā)射電流為200μΑ，掃描范圍35~450amu; (c) 標準指紋圖譜的確定：通過4個不同來源的18個無錫毫茶樣品中提取得到的香氣 成分的GC-MS分析測定，比較其色譜圖，確定共有特征峰，得到由其共有特征峰構成的無錫 毫茶香氣GC-MS標準指紋圖譜； 共有特征峰有35個，以18號峰為參照的相對保留時間RT的相對標準偏差RSD均小于 1%;其中： 1號峰平均RT為0. 14,RSD為0. 27% ; 2號峰平均RT為0. 36,RSD為0. 10% ; 3號峰平均RT為0. 48,RSD為0. 10% ; 4號峰平均RT為0. 56,RSD為0. 82% ; 5號峰平均RT為0. 57,RSD為0. 16% ; 6號峰平均RT為0. 62,RSD為0. 23% ; 7號峰平均RT為0. 63,RSD為0. 14% ; 8號峰平均RT為0. 69,RSD為0. 25% ; 9號峰平均RT為0. 72,RSD為0. 05% ; 10號峰平均RT為0. 76,RSD為0. 05% ; 11號峰平均RT為0. 77,RSD為0. 10% ; 12號峰平均RT為0. 78,RSD為0. 16% ; 13號峰平均RT為0. 85,RSD為0. 30% ; 14號峰平均RT為0. 87,RSD為0. 40% ; 15號峰平均RT為0. 89,RSD為0. 71% ; 16號峰平均RT為0. 93,RSD為0. 18% ; 17號峰平均RT為0. 96,RSD為0. 04% ; 18號峰平均RT為1. 00,RSD為0% ; 19號峰平均RT為1. 02,RSD為0. 60% ; 20號峰平均RT為1. 07,RSD為0. 24% ; 21號峰平均RT為1. 13,RSD為0. 62% ; 22號峰平均RT為1. 16,RSD為0. 62% ; 23號峰平均RT為1. 30,RSD為0. 72% ; 24號峰平均RT為1. 31，RSD為0. 80% ; 25號峰平均RT為1. 32,RSD為0. 40% ; 26號峰平均RT為1. 39,RSD為0. 62% ; 27號峰平均RT為1. 40,RSD為0. 10% ; 28號峰平均RT為1. 41，RSD為0. 05% ; 29號峰平均RT為I. 43,RSD為0. 08% ; 30號峰平均RT為1. 46,RSD為0. 06% ; 31號峰平均RT為1. 49,RSD為0. 12% ; 32號峰平均RT為1. 50,RSD為0. 08% ; 33號峰平均RT為L57,RSD為0· 10% ; 34號峰平均RT為1. 66,RSD為0. 10% ; 35號峰平均RT為1. 85,RSD為0. 10% ; 待測樣品與標準指紋圖譜對比，根據(jù)其相對含量組成的矩陣，應用夾角余弦相似度法 或聚類分析法進行分析，判定待測樣品是否摻假； 夾角余弦相似度法分析： 根據(jù)35個共有特征峰的平均相對含量組成的矩陣進行相似度分析，若相似度高于 0. 80,則該待測未知茶樣為無錫毫茶，否則為摻假茶；計算公式為：
【權利要求】
1. 一種基于指紋圖譜的無錫毫茶摻假的檢測方法，其特征在于，包括以下步驟： (1) 構建無錫毫茶香氣GC-MS標準指紋圖譜，提取若干批次不同來源的當年產正宗無 錫毫茶樣品香氣后進行香氣成分的GC-MS指紋分析，并確定共有特征峰； (2) 采用步驟（1)中的無錫毫茶香氣GC-MS標準指紋圖譜的獲得方法，測定無錫毫茶未 知樣品的香氣成分的GC-MS色譜圖； (3) 將步驟（2)獲得的無錫毫茶未知樣品的香氣成分的GC-MS色譜圖與步驟（1)得到 的標準指紋圖譜進行比較，根據(jù)它們的相對含量組成的矩陣，進行相似度分析或進行聚類 分析，判定無錫毫茶未知樣品是否摻假。
2. 根據(jù)權利要求1所述的基于指紋圖譜的無錫毫茶摻假的檢測方法，其特征在于，所 述步驟（3)中相似度分析，采用夾角余弦法，根據(jù)35個共有特征峰的平均相對含量組成的 矩陣進行相似度分析，若相似度高于〇. 80,則該待測未知茶樣為無錫毫茶，否則為摻假茶； 計算公式為：
式（1)中A為某個待測未知茶樣對應香氣組分的相對含量，B,為標準指紋圖譜中對應 香氣組分的平均相對含量。
3. 根據(jù)權利要求1所述的基于指紋圖譜的無錫毫茶摻假的檢測方法，其特征在于，所 述步驟（3)中聚類分析，采用歐式里德距離Euclidean計算無錫毫茶樣品間距離，根據(jù)待測 未知茶樣間距離遠近使用Ward法對樣本進行分類，均值為1作為標準化處理，進行聚類分 析，設定18號峰為參照峰，以35個共有特征峰的平均相對含量組成的矩陣進行聚類分析， 其中18號峰作為參照峰，其平均RT為1. 00,RSD為0 %。
【文檔編號】G01N30/02GK104483412SQ201410835638
【公開日】2015年4月1日 申請日期:2014年12月30日 優(yōu)先權日:2014年12月30日
【發(fā)明者】李明, 曹光群, 楊成, 曾茜 申請人:江南大學