專(zhuān)利名稱(chēng)：促生長(zhǎng)素抑制素受體2拮抗劑的制作方法
促生長(zhǎng)素抑制素受體2拮抗劑相關(guān)申請(qǐng)本申請(qǐng)是專(zhuān)利合作條約(PCT)申請(qǐng)，要求2008年4月16日提交的美國(guó)申請(qǐng)?zhí)?12/104, 318的優(yōu)先權(quán)，其是PCT申請(qǐng)?zhí)朠CT/US2007/081，430和美國(guó)申請(qǐng)?zhí)?1/872，367的 部分繼續(xù)，這兩個(gè)申請(qǐng)都在2007年10月15日提交，要求2006年10月16日提交的美國(guó)臨 時(shí)申請(qǐng)60/8 ，637的權(quán)益。這些申請(qǐng)的內(nèi)容在此通過(guò)引用整體并入。政府支持本發(fā)明的內(nèi)容得到國(guó)家衛(wèi)生研究院授予的資助號(hào)DK-59953的支持。政府可對(duì)本 發(fā)明具有某些權(quán)利。
背景技術(shù)：
環(huán)狀十四肽促生長(zhǎng)素抑制素-H(SRIF)最初從下丘腦分離并被鑒定為生長(zhǎng)激素 (GH)從垂體前葉釋放的生理抑制劑。該十四肽在3-位置和14-位置的兩個(gè)半胱氨酰氨基 酸殘基的硫氫基之間具有橋聯(lián)鍵或環(huán)化鍵。SRIF和SRIF相關(guān)類(lèi)似物影響多個(gè)細(xì)胞過(guò)程，特 別是與GH釋放相關(guān)的那些過(guò)程，還抑制某些腫瘤的生長(zhǎng)。例如，類(lèi)似物[D-Trp8]-SRIF具 有氨基酸序列(環(huán) 314) H-Ala-Gly-Cys-Lys-Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys-ΟΗ,并且具有比SRIF高得多的抑制GH釋放的效價(jià)。SRIF通過(guò)與膜結(jié)合的結(jié)構(gòu)相似受體家族相互作用而引發(fā)其生物效應(yīng)。五種SRIF 受體已經(jīng)被克隆并稱(chēng)為SSTR 1-5。所有五種受體以高親和力結(jié)合SRIF和觀(guān)氨基酸SRIF 肽SRIF-28(來(lái)自豬胃腸道以及豬和羊的下丘腦)。已經(jīng)鑒定了各種SSTR的激動(dòng)劑和拮抗 劑。促生長(zhǎng)素抑制素肽和類(lèi)似物可以被修飾以實(shí)現(xiàn)選擇性結(jié)合個(gè)體SSTR。此類(lèi)肽和類(lèi) 似物用于例如區(qū)分個(gè)體受體的個(gè)體信號(hào)傳導(dǎo)功能。受體特異性肽和類(lèi)似物的使用已經(jīng)導(dǎo)致 不同受體亞型介導(dǎo)體內(nèi)SRIF不同功能的觀(guān)念。例如，SSTR2和SSTR5的選擇性拮抗劑已經(jīng)被鑒定并用于揭示這些受體的不同功 能。認(rèn)為這兩種受體是外周組織中主要的亞型。認(rèn)為SSTR2介導(dǎo)對(duì)生長(zhǎng)激素、胰高血糖素 和胃酸分泌的抑制。激動(dòng)劑奧曲肽顯示對(duì)SSTR2的一定特異性。相反，SSTR5表現(xiàn)為主要 參與控制胰島素和淀粉酶釋放。已經(jīng)描述了分別對(duì)SSTR2和SSTR5具有特異性的類(lèi)似物。SSTR3介導(dǎo)對(duì)胃平滑肌收縮的抑制。顯示了特異性結(jié)合SSTR3的促生長(zhǎng)素抑制素 類(lèi)似物。SSTR4存在于腦垂體、肺、胃腸道、腎和某些腫瘤中，基本上排除其他SRIF受體。認(rèn) 為它在結(jié)合SRIF后被活化。SSTR4和SSTRl特異性配體已經(jīng)用于例如治療內(nèi)皮細(xì)胞的方法 中。對(duì)SSTR4特異性的受體選擇性促生長(zhǎng)素抑制素肽類(lèi)似物是本領(lǐng)域已知的。促生長(zhǎng)素抑制素受體在病理狀態(tài)、特別是胃腸道的神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤中表達(dá)。源于 促生長(zhǎng)素抑制素靶組織的大多數(shù)人類(lèi)腫瘤具有保守的促生長(zhǎng)素抑制素受體。促生長(zhǎng)素抑制 素信號(hào)傳導(dǎo)的效應(yīng)首先發(fā)現(xiàn)于生長(zhǎng)激素生成腺瘤和TSH生成腺瘤中；約一半的內(nèi)分泌失活 腺瘤展示促生長(zhǎng)素抑制素受體。90%的類(lèi)癌和大部分胰島細(xì)胞癌，包括它們的轉(zhuǎn)移，通常具 有高密度的促生長(zhǎng)素抑制素受體。然而，僅10%的結(jié)腸直腸癌且沒(méi)有外分泌胰腺癌含有促生長(zhǎng)素抑制素受體。腫瘤中的促生長(zhǎng)素抑制素受體可以例如使用體外結(jié)合方法或使用體內(nèi) 成像技術(shù)來(lái)鑒定；后者允許準(zhǔn)確定位患者中的腫瘤及其轉(zhuǎn)移。因?yàn)槲改c胰腺腫瘤中促生長(zhǎng) 素抑制素受體是功能性的，它們的鑒定可用于評(píng)估類(lèi)似物抑制患者中過(guò)度激素釋放的治療 效力。鑒于其作為診斷和治療靶的用途，需要強(qiáng)力結(jié)合SSTR2同時(shí)顯示僅最小傾向結(jié)合 其他四種受體的促生長(zhǎng)素抑制素拮抗劑。對(duì)于用作診斷成像劑而言，此類(lèi)拮抗劑具有超越 SSTR2選擇性激動(dòng)劑的優(yōu)點(diǎn)，因?yàn)樗鲛卓箘﹥?yōu)選不被內(nèi)化。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明描述了與新穎SSTR2-特異性拮抗劑相關(guān)的組合物以及使用所述拮抗劑的方法。一個(gè)實(shí)施方案涉及與選自由下述組成的組的SSTR2結(jié)合的促生長(zhǎng)素抑制素 拮抗劑(i) D0TA-pN02Phe-c [DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys] -DTyr-NH2 ； (ii) Η2Ν_ρΝ0 2Phe-c[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(iii) H2N-pN02Phe_c [DCys-A ph (Hor) -DAph (Cbm) -Lys-Thr-Cys] _2Nal_NH2 ； (iv) H2N-Cpa-C [DCys-L-Agl (NMe.苯 甲?；?-DiTrp-Lys-Thr-Cys]-2Nal-NH2 ; (v)&N-Cpa-c [DCys-D-Agl (匪e.苯甲酰 基)-DTrp-Lys-Thr-Cys] -2NaI-NH2 ； (vi) H2N-Cpa-C [DCys-Leu-DTrp-Lys-Thr-Cys] _2Nal_ NH2 ； (vii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ；(viii)Cbm-Cpa-c[DC ys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(ix)DOTA- βAla-Cpa-c[DCys-Aph (Cbm)-DTr p-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ；(χ)DOTA-Peg-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Na I-NH2 ； (xi) H2N-Cpa-C [DCys-Aph (Cbm) -DTrp-Lys-Thr-Cys] -NH2 ； (xii) H2N-Cpa-C [DCys-Ap h (Cbm) -DTrp-Lys-Thr-Cys]-Cha-NH2 ； (xiii)H2N-Cpa-C [DCys-Aph (Cbm) -DTrp-Lys-Thr-C ys] -Aph (Hor) -NH2 ； (xiv) H2N-Cpa-C [DCys-Aph (Cbm) -DTrp-Lys-Thr-Cys] -DAph (Cbm) -NH2 ； (XV) H2N-Cpa-C [DCys-Aph (Cbm) -DTrp-Lys-Thr-Cys] -Aph (Cbm) -NH2 ； (xvi) H2N-Cpa-C [DCys -Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DAph(Cbm)-GlyOH ； (xvii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(CONH-OCH3 )-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ； (xviii)H2N-Cpa-C [DCys-Aph (CONH-OH) -DTrp-Lys-Thr-C ys]-2Nal-NH2 ； (xix) H2N-Cpa-C [DCys-Aph (Cbm) -5F-DTrp-Lys-Thr-Cys] -2Nal-NH2 ； (xx) H2 N-Cpa-c [DCys-Aph (Cbm) -5F-Trp-Lys-Thr-Cys] -2NaI-NH2 ； (xxi) H2N-Cpa-C [DCys-Tyr-DAp h (Cbm) -Lys-Thr-Cys] _2Nal_NH2 ； (xxii) H2N-Cpa-C [DCys-Aph (Hor) -DAph (Cbm) -Lys-Thr-C ys]-2Nal-NH2 ； (xxiii) Ac-pN02Phe-c [DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys] -DTyr-NH2 ； (xxiν) H2N -Cpa-c [DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys] -2NaI-NH2 ； (xxv) H2N-Cpa-C [DCys-Tyr-DTrp-NMeLys -Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(xxvi)DOTA-Cpa-c[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]-DTyr -NH2 ；(xxvii) DOTA-Cpa-c[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2 ；禾口(xxviii)DOT A-Cpa-[DCys-Pal-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys] DTyr-NH2。在特定實(shí)施方案中，拮抗劑不顯著 內(nèi)化入表達(dá)SSTR2的細(xì)胞并減少奧曲肽誘導(dǎo)的SSTR2內(nèi)化。在特定實(shí)施方案中，促生長(zhǎng)素 抑制素拮抗劑還包括螯合劑、絡(luò)合劑、綴合劑或標(biāo)記。在特定實(shí)施方案中，拮抗劑相對(duì)于其 他組織優(yōu)先被腫瘤吸收。在特定實(shí)施方案中，拮抗劑相對(duì)于其他組織優(yōu)先被腫瘤吸收。在 特定實(shí)施方案中，腫瘤細(xì)胞中拮抗劑吸收與腎細(xì)胞中拮抗劑吸收的比值為至少約2. 0，在施 用后4小時(shí)測(cè)量。
一個(gè)實(shí)施方案涉及放射成像癌癥的方法，包括(a)施用包含促生長(zhǎng)素抑制素拮 抗劑和放射性核素的組合物；和(b)檢測(cè)所述放射性核素，其中所述促生長(zhǎng)素抑制素拮抗 劑選自由下述組成的組⑴ D0TA-pN02Phe-c [DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys] -DTyr-NH2 ；
(ii)H2N-PNO2Phe-C [DCys-Tyr-DAph (Cbm) -Lys-Thr-Cys] -2NaI-NH2 ； (iii)H2N-pN02Phe-c [DCys-Aph (Hor) -DAph (Cbm) -Lys-Thr-Cys] -2NaI-NH2 ； (iv) H2N-Cpa-C [DCys—L—Agl (NMe. 苯甲?；?PDiTrp-Lys-Thr-Cys]-2Nal-NH2 ; (ν) H2N-Cpa-C [DCys-D-Agl (匪e.苯甲酰 基)-DTrp-Lys-Thr-Cys] -2NaI-NH2 ； (vi) H2N-Cpa-C [DCys-Leu-DTrp-Lys-Thr-Cys] _2Nal_ NH2 ； (vii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ；(viii)Cbm-Cpa-c[DC ys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(ix)DOTA- βAla-Cpa-c[DCys-Aph (Cbm)-DTr p-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ；(χ)DOTA-Peg-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Na I-NH2 ； (xi)H2N-Cpa-C[DCys -Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-NH2 ； (xii)H2N-Cpa-C[DCys-A ph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Cha-NH2 ； (xiii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-C ys] -Aph (Hor) -NH2 ； (xiv) H2N-Cpa-C [DCys-Aph (Cbm) -DTrp-Lys-Thr-Cys] -DAph (Cbm) -NH2 ； (XV) H2N-Cpa-C [DCys-Aph (Cbm) -DTrp-Lys-Thr-Cys] -Aph (Cbm) -NH2 ； (xvi) H2N-Cpa-C [DCys -Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DAph(Cbm)-GlyOH ； (xvii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(CONH-OCH3 )-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ； (xviii)H2N-Cpa-C [DCys-Aph (CONH-OH) -DTrp-Lys-Thr-C ys]-2Nal-NH2 ； (xix) H2N-Cpa-C [DCys-Aph (Cbm) -5F-DTrp-Lys-Thr-Cys] -2Nal-NH2 ； (xx) H2 N-Cpa-c [DCys-Aph (Cbm) -5F-Trp-Lys-Thr-Cys] -2NaI-NH2 ； (xxi) H2N-Cpa-C [DCys-Tyr-DAp h (Cbm) -Lys-Thr-Cys] _2Nal_NH2 ； (xxii) H2N-Cpa-C [DCys-Aph (Hor) -DAph (Cbm) -Lys-Thr-C ys]-2Nal-NH2 ； (xxiii) Ac-pN02Phe-c [DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys] -DTyr-NH2 ； (xxiν) H2N -Cpa-c [DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys] -2NaI-NH2 ； (xxv) H2N-Cpa-C [DCys-Tyr-DTrp-NMeLys -Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(xxvi)DOTA-Cpa-c[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]-DTyr -NH2 ；(xxvii) DOTA-Cpa-c[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2 ；禾口(xxviii)DOT A-Cpa-[DCys-Pal-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys] DTyr-NH2。在特定實(shí)施方案中，促生長(zhǎng)素抑制 素拮抗劑結(jié)合SSTR2。在特定實(shí)施方案中，促生長(zhǎng)素抑制素拮抗劑選擇性結(jié)合SSTR2。一個(gè)實(shí)施方案涉及組合物制備用于治療腫瘤的藥劑的用途，其中所述組合物包含 本發(fā)明所述的促生長(zhǎng)素抑制素拮抗劑和放射性核素。在特定實(shí)施方案中，促生長(zhǎng)素抑制素 拮抗劑選擇性結(jié)合SSTR2。一個(gè)實(shí)施方案涉及用于診斷放射成像癌癥的試劑盒，包含(a)適合容器中本發(fā)明 所述的促生長(zhǎng)素抑制素拮抗劑，其中促生長(zhǎng)素抑制素拮抗劑(i)用至少一種放射性核素 標(biāo)記；(ii)未標(biāo)記并與適合容器中至少一種用于標(biāo)記的放射性核素一起提供；或(iii)未 標(biāo)記并能夠隨后用至少一種放射性核素標(biāo)記；和(b)使用說(shuō)明書(shū)。在特定實(shí)施方案中，促生 長(zhǎng)素抑制素拮抗劑選擇性結(jié)合SSTR2。一個(gè)實(shí)施方案涉及用于治療癌癥的試劑盒，包含(a)適合容器中本發(fā)明描述的 促生長(zhǎng)素抑制素拮抗劑，其中，在放射性核素標(biāo)記促生長(zhǎng)素抑制素拮抗劑后，拮抗劑以對(duì) 于癌癥治療而言的治療有效量存在，并且其中促生長(zhǎng)素抑制素拮抗劑(i)用至少一種放 射性核素標(biāo)記，(ii)未標(biāo)記并與適合容器中至少一種用于標(biāo)記的放射性核素一起提供，或
(iii)未標(biāo)記并能夠隨后用至少一種放射性核素標(biāo)記；和(b)使用說(shuō)明書(shū)。在特定實(shí)施方 案中，促生長(zhǎng)素抑制素拮抗劑選擇性結(jié)合SSTR2。
一個(gè)實(shí)施方案涉及放射成像或治療癌癥的化合物，包含有效量的、與本發(fā)明所述 促生長(zhǎng)素抑制素拮抗劑偶聯(lián)的放射性核素。在特定實(shí)施方案中，拮抗劑選擇性結(jié)合SSTR2， 不顯著內(nèi)化入表達(dá)SSTR2的細(xì)胞中，并且減少奧曲肽誘導(dǎo)的SSTR2的內(nèi)化。


圖1示例說(shuō)明了一些sst2拮抗劑的拮抗性質(zhì)，使用鈣釋放分析。圖2示例說(shuō)明，盡管對(duì)照激動(dòng)劑[Tyr3]_奧曲肽可以減少sst2內(nèi)化，但測(cè)試的 sst2選擇性拮抗劑甚至以10 μ M的濃度單獨(dú)給予時(shí)沒(méi)有效應(yīng)。而且，它們防止由[Tyr3]-奧 曲肽誘導(dǎo)的sst2內(nèi)化。圖3顯示ELISA內(nèi)化分析中另一類(lèi)似物(32)的拮抗性質(zhì)。圖4是顯示拮抗劑純度和內(nèi)化效力的表。圖5是顯示拮抗劑結(jié)合性質(zhì)的表。圖6A和6B顯示了顯示如實(shí)施例11所述SSTR2類(lèi)似物吸收的數(shù)據(jù)。
具體實(shí)施例方式如本發(fā)明所述，除非特別指明表示僅一個(gè)，否則“一”或“一個(gè)”表示一個(gè)或多個(gè)。本發(fā)明使用的“施用”涵蓋所有向患者提供物質(zhì)的適合方式。常用途徑包括口服、 舍下、經(jīng)粘膜、經(jīng)皮、直腸、陰道、皮下、肌肉內(nèi)、靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、鞘內(nèi)、經(jīng)導(dǎo)管、經(jīng)植入體等。 在一些實(shí)施方案中，組合物在腫瘤附近施用或直接施用至腫瘤，例如通過(guò)直接注射入腫瘤 或當(dāng)腫瘤是血液腫瘤時(shí)注射入血液。本發(fā)明使用的“患者”包括任何脊椎動(dòng)物，包括馬、羊、山羊、牛、豬、鳥(niǎo)、貓和靈長(zhǎng)類(lèi) 物種?；颊呖梢允抢缛?。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到，就一種物種而討論的特定的免 疫共刺激分子、信號(hào)傳導(dǎo)分子、細(xì)胞標(biāo)志、細(xì)胞類(lèi)型、感染劑等可以在不同物種中具有相應(yīng) 的類(lèi)似物，并且此類(lèi)類(lèi)似物及其在相應(yīng)和相關(guān)物種中的使用包括在本發(fā)明內(nèi)。本發(fā)明使用的“腫瘤”包括實(shí)體瘤和非實(shí)體瘤；以及從癌前病變和良性腫瘤到癌、 惡性和轉(zhuǎn)移腫瘤的不同的腫瘤發(fā)育階段。如本發(fā)明使用的，例如在SSTR2拮抗劑上下文中，“吸收”指與腫瘤結(jié)合存在的拮抗 劑的量；并且區(qū)別于“內(nèi)化”，“內(nèi)化”指?jìng)€(gè)體細(xì)胞水平上的作用，例如分子進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的 能力。因此，本發(fā)明各種實(shí)施方案具有高度吸收但不內(nèi)化。如本發(fā)明使用的，所有溫度是。C，并且所有比值按體積計(jì)。液體物質(zhì)的百分比也按 體積計(jì)。術(shù)語(yǔ)“選擇性地結(jié)合”或“選擇性結(jié)合”在本發(fā)明指拮抗劑優(yōu)先結(jié)合特定結(jié)合配偶 體，例如，選擇性結(jié)合SSTR2的拮抗劑強(qiáng)力結(jié)合SSTR2，同時(shí)表現(xiàn)出對(duì)其他SSTR或結(jié)合配偶 體的弱結(jié)合或無(wú)結(jié)合。通常，“選擇性”拮抗劑對(duì)選擇性受體的結(jié)合比其對(duì)其他受體的結(jié)合 強(qiáng)約10倍、約100倍或約1000倍(或更高)。本發(fā)明涉及預(yù)想不到的發(fā)現(xiàn)特定修飾有效產(chǎn)生與其他克隆SRIF受體相比對(duì) SSTR2具有選擇性的SRIF肽類(lèi)似物。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)對(duì)SSTR2高度選擇性的一類(lèi)促生長(zhǎng)素抑制素 肽類(lèi)似物。這些肽類(lèi)似物是促生長(zhǎng)素抑制素拮抗劑，并且盡管不內(nèi)化入具有SSTR2受體的 細(xì)胞中，但這些類(lèi)似物以比相當(dāng)?shù)氖荏w選擇性促生長(zhǎng)素抑制素肽激動(dòng)劑更大的量被吸收。這些肽選擇性結(jié)合克隆的SSTR2而不活化受體，并且這些肽類(lèi)似物被碘化或以其他方式被 放射性標(biāo)記時(shí)，保留其期望的生物學(xué)性質(zhì)。因此，這些新肽用于確定腫瘤位置和受體SSTR2 的細(xì)胞表達(dá)，以及用于調(diào)節(jié)某些藥理學(xué)功能，而無(wú)作為此前施用SRIF特征的某些伴隨的副 作用。這些SRIF肽拮抗劑被放射性標(biāo)記時(shí)可用于例如閃爍掃描術(shù)以在體外或體內(nèi)定位表 達(dá)這些受體的腫瘤，使用SPECT或PET。除放射性標(biāo)記以外的標(biāo)記是本領(lǐng)域已知的，例如熒 光標(biāo)記，并且可選擇地使用。當(dāng)肽類(lèi)似物包括適合的螯合的放射性核素時(shí)，這些類(lèi)似物用作 適合治療腫瘤的放射性核素療法的放射性藥物。提供了對(duì)SRIF受體SSTR2具有選擇性親和力的SRIF肽拮抗劑；它們優(yōu)選地還對(duì) SSTR2具有高親和力，例如等于約IOnm或更小的KD。這些肽包括SRIF的縮短的環(huán)狀類(lèi)似 物，其中環(huán)部分被縮短至僅六個(gè)殘基，并且其中在N末端存在一個(gè)殘基并且優(yōu)選地在C末端 添加一個(gè)殘基。換言之，1-，4_，5_，6_，11-，12-和13-位置殘基從14-殘基的天然SRIF中 缺失，產(chǎn)生各種七肽。這些七肽可以具有在C末端添加的殘基，例如殘基15，以形成奧曲肽。標(biāo)準(zhǔn)的三字母縮寫(xiě)表示α -氨基酸殘基，并且其中氨基酸殘基具有異構(gòu)形式，除 非另外明確指明，否則其代表L-形式的氨基酸(例如，Ser = L-絲氨酸)?！癓”或“D”指 特定氨基酸的D-異構(gòu)體和L-異構(gòu)體。當(dāng)下文提及肽中位置時(shí)，參考天然14-殘基促生長(zhǎng) 素抑制素(SRIF)肽的相應(yīng)位置進(jìn)行編號(hào)。表現(xiàn)出對(duì)SSTR2期望特異性的代表性肽拮抗劑的實(shí)例包括例如其中位置1、4_6和 11-13的殘基優(yōu)選被消除的拮抗劑。實(shí)例包括(環(huán)3-14)Xaa1-Xaa2-D-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Xaa6-Xaa7-Xaa8-Xaa9-Xaa10-Xaa11-Xaa12-Xaa^--^-^^14-；其中 Xaa1 是 des-Xaa ；Xaa2 是 Trp (A)、 Phe (B)、Nal 或 Tyr (其中 A 是 H、Cl、F、Br、Me、N02、0Me 或 N-甲酰基并且 B 是 H、鹵素、CH3、 NO2或OCH3) ；D-Xaa3是D-Cys、D-Pen、D-HCys或具有SH-側(cè)鏈的另一 D-異構(gòu)體α -氨基酸； Xaa4, Xaa5 和 Xaa6 是 des-Xaa ；Xaa7 是 Aph (Q1)、Ala (噻吩基)、Tyr、ITyr 或 Trp (A)(其中 Q1 是 Cbm、OH-Cbm, CH3-Cbnu OCH3-Cbnu OEt-Cbm, Cbm-Et (OEt)2 或 Hor) ；Xaa8 是 D-Trp (A)、 Trp (A)、Tyr、D-Tyr、Phe (B)、D-Phe (B)、L 或 D-Bz IHi s、L 或 D- (DNP) Hi s、L 或 D-Aph (Cbm)； Xaa9 是 Lys> N°MeLys、hLys、NaMehLys> Orn 或 NaMeOrn ；Xaa10 是 Thr> Ser 或 Val ；Xaa11 > Xaa12和Xaa13是des-Xaa ；Xaa14是Cys、Pen、hCys或具有SH側(cè)鏈的L-異構(gòu)體α -氨基酸； 并且 Xaa15 是2恥1、0-2恥1、Aph ^j2)、D-Aph ^j2)、(R1) Cha、(R1)D-Cha, (R1)Leiu (R1)D-Leiu Tyr、D-Tyr、Trp、D-Trp 或 des-Xaa (其中隊(duì)是 H 或 C°Me，并且 ％ 是 Cbm、OH-Cbm, CH3-Cbnu OCH3-Cbm或OEt-Cbm)。此外，2-位的Tyr可以被放射性碘標(biāo)記、絡(luò)合、綴合或螯合至與肽 類(lèi)似物的N末端殘基的α-氨基直接或經(jīng)接頭連接的物質(zhì)。該物質(zhì)可以發(fā)揮作用，例如連 接放射活性核素(即放射性核素)至肽。例如，大環(huán)螯合劑，例如D0TA，可以添加在N末 端，通過(guò)將其與) 直接結(jié)合或者使用接頭例如GABA( γ氨基丁酸，參見(jiàn)例如美國(guó)專(zhuān)利號(hào) 6，022，523，其內(nèi)容在此通過(guò)引用整體并入)或0々13間接與)(脅2結(jié)合。SRIF類(lèi)似物的另一實(shí)例包括氨基酸序列(環(huán)3-14)Xaa1-Xaa2-D-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Xaa6-Xaa7-Xaa8-LyS-Thr-Xaa1 J-Xaa12-Xaa13~Cys ；胃巾 Xaa2 ^IX^^ Phe ；D-Xaa3 ^ D-Cys ； Xaa7是Aph (Q1)、Tyr或ITyr ；并且) 是D-Trp或D-Aph (Cbm)；并且其中其他的Xaa基團(tuán) 如本發(fā)明所描述。本發(fā)明使用的“Trp”和“D-Trp”指未取代的殘基以及其中在Trp的5_或6_位置 進(jìn)行氫的單取代的殘基。這些位置上的取代可以包括例如氯代、氟代、溴代、甲基、硝基和甲氧基，使用氯代、氟代和溴代或使用甲?；〈胚酦的氫。本發(fā)明使用的“Nal”指在β -碳原子上被萘基取代的丙氨酸異構(gòu)體，與萘的連接 優(yōu)選在環(huán)的2位置或者任選在1位置。本發(fā)明使用的“Aph”指氨基苯基丙氨酸，其中氨基優(yōu)選連接至苯環(huán)的4位置，但是 連接在2-或3-位置一般是等價(jià)的。本發(fā)明使用的“Aph (Cbm)，，指4-脲基-苯基丙氨酸。 Aph(OH-Cbm)表示4-(3-羥基)-脲基-苯基丙氨酸。本發(fā)明使用的“Aph(CH3-Cbm) ”指 4- (3-甲基)-脲基-苯基丙氨酸。本發(fā)明使用的"Aph (OCH3-Cbm)，，指4- (3-甲氧基)-脲 基-苯基丙氨酸。本發(fā)明使用的“Aph [ (EtO) 2Et-Cbm] ”指4- {3- [2- (2-乙氧基-乙氧基)-乙 基]}-脲基-苯基丙氨酸。本發(fā)明使用的“ITyr”指碘化的L-酪氨酸。本發(fā)明使用的“Cpa” 指氯-Phe，例如4-ClPhe0本發(fā)明使用的“Aph (Hor) ”指4_[ (2，6- 二氧-六氫-嘧啶_4_羰 基)-氨基]-苯基丙氨酸。本發(fā)明使用的“SRIF”指14-殘基環(huán)狀促生長(zhǎng)素抑制素肽。本 發(fā)明使用的“Cha”指環(huán)己基胺。本發(fā)明使用的“Pen”指青霉胺(β_巰基纈氨酸)。本發(fā)明 使用的“hLys”或“hCys”指在側(cè)鏈具有一個(gè)額外CH2基團(tuán)的α -氨基酸。C末端通常被酰胺化，盡管可以使用等價(jià)物，例如Gly-OH。肽的N末端可以各種 方式修飾而不顯著不利地影響結(jié)合親和力。認(rèn)為對(duì)這些環(huán)狀肽的所有修飾被包括作為整 體發(fā)明肽的部分。例如，可以絡(luò)合劑或綴合劑(Z)的形式向N末端氨基酸進(jìn)行多種添加， 然后絡(luò)合劑或綴合劑(Z)可用于將需要的部分結(jié)合至肽或提供標(biāo)記。此類(lèi)部分Z—般可 選自由下述組成的組基于DOTA的螯合劑和基于DTPA的螯合劑、基于NOTA的螯合劑、羰 基化合物、2-胼基煙酰胺(HYNIC)、N4-螯合劑、去鐵案(desferrioxamin)和NxSy-螯合 劑，全部任選與放射性同位素、用于加鹵的酪氨酸(Tyr)、熒光染料或生物素絡(luò)合。Cpa還 可用作氚化的前體?？梢赃B接螯合劑，例如DTPA、DOTA, HYNIC和P2S2_C00H。螯合劑包括 例如P-NH2-BZ-DOTAO-P-氨基芐基-1，4，7，10-四氮雜環(huán)十二烷_(kāi)1，4，7，10-四乙酸)和 DOTA-P-NH2-酰苯胺[1，4，7，10-四氮雜環(huán)十二烷-1，4，7，10-四乙酸單(對(duì)氨基酰苯胺)]。 或者，如果需要，螯合劑可通過(guò)適合的接頭(L)共價(jià)連接至N末端。適合的接頭包括例如酪 氨酸、賴(lài)氨酸、二氨基丁酸、二氨基丙酸、聚乙二醇、脂肪酸及其衍生物、β-丙氨酸、5-氨基 戊酸、肌氨酸和葡萄糖醛酸。當(dāng)Tyr出現(xiàn)在N末端時(shí)，其可以被放射性碘化或以其他方式標(biāo) 記。具有超過(guò)約20個(gè)氨基酸的?；€可以存在于N末端，因?yàn)槿绻枰?，N末端殘基還可 用大的部分?；粨p失選擇性。已經(jīng)通過(guò)測(cè)試本發(fā)明類(lèi)似物肽與五種不同克隆的人SRIF受體的相互作用而證明 了其對(duì)SSTR2的結(jié)合選擇性。一般而言，表達(dá)受體的重組細(xì)胞經(jīng)洗滌和勻漿而制備適合緩 沖液中粗制蛋白勻漿。在典型分析中，將適量的來(lái)自細(xì)胞勻漿的蛋白質(zhì)放入小體積的處于 適當(dāng)PH的適當(dāng)分析緩沖液中。以適宜的濃度向混合物中添加候選物質(zhì)，例如潛在的SRIF 激動(dòng)劑和拮抗劑，并監(jiān)測(cè)候選物質(zhì)與報(bào)告多肽之間的相互作用。結(jié)合SSTR2但對(duì)其他受體 也顯示親和性的受體拮抗劑可以用于本發(fā)明的各種組合物和方法，包括用于腫瘤成像和治 療的試劑盒、組合物和方法。在優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明多肽僅明顯強(qiáng)力結(jié)合SSTR2，并且它 們的結(jié)合表現(xiàn)出高親和力。對(duì)克隆的SRIF受體進(jìn)行受體結(jié)合分析，并使用競(jìng)爭(zhēng)性分析產(chǎn)生IC5tl值，IC50值指 示從50%結(jié)合位點(diǎn)替代被測(cè)量的靶配體飽和濃度所必需的競(jìng)爭(zhēng)性配體的濃度。本發(fā)明還涉及例如內(nèi)部操作地檢測(cè)人體中健康狀態(tài)下不含有大量SSTR2的組織中惡性腫瘤的方法。該方法包括例如(i)向這種人施用一種組合物，該組合物包含足以通 過(guò)Y檢測(cè)探針檢測(cè)的量的SSTR2選擇性肽，其中所述肽例如用99mTc、161Tb、9°Y、mLu、123I或 125I放射活性標(biāo)記，和(ii)在允許活性物質(zhì)結(jié)合并吸收入腫瘤以及血液清除放射性后，使 這種人經(jīng)受通過(guò)使用Y檢測(cè)探針的身體相關(guān)區(qū)域的放射檢測(cè)技術(shù)。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明SRIF拮抗劑對(duì)SSTR2具有高度選擇性，并且它們以大 于對(duì)SSTR2僅部分特異性的其他已知SRIF肽激動(dòng)劑的量被吸收。更重要地，認(rèn)為SRIF拮 抗劑用于治療表達(dá)SSTR2的腫瘤細(xì)胞。此類(lèi)治療可包括例如放射療法，其成功直接取決于 腫瘤吸收的輻射的量。由于它們被腫瘤細(xì)胞吸收而不必然被腫瘤細(xì)胞內(nèi)化，因此，本發(fā)明拮 抗劑比已知激動(dòng)劑更有效用于腫瘤放療。本發(fā)明拮抗劑還用于閃爍掃描術(shù)以確定表達(dá)SSTR2的細(xì)胞和組織在全身的分布。 通過(guò)放射性?huà)呙杌虼殴舱竦耐獠砍上竦氖褂迷试S在體內(nèi)半定量檢測(cè)。本發(fā)明拮抗劑還用于選擇性阻斷某些由SSTR2介導(dǎo)的藥理學(xué)效應(yīng)。SRIF的許多效 應(yīng)是本領(lǐng)域已知的或會(huì)知道的。放射性標(biāo)記的拮抗劑用于治療性治療人體中健康狀態(tài)下不含大量SSTR2的組織 中的惡性腫瘤。放射性標(biāo)記的SSTR2-選擇性肽拮抗劑可以有效用于閃爍掃描術(shù)或用于 對(duì)抗或控制腫瘤的量包括于組合物中而被施用。放射性標(biāo)記的肽可例如使用186Re、188Re、 miCdd^Cu^Td^Sru^Te^Pr^Pr^Gd^Ga^Ga^Te^Pt、 mAt^Au^Au^Tb^Pd^Dy^Prn^^^Sm^Gd^Gd^Ho^m、16、、17、、177!^、 1(l5Rh、114Ag、124I 或 131I 來(lái)標(biāo)記。標(biāo)記的SRIF類(lèi)似物用于藥物篩選分析以篩選以高親和力結(jié)合SSTR2并且是高度 有效拮抗劑的新的有效肽和非肽物質(zhì)。使用本發(fā)明所述對(duì)受體SSTR2具有選擇性的配體， 可以獲得對(duì)重組產(chǎn)生的受體的基線(xiàn)活性。然后可以進(jìn)行標(biāo)記配體和候選物對(duì)SSTR2的競(jìng)爭(zhēng) 性結(jié)合分析以確定相對(duì)結(jié)合親和力?；蛘?，受體功能的抑制劑或修飾劑(例如拮抗劑)的 有希望的候選物可直接加入分析混合物以確定此類(lèi)候選物對(duì)受體的效應(yīng)。通過(guò)比較在候選 物存在或不存在時(shí)的受體活性程度，則可以獲得有關(guān)候選物質(zhì)對(duì)受體正常功能效應(yīng)的信息 并因此確定與已知SSTR2選擇性類(lèi)似物相比其作為激動(dòng)劑或拮抗劑的功能。下述實(shí)施例描 述的環(huán)狀SRIF肽是拮抗劑，并且它們用來(lái)介導(dǎo)SSTR2的正常功能。本發(fā)明描述的肽可通過(guò)經(jīng)典溶液合成來(lái)合成，但是酰胺化的肽優(yōu)選通過(guò)本領(lǐng)域已 知的在甲基二苯甲胺(MBHA)樹(shù)脂或BHA樹(shù)脂上的固相技術(shù)合成。具有游離羧基C末端的 肽可如美國(guó)專(zhuān)利號(hào)7，019，109中的教導(dǎo)來(lái)合成，其內(nèi)容在此通過(guò)引用整體并入。具有酰胺 化C末端的肽可如美國(guó)專(zhuān)利號(hào).5，874，227的教導(dǎo)來(lái)合成，其內(nèi)容在此通過(guò)引用整體并入。 固相合成以逐步方式在C末端開(kāi)始向鏈中添加氨基酸的方式進(jìn)行。本領(lǐng)域已知的側(cè)鏈保護(hù) 基作為具有特定反應(yīng)性側(cè)鏈的任何氨基酸的部分被加入，并且任選地可用于其它情況(例 如 Ρ)，其中此類(lèi)氨基酸偶聯(lián)至建立在樹(shù)脂上的鏈上。此類(lèi)合成提供完全保護(hù)的中間體肽 基樹(shù)脂。保護(hù)基團(tuán)一般在氧化而在Cys側(cè)鏈之間產(chǎn)生二硫鍵之前分離并且肽從樹(shù)脂載體裂 解。本發(fā)明描述的SRIF類(lèi)似物還用于治療性適應(yīng)癥，例如促生長(zhǎng)素抑制素調(diào)節(jié)劑。這 種用途中，類(lèi)似物一般在小于約100微克/千克體重、小于1000微克/千克體重、小于約 100微克/千克體重、小于約10微克/千克體重或小于約1微克/千克體重的水平是有效的。為了延長(zhǎng)的作用，可能需要使用約0.1至約2.5毫克/千克體重的劑量水平使用。這 些類(lèi)似物溶于水并因此可制備為相對(duì)濃縮的溶液以施用。本發(fā)明的肽不僅提供用于結(jié)合SSTR2的更有效的配體，而且使用標(biāo)記肽(例如本 發(fā)明肽的放射性標(biāo)記形式)可促進(jìn)更有效拮抗劑的藥物篩選。本領(lǐng)域已知的篩選分析可采用直接來(lái)自重組宿主的受體多肽SSTR2，并且可用于 鑒定用于阻斷或模擬促生長(zhǎng)素抑制素期望的某些方面同時(shí)消除可產(chǎn)生自其他受體的活化 或阻斷的激素的不期望方面的物質(zhì)。在這方面，如果需要放射性碘化類(lèi)似物用于篩選目的， 則可以在N末端添加Tyr而取代D0TA，或者可以在2位置使用Tyr而取代Cpa，或者適合的 放射性配體可通過(guò)DOTA螯合劑連接。使用候選化合物的競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合分析可首先以該方式 對(duì)SSTR2進(jìn)行以檢索高結(jié)合親和力；然后通過(guò)篩選多個(gè)SRIF受體，可以確認(rèn)是否存在需要 的僅對(duì)該受體的選擇性結(jié)合。非放射性標(biāo)記的肽可用于治療所有已知表達(dá)SSTR2的器官的 疾病，所述器官包括肺、胃腸道和腎。因?yàn)橄騍RIF類(lèi)似物N末端添加不表現(xiàn)為不利影響選擇性結(jié)合，應(yīng)該清楚，這些化 合物可與放射活性核素絡(luò)合，目的是將該物質(zhì)載至腫瘤或希望細(xì)胞凋亡的其他組織。例如， 適合的螯合劑可用于將SRIF類(lèi)似物與前述高度放射活性的金屬絡(luò)合。適合螯合放射活性 金屬原子的螯合基團(tuán)的一些實(shí)例是四配位基螯合劑或基團(tuán)，衍生自乙二胺四乙酸(EDTA)、 二乙烯三胺戊乙酸(DTPA)、環(huán)己基1，2-二胺四乙酸(⑶TA)、乙二醇-0，0' -二(2-氨基 乙基)-N，N，N'，N'-四乙酸(EGTA)、N，N-二(羥基芐基)-乙二胺-N，N' - 二乙酸 (HBED)、三乙烯四胺六乙酸(TTHA)、1，4，7，10-四氮雜環(huán)十二烷-N，N'，N"，N"‘-四乙酸 (DOTA)、羥基乙二胺三乙酸(HEDTA)、1，4，8，11-四氮雜環(huán)-十四烷-N，N'，N"，N"‘-四 乙酸(TETA)、取代的DTPA、取代的EDTA。其他的螯合劑以及放射活性劑公開(kāi)于WO 95/22341 和WO 04/082722以及美國(guó)專(zhuān)利公布2004/(^似842和2005/0070470，其完整內(nèi)容在此通過(guò) 引用并入。螯合劑可衍生自例如EDTA和D0TA。一些適合的鹽是111^i-OXinth99mTc-酒石 酸鹽，其一般可以在對(duì)肽拮抗劑無(wú)害的條件下以簡(jiǎn)單方式形成。SRIF拮抗劑的溶解度可通過(guò)使用親水化合物(例如氫化乳清酸(Hor)或類(lèi)似物) ?；疦末端氨基、或通過(guò)與適合異氰酸酯(例如異氰酸甲酯或異氰酸異丙酯)反應(yīng)以在N 末端產(chǎn)生脲基而得到提高。如本領(lǐng)域已知增加SRIF拮抗劑作用持續(xù)時(shí)間的其他物質(zhì)也可 在N末端連接。與藥學(xué)或獸醫(yī)學(xué)可接受載體組合形成藥物組合物的這些SRIF拮抗劑或其非毒性 鹽可以靜脈內(nèi)、皮下、肌內(nèi)、經(jīng)皮例如鼻內(nèi)、腦脊髓內(nèi)或口服施用于動(dòng)物，包括人和其他哺乳 動(dòng)物。被設(shè)計(jì)用于檢測(cè)組織中的惡性人腫瘤(包括其轉(zhuǎn)移)的此類(lèi)藥物組合物除了藥學(xué)可 接受載體物質(zhì)以外可以包括任選的藥學(xué)可接受佐劑、足以外部成像以通過(guò)Y檢測(cè)探針檢 測(cè)或用于對(duì)抗或控制腫瘤的作為活性物質(zhì)的標(biāo)記的肽拮抗劑。肽拮抗劑應(yīng)該是至少約90% 純的并且優(yōu)選應(yīng)該具有至少約98%的純度；然而，較低的純度是有效的，并且很可用于非 人的哺乳動(dòng)物。該純度表示所述肽構(gòu)成存在的所有類(lèi)似肽和肽片段的所述重量％。對(duì)人的 施用應(yīng)該在醫(yī)生指導(dǎo)下對(duì)抗具體腫瘤和癌癥或調(diào)節(jié)其中SSTR2受體發(fā)揮控制功能的其他 病狀，例如與酪氨酸磷酸酶偶聯(lián)以便能夠刺激該酶以介導(dǎo)SRIF的抗增殖效應(yīng)。所需劑量根 據(jù)待治療的特定病狀、病狀嚴(yán)重度以及所需治療的持續(xù)時(shí)間而變化。腫瘤通常表達(dá)幾種類(lèi)型的肽受體(Reubi, J.和Waser，B.，Eur. J. Nucl. Med.Molec. Imaging, 30 :781-793,2003)。多個(gè)肽受體的此類(lèi)組可以包括sst2受體以及鈴蟾肽 受體、CCK受體、VIP受體、GLP-I受體、神經(jīng)降壓素受體、促胰液素受體、神經(jīng)調(diào)節(jié)肽B受體 和CRF受體等。在這種情況下，SSTR2拮抗劑作為混合物與這些各種受體的一種或多種放 射性標(biāo)記拮抗劑的組合施用應(yīng)該非常明顯地改善此類(lèi)腫瘤的體內(nèi)靶向。此類(lèi)肽拮抗劑通常以藥學(xué)或獸醫(yī)學(xué)可接受的非毒性鹽形式施用，例如酸加成鹽或 金屬絡(luò)合物，例如與鋅、鐵、鈣、鋇、鎂、鋁或類(lèi)似物的金屬絡(luò)合物。此類(lèi)非毒性鹽的示例有 鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、鞣酸鹽、草酸鹽、富馬酸鹽、葡萄糖酸鹽、藻酸鹽、馬來(lái)酸 鹽、乙酸鹽、檸檬酸鹽、苯甲酸鹽、琥珀酸鹽、蘋(píng)果酸鹽、抗壞血酸鹽、酒石酸鹽及類(lèi)似物。還可能希望經(jīng)延長(zhǎng)的時(shí)段(例如從單次施用后一周至一年的時(shí)段)遞送這些SRIF 拮抗劑，并且可以如本領(lǐng)域公知的，利用緩釋、儲(chǔ)庫(kù)或植入劑型。劑型可以含有例如在體液 中具有低溶解度的化合物的藥學(xué)可接受的非毒性鹽，例如與多元酸的酸加成鹽、與多價(jià)金 屬陽(yáng)離子的鹽或兩種鹽的組合。相對(duì)不溶性鹽可以配制成凝膠，例如硬脂酸鋁凝膠。適合注 射的緩釋儲(chǔ)庫(kù)制劑還可以含有分散或封裝于緩慢降解的、非毒性或非抗原性聚合物的SRIF 拮抗劑或其鹽，所述聚合物例如聚乳酸/聚乙醇酸聚合物，例如在美國(guó)專(zhuān)利號(hào)3，773，919中 所述。治療有效量的肽拮抗劑應(yīng)該在醫(yī)生指導(dǎo)下施用，并且藥物組合物通常含有與常規(guī) 的藥學(xué)或獸醫(yī)學(xué)可接受的載體結(jié)合的肽。認(rèn)為治療有效量是經(jīng)計(jì)算為實(shí)現(xiàn)所需效應(yīng)的預(yù)定 量。所需劑量根據(jù)特定治療和所需治療持續(xù)時(shí)間而變化；然而，預(yù)期約10微克至約1微克 /千克體重/天的劑量將用于治療性治療?？赡芴貏e有利的是如之前所述以?xún)?chǔ)庫(kù)或長(zhǎng)效形 式施用此類(lèi)化合物。治療有效量通常是當(dāng)以生理上可接受的組合物外周(例如靜脈內(nèi))施 用時(shí)足以實(shí)現(xiàn)其約0. 1 μ g/ml至約100 μ g/ml、約1 μ g/ml至約50 μ g/ml或至少約2 μ g/ ml (通常5至10yg/ml)的血漿濃度的SRIF拮抗劑的量。以這些量，它們可用于按需要影 響胃分泌。當(dāng)組合物用于成像或治療性治療時(shí)，放射性標(biāo)記的化合物的差貯藏期限和/或放 射性核素的短半衰期可能要求使用者在臨床醫(yī)院或?qū)嶒?yàn)室進(jìn)行放射性核素的標(biāo)記反應(yīng)。在 此類(lèi)情況下，可以“試劑盒”的形式為使用者提供各種反應(yīng)成分。進(jìn)行所需反應(yīng)所必需的操 作應(yīng)該盡可能簡(jiǎn)單以使使用者能夠使用正常為一次性的工具從試劑盒制備放射活性標(biāo)記 的組合物。因此，用于制備放射性藥物組合物、檢測(cè)和定位組織中的惡性腫瘤及其轉(zhuǎn)移的試 劑盒可以包含(i)SSTR2選擇性肽、惰性藥學(xué)可接受的載體和/或配制劑以及任選的佐劑， ( )放射活性金屬同位素的鹽或螯合物的溶液，和(iii)含有使試劑盒中存在的成分反應(yīng) 的處方的使用說(shuō)明書(shū)。用作此類(lèi)試劑盒的成分的肽拮抗劑可以通過(guò)與螯合劑反應(yīng)而被衍生化。得到的肽 綴合物提供以簡(jiǎn)單方式牢固連接放射性核素的便利。含N 二-或多乙酸或其衍生物，例如 前面提到的化合物，已經(jīng)證明非常適合使各種金屬放射性核素(例如111^1和113mIn)連接至 肽分子。提供于使用者的試劑盒還可以包含上文定義的其他成分以及使用說(shuō)明書(shū)，而具有 有限的貯藏期限的放射性核素的鹽或螯合物的溶液可以單獨(dú)提供給使用者。制備用99mTc、186Re或188Re標(biāo)記的放射性藥物組合物的試劑盒除了上述⑴和(ii) 中定義的成分外可以包含例如還原劑以及需要時(shí)的螯合劑，和(iii)使用說(shuō)明書(shū)，具有使 試劑盒成分與高锝酸鹽溶液形式的"mTc或與高錸酸鹽溶液形式的186Re或188Re反應(yīng)的處方。如果需要，試劑盒的各種成分可以被組合，條件是它們是相容的。試劑盒應(yīng)該包含還原 高锝酸鹽或高錸酸鹽的還原劑，例如連二亞硫酸鹽、金屬還原劑或絡(luò)合物穩(wěn)定還原劑，例如 SnCl2, Sn (II)-酒石酸鹽、Sn (II)-膦酸鹽或焦磷酸鹽、或Sn (II)-葡庚糖酸鹽。高锝酸鹽 或高錸酸鹽溶液可以簡(jiǎn)單地獲自適合的供應(yīng)商。當(dāng)放射性核素存在于試劑盒本身中時(shí)，與 肽的絡(luò)合物生成反應(yīng)可以簡(jiǎn)單地通過(guò)在中性介質(zhì)中組合各組分并使它們反應(yīng)而發(fā)生。為了 該目的，放射性核素可以與結(jié)合至如前所述比較弱的螯合劑的螯合物形式的肽反應(yīng)。當(dāng)試劑盒包含前述衍生化的肽并預(yù)期用于制備用99mTc、186Re或188Re標(biāo)記的放射 性藥物組合物時(shí)，放射性核素將優(yōu)選以高锝酸鹽或高錸酸鹽溶液的形式單獨(dú)添加。這種情 況下，試劑盒將包含適合的還原劑和需要時(shí)的螯合劑，前者還原高锝酸鹽或高錸酸鹽。可以 使用還原劑，例如連二亞硫酸鹽或金屬還原劑。成分可以任選地被組合，條件是它們是相容 的。其中組合的成分優(yōu)選被凍干的這種單組份試劑盒適合通過(guò)使用者與放射性核素溶液 反應(yīng)?？梢允褂媒饘龠€原劑，例如 Sn(II)、Ce (III)、Fe (II)、Cu(I)、Ti (III)或 Sb (III)； Sn(II)。試劑盒的肽組份可以提供為溶液，例如生理鹽水溶液的形式或在一些緩沖溶液中， 但是其優(yōu)選以干燥狀態(tài)、例如凍干狀態(tài)存在。當(dāng)用作注射液體的組份時(shí)，其應(yīng)該是無(wú)菌的。 當(dāng)組份是干燥狀態(tài)時(shí)，使用者應(yīng)該使用無(wú)菌生理鹽水溶液作為溶劑。如果需要，組份可以用 適合的穩(wěn)定劑以常規(guī)方式穩(wěn)定，所述穩(wěn)定劑例如抗壞血酸、龍膽酸或這些酸的鹽。盡管已經(jīng)就其優(yōu)選實(shí)施方案描述了本發(fā)明，但應(yīng)該理解，可以做出對(duì)本領(lǐng)域普通 技術(shù)人員而言顯而易見(jiàn)的各種改變和調(diào)整而不背離所附權(quán)利要求中提出的本發(fā)明范圍。盡 管權(quán)利要求在肽序列方面不同地限定了本發(fā)明，但應(yīng)該理解，這預(yù)期包括公知為其完全等 價(jià)物并且最經(jīng)常施用的其非毒性鹽。下述實(shí)施例被包括以說(shuō)明本發(fā)明優(yōu)選實(shí)施方案。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)理解，隨后實(shí) 施例中公開(kāi)的技術(shù)代表發(fā)明人發(fā)現(xiàn)在實(shí)施本發(fā)明中作用良好的技術(shù)，并因此可以被認(rèn)為構(gòu) 成其實(shí)施的優(yōu)選方式。然而，根據(jù)本公開(kāi)內(nèi)容，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解可以對(duì)公開(kāi)的具體 實(shí)施方案進(jìn)行許多改變并且依然獲得同樣或類(lèi)似的結(jié)果而不背離本發(fā)明的精神和范圍。在 此所有專(zhuān)利、申請(qǐng)和參考文獻(xiàn)的公開(kāi)內(nèi)容通過(guò)引用明確并入本發(fā)明。實(shí)施例下述實(shí)施例示例說(shuō)明提供許多體現(xiàn)本發(fā)明各種特征的SRIF肽拮抗劑。每個(gè)肽中， 位置3和位置14(根據(jù)SRIF編號(hào))的半胱氨酸殘基通過(guò)環(huán)化二硫鍵結(jié)合并且可以注釋為 “(環(huán)3-14)”或“([]”。實(shí)施例1.合成了促生長(zhǎng)素抑制素類(lèi)似物0(^-(^-六廣4’5’6’11’12’13飾&2，D-Cys3, Tyr7, D-4Aph (Cbm)8] -SRIF-2Nal_NH2，具有下述結(jié)構(gòu)(環(huán) 3-14) D0TA-Cpa-D-Cys-Tyr-D-4Aph (Cb m) -LyS-Thr-CyS-2Nal-NH2。(肽28)。采用BOC策略的固相方法用于以逐步方式在MBHA樹(shù) 脂上合成八肽，大體如‘277專(zhuān)利“實(shí)施例II”所述。BoC-D-4Aph(Cbm)-0H被預(yù)先制備并在 位置8偶聯(lián)。在從樹(shù)脂切割肽并同時(shí)通過(guò)HF去除側(cè)鏈保護(hù)基(除了從Lys去除Fmoc)之后， 通過(guò)添加10%碘在甲醇中的溶液直至得到的溶液保持橙色，然后攪拌40分鐘并用抗壞 血酸猝滅，肽在75%乙酸溶液中被氧化以產(chǎn)生二硫橋。通過(guò)制備型RP-HPLC純化粗肽， 使用從基線(xiàn)％ B(洗脫劑A = 0.1% TFA，洗脫劑B = 60% CH3CN,40 % A) 1 % B/分鐘增量的線(xiàn)性梯度，流速lOOml/min。然后通過(guò)向無(wú)水N，N-二甲基甲酰胺(DMF，3.5ml)中純 化肽(32mg, 20 μ Μ)添加 DMF(Iml)中的 DOTA-NHS. 3TFA. HPF6 (Macrocyclics, Dallas, TX) (198mg, 20 μ Μ)和 N，N' - 二異丙基乙胺(DIPEA) (36 μ 1， 22 μ Μ)，將 DOTA 偶聯(lián) 在N末端作為螯合劑?；旌衔镌谑覝?cái)嚢柽^(guò)夜。反應(yīng)進(jìn)程通過(guò)分析HPLC跟蹤，并且MS分 析顯示獲得了 預(yù)期產(chǎn)物純的 DOTA-des-AA1’4’5’6’11’12’13^ ^ D-Cys3, Tyr7, D_4Aph (Cbm)8， Lys (Fmoc) 9]-SRIF-2Nal-NH2。反應(yīng)完全后，通過(guò)添加的20%哌啶在DMF中的溶液并 等待 30 分鐘而實(shí)現(xiàn)從 Lys9 側(cè)鏈除去 Fmoc 保護(hù)基。DOTA-des-AA1’4’5’6’11’12’13 [Cpa2，D-Cys3, Tyr7, D-4Aph (Cbm) 8]-SRIF-2Nal-NH2通過(guò)使用上述相同條件的制備型RP-HPLC脫鹽。最終 環(huán)狀DOTA-肽-綴合物的純度通過(guò)分析型C^E測(cè)定。其是94%純的。MS分析顯示[M+H]+質(zhì)量為1583. 72Da，其非常接近1583. 62Da的計(jì)算質(zhì)量。該肽 在下文被稱(chēng)為28號(hào)肽。實(shí)施例2.實(shí)施例1中描述的初始合成被重復(fù)，具有兩個(gè)改變；在7-位置和8-位置使用 4Aph (Cbm)和 D-Trp 以提供八肽-樹(shù)脂 des-AA1’4’5’6’11’12’13 [Cpa2，D-Cys3,4Aph (Cbm)7, D-Trp8, Lys (Fmoc)9] -SRIF-2Nal_MBHA 樹(shù)脂。在從酰胺樹(shù)脂切割肽并同時(shí)通過(guò)HF從氨基酸側(cè)鏈去除保護(hù)基(除了從Lys去除 Fmoc)之后，通過(guò)添加10%碘在甲醇中的溶液直至得到的溶液保持橙色，然后攪拌40分鐘 并用抗壞血酸猝滅，肽在75%乙酸溶液中被氧化以產(chǎn)生二硫橋。通過(guò)制備型RP-HPLC純 化粗肽，使用從基線(xiàn)％ B (洗脫劑A = 0. 1 % TFA,洗脫劑B = 60% CH3CN, 40% A)l% B/分 鐘增量的線(xiàn)性梯度，流速lOOml/min。向無(wú)水N，N-二甲基甲酰胺(DMF，3. 5ml)中純化肽 (34mg 24 μ M)添力口 DMF (150 μ 1)中的 DOTA-NHS. 3TFA. HPF6 (Macrocyclics, Dallas, TX) (24mg, 24. 2 μ Μ)和N，N' - 二異丙基乙胺(DIPEA) 00 μ 1，M μ Μ)?；旌衔镌谑覝?cái)嚢柽^(guò) 夜。反應(yīng)進(jìn)程通過(guò)分析HPLC跟蹤，反應(yīng)完全后，向反應(yīng)混合物添加Iml哌啶以從Lys9側(cè) 鏈去除 Fmoc 保護(hù)基持續(xù) 30 分鐘，得到 DOTA-des-AA1,4,5,6,11,12,13[Cpa2，D-Cys3,4Aph(Cbm)7, D-Trp8] _SRIF-2Nal-NH2，其具有下式(環(huán) 3-14) D0TA-Cpa-D-Cys_4Aph (Cbm)-D-Trp-Lys-T hr-Cys-2Nal-NH2。該肽通過(guò)使用上述相同條件的制備型RP-HPLC脫鹽。最終環(huán)狀DOTA-肽-綴合物 的純度通過(guò)分析型C^E測(cè)定為約98%純。MS分析顯示[M+H] +質(zhì)量為1606. 50Da，其非常接 近1606. 64Da的計(jì)算值。該肽在下文被稱(chēng)為14號(hào)肽。實(shí)施例3.實(shí)施例1提出的合成被重復(fù)，在C末端省略2Nal并用4Aph(Hor)替代Tyr7。 Boc-4Aph (Hor)-OH 如所述預(yù)制備(Jiang, G.等，J. Med. Chem.，44 :453-467)。肽的切割、脫 保護(hù)、環(huán)化和純化如實(shí)施例1進(jìn)行。純化的環(huán)狀肽具有下式(環(huán)3-14)D0TA-Cpa-D-Cys-4A ph (Hor) -D-4Aph (Cbm) -Lys-Thr-Cys-NH2。其根據(jù) QE 具有約 98% 的純度。其稱(chēng)為 33 號(hào)肽。 MS分析顯示[M+H]+質(zhì)量為1525. 68Da，其非常接近1525. 58Da的計(jì)算值。實(shí)施例4.實(shí)施例1中提出的合成被重復(fù)，具有一個(gè)改變，在N末端使用PNO2-Phe替代 pCl-Phe。肽的切割、脫保護(hù)、環(huán)化和純化如實(shí)施例1進(jìn)行。純化的環(huán)狀肽具有下式(環(huán) 3-14) D0TA-pN02-Phe-D-Cys-Tyr-D-4Aph (Cbm) -Lys-Thr-Cys-2Nal_NH2。其根據(jù) C^E 具有約98%的純度，其稱(chēng)為5號(hào)肽。MS分析顯示[M+H] +質(zhì)量為1594. 17Da，其非常接近1594. 65Da 的計(jì)算值。實(shí)施例5.實(shí)施例1中描述的初始合成被重復(fù)，具有一個(gè)改變；使用Aph(Hor)替代7_位 置的 Tyr 以提供八肽-樹(shù)脂 ^es-AA1'4'5'6'11'12'13^2, D-Cys3,4Aph(Hor)7, D-Aph(Cbm)8, Lys (Fmoc) 9]-SRIF-2Nal-MBHA樹(shù)脂。然后如實(shí)施例2所述進(jìn)行反應(yīng)，得到DOTA-des-AA1’4’5’ 6'n'12'13[Cpa2, D-Cys3,4Aph(Hor)7, D-Aph(Cbm)8]-SRIF-2Nal_NH2，其具有下式(環(huán) 3-14)DO TA-Cpa-D-Cys-4Aph(Hor)-D-Aph(Cbm)-Lys-Thr-Cys-2Nal-NH2 (肽 30)。最終環(huán)狀DOTA-肽-綴合物的純度通過(guò)分析型CZE測(cè)定為約98%純。MS分析顯 示[M+H]+質(zhì)量為1722. 56Da，其非常接近1722. 65Da的計(jì)算值。實(shí)施例6.實(shí)施例5提出的合成被重復(fù)，在C末端用D-Tyr替代2Nal。肽的切割、脫保護(hù)、環(huán) 化和純化如實(shí)施 例1進(jìn)行。純化的環(huán)狀肽具有下式(環(huán)3-14)D0TA-Cpa-D-Cys-4Aph (Hor )-D-4Aph (Cbm) -Lys-Thr-Cys-D-Tyr-NH2。其根據(jù) CZE 具有約 98% 的純度。其稱(chēng)為 31 號(hào)肽。 MS分析顯示[M+H]+質(zhì)量為1688. 83Da，其非常接近1688. 64Da的計(jì)算值。實(shí)施例7.實(shí)施例4提出的合成被重復(fù)，在C末端用D-Tyr替代2Nal。肽的切割、脫保護(hù)、環(huán) 化和純化如實(shí)施例1進(jìn)行。純化的環(huán)狀肽具有下式(環(huán)3-14)DOTA-PNO2-Phe-D-Cys-Tyr-D-4Aph (Cbm)-Lys-Thr-Cys-D-Tyr-NH2。其根據(jù) CZE 具有約 98% 的純度。其稱(chēng)為 3 號(hào)肽。MS 分析顯示[M+H]+質(zhì)量為1560. 63Da，其非常接近1560. 83Da的計(jì)算值。實(shí)施例8.實(shí)施例7提出的合成被重復(fù)，具有兩個(gè)改變，在7-位置使用ITyr并且在8_位 置使用 D-Trp 以提供八肽-樹(shù)脂 ^es-AA1'4'5'6'11'12'13^^2, D-Cys3, ITyr7, D-Trp8, Lys (Fmoc)9] -SRIF-D-Tyr-MBHA 樹(shù)脂。當(dāng)肽從酰胺樹(shù)脂被切割并大體上如實(shí)施例2所述進(jìn)行反應(yīng)之后，獲得具有下式的 肽(環(huán) 3-14) D0TA-pN02-Phe-D-Cys-ITyr-D-Trp-Lys-Thr-Cys-D-Tyr-NH2 (肽 32)。最終環(huán) 狀DOTA-肽-綴合物的純度通過(guò)分析型CZE測(cè)定為約98%純。MS分析顯示[M+H]+質(zhì)量為 1667. 74Da，其非常接近1667. 52Da的計(jì)算值。實(shí)施例9.體外生物分析根據(jù)其結(jié)合在CHO-Kl細(xì)胞和CCL39細(xì)胞上表達(dá)的分離的克隆受體 的能力在體外測(cè)試各種促生長(zhǎng)素抑制素類(lèi)似物的效應(yīng)。編碼多個(gè)促生長(zhǎng)素抑制素受體亞型 的基因的分子克隆允許這些受體在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的個(gè)體表達(dá)及其各自藥理特征的表征。 已經(jīng)克隆了五個(gè)此類(lèi)受體亞型，稱(chēng)為SSTRl至SSTR5(Raynor，K.等，Mol. Pharmacol. ,43 838-844，1993 ；Raynor, K.等，Mol. Pharmacol. ,44 :385_392，1993)。這些參考文獻(xiàn)描述了 可用于確定特定SRIF類(lèi)似物是否與物種受體亞型的一個(gè)或多個(gè)選擇性結(jié)合以及它們是以 高親和力還是低親和力與此類(lèi)受體亞型結(jié)合。每個(gè)受體亞型可以介導(dǎo)不同但是重疊的SRIF 生理效應(yīng)。結(jié)果，與受體SSTR2選擇性結(jié)合的化合物可用于調(diào)節(jié)SRIF特定的生理功能而不 可能具有由其他SRIF受體介導(dǎo)的另一種SRIF生理功能所引起的不希望的效應(yīng)。CHO-Kl細(xì)胞在Ham’ s F-12培養(yǎng)基中培養(yǎng)，并且CCL39細(xì)胞在補(bǔ)充了 10 %胎牛血清、100U/ml青霉素和100yg/ml鏈霉素的Dulbecco，s改良的Eagle，s培養(yǎng)基/ Ham's F-12(l 1)混合物中在含有5% CO2的濕潤(rùn)空氣中37°C培養(yǎng)。細(xì)胞用冰冷0. 05M Tris-HCKpH 7.4)洗滌并刮入冰冷0. 05M Tris-HCl(pH 7. 4)，離心收集，并使用轉(zhuǎn)子/定 子系統(tǒng)在相同緩沖液中勻漿。在4°C下120g離心5分鐘后，收集上清液并再次在4°C下 48，OOOg離心30分鐘。得到的沉淀懸浮于冰冷Tris緩沖液，轉(zhuǎn)移到微量離心管中，在4°C 下20，OOOg離心15分鐘。抽掉上清液后，膜沉淀在-80°C保存。對(duì)固定在顯微鏡載玻片上的20 μ m厚的膜沉淀冷凍切片進(jìn)行受體放射自顯影，然 后保存在_20°C。對(duì)于每個(gè)測(cè)試化合物，使用以強(qiáng)親和力與全部五種受體結(jié)合的通用促生長(zhǎng) 素抑制素配體放射性配體125I-[Leu8，D-Trp22, Tyr25]-促生長(zhǎng)素抑制素28進(jìn)行完全替換實(shí) 驗(yàn)。使用范圍0. I-IOOOnM的不斷增加濃度的未標(biāo)記肽。使用相同的不斷增加濃度的未標(biāo) 記的促生長(zhǎng)素抑制素-28平行運(yùn)行，作為對(duì)照。在使用本領(lǐng)域已知的計(jì)算機(jī)輔助圖像處理 系統(tǒng)對(duì)數(shù)據(jù)量化之后計(jì)算IC5tl值。在IOOnM 的濃度，28 號(hào)肽對(duì) SRIF-28 配體與 SSTRl、SSTR3、SSTR4 和 SSTR5 的結(jié)合 具有最小效應(yīng)。相反，其選擇性結(jié)合SSTR2，替代放射性配體與人SSTR2的結(jié)合，IC5tl值約 1. 8nM。某些SRIF 類(lèi)似物抑制 125I-[Leu8，D-Trp22，Tyr24] SRIF-28 與各種克隆的人 SRIF 受 體的放射性配體結(jié)合的效價(jià)顯示于下表1，其中IC5tl值以納米摩爾濃度給出。括號(hào)中的數(shù) 字表示特定結(jié)合測(cè)試進(jìn)行的次數(shù)。 表 1.
權(quán)利要求
1.一種與SSTR2結(jié)合的促生長(zhǎng)素抑制素拮抗劑，選自由下述組成的組(i)D0TA-pN02Phe-c [DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys] -DTyr-NH2 ；(ii)H2N-PNO2Phe-C[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(iii)H2N-PNO2Phe-C[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(iv)H2N-Cpa-C [DCys-L-Agl (We.苯甲酰基)-DTrp-Lys-Thr-Cys] _2Nal_NH2 ； (ν) H2N-Cpa-C [DCys-D-Agl (We.苯甲酰基)-DTrp-Lys-Thr-Cys] _2Nal_NH2 ；(vi)H2N-Cpa-C[DCys-Leu-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(vii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(viii)Cbm-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2；(ix)DOTA-βAla-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ； (χ)DOTA-Peg-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ；(xi)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-NH2 ；(xii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Cha-NH2；(xiii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Aph(Hor)-NH2；(xiv)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DAph(Cbm)-NH2 ； (XV) H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Aph(Cbm)-NH2 ；(xvi)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DAph(Cbm)-GlyOH ；(xvii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(CONH-OCH3)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(xviii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(CONH-OH)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(xix)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-5F-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ； (XX) H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-5F-Trp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(xxi)H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(xxii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(xxiii)Ac-pN02Phe_c[DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；(xxiv)H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ； (XXV) H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DTrp-NMeLys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ；(xxvi)DOTA-Cpa-c[DCys-Aph(Hor)-Aph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；(xxvii)DOTA-Cpa-c[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；禾口(xxviii)DOTA-Cpa-[DCys-Pal-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]DTyr-NH2。
2.權(quán)利要求1所述的促生長(zhǎng)素抑制素拮抗劑，其中所述拮抗劑不顯著內(nèi)化入表達(dá) SSTR2的細(xì)胞中，并且減少奧曲肽誘導(dǎo)的SSTR2內(nèi)化。
3.權(quán)利要求1所述的促生長(zhǎng)素抑制素拮抗劑，還包含螯合劑、絡(luò)合劑、綴合劑或標(biāo)記。
4.權(quán)利要求1所述的促生長(zhǎng)素抑制素拮抗劑，其中所述拮抗劑相對(duì)于其他組織優(yōu)先被 腫瘤吸收。
5.權(quán)利要求1所述的促生長(zhǎng)素抑制素拮抗劑，其中所述拮抗劑相對(duì)于其他組織優(yōu)先被 腫瘤吸收。
6.權(quán)利要求1所述的促生長(zhǎng)素抑制素拮抗劑，其中在施用后4小時(shí)測(cè)量的腫瘤細(xì)胞中 拮抗劑吸收與腎細(xì)胞中拮抗劑吸收的比值為至少約2. O。
7.一種放射成像癌癥的方法，包括(a)施用包含促生長(zhǎng)素抑制素拮抗劑和放射性核素的組合物；和(b)檢測(cè)所述放射性核素，其中所述促生長(zhǎng)素抑制素拮抗劑選自由下述組成的組(i)D0TA-pN02Phe-c [DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys] -DTyr-NH2 ；(ii)H2N-PNO2Phe-C[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(iii)H2N-PNO2Phe-C[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(iv)H2N-Cpa-C [DCys-L-Agl (We.苯甲?；?-DTrp-Lys-Thr-Cys] _2Nal_NH2 ； (ν) H2N-Cpa-C [DCys-D-Agl (We.苯甲?；?-DTrp-Lys-Thr-Cys] _2Nal_NH2 ；(vi)H2N-Cpa-C[DCys-Leu-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(vii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(viii)Cbm-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2；(ix)DOTA-βAla-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ； (χ)DOTA-Peg-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ；(xi)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-NH2 ；(xii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Cha-NH2；(xiii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Aph(Hor)-NH2；(xiv)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DAph(Cbm)-NH2 ； (XV) H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Aph(Cbm)-NH2 ；(xvi)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DAph(Cbm)-GlyOH ；(xvii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(CONH-OCH3)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(xviii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(CONH-OH)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(xix)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-5F-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ； (XX) H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-5F-Trp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(xxi)H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(xxii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(xxiii)Ac-pN02Phe_c[DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；(xxiv)H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ； (XXV) H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DTrp-NMeLys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ；(xxvi)DOTA-Cpa-c[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；(xxvii)DOTA-Cpa-c[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；禾口(xxviii)DOTA-Cpa-[DCys-Pal-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]DTyr-NH2。
8.權(quán)利要求7所述的方法，其中所述促生長(zhǎng)素抑制素拮抗劑結(jié)合SSTR2。
9.權(quán)利要求8所述的方法，其中所述促生長(zhǎng)素抑制素拮抗劑選擇性結(jié)合SSTR2。
10.組合物制備用于治療腫瘤的藥劑的用途，其中所述組合物包含促生長(zhǎng)素抑制素拮 抗劑和放射性核素，其中所述促生長(zhǎng)素抑制素拮抗劑選自由下述組成的組(i)D0TA-pN02Phe-c [DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys] -DTyr-NH2 ；(ii)H2N-PNO2Phe-C[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(iii)H2N-PNO2Phe-C[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(iv)H2N-Cpa-C [DCys-L-Agl (We.苯甲酰基)-DTrp-Lys-Thr-Cys] _2Nal_NH2 ；(v)H2N-Cpa-C [DCys-D-Agl (We.苯甲?；?-DTrp-Lys-Thr-Cys] _2Nal_NH2 ；(vi)H2N-Cpa-C[DCys-Leu-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(vii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(viii)Cbm-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2；(ix)DOTA-βAla-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ； (χ)DOTA-Peg-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ；(xi)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-NH2 ；(xii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Cha-NH2；(xiii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Aph(Hor)-NH2；(xiv)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DAph(Cbm)-NH2 ； (XV) H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Aph(Cbm)-NH2 ；(xvi)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DAph(Cbm)-GlyOH ；(xvii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(CONH-OCH3)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(xviii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(CONH-OH)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(xix)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-5F-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ； (XX) H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-5F-Trp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(xxi)H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(xxii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(xxiii)Ac-pN02Phe_c[DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；(xxiv)H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ； (XXV) H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DTrp-NMeLys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ；(xxvi)DOTA-Cpa-c[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；(xxvii)DOTA-Cpa-c[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；禾口(xxviii)DOTA-Cpa-[DCys-Pal-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]DTyr-NH2。
11.權(quán)利要求13所述的方法，其中所述促生長(zhǎng)素抑制素拮抗劑選擇性結(jié)合SSTR2。
12.一種用于診斷放射成像癌癥的試劑盒，包含(a)適合容器中的促生長(zhǎng)素抑制素拮抗劑，其中促生長(zhǎng)素抑制素拮抗劑 (i)用至少一種放射性核素標(biāo)記；( )未標(biāo)記并與適合容器中至少一種用于標(biāo)記的放射性核素一起提供；或 (iii)未標(biāo)記并能夠隨后用至少一種放射性核素標(biāo)記；和(b)使用說(shuō)明書(shū)，其中所述促生長(zhǎng)素抑制素拮抗劑選自由下述組成的組(i)D0TA-pN02Phe-c [DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys] -DTyr-NH2 ；(ii)H2N-PNO2Phe-C[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(iii)H2N-PNO2Phe-C[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(iv)H2N-Cpa-C [DCys-L-Agl (We.苯甲?；?-DTrp-Lys-Thr-Cys] _2Nal_NH2 ； (ν) H2N-Cpa-C [DCys-D-Agl (We.苯甲?；?-DTrp-Lys-Thr-Cys] _2Nal_NH2 ；(vi)H2N-Cpa-C[DCys-Leu-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(vii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(viii)Cbm-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2；(ix)DOTA-βAla-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ； (χ)DOTA-Peg-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ；(xi)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-NH2 ；(xii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Cha-NH2；(xiii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Aph(Hor)-NH2；(xiv)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DAph(Cbm)-NH2 ； (XV) H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Aph(Cbm)-NH2 ；(xvi)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DAph(Cbm)-GlyOH ；(xvii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(CONH-OCH3)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(xviii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(CONH-OH)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(xix)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-5F-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ； (XX) H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-5F-Trp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(xxi)H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(xxii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(xxiii)Ac-pN02Phe_c[DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；(xxiv)H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ； (XXV) H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DTrp-NMeLys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ；(xxvi)DOTA-Cpa-c[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；(xxvii)DOTA-Cpa-c[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；禾口(xxviii)DOTA-Cpa-[DCys-Pal-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]DTyr-NH2。
13.權(quán)利要求12所述的試劑盒，其中所述促生長(zhǎng)素抑制素拮抗劑選擇性結(jié)合SSTR2。
14.一種用于治療癌癥的試劑盒，包含(a)適合容器中的促生長(zhǎng)素抑制素拮抗劑，其中，在放射性核素標(biāo)記所述促生長(zhǎng)素抑制 素拮抗劑后，所述拮抗劑以對(duì)于癌癥治療而言的治療有效量存在，并且其中所述促生長(zhǎng)素 抑制素拮抗劑(i)用至少一種放射性核素標(biāo)記，( )未標(biāo)記并與適合容器中至少一種用于標(biāo)記的放射性核素一起提供，或 (iii)未標(biāo)記并能夠隨后用至少一種放射性核素標(biāo)記；和(b)使用說(shuō)明書(shū)，其中所述促生長(zhǎng)素抑制素拮抗劑選自由下述組成的組(i)D0TA-pN02Phe-c [DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys] -DTyr-NH2 ；(ii)H2N-PNO2Phe-C[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(iii)H2N-PNO2Phe-C[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(iv)H2N-Cpa-C [DCys-L-Agl (We.苯甲?；?-DTrp-Lys-Thr-Cys] _2Nal_NH2 ； (ν) H2N-Cpa-C [DCys-D-Agl (We.苯甲?；?-DTrp-Lys-Thr-Cys] _2Nal_NH2 ；(vi)H2N-Cpa-C[DCys-Leu-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(vii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(viii)Cbm-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2；(ix)DOTA- βAla-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ； (χ)DOTA-Peg-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ；(xi)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-NH2 ；(xii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Cha-NH2；(xiii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Aph(Hor)-NH2；(xiv)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DAph(Cbm)-NH2 ； (XV) H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Aph(Cbm)-NH2 ；(xvi)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DAph(Cbm)-GlyOH ；(xvii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(CONH-OCH3)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(xviii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(CONH-OH)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(xix)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-5F-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ； (XX) H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-5F-Trp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(xxi)H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(xxii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr—Cys]_2Nal_NH2；(xxiii)Ac-pN02Phe_c[DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；(xxiv)H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ； (XXV) H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DTrp-NMeLys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ；(xxvi)DOTA-Cpa-c[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；(xxvii)DOTA-Cpa-c[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；禾口(xxviii)DOTA-Cpa-[DCys-Pal-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]DTyr-NH2。
15.權(quán)利要求14所述的試劑盒，其中所述促生長(zhǎng)素抑制素拮抗劑選擇性結(jié)合SSTR2。
16.一種用于放射成像癌癥或治療癌癥的化合物，包含有效量的、與促生長(zhǎng)素抑制素拮 抗劑偶聯(lián)的放射性核素，其中所述拮抗劑結(jié)合SSTR2并選自由下述組成的組(i)D0TA-pN02Phe-c [DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys] -DTyr-NH2 ；(ii)H2N-PNO2Phe-C[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(iii)H2N-PNO2Phe-C[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(iv)H2N-Cpa-C [DCys-L-Agl (We.苯甲?；?-DTrp-Lys-Thr-Cys] _2Nal_NH2 ； (ν) H2N-Cpa-C [DCys-D-Agl (We.苯甲?；?-DTrp-Lys-Thr-Cys] _2Nal_NH2 ；(vi)H2N-Cpa-C[DCys-Leu-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(vii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(viii)Cbm-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2；(ix)DOTA-βAla-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ； (χ)DOTA-Peg-Cpa-c[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ；(xi)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-NH2 ；(xii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Cha-NH2；(xiii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Aph(Hor)-NH2；(xiv)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DAph(Cbm)-NH2 ； (XV) H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Aph(Cbm)-NH2 ； (xvi) H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DAph(Cbm)-GlyOH ；(xvii)H2N-Cpa-C [DCys-Aph (CONH-OCH3) -DTrp-Lys-Thr-Cys] _2Nal_NH2 ；(xviii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(CONH-OH)-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(xix)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-5F-DTrp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ； (XX) H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Cbm)-5F-Trp-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(xxi)H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2 ；(xxii)H2N-Cpa-C[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]_2Nal_NH2；(xxiii)Ac-pN02Phe_c[DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；(xxiv)H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ； (XXV) H2N-Cpa-C[DCys-Tyr-DTrp-NMeLys-Thr-Cys]-2NaI-NH2 ；(xxvi)DOTA-Cpa-c[DCys-Aph(Hor)-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；(xxvii)DOTA-Cpa-c[DCys-Tyr-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]-DTyr-NH2；禾口(xxviii)DOTA-Cpa-[DCys-Pal-DAph(Cbm)-Lys-Thr-Cys]DTyr-NH2。
17.權(quán)利要求16所述的化合物，其中所述拮抗劑選擇性結(jié)合SSTR2，并且不顯著內(nèi)化入 表達(dá)SSTR2的細(xì)胞，并且減少奧曲肽誘導(dǎo)的SSTR2內(nèi)化。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了作為促生長(zhǎng)素抑制素受體的受體拮抗劑的促生長(zhǎng)素抑制素類(lèi)似物，包括SSTR2-選擇性拮抗劑。本發(fā)明還公開(kāi)了相關(guān)的化合物、試劑盒和方法，包括與放射性核素絡(luò)合或綴合的拮抗劑及其用途。本發(fā)明拮抗劑用于診斷和治療贅生性和非贅生性哺乳動(dòng)物疾病。
文檔編號(hào)C07K14/655GK102089321SQ200980122566
公開(kāi)日2011年6月8日 申請(qǐng)日期2009年4月15日 優(yōu)先權(quán)日2008年4月16日
發(fā)明者H·R·馬克夫, J·C·儒貝, J·E·F·瑞維爾, J·爾學(xué)藝 申請(qǐng)人:伯爾尼大學(xué), 巴塞爾醫(yī)學(xué)院, 索爾克生物學(xué)研究院