17%和 42% ±14% )。
[003引圖5CAR.CD138叮細胞祀向CD138+腫瘤細胞系。在標準51Cr釋放試驗（A，D)中，來 自健康供體的表達CAR.CD138的T細胞（在10:1E:T比例下分別為31% ±8%、30% ±8%、 39% ±7%和65% ±13%)W明顯比對照T細胞（在10:1E:T比例下分別為9% ±2%、7% ±6%、2% ±6%和5% ±2%)高的比例裂解CD138+MM-衍生的細胞系U266、RPMI-8266、 0PM-2和匪.1S。當從匪患者生成轉導的T細胞時，觀察到相似的殺傷圖案。相反，CAR. CD138+T細胞具有針對CD138-祀標（拉吉、ARH-77和K562)的可忽略活性（A、B、D)。對照 T細胞也觀察到可忽略的殺傷（C)。（D)顯示了至少5次獨立實驗的的匯總+SD。
[0037]圖6.CAR. CD138叮細胞在共培養(yǎng)實驗中消除CD13削中瘤細胞。（A)為了評價CAR. CD138+消除CD138+腫瘤細胞的長期能力，在沒有外源性細胞因子的情況下，CAR+或對照T 細胞與〔0138+扣266，1?口]\〇-8266,0口]\1-2和11.1巧或〔0138-(拉吉或4冊77)腫瘤細胞共培 養(yǎng)，并且在5-7天后通過FACS分析對殘留腫瘤細胞進行計數(shù)。在沒有CAR+T細胞的情況下， CD138+腫瘤完全消除，而腫瘤細胞在含對照T細胞的培養(yǎng)中過度生長扣266:57% ±18% ; RPMI:29% ±13%;0PM-2:63% 1S:67% ±1%)。相反，觀察到缺少針對CD138- 祀細胞的抗腫瘤效果。度）顯示了 5次獨立實驗的的匯總±SD。
[003引 圖7.CAR.CD138叮細胞顯示響應腫瘤細胞的Thl概況。為了評價CAR.CD138+的細 胞因子概況，〔4護或對照1'細胞與〔0138 +扣266、1?^1-8266、0口]\1-2和11.1巧或〔0138-(拉 吉）腫瘤細胞共培養(yǎng)。在24小時后收集培養(yǎng)上清并分析Thl和Thl細胞因子的存在。
[0039] 圖8.CAR.CD138+T細胞祀向推定的癌癥干細胞為了確保該方法也可祀向推定的癌 癥干細胞，通過由RPMI-8266腫瘤細胞中含有的SP細胞研究CD138的表達，然后監(jiān)測該亞 組是否也可被CAR+T細胞有效消除。在與對照T細胞的共培養(yǎng)中，不僅RPMI-8266細胞仍 然存在（73% ±7%)，平均6% (范圍為0.11%至26. 7%)的SP細胞也仍然存在（A，B)。 相反，在與CAR+T細胞的培養(yǎng)中，RPMI細胞明顯減少（11% ±10% )并且沒有可檢測的SP 細胞化04% ±0. 07% ) (A，B)。為了進一步確認運一能力，直接從RPMI細胞系中分選SP 細胞并與對照或CAR+T細胞培養(yǎng)（C)。僅在轉導的T細胞存在下，SP細胞分選的細胞被完 全消除。顯示了2個代表性共培養(yǎng)實驗。
[0040] 圖9.CAR.CD138叮細胞祀向原發(fā)性骨髓瘤細胞。（A)與對照T細胞相反，從健康 供體生成的CAR+T細胞成功地消除了來自匪患者的CD138選擇的腫瘤細胞（<80%倍數(shù)降 低）。做類似地，自體同源CAR+T細胞與對照T細胞（2% ±2% )相比消除了原發(fā)性匪細 胞（37% ±14% ) (90% ±10%倍數(shù)降低）。似運些實驗中的細胞因子概況與Thl-致。 [00川圖10.CAR.CD138叮細胞具有體內(nèi)抗腫瘤活性。NSG小鼠接受靜脈內(nèi)給予4xl06個 蛋火蟲巧光素酶標記的0PM-2細胞，之后是3次用CAR.CD138+T細胞的靜脈內(nèi)輸注（IxlO7)。 在第23天開始進行Cioluminescent成像度LI)W監(jiān)測腫瘤生長。（A)由BLI測定每只小 鼠的平均光子/sec/cm7sr，比較用對照T細胞（NT，η= 11，黑色圓點）或CAR.CD138叮細 胞（η= 11，灰色方塊）處理的小鼠。在第59天時的平均值+SEM，*p= 0. 05。3次獨立 實驗的匯總。（D)用CAR.CD138叮細胞或對照T細胞處理的小鼠的卡普蘭-邁耶存活曲線 (f)<0. 01)。
[0042] 圖11.低氧誘導型CAR.CD138化RE.CAR.CD138)的生成和功能。（A)在逆轉錄病毒 載體中編碼的HRE.CAR.CD138的示意圖。度）對照、組成型CAR.CD138+或HRE.CAR.CD138叮 細胞在正常氧（20%氧壓）或低氧（1%氧壓）下與CD138+祀標扣266)共培養(yǎng)。在培養(yǎng)4 天后，收集細胞并用CD3和CD138染色W評價腫瘤細胞的生長。也評價T細胞上CAR的表 達。HRE.CAR.CD138叮細胞在低氧條件下消除腫瘤細胞。似對照、組成型CAR.CD138+或 HRE.CAR.CD138+T細胞用CS陽標記并在正常氧（20%氧壓）或低氧（1%氧壓）下與CD138+ 祀標扣266)共培養(yǎng)。在4天的培養(yǎng)后，收集細胞，用CD3染色并通過流式細胞術測量CSFE 的稀釋。HRE.CAR.CD138叮細胞在低氧條件下增殖。
[004引發(fā)明詳述
[0044] 與長期存在的專利法慣例一致，本說明書（包括權利要求）中使用的單詞"一"和 "一個"與單詞包括一致，表示"一種或多種"。本發(fā)明的一些實施方式可能由一個或多個本 發(fā)明的元素、方法步驟和/或方法組成或基本由其組成?？紤]到本文所述的任意方法或組 合物可相對于本文所述的任意其他方法或組合物實施。
[0045] 本文所用術語"含氧量低"是指20%氧壓并且本文所用的"低氧"是指1%氧壓。 在【具體實施方式】中，生理組織低氧被認為低于約60mmHg。
[004引 I. 一般實施方式
[0047] 在本發(fā)明的實施方式中，存在用于治療CD138-表達癌細胞的方法和組合物。在
【具體實施方式】中，癌癥是血液惡性腫瘤，如多發(fā)性骨髓瘤（MM)，或實體瘤，如乳腺癌，W及幾 乎為不變地含氧量低的實體瘤。該方法和組合物設及提供向特定需要的組織或細胞遞送 治療，但不向CD138-表達的非癌細胞遞送治療的處理。該方法和組合物設及提供向表達 CD138的癌組織或細胞遞送治療但不向表達CD138但不需要癌癥治療的細胞遞送治療的處 理。在特定實施方式中，該治療在低氧的組織或環(huán)境中有效并且該治療在正常氧的組織或 環(huán)境中無效。在本發(fā)明的方面中，治療在低氧的組織或環(huán)境中有效并且在正常氧的組織或 環(huán)境中無效，因為治療部分并不存在于正常氧的組織或環(huán)境中。在一些情況中，細胞治療可 在低氧的組織或環(huán)境中有效并且在正常氧的組織或環(huán)境中無效，因為細胞在正常氧組織或 環(huán)境中缺少治療部分的表達，但是運種表達存在于低氧組織或環(huán)境中。在本發(fā)明的實施方 式中，治療部分包含至少CD138抗原特異性CAR?？捎靡簿哂薪M織特異性或環(huán)境特異性表達 的響應部分祀向其它組織特異性抗原。
[0048] 本發(fā)明的特定方面對已知患有MM、疑似患有MM或處于發(fā)生MM風險的個體提供了 針對MM的治療。在一些情況中，可通過除了CD138-陽性癌細胞的鑒定W外的方式確定個 體患有MM。在特定實施方式中，已經(jīng)或正向個體提供針對MM的治療。一開始或在治療一段 時間之后，個體可能耐受一種或多種任意類型的MM治療（除本發(fā)明W外）。
[0049] 本發(fā)明的特定方面向已知患有乳腺癌、疑似患有乳腺癌或處于發(fā)生乳腺癌風險 (如具有一種或多種指示性遺傳標記物或家族或個人病史）的個體提供了針對乳腺癌的治 療。在一些情況中，可通過除了CD138-陽性癌細胞的鑒定W外的方式確定個體患有乳腺 癌。在特定實施方式中，已經(jīng)或正向個體提供針對乳腺癌的治療。一開始或在治療一段時 間之后，個體可能耐受一種或多種任意類型的乳腺癌治療（除本發(fā)明W外）。
[0050] 盡管在針對MM的治療選擇中有顯著的改善，該疾病仍然是基本無法治愈的。具體 地，發(fā)明人和其它人已經(jīng)證明表達祀向腫瘤相關抗原（TAA)的嵌合抗原受體（CAR)并包含 充足的共刺激內(nèi)結構域的T細胞是治療B系血液惡性腫瘤的有吸引力的方式。由于惡性淋 己瘤細胞（PC)表達高水平的CD138抗原，它們可被重定向W祀向該抗原的T細胞有效消 除是合乎邏輯的。事實上，在初始研究中，CD138-特異性CAR(CAR.CD138)已經(jīng)顯示出針對 CD138+腫瘤細胞的有用活性。使用CD138的一個注意之處在于，抗原也W低水平在上皮細 胞、間充質(zhì)細胞、血管平滑肌細胞、內(nèi)皮細胞和神經(jīng)細胞的基底側表面上表達，例如，增加了 CAR-修飾的T細胞的毒性"命中祀標"但"脫離器官"或"脫離組織"的風險。因此，在本發(fā) 明的【具體實施方式】中，可通過在低氧應答元件的誘導型控制下表達CAR.CD138來探索正常 的MM骨髓度M)微環(huán)境的低氧性質(zhì)。也可限定在體外和體內(nèi)的低氧環(huán)境，如在異種移植小 鼠模型中用于CAR-修飾的T細胞的共刺激的最優(yōu)選免疫元件。最后，為了進一步提高本發(fā) 明的實施方式的安全性，可在構建體中加入自殺基因，如基于誘導型脫冬酶9 (iC9)的先前 驗證的自殺基因。運一策略使得CAR-修飾的T細胞的快速消融應該W比預期更大的數(shù)量 逃離低氧BM環(huán)境并保留充足的功能性CAR表達W造成"命中祀標"但"脫離器官"的毒性。 在某些方面中，可制備臨床級逆轉錄病毒載體并從MM患者中制備CAR-修飾的自體同源T 細胞系，并將運些細胞輸注到在一期臨床試驗中招募的患有復發(fā)的MM的患者中。在某些情 況中，可評價過程的安全性，輸注的T細胞的體內(nèi)存活，和運些細胞在BM中的積累W及外周 血（PB)對比BM中T細胞的CAR差異表達。如果存在毒性，可確定iC9安全性基因的體內(nèi) 活性。也可評價τ-細胞輸注是否在患有可檢測疾病的患者中提供疾病控制。
[0051] 本發(fā)明的目的是通過在低氧應答元件（HRE)的誘導型控制下表達CAR.CD138來探 索MMBM微環(huán)境的低氧性質(zhì)。也可在異種移植小鼠模型中限定在體外和體內(nèi)的低氧環(huán)境中 用于CAR-修飾的T細胞的共刺激的最優(yōu)選免疫元件。最后，為了進一步提高所述方法的安 全性，可基于誘導型脫冬酶9(iC9)在構建體內(nèi)納入先前驗證的自殺基因。在某些實施方 式中，可使用小分子（例如AP1903)使誘導型脫冬酶9(iCaspase9)二聚化。參見，例如， Straathof等，Blood105:4247-4254(2005)〇
[005引可從匪患者制備臨床級載體（如逆轉錄病毒載體）和CAR-修飾的T-細胞系并 將其輸注到患有復發(fā)的MM的患者中?？稍u價過程的安全性，并且，如果出現(xiàn)毒性，可給予二 聚體藥物W激活體內(nèi)的iC9安全性基因。也可評價T-細胞輸注是否在患有可檢測疾病的 患者中提供疾病對照。
[005引本發(fā)明的目的是通過測量其體內(nèi)存活來表征輸注的CAR-T細胞的命運，W及二聚 化藥物在體外和（如果臨床顯示）體內(nèi)對運些細胞的后續(xù)影響。也可比較運些細胞在BM 和外周血中的累積，各環(huán)境中T細胞的CAR差異表達W及它們殺死腫瘤細胞的能力?？上?有此需求的個體臨床上提供細胞W及適當時的二聚化藥物。
[0054] 本發(fā)明的實施方式將通過疫苗接種在MM患者中引發(fā)生存素特異性CTL。在補充的 方法中，本發(fā)明提供了祀腫瘤PC，在血液惡性腫瘤中利用CAR技術。
[00巧]II.血液惡性腫瘤
[0056] 血液惡性腫瘤包括影響血液、骨髓和淋己結的癌癥類型。它們可衍生自兩種主要 的血細胞系之一：骨髓或淋己細胞系。骨髓細胞系通常產(chǎn)生粒細胞、紅細胞、凝血細胞、巨隧 細胞和肥大細胞；淋己細胞系產(chǎn)生B細胞、T細胞、NK細胞和漿細胞。淋己瘤、淋己細胞性 白血病和骨髓瘤來自淋己細胞系，而急性和慢性骨髓性白血病、骨髓發(fā)育異常綜合征和骨 髓增生疾病的來源是骨髓。在某些實施方式中，可用本發(fā)明的方法和/或組合物治療任意 運些血液惡性腫瘤。
[0057] 可用本發(fā)明的方法和組合物治療多發(fā)性骨髓瘤（MM，其也稱為漿細胞骨髓瘤或卡 勒氏?。?。MM是漿細胞的癌癥，其是正常情況下負責產(chǎn)生抗體的一種類型的白細胞。在MM 中，骨髓中多個異常漿細胞聚積，其在那里破壞正常血細胞的產(chǎn)生。可W多種方式診斷MM， 如通過血液檢查（例如，血清蛋白質(zhì)電泳或無血清K/λ輕鏈試驗）、骨髓檢查、尿蛋白質(zhì)電 泳和通常設及骨的X-射線。雖然被認為無法治愈，可用類固醇、化療、蛋白酶體抑制劑（例 如，棚替佐米）、免疫調(diào)節(jié)藥物（IMiD)如沙利度胺或來那度胺、放射和/或干細胞移植進行 治療。某些癥狀包括，例如，升高的巧、腎衰竭、貧血和/或骨損傷。本發(fā)明的治療可用于一 期、二期或Ξ期MM。MM的病情檢查的部分可包括例如，無血清輕鏈試驗、骨骼檢查、骨髓活 檢和/或IgG的定量測量。
[005引除了本發(fā)明的實施方式W外，可向患有匪的人提供高劑量化療和自體同源造血 干細胞移植，尤其是如果個體的年齡在65歲W下。在干細胞移植之前，運些個體可接受誘 導化療的初步療程，如沙利度胺、地塞米松、基于棚替佐米的方案、來那度胺或其組合?？刹?用自體同源或同種異體干細胞移植（ASCT)?？捎妹婪▉?、氯潑尼松、棚替佐米、美法侖、來那 度胺或其組合來治療65歲W上的個體。
[0059]III.CD138
[0060]CD138(也稱為多配體聚糖-1)是人中由SDCl基因編碼的蛋白質(zhì)。例如， 技曼成沒址黎登錄號BC008765提供了示例性CD138多核巧酸并且G州登錄號 AA冊8765提供了示例性CD138多膚，兩者都通過引用全文納入本文。本領域技術人員可使 用運類序列來生成，例如CD138-特異性CAR分子。
[0061]IV.嵌合抗原受體（CAR)
[0062] 在一些情況中，細胞經(jīng)修飾表達CD138-特異性CAR。使人T淋己細胞表達腫瘤介導 的嵌合抗原受體（CAR)的遺傳工程改造可產(chǎn)生抗腫瘤效應細胞，其疏通了腫瘤免疫逃逸機 審IJ，運是由于蛋白質(zhì)-抗原加工和呈遞中的異常。此外，運些轉基因受體可導向非蛋白來源 的腫瘤相關抗原。在本發(fā)明的某些實施方式中，存在經(jīng)修飾W包含至少CAR的CTL。在具體 方面中，特定細胞包含兩種或更多種CD138-特異性識別部分，包括兩種或更多種CD138-特 異性CAR的表達。
[0063] 本發(fā)明包括人工T細胞受體，其稱為CAR(其也可稱為嵌合T細胞受體或嵌合免疫 受體）。在本發(fā)明的實施方式中，其對于CD138是特異性的。CAR-般可包括胞外結構域、 跨膜結構域和內(nèi)結構域。在【具體實施方式】中，其可W是第一代、第二代或第Ξ代。
[0064] 在特定情況中，免疫細胞包括嵌合、非天然、至少部分人工工程改造、并導向CD138 的CAR。在特定情況中，工程改造的CAR具有1個、2個、3個、4個或更多個組件，并且在一 些實施方式中，運一個或多個組件促進T淋己細胞祀向或結合包含腫瘤抗原的癌細胞。在
【具體實施方式】中，CAR包含針對腫瘤抗原的抗體、胞質(zhì)信號傳導結構域的部分或全部、和/ 或一個或多個共刺激分子的部分或全部，例如共刺激分子的內(nèi)結構域。在特定實施方式中， 該抗體是單鏈可變區(qū)片段（scFv)。在某些方面中，抗體導向例如，表達CD138的癌細胞的 細胞表面上的祀抗原。在某些實施方式中，采用胞質(zhì)信號傳導結構域，如衍生自T細胞受體 ζ-鏈的那些作為嵌合受體的至少一部分W產(chǎn)生刺激信號供于T淋己細胞增殖和效應功能 隨后接合嵌合受體與祀抗原。示例可包括但不限于，來自共刺激分子如CD27、CD28、4-1BB 和0X40或細胞因子受體如IL7和IL15的信號傳導組分的內(nèi)結構域。在特定實施方式中，采 用共刺激分子來增強抗原接合后由CAR產(chǎn)生的T細胞的激活、增殖和細胞毒性。在具體實施 方式中，共刺激分子是CD28、0X40和4-1BB，并且細胞因子和細胞因子受體是IL7和IL15。
[0065] 通常，CAR的胞外結構域包含信號膚、抗原識別結構域和連接抗原識別結構域到 跨膜結構域的間隔子?？乖R別結構域通常會包含針對CD138有特異性的單鏈可變片段 (scFv)。然而，在相同細胞中存在兩種或更多種CAR的情況中，第二CAR包含針對選自下 組的抗原有特異性的scFv:例如，黑色素瘤-相關抗原（MAGE)，黑色素瘤的優(yōu)先表達抗原 任^16)、生存素、〔019、〔020、〔022、4-輕鏈、〔030、〔033、〔0123、〔038、1?01?1、6^82、6^83/4、 EGFrVIII、癌胚抗原、EGP2、EGP40、間皮素、TAG72、PSMA、NKG2D配體、B7-冊、比-13 受體 a2、MUC1、MUC16、CA9、GD2、GD3、HMW-MAA、CD171、LewisY、G250/CAIX、HLA-AIMAGEA1、 HLA-A2NY-ES0-1、PSCI、葉酸受體-a、CD44v6、CD44v7/8、8H9、NCAM、VEGF受體、5T4、胎牛 AchR、NKG2D配體或CD44v6。
[0066] 胞外結構域的較鏈的示例包括免疫球蛋白的C肥C冊區(qū)，IgGl的較鏈區(qū)和CD3部 分?？缒^(qū)可W是任意類型，雖然在一些情況中，其可W是CD28。
[0067] 通常，在抗原識別和受體聚類之后，采用本發(fā)明的CAR的內(nèi)結構域來進行細胞內(nèi) 信號傳輸。最常用的內(nèi)結構域組件是CD3-C，其含有3個ITAM并且在抗原結合之后將激活 信號傳輸?shù)溅蛹毎?。在一些情況中，采用其它共刺激信號傳導，如CD3-ζ與CD28、4-1BB和 /或0X40的組合。
[006引V.自殺基因
[0069] 在本發(fā)明的實施方式中，在特定表達載體中采用自殺基因來使細胞通過在例如所 需的時間點或位置或生理事件處通過調(diào)亡來自殺。自殺基因可存在于與CD138-CAR載體相 同的表達載體上。雖然自殺基因是本領域已知并常規(guī)使用的，在【具體實施方式】中，本發(fā)明中 使用的自殺基因是脫冬酶9、單純瘤疹病毒、胸巧激酶化SV-tk)、胞喀晚脫氨酶（CD)或細 胞色素P450。在具體方面中，使用二聚化的特定化學誘導劑（CID)可誘導并激活自殺基因 (Ramos等，2010)。
[0070]VI.低氧應答調(diào)控元件
[0071] 本發(fā)明的實施方式采用允許對治療細胞的活性進行環(huán)境控制的調(diào)控元件，包括控 制治療細胞中人工抗原受體的表達。在【具體實施方式】中，W環(huán)境或組織特異性的方式調(diào)控 CAR的表達，如存在低氧下或在低氧組織中。運一個或多個元件用于編碼CD138-特異性CAR 的表達載體中并且在功能上與編碼CD138-特異性CAR的序列相關。功能上相關可表示運 一個或多個元件被設置成合適的方式W能夠調(diào)節(jié)編碼CD138-特異性CAR多膚的序列的表 達。在一些實施方式中，通過在正常氧環(huán)境中限定的運類元件完全不能影響CD138-特異性 CAR的轉錄或影響可忽略不計。
[0072] 可采用的示例性HRE包括序列NCGTG，例如，在【具體實施方式】中，該序列隨機重復， 如至少6次，雖然其可W是7、8、9、10或更多次。
[007引VII.接合分子
[0074] 在本發(fā)明的一些實施方式中，也修飾包含CD138-特異性CAR的本發(fā)明的細胞W表 達接合分子。在特定實施方式中，運類細胞能夠分泌雙特異性T細胞接合分子。特定實施 方式中的雙特異性包含存在激活結構域和抗原識別結構域?？乖R別結構域結合在祀細胞 中或其上存在或由其分泌的分子，并且激活結構域結合T-細胞、NK-細胞或NKT-細胞上存 在的細胞表面受體，其引發(fā)最終激活受體細胞的過程。結合結構域和抗原識別結構域可W 是任意類型，但在【具體實施方式】中，一個scFv針對介導激活的細胞表面分子有特異性并且 其它scFv對所選的特定腫瘤抗原有特異性，包括CD138或另一種腫瘤抗原。可調(diào)整腫瘤抗 原的特定scFvW識別具有特定腫瘤抗原的相應癌細胞。
[0075] 在特定方面中，接合分子包含結合免疫細胞表面（或工程改造的免疫細胞表面） 上的激活分子的激活結構域，和結合祀細胞抗原（例如，腫瘤細胞或癌細胞表面上表達的 抗原）的抗原識別結構域。
[0076] 接合物可W是兩部分的（例如，包含激活結構域和抗原識別結構域，其可任選地 由接頭連接），或可W是Ξ部分或多部分的（例如，包含一個或多個激活結構域和/或抗原 識別結構域，或其它結構域）。在【具體實施方式】中，接合物的激活結構域是或包含抗體或其 抗原結合片段或部分，例如，單鏈可變片段（scFv)。在其他【具體實施方式】中，抗原識別結構 域是或包含抗體或抗原結合片段或其部分，例如，單克隆抗體或scFv，或者其可包含配體、 膚、可溶性T-細胞受體或其組合。在某些實施方式中，激活結構域和抗原識別結構域通過 接頭，例如膚接頭連接。
[0077] 本領域技術人員識別具有不同激活受體的免疫細胞，W及接合物對正在激活的細 胞進行調(diào)節(jié)。例如，CD3是Τ-細胞上的激活受體，而CD16、NKG2D或NKp30是NK細胞上的激 活受體，并且CD3或非變異TCR是NKT-細胞上的激活受體。因此，激活T-細胞的接合分子 可具有與激活NK細胞的接合分子不同的激活結構域。在【具體實施方式】中，例如，在免疫細 胞是T-細胞的情況中，激活分子是W下中的一種或多種：CD3,例如CD3丫、CD3δ或CD3ε; 或者CD27、CD28、CD40、CD134、CD137和CD278。在其他【具體實施方式】中，例如，在免疫細胞 是ΝΚ細胞的情況中，激活分子是CD16、NKG2D或ΝΚρ30,或者在免疫細胞是ΝΚΤ-細胞的情 況中，激活分子是CD3或非變異TCR。
[0078] 在某些其他實施方式中，接合物還包含一種或多種輔助結構域，例如，一種或多種 細胞因子、共刺激結構域、抑制Τ-細胞激活的負調(diào)控分子的結構域或其組合。在具體實施 方式中，細胞因子是IL-15、IL-2和/或IL-7。在其他【具體實施方式】中，共刺激結構域是 CD27、CD80、CD86、CD134或CD137。在其他【具體實施方式】中，抑制Τ-細胞激活負調(diào)控分子 的結構域是PD-1、PD-L1、CTLA4 或Β7-Η4。
[0079] 在一些情況中，接合物的scFv對W下有特異性：^)Μ2、CD19、8H9、CAIX、CD20、 CD30、CD33、CD44、CD70、CD123、CD138、EGFR、EGFRvIII、EGP2、EGP40、EPCAM、化hA2、 ERBB2(肥R2)、ERBB3、ERBB4、FAP、FAR、FBP、GD2、GD3、HLA-Al+MAGEl、ILllRa、IL13Ra2、 K-輕鏈、邸R、λ化ambda)、Lewis-Y、MCSP、間皮素、Mucl、NCAM、NKG2D配體、TAG72、TEMl、 TEM8、CEA、PSCA和PSMA。
[0080]VIII.病毒特異性
[0081] 在本發(fā)明的實施方式中，C