本發(fā)明屬于藥物化學(xué)
技術(shù)領(lǐng)域：
，特別涉及一種新的燈盞花乙素晶型和該晶型的制備方法。
背景技術(shù)：
：燈盞花為菊科植物短葶飛蓬erigeronbreviscapus(vant.)hand-mazz的干燥全草，主要分布于云南省，首載于《滇南本草》，用于治療中風(fēng)后遺癥、風(fēng)濕、胸痹等癥。二十世紀(jì)七十年代經(jīng)學(xué)者研究從中分離的燈盞花乙素(即野黃芩苷，scutellarin，cas號(hào)為27740-01-8)為治療中風(fēng)的有效成分。由于燈盞花乙素固有的面型分子結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致該化合物水溶性和脂溶性均較差。在日常注射劑生產(chǎn)過(guò)程中，采用堿性水溶液與燈盞花乙素分子中葡萄糖醛酸上的羧基成鹽，最終溶解成水溶液。小體積配制燈盞花乙素水溶液過(guò)程因燈盞花乙素的溶解度差和溶解速度慢的理化性質(zhì)還不會(huì)對(duì)注射劑產(chǎn)品質(zhì)量構(gòu)成威脅和生產(chǎn)過(guò)程造成不方便。但是，工業(yè)化大規(guī)模配液生產(chǎn)燈盞花乙素注射劑的過(guò)程中，因燈盞花乙素溶解度差和溶解速度慢將導(dǎo)致整個(gè)配液時(shí)間顯著延長(zhǎng)，并因此帶來(lái)燈盞花乙素長(zhǎng)期在堿性水溶液中產(chǎn)生降解產(chǎn)物，最終反映在產(chǎn)品質(zhì)量上有關(guān)物質(zhì)偏高，生產(chǎn)過(guò)程較長(zhǎng)。有必要研究一種新的燈盞花乙素結(jié)晶形式，可以使燈盞花乙素在堿性水溶液中的溶解速度加快。中國(guó)專(zhuān)利cn200910164855.7公開(kāi)了燈盞花乙素結(jié)晶i及其制備方法，提供了結(jié)晶溶劑量少，生產(chǎn)成本低，易工業(yè)化生產(chǎn)，收率高的燈盞花乙素結(jié)晶i及其制備方法。制得的結(jié)晶形態(tài)的燈盞花乙素與現(xiàn)有燈盞花素相比，具有純度高，使用更安全，大規(guī)模生產(chǎn)或配制成治療用制劑所需要的性能，對(duì)光、濕、熱等穩(wěn)定，在堿性溶液中更加穩(wěn)定，便于工業(yè)化生產(chǎn)、儲(chǔ)存。cn201410269593.1公開(kāi)了燈盞花乙素二水合物結(jié)晶ii及其制備方法，提供了一種合成的高純度燈盞花乙素二水合物結(jié)晶ⅱ，與不含結(jié)晶水的植物提取燈盞花乙素和已經(jīng)報(bào)道的燈盞花乙素結(jié)晶ⅰ比較具有純度高、穩(wěn)定性好、低引濕性、在水和乙醇中的溶解性好、不會(huì)有潮解現(xiàn)象等優(yōu)點(diǎn)。上述燈盞花乙素相關(guān)晶型專(zhuān)利均未提及燈盞花乙素在堿性水溶液中溶解速度提升的問(wèn)題?？诜腆w藥物被體內(nèi)吸收并發(fā)揮作用取決于藥物活性成分的水溶性和穿透內(nèi)臟粘膜的滲透性，其中溶解為吸收過(guò)程的控制步驟。制藥業(yè)中大約有90％的藥物其活性成分包含在固體顆粒中，在這些固體藥物化合物中約有三分之一不溶于水。水不溶性藥物由于不能有效地溶解于胃腸液，因此，限制了其在人體內(nèi)作用的發(fā)揮。提高藥物的溶解度和溶解速率，已經(jīng)成為制藥業(yè)發(fā)展的一大挑戰(zhàn)。根據(jù)noyes-whitney方程，由于顆粒粒徑減小導(dǎo)致的比表面積增加和高潤(rùn)濕性，可以促進(jìn)顆粒的快速溶解(陳鵬，張小崗.微粉化技術(shù)提高水不溶性藥物溶解度[j].化學(xué)通報(bào).2007，10：766-771)。常用的減小藥物顆粒粒度的方法主要有低溫氣流粉碎法、球磨法、固態(tài)分散法等。前兩種方法一般存在著能耗大、效率低、產(chǎn)品粒度分布寬、易使熱不穩(wěn)定藥物的結(jié)構(gòu)破壞與降解、粉碎過(guò)程中由于粉塵飛揚(yáng)而污染環(huán)境等缺點(diǎn)。而固體分散法雖在一定程度上改善藥物的溶出效果，但操作過(guò)程較復(fù)雜，成本較高(周敏毅，陳建峰，劉曉林.重結(jié)晶法制備微粉化布洛芬的初步探索[j].化工進(jìn)展.2003，22(5)：524-527)。微粉結(jié)晶法是制備微粉化藥物的又一種重要方法，是固體物質(zhì)在一定條件下的容積中析晶時(shí)促使其微粉化的技術(shù)方法，這種方法無(wú)需特殊的粉碎設(shè)備，微粉粒徑絕大部分在50微米以下，而且粒度均一性良好，幅度變化較小(張耿元.替格瑞洛的微粉化及其晶型，以及制備方法和藥物應(yīng)用[p].中國(guó)專(zhuān)利：201410033754.7，2014-01-24)。到目前為止，國(guó)內(nèi)外尚沒(méi)有公開(kāi)通過(guò)微粉化途徑獲得能快速溶解的燈盞花乙素結(jié)晶的報(bào)道。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種新的、溶解速度更快的燈盞花乙素晶型。本發(fā)明的另一目的是提供這種燈盞花乙素晶型的制備方法。本發(fā)明所述的燈盞花乙素晶型，命名為燈盞花乙素晶型ⅲ。本發(fā)明所述的燈盞花乙素晶型ⅲ，使用cu-kα輻射，λ＝1.5405a，以2θ角度表示的x-射線粉末衍射光譜特征如下：2θi/i0％8.0273.149.5113.2710.1836.8514.3437.4616.1810019.131021.1813.8625.8924.7426.8327.6329.0615.9538.7315.0146.5611.09本發(fā)明所述的燈盞花乙素晶型ⅲ，x-射線粉末衍射2θ位置16.18處衍射峰強(qiáng)度為100％。本發(fā)明所述的燈盞花乙素晶型ⅲ的dsc分析吸熱轉(zhuǎn)變溫度為107-137℃。本發(fā)明所述的燈盞花乙素晶型ⅲ的熔融分解溫度為195-201℃。本發(fā)明所提供的燈盞花乙素晶型ⅲ，是一種燈盞花乙素微粉化的晶型，其粒徑在50微米以下，優(yōu)選粒徑在30微米以下，優(yōu)選粒徑在1-20微米，更優(yōu)選1-10微米，而且其粉末的x-射線衍射圖譜與現(xiàn)有的燈盞花乙素結(jié)晶粉末的x-射線衍射圖譜明顯不同。本發(fā)明所述的燈盞花乙素晶型ⅲ的制備方法包括以下步驟：一、將燈盞花乙素加入有機(jī)溶劑中，有機(jī)溶劑的加入量為在室溫至溶劑回流溫度下使燈盞花乙素完全溶解，再將溶解的溶液緩慢加入溶液體積5-12倍的含水溶劑中，并進(jìn)行攪拌，使燈盞花乙素立即析出和分散在含水溶劑中；二、過(guò)濾，分離出固體，減壓干燥，即得微粉化的燈盞花乙素晶型ⅲ。其中，攪拌的速度為500-1500r/min，所述的有機(jī)溶劑是甲醇、乙醇、異丙醇、n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺、二甲亞砜中的一種或多種。所述的含水溶劑是水與上述有機(jī)溶劑的混合溶劑，例如甲醇水溶液、乙醇水溶液或異丙醇水溶液等。所述的含水溶劑中水與有機(jī)溶劑的用量體積比為100：0～40。應(yīng)當(dāng)說(shuō)明的是，上述制備方法中，含水溶劑可以為水或含有水的混合溶劑，當(dāng)水與有機(jī)溶劑的用量體積比為100:0時(shí)，意味著此時(shí)的含水溶劑為水。所述水包括純凈水、蒸餾水、去離子水或注射用水。所述的減壓干燥包括在室溫～60℃任意溫度下的干燥。本發(fā)明所述的燈盞花乙素晶型ⅲ與未微粉化樣品相比，具有在甲醇、乙醇、堿性水溶液等溶劑中的溶解速度更快的優(yōu)點(diǎn)，尤其是在堿性水溶液中溶解速度提升更為明顯。此外，與未微粉化樣品相比，雜質(zhì)較少。提高溶解速度和減少雜質(zhì)，在有些領(lǐng)域或許意義不大，但在制藥領(lǐng)域，提高溶解速度哪怕是較小的數(shù)值都會(huì)帶來(lái)較為重要的結(jié)果，減少雜質(zhì)哪怕是較小的數(shù)值都會(huì)大大提高藥品的安全性。燈盞花乙素作為注射用原料藥，這兩個(gè)數(shù)值的提高，能大大節(jié)省時(shí)間成本、提高產(chǎn)品質(zhì)量，帶來(lái)非常好的臨床效果。溶解速度試驗(yàn)：精密稱(chēng)取燈盞花乙素精制品(未微粉化)和燈盞花乙素晶型ⅲ(微粉化)各3份，每份10mg，在25℃條件下，分別加入堿性水溶液(ph6-8)、甲醇、乙醇適量，超聲使其溶解，記錄溶解時(shí)間。結(jié)果見(jiàn)表1、表2、表3。表1不同燈盞花乙素樣品在100ml不同溶劑中的溶解時(shí)間(min)從表1顯示，燈盞花乙素晶型ⅲ與燈盞花乙素精制品(未微粉化)比較，具有較快的溶解速度。表2不同燈盞花乙素樣品配制200l燈盞花乙素注射制劑溶解時(shí)間(h)樣品名稱(chēng)堿性水溶液(ph6-8)燈盞花乙素精制品(未微粉化)3.0燈盞花乙素結(jié)晶ⅲ(實(shí)施例1)2.5燈盞花乙素結(jié)晶ⅲ(實(shí)施例2)2.8燈盞花乙素結(jié)晶ⅲ(實(shí)施例3)2.7燈盞花乙素結(jié)晶ⅲ(實(shí)施例4)2.8從表2顯示，大規(guī)模配液生產(chǎn)燈盞花乙素注射劑時(shí)，溶解時(shí)間明顯增加，而經(jīng)過(guò)微粉化的燈盞花乙素晶型ⅲ能顯著縮短配液時(shí)間。表3同一批燈盞花乙素樣品經(jīng)微粉化和未微粉化配制200l燈盞花乙素注射制劑有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)結(jié)果樣品名稱(chēng)雜質(zhì)(％)燈盞花乙素精制品(未微粉化)1.4燈盞花乙素結(jié)晶ⅲ(實(shí)施例1)1.2從表3顯示，燈盞花乙素晶型ⅲ與燈盞花乙素精制品(未微粉化)比較，雜質(zhì)明顯減少。附圖說(shuō)明圖1為本發(fā)明所述的燈盞花乙素結(jié)晶ⅲ的x-射線粉末衍射圖。圖2為本發(fā)明所述的燈盞花乙素結(jié)晶ⅲ的dsc圖。圖3為本發(fā)明所述的燈盞花乙素結(jié)晶ⅲ的tg-dta圖。圖4為本發(fā)明所述的燈盞花乙素結(jié)晶ⅲ的hplc圖。具體實(shí)施方式實(shí)施例1：取燈盞花乙素精制品1g加入50ml甲醇中，加熱回流20～25min使其完全溶解，緩慢加入(或滴加)到300ml蒸餾水中，邊滴加，邊攪拌，攪拌速度為800r/min，燈盞花乙素立即析出并分散在水中。過(guò)濾，用蒸餾水?dāng)囅椿驔_洗2-4次，過(guò)濾，30℃下減壓干燥至恒重，即得微粉化的燈盞花乙素結(jié)晶ⅲ，收率90％。取上述粉末進(jìn)行粉末粒徑檢測(cè)，粉末平均粒徑為4-7微米。實(shí)施例2：取燈盞花乙素精制品1g加入45ml甲醇中，加熱回流30min使其完全溶解，緩慢加入(或滴加)到400ml蒸餾水與乙醇的混合溶液(v:v＝360:40)中，邊滴加，邊攪拌，攪拌速度為750r/min，燈盞花乙素立即析出并分散在水中。過(guò)濾，用蒸餾水?dāng)囅椿驔_洗2-4次，過(guò)濾，50℃下減壓干燥至恒重，即得微粉化的燈盞花乙素結(jié)晶ⅲ，收率92％。取上述粉末進(jìn)行粉末粒徑檢測(cè)，粉末平均粒徑為6-8微米。實(shí)施例3：取燈盞花乙素精制品1g加入60ml甲醇與異丙醇的混合溶劑(v:v＝8:2)中，加熱回流30～35min使其完全溶解，緩慢加入(或滴加)到800ml蒸餾水中，邊滴加，邊攪拌，攪拌速度為800r/min，燈盞花乙素立即析出并分散在水中。過(guò)濾，用蒸餾水?dāng)囅椿驔_洗2-4次，過(guò)濾，60℃下減壓干燥至恒重，即得微粉化的燈盞花乙素結(jié)晶ⅲ，收率89％。取上述粉末進(jìn)行粉末粒徑檢測(cè)，粉末平均粒徑為6-9微米。實(shí)施例4：取燈盞花乙素精制品1g加入60ml乙醇中，加熱回流30～35min使其完全溶解，緩慢加入(或滴加)到600ml蒸餾水與異丙醇的混合溶液(v:v＝550:50)中，邊滴加，邊攪拌，攪拌速度為900r/min，燈盞花乙素立即析出并分散在該混合溶液中。過(guò)濾，用蒸餾水?dāng)囅椿驔_洗2-4次，過(guò)濾，45℃下減壓干燥至恒重，即得微粉化的燈盞花乙素結(jié)晶ⅲ，收率87％。取上述粉末進(jìn)行粉末粒徑檢測(cè)，粉末平均粒徑為3-7微米。燈盞花乙素結(jié)晶ⅲ中燈盞花乙素的純度測(cè)定：色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-0.1％磷酸溶液(40:60)為流動(dòng)相；流速為每分鐘1.0ml；柱溫40℃；檢測(cè)波長(zhǎng)335nm。理論板數(shù)按野黃芩苷計(jì)算應(yīng)不低于5000。對(duì)照品溶液的制備取野黃芩苷對(duì)照品10mg，精密稱(chēng)定，置100ml量瓶中，加甲醇70ml，超聲處理(功率300w，頻率50khz)45分鐘，取出，放置室溫，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。供試品溶液的制備取本品10mg，精密稱(chēng)定，置100ml量瓶中，加甲醇70ml，超聲處理(功率300w，頻率50khz)45分鐘，取出，放置室溫，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。雜質(zhì)測(cè)定：取本品適量(相當(dāng)于野黃芩苷20mg)，置50ml量瓶中，加甲醇適量，超聲處理(功率300w，頻率50khz)45分鐘，放至室溫，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。精密量取供試品溶液1ml，置100ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。照[含量測(cè)定]項(xiàng)下的色譜條件，取對(duì)照溶液5μl，注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使主成分色譜峰的峰高為滿(mǎn)量程的10％，再精密量取供試品溶液與對(duì)照溶液各5μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時(shí)間的2.5倍。供試品溶液色譜中，其他成分峰面積的和不得大于對(duì)照溶液主峰峰面積的2倍。當(dāng)前第1頁(yè)12