發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及活化胰高血糖素受體的毒蜥外泌肽-4的肽類似物，及其醫(yī)藥用途，例如在治療嚴(yán)重低血糖中的用途。發(fā)明背景毒蜥外泌肽-4是一種39個(gè)氨基酸的肽，其由吉拉毒蜥(Gilamonster)(Helodermasuspectum)的唾液腺產(chǎn)生(Eng,J.等,J.Biol.Chem.,267:7402-05,1992)。毒蜥外泌肽-4是胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)受體的活化劑，但它不顯著活化胰高血糖素受體。毒蜥外泌肽-4的氨基酸序列如SEQIDNO:1所示：HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-NH2胰高血糖素是一種29個(gè)氨基酸的肽，其在循環(huán)葡萄糖低時(shí)釋放入血流中。胰高血糖素的氨基酸序列如SEQIDNO:2所示：HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNT-OH在低血糖期間，當(dāng)血糖水平掉落至正常水平之下時(shí)，胰高血糖素向肝臟發(fā)出分解糖原并釋放葡萄糖的信號(hào)，引起血糖水平升高以達(dá)到正常水平。低血糖在由于血糖水平升高而使用胰島素治療的糖尿病患者中是常見的副作用。因此，胰高血糖素在葡萄糖調(diào)節(jié)中最主要的作用是抵銷胰島素作用和維持血糖水平。胰高血糖素具有約7的等電點(diǎn)，并因此在4-8的pH范圍只有很差的溶解性(<0.2mg/ml)。其在3以下或9以上的pH值溶解性好(>10mg/ml)(Bromer,W.W.,HandbookofExperimentalPharmacology,Vol66/1,1983)。因此，由于在低pH溶液中胰高血糖素的化學(xué)和生物物理的不穩(wěn)定性，目前可用的商業(yè)胰高血糖素溶液(HypoKit,胰高血糖素急救試劑盒)為酸性且需要在使用前新鮮制備(Joshi,A.B.等,Int.J.Ph.Sci.,203,115-125,2000)。與商業(yè)試劑盒溶液相比具有增強(qiáng)的穩(wěn)定性的胰高血糖素制劑的制備描述于專利申請(qǐng)WO9947160、WO12059762、US2011/0097386、US2011/0237510、US2011/049713、WO12012460、WO12122535、US2012/0071817和WO13101749中，它們的內(nèi)容通過(guò)提述并入本文。胰高血糖素的穩(wěn)定化的類似物的制備描述于專利申請(qǐng)WO14016300、WO11049713、WO07056362、WO08086086和WO09155257中，它們的內(nèi)容通過(guò)提述并入本文。在合成肽的位置1使用4-噻唑丙氨酸(4-Thiazolylalanine)已在WO07140284中描述用于GLP-1受體激動(dòng)劑。相反，本發(fā)明中的4-噻唑丙氨酸提供了與在位置1攜帶天然組氨酸的肽(天然胰高血糖素)相比對(duì)GLP-1受體具有降低的活性的高活性胰高血糖素受體激動(dòng)劑。發(fā)明概述本發(fā)明提供毒蜥外泌肽-4類似物(exendin-4analogues)，其強(qiáng)力且選擇性地活化胰高血糖素受體，并顯示與天然胰高血糖素相比在接近中性的pH較高的溶解度和在溶液中增強(qiáng)的化學(xué)穩(wěn)定性。所有化合物在位置1攜帶人工氨基酸4-噻唑丙氨酸。這令人驚訝地導(dǎo)致當(dāng)與僅在位置1彼此不同的相同化合物(在位置1為Tza而非His)進(jìn)行比較時(shí)對(duì)胰高血糖素受體相較于GLP1受體更高的選擇性。因此，本發(fā)明提供高選擇性的胰高血糖素受體激動(dòng)劑。本發(fā)明提供具有式(I)的肽化合物，或其鹽或溶劑合物：Tza-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-X10-Ser-Lys-Gln-X14-Glu-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-X21-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Leu-Ala-X29-Gly-Pro-Glu-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser-R1(I)X10表示選自Tyr、Leu、Val、Ile、Phe、苯甘氨酸、1-萘丙氨酸、2-氟苯丙氨酸、環(huán)己基甘氨酸和叔亮氨酸的氨基酸殘基，X14表示選自Leu和Nle的氨基酸殘基，X21表示選自Asp和Glu的氨基酸殘基，X29表示選自Gly和Thr的氨基酸殘基，R1表示OH或NH2。本發(fā)明的化合物是胰高血糖素受體激動(dòng)劑，如通過(guò)如下觀察所確定的，即其能夠在結(jié)合于胰高血糖素的受體后刺激胞內(nèi)cAMP形成。所述化合物對(duì)于胰高血糖素受體與天然胰高血糖素的情況相比，展現(xiàn)至少0.1％，優(yōu)選0.5％，更優(yōu)選1.0％，和甚至更優(yōu)選10.0％的相對(duì)活性。本發(fā)明的化合物還活化GLP1受體，如通過(guò)如下觀察所確定的，即其能夠在結(jié)合于GLP1的受體后刺激胞內(nèi)cAMP形成。本發(fā)明的給定化合物的活性(通過(guò)其對(duì)于GLP1受體的活性相對(duì)于GLP1的活性表示)與相同化合物對(duì)于胰高血糖素受體的活性(通過(guò)其對(duì)于胰高血糖素受體的活性相對(duì)于胰高血糖素的活性表示)相比為10％以下，更優(yōu)選5％以下，和甚至更優(yōu)選2％以下。令人驚訝的是，發(fā)現(xiàn)式I的在位置1具有4-噻唑丙氨酸的肽化合物與在該位置具有組氨酸的衍生物相比顯示了增加的胰高血糖素受體活化和針對(duì)對(duì)于GLP-1受體的活性的增加的選擇性。組氨酸是在胰高血糖素中位置1處天然存在的氨基酸，并且已經(jīng)顯示其對(duì)于胰高血糖素受體的活化機(jī)制是重要的(Unson,C.G.等,Arch.Biochem.Biophys.,300,747-750,1993)。此外，本發(fā)明的化合物優(yōu)選在酸性和/或生理pH值，例如，在pH4.5和/或在pH7.4在25℃具有增強(qiáng)的溶解度，優(yōu)選至少0.5mg/ml，更優(yōu)選至少1.0mg/ml和甚至更優(yōu)選至少10.0mg/ml。另外，本發(fā)明的化合物優(yōu)選在pH7.3的溶液中在50℃儲(chǔ)存14天時(shí)具有高穩(wěn)定性(通過(guò)如實(shí)施例中所述的色譜分析所確定的)。優(yōu)選地，新形成的降解產(chǎn)物為40％以下，更優(yōu)選30％以下，甚至更優(yōu)選20％以下。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述C-末端基團(tuán)R1為NH2。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，所述C-末端基團(tuán)R1為OH。進(jìn)一步的實(shí)施方案涉及一組化合物，或其鹽或溶劑合物，其中X10表示Leu，X14表示選自Leu和Nle的氨基酸殘基，X21表示選自Asp和Glu的氨基酸殘基，X29表示選自Gly和Thr的氨基酸殘基，R1表示OH。進(jìn)一步的實(shí)施方案涉及一組化合物，或其鹽或溶劑合物，其中X10表示Tyr，X14表示選自Leu和Nle的氨基酸殘基，X21表示Glu，X29表示選自Gly和Thr的氨基酸殘基，R1表示OH。進(jìn)一步的實(shí)施方案涉及一組化合物，或其鹽或溶劑合物，其中X10表示Val，X14表示Leu，X21表示Glu，X29表示選自Gly和Thr的氨基酸殘基，R1表示OH。進(jìn)一步的實(shí)施方案涉及一組化合物，或其鹽或溶劑合物，其中X10表示Ile，X14表示選自Leu和Nle的氨基酸殘基，X21表示Glu，X29表示Thr，R1表示OH。進(jìn)一步的實(shí)施方案涉及一組化合物，或其鹽或溶劑合物，其中X10表示1-萘丙氨酸，X14表示選自Leu和Nle的氨基酸殘基，X21表示選自Asp和Glu的氨基酸殘基，X29表示Thr，R1表示OH。進(jìn)一步的實(shí)施方案涉及一組化合物，或其鹽或溶劑合物，其中X10表示2-氟苯丙氨酸，X14表示選自Leu和Nle的氨基酸殘基，X21表示Asp，X29表示Thr，R1表示OH。進(jìn)一步的實(shí)施方案涉及一組化合物，或其鹽或溶劑合物，其中X10表示環(huán)己基甘氨酸，X14表示選自Leu和Nle的氨基酸殘基，X21表示選自Asp和Glu的氨基酸殘基，X29表示Thr，R1表示OH。進(jìn)一步的實(shí)施方案涉及一組化合物，或其鹽或溶劑合物，其中X10表示選自Tyr、Leu、Val、Ile、苯甘氨酸、1-萘丙氨酸、2-氟苯丙氨酸和環(huán)己基甘氨酸的氨基酸殘基，X14表示Leu，X21表示選自Asp和Glu的氨基酸殘基，X29表示選自Gly和Thr的氨基酸殘基，R1表示OH。進(jìn)一步的實(shí)施方案涉及一組化合物，或其鹽或溶劑合物，其中X10表示選自Tyr、Leu、Ile、Phe、1-萘丙氨酸、環(huán)己基甘氨酸和叔亮氨酸的氨基酸殘基，X14表示Nle，X21表示選自Asp和Glu的氨基酸殘基，X29表示Thr，R1表示OH。進(jìn)一步的實(shí)施方案涉及一組化合物，或其鹽或溶劑合物，其中X10表示選自Leu、Phe、1-萘丙氨酸、2-氟苯丙氨酸和環(huán)己基甘氨酸的氨基酸殘基，X14表示選自Leu和Nle的氨基酸殘基，X21表示Asp，X29表示Thr，R1表示OH。進(jìn)一步的實(shí)施方案涉及一組化合物，或其鹽或溶劑合物，其中X10表示選自Tyr、Leu、Val、Ile、苯甘氨酸、1-萘丙氨酸、環(huán)己基甘氨酸和叔亮氨酸的氨基酸殘基，X14表示選自Leu和Nle的氨基酸殘基，X21表示Glu，X29表示選自Gly和Thr的氨基酸殘基，R1表示OH。進(jìn)一步的實(shí)施方案涉及一組化合物，或其鹽或溶劑合物，其中X10表示選自Tyr、Leu、Val、Ile、Phe、苯甘氨酸、1-萘丙氨酸、2-氟苯丙氨酸、環(huán)己基甘氨酸和叔亮氨酸的氨基酸殘基，X14表示選自Leu和Nle的氨基酸殘基，X21表示選自Asp和Glu的氨基酸殘基，X29表示Thr，R1表示OH。進(jìn)一步的實(shí)施方案涉及一組化合物，或其鹽或溶劑合物，其中X10表示選自Tyr，Leu和Val的氨基酸殘基，X14表示Leu，X21表示Glu，X29表示Gly，R1表示OH。式(I)的肽化合物的具體實(shí)例是SEQIDNO:3-25的化合物及其鹽或溶劑合物。式(I)的肽化合物的具體實(shí)例是SEQIDNO:3、5、6、9、15、20、23、24和25的化合物及其鹽或溶劑合物。在某些實(shí)施方案中，即當(dāng)式(I)的化合物包含遺傳編碼的氨基酸殘基時(shí)，本發(fā)明進(jìn)一步提供編碼所述化合物的核酸(其可為DNA或RNA)、包含這樣的核酸的表達(dá)載體和含有這樣的核酸或表達(dá)載體的宿主細(xì)胞。在進(jìn)一步的方面中，本發(fā)明提供包含本發(fā)明的化合物與載劑混合的組合物。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述組合物是藥物可接受的組合物并且所述載劑是藥物可接受的載劑。本發(fā)明的化合物可以是鹽例如藥物可接受的鹽或溶劑合物例如水合物的形式。在更進(jìn)一步的方面，本發(fā)明提供在醫(yī)藥治療方法中特別是人類醫(yī)藥中使用的組合物。在某些實(shí)施方案中，所述核酸或所述表達(dá)載體可用作治療劑，例如，用于基因療法中。式(I)的化合物適用于治療應(yīng)用而無(wú)需額外的治療上有效的作用劑。然而，在其他實(shí)施方案中，將所述化合物與至少一種額外的治療活性劑一起使用，如在“組合療法”中所描述的。本發(fā)明的化合物及其制劑可主要用于治療低血糖，提高血糖水平，作為胰島素的輔助療法，也可用于降低和維持體重，作為β-阻斷劑和鈣通道阻斷劑中毒的解毒劑和用于誘導(dǎo)胃腸系統(tǒng)的臨時(shí)松弛用于放射性用途。發(fā)明詳述定義本發(fā)明的氨基酸序列含有用于天然存在的氨基酸的常規(guī)單字母和三字母代碼，以及普遍接受的用于其他氨基酸的三字母代碼，如Nle(正亮氨酸)。另外，將以下代碼用于表1中所示的氨基酸：術(shù)語(yǔ)“天然毒蜥外泌肽-4”指具有序列HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-NH2(SEQIDNO:1)的天然毒蜥外泌肽-4。本發(fā)明提供如上定義的肽化合物。本發(fā)明的肽化合物包含通過(guò)肽(即羧酰胺鍵(carboxamidebond))連接的氨基羧酸的線性骨架。優(yōu)選地，所述氨基羧酸是α-氨基羧酸并且更優(yōu)選L-α-氨基羧酸，除非另外指明。所述肽化合物包含39個(gè)氨基羧酸的骨架序列。為避免疑惑，在本文提供的定義中，通常意欲的是肽部分的序列在聲明允許變異的那些位置的至少之一不同于天然毒蜥外泌肽-4?？烧J(rèn)為肽部分內(nèi)的氨基酸以常規(guī)的N-末端至C-末端方向連續(xù)編號(hào)為1至39。提及肽部分內(nèi)的“位置”時(shí)應(yīng)該如此理解，提及天然毒蜥外泌肽-4和其他分子內(nèi)的位置時(shí)也應(yīng)如此，例如，在毒蜥外泌肽-4中，His在位置1，Gly在位置2，......，Met在位置14，......且Ser在位置39。在另一個(gè)方面中，本發(fā)明提供包含如本文所述的本發(fā)明化合物或其鹽或溶劑合物與載劑混合的組合物。本發(fā)明還提供本發(fā)明的化合物用作藥物的用途，特別是用于治療如本文所述的病況的用途。本發(fā)明還提供組合物，其中所述組合物是藥物可接受的組合物，并且所述載劑是藥物可接受的載劑。肽合成本領(lǐng)域技術(shù)人員知曉多種不同的方法來(lái)制備本發(fā)明中描述的肽。這些方法包括但不限于合成方法和重組基因表達(dá)。因此，制備這些肽的一種方式是在溶液中或在固體支持物上合成以及隨后的分離和純化。制備所述肽的另一種方式是在宿主細(xì)胞中基因表達(dá)，在所述宿主細(xì)胞中已經(jīng)引入了編碼所述肽的DNA序列?？商鎿Q地，所述基因表達(dá)可以在不利用細(xì)胞系統(tǒng)的情況下實(shí)現(xiàn)。上述方法也可以任何方式組合。制備本發(fā)明的肽的優(yōu)選方法是在合適的樹脂上進(jìn)行固相合成。固相肽合成是一種確立的方法(參見例如：Stewart和Young,SolidPhasePeptideSynthesis,PierceChemicalCo.,Rockford,Ill.,1984；E.Atherton和R.C.Sheppard,SolidPhasePeptideSynthesis.APracticalApproach,Oxford-IRLPress,NewYork,1989)。固相合成通過(guò)將N-末端受保護(hù)的氨基酸以其羧基末端附接到攜帶可裂解接頭的惰性固體支持物來(lái)起始。該固體支持物可以是任何允許起始氨基酸偶聯(lián)的聚合物，例如，三苯甲基樹脂、氯代三苯甲基樹脂、Wang樹脂或Rink樹脂，其中羧基(或?qū)τ赗ink樹脂而言為甲酰胺)與樹脂的連接對(duì)酸敏感(當(dāng)使用Fmoc策略時(shí))。所述聚合物支持物在肽合成過(guò)程中在用于脫保護(hù)α-氨基的條件下必須是穩(wěn)定的。在已經(jīng)將第一個(gè)氨基酸偶聯(lián)至固體支持物之后，去除此氨基酸的α-氨基保護(hù)基團(tuán)。然后使用適當(dāng)?shù)孽０放悸?lián)試劑將剩余的受保護(hù)的氨基酸按照肽序列所示的順序相繼地偶聯(lián)，所述酰胺偶聯(lián)試劑例如BOP、HBTU、HATU或DIC(N,N’-二異丙基碳二亞胺(N,N'-diisopropylcarbodiimide))/HOBt(1-羥基苯并三唑(1-hydroxybenzotriazol))，其中BOP、HBTU和HATU與叔胺堿一起使用?？商鎿Q地，釋放的N-末端可以用除氨基酸之外的基團(tuán)，例如羧酸等進(jìn)行官能化。最后將肽從樹脂上裂解下來(lái)并脫保護(hù)。這可以通過(guò)使用King氏混合物來(lái)實(shí)現(xiàn)(D.S.King,C.G.Fields,G.B.Fields,Int.J.PeptideProteinRes.36,1990,255-266)。然后可通過(guò)色譜，例如制備型RP-HPLC純化原料，如果需要的話。效力如本文所用，術(shù)語(yǔ)“效力”或“體外效力”是在基于細(xì)胞的測(cè)定法中化合物活化GLP-1或胰高血糖素的受體的能力的量度。在數(shù)值上，其表示為“EC50值”，其為在劑量-響應(yīng)實(shí)驗(yàn)中誘導(dǎo)響應(yīng)(例如形成細(xì)胞內(nèi)cAMP)的最大增加的一半的化合物的有效濃度。治療用途本發(fā)明的化合物是胰高血糖素受體的激動(dòng)劑。這種激動(dòng)劑首先可提供治療益處以解決靶向低血糖的臨床需求。由抗高血糖藥物例如胰島素治療誘發(fā)的低血糖是T1DM和T2DM治療中維持血糖控制的重要風(fēng)險(xiǎn)。實(shí)現(xiàn)嚴(yán)格的葡萄糖控制的嘗試可增加門診病人中和重癥監(jiān)護(hù)環(huán)境中低血糖的風(fēng)險(xiǎn)。在健康的狀態(tài)中，空腹血漿葡萄糖濃度通常在70mg/dL以上。如果血糖水平下降到該閾值以下，首先會(huì)發(fā)生輕度(mild)低血糖，具有仍然可以自行處理的癥狀。這些癥狀可包括虛弱、嗜睡、眩暈、視力模糊或悲傷和不快的感覺(jué)。低血糖的癥狀還取決于患者的年齡，且在老年人中主要是神經(jīng)性的，而在兒童中頻繁觀察到行為的改變。夜間的低血糖事件可導(dǎo)致早晨頭痛、睡眠質(zhì)量差、多夢(mèng)、噩夢(mèng)、在床上大量出汗和不安的行為。也已經(jīng)報(bào)道了在夜間低血糖過(guò)程中的夢(mèng)游。如果血糖水平更進(jìn)一步下降，后果可能是嚴(yán)重低血糖的事件。嚴(yán)重低血糖與低于40-50mg/dL血清葡萄糖值相關(guān)聯(lián)，該事件可導(dǎo)致神經(jīng)低血糖癥的癥狀，如癲癇發(fā)作(seizure)或昏迷，這需要他人的幫助。低血糖可影響腦部，導(dǎo)致混淆(異常行為或兩者，如無(wú)法完成日常的任務(wù))、視力障礙、癲癇發(fā)作和有時(shí)出現(xiàn)的意識(shí)喪失。低血糖的頻繁發(fā)生可導(dǎo)致意識(shí)降低因而顯著增加了嚴(yán)重低血糖的風(fēng)險(xiǎn)。強(qiáng)烈且長(zhǎng)期的嚴(yán)重低血糖可導(dǎo)致死亡，而負(fù)責(zé)低血糖誘發(fā)的死亡的潛在機(jī)制包括腦死亡和心律失常。平均而言，T1DM患者每周經(jīng)歷2回有癥狀的低血糖，每年1回嚴(yán)重低血糖。在用胰島素治療的T2DM患者中低血糖的發(fā)病率為T1DM中所見的約三分之一。這個(gè)數(shù)目隨著胰島素治療的更長(zhǎng)時(shí)間、同病(comorbidity)的發(fā)生和患者的年齡可在患者中增加。低血糖的治療取決于低血糖事件的持續(xù)時(shí)間和強(qiáng)度。輕度和中度低血糖容易通過(guò)飲用或食用含糖的飲料或食物來(lái)自我治療。另一方面嚴(yán)重低血糖需要他人的幫助。盡管糖的靜脈內(nèi)應(yīng)用限制于健康護(hù)理專業(yè)人員，但是施用胰高血糖素作為急救藥物可以由任何受過(guò)訓(xùn)練的人或者通過(guò)皮下或者通過(guò)肌內(nèi)注射來(lái)實(shí)施。胰高血糖素是在循環(huán)葡萄糖低時(shí)由胰腺α細(xì)胞產(chǎn)生并釋放到血流中的肽激素。作為具有與胰島素相反的效果的胰島激素，胰高血糖素通過(guò)刺激糖異生和糖原分解(而同時(shí)抑制糖酵解和糖原合成)提高血糖水平以避免低血糖狀態(tài)。兩種商業(yè)胰高血糖素應(yīng)急試劑盒被批準(zhǔn)作為用于嚴(yán)重低血糖的搶救藥物，即GlucagonEmergencyKit(胰高血糖素應(yīng)急試劑盒)(EliLillyandCo.,Indianapolis,IN)和(NovoNordiskA/S,Denmark)。該試劑盒含有胰高血糖素粉末的小瓶和充滿溶劑的注射器。該胰高血糖素試劑盒需要在使用前進(jìn)行重構(gòu)。將溶劑從注射器轉(zhuǎn)移到小瓶并振蕩小瓶直到所有固體溶解。然后將溶液抽回注射器且在去除注射器中的氣泡后，試劑盒已準(zhǔn)備好可供施用至腿部或腹部。對(duì)于成人和重量超過(guò)25公斤的兒童且對(duì)于年齡在6至8歲或以上的兒童，推薦劑量為1mL無(wú)菌水中1mg的胰高血糖素。對(duì)于25公斤以下或小于6至8歲的兒童建議劑量減半(0.5mL)。兩種市售胰高血糖素產(chǎn)品的FDA批準(zhǔn)的說(shuō)明書只允許將凍干的粉末在水溶液中重構(gòu)后立即使用。由于包括小心溶解凍干的粉末和完成注射的不同步驟的復(fù)雜過(guò)程，在發(fā)生緊急情況時(shí)這些產(chǎn)品需要由護(hù)理人員或患者親屬向患者施用?；谶@些要求，胰高血糖素仍是一種未被充分利用的治療方法，盡管它具有記錄在案的(documented)立即改善低血糖的益處。如本發(fā)明所描述，在溶液中具有改進(jìn)的穩(wěn)定性的胰高血糖素受體激動(dòng)劑產(chǎn)品能夠使適用于患者自我注射的即用筆裝置成為可能。除了其作為急救藥物的益處，這樣的產(chǎn)品可提供成為作為胰島素對(duì)應(yīng)物(insulincounterpart)用于葡萄糖優(yōu)化的治療組件的機(jī)會(huì)。一個(gè)獨(dú)特的應(yīng)用可為在自動(dòng)閉環(huán)人工胰臟控制系統(tǒng)中的用途，所述系統(tǒng)具有胰島素和如本發(fā)明中所描述的胰高血糖素受體激動(dòng)劑的雙泵遞送。這樣的可植入系統(tǒng)皮下測(cè)量血糖，并將胰島素提供給患者以將血糖水平回復(fù)到正常水平。與此相對(duì)，穩(wěn)定化的胰高血糖素受體激動(dòng)劑由人工胰臟系統(tǒng)施用，以防止葡萄糖水平過(guò)低。因此，本發(fā)明的化合物可用于治療輕度至中度的低血糖或用于嚴(yán)重低血糖事件中。此外，低血糖的下列形式可用本發(fā)明的化合物治療，其為：由抗糖尿病治療例如胰島素療法誘導(dǎo)的，反應(yīng)性或餐后低血糖，空腹低血糖，醇誘導(dǎo)的低血糖，胃旁路術(shù)后低血糖，非糖尿病性低血糖和妊娠相關(guān)低血糖。如上概述，胰高血糖素是具有與胰島素的效果相反的急性效果的激素，通過(guò)刺激糖異生和糖原分解來(lái)提高血糖水平以避免低血糖狀態(tài)。然而，在嚙齒動(dòng)物和人中最近的數(shù)據(jù)揭示，胰高血糖素可對(duì)能量平衡、體脂量(bodyfatmass)和營(yíng)養(yǎng)攝入也有有益作用。因此，可將本發(fā)明的化合物用于低血糖治療之外的多種病況或病癥。本發(fā)明的化合物可與其它治療活性藥物組合使用。相關(guān)的治療用途包括治療或預(yù)防低血糖(急性和慢性兩者)、2型糖尿病、延遲前期糖尿病向2型糖尿病的進(jìn)展，例如處于糖耐量受損和/或空腹血糖受損的狀態(tài)、妊娠糖尿病、1型糖尿病、肥胖、與超重至肥胖相關(guān)的疾病、代謝綜合征/糖胖病(diabesity)、心血管疾病、在飲食失調(diào)例如貪食癥的治療中調(diào)節(jié)食欲和飽腹感，以及在減肥成功后維持降低的體重。對(duì)于β阻斷劑中毒的情況，其中存在有癥狀性心動(dòng)過(guò)緩和低血壓，高劑量的胰高血糖素被認(rèn)為是一線解毒劑。因此，注射本發(fā)明的化合物可用作β阻斷劑和鈣通道阻斷劑過(guò)量時(shí)的防范。胰高血糖素的一種肝外效果是胃腸道包括胃、十二指腸、小腸和結(jié)腸中平滑肌細(xì)胞的松弛。本發(fā)明的化合物及其藥物制劑可用作平滑肌細(xì)胞松弛劑與用于胃腸道的診斷成像技術(shù)組合，例如放射照相術(shù)(radiography)、CT掃描、超聲成像術(shù)(sonography)、MRI成像和核醫(yī)學(xué)成像。因此，本發(fā)明的化合物及其制劑可用于治療低血糖，升高血糖水平，作為胰島素的輔助治療，用于減少和維持體重，作為β阻斷劑和鈣通道阻斷劑中毒的解毒劑，和用于誘導(dǎo)胃腸系統(tǒng)的暫時(shí)松弛用于放射性用途。藥物組合物術(shù)語(yǔ)“藥物組合物”指示含有在混合時(shí)能夠相容的成分并且可以被施用的混合物。藥物組合物可包括一種或多種醫(yī)用的藥物。此外，藥物組合物可包括載劑、溶劑、佐劑、潤(rùn)滑劑(emollient)、膨脹劑、穩(wěn)定劑和其它組分，無(wú)論這些被認(rèn)為是活性或非活性成分。供技術(shù)人員在藥物組合物的制備中使用的指南可以在，例如，Remington：TheScienceandPracticeofPharmacy,(第20版)A.R.GennaroA.R.編，2000年，LippencottWilliams&Wilkins中找到。本發(fā)明的毒蜥外泌肽-4肽衍生物或其鹽作為藥物組合物的一部分與藥物可接受的載劑、稀釋劑或賦形劑聯(lián)合施用?！八幬锟山邮艿妮d劑”是生理上可接受的、同時(shí)保持與它一起施用的物質(zhì)的治療性質(zhì)的載劑。標(biāo)準(zhǔn)的藥物可接受的載劑和它們的制劑是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的并且記載于，例如，Remington：TheScienceandPracticeofPharmacy，(第20版)A.R.GennaroA.R.編，2000年，LippencottWilliams&Wilkins中。一個(gè)示例性的藥物可接受的載劑是生理鹽水溶液。藥物可接受的載劑或稀釋劑包括適合口服、直腸、經(jīng)鼻或胃腸外(包括皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、皮內(nèi)和透皮)施用的制劑中使用的那些。本發(fā)明的化合物通常胃腸外施用。術(shù)語(yǔ)“鹽”或“藥物可接受的鹽”指安全且有效地用于哺乳動(dòng)物的本發(fā)明的化合物的鹽。藥物可接受的鹽可包括但不限于酸加成鹽和堿性鹽。酸加成鹽的實(shí)例包括氯化物、硫酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸(氫)鹽、乙酸鹽、檸檬酸鹽、甲苯磺酸鹽或甲磺酸鹽。堿性鹽的實(shí)例包括與無(wú)機(jī)陽(yáng)離子的鹽，例如堿金屬或堿土金屬鹽如鈉、鉀、鎂或鈣鹽，以及與有機(jī)陽(yáng)離子的鹽，如胺鹽。藥物可接受的鹽進(jìn)一步的實(shí)例在Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy，(第20版)A.R.GennaroA.R.編,2000年,LippencottWilliams&Wilkins或HandbookofPharmaceuticalSalts,Properties,SelectionandUse,P.H.Stahl,C.G.Wermuth編,2002年,由VerlagHelveticaChimicaActa,Zurich,Switzerland和Wiley-VCH,Weinheim,Germany聯(lián)合出版中描述。術(shù)語(yǔ)“溶劑合物”指本發(fā)明的化合物或其鹽與溶劑分子例如有機(jī)溶劑分子和/或水的復(fù)合物(complex)。化合物的術(shù)語(yǔ)“治療有效量”指無(wú)毒、但足以提供合意效果的化合物的量。式(I)化合物達(dá)到合意的生物效果所需的量取決于許多因素，例如所選的特定化合物、預(yù)期的用途、施用模式和患者的臨床病況。適當(dāng)?shù)摹坝行А绷吭谌魏蝹€(gè)別情況中可使用常規(guī)的實(shí)驗(yàn)由本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)確定。本發(fā)明的藥物組合物是那些適合于胃腸外(例如皮下、肌內(nèi)、皮內(nèi)或靜脈內(nèi))、口服、直腸、局部和經(jīng)口(例如舌下)施用的那些，盡管最合適的施用模式在每種個(gè)別情況中取決于待治療的病況的性質(zhì)和嚴(yán)重程度，以及在每種情況中使用的式(I)化合物的性質(zhì)。合適的藥物組合物可以是分開的單位的形式，例如膠囊、片劑和小瓶或安瓿中的粉末，其中每個(gè)都包含限定量的化合物；作為粉末或顆粒；作為在水性或非水性液體中的溶液或懸浮液；或作為水包油或油包水乳劑。它可以單劑可注射的形式，例如以筆的形式提供。如已經(jīng)提到的，所述組合物可以通過(guò)任何合適藥學(xué)方法制備，所述方法包括其中將活性成分與載劑(其可由一種或多種另外的成分組成)相接觸的步驟。組合療法除了其作為藥物用于低血糖事件的用途，本發(fā)明的化合物胰高血糖素受體激動(dòng)劑能與其它藥理學(xué)活性的化合物，如RoteListe2014中提到的所有藥物廣泛地組合，例如與RoteListe2014第12章中提到的所有抗糖尿病藥，與RoteListe2014第1章中提到的所有減肥藥或食欲抑制劑，RoteListe2014第58章中提到的所有降脂劑，RoteListe2014中提到的所有抗高壓藥和護(hù)腎藥(nephroprotectives)，或RoteListe2014第36章中提到的所有利尿劑組合?；钚猿煞纸M合可以特別用于作用上協(xié)同的改善。它們可以通過(guò)將活性成分單獨(dú)施用給患者或以其中多個(gè)活性成分存在于一個(gè)藥物制備物中的組合產(chǎn)品形式來(lái)施用。當(dāng)活性成分是通過(guò)單獨(dú)施用活性成分來(lái)施用時(shí)，這可同時(shí)或相繼進(jìn)行。下文提及的大多數(shù)活性成分在USPDictionaryofUSANandInternationalDrugNames,USPharmacopeia,Rockville2011中公開。適用于這種組合的其它活性物質(zhì)特別包括例如對(duì)于提及的適應(yīng)癥之一將治療效果添加至一種或多種活性物質(zhì)的那些，和/或允許一種或多種活性物質(zhì)的劑量得以減少的那些。適用于組合的治療劑包括，例如，抗糖尿病劑，如：胰島素和胰島素衍生物，例如：甘精胰島素(Glargine)/(參見www.lantus.com)、賴谷胰島素(Glulisin)/地特胰島素(Detemir)/賴脯胰島素(Lispro)/德谷胰島素(Degludec)/德谷胰島素Plus(DegludecPlus)、門冬胰島素(Aspart)、基礎(chǔ)胰島素和類似物(例如LY2963016)、聚乙二醇化的賴脯胰島素(LY2605541)、Linjeta、NN1045、胰島素加Symlin(InsulinplusSymlin)、速效和短效胰島素(例如Linjeta、PH20、NN1218、HinsBet)、(APC-002)水凝膠、口服、吸入、經(jīng)皮和舌下胰島素(例如Afrezza、Tregopil、TPM02、Capsulin、口服胰島素、ORMD-0801、NN1953、VIAtab)。其他還包括與白蛋白或另一蛋白質(zhì)通過(guò)雙功能接頭鍵合的那些胰島素衍生物如HM12460A(LAPS胰島素)。GLP-1、GLP-1類似物和GLP-1受體激動(dòng)劑，例如：利西拉來(lái)(Lixisenatide)/AVE0010/ZP10/Lyxumia、艾塞那肽(Exenatide)/毒蜥外泌肽-4/Byetta/Bydureon/ITCA650、利拉魯肽(Liraglutide)/Victoza、索馬魯肽(Semaglutide)、他司魯肽(Taspoglutide)、阿必魯肽(Albiglutide)、度拉糖肽(Dulaglutide)、rExendin-4、CJC-1134-PC、PB-1023、TTP-054、HM-11260C、CM-3、GLP-1Eligen、ORMD-0901、NN-9924、Nodexen、Viador-GLP-1、CVX-096、ZYOG-1、ZYD-1、MAR-701、ZP-2929、ZP-3022、CAM-2036、DA-15864、ARI-2651、ARI-2255、艾塞那肽-XTEN和胰高血糖素-Xten、MAR709、HM1525A、GLP1R/胰高血糖素R雙激動(dòng)劑、GLP1R/GIPR雙激動(dòng)劑、GLP1R/胰高血糖素R/GIPR三激動(dòng)劑、GLP1R激動(dòng)劑與胰島素衍生物如IDegLira、Lixilan等的組合。DPP4抑制劑，例如：阿格列汀(Alogliptin)/Nesina、利拉利汀(Linagliptin)/BI-1356/Ondero/Trajenta/Tradjenta/Trayenta/Tradzenta、沙格列汀(Saxagliptin)/Onglyza、西他列汀(Sitagliptin)/捷諾維(Januvia)/Xelevia/Tesave/Janumet/Velmetia、維格列汀(Vildagliptin)、阿拉格列汀(Anagliptin)、吉格列汀(Gemigliptin)、特力利汀(Teneligliptin)、美格列汀(Melogliptin)、曲格列汀(Trelagliptin)、DA-1229、MK-3102、KM-223。SGLT2抑制劑，例如：卡格列凈(Canaglifozin)、達(dá)格列凈(Dapagliflozin)、瑞格列凈(Remoglifozin)、舍格列凈(Sergliflozin)、依帕列凈(Empagliflozin)、伊格列凈(Ipragliflozin)、托格列凈(Tofogliflozin)、魯格列凈(Luseogliflozin)、LX-4211、PF-04971729、RO-4998452、EGT-0001442、DSP-3235。雙胍類(例如美福明(Metformin)、丁福明(Buformin)、苯乙福明(Phenformin))、噻唑烷二酮類(例如吡格列酮(Pioglitazone)、利格列酮(Rivoglitazone)、羅格列酮(Rosiglitazone)、曲格列酮(Troglitazone))、雙重PPAR激動(dòng)劑(例如阿格列扎(Aleglitazar)、莫格列扎(Muraglitazar)、替格列扎(Tesaglitazar))、磺酰脲類(例如甲苯磺丁脲(Tolbutamide)、格列苯脲(Glibenclamide)、格列美脲(Glimepiride)/亞莫利(Amaryl)、格列吡嗪(Glipizide))、美格列奈類(例如那格列奈(Nateglinide)、瑞格列奈(Repaglinide)、米格列奈(Mitiglinide))、α-葡糖苷酶抑制劑(例如阿卡波糖(Acarbose)、米格列醇(Miglitol)、伏格列波糖(Voglibose))，胰淀素(Amylin)及胰淀素類似物(例如普蘭林肽(Pramlintide)、Symlin)。GPR119激動(dòng)劑(例如GSK-263A、PSN-821、MBX-2982、APD-597)、GPR40激動(dòng)劑(例如TAK-875、TUG-424、P-1736、JTT-851、GW9508)。其它合適的組合伴侶是：塞克洛瑟(Cycloset)、11-β-HSD的抑制劑(例如LY2523199、BMS770767、RG-4929、BMS816336、AZD-8329、HSD-016、BI-135585)、葡糖激酶的活化劑(例如TTP-399、AMG-151、TAK-329)、DGAT的抑制劑(例如LCQ-908)、蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸酶1的抑制劑(例如曲度奎明(Trodusquemine))、葡萄糖-6-磷酸酶的抑制劑、果糖-1,6-二磷酸酶的抑制劑、糖原磷酸化酶的抑制劑、磷酸烯醇丙酮酸羧激酶的抑制劑、糖原合酶激酶的抑制劑、丙酮酸脫氫激酶(pyruvatedehydrokinase)的抑制劑、α2-拮抗劑、CCR-2拮抗劑。一種或多種降脂劑也適合作為組合伴侶，例如：HMG-輔酶A還原酶抑制劑(例如辛伐他汀(Simvastatin)、阿托伐他汀(Atorvastatin))，貝特類(fibrates)(例如苯扎貝特(Bezafibrate)，非諾貝特(Fenofibrate))，煙酸及其衍生物(例如煙酸(Niacin))，PPAR-(α，γ或α/γ)激動(dòng)劑或調(diào)節(jié)劑(例如阿格列扎(Aleglitazar))，PPAR-δ激動(dòng)劑、ACAT抑制劑(例如阿伐麥布(Avasimibe))、膽固醇吸收抑制劑(例如依折麥布(Ezetimibe))、膽汁酸結(jié)合物(例如考來(lái)烯胺(Cholestyramine))、回腸膽汁酸轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑(ilealbileacidtransportinhibitors)、MTP抑制劑或PCSK9的調(diào)節(jié)劑。HDL-升高化合物，如：CETP抑制劑(例如托徹普(Torcetrapib)、安塞曲匹(Anacetrapid)、達(dá)塞曲匹(Dalcetrapid)、依塞曲匹(Evacetrapid)、JTT-302、DRL-17822、TA-8995)或ABC1調(diào)節(jié)劑。其他適合的組合伴侶是用于治療肥胖的一種或多種活性物質(zhì)，如例如：西布曲明(Sibutramine)、特索芬辛(Tesofensine)、奧利司他(Orlistat)、大麻素-1受體的拮抗劑、MCH-1受體拮抗劑、MC4受體激動(dòng)劑、NPY5或NPY2拮抗劑(例如韋利貝特(Velneperit))、β-3-激動(dòng)劑、瘦素或瘦素模擬物、5HT2c受體的激動(dòng)劑(例如氯卡色林(Lorcaserin))，或布普品(bupropione)/那曲酮(naltrexone)、布普品/唑尼沙胺(zonisamide)、布普品/芬特明(phentermine)或普蘭林肽(pramlintide)/美曲普汀(metreleptin)的組合。其他合適的組合伴侶是：其他胃腸肽如肽YY3-36(PYY3-36)或其類似物、胰多肽(PP)或其類似物、GIP受體激動(dòng)劑或拮抗劑、生長(zhǎng)素釋放肽拮抗劑(ghrelinantagonists)或反向激動(dòng)劑，Xenin及其類似物。此外，與用于影響高血壓、慢性心力衰竭或動(dòng)脈粥樣硬化的藥物組合是合適的，如例如：血管緊張素II受體拮抗劑(AngiotensinIIreceptorantagonists)(例如替米沙坦(telmisartan)、坎地沙坦(candesartan)、纈沙坦(valsartan)、氯沙坦(losartan)、依普羅沙坦(eprosartan)、厄貝沙坦(irbesartan)、奧美沙坦(olmesartan)、他索沙坦(tasosartan)、阿齊沙坦(azilsartan))、ACE抑制劑、ECE抑制劑、利尿劑、β-阻斷劑、鈣拮抗劑、中樞作用的高壓藥(centrallyactinghypertensives)、α-2-腎上腺素能受體的拮抗劑、中性內(nèi)肽酶的抑制劑、凝血細(xì)胞聚集抑制劑(thrombocyteaggregationinhibitors)等或其組合。在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及本發(fā)明化合物或其生理上可接受的鹽與作為組合伴侶的至少一種上述活性物質(zhì)組合用于制備藥物的用途，所述藥物適用于治療或預(yù)防能夠受結(jié)合至胰高血糖素受體影響的疾病或病況。優(yōu)選其為代謝綜合征語(yǔ)境下的疾病，特別是上文列出的疾病或病況之一，最特別是糖尿病或肥胖癥或其并發(fā)癥。根據(jù)本發(fā)明的化合物或其生理上可接受的鹽與一種或多種活性物質(zhì)組合的使用可以同時(shí)、分開或順序發(fā)生。根據(jù)本發(fā)明的化合物或其生理上可接受的鹽與另一種活性物質(zhì)組合的使用可以同時(shí)或在交錯(cuò)的時(shí)間發(fā)生，但特別是在短時(shí)間間隔內(nèi)發(fā)生。如果它們同時(shí)施用，則將兩種活性物質(zhì)一起給予患者；如果它們?cè)诮诲e(cuò)的時(shí)間使用，則將兩種活性物質(zhì)在小于或等于12小時(shí)，但特別是小于或等于6小時(shí)的時(shí)間段內(nèi)給予患者。因此，在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及藥物，所述藥物包含根據(jù)本發(fā)明的化合物或這種化合物的生理學(xué)上可接受的鹽和作為組合伴侶的至少一種上述活性物質(zhì)，任選地連同一種或多種惰性載劑和/或稀釋劑。根據(jù)本發(fā)明的化合物或其生理上可接受的鹽或溶劑合物，和與其組合的另一活性物質(zhì)均可一起存在于一個(gè)制劑中，例如片劑或膠囊、在適當(dāng)?shù)淖⑸淦骰蜓b置中的即用型制劑、可在注射之前重構(gòu)的凍干劑，或分別在兩個(gè)相同或不同的制劑中，例如作為所謂的試劑盒的組件(kit-of-parts)。附圖說(shuō)明圖1為在末梢麻醉的大鼠中皮下施用GCG或SEQ.ID5之后的血糖偏移。數(shù)值是均值±SEM，n＝6-8只大鼠。圖2為在末梢麻醉的大鼠中皮下施用GCG或SEQ.ID6之后的血糖偏移。數(shù)值是均值±SEM，n＝6-8只大鼠。圖3為在犬中皮下SEQ.ID5和人胰高血糖素對(duì)血糖的作用。圖4為在犬中皮下和肌內(nèi)SEQ.ID5對(duì)血糖的作用。圖5為在犬中皮下SEQ.ID5相較于SEQ.ID6對(duì)血糖的作用。方法采用的略縮語(yǔ)如下：2F-Phe2-氟苯丙氨酸AA氨基酸cAMP環(huán)單磷酸腺苷Boc叔丁氧羰基BOP(苯并三唑-1-基氧基)三(二甲氨基)六氟磷酸鏻BSA牛血清白蛋白tBu叔丁基Chg環(huán)己基甘氨酸CTC2-氯三苯甲基氯DICN,N'-二異丙基碳二亞胺DIPEAN,N-二異丙基乙胺DMEM杜貝可氏修飾伊格氏培養(yǎng)基(Dulbecco’smodifiedEagle’smedium)DMF二甲基甲酰胺EDT乙二硫醇(ethanedithiol)FBS胎牛血清Fmoc芴基甲基氧基羰基(fluorenylmethyloxycarbonyl)GCG胰高血糖素GLP-1胰高血糖素相關(guān)肽1HATU2-(1H-7-氮雜苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽HBSSHanks’平衡鹽溶液HBTU2-(1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基-脲鎓六氟磷酸鹽HEPES2-[4-(2-羥乙基)哌嗪-1-基]乙磺酸HOBt1-羥基苯并三唑HOSuN-羥基琥珀酰亞胺HPLC高效液相色譜HTRF均相時(shí)間分辨熒光IBMX3-異丁基-1-甲基黃嘌呤Nal1-萘丙氨酸PBS磷酸鹽緩沖鹽水PEG聚乙二醇Phg苯甘氨酸RP-HPLC反相高效液相色譜s.c.皮下TFA三氟乙酸Tle叔亮氨酸TRIS三(羥甲基)氨基甲烷Trt三苯甲基Tza4-噻唑丙氨酸UV紫外肽化合物的通用合成材料：對(duì)于固相肽合成，使用預(yù)裝載的Fmoc-Ser(TBU)-Wang樹脂。Fmoc-Ser(TBU)-Wang樹脂購(gòu)自Novabiochem，具有0.3mmol/g的載量(loading)。Fmoc保護(hù)的天然氨基酸購(gòu)自ProteinTechnologiesInc.、SennChemicals、MerckBiosciences、Novabiochem、IrisBiotech或Bachem。在整個(gè)合成中使用以下標(biāo)準(zhǔn)氨基酸：Fmoc-L-Ala-OH、Fmoc-L-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-L-Asn(Trt)-OH、Fmoc-L-Asp(OtBu)-OH、Fmoc-L-Gln(Trt)-OH、Fmoc-L-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-L-His(Trt)-OH、Fmoc-L-Ile-OH、Fmoc-L-Leu-OH、Fmoc-L-Lys(Boc)-OH、Fmoc-L-Phe-OH、Fmoc-L-Pro-OH、Fmoc-L-Ser(tBu)-OH、Fmoc-L-Thr(tBu)-OH、Fmoc-L-Trp(Boc)-OH、Fmoc-L-Tyr(tBu)-OH、Fmoc-L-Val-OH。此外，以下特殊氨基酸購(gòu)自與上文相同的供應(yīng)商：Fmoc-L-Tza-OH、Fmoc-L-Phg-OH、Fmoc-L-NaI-OH、Fmoc-L-2F-Phe-OH、Fmoc-L-Chg-OH、Fmoc-L-Tle-OH。固相肽合成使用標(biāo)準(zhǔn)Fmoc化學(xué)和HBTU/DIPEA活化在Prelude肽合成儀(PreludePeptideSynthesizer)(ProteinTechnologiesInc)上進(jìn)行。將DMF用作溶劑。脫保護(hù)：20％哌啶/DMF，進(jìn)行2×2.5分鐘。洗滌：7×DMF。偶聯(lián)2:5:10的200mMAA/500mMHBTU/2MDIPEA在DMF中2×進(jìn)行20分鐘。洗滌：5×DMF。將所有已合成的肽用King氏裂解混合物(由82.5％TFA、5％苯酚、5％水、5％茴香硫醚(thioanisole)、2.5％EDT組成)從樹脂上切割下來(lái)。然后將粗肽在二乙醚或二異丙醚中沉淀，離心，并凍干。肽通過(guò)分析型HPLC分析并用ESI質(zhì)譜檢查。粗肽通過(guò)常規(guī)制備型RP-HPLC純化步驟純化。通用制備型HPLC純化步驟將粗肽在純化系統(tǒng)(PurifierSystem)上或在Jasco半制備型HPLC系統(tǒng)(JascosemiprepHPLCSystem)上純化。根據(jù)待純化的粗肽的量使用不同尺寸并具有不同流速的制備型RP-C18HPLC柱。采用乙腈+0.1％TFA(B)和水+0.1％TFA(A)作為洗脫劑。收集含產(chǎn)物的級(jí)分并凍干以獲得純化的產(chǎn)物，通常為TFA鹽。毒蜥外泌肽-4衍生物的溶解性和穩(wěn)定性測(cè)試在對(duì)肽批次進(jìn)行溶解性和穩(wěn)定性測(cè)試之前，確定其含量。因此，對(duì)兩個(gè)參數(shù)進(jìn)行了調(diào)查，其純度(HPLC-UV)和該批次的鹽載量(離子色譜法)。對(duì)于溶解性測(cè)試，目標(biāo)濃度為10mg/mL的純化合物。因此，將來(lái)自固體樣品的溶液基于先前確定的含量以10mg/mL化合物的濃度制備在不同的緩沖液體系中。通過(guò)20分鐘在4000rpm下的離心獲得了上清液，在2小時(shí)的溫和攪拌后從所述上清液進(jìn)行了HPLC-UV。然后通過(guò)比較使用在純水或不同量的乙腈(所有化合物均溶解的光學(xué)對(duì)照)中濃度為2mg/mL的肽的儲(chǔ)液獲得的UV峰面積來(lái)確定溶解性。對(duì)于溶解性測(cè)試，分析型色譜用WatersUPLC系統(tǒng)在WatersACQUITYCSHTMC181.7μm(150x2.1mm)上在50℃用梯度洗脫以0.5mL/分鐘的流速進(jìn)行并在210-225nm監(jiān)測(cè)。將梯度設(shè)置為20％B(0-3分鐘)至75％B(3-23分鐘)，接著是98％B(23.5-30.5)的洗滌步驟和平衡期(31-37分鐘，20％B)。緩沖液A＝0.5％三氟乙酸的水溶液，且B＝0.35％三氟乙酸的乙腈溶液。任選地，將LC與使用正離子模式的WatersLCTPremierESI-TOF質(zhì)譜儀偶聯(lián)。對(duì)于穩(wěn)定性測(cè)試，目標(biāo)濃度為10mg/mL的純化合物，在含有間甲酚(30mM)、氯化鈉(85mM)和聚山梨酯20(polysorbate20)(8μM)的pH7.3TRIS緩沖液(50mM)中。將所述溶液在50℃儲(chǔ)存14天。此后，通過(guò)UPLC分析所述溶液。對(duì)于穩(wěn)定性測(cè)試，UPLC在具有WatersAcquityUPLCBEH130C181.7μm柱(2.1x100mm)的WatersAcquityUPLCH-Class系統(tǒng)上在40℃以0.5mL/分鐘的流速的梯度洗脫進(jìn)行并在215和280nm監(jiān)測(cè)。將梯度設(shè)置為在19.2分鐘的時(shí)間中10％B至90％B，然后90％B進(jìn)行0.8分鐘。緩沖液A＝0.1％甲酸(formicacid)水溶液，且B＝0.1％甲酸的乙腈溶液。對(duì)于剩余肽量的確定，比較了t0和t14處的目標(biāo)化合物的峰面積，根據(jù)下式得到“％剩余肽”：％剩余肽＝[(峰面積肽t14)x100]/峰面積肽t0?！埃?biāo)準(zhǔn)化純度”定義為根據(jù)下式的第14天時(shí)的％相對(duì)純度相對(duì)于t0處的％相對(duì)純度：％標(biāo)準(zhǔn)化純度＝[(％相對(duì)純度t14)x100)]/％相對(duì)純度t0t0處的％相對(duì)純度根據(jù)下式通過(guò)用t0處肽的峰面積除以t0處全部峰面積之和來(lái)計(jì)算：％相對(duì)純度t0＝[(峰面積t0)x100]/t0處全部峰面積之和同樣，％相對(duì)純度t14根據(jù)下式通過(guò)用t14處肽的峰面積除以t14處全部峰面積之和來(lái)計(jì)算：％相對(duì)純度t14＝[(峰面積t14)x100]/t14處全部峰面積之和“％標(biāo)準(zhǔn)化純度”和“％剩余肽”之間的潛在區(qū)別反映了在應(yīng)激條件下沒(méi)有保持可溶的肽量。這種沉淀包括不溶性降解產(chǎn)物、聚合物和/或原纖維(fibril)，它們?cè)诜治鲋耙呀?jīng)通過(guò)離心去除。陰離子色譜：儀器：DionexICS-2000，預(yù)/柱：IonPacAG-182x50mm(Dionex)/AS182×250mm(Dionex)，洗脫劑：氫氧化鈉水溶液，流速：0.38mL/分鐘，梯度：0-6分鐘：22mMKOH，6-12分鐘：22-28mMKOH，12-15分鐘：28-50mMKOH，15-20分鐘：22mMKOH，抑制劑：ASRS3002mm，檢測(cè)：電導(dǎo)率。對(duì)胰高血糖素受體效力的體外細(xì)胞測(cè)定法：化合物對(duì)于相應(yīng)受體的的激動(dòng)作用通過(guò)功能性測(cè)定來(lái)確定，所述功能性測(cè)定測(cè)量穩(wěn)定表達(dá)人GLP-1或胰高血糖素受體的HEK-293細(xì)胞系的cAMP響應(yīng)。使用來(lái)自Cisbio公司的試劑盒(目錄號(hào)62AM4PEC)基于HTRF(均相時(shí)間分辨熒光)測(cè)定細(xì)胞的cAMP含量。為了制備，將細(xì)胞分入T175培養(yǎng)瓶中，并在培養(yǎng)基(DMEM/10％FBS)中過(guò)夜培養(yǎng)至接近匯合。然后去除培養(yǎng)基并用不含鈣和鎂的PBS洗滌細(xì)胞，隨后使用Accutase(Sigma-Aldrich目錄號(hào)A6964)的蛋白酶處理。洗滌脫離的細(xì)胞并重懸于測(cè)定緩沖液(1×HBSS；20mMHEPES，0.1％BSA，2mMIBMX)中并測(cè)定細(xì)胞密度。然后，將它們稀釋至400000個(gè)細(xì)胞/ml并將25μl的等分試樣分配到96孔板的孔中。為了測(cè)量，將25μl在測(cè)定緩沖液中的測(cè)試化合物溶液添加至孔，然后在室溫溫育30分鐘。加入稀釋在裂解緩沖液(試劑盒組分)中的HTRF試劑后，將平板溫育1小時(shí)，接著在665/620nm測(cè)量熒光比。激動(dòng)劑的體外效力通過(guò)確定引起最大響應(yīng)的50％活化的濃度(EC50)來(lái)定量。麻醉大鼠中的血糖概貌(bloodglucoseprofile)：本方法的目的在于研究在肝臟糖原分解的過(guò)程中的測(cè)試化合物。大鼠可以自由獲得食物，直到實(shí)驗(yàn)開始?？梢哉f(shuō)，血糖在施用胰高血糖素(GCG)或GCG-模擬物之后的上升并且所述上升持續(xù)約60到90分鐘是由GCG-或GCG-模擬物誘導(dǎo)的肝臟糖原分解的結(jié)果。將GCG模擬物對(duì)肝糖原分解和隨后的血液中的高血糖峰的效果與以30μg/kg的劑量皮下推注(subcutaneousbolusinjection)GCG獲得的效果進(jìn)行了比較。如前文所述(Herling等，AmJPhysiol.1998年；274:G1087-93)，在麻醉的雄性Wistar大鼠中測(cè)定了血糖水平。將大鼠用腹膜內(nèi)注射戊巴比妥鈉(pentobarbitalsodium)(60毫克/千克)和氯胺酮(ketamine)(10毫克/千克)麻醉并切開氣管。通過(guò)皮下輸注戊巴比妥鈉(根據(jù)個(gè)體動(dòng)物麻醉深度調(diào)整；約24mg/kg/h)將麻醉維持多至5小時(shí)。用直腸探頭溫度計(jì)監(jiān)測(cè)體溫，并借助加熱的外科手術(shù)臺(tái)(heatedsurgicaltable)將體溫保持在37℃。從尾部尖端每15分鐘獲得用于葡萄糖分析的血液樣本(10μl)。手術(shù)后允許大鼠穩(wěn)定其血糖水平多至2小時(shí)。然后，皮下施用作為參考化合物的GCG，或測(cè)試化合物。對(duì)于GCG使用30μg/kg的劑量以誘發(fā)肝糖原分解。測(cè)試化合物SEQ.ID5以10、20和30μg/kg的劑量施用，測(cè)試化合物SEQ.ID6以10和30μg/kg的劑量施用。在血糖正常的比格犬(Beagledog)中的血糖概貌：使雄性血糖正常的比格犬在實(shí)驗(yàn)前和整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中禁食過(guò)夜。將動(dòng)物隨機(jī)分配至每組n＝6的組。在時(shí)間點(diǎn)0分鐘處，將動(dòng)物用單劑量的測(cè)試化合物或作為參考化合物的天然人胰高血糖素處理。注射溶液在實(shí)驗(yàn)前新鮮制備。將測(cè)試化合物以1-100μg/kg的劑量通過(guò)三種不同的途徑(皮下、肌內(nèi)和靜脈內(nèi))作為單次注射施用。采血通過(guò)穿刺頸靜脈(jugularvein)(頸部的靜脈(venajugularis))在藥物施用前(＝0分鐘)和其后多至240分鐘連續(xù)進(jìn)行。血糖通過(guò)酶法(己糖激酶法)從全血測(cè)定，胰島素用犬特異性ELISA測(cè)定法從K-EDTA血漿分析。實(shí)施例通過(guò)以下實(shí)施例進(jìn)一步闡釋本發(fā)明。實(shí)施例1：SEQIDNO:25的合成固相合成在預(yù)裝載的Fmoc-Ser(tBu)-Wang樹脂上進(jìn)行。將Fmoc合成策略與HBTU/DIPEA活化一起應(yīng)用。在固相合成方案中，在位置1使用Fmoc-Tza-OH并在位置10使用Fmoc-Tle-OH。用King氏混合物(D.S.King,C.G.Fields,G.B.Fields,Int.J.PeptideProteinRes.36,1990,255-266)將肽從樹脂上裂解下來(lái)。將粗產(chǎn)物使用乙腈/水梯度(兩個(gè)緩沖液均含有0.1％TFA)在Waters柱(Sunfire,制備型C18)上通過(guò)制備型HPLC純化。最后，通過(guò)LC-MS確認(rèn)經(jīng)純化的肽的分子量。實(shí)施例2：SEQIDNO:24的合成固相合成在預(yù)裝載的Fmoc-Ser(tBu)-Wang樹脂上進(jìn)行。將Fmoc合成策略與HBTU/DIPEA活化一起應(yīng)用。在固相合成方案中，在位置1使用Fmoc-Tza-OH并在位置10使用Fmoc-Chg-OH。用King氏混合物(D.S.King,C.G.Fields,G.B.Fields,Int.J.PeptideProteinRes.36,1990,255-266)將肽從樹脂上裂解下來(lái)。將粗產(chǎn)物使用乙腈/水梯度(兩個(gè)緩沖液均含有0.1％TFA)在Waters柱(Sunfire,制備型C18)上通過(guò)制備型HPLC純化。最后，通過(guò)LC-MS確認(rèn)經(jīng)純化的肽的分子量。實(shí)施例3：SEQIDNO:5的合成固相合成在預(yù)裝載的Fmoc-Ser(tBu)-Wang樹脂上進(jìn)行。將Fmoc合成策略與HBTU/DIPEA活化一起應(yīng)用。在固相合成方案中，在位置1使用Fmoc-Tza-OH。用King氏混合物(D.S.King,C.G.Fields,G.B.Fields,Int.J.PeptideProteinRes.36,1990,255-266)將肽從樹脂上裂解下來(lái)。將粗產(chǎn)物使用乙腈/水梯度(兩個(gè)緩沖液均含有0.1％TFA)在Waters柱(Sunfire，制備型C18)上通過(guò)制備型HPLC純化。最后，通過(guò)LC-MS確認(rèn)經(jīng)純化的肽的分子量。以類似的方式合成了SEQIDNO:3-36的肽，參見表2。表2：合成的肽的列表及計(jì)算分子量對(duì)實(shí)測(cè)分子量的比較實(shí)施例4：化學(xué)穩(wěn)定性和溶解性如方法中所述評(píng)價(jià)了肽化合物的溶解性和化學(xué)穩(wěn)定性。結(jié)果在表3中給出。表3:化學(xué)穩(wěn)定性和溶解性實(shí)施例5：關(guān)于GLP-1和胰高血糖素受體的體外數(shù)據(jù)通過(guò)將表達(dá)人胰高血糖素受體(hGLUCR)和人GLP-1受體(hGLP-1R)的細(xì)胞暴露于增加濃度的所列化合物并如方法中所述測(cè)量形成的cAMP而測(cè)定了肽化合物對(duì)于GLP-1和胰高血糖素受體的效力。關(guān)于對(duì)人GLP-1受體(hGLP-1R)和人胰高血糖素受體(hGLUCR)有活性的毒蜥外泌肽-4衍生物的結(jié)果顯示于表4中。表4：毒蜥外泌肽-4類似物對(duì)于GLP-1受體和胰高血糖素受體的EC50值(以pM表示)實(shí)施例6：比較測(cè)試已經(jīng)測(cè)試了選出的在位置1包含人工氨基酸4-噻唑丙氨酸的毒蜥外泌肽-4衍生物并與在位置1具有組氨酸的相應(yīng)化合物進(jìn)行了比較。位置1的組氨酸不僅在胰高血糖素中對(duì)于活化受體是關(guān)鍵的，而且在許多相關(guān)的肽包括GLP-1和毒蜥外泌肽-4中(亦如此)。因此，令人驚訝的是人工氨基酸4-噻唑丙氨酸產(chǎn)生了與在位置1具有組氨酸的相同化合物相比甚至更高的受體活化。另外，反調(diào)節(jié)胰高血糖素效果的GLP-1受體的活化通過(guò)引入人工氨基酸4-噻唑丙氨酸而令人驚訝地降低。這導(dǎo)致更具選擇性的、具有更高GCG/GLP-1活性比的胰高血糖素受體激動(dòng)劑。參照對(duì)化合物和對(duì)于GLP-1和胰高血糖素受體的相應(yīng)的EC50值(以pM指示)在表5中給出。表5：在位置1包含人工氨基酸4-噻唑丙氨酸的毒蜥外泌肽-4衍生物與在位置1包含天然氨基酸組氨酸的毒蜥外泌肽-4的比較。對(duì)于GLP-1和胰高血糖素受體的EC50值以pM指示。實(shí)施例7：皮下注射后在麻醉大鼠中SEQ.ID5和SEQ.ID6對(duì)葡萄糖釋放的作用在2小時(shí)的預(yù)處理期間，血糖穩(wěn)定在約6mmol/l的水平，表示了大鼠的正常喂養(yǎng)值(normalfedvalue)。30μg/kg劑量的GCG引起了血糖的迅速上升，其在30分鐘之后達(dá)到約10至11mmol/l的血糖水平的峰值。以10、20和30μg/kg的劑量皮下施用的測(cè)試化合物SEQ.ID5引起了血糖的劑量依賴性升高，其分別在注射后30、45、90分鐘達(dá)到峰值。20μg/kg的SEQ.ID5的劑量顯示與30μg/kgGCG相比近乎相當(dāng)形狀的血糖偏移(bloodglucoseexcursion)(圖1)。10和30μg/kg的劑量的測(cè)試化合物SEQ.ID6引起了血糖的劑量依賴性升高，其分別在注射后30和60分鐘達(dá)到峰值。10μg/kg劑量的SEQ.ID6顯示與30μg/kgGCG相比更有力的血糖偏移(圖2)。實(shí)施例8：皮下注射后在血糖正常的比格犬中SEQ.ID5和SEQ.ID6對(duì)葡萄糖釋放的作用在動(dòng)物和人中注射胰高血糖素導(dǎo)致肝臟糖原的迅速招募，糖原立即分解為葡萄糖。這導(dǎo)致急性但短效的血糖升高。在血糖正常的比格犬中，皮下(s.c.)注射1μg/kg人胰高血糖素導(dǎo)致血糖在15分鐘內(nèi)迅速升高2-3mmol/L。皮下注射SEQ.ID5和SEQ.ID6模擬了人胰高血糖素對(duì)血糖的作用。在犬中，皮下注射1μg/kgSEQ.ID5后的凈總葡萄糖響應(yīng)(血糖AUC(0-240分鐘)相對(duì)于基線的變化)與1μg/kg皮下人胰高血糖素的情況類似。血糖對(duì)SEQ.ID5的響應(yīng)依賴于劑量而增加，直至以10μg/kg皮下達(dá)到了～3.5-4mmol/L的峰值增加(圖3)。在此之上更高劑量的皮下SEQ.ID5不再導(dǎo)致更高的葡萄糖偏移。在犬中葡萄糖響應(yīng)皮下SEQ.ID5的發(fā)生與人胰高血糖素的情況類似，盡管葡萄糖響應(yīng)的持續(xù)時(shí)間稍長(zhǎng)。SEQ.ID5經(jīng)由所有胃腸外途徑如皮下、肌內(nèi)和靜脈內(nèi)注射均有活性，導(dǎo)致了快速且瞬時(shí)的血糖升高。在犬中，皮下和肌內(nèi)注射SEQ.ID5在活性和血糖時(shí)間-作用曲線方面沒(méi)有區(qū)別(圖4)。關(guān)于對(duì)血糖響應(yīng)的誘導(dǎo)，SEQ.ID5和SEQ.ID6在血糖正常的犬中有類似的活性(圖5)。表10：序列序列表<110>賽諾菲(SANOFI)<120>作為選擇性胰高血糖素受體激動(dòng)劑的毒蜥外泌肽-4衍生物<130>DE2014/055<160>36<170>PatentInversion3.5<210>1<211>39<212>PRT<213>吉拉毒蜥(Helodermasuspectum)<220><221>MOD_RES<222>(39)..(39)<223>酰胺化的C末端<400>1HisGlyGluGlyThrPheThrSerAspLeuSerLysGlnMetGluGlu151015GluAlaValArgLeuPheIleGluTrpLeuLysAsnGlyGlyProSer202530SerGlyAlaProProProSer35<210>2<211>29<212>PRT<213>人(Homosapiens)<400>2HisSerGlnGlyThrPheThrSerAspTyrSerLysTyrLeuAspSer151015ArgArgAlaGlnAspPheValGlnTrpLeuMetAsnThr2025<210>3<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(1)..(1)<223>Xaa是L-4-噻唑丙氨酸(Tza)<220><221>MOD_RES<222>(14)..(14)<223>Xaa是L-正亮氨酸(Nle)<400>3XaaSerGlnGlyThrPheThrSerAspLeuSerLysGlnXaaGluSer151015ArgArgAlaGlnAspPheIleGluTrpLeuLeuAlaThrGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35<210>4<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(1)..(1)<223>Xaa是L-4-噻唑丙氨酸(Tza)<400>4XaaSerGlnGlyThrPheThrSerAspLeuSerLysGlnLeuGluSer151015ArgArgAlaGlnGluPheIleGluTrpLeuLeuAlaGlyGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35<210>5<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(1)..(1)<223>Xaa是L-4-噻唑丙氨酸(Tza)<400>5XaaSerGlnGlyThrPheThrSerAspTyrSerLysGlnLeuGluSer151015ArgArgAlaGlnGluPheIleGluTrpLeuLeuAlaGlyGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35<210>6<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(1)..(1)<223>Xaa是L-4-噻唑丙氨酸(Tza)<400>6XaaSerGlnGlyThrPheThrSerAspTyrSerLysGlnLeuGluSer151015ArgArgAlaGlnGluPheIleGluTrpLeuLeuAlaThrGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35<210>7<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(1)..(1)<223>Xaa是L-4-噻唑丙氨酸(Tza)<400>7XaaSerGlnGlyThrPheThrSerAspValSerLysGlnLeuGluSer151015ArgArgAlaGlnGluPheIleGluTrpLeuLeuAlaThrGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35<210>8<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(1)..(1)<223>Xaa是L-4-噻唑丙氨酸(Tza)<400>8XaaSerGlnGlyThrPheThrSerAspIleSerLysGlnLeuGluSer151015ArgArgAlaGlnGluPheIleGluTrpLeuLeuAlaThrGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35<210>9<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(1)..(1)<223>Xaa是L-4-噻唑丙氨酸(Tza)<400>9XaaSerGlnGlyThrPheThrSerAspValSerLysGlnLeuGluSer151015ArgArgAlaGlnGluPheIleGluTrpLeuLeuAlaGlyGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35<210>10<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(1)..(1)<223>Xaa是L-4-噻唑丙氨酸(Tza)<220><221>MOD_RES<222>(10)..(10)<223>Xaa是L-苯基甘氨酸(Phg)<400>10XaaSerGlnGlyThrPheThrSerAspXaaSerLysGlnLeuGluSer151015ArgArgAlaGlnGluPheIleGluTrpLeuLeuAlaThrGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35<210>11<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(1)..(1)<223>Xaa是L-4-噻唑丙氨酸(Tza)<220><221>MOD_RES<222>(10)..(10)<223>Xaa是L-1-萘丙氨酸(1NaI)<400>11XaaSerGlnGlyThrPheThrSerAspXaaSerLysGlnLeuGluSer151015ArgArgAlaGlnGluPheIleGluTrpLeuLeuAlaThrGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35<210>12<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(1)..(1)<223>Xaa是L-4-噻唑丙氨酸(Tza)<400>12XaaSerGlnGlyThrPheThrSerAspLeuSerLysGlnLeuGluSer151015ArgArgAlaGlnGluPheIleGluTrpLeuLeuAlaThrGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35<210>13<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(1)..(1)<223>Xaa是L-4-噻唑丙氨酸(Tza)<220><221>MOD_RES<222>(14)..(14)<223>Xaa是L-正亮氨酸(Nle)<400>13XaaSerGlnGlyThrPheThrSerAspPheSerLysGlnXaaGluSer151015ArgArgAlaGlnAspPheIleGluTrpLeuLeuAlaThrGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35<210>14<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(1)..(1)<223>Xaa是L-4-噻唑丙氨酸(Tza)<220><221>MOD_RES<222>(14)..(14)<223>Xaa是L-正亮氨酸(Nle)<400>14XaaSerGlnGlyThrPheThrSerAspIleSerLysGlnXaaGluSer151015ArgArgAlaGlnGluPheIleGluTrpLeuLeuAlaThrGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35<210>15<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(1)..(1)<223>Xaa是L-4-噻唑丙氨酸(Tza)<400>15XaaSerGlnGlyThrPheThrSerAspLeuSerLysGlnLeuGluSer151015ArgArgAlaGlnAspPheIleGluTrpLeuLeuAlaThrGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35<210>16<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(1)..(1)<223>Xaa是L-4-噻唑丙氨酸(Tza)<220><221>MOD_RES<222>(14)..(14)<223>Xaa是L-正亮氨酸(Nle)<400>16XaaSerGlnGlyThrPheThrSerAspLeuSerLysGlnXaaGluSer151015ArgArgAlaGlnGluPheIleGluTrpLeuLeuAlaThrGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35<210>17<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(1)..(1)<223>Xaa是L-4-噻唑丙氨酸(Tza)<220><221>MOD_RES<222>(14)..(14)<223>Xaa是L-正亮氨酸(Nle)<400>17XaaSerGlnGlyThrPheThrSerAspTyrSerLysGlnXaaGluSer151015ArgArgAlaGlnGluPheIleGluTrpLeuLeuAlaThrGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35<210>18<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(1)..(1)<223>Xaa是L-4-噻唑丙氨酸(Tza)<220><221>MOD_RES<222>(10)..(10)<223>Xaa是L-2-氟苯甘氨酸(2FPhg)<220><221>MOD_RES<222>(14)..(14)<223>Xaa是L-正亮氨酸(Nle)<400>18XaaSerGlnGlyThrPheThrSerAspXaaSerLysGlnXaaGluSer151015ArgArgAlaGlnAspPheIleGluTrpLeuLeuAlaThrGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35<210>19<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(1)..(1)<223>Xaa是L-4-噻唑丙氨酸(Tza)<220><221>MOD_RES<222>(10)..(10)<223>Xaa是L-1-萘丙氨酸(1Nal)<220><221>MOD_RES<222>(14)..(14)<223>Xaa是L-正亮氨酸(Nle)<400>19XaaSerGlnGlyThrPheThrSerAspXaaSerLysGlnXaaGluSer151015ArgArgAlaGlnAspPheIleGluTrpLeuLeuAlaThrGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35<210>20<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(1)..(1)<223>Xaa是L-4-噻唑丙氨酸(Tza)<220><221>MOD_RES<222>(10)..(10)<223>Xaa是L-環(huán)己基甘氨酸(Chg)<220><221>MOD_RES<222>(14)..(14)<223>Xaa是L-正亮氨酸(Nle)<400>20XaaSerGlnGlyThrPheThrSerAspXaaSerLysGlnXaaGluSer151015ArgArgAlaGlnAspPheIleGluTrpLeuLeuAlaThrGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35<210>21<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(1)..(1)<223>Xaa是L-4-噻唑丙氨酸(Tza)<220><221>MOD_RES<222>(10)..(10)<223>Xaa是L-2-氟苯甘氨酸(2FPhg)<400>21XaaSerGlnGlyThrPheThrSerAspXaaSerLysGlnLeuGluSer151015ArgArgAlaGlnAspPheIleGluTrpLeuLeuAlaThrGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35<210>22<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(1)..(1)<223>Xaa是L-4-噻唑丙氨酸(Tza)<220><221>MOD_RES<222>(10)..(10)<223>Xaa是L-1-萘丙氨酸(1Nal)<400>22XaaSerGlnGlyThrPheThrSerAspXaaSerLysGlnLeuGluSer151015ArgArgAlaGlnAspPheIleGluTrpLeuLeuAlaThrGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35<210>23<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(1)..(1)<223>Xaa是L-4-噻唑丙氨酸(Tza)<220><221>MOD_RES<222>(10)..(10)<223>Xaa是L-環(huán)己基甘氨酸(Chg)<400>23XaaSerGlnGlyThrPheThrSerAspXaaSerLysGlnLeuGluSer151015ArgArgAlaGlnAspPheIleGluTrpLeuLeuAlaThrGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35<210>24<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(1)..(1)<223>Xaa是L-4-噻唑丙氨酸(Tza)<220><221>MOD_RES<222>(10)..(10)<223>Xaa是L-環(huán)己基甘氨酸(Chg)<220><221>MOD_RES<222>(14)..(14)<223>Xaa是L-正亮氨酸(Nle)<400>24XaaSerGlnGlyThrPheThrSerAspXaaSerLysGlnXaaGluSer151015ArgArgAlaGlnGluPheIleGluTrpLeuLeuAlaThrGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35<210>25<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(1)..(1)<223>Xaa是L-4-噻唑丙氨酸(Tza)<220><221>MOD_RES<222>(10)..(10)<223>Xaa是L-叔亮氨酸(Tle)<220><221>MOD_RES<222>(14)..(14)<223>Xaa是L-正亮氨酸(Nle)<400>25XaaSerGlnGlyThrPheThrSerAspXaaSerLysGlnXaaGluSer151015ArgArgAlaGlnGluPheIleGluTrpLeuLeuAlaThrGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35<210>26<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(14)..(14)<223>Xaa是L-正亮氨酸(Nle)<400>26HisSerGlnGlyThrPheThrSerAspLeuSerLysGlnXaaGluSer151015ArgArgAlaGlnAspPheIleGluTrpLeuLeuAlaThrGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35<210>27<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<400>27HisSerGlnGlyThrPheThrSerAspLeuSerLysGlnLeuGluSer151015ArgArgAlaGlnGluPheIleGluTrpLeuLeuAlaGlyGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35<210>28<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<400>28HisSerGlnGlyThrPheThrSerAspTyrSerLysGlnLeuGluSer151015ArgArgAlaGlnGluPheIleGluTrpLeuLeuAlaGlyGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35<210>29<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<400>29HisSerGlnGlyThrPheThrSerAspTyrSerLysGlnLeuGluSer151015ArgArgAlaGlnGluPheIleGluTrpLeuLeuAlaThrGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35<210>30<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<400>30HisSerGlnGlyThrPheThrSerAspValSerLysGlnLeuGluSer151015ArgArgAlaGlnGluPheIleGluTrpLeuLeuAlaThrGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35<210>31<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<400>31HisSerGlnGlyThrPheThrSerAspIleSerLysGlnLeuGluSer151015ArgArgAlaGlnGluPheIleGluTrpLeuLeuAlaThrGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35<210>32<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(10)..(10)<223>Xaa是L-苯基甘氨酸(Phg)<400>32HisSerGlnGlyThrPheThrSerAspXaaSerLysGlnLeuGluSer151015ArgArgAlaGlnGluPheIleGluTrpLeuLeuAlaThrGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35<210>33<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(10)..(10)<223>Xaa是L-1-萘丙氨酸(1Nal)<400>33HisSerGlnGlyThrPheThrSerAspXaaSerLysGlnLeuGluSer151015ArgArgAlaGlnGluPheIleGluTrpLeuLeuAlaThrGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35<210>34<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<400>34HisSerGlnGlyThrPheThrSerAspLeuSerLysGlnLeuGluSer151015ArgArgAlaGlnGluPheIleGluTrpLeuLeuAlaThrGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35<210>35<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<400>35HisSerGlnGlyThrPheThrSerAspLeuSerLysGlnLeuGluSer151015ArgArgAlaGlnAspPheIleGluTrpLeuLeuAlaThrGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35<210>36<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(14)..(14)<223>Xaa是L-正亮氨酸(Nle)<400>36HisSerGlnGlyThrPheThrSerAspLeuSerLysGlnXaaGluSer151015ArgArgAlaGlnGluPheIleGluTrpLeuLeuAlaThrGlyProGlu202530SerGlyAlaProProProSer35當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3