從雷公藤中制備雷公藤乙素的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于藥物制備領(lǐng)域，特別涉及一種從雷公藤中制備雷公藤乙素的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]雷公藤(Tripteryginum ffilfordii Hook.F)又名黃藤、黃藤木、黃臘藤、黃檀根、斷腸草等，屬衛(wèi)茅科植物。味辛、苦，性涼，有大毒，歸心、肝、脾、腎經(jīng)，有清熱解毒，祛風(fēng)除濕，舒筋活血通絡(luò)，消腫止痛，殺蟲止癢之功。主要分布福建、湖南、江西等地。臨床常用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、慢性腎炎、紅斑狼瘡等難治性免疫功能亢進(jìn)疾病。目前有雷公藤片、雷公藤多苷片、雷公藤內(nèi)酯、雷公藤內(nèi)酯軟膏、雷公藤總萜片等國家藥品標(biāo)準(zhǔn)收載的多個國產(chǎn)藥品品種廣泛應(yīng)用于臨床，療效顯著。
[0003]雷公藤乙素(Tripd1lide)，又名雷公藤內(nèi)酯二醇，是雷公藤中的一種二蔽內(nèi)酯類成分。雷公藤乙素是雷公藤的主要活性成分，也是雷公藤多苷片和雷公藤總萜片的主要有效成分。研究表明雷公藤乙素具有抗炎、免疫抑制、抗腫瘤以及治療糖尿病腎病等作用，具有很好的藥用開發(fā)前景。
[0004]目前關(guān)于雷公藤乙素的制備方法有:雷公藤提取物反復(fù)柱層析制備法，雷公藤提取物高效液相色譜制備法，雷公藤提取物高速逆流色譜制備法等。這些方法有的過程非常復(fù)雜、提取制備效率低，有的產(chǎn)品純度不高、得率低，有的需要昂貴儀器設(shè)備、有機溶劑的用量很大、成本高、難以適合雷公藤乙素的大規(guī)模分離制備。
[0005]本發(fā)明公開了一種從雷公藤中制備雷公藤乙素的方法，該法與現(xiàn)有方法比較，具有提取制備過程相對簡單、設(shè)備要求低、產(chǎn)品得率高、純度高、適合雷公藤乙素的大規(guī)模分離制備等優(yōu)勢。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的是提供一種從雷公藤中制備雷公藤乙素的方法，該法與現(xiàn)有方法比較，具有提取制備過程相對簡單、設(shè)備要求低、產(chǎn)品得率高、純度高、適合雷公藤乙素的大規(guī)模分離制備等優(yōu)勢。
[0007]本發(fā)明的技術(shù)方案如下:
(I)將雷公藤根切片，用3?10倍量的乙醇水溶液(70%?95%)加熱回流提取3次，每次
1.5小時，合并提取液，減壓濃縮回收乙醇得到總浸膏。將總浸膏用乙酸乙酯溶解數(shù)次至不再溶解，合并乙酸乙酯溶液，減壓濃縮回收乙酸乙酯得乙酸乙酯部位。
[0008](2)將乙酸乙酯部位經(jīng)10?30倍量中性氧化鋁色譜柱層析，先用石油醚一乙酸乙酯(2:3，V/V)洗脫，洗脫液棄去，再用乙酸乙酯一甲醇(3:1，V/V)洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮得中性氧化鋁色譜柱洗脫部位。
[0009](3)將中性氧化鋁色譜柱洗脫部位經(jīng)MCI GEL色譜柱層析，先用甲醇一水(1:3，V/V)洗脫，洗脫液棄去，再用甲醇一水(1:1，V/V)洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮得MCI GEL色譜柱洗脫部位。
[0010](4)將MCI GEL色譜柱洗脫部位經(jīng)10?30倍量硅膠色譜柱層析，先用石油醚一乙酸乙酯(7:4，V/V)洗脫，洗脫液棄去，再用石油醚一乙酸乙酯(1:1，V/V)洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮得硅膠色譜柱洗脫部位，并析出雷公藤乙素粗品。
[0011](5)將雷公藤乙素粗品用乙酸乙酯結(jié)晶，得到雷公藤乙素粗晶，再用乙酸乙酯重結(jié)晶I?2次，得雷公藤乙素純晶，采用雷公藤乙素對照品對照HPLC法以及核磁共振波譜法鑒定產(chǎn)品。經(jīng)HPLC檢測雷公藤乙素含量大于99%。相對于雷公藤藥材中雷公藤乙素的量，該法制得雷公藤乙素廣品得率大于90%。
【具體實施方式】
[0012]下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說明，但應(yīng)理解本發(fā)明的范圍非僅限于這些實施例的范圍。
[0013]實施例1:
將雷公藤根30千克切片，用10倍量的95%乙醇水溶液加熱回流提取3次，每次1.5小時，合并提取液，減壓濃縮回收乙醇得到總浸膏2915克。將總浸膏用乙酸乙酯溶解數(shù)次至不再溶解，合并乙酸乙酯溶液，減壓濃縮回收乙酸乙酯得乙酸乙酯部位480克。將乙酸乙酯部位經(jīng)30倍量中性氧化鋁色譜柱層析，先用石油醚一乙酸乙酯(2:3，V/V)洗脫，洗脫液棄去，再用乙酸乙酯一甲醇(3:1，V/V)洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮得中性氧化鋁色譜柱洗脫部位36克。將中性氧化鋁色譜柱洗脫部位經(jīng)MCI GEL色譜柱層析，先用甲醇一水(1:3，V/V)洗脫，洗脫液棄去，再用甲醇一水(I: I，V/V)洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮得MCI GEL色譜柱洗脫部位3.3克。將MCI GEL色譜柱洗脫部位經(jīng)30倍量硅膠色譜柱層析，先用石油醚一乙酸乙酯(7:4，V/V)洗脫，洗脫液棄去，再用石油醚一乙酸乙酯(1:1，V/V)洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮得硅膠色譜柱洗脫部位，并析出雷公藤乙素粗品0.12克。將雷公藤乙素粗品用乙酸乙酯結(jié)晶，得到雷公藤乙素粗晶，再用乙酸乙酯重結(jié)晶I次，得雷公藤乙素純晶0.084克，采用雷公藤乙素對照品對照HPLC法以及核磁共振波譜法鑒定產(chǎn)品。經(jīng)HPLC檢測雷公藤乙素含量為99.1%。經(jīng)HPLC測得雷公藤藥材中雷公藤乙素含量為3.lppm。相對于雷公藤藥材中雷公藤乙素的量，雷公藤乙素廣品得率為90.3%。
[0014]實施例2:
將雷公藤根30千克切片，用3倍量的70%乙醇水溶液加熱回流提取3次，每次1.5小時，合并提取液，減壓濃縮回收乙醇得到總浸膏3045克。將總浸膏用乙酸乙酯溶解數(shù)次至不再溶解，合并乙酸乙酯溶液，減壓濃縮回收乙酸乙酯得乙酸乙酯部位498克。將乙酸乙酯部位經(jīng)10倍量中性氧化鋁色譜柱層析，先用石油醚一乙酸乙酯(2:3，V/V)洗脫，洗脫液棄去，再用乙酸乙酯一甲醇(3:1，V/V)洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮得中性氧化鋁色譜柱洗脫部位38克。將中性氧化鋁色譜柱洗脫部位經(jīng)MCI GEL色譜柱層析，先用甲醇一水(1:3，V/V)洗脫，洗脫液棄去，再用甲醇一水(I: I，V/V)洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮得MCI GEL色譜柱洗脫部位4.1克。將MCI GEL色譜柱洗脫部位經(jīng)10倍量硅膠色譜柱層析，先用石油醚一乙酸乙酯(7:4，V/V)洗脫，洗脫液棄去，再用石油醚一乙酸乙酯(1:1，V/V)洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮得硅膠色譜柱洗脫部位，并析出雷公藤乙素粗品0.13克。將雷公藤乙素粗品用乙酸乙酯結(jié)晶，得到雷公藤乙素粗晶，再用乙酸乙酯重結(jié)晶2次，得雷公藤乙素純晶0.085克，采用雷公藤乙素對照品對照HPLC法以及核磁共振波譜法鑒定產(chǎn)品。經(jīng)HPLC檢測雷公藤乙素含量為99.2%。經(jīng)HPLC測得雷公藤藥材中雷公藤乙素含量為3.lppm。相對于雷公藤藥材中雷公藤乙素的量，雷公藤乙素廣品得率為91.3%。
[0015] 實施例3:
將雷公藤根30千克切片，用6倍量的85%乙醇水溶液加熱回流提取3次，每次1.5小時，合并提取液，減壓濃縮回收乙醇得到總浸膏3002克。將總浸膏用乙酸乙酯溶解數(shù)次至不再溶解，合并乙酸乙酯溶液，減壓濃縮回收乙酸乙酯得乙酸乙酯部位496克。將乙酸乙酯部位經(jīng)20倍量中性氧化鋁色譜柱層析，先用石油醚一乙酸乙酯(2:3，V/V)洗脫，洗脫液棄去，再用乙酸乙酯一甲醇(3:1，V/V)洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮得中性氧化鋁色譜柱洗脫部位40克。將中性氧化鋁色譜柱洗脫部位經(jīng)MCI GEL色譜柱層析，先用甲醇一水(1:3，V/V)洗脫，洗脫液棄去，再用甲醇一水(I: I，V/V)洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮得MCI GEL色譜柱洗脫部位4.3克。將MCI GEL色譜柱洗脫部位經(jīng)20倍量硅膠色譜柱層析，先用石油醚一乙酸乙酯(7:4，V/V)洗脫，洗脫液棄去，再用石油醚一乙酸乙酯(1:1，V/V)洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮得硅膠色譜柱洗脫部位，并析出雷公藤乙素粗品0.14克。將雷公藤乙素粗品用乙酸乙酯結(jié)晶，得到雷公藤乙素粗晶，再用乙酸乙酯重結(jié)晶2次，得雷公藤乙素純晶0.0841克，采用雷公藤乙素對照品對照HPLC法以及核磁共振波譜法鑒定產(chǎn)品。經(jīng)HPLC檢測雷公藤乙素含量為99.2%。經(jīng)HPLC測得雷公藤藥材中雷公藤乙素含量為3.lppm。相對于雷公藤藥材中雷公藤乙素的量，雷公藤乙素廣品得率為90.4%。
【主權(quán)項】
1.從雷公藤中制備雷公藤乙素的方法，其特征在于它包含以下步驟: (1)將雷公藤根切片，用3?10倍量的乙醇水溶液(70%?95%)加熱回流提取3次，每次.1.5小時，合并提取液，減壓濃縮回收乙醇得到總浸膏，將總浸膏用乙酸乙酯溶解數(shù)次至不再溶解，合并乙酸乙酯溶液，減壓濃縮回收乙酸乙酯得乙酸乙酯部位； (2)將乙酸乙酯部位經(jīng)10?30倍量中性氧化鋁色譜柱層析，先用石油醚一乙酸乙酯(2:。3，V/V)洗脫，洗脫液棄去，再用乙酸乙酯一甲醇(3:1，V/V)洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮得中性氧化鋁色譜柱洗脫部位； (3)將中性氧化鋁色譜柱洗脫部位經(jīng)MCIGEL色譜柱層析，先用甲醇一水(1: 3，V/V)洗脫，洗脫液棄去，再用甲醇一水(1:1，V/V)洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮得MCI GEL色譜柱洗脫部位； (4)將MCIGEL色譜柱洗脫部位經(jīng)10?30倍量硅膠色譜柱層析，先用石油醚一乙酸乙酯(7:4，V/V)洗脫，洗脫液棄去，再用石油醚一乙酸乙酯(1:1，V/V)洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮得硅膠色譜柱洗脫部位，并析出雷公藤乙素粗品； (5)將雷公藤乙素粗品用乙酸乙酯結(jié)晶，得到雷公藤乙素粗晶，再用乙酸乙酯重結(jié)晶I?2次，得雷公藤乙素純晶。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種從雷公藤中制備雷公藤乙素的方法。將雷公藤根用乙醇水溶液加熱回流提取，得到總浸膏。將總浸膏用乙酸乙酯溶解數(shù)次至不再溶解，得乙酸乙酯部位。將乙酸乙酯部位依次經(jīng)中性氧化鋁色譜柱、MCI？GEL色譜柱和硅膠色譜柱層析，得雷公藤乙素粗品。最后用乙酸乙酯重結(jié)晶，得雷公藤乙素純品。該法提取制備過程相對簡單、設(shè)備要求低、產(chǎn)品得率高、純度高、適合雷公藤乙素的大規(guī)模分離制備。
【IPC分類】C07J73/00
【公開號】CN105601700
【申請?zhí)枴緾N201610003311
【發(fā)明人】劉建群, 伍秋珊, 余昭芬, 舒積成, 廖琦, 劉英俊
【申請人】江西中醫(yī)藥大學(xué)
【公開日】2016年5月25日
【申請日】2016年1月7日