專(zhuān)利名稱(chēng)：取代的雜環(huán)化合物和其用途的制作方法
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1.發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及取代的雜環(huán)化合物和包括一種或多種所述化合物的組合物。本發(fā)明還涉及通過(guò)將一種或多種取代的雜環(huán)化合物給予需要的個(gè)體來(lái)預(yù)防或治療各種疾病和紊亂的方法。本發(fā)明特別涉及通過(guò)將一種或多種取代的雜環(huán)化合物給予需要的個(gè)體而預(yù)防或治療癌癥或炎性病癥的方法。
2.發(fā)明背景2.1微管真核細(xì)胞的細(xì)胞骨架由微絲、微管和中間絲的廣泛網(wǎng)絡(luò)組成。微管在有絲分裂中具有重要的作用。α-、β-和γ-微管蛋白亞單位是負(fù)責(zé)形成微管的真核細(xì)胞骨架蛋白質(zhì)。微管為由α-、β-微管蛋白雜二聚體組成并沿微管軸端對(duì)端連接的中空?qǐng)A柱體。γ-微管蛋白包含于微管組織中。一經(jīng)形成，微管就處于平衡狀態(tài)，微管蛋白雜二聚體持續(xù)地加到微管的一端并在相對(duì)端去除。該平衡使得微管的長(zhǎng)度可以控制，并且這種控制是微管在細(xì)胞中執(zhí)行它們的多種功能所必需的。
在細(xì)胞分裂過(guò)程中，微管負(fù)責(zé)傳送子染色體組到每個(gè)單獨(dú)的子代細(xì)胞中。具體地講，在分裂前期細(xì)胞核中的DNA被復(fù)制且兩組遺傳物質(zhì)組織成單獨(dú)的子染色體組。在分裂前期即將結(jié)束時(shí)，微管從正在分裂的親代細(xì)胞的任一端的中心體朝向兩個(gè)相同的染色體組生長(zhǎng)。這種生長(zhǎng)中的微管束形成被稱(chēng)作有絲分裂紡錘體的結(jié)構(gòu)。在分類(lèi)前中期微管將自身附著在染色體上，一旦進(jìn)入分裂后期，微管變得不穩(wěn)定并縮短，將子染色體分離到位于正在分裂的細(xì)胞的相對(duì)端它們各自的子代細(xì)胞中。因此，微管密切地參與細(xì)胞分裂過(guò)程。
2.2癌癥和腫瘤性疾病目前的癌癥治療包括手術(shù)、化學(xué)治療和/或放射治療來(lái)根除患者的腫瘤細(xì)胞(參見(jiàn)例如Stockdale，1998，″Principles of Cancer PatientManagement″，in Scientific AmericanMedicine，vol.3，Rubenstein andFederman，編，第12章，第IV節(jié)))。所有這些手段對(duì)患者都有顯著的缺點(diǎn)。例如由于患者的健康，手術(shù)可成為禁忌，或者手術(shù)為患者無(wú)法接受。此外，手術(shù)可能無(wú)法完全根除腫瘤組織。只有當(dāng)受到輻射的腫瘤組織顯示比正常組織更高的輻射敏感度時(shí)放射治療才有效，而且放射治療經(jīng)常引起嚴(yán)重的副作用。(出處同前)至于化學(xué)治療，許多化學(xué)治療性制劑可以用于治療腫瘤性疾病?；瘜W(xué)治療性制劑的具體實(shí)例包括靶向微管蛋白(例如抑制微管蛋白的聚合或穩(wěn)定性或微管蛋白的穩(wěn)定性)或微管的藥物，例如秋水仙堿(一種從秋水仙中提取的生物堿)、長(zhǎng)春花生物堿類(lèi)藥物(例如長(zhǎng)春花新堿、長(zhǎng)春花堿和脫水長(zhǎng)春花堿(vinorlbine))和紫杉烷類(lèi)藥物(例如紫杉醇(Taxol)和多西他賽(Taxotere))。秋水仙堿通過(guò)單一高親和力的結(jié)合位點(diǎn)(稱(chēng)作秋水仙堿位點(diǎn))結(jié)合微管蛋白雜二聚體來(lái)發(fā)揮它的細(xì)胞毒性效應(yīng)。這種結(jié)合引發(fā)二聚體結(jié)構(gòu)的改變并阻礙二聚體組裝為微管。秋水仙堿結(jié)合位點(diǎn)顯示出對(duì)一組各種各樣的分子結(jié)構(gòu)的親和力，包括但不限于鬼臼毒素(podophyllotoxins)、五加前胡素(steganacin)、查耳酮(chalcones)、諾可唑(nocodazole)和TN-16。快速分裂中的細(xì)胞(例如癌細(xì)胞)暴露于秋水仙堿導(dǎo)致有絲分裂紡錘體消失，將細(xì)胞阻斷于細(xì)胞周期的M期并最終殺死細(xì)胞。長(zhǎng)春花生物堿結(jié)合β-微管蛋白上的位點(diǎn)(稱(chēng)作長(zhǎng)春花生物堿結(jié)合位點(diǎn))導(dǎo)致微管蛋白二聚體不穩(wěn)定。中毒的二聚體隨后可被加到微管聚合物中并阻止微管的進(jìn)一步生長(zhǎng)。紫杉烷類(lèi)直接結(jié)合完整微管的微管蛋白亞單位，使微管穩(wěn)定并抑制解聚作用或穩(wěn)定性。當(dāng)分裂中的細(xì)胞進(jìn)入分裂后期，穩(wěn)定化的微管不能收縮并無(wú)法將各組子染色體拉到它們相應(yīng)的子代細(xì)胞中。因此，細(xì)胞分裂無(wú)法發(fā)生，并且細(xì)胞被阻斷在細(xì)胞周期的M階段并最終調(diào)亡。
盡管可以獲得多種化學(xué)治療性制劑，傳統(tǒng)的化學(xué)治療具有許多缺點(diǎn)(參見(jiàn)例如Stockdale，1998，″Principles Of Cancer Patient Management″inScientific American Medicine，vol.3，Rubenstein and Federman，編，第12章，第10節(jié)))。幾乎所有的化學(xué)治療性制劑都有毒性，且化學(xué)治療性制劑可導(dǎo)致顯著且往往危險(xiǎn)的副作用，包括嚴(yán)重的惡心、骨髓抑制、免疫抑制等。此外，許多腫瘤細(xì)胞由于多重耐藥而對(duì)化學(xué)治療性制劑有抵抗力或產(chǎn)生抵抗力。因此，本領(lǐng)域亟需用于治療癌癥或腫瘤性疾病且具有最低限度的副作用或沒(méi)有任何副作用的新型化合物、組合物和方法。此外，還需要提供特異性增強(qiáng)毒性降低的癌細(xì)胞特異性治療的癌癥治療。
2.3炎性疾病炎癥在宿主防御和免疫介導(dǎo)疾病的進(jìn)展中起著主要作用。炎癥反應(yīng)的啟動(dòng)是由于復(fù)雜的事件級(jí)聯(lián)(包括化學(xué)介質(zhì)(例如細(xì)胞因子和前列腺素)和炎性細(xì)胞(例如白細(xì)胞))響應(yīng)損傷(例如創(chuàng)傷、局部缺血和外來(lái)顆粒)和感染(例如細(xì)菌或病毒感染)。炎癥反應(yīng)的特征是血流量增加、毛細(xì)血管通透性提高和吞噬細(xì)胞的流入。這些事件導(dǎo)致在損傷或感染的部位形成腫脹、充血、溫度增高(改變的溫度模式)和膿液。
細(xì)胞因子和前列腺素控制炎癥反應(yīng)，并通過(guò)有序和自我限制的級(jí)聯(lián)被釋放到血液或受感染的組織中。細(xì)胞因子和前列腺素的這種釋放增加了損傷或感染區(qū)域的血流量并可導(dǎo)致充血和溫度增高。一些這樣的化學(xué)物質(zhì)導(dǎo)致液體滲入到組織中引起腫脹。這種保護(hù)性過(guò)程可刺激神經(jīng)并引起疼痛。如果這些變化在相關(guān)區(qū)域內(nèi)持續(xù)有限時(shí)間，對(duì)身體有好處。
炎癥反應(yīng)中體液和細(xì)胞免疫元素之間的精細(xì)平衡的相互作用可以消除有害物質(zhì)并啟動(dòng)受損組織的修復(fù)。當(dāng)這種精細(xì)平衡的相互作用被破壞時(shí)，炎癥反應(yīng)可對(duì)正常組織產(chǎn)生相當(dāng)大的傷害，可以比引發(fā)該反應(yīng)的原始損傷的危害更大。在這些失控的炎癥反應(yīng)中，需要臨床介入來(lái)預(yù)防組織受損和器官功能紊亂。例如類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、克羅恩氏病、哮喘、變態(tài)反應(yīng)或炎性腸病等疾病的特征是慢性炎癥。
當(dāng)前炎性疾病的治療包括對(duì)癥藥物治療和免疫抑制劑來(lái)控制癥狀。例如非甾體抗炎藥(NSAID)如阿司匹林、布洛芬、非諾洛芬、萘普生、托美丁、舒林酸、甲氯芬那酸鈉、吡羅昔康、氟比洛芬、雙氯芬酸、奧沙普嗪、萘丁美酮、依托度酸和酮洛芬具有鎮(zhèn)痛和消炎效果。然而，認(rèn)為NSAID不能改變疾病的進(jìn)展。(Tierney等(編著)，Current Medical Diagnosis &Treatment，第37版，Appleton & Lange(1998)，第793頁(yè))。此外，NSAID經(jīng)常導(dǎo)致胃腸副作用，影響下消化道導(dǎo)致穿孔或加重炎性腸病，產(chǎn)生腎臟毒性和延長(zhǎng)的出血時(shí)間。皮質(zhì)類(lèi)固醇是另一類(lèi)通常用于控制炎癥癥狀的藥物。皮質(zhì)類(lèi)固醇和NSAID一樣不會(huì)改變疾病的自然進(jìn)展，因此當(dāng)停用藥物時(shí)，活動(dòng)性疾病的臨床癥狀通常再次出現(xiàn)。長(zhǎng)期皮質(zhì)類(lèi)固醇治療所導(dǎo)致的不良反應(yīng)的嚴(yán)重問(wèn)題(例如骨質(zhì)疏松癥、感染風(fēng)險(xiǎn)提高、食欲增加、高血壓、浮腫、消化性潰瘍、精神病)大大限制了它的長(zhǎng)期使用。
低劑量的免疫抑制劑(例如細(xì)胞毒制劑)也通常用于治療炎性疾病。例如甲胺蝶呤(一種葉酸拮抗劑)經(jīng)常用于治療銀屑病、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和其它炎性疾病。象其它細(xì)胞毒劑一樣，甲胺蝶呤經(jīng)常導(dǎo)致口腔炎、紅斑、slopecia、惡心、嘔吐、腹瀉并損害主要器官(例如腎和肝)。免疫抑制劑的長(zhǎng)期使用通常使患者對(duì)感染缺乏抵抗力。
人們不斷尋找治療炎性疾病的新方法。特別地，人們不斷尋找降低當(dāng)前所用藥物的給藥劑量和/或頻率，或能夠使當(dāng)前所用治療更為有效的任何新療法。
2.4中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病以不同的嚴(yán)重程度影響廣泛的人群。通常，這種疾病的一個(gè)主要特征包括認(rèn)知力或記憶力的嚴(yán)重?fù)p傷，表現(xiàn)為先前功能水平的顯著衰退。例如癡呆的特征是幾種認(rèn)知損傷(包括嚴(yán)重的記憶力缺乏)，并可為各種疾病(包括阿爾茨海默病、帕金森氏病、亨廷頓病和多發(fā)性硬化等)的獨(dú)立或基礎(chǔ)特征。其它中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病包括短時(shí)間發(fā)生的譫妄或意識(shí)紊亂，以及在沒(méi)有其它中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的情況下發(fā)生健忘癥或離散記憶受損。
3.發(fā)明概述本發(fā)明提供了新的化合物、新的藥物組合物和那些化合物或藥物組合物在預(yù)防、治療或控制各種疾病中的用途。本發(fā)明特別提供了預(yù)防、控制或治療癌癥(包括用常規(guī)的或當(dāng)前可用的癌癥治療難以治愈的或沒(méi)有響應(yīng)的癌癥)的方法，包括給予需要的患者有效量的本發(fā)明的化合物。
本發(fā)明提供了具有式I的化合物和下表1的化合物。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了具有式I的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或水合物，其中X、R1、R2、R3、R4、R5、Ra和Rb如本文所述。
本發(fā)明還提供了包括一種或多種本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或水合物的藥物組合物，本發(fā)明還特別包含一種或多種本發(fā)明的化合物的藥物組合物。
本發(fā)明提供了包含一種或多種本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或水合物和一種或多種預(yù)防性制劑或治療性制劑的藥物組合物，所述預(yù)防性制劑或治療性制劑已知可用于或已經(jīng)或當(dāng)前正在用于預(yù)防、治療或改善伴隨有或特征為異常血管形成的疾病或病癥、中樞神經(jīng)系統(tǒng)病癥、增生性病癥、炎癥、或通過(guò)抑制磷酸二酯酶IV(″PDE4″)活性和/或抑制微管蛋白聚合或穩(wěn)定性來(lái)預(yù)防、控制、治療或改善的疾病或病癥，或其一種或多種的癥狀。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物組合物可包含一種或多種本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或水合物和一種或多種血管靶向制劑。
本發(fā)明還提供了抑制或降低微管蛋白聚合或穩(wěn)定性的方法，所述方法包括將細(xì)胞與有效量的本發(fā)明的化合物接觸。
本發(fā)明還提供了抑制或降低微管蛋白聚合或穩(wěn)定性和PDE4活性的方法，所述方法包括將細(xì)胞與有效量的本發(fā)明的化合物接觸。
本發(fā)明還提供了抑制PDE4活性的方法，所述方法包括將細(xì)胞與有效量的本發(fā)明的化合物接觸。
本發(fā)明還提供了靶向、阻斷或破壞腫瘤血管功能的方法，所述方法包括將腫瘤與有效量的本發(fā)明的化合物接觸。
本發(fā)明還提供了靶向、阻斷或破壞腫瘤血管內(nèi)皮的方法，所述方法包括將腫瘤與有效量的本發(fā)明的化合物接觸。
本發(fā)明還提供了閉塞已存在的腫瘤血管的方法，所述方法包括將腫瘤與有效量的本發(fā)明的化合物接觸。
本發(fā)明還提供了殺死腫瘤細(xì)胞的方法，所述方法包括將腫瘤細(xì)胞與有效量的本發(fā)明的化合物接觸。
本發(fā)明還提供了引起腫瘤細(xì)胞內(nèi)急性血管塌陷的方法，所述方法包括將腫瘤細(xì)胞與有效量的本發(fā)明的化合物接觸。
本發(fā)明還提供了通過(guò)血管抑制阻斷血管生成的方法，所述方法包括將細(xì)胞與有效量的本發(fā)明的化合物接觸。
本發(fā)明提供了抑制血管生成的方法，所述方法包括將有效量的本發(fā)明的化合物給予需要它的個(gè)體。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了預(yù)防、治療、控制或改善增生性病癥或炎癥或它們的一種或多種癥狀的方法，所述方法包括將預(yù)防或治療有效量的本發(fā)明的化合物單獨(dú)給藥或與預(yù)防或治療有效量的一種或多種除本發(fā)明的化合物之外的用于預(yù)防、治療、控制或改善增生性病癥或炎癥或它們的一種或多種癥狀或已知對(duì)預(yù)防、治療、控制或改善增生性病癥或炎癥或它們的一種或多種癥狀有效的治療性制劑聯(lián)合給藥。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了預(yù)防、治療、控制或改善中樞神經(jīng)系統(tǒng)病癥或其一種或多種癥狀的方法，所述方法包括將預(yù)防或治療有效量的本發(fā)明的化合物單獨(dú)給藥或與預(yù)防或治療有效量的一種或多種除本發(fā)明的化合物之外的用于預(yù)防、治療、控制或改善中樞神經(jīng)系統(tǒng)病癥或其一種或多種癥狀或已知對(duì)預(yù)防、治療、控制或改善中樞神經(jīng)系統(tǒng)病癥或其一種或多種癥狀有效的治療性制劑聯(lián)合給藥。
在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了預(yù)防、治療、控制或改善對(duì)微管蛋白結(jié)合劑(例如秋水仙堿、紫杉醇或長(zhǎng)春花生物堿)耐受的癌癥或其一種或多種癥狀的方法，所述方法包括將預(yù)防或治療有效量的本發(fā)明的化合物單獨(dú)給藥或與預(yù)防或治療有效量的一種或多種除本發(fā)明的化合物之外的用于預(yù)防、治療、控制或改善增生性病癥或炎癥或它們的一種或多種癥狀或已知對(duì)預(yù)防、治療、控制或改善增生性病癥或炎癥或它們的一種或多種癥狀有效的治療性制劑(例如秋水仙堿、紫杉醇或長(zhǎng)春花生物堿)聯(lián)合給藥。
3.1術(shù)語(yǔ)和縮寫(xiě)此處所用術(shù)語(yǔ)“烷氧基”是指具有式-O-烷基、-O-低級(jí)烷基、-O-環(huán)烷基、-O-低級(jí)烷基-環(huán)烷基、-O-芐基、-O-低級(jí)烷基-芐基的化合物，其中烷基、低級(jí)烷基和環(huán)烷基定義如下。-O-低級(jí)烷基的代表性基團(tuán)包括但不限于-O-甲基、-O-乙基、-O-正丙基、-O-正丁基、-O-正戊基、-O-正己基、-O-正庚基、-O-正辛基、-O-異丙基、-O-仲丁基、-O-異丁基、-O-叔丁基、-O-異戊基、-O-2-甲基丁基、-O-2-甲基戊基、-O-3-甲基戊基、-O-2，2-二甲基丁基、-O-2，3-二甲基丁基、-O-2，2-二甲基戊基、-O-2，3-二甲基戊基、-O-3，3-二甲基戊基、-O-2，3，4-三甲基戊基、-O-3-甲基己基、-O-2，2-二甲基己基、-O-2，4-二甲基己基、-O-2，5-二甲基己基、-O-3，5-二甲基己基、-O-2，4-二甲基戊基、-O-2-甲基庚基、-O-3-甲基庚基、-O-乙烯基、-O-烯丙基、-O-1-丁烯基、-O-2-丁烯基、-O-異丁烯基、-O-1-戊烯基、-O-2-戊烯基、-O-3-甲基-1-丁烯基、-O-2-甲基-2-丁烯基、-O-2，3-二甲基-2-丁烯基、-O-1-己基、-O-2-己基、-O-3-己基、-O-乙炔基、-O-丙炔基、-O-1-丁炔基、-O-2-丁炔基、-O-1-戊炔基、-O-2-戊炔基和-O-3-甲基-1-丁炔基。-O-環(huán)烷基的代表性基團(tuán)包括但不限于-O-環(huán)丙基、-O-環(huán)丁基、-O-環(huán)戊基、-O-環(huán)己基、-O-環(huán)庚基、-O-環(huán)辛基、-O-環(huán)壬基和-O-環(huán)癸基。-O-低級(jí)烷基-環(huán)烷基的代表性基團(tuán)包括但不限于-O-CH2-環(huán)丙基、-O-CH2-環(huán)丁基、-O-CH2-環(huán)戊基、-O-CH2-環(huán)己基、-O-CH2-環(huán)庚基、-O-CH2-環(huán)辛基、-O-CH2-環(huán)壬基、-O-CH2-環(huán)癸基、-O-(CH2)2-環(huán)丙基、-O-(CH2)2-環(huán)丁基、-O-(CH2)2-環(huán)戊基、-O-(CH2)2-環(huán)己基、-O-(CH2)2-環(huán)庚基、-O-(CH2)2-環(huán)辛基、-O-(CH2)2-環(huán)壬基和-O-(CH2)2-環(huán)癸基。
此處所用術(shù)語(yǔ)“烷基”指具有1到20個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的飽和或不飽和烴。直鏈烷基的代表性基團(tuán)包括但不限于-甲基、-乙基、-正丙基、-正丁基、-正戊基、-正己基、-正庚基、-正辛基、-正壬基、-正癸基、-正十一烷基、-正十二烷基、-正十三烷基、-正十四烷基、正十五烷基等；支鏈烷基包括但不限于-異丙基、-仲丁基、-異丁基、-叔丁基、-異戊基、2-甲基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、2，2-二甲基丁基、2，3-二甲基丁基、2，2-二甲基戊基、2，3-二甲基戊基、3，3-二甲基戊基、2，3，4-三甲基戊基、3-甲基己基、2，2-二甲基己基、2，4-二甲基己基、2，5-二甲基己基、3，5-二甲基己基、2，4-二甲基戊基、2-甲基庚基、3-甲基庚基；不飽和烷基包括但不限于-乙烯基、-烯丙基、-1-丁烯基、-2-丁烯基、-異丁烯基、-1-戊烯基、-2-戊烯基、-3-甲基-1-丁烯基、-2-甲基-2-丁烯基、-2，3-二甲基-2-丁烯基、1-己基、2-己基、3-己基、-乙炔基、-丙炔基、-1-丁炔基、-2-丁炔基、-1-戊炔基、-2-戊炔基、-3-甲基-1-丁炔基、-1-己炔基、-2-己炔基、-1-庚炔基、-2-庚炔基、-1-辛炔基、-2-辛炔基、-1-壬炔基、-2-壬炔基、-1-癸炔基、-2-癸炔基。
此處所用術(shù)語(yǔ)“烯基”指具有2到10個(gè)碳原子且包括至少一個(gè)碳-碳雙鍵的直鏈或支鏈非環(huán)狀烴。直鏈和支烯基的代表性基團(tuán)包括-乙烯基、-烯丙基、-1-丁烯基、-2-丁烯基、-異丁烯基、-1-戊烯基、-2-戊烯基、-3-甲基-1-丁烯基、-2-甲基-2-丁烯基、-2，3-二甲基-2-丁烯基、-1-己烯基、-2-己烯基、-3-己烯基、-1-庚烯基、-2-庚烯基、-3-庚烯基、-1-辛烯基、-2-辛烯基、-3-辛烯基、-1-壬烯基、-2-壬烯基、-3-壬烯基、-1-癸烯基、-2-癸烯基、-3-癸烯基等。
此處所用術(shù)語(yǔ)“炔基”指具有2到10個(gè)碳原子且包括至少一個(gè)碳-碳三鍵的直鏈或支鏈非環(huán)狀烴。直鏈和支鏈-(C2-C10)炔基的代表性基團(tuán)包括-乙炔基、-丙炔基、-1-丁炔基、-2-丁炔基、-1-戊炔基、-2-戊炔基、-3-甲基-1-丁炔基、-4-戊炔基、-1-己炔基、-2-己炔基、-5-己炔基、-1-庚炔基、-2-庚炔基、-6-庚炔基、-1-辛炔基、-2-辛炔基、-7-辛炔基、-1-壬炔基、-2-壬炔基、-8-壬炔基、-1-癸炔基、-2-癸炔基、-9-癸炔基等。炔基可為未取代的或取代的。
此處所用術(shù)語(yǔ)“抗體”指單克隆抗體、多特異性抗體、人抗體、人源化抗體、駱駝源化(camelised)抗體、嵌合抗體、單域抗體、單鏈Fv(scFv)、單鏈抗體、Fab片段、F(ab′)片段、二硫鍵連接的Fv(sdFv)和抗獨(dú)特型(anti-Id)抗體(包括例如抗本發(fā)明的抗體的抗獨(dú)特型抗體)和以上任一種的表位結(jié)合片段。具體地說(shuō)，抗體包括免疫球蛋白分子，例如包括抗原結(jié)合位點(diǎn)的分子。免疫球蛋白分子可為任何型(例如IgG、IgE、IgM、IgD、IgA和IgY)、類(lèi)(例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2)或亞類(lèi)。
此處所用術(shù)語(yǔ)“芳基”是指碳環(huán)芳基。芳基的實(shí)例包括但不限于苯基、芐基、萘基和蒽基。
此處所用術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”指3-、4-、5-、6-、7-或8-元飽和或不飽和非芳香族碳環(huán)。代表性的C3-C8環(huán)烷基包括但不限于-環(huán)丙基、-環(huán)丁基、-環(huán)戊基、-環(huán)戊二烯基、-環(huán)己基、-環(huán)己烯基、-1，3-環(huán)己二烯基、-1，4-環(huán)己二烯基、-環(huán)庚基、-1，3-環(huán)庚二烯基、-1，3，5-環(huán)庚三烯基、環(huán)辛基和環(huán)辛二烯基。術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”也包括-低級(jí)烷基-環(huán)烷基，其中低級(jí)烷基和環(huán)烷基如此處所定義。-低級(jí)烷基-環(huán)烷基的實(shí)例包括但不限于-CH2-環(huán)丙基、-CH2-環(huán)丁基、-CH2-環(huán)戊基、-CH2-環(huán)戊二烯基、-CH2-環(huán)己基、-CH2-環(huán)庚基和-CH2-環(huán)辛基。
此處所用術(shù)語(yǔ)“化合物”和“本發(fā)明的化合物”可互換使用，指此處特別說(shuō)明或一般公開(kāi)的任何化合物，包括其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物或溶劑化物。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物為具有式I的化合物和表1中的化合物，及其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物或溶劑化物。
此處所用術(shù)語(yǔ)“病癥”和“疾病”可互換使用指?jìng)€(gè)體的不適。某些不適可具有多于一種病癥的特征。例如，某些不適可同時(shí)具有非癌性增生性病癥和炎性病癥的特征。在一個(gè)實(shí)施方案中，增生性病癥是癌癥。
此處所用術(shù)語(yǔ)“有效量”是指本發(fā)明的化合物的量，所述量足以減輕或改善病癥(例如以異常血管生成為特征的病癥、中樞神經(jīng)系統(tǒng)病癥、增生性病癥或特征為炎癥的病癥(即炎性病癥))或其一種或多種癥狀的嚴(yán)重程度或持續(xù)時(shí)間，預(yù)防病癥(例如以異常血管生成為特征的病癥、增生性病癥或炎性病癥)的發(fā)展，使病癥(例如增生性病癥或炎性病癥)消退，預(yù)防病癥(例如以異常血管生成為特征的病癥、增生性病癥或炎性病癥)所伴隨的一種或多種癥狀的復(fù)發(fā)、發(fā)展或發(fā)作，或者提高或改善另一種治療的預(yù)防或治療效果。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，針對(duì)癌癥治療，有效量指抑制或減緩癌細(xì)胞的增生，抑制或減緩腫瘤細(xì)胞的擴(kuò)散(轉(zhuǎn)移)，抑制或減緩伴隨癌癥的一種或多種癥狀的發(fā)作、發(fā)展或進(jìn)展，減小腫瘤的尺寸或殺死腫瘤細(xì)胞的本發(fā)明的化合物的量。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物的治療有效量為攻擊腫瘤血管系統(tǒng)并切斷對(duì)腫瘤的血液和/或氧氣供應(yīng)的量。相對(duì)于對(duì)照或安慰劑(例如磷酸鹽緩沖鹽水(″PBS″))計(jì)算，優(yōu)選本發(fā)明的化合物的治療有效量抑制或減少癌細(xì)胞的增生或腫瘤的尺寸至少5％，優(yōu)選至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％，或至少99％。在另一個(gè)實(shí)施方案中，針對(duì)炎癥，有效量是指減輕關(guān)節(jié)、器官或組織的炎癥的本發(fā)明的化合物的量。相對(duì)于對(duì)照或安慰劑(例如磷酸鹽緩沖鹽水)計(jì)算，優(yōu)選本發(fā)明的化合物的有效量將關(guān)節(jié)、器官或組織的炎癥減輕至少5％，優(yōu)選至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％，或至少99％。在另一個(gè)實(shí)施方案中，針對(duì)銀屑病的治療，有效量是指將人的銀屑病面積和嚴(yán)重程度指數(shù)(PASI)評(píng)分減少至少20％、至少35％、至少30％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％或至少85％的本發(fā)明的化合物的量。在一個(gè)可選擇的實(shí)施方案中，針對(duì)銀屑病的治療，有效量?jī)?yōu)選地指將人總體評(píng)定評(píng)分提高至少25％、至少35％、至少30％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％或至少95％的本發(fā)明的化合物的量。本發(fā)明的化合物的治療有效量的實(shí)例見(jiàn)以下4.4.5節(jié)。
此處所用術(shù)語(yǔ)“鹵素”是指-F、-Cl、-Br或-I。
此處所用術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)”是指芳香族或非芳香族環(huán)烷基，其中1到4個(gè)環(huán)碳原子獨(dú)立地被選自O(shè)、S和N的雜原子置換。雜環(huán)的代表性實(shí)例包括但不限于苯并呋喃基、苯并噻吩、吲哚基、苯并吡唑基、香豆素基、異喹啉基、吡咯基、吡咯烷基、噻吩基、呋喃基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、三唑基、喹啉基、嘧啶基、吡啶基、吡啶酮基、吡嗪基、噠嗪基、異噻唑基、異噁唑基、(1，4)-二氧六環(huán)、(1，3)-二氧戊環(huán)、4，5-二氫-1H-咪唑基和四唑基。雜環(huán)可為取代或未取代的。雜環(huán)也可在任何環(huán)原子(即在雜環(huán)的任何碳原子或雜原子)上成鍵。
此處所用術(shù)語(yǔ)“聯(lián)合”是指采用多于一種治療(例如一種或多種預(yù)防性制劑和/或治療性制劑)。使用術(shù)語(yǔ)“聯(lián)合”不限制給予患有病癥(例如以異常血管生成為特征的病癥、增生性病癥或炎性病癥)的個(gè)體施以治療(例如預(yù)防性制劑和/或治療性制劑)的順序。第一種治療(例如預(yù)防性制劑或治療性制劑，如本發(fā)明的化合物)可在給予第二種治療(例如預(yù)防性制劑或治療性制劑，如抗炎制劑或抗血管生成制劑)之前(例如5分鐘、15分鐘、30分鐘、45分鐘、1小時(shí)、2小時(shí)、4小時(shí)、6小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí)、72小時(shí)、96小時(shí)、1周、2周、3周、4周、5周、6周、8周或12周以前)、同時(shí)或之后(例如5分鐘、15分鐘、30分鐘、45分鐘、1小時(shí)、2小時(shí)、4小時(shí)、6小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí)、72小時(shí)、96小時(shí)、1周、2周、3周、4周、5周、6周、8周或12周以后)給予患有病癥(例如以異常血管生成為特征的病癥、增生性病癥或炎性病癥)的個(gè)體。
這里與化合物(例如本發(fā)明的化合物)一起出現(xiàn)的術(shù)語(yǔ)“分離的”是指基本不含化學(xué)前體，其它化合物(化學(xué)合成時(shí))或其它異構(gòu)體的化合物。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，該化合物為60％、65％、75％、80％、85％、90％、95％或99％不含其它不同的化合物(例如其它異構(gòu)體)。優(yōu)選本發(fā)明的化合物為分離的化合物。
此處所用術(shù)語(yǔ)“低級(jí)烷基”指具有1到8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈飽和或不飽和烴。直鏈低級(jí)烷基的代表性基團(tuán)包括但不限于-甲基、-乙基、-正丙基、-正丁基、-正戊基、-正己基、-正庚基和-正辛基；支鏈低級(jí)烷基包括但不限于-異丙基、-仲丁基、-異丁基、-叔丁基、-異戊基、-2-甲基丁基、-2-甲基戊基、-3-甲基戊基、-2，2-二甲基丁基、-2，3-二甲基丁基、-2，2-二甲基戊基、-2，3-二甲基戊基、-3，3-二甲基戊基、-2，3，4-三甲基戊基、-3-甲基己基、-2，2-二甲基己基、-2，4-二甲基己基、-2，5-二甲基己基、-3，5-二甲基己基、-2，4-二甲基戊基、-2-甲基庚基、-3-甲基庚基。不飽和的C1-C8烷基包括但不限于-乙烯基、-烯丙基、-1-丁烯基、-2-丁烯基、-異丁烯基、-1-戊烯基、-2-戊烯基、-3-甲基-1-丁烯基、-2-甲基-2-丁烯基、-2，3-二甲基-2-丁烯基、-1-己基、-2-己基、-3-己基、-乙炔基、-丙炔基、-1-丁炔基、-2-丁炔基、-1-戊炔基、-2-戊炔基和-3-甲基-1-丁炔基。
此處所用術(shù)語(yǔ)“低級(jí)羥烷基”是指被一個(gè)或多個(gè)羥基取代的此處所述的低級(jí)烷基。代表性的低級(jí)羥烷基包括但不限于-CH2OH、-(CH2)2OH、-(CH2)3OH、-(CH2)4OH、-(CH2)5OH、-CH(OH)CH3、-CH(OH)CH2CH3、-CH(OH)(CH2)2CH3、-CH2CH(OH)CH3、-CH2CH(OH)CH2CH3等。
當(dāng)此處所述的基團(tuán)被稱(chēng)為“取代或未取代的”時(shí)，在取代的情況下，它們可以被任何不會(huì)對(duì)化合物的所期望的活性產(chǎn)生不利影響的取代基取代。優(yōu)選的取代基的實(shí)例為此處所公開(kāi)的示例性化合物和實(shí)施方案的化合物的那些取代基以及鹵素(例如氯、碘、溴或氟)、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、羥基、C1-6烷氧基、氨基、硝基、巰基、硫醚、亞胺、氰基、酰氨基、膦酸根合(phosphonato)、膦、羧基、硫代羰基、磺?；?、氨磺酰、酮、醛、酯、乙?；⒁阴Ｑ趸?、氨基甲酰基、氧代基(＝O)、鹵代烷基(例如三氟甲基)、取代的氨?；桶被榛⑻辑h(huán)環(huán)烷基(可為單環(huán)或者稠合或非稠合多環(huán)(例如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基或環(huán)己基))或雜環(huán)烷基(可為單環(huán)或者稠合或非稠合多環(huán)(例如，吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉基或噻嗪基))、碳環(huán)或雜環(huán)、單環(huán)或稠合或非稠合多環(huán)芳基(例如苯基、萘基、吡咯基、吲哚基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噁唑基、異噁唑基、噻唑基、三唑基、四唑基、吡唑基、吡啶基、喹啉基、異喹啉基、吖啶基、吡嗪基、噠嗪基、嘧啶基、苯并咪唑基、苯并噻吩基或苯并呋喃基)、氨基(伯、仲或叔)、O-低級(jí)烷基、O-芳基、芳基、芳基-低級(jí)烷基、CO2CH3、CONH2、OCH2CONH2、NH2、SO2NH2、OCHF2、CF3、OCF3，以及也可任選地被稠環(huán)結(jié)構(gòu)或橋(例如-OCH2O-或-O-低級(jí)烷基-O-)取代的部分。這些取代基可任選地進(jìn)一步被選自這類(lèi)基團(tuán)的取代基取代。在一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)?shù)图?jí)烷基(例如亞甲基)被取代時(shí)，它被天然氨基酸的側(cè)鏈取代。
本發(fā)明的各種化合物包括一個(gè)或多個(gè)手性中心并可以以對(duì)映體的外消旋混合物、非對(duì)映體混合物、或?qū)τ丑w或光學(xué)純化合物存在。本發(fā)明包括這些化合物的立體異構(gòu)純形式的用途，以及那些形式的混合物的用途。例如，包含等量或不等量的本發(fā)明具體化合物的對(duì)映體的各混合物可用于本發(fā)明的方法和組合物中。這些異構(gòu)體可通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)(例如手性柱或手性拆分試劑)不對(duì)稱(chēng)合成或拆分。參見(jiàn)例如Jacques，J.等的Enantiomers，Racemates and Resolutions(Wiley-Interscience，New York，1981)、Wilen，S.H.等的Tetrahedron 332725(1977)、Eliel，E.L.等的Stereochemistfy ofCarbon Compounds(McGraw-Hill，NY，1962)和Wilen，S.H.的Tables ofResolving Agents and Optical Resolutions第268頁(yè)(E.L.Eliel編，Univ.ofNotre Dame Press，Notre Dame，IN，1972)。
還應(yīng)該指出本發(fā)明的化合物包括E和Z異構(gòu)體或其混合物，以及順式和反式異構(gòu)體或其混合物。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物被分離為E或Z異構(gòu)體。在其它實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物為E和Z異構(gòu)體的混合物。
除非另有說(shuō)明，此處所用的術(shù)語(yǔ)“立體異構(gòu)純的”是指包含化合物的一種立體異構(gòu)體并基本不含該化合物的其它立體異構(gòu)體的組合物，或者包含化合物的一種幾何異構(gòu)體(例如圍繞雙鍵)并基本上不含其它幾何異構(gòu)體的組合物。例如具有一個(gè)手性中心的本發(fā)明的立體異構(gòu)純化合物或其組合物基本上不含該化合物的相反的對(duì)映體。具有兩個(gè)手性中心的本發(fā)明的立體異構(gòu)純化合物或其組合物基本上不含該化合物的其它非對(duì)映體。具有一個(gè)能形成E/Z異構(gòu)的雙鍵的本發(fā)明的立體異構(gòu)純化合物或其組合物基本上不含E/Z異構(gòu)體中的一種。典型的立體異構(gòu)純化合物包含大于約80％重量的該化合物的一種立體異構(gòu)體或E/Z異構(gòu)體和小于約20％重量的該化合物的其它立體異構(gòu)體或E/Z異構(gòu)體，更優(yōu)選大于約90％重量的該化合物的一種立體異構(gòu)體或E/Z異構(gòu)體和小于約10％重量的該化合物的其它立體異構(gòu)體或E/Z異構(gòu)體，甚至更優(yōu)選大于約95％重量的該化合物的一種立體異構(gòu)體或E/Z異構(gòu)體和小于約5％重量的該化合物的其它立體異構(gòu)體或E/Z異構(gòu)體，最優(yōu)選大于約97％重量的該化合物的一種立體異構(gòu)體或E/Z異構(gòu)體和小于約3％重量的該化合物的其它立體異構(gòu)體或E/Z異構(gòu)體。除非另有說(shuō)明，此處所用的術(shù)語(yǔ)“立體異構(gòu)富集”是指本發(fā)明的化合物或其組合物包含大于約60％重量的本發(fā)明的化合物的一種立體異構(gòu)體或E/Z異構(gòu)體，優(yōu)選大于約70％重量，更優(yōu)選大于約80％重量的本發(fā)明的化合物的一種立體異構(gòu)體或E/Z異構(gòu)體。除非另有說(shuō)明，此處所用的術(shù)語(yǔ)“對(duì)映異構(gòu)體純的”是指具有一個(gè)手性中心的本發(fā)明的立體異構(gòu)純化合物或其組合物。類(lèi)似地，術(shù)語(yǔ)“立體異構(gòu)富集的”是指具有一個(gè)手性中心的本發(fā)明的立體異構(gòu)富集化合物或其組合物。
應(yīng)該指出如果結(jié)構(gòu)或部分結(jié)構(gòu)的立體化學(xué)沒(méi)有用例如粗實(shí)線或虛線表示，則該結(jié)構(gòu)或部分結(jié)構(gòu)可理解為包括它所有的立體異構(gòu)體。
此處所用術(shù)語(yǔ)“控制”是指?jìng)€(gè)體從治療(例如預(yù)防性制劑或治療性制劑)中獲得的有利結(jié)果，但該有利結(jié)果并未使疾病痊愈。在某些實(shí)施方案中，給予個(gè)體一種或多種治療(例如一種或多種預(yù)防性制劑或治療性制劑)來(lái)“控制”疾病或其癥狀從而預(yù)防該疾病或其癥狀的進(jìn)展或惡化。
此處所用術(shù)語(yǔ)“不響應(yīng)”和“難以治愈的”描述了用當(dāng)前可用的治療(例如預(yù)防性制劑或治療性制劑)來(lái)治療病癥(例如以異常血管生成為特征的病癥、增生性病癥或炎性病癥)的個(gè)體，該治療在臨床上不足以減輕伴隨這類(lèi)病癥的一種或多種癥狀。通常這類(lèi)個(gè)體忍受?chē)?yán)重的持續(xù)活動(dòng)性疾病并要求另外的治療來(lái)改善伴隨他們病癥(例如以異常血管生成為特征的病癥、增生性病癥或炎性病癥)的癥狀。
此處所用短語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的鹽”是指本發(fā)明的化合物的藥學(xué)上可接受的有機(jī)或無(wú)機(jī)鹽。優(yōu)選的鹽包括但不限于硫酸鹽、檸檬酸鹽、醋酸鹽、草酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、硝酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽、酸式磷酸鹽、異煙酸鹽(isonicotinate)、乳酸鹽、水楊酸鹽、酸式檸檬酸鹽、酒石酸鹽、油酸鹽、鞣酸鹽、泛酸鹽、酒石酸氫鹽、抗壞血酸鹽、琥珀酸鹽、馬來(lái)酸鹽、龍膽酸鹽、富馬酸鹽、葡萄糖酸鹽、glucaronate、糖酸鹽、甲酸鹽、苯甲酸鹽、谷氨酸鹽、甲磺酸鹽、乙磺酸鹽、苯磺酸鹽、對(duì)甲苯磺酸鹽和雙羥萘酸鹽(即1，1′-亞甲基-雙-(2-羥基-3-萘甲酸鹽))。藥學(xué)上可接受的鹽可包含另一種分子，例如醋酸根離子、琥珀酸根離子或其它抗衡離子?？购怆x子可為穩(wěn)定母體化合物上的電荷的任何有機(jī)或無(wú)機(jī)部分。此外，藥學(xué)上可接受的鹽在其結(jié)構(gòu)中可具有多于一個(gè)帶電荷原子。在藥學(xué)上可接受的鹽具有多個(gè)帶電荷原子部分的情形下，可有多個(gè)抗衡離子。因此，藥學(xué)上可接受的鹽可具有一個(gè)或多個(gè)帶電荷原子和/或一個(gè)或多個(gè)抗衡離子。
此處所用術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的溶劑化物”是指一個(gè)或多個(gè)溶劑分子和本發(fā)明的化合物的締合。形成藥學(xué)上可接受的溶劑化物的溶劑的實(shí)例包括但不限于水、異丙醇、乙醇、甲醇、DMSO、乙酸乙酯、乙酸和乙醇胺。
此處所用術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的水合物”是指本發(fā)明的化合物或其鹽進(jìn)一步包含通過(guò)非共價(jià)分子間力結(jié)合的化學(xué)計(jì)量或非化學(xué)計(jì)量的水。
此處所用術(shù)語(yǔ)“預(yù)防”是指給予個(gè)體治療(例如預(yù)防性制劑或治療性制劑)或聯(lián)合治療(例如預(yù)防性制劑或治療性制劑的聯(lián)合)，來(lái)預(yù)防其所患病癥或病癥的一種或多種癥狀的復(fù)發(fā)、發(fā)作或進(jìn)展。
此處所用短語(yǔ)“預(yù)防有效量”是指治療(例如預(yù)防性制劑)的量足以預(yù)防病癥(例如以異常血管生成為特征的病癥、增生性病癥或炎性病癥)或病癥的一種或多種癥狀的發(fā)展、復(fù)發(fā)或發(fā)作，或增強(qiáng)或改善另一種治療(例如另一種治療性制劑)的預(yù)防效果?；衔锏念A(yù)防有效量的實(shí)例見(jiàn)述于以下4.4.5節(jié)。
此處所用短語(yǔ)“副作用”包括治療(例如預(yù)防性制劑或治療性制劑)的不希望的和不利的作用。副作用總是不希望的，但不希望的副作用不一定是不利的。治療(例如預(yù)防性制劑或治療性制劑)的不利作用可能是有害的或不舒服或危險(xiǎn)的。副作用包括但不限于發(fā)熱、寒戰(zhàn)、嗜睡、胃腸毒性(包括胃和腸的潰瘍以及糜爛)、惡心、嘔吐、神經(jīng)毒性、中毒性腎損害、腎毒性(包括乳突狀壞死和慢性間質(zhì)性腎炎的情況)、肝毒性(包括升高的血清肝酶水平)、骨髓中毒(包括白血球減少癥、骨髓抑制、血小板減少癥和貧血癥)、口干、金屬味、妊娠延長(zhǎng)、虛弱、嗜眠、疼痛(包括肌肉疼痛、骨骼疼痛和頭痛)、脫發(fā)、無(wú)力、頭暈、錐體束外癥狀、靜坐不能、心血管紊亂和性功能障礙。
此處所用術(shù)語(yǔ)“個(gè)體”和“患者”在此處可以互換使用。術(shù)語(yǔ)“個(gè)體”是指動(dòng)物，優(yōu)選包括非靈長(zhǎng)類(lèi)(例如牛、豬、馬、貓、狗、鼠和小鼠)和靈長(zhǎng)類(lèi)(例如猿如獼猴、黑猩猩和人)在內(nèi)的哺乳動(dòng)物，更優(yōu)選人。在一個(gè)實(shí)施方案中，個(gè)體的病癥(例如以異常血管生成為特征的病癥、增生性病癥或炎性病癥)是難治愈的或?qū)Ξ?dāng)前治療不響應(yīng)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，個(gè)體為家畜(例如馬、?；蜇i)或?qū)櫸?例如狗或貓)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，個(gè)體不是免疫受損的或免疫抑制的哺乳動(dòng)物，優(yōu)選人(例如HIV個(gè)體)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，個(gè)體不是淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)低于約500個(gè)細(xì)胞/mm3的哺乳動(dòng)物，優(yōu)選人。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，個(gè)體是人。
此處所用術(shù)語(yǔ)“協(xié)同”是指本發(fā)明的化合物和另一種治療(例如預(yù)防性制劑或治療性制劑)聯(lián)合，所述另一種治療已經(jīng)或當(dāng)前正在用于預(yù)防、控制或治療病癥(例如以異常血管生成為特征的病癥、增生性病癥或炎性病癥)，所述聯(lián)合比各治療的累加效果更為有效。聯(lián)合治療(例如預(yù)防性制劑或治療性制劑的聯(lián)合)的協(xié)同效果使得可以對(duì)患有病癥(例如以異常血管生成為特征的病癥、增生性病癥或炎性病癥)的個(gè)體使用較少劑量的一種或多種治療和/或以較低頻率給予所述治療。能夠采用較少劑量的治療(例如預(yù)防性制劑或治療性制劑)和/或以較低頻率給予所述治療減輕了給予個(gè)體的該治療所伴隨的毒性，而沒(méi)有降低所述治療在預(yù)防、控制或治療病癥(例如以異常血管生成為特征的病癥、增生性病癥或炎性病癥)的效果。此外，協(xié)同效果可以改善制劑預(yù)防、控制或治療病癥(例如以異常血管生成為特征的病癥、增生性病癥或炎性病癥)的效果。聯(lián)合治療(例如預(yù)防性制劑或治療性制劑的聯(lián)合)的協(xié)同效果可避免或減輕單獨(dú)使用各個(gè)治療所伴隨的不利或不希望的副作用。在一個(gè)實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)協(xié)同是指本發(fā)明的單一化合物對(duì)腫瘤或腫瘤細(xì)胞的生物學(xué)效果。不受理論的限制，由于本發(fā)明的化合物同時(shí)具有血管靶向活性(對(duì)抗中心腫瘤細(xì)胞特別有效)和抗血管生成活性(對(duì)抗外周腫瘤細(xì)胞特別有效)，本發(fā)明的化合物特別用于根除大部分腫瘤，并在一個(gè)實(shí)施方案中完全根除腫瘤。因此，由于其雙重活性(血管靶向制劑和抗血管生成劑)的協(xié)同效果，本發(fā)明的化合物能夠非常積極地對(duì)抗腫瘤。
此處所用術(shù)語(yǔ)“治療”是指給予一種或多種治療(例如一種或多種治療性制劑如本發(fā)明的化合物)來(lái)減輕或改善病癥(例如以異常血管生成為特征的病癥、增生性病癥或炎性病癥)的進(jìn)展、嚴(yán)重程度和/或持續(xù)時(shí)間，或改善病癥的一種或多種癥狀。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，這類(lèi)術(shù)語(yǔ)是指抑制或減緩癌細(xì)胞的增生，抑制或減緩腫瘤細(xì)胞的播散(轉(zhuǎn)移)，抑制或減緩伴隨癌癥的一種或多種癥狀的發(fā)作、發(fā)展或進(jìn)展，減小腫瘤的尺寸，或改善患者的ECOG或Karnofsky評(píng)分。在其它實(shí)施方案中，這類(lèi)術(shù)語(yǔ)是指減輕一個(gè)或多個(gè)關(guān)節(jié)、器官或組織的腫脹，或減輕與炎性病癥相伴隨的疼痛。在其它實(shí)施方案中，這類(lèi)術(shù)語(yǔ)是指降低人PASI評(píng)分或改善人總體評(píng)定評(píng)分。
此處所用術(shù)語(yǔ)“微管蛋白結(jié)合制劑”、“微管蛋白結(jié)合性制劑”或其不同方式是指可結(jié)合細(xì)胞中的微管蛋白、α，β-微管蛋白二聚體或完整的微管的任何細(xì)胞(增殖)抑制劑或細(xì)胞毒性劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，微管蛋白結(jié)合制劑抑制微管蛋白的聚合或穩(wěn)定性。在另一個(gè)實(shí)施方案中，微管蛋白結(jié)合制劑為微管蛋白去穩(wěn)定劑。
此處所用術(shù)語(yǔ)“抑制微管蛋白的聚合或穩(wěn)定性”或“對(duì)微管蛋白的聚合或穩(wěn)定性的抑制”是指對(duì)微管蛋白二聚體的結(jié)構(gòu)的任何改變，對(duì)微管蛋白二聚體組裝為微管的任何阻礙，或?qū)ξ⒐艿鞍椎娜魏稳シ€(wěn)定作用。
以下縮寫(xiě)用于此處并具有所示的定義Dess-Martin Periodinane為1，1，1-三乙酰氧基-1，1-二氫-1，2-苯碘酰-3-(1H)-酮，DMF為N，N-二甲基甲酰胺，DMSO為二甲基亞砜，EtOAc為乙酸乙酯，HPLC為高效液相色譜，HUVEC為人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，KHMDS為六甲基二硅基氨基鉀，LHMDS為六甲基二硅基氨基鋰、PBMC為外周血液?jiǎn)魏思?xì)胞，PCC為氯鉻酸吡啶鎓，PDC為重鉻酸吡啶鎓，Ph為苯基，THF為四氫呋喃，TLC為薄層色譜，TPAP為過(guò)釕酸四正丙銨。
4.發(fā)明詳述本發(fā)明提供了化合物以及所述化合物的用途。本發(fā)明包括本發(fā)明的化合物抑制微管蛋白的聚合和/或微管蛋白穩(wěn)定性和/或抑制有絲分裂的用途。本發(fā)明還包括本發(fā)明的化合物抑制血管生成的用途。本發(fā)明還包括本發(fā)明的化合物抑制PDE4活性的用途。本發(fā)明還包括本發(fā)明的化合物作為血管靶向制劑的用途。
本發(fā)明包括治療方案，所述治療方案對(duì)多種病癥(例如以異常血管生成為特征的病癥、增生性病癥或炎性病癥)或其一種或多種癥狀提供了比當(dāng)前單一制劑治療或聯(lián)合治療更好的預(yù)防或治療效果。具體地，本發(fā)明提供了用于預(yù)防、治療、控制或改善增生性病癥(例如癌癥)、黃斑變性或炎性疾病或其一種或多種癥狀的預(yù)防和治療方案，所述方案包括將預(yù)防或治療有效量的一種或多種本發(fā)明的化合物單獨(dú)或與預(yù)防或治療有效量的至少一種除本發(fā)明的化合物之外的其它預(yù)防性制劑或治療性制劑聯(lián)合給予個(gè)體。
4.1本發(fā)明的化合物本發(fā)明包括具有式I的化合物和下表1所列的化合物。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了具有式I的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或水合物， 其中X為取代或未取代的咪唑、取代或未取代的吡啶、取代或未取代的吡咯烷、取代或未取代的噻吩、取代或未取代的吲哚、取代或未取代的2，3-二氫苯并呋喃、取代或未取代的3，4-二氫-2H-苯并(b)(1，4)噁嗪、取代或未取代的1H-苯并(d)(1，2，3)三唑、取代或未取代的喹啉、取代或未取代的苯并呋喃、取代或未取代的苯并(d)噁唑-2(3H)酮或取代或未取代的嘧啶；R1和R2各自獨(dú)立地為-H、-CN、鹵素、取代或未取代的低級(jí)烷基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的炔基、-NHC(O)R9、-NHC(O)OR9、-COOH、-C(O)-低級(jí)烷基、-C(O)O-低級(jí)烷基、-C(O)-N(R9)2、取代或未取代的芳基、或取代或未取代的雜環(huán)；Ra和Rb各自獨(dú)立地為-H、取代或未取代的低級(jí)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜環(huán)、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的烷氧基、鹵素、氰基、-NO2、-OH、-OPO(OH)2、-N(R9)2、-OC(O)-R10、-OC(O)-R10-N(R10)2、-C(O)N(R10)2、-NHC(O)-R10、-NHS(O)2-R10、-S(O)2-R10、-S(O)2-NH2、-S(O)2-N(R10)2、-NHC(O)NH-R10、-NHC(O)N(R10)2、-NHC(O)NHSO2-R10、-NHC(O)-R10-N(R10)2、-NHC(O)CH(R10)(N(R9)2)或-NHC(O)-R10-NH2；R3為-H、取代或未取代的低級(jí)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜環(huán)、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的烷氧基、鹵素、氰基、-NO2、-OH、-OPO(OH)2、-N(R9)2、-OC(O)-R10、-OC(O)-R10-N(R10)2、-OC(O)-R10-NH2、-C(O)N(R10)2、-NHC(O)-R10、-NHS(O)2-R10、-S(O)2-R10、-OS(O)2-R10、-S(O)2-NH2、-S(O)2-N(R10)2、-OS(O)2-NH2、-OS(O)2-N(R10)2、-NHC(O)O-R10、-NHC(O)NH-R10、-NHC(O)N(R10)2、-NHC(O)NHSO2-R10、-NHC(O)-R10-N(R10)2、-NHC(O)CH(R10)(N(R9)2)或-NHC(O)-R10-NH2、或R3與Ra或R4一起形成-O-C(R16R17)O-、-O-(C(R16R17))2-O-或-O-(C(R16R17))3-O-；R4為-H、取代或未取代的低級(jí)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜環(huán)、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的烷氧基、鹵素、氰基、-NO2、-OH、-OPO(OH)2、-N(R9)2、-OC(O)-R10、-OC(O)-R10-N(R10)2、-OC(O)-R10-NH2、-C(O)N(R10)2、-NHC(O)-R10、-NHS(O)2-R10、-S(O)2-R10、-OS(O)2-R10、-S(O)2-NH2、-S(O)2-N(R10)2、-OS(O)2-NH2、-OS(O)2-N(R10)2、-NHC(O)O-R10、-NHC(O)NH-R10、-NHC(O)N(R10)2、-NHC(O)NHSO2-R10、-NHC(O)-R10-N(R10)2、-NHC(O)CH(R10)(N(R9)2)或-NHC(O)-R10-NH2；R5為-H、取代或未取代的低級(jí)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜環(huán)、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的烷氧基、鹵素、氰基、-NO2、-OH、-OPO(OH)2、-N(R9)2、-OC(O)-R10、-OC(O)-R10-N(R10)2、-OC(O)-R10-NH2、-C(O)N(R10)2、-NHC(O)-R10、-NHS(O)2-R10、-S(O)2-R10、-OS(O)2-R10、-S(O)2-NH2、-S(O)2-N(R10)2、-OS(O)2-NH2、-OS(O)2-N(R10)2、-NHC(O)O-R10、-NHC(O)NH-R10、-NHC(O)N(R10)2、-NHC(O)NHSO2-R10、-NHC(O)-R10-N(R10)2、-NHC(O)CH(R10)(N(R9)2)或-NHC(O)-R10-NH2；
每個(gè)R9各自獨(dú)立地為-H、取代或未取代的低級(jí)烷基、或取代或來(lái)取代的環(huán)烷基；每個(gè)R10各自獨(dú)立地為取代或未取代的低級(jí)烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的低級(jí)羥烷基，或R10和其所連接的氮原子形成取代或未取代的雜環(huán)，或適當(dāng)情況下，R10為-H；和R16和R17各自獨(dú)立地為-H或鹵素。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，具有式I化合物是以下這些，其中當(dāng)(1)X為吡啶、取代的吡啶、吡咯烷、咪唑、萘或噻吩；(2)Ra和Rb是H；和(3)R4為氫、硝基、氰基、三氟甲基、乙氧羰基、甲氧羰基、丙氧羰基、乙?；?，氨基甲?；?、乙酰氧基、羧基、羥基、氨基、低級(jí)烷基、低級(jí)亞烷基甲基、低級(jí)烷氧基，或鹵素時(shí)；如果R3或R5之一為H，則另一個(gè)不為-O-C1-10烷基、-O-C1-10單環(huán)烷基、-O-C1-10多環(huán)烷基、-O-C1-10苯并環(huán)烷基、-C0-3-C1-10烷基、-C0-3-C1-10單環(huán)烷基、-C0-3-C1-10多環(huán)烷基、-C0-3-C1-10苯并環(huán)烷基、-CH＝C1-10烷基、-CH＝C1-10單環(huán)烷基或-CH＝C1-10雙環(huán)烷基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，具有式I化合物是以下這些，其中當(dāng)X為取代或未取代的咪唑、取代或未取代的吡啶、取代或未取代的吡咯烷或取代或未取代的噻吩時(shí)，如果R3或R5之一為H，則另一個(gè)不為取代或未取代的烷基、取代的烯基，或取代或未取代的烷氧基。
在一個(gè)實(shí)施方案中，具有式I化合物是以下這些，其中R1、R3、R4、R5、Ra和Rb如上所述，X為取代或未取代的吲哚、取代或未取代的2，3-二氫苯并呋喃、取代或未取代的3，4-二氫-2H-苯并(b)(1，4)噁嗪、取代或未取代的1H-苯并(d)(1，2，3)三唑、取代或未取代的喹啉、取代或未取代的苯并呋喃、取代或未取代的苯并(d)噁唑-2(3H)酮，或取代或未取代的嘧啶。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，具有式I化合物是其中R1和R2之一為-H的那些化合物。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，具有式I化合物是其中R3或R5為烷氧基，優(yōu)選甲氧基或乙氧基的那些化合物。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，具有式I化合物是其中R3和R5為烷氧基，優(yōu)選甲氧基或乙氧基的那些化合物。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，具有式I化合物是其中R4以及R3或R5中的一個(gè)為烷氧基，優(yōu)選甲氧基或乙氧基的那些化合物。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，具有式I化合物是其中R1為氰基的那些化合物。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，具有式I化合物是其中X被取代的那些化合物。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，具有式I化合物是其中X被低級(jí)烷基，優(yōu)選甲基取代的那些化合物。
本發(fā)明的化合物的說(shuō)明性實(shí)例包括表1所列的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或水合物。應(yīng)該指出這些化合物的E/Z和順/反異構(gòu)體是特別預(yù)期的。
表1
具體地說(shuō)，本發(fā)明包括抑制或降低微管蛋白聚合和/或穩(wěn)定性的化合物。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，本發(fā)明包括抑制或降低微管蛋白聚合或穩(wěn)定性以及抑制或降低一種或多種腫瘤壞死因子-α(TNF-α)活性表達(dá)的化合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明包括抑制或降低微管蛋白聚合或穩(wěn)定性以及抑制或降低一種或多種PDE4活性表達(dá)的化合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明包括具有式I的化合物，該化合物抑制或降低微管蛋白聚合或穩(wěn)定性，抑制或降低一種或多種TNF-α活性表達(dá)以及抑制或降低一種或多種PDE4活性表達(dá)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明包括將細(xì)胞周期停滯于G2/M階段的化合物。
如上所述，本發(fā)明的某些化合物可包括一個(gè)或多個(gè)手性原子。因此，本發(fā)明包括所有的立體異構(gòu)體(即幾何異構(gòu)體)，所述立體異構(gòu)體包括構(gòu)象和構(gòu)型異構(gòu)體(例如對(duì)映體、非對(duì)映異構(gòu)體及其混合物)。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明包括此處所述所有化合物的外消旋或者R-或S-對(duì)映體。各對(duì)映體可以基本不含其它對(duì)映體(例如至少75％(重量/重量)，至少90％(重量/重量)或至少99％(重量/重量)不含其它對(duì)映體)或以混合物(例如外消旋混合物)的形式提供。
本發(fā)明的化合物還包括烯烴，所述烯烴如果被不對(duì)稱(chēng)取代可以以E和Z或順式和反式構(gòu)型存在。因此，本發(fā)明包括E和Z以及順式和反式烯烴異構(gòu)體。例如，認(rèn)為具有下式結(jié)構(gòu)的化合物 包括具有以下結(jié)構(gòu)的E和Z烯烴異構(gòu)體
4.1制備本發(fā)明的化合物的方法本發(fā)明的化合物可通過(guò)常規(guī)的有機(jī)合成制備。例如但不限于，具有上述式I的本發(fā)明的化合物可用如方案1-4所示的方法制備。
方案1顯示具有式I的化合物如何通過(guò)Friedel-Crafts酰化反應(yīng)方法制備。
方案1 具有式44的苯甲酰氯化合物與取代或未取代的具有式45的雜環(huán)化合物通過(guò)Friedel-Crafts酰化反應(yīng)(March，J.Advanced OrganicChemistry-Reactions，Mechanisms and Structure，第4版，John Wiley和Sons，New York，1992，第539-542頁(yè))偶聯(lián)得到具有式46的中間體。具有式46的化合物隨后通過(guò)Wittig反應(yīng)(March，J.Advanced OrganicChemistry-Reactions，Mechanisms and Structure，第4版，John Wiley和Sons，New York，1992，第956-963頁(yè))，在堿(例如六甲基二硅基氨基鋰或六甲基二硅基氨基鉀)的存在下，與具有式47的膦烷或具有式48的膦酸酯反應(yīng)得到相應(yīng)的化合物I。
在一個(gè)實(shí)施方案中，Wittig反應(yīng)中所使用的堿為L(zhǎng)HMDS。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，Wittig反應(yīng)中所使用的堿為KHMDS。
通用方法A-Friedel-Crafts?；磻?yīng)將三氯化鋁(約1當(dāng)量)加入溫度為0℃的0.5到1.0M的取代或未取代的具有式45的雜環(huán)化合物(約1當(dāng)量)的二氯甲烷溶液中。將具有式44的苯甲酰氯(約1當(dāng)量)加入所得的混合物中并使反應(yīng)物升到室溫。反應(yīng)混合物隨后用二氯甲烷稀釋?zhuān)盟礈?3×)，用硫酸鎂干燥，過(guò)濾并真空濃縮得到粗殘余物。該粗殘余物用快速柱色譜法(己烷/乙酸乙酯)純化來(lái)獲得具有式46的化合物。
通用方法B-Wittig反應(yīng)將KHMDS(約2當(dāng)量)加入溫度為0℃的0.5到1.0M的具有式47的膦烷或具有式48的膦酸酯(約2當(dāng)量)的THF溶液中。將所得的混合物升到室溫并隨后攪拌約15分鐘到約1小時(shí)，此后加入約1.0M的具有式46的化合物(約1當(dāng)量)的THF溶液，將所得的混合物加熱回流約4小時(shí)到約36小時(shí)，同時(shí)用TLC監(jiān)測(cè)。將反應(yīng)物冷卻至室溫并隨后真空濃縮得到粗殘余物，將該粗殘余物用快速柱色譜法(己烷/乙酸乙酯)純化來(lái)獲得具有式I的化合物。
方案2顯示如何通過(guò)Grignard反應(yīng)制備具有式I的化合物。
方案2
將具有式43的溴苯或氯苯與鎂反應(yīng)制備相應(yīng)的Grignard試劑，所述Grignard試劑隨后與具有式44的苯甲醛反應(yīng)得到具有式45的羥基化合物。羥基化合物45隨后用氧化劑處理得到具有式40的中間體化合物，所述中間體化合物如上述方案1所述在Wittig反應(yīng)中與合適的膦烷47或膦酸酯48反應(yīng)得到具有式I的化合物。
用于將具有式45的化合物轉(zhuǎn)化為具有式40的化合物的合適的氧化劑包括但不限于氯鉻酸吡啶鎓(PCC)、重鉻酸吡啶鎓(PDC)、Jones試劑、Dess-Martin periodinane、MnO2和過(guò)釕酸四正丙酯(TPAP)。
在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，氧化劑為PCC。
通用方法C-Grignard反應(yīng)將約1/4體積的約0.5M的具有式43的溴苯化合物(約1.2當(dāng)量)的THF溶液緩慢加到約0.5M的鎂屑(約1.2當(dāng)量)的THF溶液中。將所得的混合物加熱回流約30分鐘，隨后移除熱源并滴入其余的具有式43的溴苯化合物。將所得的混合物加熱回流約5小時(shí)到約24小時(shí)，隨后冷卻至室溫并在室溫下攪拌約18小時(shí)。隨后將所得的溶液加到約0.5M的具有式44的苯甲醛化合物的THF溶液(約0℃)中，控制加入速度使得反應(yīng)溫度在加入過(guò)程中不超過(guò)15℃。加畢，將所得的反應(yīng)物在室溫下攪拌約12小時(shí)到約24小時(shí)，隨后冷卻到約0℃并用飽和氯化銨水溶液終止反應(yīng)。所得混合物用乙酸乙酯(3×)萃取，合并的有機(jī)萃取物用水(3×)和鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥并真空濃縮得到粗殘余物，將該粗殘余物用快速柱色譜法(己烷/乙酸乙酯洗脫液)純化來(lái)獲得具有式45的羥基化合物。
通用方法D-具有式45的羥基化合物的氧化反應(yīng)將氯鉻酸吡啶鎓(約1.5當(dāng)量)和硅藻土(約100mg每1mmol具有式45的羥基化合物)加到約0.5M的具有式45的羥基化合物(約1當(dāng)量)的二氯甲烷溶液中，將所得的混合物攪拌約6小時(shí)到約24小時(shí)。將反應(yīng)混合物過(guò)濾，所得濾餅用二氯甲烷洗滌，合并濾液和洗液并真空濃縮得到粗殘余物，將該粗殘余物用快速柱色譜法純化獲得具有式40的二苯甲酮化合物，該二苯甲酮化合物可通過(guò)上述通用方法B轉(zhuǎn)化為具有式I的化合物。
方案3顯示通過(guò)苯乙烯和溴苯的鈀催化偶聯(lián)來(lái)合成具有式I的化合物。
方案3 通用方法E-苯乙烯和溴苯的鈀催化偶聯(lián)將約0.5M的Pd(OAc)4(約0.03當(dāng)量)的DMF溶液加到具有式52的苯乙烯化合物(約1當(dāng)量)、具有式53的溴苯化合物(約1.5當(dāng)量)、醋酸鈉(約1.7當(dāng)量)和四正丁基溴化銨(約1.1當(dāng)量)的DMF懸浮液中。將所得的混合物加熱到60℃并在此溫度下攪拌約6小時(shí)到約18小時(shí)，隨后冷卻至室溫并將其倒入水∶乙酸乙酯(3∶1)的混合物中。收集有機(jī)相，水相用乙酸乙酯(3×)洗滌。合并的有機(jī)相依次用水和鹽水洗滌，隨后用硫酸鎂干燥，過(guò)濾并真空濃縮得到粗殘余物，將該粗殘余物用快速柱色譜法純化來(lái)獲得具有式I的化合物。
方案4顯示利用苯基鋰中間體制備具有式I的化合物的方法。
方案4 具有式49的溴化化合物與正丁基鋰反應(yīng)得到相應(yīng)的中間體有機(jī)鋰試劑，該有機(jī)鋰試劑隨后與具有式50的苯甲醛反應(yīng)得到具有式51的羥基化合物。羥基化合物51隨后用氧化劑處理得到具有式46的中間體化合物，所述中間體化合物如上述方案1所述在Wittig反應(yīng)中與合適的膦烷47或膦酸酯48反應(yīng)得到具有式I的化合物。
用于將具有式51的化合物轉(zhuǎn)化為具有式46的化合物的合適的氧化劑包括但不限于氯鉻酸吡啶鎓(PCC)、重鉻酸吡啶鎓(PDC)、Jones試劑、Dess-Martin periodinane、MnO2和過(guò)釕酸四正丙酯(TPAP)。
在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，氧化劑為PCC。
有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域技術(shù)人員知悉如何采用方案1-4中所述的方法并通過(guò)對(duì)方案1-4的方法制得的產(chǎn)物進(jìn)行簡(jiǎn)單的化學(xué)轉(zhuǎn)化來(lái)制備本發(fā)明的化合物。
本發(fā)明的化合物一經(jīng)合成，則可通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)純化技術(shù)從化學(xué)前體或其它化學(xué)品中分離，所述標(biāo)準(zhǔn)純化技術(shù)例如色譜法(例如快速柱色譜法和HPLC)、不對(duì)稱(chēng)合成法、重結(jié)晶和差異溶解度。
4.2與本發(fā)明的化合物聯(lián)用的試劑本發(fā)明提供了預(yù)防、控制、治療或改善病癥(例如增生性病癥、伴隨有或特征為異常血管生成的病癥，通過(guò)抑制或減少PDE4表達(dá)和/或活性、或者抑制或減少微管蛋白聚合和/或穩(wěn)定性來(lái)預(yù)防、控制或治療的病癥或炎性病癥)的方法，所述方法包括將一種或多種本發(fā)明的化合物和除本發(fā)明的化合物之外的一種或多種治療(例如一種或多種預(yù)防性制劑或治療性制劑)給予需要它們的個(gè)體。
本發(fā)明還提供了包含一種或多種本發(fā)明的化合物和除本發(fā)明的化合物之外的一種或多種預(yù)防性制劑或治療性制劑的組合物，以及使用所述組合物預(yù)防、控制、治療或改善增生性病癥或炎性病癥的方法。預(yù)防性制劑或治療性制劑包括但不限于小分子、合成藥物、肽、多肽、蛋白質(zhì)、核酸(例如DNA和RNA核苷酸包括但不限于反義核苷酸序列，RNAi，三螺旋和編碼生物活性蛋白質(zhì)、多肽或肽的核苷酸序列)、抗體、合成或天然無(wú)機(jī)分子、模擬制劑(mimetic agents)以及合成或天然有機(jī)分子。
任何已知可用或已經(jīng)使用或當(dāng)前正用于預(yù)防、控制、治療或改善病癥(例如增生性病癥、伴隨有或特征為異常血管生成的病癥，增生性病癥，炎性病癥、通過(guò)抑制PDE4或者減少或抑制微管蛋白聚合或穩(wěn)定性來(lái)預(yù)防、控制、治療或改善的病癥)或病癥的一種或多種癥狀的制劑可與此處所述的本發(fā)明的化合物聯(lián)用。關(guān)于已用或當(dāng)前正用于預(yù)防、治療、控制或改善增生性病癥或炎性病癥或其一種或多種癥狀的預(yù)防性制劑或治療性制劑的信息，參見(jiàn)例如Gilman等的Goodman and Gilman′sThe PharmacologicalBasis of Therapeutics(治療藥理學(xué)基礎(chǔ))，第10版，McGraw-Hill，New York，2001、The Merck Manual of Diagnosis and Therapy(默克診療手冊(cè))，BerkoW，M.D.等編著，第17版，Merck Sharp & Dohme Research Laboratories，Rahway，NJ，1999、Cecil Textbook of Medicine(塞氏醫(yī)學(xué)教材)，第20版，Bennett和Plum編著，W.B.Saunders，Philadelphia，1996。這類(lèi)制劑的實(shí)例包括但不限于抗炎制劑(例如皮質(zhì)甾類(lèi)(例如潑尼松和氫化可的松)、糖皮質(zhì)激素類(lèi)、類(lèi)固醇、非類(lèi)固醇抗炎藥物(例如阿司匹林、布洛芬、雙氯芬酸和COX-2抑制劑)、β-激動(dòng)劑、抗膽堿劑和甲基黃嘌呤)、免疫調(diào)節(jié)劑、金注射劑、柳氮磺胺吡啶、青霉胺、抗血管生成劑(例如血管生成抑制素、TNF-α拮抗劑(例如抗TNFα抗體)和內(nèi)皮生長(zhǎng)抑素)、抗纖維化制劑、止吐劑(例如甲氧氯普胺、多潘立酮、普魯氯嗪、異丙嗪、氯丙嗪、三甲氧苯酰胺、昂丹司瓊、格拉司瓊、羥嗪、乙酰亮氨酸(acethylleucine)單乙醇胺、阿立必利、阿扎司瓊、苯喹胺、氨醇醋茶堿(bietanautine)、溴必利、氯苯丁嗪、氯波必利、苯甲嗪、茶苯海明(dimenhydinate)、地芬尼多、多拉司瓊、氯苯甲嗪、美沙拉妥、美托哌丙嗪、大麻隆、氮羥哌丙嗪、嗶哌馬嗪、東莨菪堿、舒必利、四氫大麻酚、硫乙拉嗪、硫丙拉嗪和托烷司瓊)、阿片樣物質(zhì)(例如嗎啡、二乙酰嗎啡、氫嗎啡酮、氫可酮、羥嗎啡酮、羥考酮、美托酮、阿樸嗎啡、去甲嗎啡、唉托啡、丁丙諾啡、哌替啶、洛哌丁胺、阿尼利定、依索庚嗪、匹米諾定(piminidine)、β-普魯丁、地芬諾酯、芬太尼(fentanil)、舒芬太尼、阿芬太尼、瑞芬太尼、左嗎啡、右甲嗎南、非那佐辛、噴他佐辛、環(huán)佐辛、美沙酮、異美沙酮和丙氧芬)、造血細(xì)胞集落刺激因子(例如非格司亭、乙二醇化非格司亭(pegfilgrastim)、沙格司亭、莫拉司亭和阿法依泊丁)、止吐劑(例如甲氧氯普胺、多潘立酮、普魯氯嗪、異丙嗪、氯丙嗪、三甲氧苯酰胺、昂丹司瓊、格拉司瓊、羥嗪、乙酰亮氨酸(acethylleucine)、單乙醇胺、阿立必利、阿扎司瓊、苯喹胺、氨醇醋茶堿、溴必利、氯苯丁嗪、氯波必利、苯甲嗪、茶苯海明、地芬尼多、多拉司瓊、氯苯甲嗪、美沙拉妥、美托哌丙嗪、大麻隆、氮羥哌丙嗪、嗶哌馬嗪、東莨菪堿、舒必利、四氫大麻酚、硫乙拉嗪、硫丙拉嗪和托烷司瓊)、達(dá)普宋、補(bǔ)骨酯素(例如甲氧沙林(methoxalen)和三甲沙林)、抗組胺藥、抗瘧疾制劑(例如羥氯喹)、抗病毒劑、抗生素(例如更生霉素(以前稱(chēng)為放線菌素)、博萊霉素、紅霉素、青霉素、光輝霉素和安曲霉素(AMC))、血管靶向制劑(例如微管去穩(wěn)定藥物、combretastatin A-4磷酸二鈉、ZD6126、AVE8062、Oxi 4503、TZT 1027和DMXAA)、IMiD和SelCID(Celgene Corporation，New Jersey)(例如Revimid、Actimid和美國(guó)專(zhuān)利第6,075,041、5,877,200、5,698,579、5,703,098、6,429,221、5,736,570、5,658,940、5,728,845、5,728,844、6,262,101、6,020,358、5,929,117、6,326,388、6,281,230、5,635,517、5,798,368、6,395,754、5,955,476、6,403,613、6,380,239和6,458,810號(hào)所公開(kāi)的藥物，這些文獻(xiàn)通過(guò)引用而納入本文中)。
4.2.1免疫調(diào)節(jié)劑任何本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的免疫調(diào)節(jié)劑都可用于本發(fā)明的方法和組合物中。
免疫調(diào)節(jié)劑的實(shí)例包括但不限于蛋白制劑，例如細(xì)胞因子、肽模擬制劑和抗體(例如人抗體、人源化抗體、嵌合抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、Fv片段、ScFv片段、Fab片段或F(ab)2片段或表位結(jié)合片段)，核酸分子(例如反義核酸分子、三螺旋和編碼免疫調(diào)節(jié)性基因產(chǎn)物的核酸分子)、小分子、有機(jī)化合物和無(wú)機(jī)化合物。具體地，免疫調(diào)節(jié)劑包括但不限于甲氨蝶呤(methothrexate)、來(lái)氟米特、環(huán)磷酰胺、cytoxan、Immuran、環(huán)孢菌素A、米諾環(huán)素、硫唑嘌呤、抗生素(例如FK506(藤霉素))、甲潑尼龍(MP)、皮質(zhì)甾類(lèi)、類(lèi)固醇(steriods)、霉酚酸酯(mycophenolate mofetil)、雷伯霉素(西羅莫司)、咪唑立賓、去氧精胍菌素、布喹那、malononitriloamindes(例如來(lái)氟米特)、T細(xì)胞受體調(diào)節(jié)劑和細(xì)胞因子受體調(diào)節(jié)劑。
細(xì)胞因子受體調(diào)節(jié)劑的實(shí)例包括但不限于可溶性細(xì)胞因子受體(例如TNF-α受體的胞外域或其片段、IL-1β受體的胞外域或其片段和IL-6受體的胞外域或其片段)、細(xì)胞因子或其片段(例如白介素(IL)-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-11、IL-12、IL-15、IL-23、TNF-α、TNF-β、干擾素(IFN)-α、IFN-β、IFN-γ和GM-CSF)、抗細(xì)胞因子受體抗體(例如抗-IFN受體抗體、抗-IL-2受體抗體(例如Zenapax(Protein DesignLabs))、抗-IL-4受體抗體、抗-IL-6受體抗體、抗-IL-10受體抗體、抗-IL-12受體抗體、抗-IL-15受體抗體和抗-IL-23受體抗體)、抗細(xì)胞因子抗體(例如抗IFN α抗體、抗IFN-β抗體、抗IFN-γ抗體、抗TNF-α抗體、抗IL-1β抗體、抗-IL-2抗體、抗-IL-4抗體、抗-IL-6抗體、抗-IL-8抗體(例如ABX-IL-8(Abgenix))、抗-IL-9抗體、抗-IL-10抗體、抗-IL-12抗體和抗-IL-23抗體)。在具體的實(shí)施方案中，細(xì)胞因子受體調(diào)節(jié)劑為IL-4、IL-10或其片段。在另一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞因子受體調(diào)節(jié)劑為抗-IL-1β抗體、抗-IL-6抗體、抗-IL-12受體抗體或抗TNF-α抗體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞因子受體調(diào)節(jié)劑為T(mén)NF-α受體的胞外域或其片段。在某些實(shí)施方案中，細(xì)胞因子受體調(diào)節(jié)劑不是TNF-α拮抗劑。
4.2.2抗血管生成劑本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的任何抗血管生成劑可用于本發(fā)明的組合物和方法?？寡苌蓜┑姆窍拗菩詫?shí)例包括減緩或抑制血管生成的蛋白質(zhì)、多肽、肽、融合蛋白、抗體(例如人抗體、人源化抗體、嵌合抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、Fv片段、ScFv片段、Fab片段、F(ab)2片段及其抗原結(jié)合片段)例如免疫特異性結(jié)合TNF-α的抗體、核酸分子(例如反義分子或三螺旋)、有機(jī)分子、無(wú)機(jī)分子和小分子。具體地，抗血管生成劑的實(shí)例包括但不限于內(nèi)皮生長(zhǎng)抑素、血管生成抑素、apomigren、抗血管生成的抗凝血酶III、纖連蛋白的29kDa N-端和40kDa C-端蛋白水解片段、uPA受體拮抗劑、催乳素的16kDa蛋白水解片段、血小板因子-4的7.8kDa蛋白水解片段、血小板因子-4的抗血管生成的24氨基酸片段、標(biāo)記為13.40的抗血管生成因子、凝血酶致敏蛋白(thrombospondin)I的抗血管生成的22氨基酸肽片段、SPARC的抗血管生成的20氨基酸肽片段、含RGD和NGR的肽、層連蛋白、纖連蛋白、前膠原和EGF的抗血管生成的肽、抗整聯(lián)蛋白αvβ3抗體、酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(aFGF)拮抗劑、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)拮抗劑、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)拮抗劑(例如抗VEGF抗體)和VEGF受體(VEGFR)拮抗劑(例如抗VEGFR抗體)。
整聯(lián)蛋白αvβ3拮抗劑的實(shí)例包括但不限于蛋白質(zhì)制劑，例如非催化劑的金屬蛋白酶片段、RGD肽、肽模擬、融合蛋白、解聯(lián)蛋白或其衍生物或類(lèi)似物，和免疫特異性結(jié)合整聯(lián)蛋白αvβ3的抗體、核酸分子、有機(jī)分子和無(wú)機(jī)分子。免疫特異性結(jié)合整聯(lián)蛋白αvβ3的抗體的非限制性實(shí)例包括11D2(Searle)。小分子peptidometric整聯(lián)蛋白αvβ3拮抗劑的非限制性實(shí)例包括S836(Searle)和S448(Searle)。解聯(lián)蛋白的實(shí)例包括但不限于Accutin。本發(fā)明還包括以下美國(guó)專(zhuān)利和國(guó)際申請(qǐng)公開(kāi)所披露的任何整聯(lián)蛋白αvβ3拮抗劑在本發(fā)明的組合物和方法中的用途美國(guó)專(zhuān)利第5,652,109、5,652,110、5,578,704、5,149,780、5,196,511、5,204,445、5,262,520、5,306,620、5,478,725、5,498,694、5,523,209、5,578,704、5,589,570、5,652,109、5,652,110、5,693,612、5,705,481、5,753,230、5,767,071、5,770,565、5,780,426、5,817,457、5,830,678、5,849,692、5,955,572、5,985,278、6,048,861、6,090,944、6,096,707、6,130,231、6,153,628、6,160,099和6,171,58號(hào)，以及國(guó)際申請(qǐng)公開(kāi)WO 95/22543、WO 98/33919、WO 00/78815、WO 00/31248、WO 98/46264、WO 98/40488和WO 02/070007，各文獻(xiàn)通過(guò)引用而納入本文中。
在本發(fā)明的一個(gè)具體的實(shí)施方案中，抗血管生成劑為內(nèi)皮生長(zhǎng)抑素。天然的內(nèi)皮生長(zhǎng)抑素由膠原蛋白XVIII的C-端～180氨基酸組成(編碼膠原XVIII的兩種剪接形式的cDNA，其GenBank登錄號(hào)為AF18081和AF18082)。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，抗血管生成劑為纖溶酶原片段(纖溶酶原的編碼序列可參見(jiàn)GenBank登錄號(hào)NM_000301和A33096)。血管生成抑素肽天然地包括纖溶酶原的四個(gè)kringle域(kringle 1到kringle4)。已經(jīng)證明重組kringle 1、2和3具有天然肽的抗血管生成性質(zhì)，而kringle4沒(méi)有這種活性(Cao等，1996，J.Biol.Chem.27129461-29467)。因此，細(xì)胞生長(zhǎng)抑素肽包括至少一個(gè)，優(yōu)選多于一個(gè)選自kringle 1、kringle 2和kringle 3的kringle域。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，抗血管生成肽為人血管生成抑素分子的40kDa同種型、人血管生成抑素分子的42kDa同種型、人血管生成抑素分子的45kDa同種型或其組合。在另一個(gè)實(shí)施方案中，抗血管生成劑為纖溶酶原的kringle 5域，它是比血管生成抑素(包含kringle 1-4域的血管生成抑素)更為有效的血管生成抑制劑。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，抗血管生成劑為抗凝血酶III?？鼓窱II(以下稱(chēng)抗凝血酶)包含將蛋白質(zhì)束縛到血管壁的肝素結(jié)合域和與凝血酶相互作用的活性部位環(huán)。當(dāng)抗凝血酶被束縛到肝素上時(shí)，該蛋白質(zhì)引出構(gòu)象變化使得活性環(huán)與凝血酶相互作用，導(dǎo)致所述環(huán)被凝血酶蛋白水解解離。蛋白水解解離事件導(dǎo)致抗凝血酶構(gòu)象的另一個(gè)變化，即(i)改變了凝血酶和抗凝血酶相同作用界面，并(ii)從肝素中釋放出絡(luò)合物(Carrell，1999，Science 2851861-1862，以及其中的參考文獻(xiàn))。O′Reilly等(1999，Science 2851926-1928)已經(jīng)發(fā)現(xiàn)解離的抗凝血酶具有強(qiáng)抗血管生成活性。因此，在一個(gè)實(shí)施方案中，抗血管生成劑是抗凝血酶的抗血管生成形式。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，抗血管生成劑為纖連蛋白的40kDa和/或29kDa蛋白水解片段。
在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，抗血管生成劑為尿激酶纖溶酶原活化劑(uPA)受體拮抗劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，拮抗劑為uPA的顯性負(fù)性突變(參見(jiàn)例如(Crowley等，1993，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 905021-5025)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，拮抗劑為肽拮抗劑或其融合蛋白(Goodson等，1994，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 917129-7133)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，拮抗劑為顯性負(fù)性可溶性u(píng)PA受體(Min等，1996，Cancer Res.562428-2433)。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，抗血管生成劑為包含約120個(gè)氨基酸的催乳素的16kDa N-端片段或其生物活性片段(催乳素的編碼序列可見(jiàn)于GenBank登錄號(hào)NM_000948)。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，抗血管生成劑為7.8kDa血小板因子-4片段。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，抗血管生成劑為對(duì)應(yīng)于血小板因子-4的抗血管生成的13氨基酸片段的小肽、標(biāo)記為13.40的抗血管生成因子、凝血酶致敏蛋白(thrombospondin)I的抗血管生成的22氨基酸肽片段、SPARC的抗血管生成的20氨基酸肽片段，層連蛋白纖連蛋白、前膠原或EGF的抗血管生成小肽，或整聯(lián)蛋白αvβ3或VEGF受體的小肽拮抗劑。在另一個(gè)實(shí)施方案中，小肽包含RGD或NGR基序。在某些實(shí)施方案中，抗血管生成劑為T(mén)NF-α拮抗劑。在其它實(shí)施方案中，抗血管生成劑不為T(mén)NF-α拮抗劑。
根據(jù)本發(fā)明的方法，可以將編碼具有抗血管生成活性的蛋白質(zhì)、多肽或肽的核酸分子，或者具有抗血管生成活性的蛋白質(zhì)、多肽或肽給予患有病癥(例如特征為或伴隨有異常血管生成的病癥、增生性病癥、炎性病癥或通過(guò)抑制PDE4或者通過(guò)減少或抑制微管蛋白聚合或穩(wěn)定性來(lái)預(yù)防、控制、治療或改善的病癥)的個(gè)體。此外，根據(jù)本發(fā)明的方法，可以將編碼具有抗血管生成活性的蛋白質(zhì)、多肽或肽的衍生物、類(lèi)似物、片段或變異體的核酸分子，或者具有抗血管生成活性的蛋白質(zhì)、多肽或肽的衍生物、類(lèi)似物、片段或變異體給予患有病癥(例如特征為或伴隨有異常血管生成的病癥、增生性病癥、炎性病癥或通過(guò)抑制PDE4或者通過(guò)減少或抑制微管蛋白聚合或穩(wěn)定性來(lái)預(yù)防、控制、治療或改善的病癥)的個(gè)體。優(yōu)選地，這類(lèi)衍生物、類(lèi)似物、變異體和片段保留全長(zhǎng)野生型蛋白質(zhì)、多肽或肽的抗血管生成活性。
可用作抗血管生成劑的蛋白質(zhì)、多肽或肽可用本領(lǐng)域熟知或此處所述的任何技術(shù)制備。具有抗血管生成活性的蛋白質(zhì)、多肽或肽可通過(guò)本領(lǐng)域熟知或此處所述的技術(shù)進(jìn)行工程化，以提高這類(lèi)蛋白質(zhì)、多肽或肽的體內(nèi)半衰期。優(yōu)選將市售抗血管生成劑用于本發(fā)明的組合物和方法。制劑的抗血管生成活性可通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知或此處所述的任何技術(shù)在體外和/或體內(nèi)測(cè)定。
抗血管生成劑及其劑量、給藥途徑和推薦用法為本領(lǐng)域所已知，且已經(jīng)見(jiàn)述于例如Physician’s Desk Reference(第57版，2003年)這樣的文獻(xiàn)中。
4.2.3TNF-α拮抗劑本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的任何TNF-α拮抗劑可用于本發(fā)明的組合物和方法。TNF-α拮抗劑的非限制性實(shí)例包括阻斷、減緩、抑制或中和TNF-α的功能、活性和/或表達(dá)的蛋白質(zhì)、多肽、肽、融合蛋白、抗體(例如人抗體、人源化抗體、嵌合抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、Fv片段、ScFv片段、Fab片段、F(ab)2片段及其抗原結(jié)合片段)例如免疫特異性結(jié)合TNF-α的抗體、核酸分子(例如反義分子或三螺旋)、有機(jī)分子、無(wú)機(jī)分子和小分子。在各個(gè)實(shí)施方案中，TNF-α拮抗劑相比對(duì)照(例如磷酸鹽緩沖鹽水(PBS))而言將TNF-α的功能、活性和/或表達(dá)降低至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％，或至少99％。
免疫特異性結(jié)合TNF-α的抗體的實(shí)例包括但不限于infliximab(REMICADE；Centacor)、D2E7(Abbott Laboratories/KnollPharmaceutical Co.，Mt.Olive，N.J.)、CDP571(也稱(chēng)作HUMICADETM)和CDP-870(均來(lái)自Celltech/Pharmacia，Slough，U.K.)和TN3-19.12(Williams等，1994，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 912762-2766；Thorbecke等，1992，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 897375-7379)。本發(fā)明還包括免疫特異性結(jié)合TNF-α的抗體在本發(fā)明的組合物和方法中的用途，所述抗體在以下美國(guó)專(zhuān)利中披露美國(guó)專(zhuān)利第5,136,021、5,147,638、5,223,395、5,231,024、5,334,380、5,360,716、5,426,181、5,436,154、5,610,279、5,644,034、5,656,272、5,658,746、5,698,195、5,736,138、5,741,488、5,808,029、5,919,452、5,958,412、5,959,087、5,968,741、5,994,510、6,036,978、6,114,517和6,171,787號(hào)。各文獻(xiàn)通過(guò)引用而納入本文中。可溶性TNF-α受體的實(shí)例包括但不限于sTNF-R1(Amgen)、etanercept(ENBRELTM；Immunex)及其大鼠同系物RENBRELTM、來(lái)源于TNFr I、TNFr II(Kohno等，1990，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 878331-8335)和TNF-αInh(Seckinger等，1990，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 875188-5192)的TNF-α的可溶性抑制劑。
在一個(gè)實(shí)施方案中，用于本發(fā)明的組合物和方法中的TNF-α拮抗劑為可溶性TNF-α受體。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，用于本發(fā)明的組合物和方法中的TNF-α拮抗劑為etanercept(ENBRELTM；Immunex)或其片段、衍生物或類(lèi)似物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，用于本發(fā)明的組合物和方法中的TNF-α拮抗劑為免疫特異性結(jié)合TNF-α的抗體。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，用于本發(fā)明的組合物和方法中的TNF-α拮抗劑為infliximab(REMICADE；Centacor)，其衍生物、類(lèi)似物或抗原結(jié)合片段。
本發(fā)明所包括的其它TNF-α拮抗劑包括但不限于IL-10(已知其通過(guò)干擾素γ-激活巨噬細(xì)胞來(lái)阻斷TNF-α的產(chǎn)生(Oswald等1992，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 898676-8680)、TNFR-IgG(Ashkenazi等，1991，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 8810535-10539)、小鼠制品TBP-1(Serono/Yeda)、疫苗CytoTAb(Protherics)、反義分子104838(ISIS)、肽RDP-58(SangStat)、沙利度胺(Celgene)、CDC-801(Celgene)、DPC-333(Dupont)、VX-745(Vertex)、AGIX-4207(AtheroGenics)、ITF-2357(Italfarmaco)、NPI-13021-31(Nereus)、SCIO-469(Scios)、TACE targeter(Immunix/AHP)、CLX-120500(Calyx)、Thiazolopyrim(Dynavax)、金諾芬(Ridaura)(SmithKline Beecham Pharmaceuticals)、奎納克林(米帕林二氯水合物)、tenidap(Enablex)、黑色素(Large Scale Biological)和抗-p38MAPK制劑(Uriach)。
TNF-α拮抗劑及其劑量、給藥途徑和推薦用法為本領(lǐng)域所已知，且已經(jīng)見(jiàn)述于例如Physician’s Desk Reference(第57版，2003年)這類(lèi)的文獻(xiàn)中。
4.2.4抗炎劑抗炎劑在增生性病癥或炎性病癥的治療中取得成功，目前成為這類(lèi)病癥以及其它病癥的常見(jiàn)和標(biāo)準(zhǔn)的治療。本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的任何抗炎治療(例如抗炎劑)可用于本發(fā)明的組合物和方法中。抗炎劑的非限制性實(shí)例包括各種非甾體抗炎藥(NSAID)、甾體抗炎藥、β-激動(dòng)劑、抗膽堿(anticholingeric)制劑、抗組胺藥(例如乙醇胺、乙二胺、哌嗪和吩噻嗪)和甲基黃嘌呤。NSAID的實(shí)例包括但不限于阿司匹林、布洛芬、水楊酸鹽、acetominophen、celecoxib(CELEBREXTM)、雙氯芬酸(VOLTARENTM)、依托度酸(LODINETM)、非諾洛芬(NALFONTM)、消炎痛(INDOCINTM)、酮咯酸(ketoralac)(TORADOLTM)、惡丙嗪(DAYPROTM)、萘丁美酮(nabumentone)(RELAFENTM)、舒林酸(CLINORILTM)、托美丁(tolmentin)(TOLECTINTM)、rofecoxib(VIOXXTM)、萘普生(ALEVETM，NAPROSYNTM)、酮洛芬(ACTRONTM)和萘丁美酮(RELAFENTM)。這類(lèi)NSAIDs通過(guò)抑制環(huán)氧合酶酶(例如COX-1和/或COX-2)來(lái)起作用。甾體抗炎藥的實(shí)例包括但不限于糖皮質(zhì)激素、地塞米松(DECADRONTM)、可的松、氫化可的松、潑尼松(DELTASONETM)、潑尼松龍、氟羥潑尼松龍、水楊酰偶氮磺胺吡啶(azulfidine)和類(lèi)二十烷酸(例如前列腺素、血栓烷和白三烯)。
抗炎劑及其劑量、給藥途徑和推薦用法為本領(lǐng)域所已知，且已經(jīng)見(jiàn)述于例如Physician’s Desk Reference(第57版，2003年)這類(lèi)的文獻(xiàn)中。
4.2.5抗癌劑任何已知可用、已經(jīng)使用或當(dāng)前正用于預(yù)防、治療、控制或改善伴隨增生性病癥(例如癌癥)的一種或多種癥狀的治療(例如預(yù)防性制劑或治療性制劑)可用于本發(fā)明的組合物和方法。預(yù)防性制劑或治療性制劑包括但不限于肽、多肽、融合蛋白、核酸分子、小分子、模擬制劑、合成藥物、無(wú)機(jī)分子和有機(jī)分子。癌癥治療的非限制性實(shí)例包括化學(xué)治療、放射治療、激素治療和/或生物治療/免疫治療。
在某些實(shí)施方案中，抗癌劑為免疫調(diào)節(jié)劑，例如化學(xué)治療性制劑。在其它實(shí)施方案中，抗癌劑不是免疫調(diào)節(jié)劑。在具體的實(shí)施方案中，抗癌劑為抗血管生成劑。在其它實(shí)施方案中，抗癌劑不是抗血管生成劑。
抗癌劑的實(shí)例包括但不限于阿西維辛、阿柔比星、鹽酸阿考達(dá)唑、阿克羅寧、阿多來(lái)新、阿地白介素、六甲蜜胺、安波霉素、醋酸阿美蒽醌、氨魯米特、安吖啶、anastrozole、安曲霉素、天門(mén)冬酰胺酶、曲林菌素、阿扎胞苷、阿扎替派、含氮霉素、巴馬司他、苯佐替派、比卡魯胺、鹽酸比生群、bisnafide dimesylate、二膦酸鹽/酯(例如帕米膦酸鹽/酯(Aredria)、sodium clondronate(Bonefos)、zoledronic acid(Zometa)、阿侖膦酸鹽/酯(Fosamax)、依替膦酸鹽/酯、ibandornate、cimadronate、利塞膦酸鹽/酯和替魯膦酸鹽/酯)、比折來(lái)新、硫酸博萊霉素、布喹那鈉、溴匹立明、白消安、放線菌素C、卡魯睪酮、卡醋胺、卡貝替姆、卡鉑、卡氮芥、鹽酸卡柔比星、卡折來(lái)新、西地芬戈、苯丁酸氮芥、西羅霉素、順氯氨鉑、克拉屈濱、crisnatol mesylate、環(huán)磷酰胺、阿糖胞苷、達(dá)卡巴嗪、放線菌素D、鹽酸柔紅霉素、地西他濱、右?jiàn)W馬鉑、地扎呱寧、甲磺酸地扎呱寧、地吖醌、docetaxel、阿霉素、鹽酸阿霉素、屈洛昔芬、檸檬酸屈洛昔芬、丙酸屈他雄酮、重氮霉素、依達(dá)曲沙、鹽酸依氟鳥(niǎo)氨酸(eflornithine)、依沙蘆星、恩洛鉑、恩普氨酯、依匹哌啶、鹽酸表柔比星、厄布洛唑、鹽酸依索比星、雌二醇氮芥、雌二醇氮芥磷酸鈉、依他硝唑、依托波苷、磷酸依托波苷、etoprine、鹽酸法倔唑、法扎拉濱、芬維A胺、氟尿苷、磷酸氟達(dá)拉濱、氟尿嘧啶、氟西他濱、磷喹酮、福司曲星鈉、吉西他濱、鹽酸吉西他濱、羥基脲、鹽酸依達(dá)比星、異環(huán)磷酰胺、伊莫福新、白介素-2(包括重組白介素2或rIL2)、干擾素α-2a、干擾素α-2b、干擾素α-nl、干擾素α-n3、干擾素β-Ia、干擾素-β-Ib、異丙鉑、鹽酸伊立替康、醋酸蘭瑞肽、來(lái)曲唑、醋酸亮丙瑞林、鹽酸利阿唑、洛美曲索鈉、羅氮芥、鹽酸洛索蒽醌、馬索羅酚、美坦素、鹽酸氮芥、抗-CD2抗體、醋酸甲地孕酮、醋酸美侖孕酮、美法侖、美諾立爾、巰基嘌呤、甲氨蝶呤、甲氨蝶呤鈉、metopline、美妥替哌、米丁度胺、mitocarcin、mitocromin、絲林霉素、米托馬星、絲裂霉素、米托司培、米托坦、鹽酸米托蒽醌、麥考酚酸、諾考達(dá)唑、諾加霉素、奧馬鉑、奧昔舒侖、帕利他西、培門(mén)冬酶、佩里霉素、溴新斯的明、硫酸培洛霉素、過(guò)磷酰胺、哌泊溴烷、哌泊舒凡、鹽酸吡羅蒽醌、普卡霉素、普洛美坦、卟吩姆鈉、泊非霉素、松龍苯芥、鹽酸丙卡巴肼、嘌呤霉素、鹽酸嘌呤霉素、吡唑呋喃菌素、利波腺苷、羅谷亞胺、沙芬戈、鹽酸沙芬戈、司莫司汀、辛曲秦、sparfosate sodium、司帕霉素、鹽酸螺旋鍺、螺莫司汀、螺鉑、鏈黑霉素、鏈佐星、磺氯苯脲、他利霉素、tecogalan sodium、替加氟、鹽酸替洛蒽醌、替莫泊芬、替尼泊苷、替羅昔隆、睪內(nèi)酯、硫咪嘌呤、硫鳥(niǎo)嘌呤、噻替派、噻唑呋林、替拉扎明、托瑞米芬檸檬酸鹽、醋酸曲托龍、磷酸曲西立濱、三甲曲沙、醛酸三甲曲沙葡萄糖、曲普瑞林、鹽酸妥布氯唑、尿嘧啶氮芥、烏瑞替派、伐普肽、verteporfin、硫酸長(zhǎng)春花堿、硫酸長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春地辛、硫酸長(zhǎng)春地辛、硫酸長(zhǎng)春匹定、硫酸長(zhǎng)春甘酯、硫酸長(zhǎng)春羅辛、酒石酸長(zhǎng)春瑞濱、硫酸長(zhǎng)春羅定、硫酸長(zhǎng)春利定、伏氯唑、折尼鉑、凈司他丁和鹽酸佐柔比星。
其它抗癌藥包括但不限于20-表-1，25-二羥維生素D3、5-乙炔基尿嘧啶、abiraterone、阿柔比星、acylfulvene、腺環(huán)戊醇(adecypenol)、阿多來(lái)新、阿地白介素、ALL-TK拮抗劑、六甲蜜胺、氨莫司汀、amidox、氨磷汀、氨基果糖酸、氨柔比星、安吖啶、阿那格雷、anastrozole、穿心蓮內(nèi)酯、血管生成抑制劑、拮抗劑D、拮抗劑G、antarelix、抗背部化形態(tài)發(fā)生蛋白質(zhì)-1、抗雄激素(前列腺癌)、抗雌激素、抗癌酮(antineoplaston)、反義寡核苷酸、甘氨酸阿非迪霉素、調(diào)亡基因調(diào)節(jié)劑、調(diào)亡調(diào)節(jié)劑、脫嘌呤核酸、ara-CDP-DL-PTBA、精氨酸脫氨基酶、asulacrine、阿他美坦、阿莫司汀、axinastatin 1、axinastatin 2、axinastatin 3、阿扎司瓊、azatoxin、重氮酪氨酸、漿果赤霉素III衍生物、balanol、巴馬司他、BCR/ABL拮抗劑、苯并二氫卟酚、苯甲酰斯他菌素、β-內(nèi)酰胺衍生物、beta-alethine、betaclamycin B、樺木酸、bFGF抑制劑、比卡魯胺、比生群、雙吖丙啶基精胺、bisnafide、bistratene A、比折來(lái)新、breflate、溴匹立明、布度肽、丁硫氨酸亞砜胺(buthionine sulfoximine)、卡泊三醇、卡弗他丁C、喜樹(shù)堿衍生物、canarypox IL-2、capecitabine、甲酰胺-氨基-三唑、羧基酰氨基三唑、CaRest M3、CARN 700、軟骨來(lái)源的抑制劑、卡折來(lái)新、酪蛋白激酶抑制劑(ICOS)、粟精、殺菌肽B、西曲瑞克、chlorlns、氯代喹喔啉磺酰胺、西卡前列素、順卟啉、克拉屈濱、氯米芬類(lèi)似物、克霉唑、collismycinA、collismycin B、combretastatin A4、combretastatin類(lèi)似物、conagenin、crambescidin 816、crisnatol、cryptophycin 8、cryptophycin A衍生物、curacinA、環(huán)戊蒽醌、cycloplatam、cypemycin、cytarabine ocfosfate、溶細(xì)胞因子、cytostatin、dacliximab、地西他濱、去氫膜海鞘素B、地洛瑞林、地塞米松、dexifosfamide、右雷佐生、右維拉帕米、地吖醌、膜海鞘素B、didox、二乙基去甲精胺、二氫-5-氮雜胞苷、9-二氫紫杉醇、dioxamycin、二苯基螺莫司汀、多西他賽、二十二醇、多拉司瓊、去氧氟尿苷、屈洛昔芬、屈大麻酚、duocarmycin SA、依布硒、依考莫司汀、依地福新、edrecolomab、eflornithine、欖香烯、乙嘧替氟、表柔比星、epothilone A、epothilone B、依立雄胺、雌莫司汀類(lèi)似物、雌激素激動(dòng)劑、雌激素拮抗劑、依他硝唑、磷酸依托泊苷、依西美坦、法倔唑、法扎拉濱、芬維A胺、非格司亭、非那雄胺、flavopiridol、氟卓斯汀、fluasterone、氟達(dá)拉濱、鹽酸fluorodaunorunicin、福酚美克、福美坦、福司曲星、福莫司汀、gadolinium texaphyrin、硝酸鎵、加洛他濱、加尼瑞克、明膠酶抑制劑、吉西他濱、谷胱甘肽抑制劑、HMG CoA還原酶抑制劑(例如阿托伐他汀、cerivastatin、氟伐他汀、lescol、lupitor、洛伐他汀、rosuvastatin和斯伐他汀)、hepsulfam、heregulin、六亞甲基雙乙酰氨、金絲桃素、ibandronic acid、依達(dá)比星、艾多昔芬、idramantone、伊莫福新、ilomastat、imidazoacridones、咪喹莫特、免疫刺激劑肽、胰島素類(lèi)生長(zhǎng)因子-1受體抑制劑、干擾素激動(dòng)劑、干擾素、白介素、碘芐胍、碘阿霉素、ipomeanol，4-、iroplact、伊索拉定、isobengazole、isohomohalicondrin B、伊他司瓊、jasplakinolide、kahalalide F、lamellarin-N triacetate、蘭瑞肽、leinamycin、來(lái)格司亭、硫酸香菇多糖、leptolstatin、來(lái)曲唑、白血病抑制因子、白細(xì)胞α干擾素、亮丙瑞林+雌激素+孕酮、亮丙瑞林、左旋咪唑、LFA-3TIP(Biogen，Cambridge，MA；美國(guó)專(zhuān)利第6,162,432號(hào))、利阿唑、線形聚胺類(lèi)似物、親油二糖肽、親油鉑化合物、lissoclinamide 7、洛鉑、蚯蚓磷脂、洛美曲索、氯尼達(dá)明、洛索蒽醌、洛伐他汀、洛索立賓、lurtotecan、lutetiumtexaphyrin、lysofylline、溶菌肽、美登堿、mannostatin A、marimastat、馬索羅酚、maspin、基質(zhì)溶解因子抑制劑、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑、美諾立爾、merbarone、meterelin、甲硫氨酸酶、甲氧氯普胺、MIF抑制劑、米非司酮、米替福新、米立司亭、錯(cuò)配雙鏈RNA、米托胍腙、二溴衛(wèi)矛醇、絲裂霉素類(lèi)似物、米托萘胺、mitotoxin fibroblast growth factor-saporin、米托蒽醌、莫法羅汀、莫拉司亭、單克隆抗體、人絨膜促性腺激素、氮磷酰基脂A+分枝桿菌夏寶壁骨架、莫哌達(dá)醇、耐多種藥物基因的抑制劑、基于多腫瘤抑制劑的治療、芥子抗癌劑、mycaperoxide B、分支桿菌細(xì)胞壁提取物、myriaporone、N-乙酰地那林、N-取代苯甲酰胺、那法瑞林、nagrestip、納洛酮+噴他佐辛、napavin、naphterpin、那托司亭、萘達(dá)鉑、nemorubicin、奈立膦酸、中性肽鏈內(nèi)切酶、尼魯米特、nisamycin、氧化氮調(diào)節(jié)劑、nitroxide antioxidant、nitrullyn、O6-芐基鳥(niǎo)嘌呤、奧曲肽、okicenone、寡核苷酸、奧那司酮、昂丹司瓊、oracin、口服細(xì)胞因子誘導(dǎo)劑、奧馬鉑、奧沙特隆、奧沙利鉑、oxaunomycin、帕利他西、帕利他西類(lèi)似物、帕利他西衍生物、palauamine、palmitoylrhizoxin、帕米膦酸、panaxytriol、帕諾米芬、parabactin、帕折普汀、培門(mén)冬酶、peldesine、戊聚糖多硫酸鈉、噴司他丁、pentrozole、全氟溴烷、過(guò)磷酰胺、紫蘇醇、phenazinomycin、乙酸苯酯、磷酸酯酶抑制劑、溶鏈菌制劑、鹽酸毛果蕓香堿、吡柔比星、吡曲克辛、placetin A、placetin B、纖溶酶原活化劑抑制劑、鉑絡(luò)合物、鉑化合物、鉑-三胺絡(luò)合物、卟吩姆鈉、泊非霉素、潑尼松、丙基雙吖啶酮、前列腺素J2、蛋白酶體抑制劑、基于蛋白A的免疫調(diào)節(jié)劑、蛋白激酶C抑制劑、蛋白激酶C抑制劑，microalgal、蛋白酪氨酸磷酸酯酶抑制劑、嘌呤核苷磷酸化酶抑制劑、紅紫素、pyrazoloacridine、pyridoxylated hemoglobin polyoxyethylene conjugate、raf拮抗劑、raltitrexed、雷莫司汀、ras法尼基蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑、ras抑制劑、ras-GAP抑制劑、retelliptine demethylated、依替膦酸錸Re 186、rhizoxin、核酶、RII retinamide、羅谷亞胺、rohitukine、羅莫肽、羅喹美克、rubiginoneB1、ruboxyl、沙芬戈、saintopin、SarCNU、sarcophytol A、沙格司亭、Sdi1模擬制劑、司莫司汀、源自衰老的抑制劑1、有義寡核苷酸、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)劑、信號(hào)鏈抗原結(jié)合蛋白、西佐喃、索布佐生、sodium borocaptate、苯乙酸鈉、solverol、促生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白、索納明、sparfosic acid、spicamycin D、螺莫司汀、splenopentin、spongistatin 1、squalamine、干細(xì)胞抑制劑、干細(xì)胞分裂抑制劑、stipiamide、基質(zhì)分解素抑制劑、sulfinosine、超活性的血管活性腸肽拮抗劑、suradista、蘇拉明、斯烷寧、合成糖胺聚糖、他莫司汀、5-氟尿嘧啶、甲酰四氫葉酸、他莫昔芬甲碘化物、?；悄就　⑺_汀、tecogalan sodium、替加氟、tellurapyrylium、端粒酶抑制劑、替莫泊芬、替莫唑胺、替尼泊苷、tetrachlorodecaoxide、tetrazomine、thaliblastine、thiocoraline、血小板生成素、血小板生成素模擬制劑、thymalfasin、胸腺生成素受體激動(dòng)劑、胸腺曲南、甲狀腺刺激激素、tin ethyl etiopurpurin、替拉扎明、二茂基二氯化肽、topsentin、托瑞米芬、全能干細(xì)胞因子、翻譯抑制劑、維甲酸、三乙?；蚝塑?、曲西立濱、三甲曲沙、曲普瑞林、托烷司瓊、妥羅雄脲、酪氨酸激酶抑制劑、酪氨酸磷酸化抑制劑、UBC抑制劑、ubenimex、泌尿生殖靜脈竇來(lái)源的生長(zhǎng)抑制因子、尿激酶受體拮抗劑、伐普肽、variolinB、載體系統(tǒng)(紅細(xì)胞基因治療)、沙利度胺、維拉雷瑣、veramine、verdins、verteporfin、長(zhǎng)春瑞濱、vinxaltine、伏氯唑、zanoterone、折尼鉑、亞芐維和zinostatin stimalamer。
在更為具體的實(shí)施方案中，本發(fā)明還包括聯(lián)合施用本發(fā)明的化合物和一種或多種治療(例如但不限于表2所公開(kāi)的抗癌劑)，優(yōu)選用于治療乳腺癌、卵巢癌、黑色素瘤、前列腺癌、結(jié)腸癌和肺癌。
表2
在具體的實(shí)施方案中，將放射治療(包括使用x射線、γ射線和其它放射源來(lái)破壞癌細(xì)胞)與本發(fā)明的抗體聯(lián)用。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，放射治療通過(guò)外部放射束或遠(yuǎn)程放射治療來(lái)進(jìn)行，其中放射來(lái)自遠(yuǎn)程源。在其它優(yōu)選的實(shí)施方案中，放射治療作為內(nèi)部治療或近程放射治療來(lái)進(jìn)行，其中放射源被置于體內(nèi)接近癌細(xì)胞或腫瘤組織處。
癌癥治療及其劑量、給藥途徑和推薦用法為本領(lǐng)域所已知，且已經(jīng)見(jiàn)述于例如Physician’s Desk Reference(第57版，2003年)這類(lèi)的文獻(xiàn)中。
4.2.6抗生素本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的抗生素可用于本發(fā)明的組合物和方法。抗生素的非限制性實(shí)例包括青霉素、頭孢菌素、亞胺培南、axtreonam、萬(wàn)古霉素、環(huán)絲氨酸、桿菌肽、氯霉素、紅霉素、克林霉素、四環(huán)素、鏈霉素、妥布霉素、慶大霉素、阿米卡星、卡那霉素、新霉素、壯觀霉素、甲氧芐啶、諾氟沙星、利福平、多粘菌素、兩性霉素B、制霉菌素、ketocanazole、異煙肼、甲硝噠唑和戊雙脒。
抗生素及其劑量、給藥途徑和推薦用法為本領(lǐng)域所已知，且已經(jīng)見(jiàn)述于例如Physician’s Desk Reference(第57版，2003年)這類(lèi)的文獻(xiàn)中。
4.2.7抗病毒制劑本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的任何抗病毒制劑都可用于本發(fā)明的組合物和方法?？共《局苿┑姆窍拗菩詫?shí)例包括抑制或降低病毒與其受體的結(jié)合、病毒進(jìn)入細(xì)胞而內(nèi)化、病毒的復(fù)制或病毒從細(xì)胞中釋放的蛋白質(zhì)、多肽、肽、融合蛋白抗體、核酸分子、有機(jī)分子、無(wú)機(jī)分子和小分子。具體地，抗病毒劑包括但不限于核苷類(lèi)似物(例如齊多夫定、阿昔洛韋、gangcyclovir、阿糖腺苷、碘苷、曲氟尿苷和利巴韋林)、膦甲酸、金剛烷胺、金剛乙胺、沙奎那韋、茚地納韋、ritonavir、α-干擾素和其它干擾素以及AZT。
抗病毒制劑及其劑量、給藥途徑和推薦用法為本領(lǐng)域所已知，且已經(jīng)見(jiàn)述于例如Physician’s Desk Reference(第56版，2002年)這類(lèi)的文獻(xiàn)中。
4.2.8血管靶向制劑本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的任何血管靶向制劑可用于本發(fā)明的組合物和方法(參見(jiàn)，例如Thorpe，P.E.，Clin.Can.Res.10415-427(2004)，此文獻(xiàn)通過(guò)引用而納入本文中)。
血管靶向制劑的非限制性實(shí)例包括小分子血管靶向制劑(例如微管去穩(wěn)定藥物、combretastatin A-4磷酸二鈉、ZD6126、AVE8062、Oxi 4503、TZT 1027和DMXAA)和基于配體的血管靶向制劑，包括但不限于融合蛋白(例如連接植物毒素gelonin的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子)、免疫毒素(例如與篦麻蛋白A共軛的endoglin的單克隆抗體)、連接細(xì)胞因子的抗體和脂質(zhì)體包裹的藥物。
在一個(gè)實(shí)施方案中，基于配體的血管靶向制劑包括任何選擇性結(jié)合腫瘤血管的組分的配體，所述配體連接(例如通過(guò)化學(xué)交聯(lián)劑或肽鍵)能夠阻塞腫瘤血管的制劑。選擇性結(jié)合腫瘤血管組分的配體的實(shí)例包括但不限于對(duì)準(zhǔn)標(biāo)識(shí)物的抗體或肽，與正常組織內(nèi)皮細(xì)胞相比，所述標(biāo)識(shí)物選擇性地在腫瘤組織內(nèi)皮細(xì)胞中上調(diào)。與正常組織內(nèi)皮細(xì)胞相比選擇性地在腫瘤組織內(nèi)皮細(xì)胞上調(diào)的標(biāo)識(shí)物的實(shí)例包括但不限于炎性介質(zhì)(例如白介素(IL)-1)誘導(dǎo)的細(xì)胞粘結(jié)分子和伴隨發(fā)生于腫瘤血管內(nèi)皮的高凝血變化的分子。能夠阻塞腫瘤血管的制劑的實(shí)例包括但不限于凝血誘導(dǎo)蛋白(例如組織因子)、毒素(例如白喉毒素、蓖麻毒、gelonin)、細(xì)胞毒制劑(例如多柔比星、neocarzinostatin)、細(xì)胞因子(例如白介素-2、白介素-12、腫瘤壞死因子-α)、調(diào)亡誘導(dǎo)劑(例如RAF-1基因、線粒體-膜破裂肽)、放射性同位素(例如碘-131、錒-225、鉍-213)和脂質(zhì)體包裹的效應(yīng)物(例如胞嘧啶阿拉伯糖苷衍生物)。
血管靶向制劑及其劑量、給藥途徑和推薦用法為本領(lǐng)域所已知，且已經(jīng)見(jiàn)述于例如Physician’s Desk Reference(第57版，2003年)這類(lèi)的文獻(xiàn)中。
4.3本發(fā)明的化合物的用途本發(fā)明涉及將一種或多種本發(fā)明的化合物或包含所述化合物的組合物給予個(gè)體(優(yōu)選人類(lèi)個(gè)體)來(lái)預(yù)防、治療、控制或改善疾病或病癥或其一種或多種癥狀的治療方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了預(yù)防、治療、控制或改善疾病或病癥或其一種或多種癥狀的方法，所述方法包括將預(yù)防或治療有效量的一種或多種本發(fā)明的化合物給予需要的個(gè)體。
本發(fā)明還提供了預(yù)防、治療、控制或改善疾病或病癥或其一種或多種癥狀的方法，所述方法包括將一種或多種本發(fā)明的化合物和一種或多種當(dāng)前正用、已用或已知可用于預(yù)防、治療或改善伴隨所述疾病或病癥的一種或多種癥狀的治療(例如一種或多種預(yù)防性制劑或治療性制劑)給予需要它們的個(gè)體。本發(fā)明的聯(lián)合治療的預(yù)防性制劑或治療性制劑可按順序或同時(shí)給藥。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，本發(fā)明的聯(lián)合治療包括一種或多種化合物和至少一種與所述化合物具有相同作用機(jī)理的其它治療(例如另一種預(yù)防性制劑或治療性制劑)。在另一個(gè)具體的實(shí)施方案中，本發(fā)明的聯(lián)合治療包括一種或多種本發(fā)明的化合物和至少一種與所述化合物具有不同作用機(jī)理的其它治療(例如另一種預(yù)防性制劑或治療性制劑)。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的聯(lián)合治療通過(guò)與各化合物共同作用來(lái)獲得加成的或協(xié)同的效果來(lái)提高一種或多種本發(fā)明的化合物的預(yù)防或治療效果。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的聯(lián)合治療減輕了治療(例如預(yù)防性制劑或治療性制劑)所伴隨的副作用。
聯(lián)合治療的預(yù)防性制劑或治療性制劑可在同一藥物組合物中給予個(gè)體(優(yōu)選人類(lèi)個(gè)體)。在可選擇的實(shí)施方案中，聯(lián)合治療的預(yù)防性制劑或治療性制劑可在不同的藥物組合物中同時(shí)給予個(gè)體。預(yù)防性制劑或治療性制劑可通過(guò)相同或不同的給藥途徑給予個(gè)體。
在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，將包含一種或多種本發(fā)明的化合物的藥物組合物給予個(gè)體(優(yōu)選人)來(lái)預(yù)防、治療、控制或改善伴隨疾病或病癥的一種或多種癥狀。根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明的藥物組合物還可包含當(dāng)前正用、已用或已知可用于預(yù)防、治療或改善伴隨疾病或病癥的一種或多種癥狀的一種或多種預(yù)防性制劑或治療性制劑。
可通過(guò)給予有效量的一種或多種本發(fā)明的化合物來(lái)預(yù)防、治療、控制或改善的疾病或病癥包括但不限于特征為或伴隨有異常血管生成的病癥、中樞神經(jīng)系統(tǒng)病癥、增生性病癥、炎性病癥、自身免疫性病癥，通過(guò)血管抑制(例如通過(guò)血管抑制來(lái)阻斷血管生成)來(lái)預(yù)防、控制、治療或改善的病癥，以及通過(guò)抑制和/或降低PDE4的表達(dá)和/或活性或者通過(guò)抑制或降低微管蛋白的聚合或穩(wěn)定性來(lái)預(yù)防、控制、治療或改善的病癥。特征為或伴隨有血管生成的病癥的實(shí)例包括但不限于增生性病癥(例如癌癥)。通過(guò)抑制或降低PDE4的表達(dá)和/或活性來(lái)預(yù)防、控制、治療或改善的病癥的實(shí)例包括但不限于炎性病癥，例如哮喘、炎癥、慢性或急性肺阻塞疾病、慢性或急性肺部炎性疾病、炎性腸病、克羅恩氏病、白塞氏病、HSP、結(jié)腸炎和再灌注引起的炎癥。通過(guò)抑制或降低微管蛋白的聚合或穩(wěn)定性來(lái)預(yù)防、控制、治療或改善的病癥的實(shí)例包括但不限于增生性病癥(例如癌癥)和非癌性病癥(例如銀屑癬和纖維化)。
在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了預(yù)防、控制、治療或改善以下疾病或病癥的方法，所述疾病或病癥包括通過(guò)血管抑制(例如通過(guò)血管抑制阻斷血管生成)來(lái)預(yù)防、控制、治療或改善的病癥，通過(guò)抑制和/或降低PDE4的表達(dá)和/或活性或者通過(guò)抑制或降低微管蛋白的聚合或穩(wěn)定性來(lái)預(yù)防、控制、治療或改善的病癥，當(dāng)前治療難以治愈的癌癥，或已經(jīng)對(duì)多種藥物產(chǎn)生耐藥性的癌癥，所述方法包括將有效量的一種或多種具有式I的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或水合物給予需要的患者。
在一個(gè)實(shí)施方案中，所述癌癥用秋水仙堿、紫杉烷(taxane)或長(zhǎng)春堿難以治愈。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的3，4-二取代的化合物為優(yōu)選的PDE4抑制劑。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的3，4-二烷氧基取代的化合物為優(yōu)選的PDE4抑制劑。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的3，4-二甲氧基取代的化合物為優(yōu)選的PDE4抑制劑。
4.3.1增生性病癥本發(fā)明的化合物和包含所述化合物的組合物可用于預(yù)防、治療、控制或改善增生性病癥(例如癌癥)或其一種或多種癥狀。不受理論的約束，在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物結(jié)合癌癥或腫瘤細(xì)胞中的α-或β-微管蛋白亞單位并抑制微管蛋白的聚合或穩(wěn)定性，從而破壞癌癥或腫瘤細(xì)胞復(fù)制的能力。在一個(gè)可選擇的實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物結(jié)合血管化腫瘤的內(nèi)皮細(xì)胞的α-或β-微管蛋白亞單位并使這些細(xì)胞的形狀發(fā)生改變。這些內(nèi)皮細(xì)胞形狀的改變使得給腫瘤供應(yīng)血液和氧的血管收縮，從而使得腫瘤萎縮或死亡。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物結(jié)合腫瘤細(xì)胞或癌細(xì)胞的α-或β-微管蛋白亞單位。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物結(jié)合血管化腫瘤的內(nèi)皮細(xì)胞的α-或β-微管蛋白亞單位。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物可用于預(yù)防、控制、治療或改善對(duì)微管蛋白結(jié)合制劑敏感的癌癥。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物可用于預(yù)防、控制、治療或改善對(duì)微管蛋白結(jié)合制劑耐受的癌癥。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了抑制癌細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞增殖的方法，所述方法包括將癌細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞與有效量的本發(fā)明的化合物接觸。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述癌細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞對(duì)傳統(tǒng)的癌癥治療具有耐受。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述癌細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞為對(duì)多種藥物具有耐藥性的癌細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞。
本發(fā)明提供了預(yù)防、治療、控制或改善伴隨有細(xì)胞過(guò)度增生，特別是上皮細(xì)胞過(guò)度增生(例如在哮喘、COPD、肺部纖維化、支氣管高反應(yīng)性、銀屑病、淋巴增生性病癥和脂溢性皮炎中)和內(nèi)皮細(xì)胞過(guò)度增生(例如在再狹窄、過(guò)度增生性血管疾病、白塞氏綜合癥、動(dòng)脈粥樣硬化和黃斑變性中)的非癌性病癥的一種或多種癥狀的方法，所述方法包括將一種或多種本發(fā)明的化合物給予需要的個(gè)體。本發(fā)明還提供了預(yù)防、治療、控制或改善伴隨細(xì)胞過(guò)度增生的非癌性病癥的方法，所述方法包括將一種或多種本發(fā)明的化合物和一種或多種可用于預(yù)防，治療，控制或改善所述病癥的其它治療(例如一種或多種其它預(yù)防性制劑或治療性制劑)給予需要的個(gè)體。
在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了預(yù)防、控制、治療或改善伴隨有細(xì)胞過(guò)度增生(例如白塞氏綜合癥、結(jié)節(jié)病、瘢痕瘤、肺部纖維化、黃斑變性和腎臟纖維化)的非癌性病癥或其一種或多種癥狀的方法，所述方法包括將預(yù)防或治療有效量的一種或多種本發(fā)明的化合物給予需要的個(gè)體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了預(yù)防、控制、治療或改善伴隨有細(xì)胞過(guò)度增生(例如白塞氏綜合癥、結(jié)節(jié)病、瘢痕瘤、肺部纖維化和腎臟纖維化)的非癌性病癥或其一種或多種癥狀的方法，所述方法包括將預(yù)防或治療有效量的一種或多種本發(fā)明的化合物和預(yù)防或治療有效量的一種或多種其它治療(例如一種或多種預(yù)防性制劑或治療性制劑)給予需要的個(gè)體。
本發(fā)明包括預(yù)防、治療、控制或改善個(gè)體的伴隨有細(xì)胞過(guò)度增生的病癥的一種或多種癥狀的方法，所述個(gè)體用這類(lèi)病癥的常規(guī)治療難以治愈，所述方法包括將預(yù)防或治療有效量的一種或多種本發(fā)明的化合物給予個(gè)體。本發(fā)明還提供了預(yù)防、控制、治療或改善個(gè)體的伴隨有細(xì)胞過(guò)度增生的非癌性病癥的方法，所述個(gè)體用這類(lèi)病癥的常規(guī)治療難以治愈的，所述方法包括將一種或多種本發(fā)明的化合物和一種或多種用于預(yù)防，治療，控制或改善所述病癥的其它治療(例如一種或多種其它預(yù)防性制劑或治療性制劑)給予需要的個(gè)體。
本發(fā)明提供了預(yù)防、治療、控制或改善癌癥或其一種或多種癥狀的方法，所述方法包括將一種或多種本發(fā)明的化合物給予需要的個(gè)體。本發(fā)明還提供了預(yù)防、治療、控制或改善癌癥的方法，其中一種或多種本發(fā)明的化合物與一種或多種用于預(yù)防，治療，控制或改善癌癥或繼發(fā)癥狀的其它治療(例如預(yù)防性制劑或治療性制劑)聯(lián)合施用。
在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了預(yù)防、治療、控制或改善癌癥或其一種或多種癥狀的方法，所述方法包括將預(yù)防或治療有效量的一種或多種本發(fā)明的化合物給予需要的個(gè)體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了預(yù)防、治療、控制或改善癌癥或其一種或多種癥狀的方法，所述方法包括將預(yù)防或治療有效量的一種或多種本發(fā)明的化合物和預(yù)防或治療有效量的用于預(yù)防、治療、控制或改善癌癥或繼發(fā)癥狀(例如病毒、細(xì)菌或真菌感染)的一種或多種治療(例如一種或多種預(yù)防性制劑或治療性制劑)給予需要的個(gè)體。
本發(fā)明的化合物特別可用作血管靶向制劑。不受理論的約束，可以認(rèn)為本發(fā)明的化合物為有效的抗腫瘤制劑，因?yàn)樗鼈兡軌蜃枞[瘤血管(例如已存在的血管)使得腫瘤細(xì)胞由于缺血和出血性壞死而死亡。因此，本發(fā)明的化合物可用于破壞或瓦解腫瘤的血管系統(tǒng)。
本發(fā)明的化合物作為對(duì)抗腫瘤內(nèi)部血管的血管靶向制劑特別有效，因此可與有效對(duì)抗外周腫瘤細(xì)胞的抗腫瘤劑(例如抗血管生成劑)聯(lián)合而協(xié)同使用。不受理論的約束，本發(fā)明的化合物由于其靶向腫瘤細(xì)胞血管系統(tǒng)的能力對(duì)遠(yuǎn)離血管的藥物滲透不良的位置的腫瘤細(xì)胞特別有效。這類(lèi)腫瘤細(xì)胞更可能對(duì)放射和藥物治療耐受。因此，本發(fā)明的化合物對(duì)于已對(duì)傳統(tǒng)癌癥治療耐受的腫瘤和腫瘤細(xì)胞特別有效。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了靶向、阻斷或破壞腫瘤血管系統(tǒng)功能的方法，所述方法包括將腫瘤與有效量的本發(fā)明的化合物接觸。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了靶向、阻斷或破壞腫瘤血管內(nèi)皮的方法，所述方法包括將腫瘤與有效量的本發(fā)明的化合物接觸。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了阻塞已存在的腫瘤血管的方法，所述方法包括將腫瘤與有效量的本發(fā)明的化合物接觸。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了殺死腫瘤細(xì)胞的方法，所述方法包括將腫瘤細(xì)胞與有效量的本發(fā)明的化合物接觸。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了在腫瘤細(xì)胞中產(chǎn)生急性血管塌陷的方法，所述方法包括將腫瘤細(xì)胞與有效量的本發(fā)明的化合物接觸。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了通過(guò)血管抑制阻斷血管生成的方法，所述方法包括將細(xì)胞與有效量的本發(fā)明的化合物接觸。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了通過(guò)血管抑制來(lái)抑制腫瘤生長(zhǎng)的方法，所述方法包括將有效量的本發(fā)明的化合物給予需要的個(gè)體。
不受理論的約束，可以認(rèn)為由于本發(fā)明的化合物同時(shí)具有血管靶向活性(特別有效地對(duì)抗中心腫瘤細(xì)胞)和抗血管生成活性(特別有效地對(duì)抗外周腫瘤細(xì)胞)，本發(fā)明的化合物對(duì)于根除大多數(shù)腫瘤特別有效，在一個(gè)實(shí)施方案中完全根除腫瘤。因此，由于作為血管靶向制劑和抗血管生成劑的雙重活性的協(xié)同效果，本發(fā)明的化合物特別有效地對(duì)抗腫瘤。
本發(fā)明的化合物可以體外或以離體方式用于控制、治療或改善某些癌癥(包括但不限于白血病和淋巴瘤)，這種治療包括自體干細(xì)胞移植。這可包括多步驟過(guò)程，其中采集個(gè)體的自體造血干細(xì)胞并清除所有癌細(xì)胞，隨后在伴隨或不伴隨高劑量放射治療下給予高劑量的本發(fā)明的化合物來(lái)根除個(gè)體剩余的骨髓細(xì)胞群，將干細(xì)胞移植物回輸給個(gè)體。隨后在骨髓功能恢復(fù)時(shí)提供支持護(hù)理，個(gè)體康復(fù)。
一種或多種本發(fā)明的化合物可用作第一、第二、第三、第四或第五線癌癥治療。本發(fā)明提供了預(yù)防、治療、控制或改善個(gè)體的癌癥或其一種或多種癥狀的方法，所述個(gè)體用這類(lèi)癌癥的常規(guī)治療是難以治愈的，所述方法包括將預(yù)防或治療有效量的一種或多種本發(fā)明的化合物給予所述個(gè)體。當(dāng)癌細(xì)胞的至少一些重要部分沒(méi)有被殺死或它們的細(xì)胞分裂停止對(duì)治療響應(yīng)，則癌癥可被確定為對(duì)治療是難以治愈的。這種判定可在體內(nèi)或體外通過(guò)任何本領(lǐng)域已知用于評(píng)估癌細(xì)胞治療有效性的方法進(jìn)行，在這里采用本領(lǐng)域接受的“難以治愈的”的含義。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，當(dāng)癌細(xì)胞的數(shù)目沒(méi)有顯著減少或在治療后增多時(shí)，癌癥是難以治愈的。
本發(fā)明提供了預(yù)防、控制、治療或改善個(gè)體的癌癥或其一種或多種癥狀的方法，所述個(gè)體對(duì)這類(lèi)癌癥的現(xiàn)有單制劑治療是難以治愈的，所述方法包括將預(yù)防或治療有效量的一種或多種本發(fā)明的化合物和用于預(yù)防、治療、控制或改善癌癥或繼發(fā)癥狀的預(yù)防或治療有效量的一種或多種治療(例如一種或多種預(yù)防性制劑或治療性制劑)給予所述個(gè)體。本發(fā)明還提供了預(yù)防、治療、控制或改善癌癥或繼發(fā)癥狀的方法，所述方法將一種或多種本發(fā)明的化合物與任何其它治療(例如放射治療、化學(xué)治療或手術(shù))聯(lián)合給予個(gè)體，所述個(gè)體已證明對(duì)其它治療是難治愈的，但不對(duì)這種治療是難治愈的。
在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了預(yù)防、控制、治療或改善癌癥(用秋水仙堿、帕利他西、多西他賽和/或長(zhǎng)春堿和/或其它長(zhǎng)春堿是難治愈的)或其一種或多種癥狀的方法，所述方法包括將預(yù)防或治療有效量的一種或多種本發(fā)明的化合物給予需要的個(gè)體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了預(yù)防、控制、治療或改善癌癥(用秋水仙堿、帕利他西、多西他賽和/或長(zhǎng)春堿難以治愈)或其一種或多種癥狀的方法，所述方法包括將預(yù)防或治療有效量的一種或多種本發(fā)明的化合物和預(yù)防或治療有效量的一種或多種其它治療給予需要的個(gè)體。根據(jù)本發(fā)明，其它治療可為化學(xué)治療性制劑、免疫調(diào)節(jié)劑、抗血管生成劑、放射治療或手術(shù)。
本發(fā)明提供了預(yù)防、治療、控制或改善患有癌癥并由于先前接受的其它癌癥治療而產(chǎn)生免疫抑制的患者的方法。本發(fā)明還提供了預(yù)防、治療、控制或改善癌癥的方法，其中已證明或可證明化學(xué)治療、放射治療、激素治療和/或生物治療/免疫治療的毒性過(guò)大，即對(duì)接受治療的個(gè)體產(chǎn)生無(wú)法接受或無(wú)法忍受的副作用。此外，本發(fā)明提供了通過(guò)向已接受治療且沒(méi)有任何疾病活性的個(gè)體給予一種或多種本發(fā)明的化合物來(lái)預(yù)防癌癥復(fù)發(fā)的方法。
可用本發(fā)明的方法來(lái)預(yù)防、控制、治療或改善的癌癥包括但不限于贅生物、腫瘤(惡性和良性)和轉(zhuǎn)移瘤，或任何特征為失控的細(xì)胞生長(zhǎng)的疾病或病癥。癌癥可為原發(fā)性或轉(zhuǎn)移性癌癥?？筛鶕?jù)本發(fā)明的方法來(lái)預(yù)防、控制、治療或改善的癌癥的具體實(shí)例包括但不限于以下部位的癌癥頭部、頸部、眼部、口腔、咽喉、食管、胸部、骨骼、肺部、結(jié)腸、直腸、胃、前列腺、乳腺、卵巢、腎、肝、胰腺和腦部。其它的癌癥包括但不限于白血病(例如但不限于急性白血病，急性淋巴細(xì)胞白血病，急性髓細(xì)胞白血病例如髓母細(xì)胞白血病、前髓細(xì)胞白血病、骨髓單核細(xì)胞白血病、單核細(xì)胞白血病、紅白血病和骨髓增生異常綜合癥，慢性白血病例如但不限于慢性髓細(xì)胞(粒細(xì)胞)白血病、慢性淋巴細(xì)胞白血病、毛細(xì)胞白血?。粖W斯勒氏?。涣馨土隼绲幌抻诤谓芙鸩?、非何杰金?。欢喟l(fā)性骨髓瘤例如但不限于無(wú)癥狀多發(fā)性骨髓瘤(smoldering multiple myeloma)、無(wú)分泌功能骨髓瘤、骨硬化骨髓瘤、漿細(xì)胞性白血病、孤立性漿細(xì)胞瘤和髓外漿細(xì)胞瘤；瓦氏(Waldenstrom′s)巨球蛋白血癥；未定性的單克隆丙種球蛋白病；良性單株丙種球蛋白病；重鏈?。还趋篮徒Y(jié)締組織肉瘤，例如但不限于骨骼肉瘤、骨肉瘤、軟骨肉瘤、尤因氏肉瘤、惡性巨細(xì)胞瘤、骨骼纖維肉瘤、脊索瘤、骨膜肉瘤、軟組織肉瘤、血管肉瘤(血管肉瘤)、纖維肉瘤、卡波濟(jì)氏肉瘤、平滑肌肉瘤、脂肪肉瘤、淋巴管肉瘤、神經(jīng)鞘瘤、橫紋肌肉瘤、滑膜肉瘤；腦部腫瘤例如但不限于神經(jīng)膠質(zhì)瘤、星形細(xì)胞瘤、腦干神經(jīng)膠質(zhì)瘤、室管膜瘤、少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤、非神經(jīng)膠質(zhì)瘤、聽(tīng)神經(jīng)瘤、顱咽管瘤、成神經(jīng)管細(xì)胞瘤、腦膜瘤、松果體瘤、成松果體細(xì)胞瘤、原發(fā)性腦淋巴瘤；乳腺癌包括但不限于腺癌、小葉(小細(xì)胞)癌、管內(nèi)癌、髓樣乳腺癌、粘蛋白乳腺癌、管狀乳腺癌、乳頭狀乳腺癌、佩吉特氏病和炎性乳腺癌；腎上腺癌例如但不限于嗜鉻細(xì)胞瘤和腎上腺皮質(zhì)癌；甲狀腺癌例如但不限于乳頭狀或?yàn)V泡狀甲狀腺癌、髓樣甲狀腺癌和退行性甲狀腺癌；胰腺癌例如但不限于胰島瘤、促胃液素瘤、胰高血糖素瘤、血管活性腸肽瘤、生長(zhǎng)激素抑制素分泌瘤和類(lèi)癌瘤或胰島細(xì)胞瘤；垂體癌例如但不限于庫(kù)欣氏綜合癥、催乳素分泌瘤、肢端肥大癥和尿崩病(diabetes insipius)；眼癌例如但不限于眼黑素瘤例如虹膜黑素瘤、脈絡(luò)膜黑素瘤、睫狀體黑素瘤和視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤；睪丸鞘膜癌例如鱗狀細(xì)胞癌、腺癌和黑素瘤；陰道癌例如鱗狀細(xì)胞癌、黑素瘤、腺癌、基底細(xì)胞癌、肉瘤和佩吉特氏?。蛔訉m頸癌例如但不限于鱗狀細(xì)胞癌和腺癌；子宮癌例如但不限于子宮內(nèi)膜癌和子宮肉瘤；卵巢癌例如但不限于卵巢上皮癌、交界瘤、生殖細(xì)胞瘤和間質(zhì)瘤；食管癌例如但不限于鱗狀癌、腺癌、腺樣囊性癌、粘液表皮樣癌、腺鱗狀上皮癌、肉瘤、黑素瘤、漿細(xì)胞瘤、疣狀癌和燕麥(小細(xì)胞)細(xì)胞癌；胃癌例如但不限于腺癌、蕈傘樣(息肉狀)、潰瘍、表面擴(kuò)散、彌漫性擴(kuò)散、惡性淋巴瘤、脂肉瘤、纖維肉瘤和癌肉瘤；結(jié)腸癌；直腸癌；肝癌例如但不限于肝細(xì)胞癌和肝胚細(xì)胞瘤、膽囊癌例如腺癌；膽管癌例如但不限于乳頭狀、結(jié)節(jié)狀和彌漫性癌；肺癌例如非小細(xì)胞肺癌、鱗狀細(xì)胞癌(表皮樣癌)、腺癌、大細(xì)胞癌和小細(xì)胞肺癌；睪丸癌例如但不限于生殖腫瘤，精原細(xì)胞瘤，退行性、經(jīng)典(典型)的精細(xì)胞非精原細(xì)胞瘤，胚胎癌，畸胎瘤，絨毛膜癌(卵黃囊腫瘤)；前列腺癌例如但不限于腺癌，平滑肌肉瘤和橫紋肌肉瘤；陰莖癌；口腔癌例如但不限于鱗狀細(xì)胞癌；基底癌；唾液腺癌例如但不限于腺癌、粘液表皮樣癌和腺囊癌；咽癌例如但不限于鱗狀細(xì)胞癌和疣；皮膚癌例如但不限于基底細(xì)胞癌、鱗狀細(xì)胞癌和黑素瘤、表淺擴(kuò)散的黑素瘤、結(jié)節(jié)性黑素瘤、著色斑惡性黑素瘤、肢端著色斑性黑素瘤；腎癌例如但不限于腎細(xì)胞癌、腺癌、腎上腺樣瘤、纖維肉瘤、移行細(xì)胞癌(腎盂和/或uterer)；腎母細(xì)胞瘤；膀胱癌例如但不限于移行細(xì)胞癌、鱗狀細(xì)胞癌、腺癌、癌肉瘤。此外，癌癥包括粘液肉瘤、骨肉瘤、內(nèi)皮肉瘤、淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞瘤、間皮瘤、滑膜瘤、成血管細(xì)胞瘤、上皮癌、囊腺癌、支氣管癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭狀癌和乳頭狀腺癌(有關(guān)這類(lèi)病癥的評(píng)論參見(jiàn)Fishman等，1985，Medicine，第二版，J.B.Lippincott Co.，Philadelphia andMurphy等，1997，Informed DecisionsThe Complete Book of CancerDiagnosis，Treatment，and Recovery，Viking Penguin，Penguin Books U.S.A.，Inc.，United States of America)。還可以認(rèn)為由調(diào)亡失常引起的癌癥也可用本發(fā)明的方法和組合物來(lái)治療。這類(lèi)癌癥可包括但不限于濾泡淋巴瘤、p53突變癌，乳腺、前列腺和卵巢的激素依賴(lài)性腫瘤，以及癌前病變例如家族性腺瘤息肉病和骨髓發(fā)育異常綜合征。
在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的方法來(lái)預(yù)防、控制、治療或改善的癌癥為前列腺癌、乳腺癌、骨癌、黑素瘤、肺癌和卵巢癌。在另一個(gè)實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的方法來(lái)預(yù)防、控制、治療或改善的癌癥為轉(zhuǎn)移性腫瘤，包括但不限于已經(jīng)或可能轉(zhuǎn)移到骨胳的腫瘤(非限制性實(shí)例為已經(jīng)轉(zhuǎn)移或有可能轉(zhuǎn)移到骨胳的前列腺癌、乳腺癌和肺癌)、已經(jīng)或可能轉(zhuǎn)移到肺的腫瘤、已經(jīng)或可能轉(zhuǎn)移到腦的腫瘤、已經(jīng)或可能轉(zhuǎn)移到個(gè)體的其它器官或組織的腫瘤。在另一個(gè)實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的方法來(lái)預(yù)防、控制、治療或改善的癌癥不伴隨TNF-α的表達(dá)和/或活性。
4.3.2炎性病癥一種或多種本發(fā)明的化合物和包含所述化合物的組合物可用于預(yù)防、治療、控制或改善炎性病癥或其一種或多種癥狀。本發(fā)明的化合物或包含所述化合物的組合物還可與一種或多種用于預(yù)防、治療、控制或改善炎性病癥或其一種或多種癥狀的其它治療(例如一種或多種其它預(yù)防性制劑或治療性制劑)聯(lián)合施用。
在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了預(yù)防、治療、控制或改善炎性病癥或其一種或多種癥狀的方法，所述方法包括將預(yù)防或治療有效量的一種或多種本發(fā)明的化合物給予需要的個(gè)體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了預(yù)防、治療、控制或改善炎性病癥或其一種或多種癥狀的方法，所述方法包括將預(yù)防或治療有效量的一種或多種本發(fā)明的化合物和預(yù)防或治療有效量的一種或多種其它治療(例如一種或多種其它預(yù)防性制劑或治療性制劑)給予需要的個(gè)體。
本發(fā)明提供了預(yù)防、控制、治療或改善個(gè)體的炎性病癥或其一種或多種癥狀的方法，所述個(gè)體用這類(lèi)炎性病癥的常規(guī)治療(例如甲胺蝶呤和TNF-α拮抗劑(例如REMICADETM或ENBRELTM))是難以治愈的，所述方法包括將預(yù)防或治療有效量的一種或多種本發(fā)明的化合物給予所述個(gè)體。本發(fā)明還提供了預(yù)防、治療、控制或改善個(gè)體的炎性病癥或其一種或多種癥狀的方法，所述個(gè)體用這類(lèi)炎性病癥的現(xiàn)有單一制劑治療是難以治愈的，所述方法包括將預(yù)防或治療有效量的一種或多種本發(fā)明的化合物和預(yù)防或治療有效量的一種或多種其它治療(例如一種或多種其它預(yù)防性制劑或治療性制劑)給予所述個(gè)體。本發(fā)明還提供了通過(guò)將一種或多種本發(fā)明的化合物與任何其它治療聯(lián)合給予患者來(lái)預(yù)防、治療、控制或改善炎性病癥的方法，所述患者已證明用其它治療是難以治愈的，但用這種治療不是難以治愈的。本發(fā)明還提供了預(yù)防、治療、控制或改善炎性病癥的可選擇性方法，其中另一種治療已經(jīng)證明或可能證明毒性太大，即對(duì)接受治療的個(gè)體產(chǎn)生無(wú)法接受或無(wú)法忍受的副作用。此外，本發(fā)明通過(guò)給予已接受治療且沒(méi)有任何疾病活性的患者一種或多種本發(fā)明的化合物而提供了預(yù)防炎性病癥復(fù)發(fā)的方法。
可用本發(fā)明的方法預(yù)防、控制、治療或改善的炎性病癥的實(shí)例包括但不限于哮喘、變應(yīng)性紊亂、特征為1型介導(dǎo)的炎癥的炎性病癥、特征為2型介導(dǎo)的炎癥的炎性病癥、纖維化疾病(例如肺纖維化)、銀屑病、多發(fā)性硬化、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、慢性阻塞性肺病(COPD)、腦炎(encephilitis)、炎性腸病(例如克羅恩氏病和潰瘍性結(jié)腸炎)、缺血性再灌注損傷、痛風(fēng)、白塞氏綜合癥、膿毒性休克、未分化脊椎關(guān)節(jié)病、未分化關(guān)節(jié)病、關(guān)節(jié)炎、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(少年和成人)、骨關(guān)節(jié)炎、牛皮癬關(guān)節(jié)炎、炎性骨質(zhì)溶解、膿毒癥、腦膜炎和慢性病毒或細(xì)菌感染導(dǎo)致的慢性炎癥。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的方法來(lái)預(yù)防、治療、控制或改善的炎性病癥為以2型介導(dǎo)的炎癥為特征的炎性病癥。2型介導(dǎo)的炎癥的特征為嗜酸性和嗜堿性組織浸潤(rùn)和/或廣泛的肥大細(xì)胞脫顆粒，該過(guò)程依賴(lài)表面結(jié)合的IgE的交聯(lián)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的方法來(lái)預(yù)防、治療、控制或改善的炎性病癥為哮喘、白塞氏綜合癥、關(guān)節(jié)炎、慢性阻塞性肺病(COPD)、肺纖維化、腎纖維化、痛風(fēng)或變應(yīng)性紊亂。
在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，將有效量的一種或多種本發(fā)明的化合物與有效量的一種或多種用于預(yù)防、治療、控制或改善哮喘或其一種或多種癥狀的治療(例如預(yù)防性制劑或治療性制劑)聯(lián)合給予個(gè)體。這類(lèi)治療的非限制性實(shí)例包括但不限于腎上腺素能激動(dòng)劑(例如兒茶酚胺(例如腎上腺素、異丙腎上腺素和異他林)、雷瑣辛(例如奧西那林、特布他林和非諾特羅)、水楊醇(例如沙丁胺醇))、抗膽堿能藥(例如硫酸阿托品、甲基硝酸阿托品和異丙托溴銨(ATROVENTTM))、β2-激動(dòng)劑(例如abuterol(VENTOLINTM和PROVENTILTM)、比托特羅(TORNALATETM)、左沙丁胺醇(XOPONEXTM)、奧西那林(ALUPENTTM)、吡布特羅(MAXAIRTM)、terbutlaine(BRETHAIRETM和BRETHINETM)、沙丁醇胺(PROVENTILTM、REPETABSTM和VOLMAXTM)、福莫特羅(FORADIL AEROLIZERTM)和沙美特羅(SEREVENTTM和SEREVENT DISKUSTM))、皮質(zhì)類(lèi)固醇(例如甲潑尼龍(MEDROLTM)、潑尼松(PREDNI SONETM和DELTASONETM)和潑尼松龍(PRELONETM、PEDIAPREDTM))、糖皮質(zhì)激素(例如口服類(lèi)固醇或其它全身或口服類(lèi)固醇、吸入糖皮質(zhì)激素)、其它類(lèi)固醇、免疫抑制劑(例如甲氨蝶呤和金鹽)、白三烯改性劑(例如孟魯司特(SINGULAIRTM)、扎魯司特(ACCOLATETM)和齊留通(ZYFLOTM))、肥大細(xì)胞穩(wěn)定劑(例如色甘酸鈉(INTALTM)和萘多羅米鈉(TILADETM))、甲基黃嘌呤(例如茶堿(UNIPHYLTM、THEO-DURTM、SLO-BIDTM、AND TEHO-42TM))和粘液溶解劑(例如乙酰半胱氨酸)。
在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，將有效量的一種或多種本發(fā)明的化合物與有效量的一種或多種用于預(yù)防、治療、控制或改善變應(yīng)性或其一種或多種癥狀的治療(例如預(yù)防性制劑或治療性制劑)聯(lián)合給予個(gè)體。所述治療的非限制性實(shí)例包括抗介質(zhì)藥(例如抗組胺藥，參見(jiàn)表3)、皮質(zhì)類(lèi)固醇、減充血?jiǎng)M交感神經(jīng)藥(例如α-腎上腺素能藥和β-腎上腺素能藥)、茶堿及其衍生物、糖皮質(zhì)激素和免疫治療(例如變應(yīng)原的反復(fù)長(zhǎng)期注射、短期脫敏和毒物免疫治療)。
表3-H1抗組胺藥
在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，將有效量的一種或多種本發(fā)明的化合物與有效量的一種或多種用于預(yù)防、治療、控制或改善COPD或其一種或多種癥狀的治療(例如預(yù)防性制劑或治療性制劑)聯(lián)合給予個(gè)體。所述治療的非限制性實(shí)例包括但不限于支氣管擴(kuò)張藥(例如短效β2-腎上腺素能激動(dòng)劑(例如沙丁胺醇、吡布特羅、特布他林和奧西那林)、長(zhǎng)效β2-腎上腺素能激動(dòng)劑(例如口服持續(xù)釋放的沙丁醇胺和吸入的沙美特羅)、抗膽堿能藥(例如異丙托溴銨)和茶堿及其衍生物(茶堿治療用量?jī)?yōu)選10-20ug/mL))、糖皮質(zhì)激素、外源性α1AT(例如衍生自每周60mg/kg劑量靜脈注射的混合人血漿的α1AT)、氧氣、肺移植術(shù)、肺減容術(shù)、氣管插管、換氣支持、每年接種流感疫苗和用23-價(jià)多糖肺炎球菌接種、運(yùn)動(dòng)和戒煙。
在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，將有效量的一種或多種本發(fā)明的化合物與有效量的一種或多種用于預(yù)防、治療、控制或改善肺部纖維化或其一種或多種癥狀的治療(例如預(yù)防性制劑或治療性制劑)聯(lián)合給予個(gè)體。這類(lèi)治療的非限制性實(shí)例包括氧氣、皮質(zhì)類(lèi)固醇(例如每日給予潑尼松，開(kāi)始為1-1.5mg/kg/d(最高達(dá)100mg/d)，給藥6周，在3-6個(gè)月緩慢減少到最小維持劑量0.25mg/kg/d)、細(xì)胞毒性藥物(例如環(huán)磷酰胺，每天一次口服100-120mg，以及硫唑嘌呤，每天一次口服3mg/kg，最高達(dá)200mg)、支氣管擴(kuò)張劑(例如短效和長(zhǎng)效β2-腎上腺素能激動(dòng)劑、抗膽堿能藥和茶堿及其衍生物)和抗組胺藥(例如苯海拉明和多西拉敏)。
抗炎治療及其劑量、給藥途徑和推薦用法為本領(lǐng)域所已知，且已經(jīng)見(jiàn)述于例如Physician’s Desk Reference(第57版，2003年)這類(lèi)的文獻(xiàn)中。
4.3.3中樞神經(jīng)系統(tǒng)病癥一種或多種本發(fā)明的化合物和包含所述化合物的組合物可用于預(yù)防、治療、控制或改善中樞神經(jīng)系統(tǒng)病癥或其一種或多種癥狀。本發(fā)明的化合物或包含所述化合物的組合物還可與一種或多種用于預(yù)防、治療、控制或改善中樞神經(jīng)系統(tǒng)病癥或其一種或多種癥狀的其它治療(例如一種或多種其它預(yù)防性制劑或治療性制劑)聯(lián)合施用。
中樞神經(jīng)系統(tǒng)病癥包括但不限于帕金森氏癥、運(yùn)動(dòng)徐緩、肌體強(qiáng)直、帕金森氏病樣震顫、帕金森氏病樣步態(tài)障礙、運(yùn)動(dòng)凍結(jié)、抑郁癥、長(zhǎng)期記憶缺失，魯賓斯坦-泰比綜合征(RTS)、癡呆、睡眠障礙、姿勢(shì)不穩(wěn)、運(yùn)動(dòng)功能減退癥、炎癥、突觸核蛋白病癥、多系統(tǒng)萎縮(multiple systemartrophies)、紋狀體黑質(zhì)變性(striatonigral degeneration)、橄欖體腦橋小腦萎縮、Shy-drager綜合征、具有帕金森氏特征的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元疾病、路易小體癡呆(Lewy body dementia)、Tau病理病癥、進(jìn)行性核上性麻痹(progressive supranculear palsy)、皮質(zhì)基底核變性(corticobasaldegeneration)、額顳葉型癡呆(frontotemporal dementia)、淀粉樣病理病癥、輕度認(rèn)知功能障礙、阿爾茨海默病、具有帕金森氏神經(jīng)機(jī)能障礙的阿爾茨海默病、可具有帕金森氏病特征的遺傳病癥、Wilson氏病、Hallervorden-Spatz疾病、Chediak-Hagashi疾病、SCA-3脊髓小腦性共濟(jì)失調(diào)、X-連結(jié)肌張力障礙帕金森氏綜合征、亨廷頓病、朊病毒病、運(yùn)動(dòng)過(guò)度癥、舞蹈病、顫搐、張力障礙性震顫、肌萎縮性脊髓側(cè)索硬化癥(ALS)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)創(chuàng)傷和肌陣攣。
在本發(fā)明的具體實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物與一種或多種第二有效成分一起使用、給藥或配制來(lái)治療、預(yù)防或控制中樞神經(jīng)系統(tǒng)病癥。第二有效成分的實(shí)例包括但不限于多巴胺激動(dòng)藥、左旋多巴、用于增進(jìn)左旋多巴治療的化合物例如單胺氧化酶抑制劑(MAO)和兒茶酚氧位甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑(COMT)、金剛烷胺、抗膽堿能藥、止吐劑和其它用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)病癥的標(biāo)準(zhǔn)治療。在另一個(gè)實(shí)例中，第二有效成分為抗炎制劑包括但不限于非甾體抗炎藥(NSAIDs)、甲氨蝶呤、來(lái)氟米特、抗瘧藥和柳氮磺胺吡啶、金鹽、糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑和其它用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)病癥的標(biāo)準(zhǔn)治療。
4.4組合物和施用治療的方法本發(fā)明提供了用于治療、預(yù)防和改善特征為或伴隨有異常血管生成的病癥、增生性病癥、炎性病癥，和通過(guò)抑制或降低PDE4的表達(dá)和/或活性或者通過(guò)抑制或降低微管蛋白的聚合或穩(wěn)定性來(lái)預(yù)防、控制、治療或改善的病癥的組合物。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，組合物包含一種或多種本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或水合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物包含一種或多種除本發(fā)明的化合物之外的預(yù)防性制劑或治療性制劑，或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或水合物，所述預(yù)防性制劑或治療性制劑已知可用于或已用于或當(dāng)前正用于預(yù)防、治療、控制或改善病癥(例如特征為或伴隨有異常血管生成的病癥、增生性病癥、炎性病癥或通過(guò)抑制PDE4或者通過(guò)降低或抑制微管蛋白的聚合或穩(wěn)定性來(lái)預(yù)防、控制、治療或改善的病癥)或其一種或多種癥狀。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物包含一種或多種本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或水合物和一種或多種預(yù)防性制劑或治療性制劑，所述預(yù)防性制劑或治療性制劑已知可用于或已用于或當(dāng)前正用于預(yù)防、治療、控制或改善病癥(例如特征為或伴隨有異常血管生成的病癥、增生性病癥、炎性病癥，或通過(guò)抑制PDE4或者通過(guò)降低或抑制微管蛋白的聚合或穩(wěn)定性來(lái)預(yù)防、控制、治療或改善的病癥)或其一種或多種癥狀。
在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，組合物包含一種或多種本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或水合物和一種或多種免疫調(diào)節(jié)劑。在另一個(gè)實(shí)施方案中，組合物包含一種或多種本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或水合物和一種或多種抗血管生成劑，其中所述抗血管生成劑不是本發(fā)明的化合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，組合物包含一種或多種本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或水合物和一種或多種抗炎劑，其中所述抗炎劑不是本發(fā)明的化合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，組合物包含一種或多種本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或水合物和一種或多種抗癌劑，其中所述抗癌劑不是本發(fā)明的化合物。根據(jù)本實(shí)施方案，抗癌劑可以是或可以不是免疫調(diào)節(jié)劑或抗血管生成劑。在另一個(gè)實(shí)施方案中，組合物包含一種或多種本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或水合物和一種或多種抗病毒劑。在另一個(gè)實(shí)施方案中，組合物包含一種或多種本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或水合物或一種或多種抗生素。在另一個(gè)實(shí)施方案中，組合物包含一種或多種本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或水合物和一種、兩種、三種或多種以下預(yù)防性制劑或治療性制劑的任何組合免疫調(diào)節(jié)劑、抗血管生成劑、除免疫調(diào)節(jié)劑或抗血管生成劑以外的抗癌劑、抗炎劑、抗病毒劑或抗菌劑(例如抗生素)。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物為藥物組合物或獨(dú)立單位劑型。本發(fā)明的藥物組合物和獨(dú)立單位劑型包含預(yù)防或治療有效量的一種或多種預(yù)防性制劑或治療性制劑(例如本發(fā)明的化合物或其它預(yù)防性制劑或治療性制劑)和通常一種或多種藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。在一個(gè)具體的實(shí)施方案和本文中，術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的”是指由聯(lián)邦或州政府管理機(jī)構(gòu)批準(zhǔn)或列于美國(guó)藥典或其它普遍認(rèn)可的藥典中用于動(dòng)物，更具體地講用于人的。術(shù)語(yǔ)“載體”是指稀釋劑、佐劑(例如弗氏佐劑(完全和不完全))、賦形劑或用于施用治療的媒介物。這類(lèi)藥用載體可為無(wú)菌液體，例如水和油(包括那些石油、動(dòng)物、植物或合成來(lái)源的)，例如花生油、大豆油、礦物油、芝麻油等。當(dāng)藥物組合物是靜脈給藥時(shí)，水是優(yōu)選的載體。鹽溶液和含水葡萄糖和甘油溶液也可用作液體載體，特別是用于注射溶液。合適的藥用載體的實(shí)例見(jiàn)述于E.W.Martin編著的″Remington′s PharmaceuticalScience″。
典型的藥物組合物和劑型包含一種或多種賦形劑。合適的賦形劑為藥學(xué)領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知，合適的賦形劑的非限制性實(shí)例包括淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明膠、麥芽、米、面粉、白堊、硅膠、硬脂酸鈉、單硬脂酸甘油酯、滑石粉、氯化鈉、干脫脂乳、甘油、丙烯、乙二醇、水、乙醇等。具體的賦形劑是否適合加到藥物組合物或劑型取決于本領(lǐng)域已知的各種因素，包括但不限于將劑型給予患者的方式和劑型中具體的有效成分。如果需要，組合物或獨(dú)立單位劑型還可包含少量潤(rùn)濕劑或乳化劑或pH緩沖劑。
本發(fā)明的不含乳糖的組合物可包含本領(lǐng)域熟知且列于例如美國(guó)藥典(USP)SP(XXI)/NF(XVI)的賦形劑。一般來(lái)說(shuō)，不含乳糖的組合物包含有效成分、粘合劑/填充劑、藥學(xué)上兼容的和藥學(xué)上可接受的量的潤(rùn)滑劑。優(yōu)選的不含乳糖的劑型包括有效成分、微晶纖維素、預(yù)凝膠化淀粉和硬脂酸鎂。
因?yàn)樗畷?huì)促進(jìn)一些化合物的分解，因此本發(fā)明還包括包含有效成分的無(wú)水藥物組合物和劑型。例如在制藥技術(shù)中普遍接受加水(例如5％)為模擬長(zhǎng)期存儲(chǔ)的方法以確定制劑隨著時(shí)間的屬性例如保存期限或穩(wěn)定性。參見(jiàn)例如(Jens T.Carstensen，Drug StabilityPrinciples & Practice，2d.Ed.，Marcel Dekker，NY，NY，1995，第379-80頁(yè))。實(shí)際上，水和熱加速一些化合物的分解。因此，水對(duì)制劑可具有重要的影響，因?yàn)樵谥苿┑闹圃?、處理、包裝、存儲(chǔ)、運(yùn)輸和使用中普遍會(huì)遇到水分和/或濕氣。
本發(fā)明的無(wú)水藥物組合物和劑型可通過(guò)使用無(wú)水或含水量低的成分和低水分或低濕度條件制備。如果預(yù)期在制造、包裝和/或存儲(chǔ)過(guò)程中與水分和/或濕氣大量接觸，含有乳糖和至少一種有效成分(包含伯胺或仲胺)的本發(fā)明的藥物組合物和劑型優(yōu)選無(wú)水。
無(wú)水藥物組合物的制備和存儲(chǔ)應(yīng)維持其無(wú)水屬性。因此，無(wú)水組合物優(yōu)選采用已知防止暴露于水的材料來(lái)包裝使得它們能夠被裝在合適的制劑盒中。合適的包裝的實(shí)例包括但不限于氣密封的箔、塑料、單位劑量容器(例如小瓶)、泡罩包裝和條帶包裝(strip packs)。
本發(fā)明還包括包含一種或多種降低有效成分分解速率的化合物的藥物組合物和劑型。這類(lèi)化合物(此處指“穩(wěn)定劑”)包括但不限于抗氧化劑(例如抗壞血酸)、pH緩沖劑或鹽緩沖劑。
藥物組合物和獨(dú)立單位劑型可為溶液、懸浮液、乳液、片劑、丸劑、膠囊劑、散劑、持續(xù)釋放制劑等形式?？诜苿┛砂?biāo)準(zhǔn)載體，例如藥物級(jí)甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸鎂、糖精鈉、纖維素、碳酸鎂等。這類(lèi)組合物和劑型將包含預(yù)防或治療有效量的預(yù)防性制劑或治療性制劑(優(yōu)選為純凈形式)和適量的載體從而提供給予患者的適當(dāng)劑型。制劑應(yīng)適應(yīng)給藥方式。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，藥物組合物或獨(dú)立單位劑型為無(wú)菌，并且為適合給予個(gè)體的形式，所述個(gè)體優(yōu)選為動(dòng)物個(gè)體，更優(yōu)選為哺乳動(dòng)物個(gè)體，最優(yōu)選人個(gè)體。
本發(fā)明的藥物組合物的配制與其預(yù)期的給藥途徑相適應(yīng)。給藥途徑的實(shí)例包括但不限于腸胃外(例如靜脈)、真皮下、皮下、口服(例如吸入)、鼻內(nèi)、透皮(局部)、透粘膜、腫瘤內(nèi)、滑膜內(nèi)和直腸給藥。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，組合物按照常規(guī)步驟配制為適于經(jīng)靜脈、皮下、肌內(nèi)、口服、鼻內(nèi)或局部給予人的藥物組合物。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，藥物組合物按照常規(guī)步驟配制為經(jīng)皮下給予人。通常，靜脈給藥的組合物為無(wú)菌等滲含水緩沖溶液。如果需要，組合物還可包含增溶劑和局部麻醉劑(例如利多卡因(lignocane))來(lái)減輕注射部位的疼痛。劑型的實(shí)例包括但不限于片劑、囊片、膠囊劑(例如軟彈性明膠膠囊)、扁囊劑、糖錠、錠劑、分散劑、栓劑、軟膏劑、泥敷劑(泥罨劑)、糊劑、粉劑、敷料、乳膏、膏藥、溶液、貼劑、氣霧劑(例如鼻噴霧劑或吸入劑)、凝膠劑、適于經(jīng)口服或粘膜給予個(gè)體的液體劑型(包括懸浮液(例如水性或非水性的液體懸浮液、水包油乳劑或油包水液體乳劑)、溶液和酏劑)、適于患者腸胃外給藥的液體劑型以及可復(fù)原提供適于患者腸胃外給藥的液體劑型的無(wú)菌固體(例如晶體或無(wú)定形固體)。
本發(fā)明的劑型的組成、形狀和類(lèi)型通常根據(jù)它們的用途而不同。例如，用于急性治療炎癥或相關(guān)病癥的劑型與用于慢性治療相同疾病的劑型相比可包含更多量的一種或多種有效成分。同樣，治療有效的劑型可根據(jù)不同類(lèi)型的癌癥而不同。類(lèi)似地，腸胃外劑型比口服劑型在治療相同疾病或病癥中可包含更少量的一種或多種有效成分。本發(fā)明所包括的具體劑型的這些或其它方式將彼此不同，并為本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知。參見(jiàn)例如Remington′s Pharmaceutical Sciences(雷明頓制藥科學(xué))，第18版，MackPublishing，Easton PA，1990年。
一般來(lái)說(shuō)，本發(fā)明的組合物的成分以單獨(dú)的或混合為單位劑型來(lái)提供，例如在氣密的容器(例如標(biāo)示有效成分的量的安瓿或小藥囊(sachette))的干凍干粉或無(wú)水濃縮物。如果組合物通過(guò)輸入給藥，可將組合物配制于含有無(wú)菌的藥物級(jí)用水或鹽水的輸注瓶?jī)?nèi)。如果組合物通過(guò)注射給藥，可提供注射用無(wú)菌水或鹽水安瓿以使各成分在給藥前混合。包含本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或水合物的本發(fā)明的典型劑型按每天約1mg到約1000mg給藥，每天一次單劑量在清晨給藥，但優(yōu)選在進(jìn)食的情況下按分劑量全天給藥。
4.4.1口服劑型適于口服給藥的本發(fā)明的藥物組合物可為分散的劑型，例如但不限于片劑(例如咀嚼片)、囊片、膠囊劑和液體(例如調(diào)味糖漿劑)。這類(lèi)劑型包括預(yù)定量的有效成分，并可通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的制藥方法制備。參見(jiàn)Remington′s Pharmaceutical Sciences(雷明頓制藥科學(xué))，第18版，MackPublishing，Easton PA，1990年。
根據(jù)常規(guī)制藥配料技術(shù)，本發(fā)明的典型的口服劑型通過(guò)將有效成分與至少一種賦形劑充分混合為混合物而制得。賦形劑可具有多種形式，取決于給藥所期望的制劑形式。例如適于在口服液體或氣霧劑劑型中使用的賦形劑包括但不限于水、乙二醇、油、醇、調(diào)味劑、防腐劑和著色劑。適用于固體口服劑型(例如粉劑、片劑、膠囊劑和囊片)的賦形劑的實(shí)例包括但不限于淀粉、糖、微晶纖維素、稀釋劑、成粒劑、潤(rùn)滑劑、粘合劑和崩解劑。
由于便于給藥，使用固體賦形劑的片劑和膠囊劑代表了最有利的口服劑型。如果需要，片劑可通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)水性或非水性技術(shù)來(lái)包被。這類(lèi)劑型可通過(guò)任何藥學(xué)方法制備。一般來(lái)說(shuō)，通過(guò)將有效成分與液體載體、細(xì)分的固體載體或兩者均勻和密切地混合并隨后將產(chǎn)物成形為所要求的外觀(如果需要)來(lái)制備藥物組合物和劑型。
例如片劑可通過(guò)壓縮或模壓制備。壓縮的片劑可通過(guò)將任選與賦形劑混合的自由流動(dòng)形式(例如粉末或顆粒)的有效成分在合適的機(jī)器中壓縮而制得。模壓的片劑可通過(guò)將用惰性液體稀釋劑潤(rùn)濕的粉末狀化合物的混合物在合適的機(jī)器中模壓而制得。
可用于本發(fā)明的口服劑型的賦形劑的實(shí)例包括但不限于粘合劑、填充劑、崩解劑和潤(rùn)滑劑。適用于藥物組合物和劑型的粘合劑包括但不限于玉米淀粉、馬鈴薯淀粉或其它淀粉、明膠、天然和合成的樹(shù)膠(例如阿拉伯膠)、海藻酸鈉、海藻酸、其它海藻酸鹽、粉末狀黃蓍膠、瓜爾膠、纖維素及其衍生物(例如乙基纖維素、醋酸纖維素、羧甲基纖維素鈣、羧甲基纖維素鈉)、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纖維素、預(yù)凝膠化淀粉、羥丙基甲基纖維素(例如2208、2906、2910號(hào))、微晶纖維素以及它們的混合物。
適用于此處公開(kāi)的藥物組合物和劑型的填充劑的實(shí)例包括但不限于滑石粉、碳酸鈣(例如顆?；蚍勰?、微晶纖維素、粉末狀纖維素、葡萄糖結(jié)合劑、高嶺土、甘露醇、硅酸、山梨醇、淀粉、預(yù)凝膠化淀粉和它們的混合物。本發(fā)明的藥物組合物中的粘合劑或填充劑通常占藥物組合物或劑型重量的約50％到約99％。
適當(dāng)形式的微晶纖維素包括但不限于商品名為AVICEL-PH-101、AVICEL-PH-103、AVICEL RC-581、AVICEL-PH-105(獲自FMCCorporation，American Viscose Division，Avicel Sales，Marcus Hook，PA)的材料和它們的混合物。一種具體的粘合劑為微晶纖維素和商品名為AVICEL RC-581的羧甲基纖維素鈉的混合物。合適的無(wú)水或低含水量賦形劑或添加劑包括AVICEL-PH-103TM和Starch 1500LM。
崩解劑用于本發(fā)明的組合物中以使片劑在暴露于水性環(huán)境中時(shí)崩解。含過(guò)多崩解劑的片劑可在存儲(chǔ)過(guò)程中崩解，而崩解劑含量過(guò)小的片劑可能無(wú)法按所要求的速率或在所要求的條件下崩解。因此，應(yīng)使用即不過(guò)多也不過(guò)少的足夠量的崩解劑來(lái)制備本發(fā)明的固體口服劑型，從而不會(huì)不利地改變有效成分的釋放。所使用的崩解劑的量隨制劑類(lèi)型的不同而變化，并為本領(lǐng)域技術(shù)人員所知悉。典型的藥物組合物包含約0.5％重量到約15％重量的崩解劑，具體為約1％重量到約5％重量的崩解劑。
可用于本發(fā)明的藥物組合物和劑型的崩解劑包括但不限于瓊脂、海藻酸、碳酸鈣、微晶纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、波拉克林鉀、淀粉羥乙酸鈉、馬鈴薯或木薯淀粉、預(yù)凝膠化淀粉、其它淀粉、粘土、其它褐藻膠、其它纖維素、樹(shù)膠和它們的混合物。
可用于本發(fā)明的藥物組合物和劑型的潤(rùn)滑劑包括但不限于硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、礦物油、輕質(zhì)礦物油、甘油、山梨醇、甘露醇、聚乙二醇、其它二醇、硬脂酸、十二烷基硫酸鈉、滑石粉、氫化植物油(例如花生油、棉籽油、葵花油、芝麻油、橄欖油、玉米油和大豆油)、硬脂酸鋅、油酸乙酯、月桂酸乙酯(ethyl laureate)、瓊脂和它們的混合物。其它的潤(rùn)滑劑包括例如syloid硅膠(硅膠)(AEROSIL 200，由W.R.Grace Co.Baltimore，MD制造)、合成二氧化硅的凝結(jié)氣溶膠(由Degussa Co.Plano，TX銷(xiāo)售)、CAB-O-SIL(火成二氧化硅產(chǎn)品，由Cabot Co.Boston，MA銷(xiāo)售)和它們的混合物。如果使用，潤(rùn)滑劑的用量通常少于使用其的藥物組合物或劑型重量的約1％。
4.4.2緩釋劑型本發(fā)明的有效成分可通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的控釋方法或給藥裝置來(lái)給藥。實(shí)例包括但不限于如美國(guó)專(zhuān)利第3,845,770、3,916,899、3,536,809、3,598,123、4,008,719、5,674,533、5,059,595、5,591,767、5,120,548、5,073,543、5,639,476、5,354,556和5,733,566號(hào)所述的實(shí)例，各文獻(xiàn)通過(guò)引用而納入本文中。通過(guò)使用羥丙基甲基纖維素、其它聚合物基質(zhì)、凝膠、滲透膜、滲透系統(tǒng)、多層包衣、微顆粒、脂質(zhì)體、微球或它們的組合以提供所期望的不同比例的釋放方式，這類(lèi)劑型可用于提供一種或多種有效成分的緩慢和可控的釋放。本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的合適的控釋制劑包括此處所述的制劑，可易于選擇與本發(fā)明的有效成分一起使用。本發(fā)明因此包括適于控釋并適于口服給藥的獨(dú)立單位劑型，例如但不限于適合于片劑、膠囊劑、膠丸和囊片。
所有控釋藥品的共同目的是相比它們的非控釋對(duì)應(yīng)物而言改善藥物治療。理想地，在藥物治療中使用優(yōu)化設(shè)計(jì)的控釋制劑的特征為在最短的時(shí)間內(nèi)使用最少量的藥物物質(zhì)來(lái)治愈或控制病情?？蒯屩苿┑膬?yōu)點(diǎn)包括藥物的延長(zhǎng)活性、減少的劑量頻率和提高的患者順應(yīng)性。此外，控釋制劑可用于影響作用開(kāi)始作用時(shí)間或其它屬性(例如血藥濃度)，并因此可影響副(不利)作用的出現(xiàn)。
大多數(shù)控釋制劑被設(shè)計(jì)為最初釋放一定量的藥物(有效成分)來(lái)迅速產(chǎn)生所要求的治療效果，并逐步和連續(xù)地釋放其它量的藥物來(lái)在延長(zhǎng)的時(shí)間周期內(nèi)維持該水平的治療或預(yù)防效果。為維持藥物在體內(nèi)的這種恒定水平，藥物必須以能替代被代謝和排泄的藥物量的速率從劑型中釋放?？赏ㄟ^(guò)各種條件來(lái)促進(jìn)有效成分的控釋?zhuān)鰲l件包括但不限于pH、溫度、酶、水或其它生理?xiàng)l件或化合物。
4.4.3腸胃外劑型腸胃外劑型可通過(guò)各種途徑(包括但不限于皮下、靜脈(包括彈丸注射)、肌內(nèi)和動(dòng)脈)來(lái)給予個(gè)體。由于它們的給藥通常規(guī)避患者對(duì)污染物的天然防御屏障，腸胃外劑型優(yōu)選為無(wú)菌或能夠在給予患者之前被滅菌。腸胃外劑型的實(shí)例包括但不限于注射用溶液、可以被溶解或懸浮于藥學(xué)上可接受的注射用介質(zhì)中的干制品、注射用懸浮液和乳液。
可用于提供本發(fā)明的腸胃外劑型的合適的媒介物為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知。實(shí)例包括但不限于USP注射用水、水性媒介物(例如但不限于氯化鈉注射液、林格氏注射液、葡萄糖注射液、葡萄糖和氯化鈉注射液以及乳酸林格氏注射液)、水可混溶的媒介物(例如但不限于乙醇、聚乙二醇和聚丙二醇)和非水性媒介物(例如但不限于玉米油、棉籽油、花生油、芝麻油、油酸乙酯、肉豆蔻酸異丙酯和苯甲酸芐酯)。
提高此處公開(kāi)的一種或多種有效成分的溶解度的化合物也可以加入本發(fā)明的腸胃外劑型中。
4.4.4透皮、局部和粘膜劑型本發(fā)明的透皮、局部和粘膜劑型包括但不限于眼用溶液、噴霧劑、氣霧劑、乳膏、洗劑、凝膠劑、溶液、乳劑、懸浮液或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它形式。參見(jiàn)Remington′s Pharmaceutical Sciences，第16和第18版，Mack Publishing，Easton PA(1980 & 1990)以及Introduction toPharmaceutical Dosage Forms，第4版，Lea & Febiger，Philadelphia(1985)。適用于治療口腔內(nèi)粘膜組織的劑型可配制為漱口劑或口凝膠。此外，透皮劑型包括“儲(chǔ)存型”或“基質(zhì)型”貼劑，所述貼劑可用于皮膚并能被保持特定的時(shí)間周期以使所期望量的有效成分透入。
可用于提供本發(fā)明所包括的透皮、局部和粘膜劑型的合適的賦形劑(例如載體和稀釋劑)和其它材料為制藥領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知，并取決于特定藥物組合物或劑型將施用的具體組織。據(jù)此，典型的賦形劑包括但不限于水、丙酮、乙醇、乙二醇、丙二醇、1，3-丁二醇、肉豆蔻酸異丙酯、棕櫚酸異丙酯、礦物油和它們的混合物來(lái)形成洗劑、酊劑、乳膏、乳劑、凝膠劑或軟膏劑，這些劑型無(wú)毒且藥學(xué)上可接受。如果需要，藥物組合物和劑型中還可加入保溫液或濕潤(rùn)劑。這類(lèi)附加成分的實(shí)例為本領(lǐng)域所熟知。參見(jiàn)Remington′s Pharmaceutical Sciences，第16和第18版，MackPublishing，Easton PA(1980 & 1990)。
附加組分可早于、同時(shí)或晚于本發(fā)明的有效成分的治療，這取決于要治療的具體的組織。例如，滲透增強(qiáng)劑可有助于將有效成分輸送給組織。合適的滲透增強(qiáng)劑包括但不限于丙酮、各種醇(例如乙醇、油醇和四氫呋喃醇)、烷基亞砜(例如二甲基亞砜)、二甲基乙酰胺、二甲基甲酰胺、聚乙二醇、吡咯烷酮(例如聚乙烯吡咯烷酮)、Kollidon grades(Povidone、Polyvidone)、尿素和各種水溶性或水不溶性糖酯，例如吐溫80(聚山梨醇酯80)和斯潘60(脫水山梨糖醇單硬脂酸酯)。
也可調(diào)節(jié)藥物組合物或劑型的pH或施用藥物組合物或劑型的組織的pH以改善一種或多種有效成分的輸送。類(lèi)似地，也可以調(diào)節(jié)溶劑載體的極性、它的離子強(qiáng)度或張力以改善輸送。藥物組合物或劑型中還可加入化合物(例如硬脂酸鹽/酯)來(lái)有利地改變一種或多種有效成分的親水性或親油性從而改善輸送。從這個(gè)角度考慮，硬脂酸鹽/酯可用作制劑的脂質(zhì)媒介物、乳化劑或表面活性劑，用作輸送增強(qiáng)劑或滲透增強(qiáng)劑。有效成分的不同的鹽、水合物或溶劑化物可用于進(jìn)一步調(diào)節(jié)所得組合物的性質(zhì)。
4.4.5給制劑量和頻率對(duì)預(yù)防、治療、控制或改善病癥(例如特征為或伴隨有異常血管生成的病癥、增生性病癥、炎性病癥，或通過(guò)抑制或減少PDE4或者抑制或降低微管蛋白聚合或穩(wěn)定性、或通過(guò)減輕或抑制微管蛋白聚合或穩(wěn)定性來(lái)預(yù)防、控制、治療或改善的病癥)或其一種或多種癥狀有效的本發(fā)明的化合物或組合物的量將隨疾病或癥狀的性質(zhì)和嚴(yán)重程度以及有效成分的給藥途徑而變化。頻率和劑量也將根據(jù)每個(gè)患者的具體因素根據(jù)給予的具體治療(例如治療性制劑或預(yù)防性制劑)、疾病、病癥或癥狀的嚴(yán)重程度，給藥途徑以及年齡、身體、體重、響應(yīng)和患者的既往病史而不同。有效劑量可從獲自體內(nèi)或動(dòng)物模型試驗(yàn)系統(tǒng)的劑量-響應(yīng)曲線中外推得到。本領(lǐng)域技術(shù)人員通過(guò)考慮這類(lèi)因素并根據(jù)例如Physician’s Desk Reference(第57版，2003年)的文獻(xiàn)所報(bào)告和推薦的劑量來(lái)選擇合適的方案。
小分子的示例性劑量包括毫克或微克量小分子/千克個(gè)體或樣品重量(例如約1微克/千克到約500毫克/千克、約100微克/千克到約5毫克/千克或約1微克/千克到約50微克/千克)。
一般來(lái)說(shuō)，用于此處所述情況的本發(fā)明的化合物的推薦日劑量為約0.01mg到約1000mg/天，以每天一次單劑量給藥，優(yōu)選以分劑量全天給藥。在一個(gè)實(shí)施方案中，日劑量按等分分劑量每天給藥兩次。具體地說(shuō)，日劑量應(yīng)為約5mg到約500mg/天，更具體地，為約10mg到約200mg/天。在控制患者病癥期間，治療應(yīng)起始于較低劑量，可能約1mg到約25mg，如果需要增加到約200mg到約1000mg/天，以單劑量或分劑量給藥，這取決于患者的總體反應(yīng)。在一些情況下如本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知，需要使用超出此處公開(kāi)范圍的有效成分劑量。此外，臨床醫(yī)師或主治醫(yī)師將知道如何和何時(shí)根據(jù)個(gè)體患者的反應(yīng)來(lái)中斷、調(diào)整或終止治療。
不同的治療有效量可用于不同的疾病或癥狀，如本領(lǐng)域技術(shù)人員所知悉。類(lèi)似地，上述劑量和劑量頻率方案還包括足以預(yù)防、控制、治療或改善這類(lèi)病癥但不足以導(dǎo)致或足以減輕伴隨本發(fā)明的化合物的不良反應(yīng)的量。此外，當(dāng)給予患者多劑量的本發(fā)明的化合物時(shí)，不是所有的劑量都必須相同。例如可以增加給予患者的劑量來(lái)提高化合物的預(yù)防或治療效果，或者也可減少該劑量來(lái)減輕具體患者所經(jīng)受的一種或多種副作用。
在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，給予患者來(lái)預(yù)防、治療、控制或改善病癥(例如特征為或伴隨有異常血管生成的病癥、增生性病癥、炎性病癥，或通過(guò)抑制PDE4、或通過(guò)降低或抑制微管蛋白聚合或穩(wěn)定性來(lái)預(yù)防、控制、治療或改善的病癥)或其一種或多種癥狀的本發(fā)明的組合物或本發(fā)明的化合物的劑量為150μg/kg，優(yōu)選250μg/kg、500μg/kg、1mg/kg、5mg/kg、10mg/kg、25mg/kg、50mg/kg、75mg/kg、100mg/kg、125mg/kg、150mg/kg或200mg/kg或以上(基于患者體重)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，給予個(gè)體來(lái)預(yù)防、治療、控制或改善病癥(例如特征為或伴隨有異常血管生成的病癥、增生性病癥、炎性病癥，或通過(guò)抑制PDE4、或通過(guò)降低或抑制微管蛋白聚合或穩(wěn)定性來(lái)預(yù)防、控制、治療或改善的病癥)或其一種或多種癥狀的本發(fā)明的組合物或本發(fā)明的化合物的劑量為單位劑量的0.1mg到20mg、0.1mg到15mg、0.1mg到12mg、0.1mg到10mg、0.1mg到8mg、0.1mg到7mg、0.1mg到5mg、0.1到2.5mg、0.25mg到20mg、0.25到15mg、0.25到12mg、0.25到10mg、0.25到8mg、0.25mg到7mg、0.25mg到5mg、0.5mg到2.5mg、1mg到20mg、1mg到15mg、1mg到12mg、1mg到10mg、1mg到8mg、1mg到7mg、1mg到5mg或1mg到2.5mg。
除本發(fā)明的化合物之外，已用于或正用于預(yù)防、治療、控制或改善病癥(例如特征為或伴隨有異常血管生成的病癥、增生性病癥、炎性病癥，或通過(guò)抑制PDE4、或通過(guò)降低或抑制微管蛋白聚合或穩(wěn)定性來(lái)預(yù)防、控制、治療或改善的病癥)或其一種或多種癥狀的預(yù)防性制劑或治療性制劑的劑量可用于本發(fā)明的聯(lián)合治療中。優(yōu)選在本發(fā)明聯(lián)合治療中使用的劑量低于已用于或正用于預(yù)防、治療、控制或改善病癥(例如特征為或伴隨異常血管生成的病癥、增生性病癥、炎性病癥或通過(guò)抑制PDE4，或通過(guò)減輕或抑制微管蛋白聚合或穩(wěn)定性來(lái)預(yù)防、控制、治療或改善的病癥)或其一種或多種癥狀的劑量。當(dāng)前用于預(yù)防、治療、控制或改善病癥(例如特征為或伴隨異常血管生成的病癥、增生性病癥、炎性病癥，或通過(guò)抑制PDE4、或通過(guò)降低或抑制微管蛋白聚合或穩(wěn)定性來(lái)預(yù)防、控制、治療或改善的病癥)或其一種或多種癥狀的制劑的推薦劑量可獲自本領(lǐng)域的任何參考文獻(xiàn)，包括但不限于Hardman等編著的Goodman & Gilman′s ThePharmacological Basis Of Basis Of Therapeutics(基本治療的藥理學(xué)基礎(chǔ))，第9版，1996年，Mc-Graw-Hill，New York；Physician′s Desk Reference(PDR)，第57版，2003，Medical Economics Co.，Inc.，Montvale，NJ，這些文獻(xiàn)通過(guò)引用而納入本文中。
在不同的實(shí)施方案中，各治療(例如預(yù)防性制劑或治療性制劑)的給藥時(shí)間間隔小于5分鐘、小于30分鐘，1小時(shí)、約1小時(shí)、約1小時(shí)到約2小時(shí)、約2小時(shí)到約3小時(shí)、約3小時(shí)到約4小時(shí)、約4小時(shí)到約5小時(shí)、約5小時(shí)到約6小時(shí)、約6小時(shí)到約7小時(shí)、約7小時(shí)到約8小時(shí)、約8小時(shí)到約9小時(shí)、約9小時(shí)到約10小時(shí)、約10小時(shí)到約11小時(shí)、約11小時(shí)到約12小時(shí)、約12小時(shí)到約18小時(shí)、18小時(shí)到24小時(shí)、24小時(shí)到36小時(shí)、36小時(shí)到48小時(shí)、48小時(shí)到52小時(shí)、52小時(shí)到60小時(shí)、60小時(shí)到72小時(shí)、72小時(shí)到84小時(shí)、84小時(shí)到96小時(shí)，或96小時(shí)到120小時(shí)。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，兩種或多種治療(例如預(yù)防性制劑或治療性制劑)對(duì)相同的觀察患者給藥。
在某些實(shí)施方案中，一種或多種本發(fā)明的化合物和一種或多種其它治療(例如預(yù)防性制劑或治療性制劑)循環(huán)施用。循環(huán)治療包括給予第一種治療(例如第一種預(yù)防性制劑或治療性制劑)一段時(shí)間，隨后給予第二種治療(例如第二種預(yù)防性制劑或治療性制劑)一段時(shí)間，隨后給予第三種治療(例如第三種預(yù)防性制劑或治療性制劑)一段時(shí)間，并重復(fù)該給藥順序(即循環(huán))，以降低對(duì)制劑中的一種發(fā)展成耐藥，避免或減輕制劑中的一種的副作用和/或改善治療的效果。
在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的相同化合物的可重復(fù)給藥，給藥可間隔至少1天、2天、3天、5天、10天、15天、30天、45天、2個(gè)月、75天、3個(gè)月或6個(gè)月進(jìn)行。在其它實(shí)施方案中，相同預(yù)防性制劑或治療性制劑可重復(fù)給藥，給藥可間隔至少1天、2天、3天、5天、10天、15天、30天、45天、2個(gè)月、75天、3個(gè)月或6個(gè)月進(jìn)行。
在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了預(yù)防、治療、控制或改善病癥(例如特征為或伴隨有異常血管生成的病癥、增生性病癥、炎性病癥，或通過(guò)抑制PDE4、或通過(guò)降低或抑制微管蛋白聚合或穩(wěn)定性來(lái)預(yù)防、控制、治療或改善的病癥)或其一種或多種癥狀的方法，所述方法包括將劑量為至少150μg/kg、優(yōu)選至少250μg/kg、至少500μg/kg、至少1mg/kg、至少5mg/kg、至少10mg/kg、至少25mg/kg、至少50mg/kg、至少75mg/kg、至少100mg/kg、至少125mg/kg、至少150mg/kg或至少200mg/kg或以上的一種或多種本發(fā)明的化合物按每3天一次、優(yōu)選每4天一次、每5天一次、每6天一次、每7天一次、每8天一次、每10天一次、每2周一次、每3周一次或每月一次給予需要的個(gè)體。
本發(fā)明提供了預(yù)防、治療、控制或改善病癥(例如特征為或伴隨有異常血管生成的病癥、增生性病癥、炎性病癥，或通過(guò)抑制PDE4、或通過(guò)降低或抑制微管蛋白聚合或穩(wěn)定性來(lái)預(yù)防、控制、治療或改善的病癥)或其一種或多種癥狀的方法，所述方法包括(a)將一個(gè)或多個(gè)劑量的預(yù)防或治療有效量的一種或多種本發(fā)明的化合物給予需要的個(gè)體；和(b)在給予一定劑量的所述本發(fā)明的化合物后，監(jiān)測(cè)所述個(gè)體的平均絕對(duì)淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)。此外，優(yōu)選所述一定數(shù)量的劑量為一種或多種本發(fā)明的化合物的1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或12份預(yù)防或治療有效量。
在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了預(yù)防、治療、控制或改善病癥(例如特征為或伴隨有異常血管生成的病癥、增生性病癥、炎性病癥，或通過(guò)抑制PDE4、或通過(guò)降低或抑制微管蛋白聚合或穩(wěn)定性來(lái)預(yù)防、控制、治療或改善的病癥)或其一種或多種癥狀的方法，所述方法包括(a)將劑量為至少150μg/kg、優(yōu)選至少250μg/kg、至少500μg/kg、至少1mg/kg、至少5mg/kg、至少10mg/kg、至少25mg/kg、至少50mg/kg、至少75mg/kg、至少100mg/kg、至少125mg/kg、至少150mg/kg或至少200mg/kg或更多的一種或多種本發(fā)明的化合物給予需要的個(gè)體；和(b)當(dāng)所述個(gè)體的平均絕對(duì)淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)為至少約500細(xì)胞/mm3、優(yōu)選至少約600cells/mm3、至少約700cells/mm3、至少約750cells/mm3、至少約800cells/mm3、至少約850cells/mm3或至少約900cells/mm3時(shí)，將一個(gè)或多個(gè)后續(xù)劑量給予所述個(gè)體。
4.5生物學(xué)測(cè)定法本發(fā)明的藥物組合物和化合物的抗癌活性可通過(guò)利用任何合適的動(dòng)物模型來(lái)測(cè)定，所述動(dòng)物模型包括但不限于具有腫瘤或注射了惡性細(xì)胞的SCID小鼠。用于肺癌的動(dòng)物模型的實(shí)例包括但不限于Zhang&Roth所描述的肺癌動(dòng)物模型(1994，In Vivo 8(5)755-69)和p53功能破壞的轉(zhuǎn)基因小鼠模型(參見(jiàn)例如Morris等，1998，J La State Med Soc 150(4)179-85)。用于乳腺癌的動(dòng)物模型的實(shí)例包括但不限于細(xì)胞周期蛋白D1過(guò)量表達(dá)的轉(zhuǎn)基因小鼠(參見(jiàn)例如Hosokawa等，2001，Transgenic Res 10(5)471-8)。用于結(jié)腸癌的動(dòng)物模型的實(shí)例包括但不限于TCR b和p53雙敲除小鼠(參見(jiàn)例如Kado等，2001，CancerRes 61(6)2395-8)。用于胰腺癌的動(dòng)物模型的實(shí)例包括但不限于Panc02小鼠胰腺癌的轉(zhuǎn)移模型(參見(jiàn)例如Wang等，2001，Int J Pancreatol 29(1)37-46)和產(chǎn)生皮下胰腺腫瘤的純合裸鼠(nu-numice)(參見(jiàn)例如Ghaneh等，2001，Gene Ther 8(3)199-208)。用于非霍奇金淋巴瘤的動(dòng)物模型的實(shí)例包括但不限于嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷(″SCID″)小鼠(參見(jiàn)例如Bryant等，2000，Lab Invest 80(4)553-73)和IgHmu-HOX11轉(zhuǎn)基因小鼠(參見(jiàn)例如Hough等，1998，Proc Natl Acad Sci USA 95(23)13853-8)。用于食管癌的動(dòng)物模型的實(shí)例包括但不限于人乳頭瘤病毒16E7型致癌基因的轉(zhuǎn)基因小鼠(參見(jiàn)例如Herber等，1996，J Virol 70(3)1873-81)。用于直腸癌的動(dòng)物模型的實(shí)例包括但不限于Apc小鼠模型(參見(jiàn)例如Fodde&Smits，2001，Trends Mol Med 7(8)369-73和Kuraguchi等，2000，Oncogene 19(50)5755-63)。
本發(fā)明的藥物組合物和化合物的抗炎活性可通過(guò)各種本領(lǐng)域已知的炎性關(guān)節(jié)炎實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型來(lái)測(cè)定，見(jiàn)述于Crofford L.J.和Wilder R.L.，″Arthritis and Autoimmunity in Animals″，in Arthritis and Allied ConditionsA Textbook of Rheumatology，McCarty等(編著)，第30章(Lee和Febiger，1993)。炎性關(guān)節(jié)炎和自身免疫性風(fēng)濕疾病的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型和自發(fā)動(dòng)物模型也可用于評(píng)估本發(fā)明的藥物組合物和化合物的抗炎活性。以下為提供用作實(shí)例但不具有限制性的示例性評(píng)估。
本領(lǐng)域已知且廣泛使用的關(guān)節(jié)炎或炎性疾病的主要?jiǎng)游锬Ｐ桶ㄗ魟┱T發(fā)關(guān)節(jié)炎大鼠模型、膠原誘發(fā)關(guān)節(jié)炎大鼠和小鼠模型，以及抗原誘發(fā)關(guān)節(jié)炎大鼠、兔和倉(cāng)鼠模型，所有模型均見(jiàn)述于Crofford L.J.和Wilder R.L.，″Arthritis and Autoimmunity in Animals″，in Arthritis and Allied ConditionsA Textbook of Rheumatology，McCarty等(編著)，第30章(Lee和Febiger，1993)，此文獻(xiàn)通過(guò)引用而納入本文中。
本發(fā)明的藥物組合物和化合物的抗炎活性可通過(guò)角叉菜膠誘發(fā)的關(guān)節(jié)炎大鼠模型來(lái)評(píng)估。在慢性關(guān)節(jié)炎或炎癥的研究中，角叉菜膠誘發(fā)關(guān)節(jié)炎也已經(jīng)被用于兔、狗和豬。用定量組織形態(tài)評(píng)估來(lái)確定治療功效。采用角叉菜膠誘發(fā)關(guān)節(jié)炎模型的方法見(jiàn)述于Hansra P.等的″Carrageenan-Induced Arthritis in the Rat″，Inflammation，24(2)141-155，(2000)。通常也使用本領(lǐng)域已知和描述的酵母多糖誘發(fā)的炎癥動(dòng)物模型。
還可利用Winter C.A.等，″Carrageenan-Induced Edema in Hind Paw ofthe Rat as an Assay for Anti-inflammatory Drugs″Proc.Soc.Exp.BiolMed.111，544-547，(1962)中所述方法的修改方案，通過(guò)測(cè)量大鼠的角叉菜膠誘發(fā)的腳爪水腫的抑制來(lái)評(píng)估本發(fā)明藥物組合物和化合物的抗炎活性。該測(cè)定已用作大多數(shù)NSAID的抗炎活性的首要體內(nèi)篩選，并被認(rèn)為可預(yù)示對(duì)于人的效果。本發(fā)明的試驗(yàn)藥物組合物或化合物的抗炎活性用試驗(yàn)組相對(duì)給予媒介物的對(duì)照組的后爪重量增長(zhǎng)的抑制百分?jǐn)?shù)來(lái)表示。
在本發(fā)明的一個(gè)具體的實(shí)施方案中，所使用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型為佐劑誘發(fā)關(guān)節(jié)炎大鼠模型，可對(duì)比對(duì)照組測(cè)定體重來(lái)確定本發(fā)明的藥物組合物和化合物的抗炎活性?；蛘撸景l(fā)明的藥物組合物和化合物的功效可通過(guò)測(cè)定骨損失的測(cè)定法來(lái)評(píng)估。動(dòng)物模型例如卵巢切除誘發(fā)骨吸收小鼠、大鼠和兔模型為本領(lǐng)域已知用于獲得骨形成的動(dòng)態(tài)參數(shù)。通過(guò)例如Yositake等或Yamamoto等描述的方法，利用顯微計(jì)算機(jī)X射線斷層分析和骨組織形態(tài)測(cè)量分析在體內(nèi)測(cè)定骨體積。Yoshitake等，″Osteopontin-Deficient MiceAre Resistant to Ovariectomy-Induced Bone Resorption，″Proc.Natl.Acad.Sci.968156-8160，(1999)；Yamamoto等，″The Integrin Ligand EchistatinPrevents Bone Loss in Ovariectomized Mice and Rats，″Endocrinology139(3)1411-1419，(1998)，這兩文獻(xiàn)通過(guò)引用而納入本文中。
此外，用于炎性腸病的動(dòng)物模型也可用于評(píng)估本發(fā)明的藥物組合物和化合物的功效(Kim等，1992，Scand.J.Gastroentrol.27529-537；Strober，1985，Dig.Dis.Sci.30(12Suppl)3S-10S)。潰瘍性結(jié)炎性腸病和克羅恩氏病為是可以在動(dòng)物中誘發(fā)的人類(lèi)炎性腸病?？梢越o動(dòng)物口服硫酸化多糖包括但不限于支鏈淀粉、角叉菜、硫酸支鏈淀粉和硫酸葡聚糖或者化學(xué)刺激劑包括但不限于三硝基苯磺酸(TNBS)和醋酸來(lái)誘發(fā)炎性腸病。
用于哮喘的動(dòng)物模型也可用于評(píng)估本發(fā)明的藥物組合物和化合物的功效。這類(lèi)模型的一個(gè)實(shí)例為鼠過(guò)繼轉(zhuǎn)移模型，其中接受TH1或TH2的小鼠的空氣變應(yīng)原激發(fā)作用導(dǎo)致TH效應(yīng)細(xì)胞遷移到呼吸道，并伴隨強(qiáng)烈的嗜中性(TH1)和嗜酸性(TH2)肺粘膜炎癥反應(yīng)(Cohn等，1997，J.Exp.Med.1861737-1747)。
用于銀屑病的動(dòng)物模型也可用于評(píng)估本發(fā)明的藥物組合物和化合物的功效。已研發(fā)銀屑病的動(dòng)物模型(參見(jiàn)例如Schon，1999，J.Invest.Dermatol.112405-410)。
此外，本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何測(cè)定法都可用于評(píng)估本發(fā)明的藥物組合物和化合物對(duì)此處所公開(kāi)的病癥的預(yù)防和/或治療應(yīng)用。
本發(fā)明的藥物組合物和化合物對(duì)外周血淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響可通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)來(lái)監(jiān)測(cè)/評(píng)估。個(gè)體的外周血淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)可通過(guò)例如從所述個(gè)體獲取外周血樣品，利用例如Ficoll-Hypaque(Pharmacia)梯度離心將淋巴細(xì)胞與外周血的其它組分(例如血漿)分離，并用臺(tái)盤(pán)藍(lán)計(jì)數(shù)淋巴細(xì)胞來(lái)測(cè)定?？梢匀缦聹y(cè)定個(gè)體的外周血T細(xì)胞可通過(guò)例如例如Ficoll-Hypaque(Pharmacia)梯度離心將淋巴細(xì)胞與外周血的其它組分(例如血漿)分離，用針對(duì)T細(xì)胞抗原(例如CD3、CD4和CD8)的抗體(與FITC或藻紅蛋白結(jié)合)標(biāo)記T細(xì)胞，并通過(guò)FACS測(cè)量T細(xì)胞的數(shù)目。
本發(fā)明的藥物組合物和化合物的毒性和/或功效可通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)藥學(xué)方法在細(xì)胞組織或?qū)嶒?yàn)動(dòng)物中測(cè)定，例如測(cè)定LD50(半數(shù)致死量)和ED50(半數(shù)治療有效量)。毒性和治療作用的劑量比為治療指數(shù)，它可表示為L(zhǎng)D50/ED50比。治療指數(shù)高的本發(fā)明的藥物組合物和化合物為優(yōu)選的。盡管可以使用具有毒性副作用的本發(fā)明的藥物組合物和化合物，應(yīng)小心設(shè)計(jì)輸送系統(tǒng)，將這類(lèi)組合物和化合物靶向受影響的組織部位以降低對(duì)未受影響的細(xì)胞的潛在損害從而減輕副作用。
獲自細(xì)胞組織測(cè)定和動(dòng)物研究的數(shù)據(jù)可用于制定本發(fā)明的藥物組合物和化合物用于人的劑量范圍。這類(lèi)制劑的劑量?jī)?yōu)選位于包含ED50而毒性很低或沒(méi)有毒性的流通濃度范圍內(nèi)。取決于所采用的劑型和所用給藥途徑，所述劑量可在這個(gè)范圍內(nèi)變動(dòng)。對(duì)于任何用于本發(fā)明方法的制劑，可以一開(kāi)始從細(xì)胞組織測(cè)定中估計(jì)治療有效劑量。可以在動(dòng)物模型中制定劑量來(lái)獲得包含在細(xì)胞組織中測(cè)定的IC50(獲得最大半數(shù)癥狀抑制的試驗(yàn)化合物濃度)的循環(huán)血漿濃度范圍。這類(lèi)信息可用于更精確地測(cè)定用于人的劑量。血漿中的水平可通過(guò)例如高效液相色譜(HPLC)和放射免疫測(cè)定法(RIA)來(lái)測(cè)定。預(yù)防性制劑或治療性制劑的藥代動(dòng)力學(xué)可通過(guò)測(cè)定參數(shù)例如血漿峰值水平(Cmax)、曲線下方面積(AUC，通過(guò)將制劑的血漿濃度與時(shí)間作圖來(lái)測(cè)定，反映生物可利用率)、化合物的半衰期(t1/2)和最大濃度時(shí)間來(lái)確定。
預(yù)防或治療增生性病癥(例如癌癥)的功效可通過(guò)例如檢測(cè)本發(fā)明的藥物組合物和化合物減輕增生性病癥的一種或多種癥狀、減少癌細(xì)胞的增生、減緩癌細(xì)胞的擴(kuò)散或減小腫瘤尺寸的能力來(lái)證明。預(yù)防或治療炎性病癥的功效可通過(guò)例如檢測(cè)本發(fā)明的藥物組合物和化合物減輕炎性病癥的一種或多種癥狀、降低T細(xì)胞活化、減少T細(xì)胞增殖、調(diào)節(jié)一種或多種細(xì)胞因子分布、減少細(xì)胞因子的生成，減輕關(guān)節(jié)、器官或組織的炎癥或改善生活質(zhì)量的能力來(lái)證明。炎性疾病活性的變化可通過(guò)觸痛的和腫脹的關(guān)節(jié)計(jì)數(shù)、患者和主治醫(yī)師對(duì)疼痛和疾病活性的總體評(píng)分和ESR/CRP來(lái)評(píng)估。結(jié)構(gòu)型關(guān)節(jié)損傷的進(jìn)展可通過(guò)手、腕和足的X射線定量記分(Sharp法)來(lái)評(píng)估。具有炎性病癥的人的功能狀態(tài)的變化可通過(guò)健康評(píng)定調(diào)查表(HAQ)來(lái)評(píng)估，而生活質(zhì)量變化用SF-36來(lái)評(píng)定。
4.6實(shí)施例4.6.1生物學(xué)測(cè)定法本發(fā)明的化合物可通過(guò)以下實(shí)施例來(lái)測(cè)定。普通化學(xué)品以及微管蛋白抑制劑Taxol、長(zhǎng)春堿和秋水仙堿可獲自Sigma(St.Louis，MO)。所有的化合物在進(jìn)一步被細(xì)胞培養(yǎng)液稀釋之前溶解于100％DMSO中。除另有說(shuō)明外，所有樣品包括對(duì)照物的最終DMSO濃度保持在恒定的0.1％。鏈霉親合素包被的釔SPA珠獲自Amersham Pharmacia BiotecH(Piscataway，NJ)。[3H]秋水仙堿獲自New England Nuclear(Boston，MA)，[3H]紫杉醇和[3H]長(zhǎng)春堿獲自Morevek Biochemicals(Brea，CA)。純化的微管蛋白和生物素標(biāo)記的不含微管結(jié)合蛋白的牛腦微管蛋白獲自Cytoskeleton，Inc.(Denver，CO)。
人腫瘤細(xì)胞系HT29(結(jié)腸腺癌，HTB-38)、HT-144(黑素瘤，HTB-63)、HCT 116(直腸癌，CCL-247)、A549(NSCLC，CCL 185)、NIHOVCAR-3(卵巢腺癌，HTB-161)、PC-3(前列腺癌，CRL-1435)、HCT-15(結(jié)腸直腸腺癌，CCL-225)、MCF-7(乳腺癌，HTB-22)、MES-SA(子宮肉瘤，CRL-1976)、MES-SA/MX2(CRL-2274)、MES-SA/Dx5(CRL-1977)獲自American TypeCulture Collection(Manassas，VA)。MCF-7/ADR由Signal Research Divisionof Celgene Corporation提供。如ATCC信息表所公布或所述，所有細(xì)胞系在37℃，5％CO2的培養(yǎng)基中培養(yǎng)。已經(jīng)報(bào)告了人親代MCF-7、MES-SA細(xì)胞系以及多藥物耐受、P-gp 170-過(guò)表達(dá)的MCF-7/ADR、MES-SA/MX2、MES-SA/Dx5、HCT-15細(xì)胞系的詳細(xì)特征(參見(jiàn)Shan，J.，Mason，J.M.，Yuan，L.，Barcia，M.，Porti，D.，Calabro，A.，Budman，D.，Vinciguerra，V.，和Xu，H.Rab6c，″A new member of the rab gene familv，is involved in drugresistance in MCF7/AdrR cells″，Gene 25767-75(2000))。HUVEC由Cellular Therapeutic Division of Celgene Corporation提供。通過(guò)Ficoll-Hypaque(Pharmacia，Piscataway，NJ)密度離心獲得正常供體提供的PBMC。
4.6.1.1細(xì)胞增殖測(cè)定法在癌細(xì)胞系、HUVEC和人PBMC中通過(guò)[3H]胸腺嘧啶核苷摻入測(cè)定法來(lái)評(píng)估細(xì)胞增殖。簡(jiǎn)要地說(shuō)，在加入化合物之前24小時(shí)將細(xì)胞接種在96孔微量滴定板上以使它們粘附到板上。每種化合物一式三份進(jìn)行連續(xù)稀釋來(lái)試驗(yàn)。經(jīng)過(guò)化合物處理后，細(xì)胞在37℃下再培養(yǎng)72小時(shí)。將[3H]胸腺嘧啶核苷(1μCi于20μl培養(yǎng)基中)在最后6小時(shí)的培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)加到每個(gè)孔中。隨后采集細(xì)胞利用TopCountMicroplate Scintillation Counter(Packard Instrument Company，Meriden，CT)來(lái)檢測(cè)所摻入的氚。利用GraphPad Prismprogram(San Diego，CA)通過(guò)非線性回歸分析來(lái)計(jì)算得到IC50。
4.6.1.2流式細(xì)胞測(cè)量分析按照Becton Dickinson(San Jose，CA)的Cycle Test Plus DNA ReagentKit的說(shuō)明，用試驗(yàn)制劑處理細(xì)胞24小時(shí)后采集細(xì)胞，用碘化丙錠(PI)染色用于細(xì)胞周期分析。樣品利用FACS Calibur instrument(BectonDickinson，San Jose，CA)來(lái)檢測(cè)。細(xì)胞周期分布采用CellQuestTMv3.1acquisition software和ModFitTMv2.0program來(lái)分析。
用試驗(yàn)制劑處理細(xì)胞48小時(shí)，隨后采集細(xì)胞用于調(diào)亡分析。按照前述方法，用PI對(duì)FITC-Annexin V binding和DNA進(jìn)行雙染色(參見(jiàn)Zhang，L.H.and Longley，R.E.，″Induction of apoptosis in mouse thymocytes bymicrocolin A and its synthetic analog″，Life Sci，641013-1028(1999))。
4.6.1.3微管蛋白聚合或穩(wěn)定性測(cè)定法利用CytoDYNAMIXTMScreen(Cytoskeleton，Denver，CO)來(lái)監(jiān)測(cè)純化的微管蛋白的聚合或穩(wěn)定性。這種測(cè)定法采用96孔測(cè)定板，每個(gè)孔內(nèi)有200μg凍干純化的微管蛋白。微管蛋白用含有試驗(yàn)化合物的冰冷的180μl聚合或穩(wěn)定緩沖液(80mM PIPES，1mM MgCl2，1mM EGTA)，或用媒介物對(duì)照DMSO來(lái)重新恢復(fù)。測(cè)定在控溫微量滴定板閱讀器中在37℃下進(jìn)行。通過(guò)在340nm處吸光度的變化對(duì)微管蛋白的聚合或穩(wěn)定性進(jìn)行分光光監(jiān)測(cè)。利用PowerWaveTMHT微量滴定板閱讀器(Bio-Tek Instruments，Highland Park，VT)按1分鐘的間隔測(cè)量60分鐘而得到吸光度。
4.6.1.4免疫熒光顯微鏡檢查根據(jù)前述方法(參見(jiàn)Isbrucker，R.A.，Gunasekera，S.P.，和Longley，R.E，″Structure-activity relationship studies of discodermolide and itssemisynthetic acetylated analogs on microtubule function and cytotoxicity″，Cancer Chemother.Pharmacol.，4829-36(2001))，通過(guò)免疫熒光法檢測(cè)A549細(xì)胞中的α-微管蛋白。簡(jiǎn)要地說(shuō)，細(xì)胞用試驗(yàn)化合物處理24小時(shí)，然后用PBS洗滌。隨后將細(xì)胞固定并用溫PBS緩沖液(含3.7％甲醛和1％Triton-X)滲透30分鐘。用PBS將細(xì)胞洗滌兩次并用1％的小鼠封閉血清的PBS溶液飽和30分鐘后，單獨(dú)用抗α-微管蛋白-FITC抗體(Sigma)染色，或在100μg/ml的碘化丙錠的存在下進(jìn)行染色。在落射熒光顯微鏡(NikonInstruments，Melville，NY)下觀察細(xì)胞并利用Image-ProTM(MediaCybernetics，Silver Spring，MD)的CCD照相機(jī)來(lái)成象。
4.6.1.5微管蛋白競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合SPA測(cè)定法如前述(參見(jiàn)Tahir，S.K.，Kovar，P.，Rosenberg，S.H.，和Ng，S.C.，″Rapidcolchicine competition-binding scintillation proximity assay usingbiotin-labeled tubulin″，Biotechniques，29156-160(2000))使用生物素標(biāo)記的微管蛋白、鏈霉親合素包被的釔SPA珠和[3H]-標(biāo)記的配體([3H]秋水仙堿、[3H]紫杉醇或[3H]長(zhǎng)春堿)來(lái)進(jìn)行微管蛋白結(jié)合的測(cè)定。簡(jiǎn)要地說(shuō)，結(jié)合混合物包括100μl測(cè)定緩沖液中的0.08μM[3H]-標(biāo)記的配體、1mM GTP和0.5μg生物素化的微管蛋白，所述測(cè)定緩沖液含80mM PIPES pH 6.9、1mM MgCl2、1mM EGTA和5％甘油。在微管蛋白之前加入試驗(yàn)化合物和[3H]-標(biāo)記的配體。在37℃下培養(yǎng)2小時(shí)后，加入20μl SPA珠(80μg于測(cè)定緩沖液中)。在室溫下進(jìn)一步振蕩培養(yǎng)30分鐘后，使SPA珠沉降45分鐘，在TopCountMicroplate Scintillation Counter上進(jìn)行閃爍計(jì)數(shù)。
4.6.1.6caspase酶測(cè)定法按照檢測(cè)試劑盒供應(yīng)商(R&D systems，Minneapolis，MN)的說(shuō)明來(lái)測(cè)定caspase酶的活性。簡(jiǎn)單地說(shuō)，在用藥物處理后，采集細(xì)胞并以250×g離心10分鐘。細(xì)胞沉淀用裂解緩沖液來(lái)裂解。細(xì)胞裂解液在冰上培養(yǎng)10分鐘，隨后以10,000×g離心1分鐘。caspase酶活性的酶反應(yīng)在96孔微量滴定板上進(jìn)行。將50μl含200μg總蛋白的裂解液、50μl 2×反應(yīng)緩沖液和5μl caspase酶特異性肽底物(分別結(jié)合caspase酶-3、-8、-9的對(duì)硝基苯胺的DEVD、IETD或LEHD)混合。該混合物在37℃下培養(yǎng)2小時(shí)，隨后用微量培養(yǎng)板閱讀器讀取A405nm。結(jié)果表示為經(jīng)藥物處理的細(xì)胞與媒介物對(duì)照細(xì)胞的caspase酶活性的變化倍數(shù)。
4.6.1.7細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白的免疫印跡分析用本發(fā)明的化合物或0.1％DMSO處理癌細(xì)胞24小時(shí)。細(xì)胞經(jīng)胰蛋白酶消化并在微量離心機(jī)中旋轉(zhuǎn)沉降6秒鐘，隨后立即在0.1ml裂解緩沖液中裂解，所述裂解緩沖液含10mM Tris-HCl pH 8.0、10mM EDTA、150mM NaCl、1％NP-40、0.5％SDS、1mM DTT、1mM Na3VO4，外加完全蛋白酶抑制劑混合物(Roche Applied Science，Indianapolis，IN)。隨后通過(guò)QiashredderTM(Qiagen，Valencia，CA)旋轉(zhuǎn)1分鐘并在干冰中冷凍。樣品用3×SDS樣品緩沖液(New England Biolabs，Beverly，MA)稀釋并煮沸5分鐘。將約30μl該混合物加載到甘氨酸聚丙烯酰胺凝膠(Invitrogen，Carlsbad，CA)的每個(gè)泳道中，電泳然后轉(zhuǎn)移到PVDF膜(Invitrogen)上。PVDF膜在室溫下用含0.05％吐溫-20和5％脫脂奶粉的PBS封閉1小時(shí)，隨后在4℃下加入抗MPM-2(Upstate Biotechnology，Lake Placid，NY)、Bcl-2、Cdc2、p53、p21或Cdc25C(Santa Cruz Biotechnology，Santa Cruz，CA)的抗體過(guò)夜。膜經(jīng)過(guò)洗滌并用HRPO偶聯(lián)的抗兔或抗小鼠IgG(SantaCruz Biotechnology，Santa Cruz，CA)(1∶10,00稀釋)在室溫下孵育60分鐘，洗滌3次，隨后用ECL Plus chemiluminescent detection system(AmershamBiosciences，Piscataway，NJ)顯影。
4.6.1.8PBMC培養(yǎng)物和TNF-α的ELISA檢測(cè)在Ficoll-Hypaque上通過(guò)密度離心制備PBMC。將PBMC以1×106/ml重新懸浮在完全RPMI-1640培養(yǎng)基/10％胎牛血清中，在24孔板中含有或不含化合物(0.1-100μM)的情況下，在37℃、5％CO2培養(yǎng)24小時(shí)用LPS(1μg/ml；Eschericllia coli serotype 0127B8；Sigma)刺激。收集不含細(xì)胞的上清夜并分成等分試樣在-70℃下存儲(chǔ)直至用ELISA測(cè)定。用R&DSystems(Minneapolis，MN)提供的檢測(cè)方法和試劑測(cè)定上清液中的TNF-α。
4.6.1.9PDE4檢測(cè)按照前述方法(參見(jiàn)Marriott，J.B.，Westby，M.，Cookson，S.，Guckian，M.，Goodbourn，S.，Muller，G.，Shire，M.G.，Stirling，D.，and Dalgleish，A.G.，″CC-3052A water-soluble analog of thalidomide and potent inhibitor ofactivation-induced TNF-alpha production″，J.Immunol.，1614236-4243(1998))從U937細(xì)胞中純化PDE。簡(jiǎn)要地說(shuō)，細(xì)胞(1×109)用PBS洗滌并在冷的均化緩沖液(20mM Tris-HCl，pH 7.1，3mM 2-巰基乙醇(2-mercaptoenthanol)，1mM MgCl2，0.1mM EGTA，1μM PMSF，1μg/ml亮肽素)中裂解。經(jīng)均化后，通過(guò)離心收集上清液并加載到經(jīng)均化緩沖液平衡的Sephacryl S-200柱上。PDE在均化緩沖液中洗脫，合并咯利普蘭敏感的節(jié)段并分成等分存儲(chǔ)。用Di Santo和Heaslip所描述的方法(DiSanto，M.E.and Heaslip，R.J.，″Identification and stabilization of large molecularweight PDE-IVs from U937″，Biochem.Biophys.Res.Commun.，1971126-1131(1993))并在不同濃度的化合物、50mM Tris-HCl，pH 7.5、5mMMgCl2和1μM cAMP(其1％為[3H]cAMP)的存在下測(cè)定PDE活性。預(yù)先確定所用提取液的量以確保反應(yīng)處于線性范圍內(nèi)并消耗小于15％的總底物。反應(yīng)在30℃下進(jìn)行30分鐘并通過(guò)沸騰2分鐘而終止。隨后將樣品驟冷并在30℃下用蛇毒(1mg/ml)處理15分鐘。未使用的底物通過(guò)加入200μlAG1-X8 resin(Bio-Rad，Richmond，CA)15分鐘來(lái)脫去除。隨后將樣品以3000rpm旋轉(zhuǎn)5分鐘，取50μl水相用于計(jì)數(shù)。每個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)加倍處理，活性表示為對(duì)照物的百分?jǐn)?shù)。IC50通過(guò)三個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的劑量-反應(yīng)曲線來(lái)確定。
4.6.1.10人腫瘤異種移植模型CB 17SCID小鼠(鼠齡6-8周，雌性)在無(wú)菌條件下的微型隔離籠中飼養(yǎng)。給小鼠皮下注射懸浮于無(wú)菌PBS的HCT-116(結(jié)腸癌)細(xì)胞(2×106細(xì)胞/小鼠)。在第6天，用數(shù)字卡尺測(cè)量所有小鼠的腫瘤，并用公式W2×L/2[W＝寬度(短軸)；L＝長(zhǎng)度(長(zhǎng)軸)]計(jì)算腫瘤體積。合并腫瘤大小為75-125mm3的小鼠并隨機(jī)分布到各個(gè)罩內(nèi)。隨后在小鼠耳朵上進(jìn)行標(biāo)記，并將各個(gè)籠隨機(jī)指定為處理組。第7天，測(cè)量腫瘤并記作為初始體積，隨后給小鼠腹腔注射媒介對(duì)照物(比例為1∶9∶10的N-甲基-2-吡咯烷酮∶PEG400∶鹽水)、CC-5079(5和25mg/kg)或陽(yáng)性對(duì)照物CamptosarTM(10mg/kg)。在指定的時(shí)間間隔測(cè)量腫瘤尺寸。
4.6.1.11細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)將HUVECs接種于24孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)2天來(lái)形成連續(xù)的單層細(xì)胞。將癌細(xì)胞或癌細(xì)胞系(例如LS-180人結(jié)腸腺癌細(xì)胞)用5μM鈣黃綠素-AM標(biāo)記30分鐘。將鈣黃綠素-AM標(biāo)記的LS-180細(xì)胞加到HUVEC培養(yǎng)物的每個(gè)孔中并在37℃下培養(yǎng)10分鐘。隨后加入TNF-α(80ng/ml)，將培養(yǎng)物再培養(yǎng)110分鐘。用PBS洗滌除去未粘附的細(xì)胞。通過(guò)設(shè)置為485/20nm處激發(fā)和530/25nm處發(fā)射的熒光板閱讀器來(lái)測(cè)量每個(gè)孔中粘附的LS-180細(xì)胞的熒光強(qiáng)度。
4.6.1.12細(xì)胞遷移和侵襲的檢測(cè)通過(guò)基于BD BioCoast Angiogenesis System(BD Biosciences，Bedford，MA)的檢測(cè)法來(lái)測(cè)定細(xì)胞的遷移和侵襲。插件的熒光阻斷膜為3微米孔徑的PET過(guò)濾器，該過(guò)濾器已用BD Matrigel basement matrix(用于侵襲檢測(cè))涂布或不用Matrigel matrix(用于遷移檢測(cè))涂布。將不含血清的培養(yǎng)基中的HUVEC(250μl/well)加到上腔室，將本發(fā)明的化合物加到含有作為化學(xué)吸引劑的VEGF的培養(yǎng)基(750μl/well)的底孔中。隨后將細(xì)胞在37℃下培養(yǎng)22小時(shí)。培養(yǎng)結(jié)束后，將細(xì)胞用鈣黃綠素AM染色來(lái)進(jìn)行熒光測(cè)量。
4.6.1.13血管生成的檢測(cè)由經(jīng)過(guò)訓(xùn)練的醫(yī)務(wù)人員采集的新鮮人臍帶來(lái)測(cè)定本發(fā)明的化合物對(duì)血管生成的作用。將臍帶在約3小時(shí)內(nèi)直接送到實(shí)驗(yàn)室，將臍帶和血管腔用冷的基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基沖洗。利用機(jī)械方法、鉗子和小型手術(shù)剪在無(wú)菌環(huán)境中從臍帶中分離動(dòng)脈。清除血管的連結(jié)組織，并沿橫向切下1mm長(zhǎng)度的血管環(huán)。將血管環(huán)置于50ml錐形底試管內(nèi)的EGM-2培養(yǎng)基(CloneticsCorp)中并在4℃下送到Celgene corporation。將6孔組織培養(yǎng)板用250μlMatrigel被覆并使其在37℃、5％CO2下膠凝30-45分鐘。將血管環(huán)用EGM-W培養(yǎng)基沖洗并置于Matrigel涂被的空上，用另外的250μl Matrigel覆蓋并使其在37℃下膠凝30-45分鐘。將血管在4ml EGM-2中培養(yǎng)24小時(shí)以使組織適應(yīng)新環(huán)境。培養(yǎng)24小時(shí)后，各血管環(huán)用0.1％DMSO作為對(duì)照物處理，或用不同濃度的本發(fā)明的化合物處理。培養(yǎng)基每周更換兩次，總計(jì)3周。本發(fā)明的化合物的作用與用DMSO處理的血管環(huán)進(jìn)行比較。結(jié)果用image-proplus軟件進(jìn)行分析。
4.6.2本發(fā)明的示例化合物的合成4.6.2.1(E/Z)3-(2，3-二氫-苯并呋喃-5-基)-3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-丙烯腈 在-78℃下向5-溴-2，3-二氫-苯并呋喃(1.0g，5.0mmol)的THF(10mL)溶液中加入正丁基鋰的己烷(1.8mL，2.5N，4.5mmol)溶液，并保持20分鐘。在-78℃下向混合物中加入3-乙氧基-4，N-二甲氧基-N-甲基-苯甲酰胺(1.1g，4.6mmol)的THF(10mL)溶液。30分鐘后，將異丙醇(1mL)和水(10mL)加到混合物中，移走冷卻浴?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?0分鐘?；旌衔镉靡宜嵋阴?50mL)和水(50mL)萃取。水層用乙酸乙酯(50mL)萃取。合并的有機(jī)層用HCl(1N，50mL)、水(50mL)、鹽水(50mL)洗滌，用MgSO4干燥。除去溶劑，得到2，3-二氫-苯并呋喃-5-基)-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-甲酮的油狀物(1.23g，92％產(chǎn)率)。油狀物未經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步中。
向攪拌的冰浴中的氰基甲基膦酸二乙酯(1.3mL，8.2mmol)的THF(15mL)溶液中滴加雙(三甲基甲硅烷基)氨基鋰(1.0M THF溶液，8.3mL，8.3mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?0分鐘。將2，3-二氫-苯并呋喃-5-基)-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-甲酮(1.23g，4.1mmol)的無(wú)水THF(15mL)溶液加到混合物中?；旌衔锘亓鬟^(guò)夜。將溶液倒入冰水(20mL)中。水層用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合并的有機(jī)層用水(50mL)、碳酸氫鈉(50mL，飽和)、鹽水(50mL)洗滌，用硫酸鎂干燥。除去溶劑，色譜(硅膠)純化得到(E/Z)3-(2，3-二氫-苯并呋喃-5-基)-3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-丙烯腈的固體混合物(1.1g，83％產(chǎn)率)mp，49-51℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.40-1.47(2t，6H，2CH3)，3.16-3.27(m，4H，2CH2)，3.89-3.92(2s，6H，2CH3)，3.98-4.12(2q，4H，2CH2)，4.58-4.66(m，4H，2CH2)，5.49-5.50(2s，2H，2CH)，6.73-7.33(m，12H，Ar)；13C NMR(DMSO-d6)δ14.68，29.30，29.39，55.96，56.02，64.50，71.78，71.89，91.11，91.31，109.16，109.27，110.96，112.95，114.18，122.14，123.04，125.45，126.62，127.37，127.72，129.48，129.53，129.87，130.57，131.77，132.22，147.88，148.08，150.77，151.32，161.82，162.51，162.84，162.93；分析計(jì)算C20H19NO3C，74.75；H，5.95；N，4.36。實(shí)測(cè)值C，74.40；H，5.95；N，4.22。
4.6.2.2 3-(3，5-二甲氧基-苯基)-3-(4-甲基-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噁嗪-7-基)-丙烯腈
在-78℃下向7-溴-4-甲基-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噁嗪(0.9g，3.9mmol)的THF(10mL)溶液中加入正丁基鋰(1.3mL，2.5N，3.3mmol)。10分鐘后，在-78℃下將溶液加到3，5-二甲氧基-苯甲酰氯(650mg，3.2mmol)的THF(10mL)溶液中。1小時(shí)后，移走冷卻浴，混合物升到室溫。向混合物中加入異丙醇(2mL)、水(30mL)和乙酸乙酯(50mL)。水層用乙酸乙酯(50mL)萃取。合并的有機(jī)層用碳酸氫鈉(50mL，飽和)、鹽水(50mL)洗滌，用硫酸鎂干燥。除去溶劑，色譜(硅膠)純化，得到黃色固體的(3，5-二甲氧基-苯基)-(4-甲基-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噁嗪-7-基)-甲酮(320mg，30％產(chǎn)率)1HNMR(CDCl3)δ2.86(s，3H，CH3)，3.42(t，J＝5Hz，2H，CH2)，3.82(s，6H，2CH3)，4.27(t，J＝4Hz，2H，CH2)，6.60-6.64(m，2H，Ar)，6.85(d，J＝2Hz，2H，Ar)，7.36(d，J＝8Hz，1H，Ar)，7.43(dd，J＝2，9Hz，1H，Ar)。
向攪拌的冰浴中的氰基甲基膦酸二乙酯(0.64mL，4.0mmol)的THF(10mL)溶液中滴加雙(三甲基甲硅烷基)氨基鋰(1.0M THF溶液，4.1mL，4.1mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?0分鐘。將(3，5-二甲氧基-苯基)-(4-甲基-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噁嗪-7-基)-甲酮(640mg，2.0mmol)的無(wú)水THF溶液(8mL)加到混合物中?；旌衔锘亓鬟^(guò)夜。將溶液倒入冰水(20mL)中。水層用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合并的有機(jī)層用水(50mL)、碳酸氫鈉(50mL，飽和)、鹽水(50mL)洗滌，用硫酸鎂干燥。除去溶劑，色譜(硅膠)純化，得到黃色固體的(E/Z)3-(3，5-二甲氧基-苯基)-3-(4-甲基-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噁嗪-7-基)-丙烯腈的混合物(370mg，55％產(chǎn)率)mp，119-121℃；1H NMR(DMSO-d6)δ2.88(s，3H，CH3)，2.92(s，3H，CH3)，3.20-3.36(m，4H，2CH2)，3.74(s，6H，2CH3)，4.17-4.25(m，4H，2CH2)，5.92(s，1H，CH)，6.09(s，1H，CH)，6.41-6.45(m，4H，Ar)，6.60-6.66(m，3H，Ar)，6.72-6.77(m，4H，Ar)，6.83-6.87(m，1H，Ar)；13C NMR(DMSO-d6)δ37.76，37.85，47.97，55.35，55.38，63.99，64.14，90.83，92.74，100.64，101.60，106.98，107.12，111.22，111.27，114.29，116.09，118.82，122.54，123.38，124.85，125.32，138.33，138.93，139.56，141.15，142.74，143.11，160.26，160.28，161.13，161.33；分析計(jì)算C20H20N2O3C，71.41；H，5.99；N，8.33。實(shí)測(cè)值C，71.37；H，5.84；N，8.30。
4.6.2.3(E/Z)3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-3-(4-甲基-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噁嗪-7-基)-丙烯腈 在-78℃下向7-溴-4-甲基-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噁嗪(1.8g，7.9mmol)的THF(15mL)溶液中加入正丁基鋰的己烷(2.6mL，2.5N，6.5mmol)溶液，并保持10分鐘。在-78℃下向混合物中加入3-乙氧基-4，N-二甲氧基-N-甲基-苯甲酰胺(1.4g，6.0mmol)的THF(10mL)溶液。30分鐘后，將異丙醇(2mL)和水(30mL)加到混合物中，移走冷卻浴?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?0分鐘?；旌衔镉靡宜嵋阴?50mL)和水(50mL)萃取。水層用乙酸乙酯(50mL)萃取。合并的有機(jī)層用水(50mL)、鹽水(50mL)洗滌，用MgSO4干燥。除去溶劑，色譜(硅膠)純化，得到(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-(4-甲基-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噁嗪-7-基)-甲酮的油狀物(1.7g，87％產(chǎn)率)1HNMR(CDCl3)δ1.47(t，J＝7Hz，3H，CH3)，3.00(s，3H，CH3)，3.41(t，J＝4Hz，2H，CH2)，3.94(s，3H，CH3)，4.15(q，J＝7Hz，2H，CH2)，4.28(t，J＝5Hz，2H，CH2)，6.64(d，J＝8Hz，1H，Ar)，6.88(d，J＝8Hz，1H，Ar)，7.31-7.41(m，4H，Ar)。
向攪拌的冰浴中的氰基甲基膦酸二乙酯(1.7mL，10.8mmol)的THF(20mL)溶液中滴加雙(三甲基甲硅烷基)氨基鋰(1.0M THF溶液，11mL，11mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?0分鐘。將(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-(4-甲基-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噁嗪-7-基)-甲酮(1.7g，5.2mmol)的無(wú)水THF(10mL)溶液加到混合物中?；旌衔锘亓鬟^(guò)夜。將溶液倒入冰水(20mL)中。水層用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合并的有機(jī)層用水(50mL)、碳酸氫鈉(50mL，飽和)、鹽水(50mL)洗滌，用硫酸鎂干燥。除去溶劑，色譜(硅膠)純化，得到(E/Z)3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-3-(4-甲基-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噁嗪-7-基)-丙烯腈的固體混合物(1.2g，66％產(chǎn)率)mp，99-101℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.31(t，J＝7Hz，6H，2CH3)，2.88(s，3H，CH3)，2.92(s，3H，CH3)，3.30-3.35(m，4H，2CH2)，3.79(s，3H，CH3)，3.82(s，3H，CH3)，3.96-4.04(2q，4H，2CH2)，4.18-4.26(m，4H，2CH2)，5.86(s，1H，CH)，5.94(s，1H，CH)，6.63-7.07(m，12H，Ar)；13CNMR(DMSO-d6)δ14.60，14.63，37.79，37.88，47.99，55.48，55.54，63.81，64.02，64.18，89.99，90.67，111.24，111.32，111.48，112.71，113.92，114.76，116.28，119.26，119.33，122.23，122.33，122.74，123.38，125.33，126.29，129.63，131.25，138.17，138.82，142.79，143.11，147.31，147.68，149.91，150.84，161.40；分析計(jì)算C21H22N2O3C，71.98；H，6.33；N，7.99。實(shí)測(cè)值C，71.67；H，6.15；N，7.88。
4.6.2.4(E/Z)3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-3-(1-甲基-1H-苯并三唑-5-基)-丙烯腈 在-78℃下向4-溴-2-乙氧基-1-甲氧基-苯(1.5g，6.5mmol)的THF(15mL)溶液中加入正丁基鋰的己烷(2.5mL，2.5N，6.3mmol)溶液，并保持20分鐘。在-78℃下向混合物中加入1-甲基-1H-苯并三唑-5-甲醛(1.0g，6.0mmol)的THF(5mL)漿。18小時(shí)后，將異丙醇(2mL)和水(10mL)加到混合物中，移走冷卻浴?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?0分鐘?；旌衔镉靡宜嵋阴?50mL)和水(50mL)萃取。水層用乙酸乙酯(50mL)萃取。合并的有機(jī)層用水(50mL)、鹽水(50mL)洗滌，用MgSO4干燥。除去溶劑，得到(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-(1-甲基-1H-苯并三唑-5-基)-甲醇的油狀物(2g)。油狀物未經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步中。
將上述(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-(1-甲基-1H-苯并三唑-5-基)-甲醇和MnO2(2.5g，29mmol)在二氯甲烷(40mL)中的混合物在室溫下攪拌18h。加入更多MnO2(1.5g)，并保持過(guò)夜。懸浮液通過(guò)硅藻土濾板過(guò)濾。除去溶劑，得到(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-(1-甲基-1H-苯并三唑-5-基)-甲酮的灰白色固體(1.12g，58％產(chǎn)率，2步)1HNMR(CDCl3)δ1.49(t，J＝7Hz，3H，CH3)，3.97(s，3H，CH3)，4.17(q，J＝7Hz，2H，CH2)，4.36(s，3H，CH3)，6.91(d，J＝8Hz，1H，Ar)，7.40(dd，J＝2，8Hz，1H，Ar)，7.50(d，J＝2Hz，1H，Ar)，7.62(d，J＝8Hz，1H，Ar)，8.04(dd，J＝2，9Hz，1H，Ar)，8.44-8.45(m，1H，Ar)。
向攪拌的冰浴中的氰基甲基膦酸二乙酯(1.2mL，7.6mmol)的THF(12mL)溶液中滴加雙(三甲基甲硅烷基)氨基鋰(1.0M THF溶液，7.6mL，7.6mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?0分鐘。將(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-(1-甲基-1H-苯并三唑-5-基)-甲酮(1.12g，3.6mmol)加到混合物中?；旌衔锘亓鬟^(guò)夜。將溶液倒入冰水(20mL)中。混合物用醚(20mL)攪拌，得到懸浮液。過(guò)濾，得到(E/Z)3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-3-(1-甲基-1H-苯并三唑-5-基)-丙烯腈的灰白色固體混合物(1.16g，96％產(chǎn)率)(異構(gòu)體比率1∶0.7)mp，180-182℃；[少量異構(gòu)體]1HNMR(DMSO-d6)δ1.30(t，J＝7Hz，6H，2CH3)，3.78(s，3H，CH3)，[3.84(s，CH3)]，3.92-4.02(m，2H，CH2)，[4.32(s，CH3)]，4.37(s，3H，CH3)，[6.29(s，CH)]，6.39(s，1H，CH)，6.71(dd，J＝2，8Hz，1H，Ar)，6.92-6.99(m，2.3H，Ar)，7.08-7.11(m，1.6H，Ar)，7.43(dd，J＝2，9Hz，1H，Ar)，[7.51(dd，Ar)]，[7.88(d，Ar)]，7.96(d，J＝9Hz，1H，Ar)，[8.04(s，Ar)]，8.11(s，1H，Ar)；13CNMR(DMSO-d6)δ14.59，34.55，55.56，63.82，63.87，94.63，95.16，110.88，111.04，111.41，111.65，111.93，113.79，118.54，119.51，119.99，122.37，122.47，127.55，128.24，129.30，130.19，133.17，133.73，134.18，134.61，144.88，145.11，147.52，147.95，150.37，151.24，161.03，151.29；分析計(jì)算C19H18N4O2+0.4H2OC，66.81；H，5.55；N，16.40。實(shí)測(cè)值C，66.79；H，5.32；N，16.28。
4.6.2.5(E/Z)3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-3-喹啉-6-基-丙烯腈 在-78℃下向4-溴-2-乙氧基-1-甲氧基-苯(1.74g，7.5mmol)的THF(15mL)溶液中加入正丁基鋰的己烷溶液(3.0mL，2.5N，7.5mmol)，并保持20分鐘。在-78℃下向混合物中加入喹啉-6-羧酸甲氧基-甲基-酰胺(1.55g，7.2mmol)的THF(10mL)溶液。2小時(shí)后，將異丙醇(2mL)和水(50mL)加到混合物中，移走冷卻浴。混合物在室溫下攪拌20分鐘。除去溶劑，殘余物用醚(20mL)攪拌。過(guò)濾，得到黃色固體的(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-喹啉-6-基-甲酮(1.5g)。固體未經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步中。
向攪拌的冰浴中的氰基甲基膦酸二乙酯(1.5mL，9.5mmol)的THF(15mL)溶液滴加雙(三甲基甲硅烷基)氨基鋰(1.0M THF溶液，9.5mL，9.5mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?0分鐘。將(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-喹啉-6-基-甲酮(1.46g，4.8mmol)加到混合物中。混合物回流過(guò)夜。將溶液倒入冰水(50mL)中。水層用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合并的有機(jī)層用水(50mL)、碳酸氫鈉(50mL，飽和)、鹽水(50mL)洗滌，用硫酸鎂干燥。除去溶劑，色譜(硅膠)純化，得到(E/Z)3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-3-喹啉-6-基-丙烯腈的灰白色固體混合物(1.25g，79％產(chǎn)率)mp，114-116℃；1HNMR(DMSO-d6)δ1.30(t，J＝7Hz，6H，2CH3)，3.79(s，3H，CH3)，3.85(s，CH3)，3.93-4.00(2q，4H，2CH2)，6.33(s，1H，CH)，6.45(s，1H，CH)，6.74(d，J＝8Hz，1H，Ar)，6.95-7.13(m，5H，Ar)，7.54-7.67(m，3H，Ar)，7.78(d，J＝9Hz，1H，Ar)，7.95(s，1H，Ar)，8.03-8.14(m，3H，Ar)，8.40(d，J＝8Hz，1H，Ar)，8.48(d，J＝8Hz，1H，Ar)，8.94-9.00(m，2H，Ar)；13C NMR(DMSO-d6)δ14.55，14.58，55.54，55.59，63.82，63.89，94.74，95.84，111.49，111.69，111.93，113.83，118.44，118.47，122.19，122.23，122.45，122.54，127.45，127.54，128.91，128.99，129.12，129.19，129.27，129.93，130.08，135.39，136.38，136.53，136.88，147.56，147.74，148.02，148.20，150.43，151.31，151.67，151.83，160.84，160.96；分析計(jì)算C21H18N2O2+0.1H2OC，75.93；H，5.52；N，8.43。實(shí)測(cè)值C，75.92；H，5.48；N，8.41。
4.6.2.6(E/Z)3-(3，5-二甲氧基-苯基)-3-喹啉-6-基-丙烯腈 在-78℃下向1-溴-3，5-二甲氧基-苯(2.7g，12mmol)的THF(20mL)溶液中加入正丁基鋰的己烷溶液(4.5mL，2.5N，11mmol)，并保持20分鐘。在-78℃下向混合物中加入喹啉-6-羧酸甲氧基-甲基-酰胺(2.2g，10mmol)。2小時(shí)后，將水(30mL)加到混合物中，移走冷卻浴?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?0分鐘?；旌衔镉靡宜嵋阴?2×50mL)萃取。合并的有機(jī)層用碳酸氫鈉(50mL，飽和)、鹽水(50mL)洗滌，用硫酸鎂干燥。除去溶劑，在醚中形成漿料，得到(3，5-二甲氧基-苯基)-喹啉-6-基-甲酮的白色固體(1.48g，50％粗產(chǎn)物產(chǎn)率)。樣品未經(jīng)純化用于下一步中。1HNMR(CDCl3)δ3.84(s，6H，2CH3)，6.70-6.73(m，1H，Ar)，6.97(d，J＝2Hz，1H，Ar)，7.49(dd，J＝4，8Hz，1H，Ar)，8.17-8.28(m，4H，Ar)，9.02-9.04(m，1H，Ar)。
向攪拌的冰浴中的氰基甲基膦酸二乙酯(1.6mL，10mmol)的THF(10mL)溶液中滴加雙(三甲基甲硅烷基)氨基鋰(1.0M THF溶液，10mL，10mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?0分鐘。將(3，5-二甲氧基-苯基)-喹啉-6-基-甲酮(1.48g，5mmol)的THF(10mL)溶液加到混合物中。混合物回流2小時(shí)。將溶液倒入冰水(30mL)中。水層用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合并的有機(jī)層用水(50mL)、碳酸氫鈉(50mL，飽和)、鹽水(50mL)洗滌，用硫酸鎂干燥。除去溶劑，色譜(硅膠)純化，得到(E/Z)3-(3，5-二甲氧基-苯基)-3-喹啉-6-基-丙烯腈的灰白色固體混合物(1.46g，92％產(chǎn)率)(根據(jù)HNMR，異構(gòu)體比率是1∶1)mp142-144℃；1H NMR(DMSO-d6)δ3.72(s，6H，2CH3)，3.77(s，6H，2CH3)，6.50-6.65(m，6H，Ar，2CH)，6.64-6.70(m，2H，Ar)，7.53-7.69(m，3H，Ar)，7.81-7.85(m，1H，Ar)，7.92(d，J＝1Hz，1H，Ar)，8.03-8.14(m，3H，Ar)，8.38-8.50(m，2H，Ar)，8.93-9.01(m，2H，Ar)；13C NMR(DMSO-d6)δ97.49，97.65，101.33，102.17，106.66，107.27，117.85，117.98，122.26，127.44，127.49，128.35，128.92，129.18，129.26，129.89，134.96，135.44，136.59，136.95，138.79，139.63，147.75，148.21，151.79，151.92，160.53，160.74，160.87；分析計(jì)算C20H16N2O2+0.1H2OC，75.50；H，5.13；N，8.80。實(shí)測(cè)值C，75.33；H，5.34；N，8.77。
4.6.2.7(E/Z)-3-(3，5-二甲氧基-苯基)-3-(1-甲基-1H-吲哚-6-基)-丙烯腈
向攪拌的1H-吲哚-6-羧酸(5.65g，35.1mmol)的55mL THF懸浮液中加入1，1′-羰基二咪唑(6.25g，38.6mmol)。懸浮液在室溫下攪拌2小時(shí)，然后在冰浴中加入鹽酸O，N-二甲基-羥基胺(4.10g，42.1mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢柽^(guò)夜?；旌衔镉靡宜嵋阴?2×50mL)萃取。合并的乙酸乙酯萃取液用鹽水(50mL)洗滌，用MgSO4干燥，過(guò)濾，濃縮為油狀物，用快速柱色譜(乙酸乙酯/己烷)純化，得到1H-吲哚-6-羧酸甲氧基-甲基-酰胺的油狀物(5.54g，77％產(chǎn)率)1HNMR(CDCl3)δ3.39(s，3H，NCH3)，3.58(s，3H，OCH3)，6.55-6.57(m，1H，Ar)，7.29-7.84(m，4H，Ar)，8.85(brs，1H，NH)。產(chǎn)物未經(jīng)純化用于下一步中。
將1-溴-3，5-二甲氧基苯(12.86g，59.3mmol)的THF(60mL)溶液冷卻到-78℃，抽真空并用氮?dú)庵匦绿畛?0次。向該澄清溶液中緩慢加入正丁基鋰(23.7mL，59.3mmol)并攪拌30分鐘。在-78℃下加入1H-吲哚-6-羧酸甲氧基-甲基-酰胺(5.50g，26.9mmol)在THF(40mL)中的混合物并攪拌3小時(shí)?；旌衔镉卯惐?12.5mL，162mmol)和加入的水(40mL)終止。用醚(3×50mL)萃取，用水(2×50mL)洗滌，干燥，濃縮為油狀物，用快速柱色譜(乙酸乙酯/己烷)純化，得到(3，5-二甲氧基-苯基)-(1H-吲哚-6-基)-甲酮的油狀物(3.70g，49％產(chǎn)率)。產(chǎn)物未經(jīng)純化用于下一步中。
在0℃下將氫氧化鉀(0.21g，3.7mmol)加到(3，5-二甲氧基-苯基)-(1H-吲哚-6-基)-甲酮(0.69g，2.5mmol)的DMF(7mL)混合物中，然后加入碘甲烷(0.2mL，2.7mmol)并在0℃下攪拌2小時(shí)?；旌衔镉妹?15mL)稀釋?zhuān)名}水(2×10mL)洗滌。有機(jī)相用MgSO4干燥，用快速柱色譜(EtOAc/己烷)濃縮、純化，得到(3，5-二甲氧基-苯基)-(1-甲基-1H-吲哚-6-基)-甲酮的灰白色固體(0.54g，75％產(chǎn)率)1H NMR(DMSO-d6)δ3.80(s，6H，2OCH3)，3.85(s，3H，NCH3)，6.55(d，J＝3Hz，1H，Ar)，6.78(t，J＝2Hz，1H，Ar)，6.83(d，J＝2Hz，2H，Ar)，7.47(d，J＝2Hz，1H，Ar)，7.61(d，J＝3Hz，1H，Ar)，7.68(d，J＝8Hz，1H，Ar)，7.90(brs，1H，Ar)。產(chǎn)物未經(jīng)純化用于下一步中。
向在冰浴中冷卻的氰基甲基膦酸二乙酯(0.55mL，3.5mmol)的無(wú)水THF(8mL)溶液中加入雙(三甲基甲硅烷基)氨基鋰(1.0M THF溶液，3.5mL，3.5mmol)，并在室溫下攪拌40分鐘，然后加入(3，5-二甲氧基-苯基)-(1-甲基-1H-吲哚-6-基)-甲酮(0.52g，1.8mmol)的THF(10mL)溶液，回流過(guò)夜。將溶液倒入冰水(10mL)中，用CH2Cl2(2×50mL)萃取，用水(30mL)洗滌，用MgSO4干燥，真空過(guò)濾、濃縮為油狀物，通過(guò)快速柱色譜法(乙酸乙酯/己烷)進(jìn)行純化，得到(E/Z)-3-(3，5-二甲氧基-苯基)-3-(1-甲基-1H-吲哚-6-基)-丙烯腈的淺黃色固體(0.53g，94％產(chǎn)率)mp，117-119℃；1HNMR(DMSO-d6)δ3.72-3.80(ms，9H，2OCH3和NCH3)，6.27和6.32(2s，1H，CH)，6.46-6.51(m，3H，Ar)，6.62-6.67(m，1H，Ar)，6.95-6.99(m，1H，Ar)，7.47-7.65(m，3H，Ar)；13C NMR(CDCl3)δ32.5，55.3，93.7，95.3，100.6，101.0，101.9，106.8，107.3，109.9，110.8，118.5，118.6，119.4，120.2，129.1，129.6，129.8，130.4，131.8，132.5，135.7，136.1，139.7，141.0，160.3，163.0。分析計(jì)算C20H18N2O2C，75.45；H，5.70；N，8.80。實(shí)測(cè)值C，75.31；H，5.77；N，8.66。
4.6.2.8(E/Z)-3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-3-(1H-吲哚-6-基)-丙烯腈 向攪拌的1H-吲哚-6-羧酸(2.68g，16.6mmol)的THF(25mL)褐色溶液中加入CDI(2.97g，18.3mmol)，并在室溫下攪拌2小時(shí)?；旌衔锢鋮s到0℃，加入鹽酸O，N-二甲基-羥基胺(1.95g，20.0mmol)，在室溫下攪拌過(guò)夜。將水(50mL)加到反應(yīng)物中，用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。合并有機(jī)相，用鹽水(100mL)洗滌，用MgSO4干燥，真空濃縮，得到1H-吲哚-6-羧酸甲氧基-甲基-酰胺的油狀物(3.87g，114％粗產(chǎn)物產(chǎn)率)1H NMR(CDCl3)δ3.40(s，3H，NCH3)，3.59(s，3H，OCH3)，6.57-6.59(m，1H，Ar)，7.31-7.33(m，1H，Ar)，7.46-7.50(m，1H，Ar)，7.64(d，J＝8Hz，1H，Ar)，7.84(s，1H，Ar)，8.60(brs，1H，NH)。產(chǎn)物未經(jīng)純化用于下一步中。
將攪拌的4-溴-2-乙氧基-1-甲氧基-苯(6.52g，23.7mmol)和無(wú)水THF(20mL)混合物冷卻到-78℃，抽空并用氮?dú)庵匦绿畛?0次。向該澄清溶液中緩慢加入正丁基鋰(9.5mL，23.7mmol)并攪拌20分鐘。在-78℃下加入1H-吲哚-6-羧酸甲氧基-甲基-酰胺(2.20g，10.8mmol)的無(wú)水THF(25mL)混合物，攪拌1小時(shí)?；旌衔镉卯惐?4.9mL，65mmol)和水(15mL)猝滅。混合物用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。合并的有機(jī)相用水(2×50mL)洗滌，用MgSO4干燥，濃縮，得到油狀物，用快速柱色譜(乙酸乙酯，己烷)純化，得到(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-(1H-吲哚-6-基)-甲酮的油狀物(2.30g)。產(chǎn)物未經(jīng)純化用于下一步中。
在0℃下向氰基甲基膦酸二乙酯(3.6mL，23mmol)的無(wú)水THF(28mL)溶液中加入雙(三甲基甲硅烷基)氨基鋰(1.0M THF溶液，23mL，23mmol)，并在室溫下攪拌30分鐘，然后加入(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-(1H-吲哚-6-基)-甲酮(2.27g，HPLC純度70％，7.68mmol)的THF(15mL)溶液，回流過(guò)夜。將反應(yīng)混合物倒入水(80mL)中，用CH2Cl2(2×80mL)萃取。合并的有機(jī)相用鹽水(80mL)洗滌，用MgSO4干燥，用快速柱色譜(乙酸乙酯，己烷)純化，得到(E/Z)-3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-3-(1H-吲哚-6-基)-丙烯腈的淺黃色固體(0.72g，30％產(chǎn)率)mp，132-134℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.27-1.33(2t，3H，CH2CH3)，3.70(s，1.9H，一種異構(gòu)體的OCH3)，3.79(s，1.25H，另一種異構(gòu)體的OCH3)，3.94-4.04(2q，2H，CH2CH3)，6.11和6.12(2s，1H，兩種異構(gòu)體的CH)，6.48-7.64(m，8H，Ar)，11.26和11.33(2brs，1H，兩種異構(gòu)體的-NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ14.58，55.54，63.80，92.17，92.32，101.34，101.39，111.32，111.50，112.54，112.66，112.83，114.02，118.96，119.06，119.15，119.79，120.06，120.30，122.40，127.42，128.04，128.72，129.35，129.75，130.08，131.00，131.40，135.25，135.50，147.36，147.69，150.03，150.90，163.02，163.10；分析計(jì)算C20H18N2O2+0.09EtOAc乙酸乙酯C，74.73；H，5.87；N，8.21。實(shí)測(cè)值C，74.94；H，5.78；N，8.58。
4.6.2.9(E/Z)-3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-3-(1-甲基-1H-吲哚-6-基)-丙烯腈
向攪拌的1H-吲哚-6-羧酸(2.68g，16.6mmol)的THF(25mL)褐色溶液中加入CDI(2.97g，18.3mmol)，并在室溫下攪拌2小時(shí)?；旌衔锢鋮s到0℃，加入鹽酸O，N-二甲基-羥基胺(1.95g，20.0mmol)，在室溫下攪拌過(guò)夜。將水(50mL)加到反應(yīng)物中，用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。合并的有機(jī)相用鹽水(100mL)洗滌，用MgSO4干燥，真空濃縮，得到1H-吲哚-6-羧酸甲氧基-甲基-酰胺的油狀物(3.87g，114％粗產(chǎn)物產(chǎn)率)1H NMR(CDCl3)δ3.40(s，3H，NCH3)，3.59(s，3H，OCH3)，6.57-6.59(m，1H，Ar)，7.31-7.33(m，1H，Ar)，7.46-7.50(m，1H，Ar)，7.64(d，J＝8Hz，1H，Ar)，7.84(s，1H，Ar)，8.60(brs，1H，NH)。產(chǎn)物未經(jīng)純化用于下一步中。
將攪拌的4-溴-2-乙氧基-1-甲氧基-苯(6.52g，23.7mmol)和無(wú)水THF(20mL)混合物冷卻到-78℃，抽真空并用氮?dú)庵匦绿畛?0次。向該澄清溶液中緩慢加入正丁基鋰(9.5mL，23.7mmol)并攪拌20分鐘。在-78℃下加入1H-吲哚-6-羧酸甲氧基-甲基-酰胺(2.20g，10.8mmol)的無(wú)水THF(25mL)混合物，攪拌1小時(shí)?；旌衔镉卯惐?4.9mL，65mmol)和水(15mL)猝滅。混合物用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。合并的有機(jī)相用水(2×50mL)洗滌，用MgSO4干燥，濃縮，得到油狀物，用快速柱色譜(乙酸乙酯，己烷)純化，得到(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-(1H-吲哚-6-基)-甲酮的油狀物(2.30g)。產(chǎn)物未經(jīng)純化用于下一步中。
在0℃下向氰基甲基膦酸二乙酯(3.6mL，23mmol)的無(wú)水THF(28mL)溶液中加入雙(三甲基甲硅烷基)氨基鋰(1.0M THF溶液，23mL，23mmol)，并在室溫下攪拌30分鐘，然后加入(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-(1H-吲哚-6-基)-甲酮(2.27g，HPLC純度70％，7.68mmol)的THF(15mL)溶液，回流過(guò)夜。將反應(yīng)混合物倒入水(80mL)中，用CH2Cl2(2×80mL)萃取。合并的有機(jī)相用鹽水(80mL)洗滌，用MgSO4干燥，用快速柱色譜(乙酸乙酯，己烷)純化，得到(E/Z)-3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-3-(1H-吲哚-6-基)-丙烯腈的淺黃色固體(0.72g，30％產(chǎn)率)mp，132-134℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.27-1.33(2t，3H，CH2CH3)，3.70(s，1.9H，一種異構(gòu)體的OCH3)，3.79(s，1.25H，另一種異構(gòu)體的OCH3)，3.94-4.04(2q，2H，CH2CH3)，6.11和6.12(2s，1H，兩種異構(gòu)體的CH)，6.48-7.64(m，8H，Ar)，11.26和11.33(2brs，1H，兩種異構(gòu)體的-NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ14.58，55.54，63.80，92.17，92.32，101.34，101.39，111.32，111.50，112.54，112.66，112.83，114.02，118.96，119.06，119.15，119.79，120.06，120.30，122.40，127.42，128.04，128.72，129.35，129.75，130.08，131.00，131.40，135.25，135.50，147.36，147.69，150.03，150.90，163.02，163.10；分析計(jì)算C20H18N2O2+0.09乙酸乙酯C，74.73；H，5.87；N，8.21。實(shí)測(cè)值C，74.94；H，5.78；N，8.58。
在0℃下向(E/Z)-3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-3-(1H-吲哚-6-基)-丙烯腈(0.15g，0.49mmol)的DMF(2mL)溶液中加入氫氧化鉀(0.04g，0.73mmol)并攪拌8分鐘，然后加入碘甲烷(0.03mL，0.53mmol)?；旌衔镌?℃下攪拌3小時(shí)，然后用乙醚(10mL)稀釋?zhuān)名}水(2×15mL)洗滌，用MgSO4干燥，濃縮為油狀物，用快速柱色譜(乙酸乙酯/己烷)純化，得到E/Z-3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-3-(1-甲基-1H-吲哚-6-基)-丙烯腈的泡沫狀固體(0.15g，93％產(chǎn)率)mp，130-132℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.27-1.33(2t，3H，CH2CH3)，3.78-3.84(ms，6H，OCH3和NCH3)，3.93-4.03(2q，2H，CH2CH3)，6.14和6.19(2s，1H，CH)，6.46-7.65(m，8H，Ar)；13CNMR(DMSO-d6)δ14.6，14.6，32.5，55.5，55.5，63.7，63.8，92.4，92.8，100.6，110.3，110.9，111.3，111.5，112.4，114.0，119.0，119.1，119.8，120.2，120.4，122.4，122.6，129.0，129.7，129.9，130.0，131.2，131.3，131.6，132.3，135.8，136.1，147.3，147.7，150.2，151.0，163.0，163.2；分析計(jì)算C21H20N2O2C，75.88；H，6.06；N，8.43。實(shí)測(cè)值C，75.53；H，6.09；N，8.33。
4.6.2.10(E/Z)-3-苯并呋喃-5-基-3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-丙烯腈 將攪拌的4-溴-2-乙氧基-1-甲氧基-苯(1.74g，7.5mmol)和干THF(15mL)的混合物冷卻到-78℃，抽空并用氮?dú)庵匦绿畛?0次。向該澄清溶液中緩慢加入正丁基鋰(3.0mL，7.5mmol)并攪拌20分鐘。在-78℃下加入苯并呋喃-5-甲醛(1.0g，6.8mmol)的干THF(10mL)混合物，攪拌1小時(shí)。混合物用異丙醇(3.1mL，41mmol)和加入的水(10mL)猝滅。混合物用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。合并的有機(jī)相用水(2×50mL)洗滌，用MgSO4干燥，濃縮，得到苯并呋喃-5-基-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-甲醇的油狀物(2.36g，115％產(chǎn)率)。產(chǎn)物未經(jīng)純化用于下一步中。
在室溫下向攪拌的苯并呋喃-5-基-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-甲醇(2.36g粗產(chǎn)物，6.8mmol)的CH2Cl2(15mL)溶液中加入活化的MnO2粉末(6.0g，69mmol)，并在每3-5小時(shí)加入2-3當(dāng)量的MnO2直到HPLC顯示原料消失。黑色懸浮液通過(guò)硅藻土濾板過(guò)濾，真空濃縮，得到苯并呋喃-5-基-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-甲酮的灰白色固體(2.25g，111％粗產(chǎn)率)。產(chǎn)物未經(jīng)純化用于下一步中。
在0℃下向氰基甲基膦酸二乙酯(2.2mL，13.7mmol)的無(wú)水THF(30mL)溶液中加入雙(三甲基甲硅烷基)氨基鋰(1.0M THF溶液，13.7mL，13.7mmol)，并在室溫下攪拌30分鐘，然后加入苯并呋喃-5-基-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-甲酮(2.23g，6.8mmol)的THF(25mL)溶液，回流2小時(shí)。將反應(yīng)混合物倒入水(20mL)中，用CH2Cl2(2×50mL)萃取。合并的有機(jī)相用鹽水(50mL)洗滌，用MgSO4干燥，用快速柱色譜(乙酸乙酯/己烷)純化，得到(E/Z)-3-苯并呋喃-5-基-3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-丙烯腈的淺黃色固體(1.79g，82％產(chǎn)率)mp，95-97℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.31(t，J＝7Hz，3H，CH2CH3)，3.79和3.84(2s，3H，OCH3)，3.93-4.04(2q，2H，CH2CH3)，6.15和6.28(2s，1H，CH)，6.71-8.11(m，8H，Ar)；13C NMR(DMSO-d6)δ14.5，14.6，55.5，55.6，63.8，93.7，93.9，107.0，107.1，111.4，111.4，111.6，112.0，113.8，118.7，118.7，122.0，122.4，122.5，125.0，125.6，127.4，127.4，129.7，130.7，132.2，133.6，147.1，147.3，147.4，147.8，150.3，151.1，154.6，155.3，161.8，162.1。分析計(jì)算C20H17NO3C，75.22；H，5.37；N，4.39。實(shí)測(cè)值C，75.20；H，5.30；N，4.41。
4.6.2.113-(3，5-二甲氧基-苯基)-3-(1，2-二甲基-1H-苯并咪唑-5-基)-丙烯腈(E和Z異構(gòu)體) 在烘箱干燥的配備回流冷凝管、滴液漏斗和磁力攪拌器的三頸燒瓶中制備格氏試劑。將3，5-二甲氧基-溴苯(2.0g，9.0mmol)的THF(10mL)溶液加到鎂條(0.2g，9.0mmol)的THF(5mL)溶液與一小塊碘的混合物中。得到的混合物回流約3小時(shí)，然后冷卻至室溫約30分鐘。隨后將(3，5-二甲氧基苯基)溴化鎂在0℃下緩慢加到攪拌的1，2-二甲氧基-1H-苯并咪唑-5-甲醛(1.3g，7.5mmol)的THF(10mL)溶液中。加畢，將溶液在室溫下攪拌約1小時(shí)?；旌衔锢鋮s到0℃并用飽和NH4Cl溶液(40mL)猝滅。水層用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。合并的有機(jī)層用水(2×30mL)、鹽水(30mL)洗滌并干燥(MgSO4)。除去溶劑，粗產(chǎn)物在己烷中形成漿料，得到(3，5-二甲氧基-苯基)-(1，2-二甲基-1H-苯并咪唑-5-基)-甲醇(2.1g，91％)的灰白色固體1H NMR(CDCl3)δ7.66(s，1H)，7.24-7.20(dd，J＝1，8Hz，1H)，7.17(d，J＝8Hz，1H)，6.56(d，J＝2Hz，2H)，6.31(t，J＝2Hz，1H)，5.84(s，1H)，3.72(s，6H)，3.63(s，3H)，3.55(b，1H)，2.52(s，3H)。
將(3，5-二甲氧基-苯基)-(1，2-二甲基-1H-苯并咪唑-5-基)-甲醇(2.1g，6.7mmol)和MnO2(2.9g，33.6mmol)的CH2Cl2(300mL)懸浮液在室溫下攪拌17小時(shí)?；旌衔锿ㄟ^(guò)硅藻土過(guò)濾，除去溶劑。粗產(chǎn)物與乙醚形成漿料，得到(3，5-二甲氧基-苯基)-(1，2-二甲基-1H-苯并咪唑-5-基)-甲酮(2.0g，99％)的灰白色固體1H NMR(DMSO-d6)δ7.90(s，1H)，7.71-7.62(m，2H)，6.80(s，3H)，3.80(s，3H)，3.35(s，3H)，2.58(s，3H)；13C NMR(DMSO-d6)δ195.28，160.17，154.83，141.54，140.27，139.15，130.15，123.50，120.73，109.70，107.19，103.62，55.47，29.96，13.52。
3-(3，5-二甲氧基-苯基)-3-(1，2-二甲基-1H-苯并咪唑-5-基)-丙烯腈(E和Z異構(gòu)體)通過(guò)采用類(lèi)似于制備3-(3-氨基-4-甲氧基-苯基)-3-(3，4-二甲氧基-苯基)-丙烯腈(E和Z異構(gòu)體)的方法，用(3，5-二甲氧基-苯基)-(1，2-二甲基-1H-苯并咪唑-5-基)-甲酮(2.0g，6.4mmol)，雙(三甲基甲硅烷基)氨基鋰(7.7mL，7.7mmol)和氰基甲基磷酸二乙酯(1.4g，7.7mmol)制備。粗產(chǎn)物用快速柱色譜法(硅膠，CH2Cl2∶CH3OH為95∶5)純化，得到白色固體的3-(3，5-二甲氧基-苯基)-3-(1，2-二甲基-1H-苯并咪唑-5-基)-丙烯腈(1.1g，50％)的異構(gòu)體混合物mp 199-201℃；1H NMR(CDCl3)δ7.69(m，3H)，6.56-6.42(m，3H)，5.70(5.74)(s，1H)，3.77(s，3H)，3.73(3.74)(s，6H)，2.61(s，3H)；13C NMR(CDCl3)δ163.76，160.63(160.60)，153.22(153.54)，142.35(142.57)，141.69(139.43)，137.04(137.38)，130.69(132.54)，123.74(122.64)，120.81(119.54)，118.23(118.09)，108.84(108.80)，107.02(107.72)，102.08(102.02)，94.32(93.47)，55.42(55.41)，30.05(30.00)，13.88；分析計(jì)算C20H19N3O2+0.2H2OC，71.28；H，5.80；N，12.47。實(shí)測(cè)值C，71.18；H，5.86；N，12.42。
等同聲明本發(fā)明不受此處所述的具體實(shí)施方案的范疇的限制。實(shí)際上，對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)說(shuō)除此處所述之外的本發(fā)明的各種修改將將是顯而易見(jiàn)的。這類(lèi)修改在附加權(quán)利要求書(shū)的范疇內(nèi)。
此處所引用的各出版物，其公開(kāi)的內(nèi)容通過(guò)引用而納入本文中。
權(quán)利要求
1.具有下式的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或水合物 其中X為取代或未取代的咪唑、取代或未取代的吡啶、取代或未取代的吡咯烷、取代或未取代的噻吩、取代或未取代的吲哚、取代或未取代的2，3-二氫苯并呋喃、取代或未取代的3，4-二氫-2H-苯并(b)(1，4)噁嗪、取代或未取代的1H-苯并(d)(1，2，3)三唑、取代或未取代的喹啉、取代或未取代的苯并呋喃、取代或未取代的苯并(d)噁唑-2(3H)酮或取代或未取代的嘧啶；R1和R2各自獨(dú)立地為-H、-CN、鹵素、取代或未取代的低級(jí)烷基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的炔基、-NHC(O)R9、-NHC(O)OR9、-COOH、-C(O)-低級(jí)烷基、-C(O)O-低級(jí)烷基、-C(O)-N(R9)2、取代或未取代的芳基、或取代或未取代的雜環(huán)；Ra和Rb各自獨(dú)立地為-H、取代或未取代的低級(jí)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜環(huán)、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的烷氧基、鹵素、氰基、-NO2、-OH、-OPO(OH)2、-N(R9)2、-OC(O)-R10、-OC(O)-R10-N(R10)2、-C(O)N(R10)2、-NHC(O)-R10、-NHS(O)2-R10、-S(O)2-R10、-S(O)2-NH2、-S(O)2-N(R10)2、-NHC(O)NH-R10、-NHC(O)N(R10)2、-NHC(O)NHSO2-R10、-NHC(O)-R10-N(R10)2、-NHC(O)CH(R10)(N(R9)2)或-NHC(O)-R10-NH2；R3為-H、取代或未取代的低級(jí)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜環(huán)、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的烷氧基、鹵素、氰基、-NO2、-OH、-OPO(OH)2、-N(R9)2、-OC(O)-R10、-OC(O)-R10-N(R10)2、-OC(O)-R10-NH2、-C(O)N(R10)2、-NHC(O)-R10、-NHS(O)2-R10、-S(O)2-R10、-OS(O)2-R10、-S(O)2-NH2、-S(O)2-N(R10)2、-OS(O)2-NH2、-OS(O)2-N(R10)2、-NHC(O)O-R10、-NHC(O)NH-R10、-NHC(O)N(R10)2、-NHC(O)NHSO2-R10、-NHC(O)-R10-N(R10)2、-NHC(O)CH(R10)(N(R9)2)或-NHC(O)-R10-NH2，或者R3與Ra或R4一起形成-O-C(R16R17)O-、-O-(C(R16R17))2-O-或-O-(C(R16R17))3-O-；R4為-H、取代或未取代的低級(jí)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜環(huán)、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的烷氧基、鹵素、氰基、-NO2、-OH、-OPO(OH)2、-N(R9)2、-OC(O)-R10、-OC(O)-R10-N(R10)2、-OC(O)-R10-NH2、-C(O)N(R10)2、-NHC(O)-R10、-NHS(O)2-R10、-S(O)2-R10、-OS(O)2-R10、-S(O)2-NH2、-S(O)2-N(R10)2、-OS(O)2-NH2、-OS(O)2-N(R10)2、-NHC(O)O-R10、-NHC(O)NH-R10、-NHC(O)N(R10)2、-NHC(O)NHSO2-R10、-NHC(O)-R10-N(R10)2、-NHC(O)CH(R10)(N(R9)2)或-NHC(O)-R10-NH2；R5為-H、取代或未取代的低級(jí)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜環(huán)、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的烷氧基、鹵素、氰基、-NO2、-OH、-OPO(OH)2、-N(R9)2、-OC(O)-R10、-OC(O)-R10-N(R10)2、-OC(O)-R10-NH2、-C(O)N(R10)2、-NHC(O)-R10、-NHS(O)2-R10、-S(O)2-R10、-OS(O)2-R10、-S(O)2-NH2、-S(O)2-N(R10)2、-OS(O)2-NH2、-OS(O)2-N(R10)2、-NHC(O)O-R10、-NHC(O)NH-R10、-NHC(O)N(R10)2、-NHC(O)NHSO2-R10、-NHC(O)-R10-N(R10)2、-NHC(O)CH(R10)(N(R9)2)或-NHC(O)-R10-NH2；每個(gè)R9獨(dú)立地為-H、取代或未取代的低級(jí)烷基、或取代或未取代的環(huán)烷基；每個(gè)R10獨(dú)立地為取代或未取代的低級(jí)烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的低級(jí)羥烷基、或R10和其所連接的氮原子形成取代或未取代的雜環(huán)、或適當(dāng)情況下R10為-H；R16和R17各自獨(dú)立地為-H或鹵素；和其中當(dāng)(1)X為吡啶、取代的吡啶、吡咯烷、咪唑、萘或噻吩；(2)Ra和Rb是H；和(3)R4為氫、硝基、氰基、三氟甲基、乙氧羰基、甲氧羰基、丙氧羰基、乙酰基、氨基甲酰基、乙酰氧基、羧基、羥基、氨基、低級(jí)烷基、低級(jí)亞烷基甲基、低級(jí)烷氧基、或鹵素時(shí)，如果R3或R5之一為H，則另一個(gè)不為-O-C1-10烷基、-O-C1-10單環(huán)烷基、-O-C1-10多環(huán)烷基、-O-C1-10苯并環(huán)烷基、-C0-3-C1-10烷基、-C0-3-C1-10單環(huán)烷基、-C0-3-C1-10多環(huán)烷基、-C0-3-C1-10苯并環(huán)烷基、-CH＝C1-10烷基、-CH＝C1-10單環(huán)烷基或-CH＝C1-10雙環(huán)烷基。
2.具有下式的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或水合物 其中X為取代或未取代的吲哚、取代或未取代的2，3-二氫苯并呋喃、取代或未取代的3，4-二氫-2H-苯并(b)(1，4)噁嗪、取代或未取代的1H-苯并(d)(1，2，3)三唑、取代或未取代的喹啉、取代或未取代的苯并呋喃、取代或未取代的苯并(d)噁唑-2(3H)酮或取代或未取代的嘧啶；R1和R2各自獨(dú)立地為-H、-CN、鹵素、取代或未取代的低級(jí)烷基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的炔基、-NHC(O)R9、-NHC(O)OR9、-COOH、-C(O)-低級(jí)烷基、-C(O)O-低級(jí)烷基、-C(O)-N(R9)2、取代或未取代的芳基、或取代或未取代的雜環(huán)；Ra和Rb各自獨(dú)立地為-H、取代或未取代的低級(jí)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜環(huán)、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的烷氧基、鹵素、氰基、-NO2、-OH、-OPO(OH)2、-N(R9)2、-OC(O)-R10、-OC(O)-R10-N(R10)2、-C(O)N(R10)2、-NHC(O)-R10、-NHS(O)2-R10、-S(O)2-R10、-S(O)2-NH2、-S(O)2-N(R10)2、-NHC(O)NH-R10、-NHC(O)N(R10)2、-NHC(O)NHSO2-R10、-NHC(O)-R10-N(R10)2、-NHC(O)CH(R10)(N(R9)2)或-NHC(O)-R10-NH2；R3為-H、取代或未取代的低級(jí)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜環(huán)、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的烷氧基、鹵素、氰基、-NO2、-OH、-OPO(OH)2、-N(R9)2、-OC(O)-R10、-OC(O)-R10-N(R10)2、-OC(O)-R10-NH2、-C(O)N(R10)2、-NHC(O)-R10、-NHS(O)2-R10、-S(O)2-R10、-OS(O)2-R10、-S(O)2-NH2、-S(O)2-N(R10)2、-OS(O)2-NH2、-OS(O)2-N(R10)2、-NHC(O)O-R10、-NHC(O)NH-R10、-NHC(O)N(R10)2、-NHC(O)NHSO2-R10、-NHC(O)-R10-N(R10)2、-NHC(O)CH(R10)(N(R9)2)或-NHC(O)-R10-NH2，或者R3與Ra或R4一起形成-O-C(R16R17)O-、-O-(C(R16R17))2-O-或-O-(C(R16R17))3-O-；R4為-H、取代或未取代的低級(jí)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜環(huán)、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的烷氧基、鹵素、氰基、-NO2、-OH、-OPO(OH)2、-N(R9)2、-OC(O)-R10、-OC(O)-R10-N(R10)2、-OC(O)-R10-NH2、-C(O)N(R10)2、-NHC(O)-R10、-NHS(O)2-R10、-S(O)2-R10、-OS(O)2-R10、-S(O)2-NH2、-S(O)2-N(R10)2、-OS(O)2-NH2、-OS(O)2-N(R10)2、-NHC(O)O-R10、-NHC(O)NH-R10、-NHC(O)N(R10)2、-NHC(O)NHSO2-R10、-NHC(O)-R10-N(R10)2、-NHC(O)CH(R10)(N(R9)2)或-NHC(O)-R10-NH2；R5為-H、取代或未取代的低級(jí)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜環(huán)、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的烷氧基、鹵素、氰基、-NO2、-OH、-OPO(OH)2、-N(R9)2、-OC(O)-R10、-OC(O)-R10-N(R10)2、-OC(O)-R10-NH2、-C(O)N(R10)2、-NHC(O)-R10、-NHS(O)2-R10、-S(O)2-R10、-OS(O)2-R10、-S(O)2-NH2、-S(O)2-N(R10)2、-OS(O)2-NH2、-OS(O)2-N(R10)2、-NHC(O)O-R10、-NHC(O)NH-R10、-NHC(O)N(R10)2、-NHC(O)NHSO2-R10、-NHC(O)-R10-N(R10)2、-NHC(O)CH(R10)(N(R9)2)或-NHC(O)-R10-NH2；每個(gè)R9獨(dú)立地為-H、取代或未取代的低級(jí)烷基、或取代或未取代的環(huán)烷基；每個(gè)R10獨(dú)立地為取代或未取代的低級(jí)烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的低級(jí)羥烷基，或者R10和其所連接的氮原子形成取代或未取代的雜環(huán)，或者在適當(dāng)情況下R10為-H；和R16和R17各自獨(dú)立地為-H或鹵素。
3.具有下述結(jié)構(gòu)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物或溶劑化物
4.權(quán)利要求1、2或3的化合物，其中所述化合物為E異構(gòu)體。
5.權(quán)利要求1、2或3的化合物，其中所述化合物為Z異構(gòu)體。
6.藥物組合物，該藥物組合物包含權(quán)利要求1或2的化合物和藥學(xué)上可接受的載體。
7.權(quán)利要求6的藥物組合物，其中所述組合物適于腸胃外、經(jīng)皮、粘膜、鼻、頰、直腸、舌下或口服給予個(gè)體。
8.抑制血管生成的方法，所述方法包括將有效量的權(quán)利要求1或2的化合物給予需要的個(gè)體。
9.抑制或降低細(xì)胞中微管蛋白聚合或微管蛋白穩(wěn)定性的方法，所述方法包括將細(xì)胞與權(quán)利要求1或2的化合物接觸。
10.權(quán)利要求9的方法，其中所述細(xì)胞為癌細(xì)胞。
11.抑制細(xì)胞中PDE4活性的方法，所述方法包括將細(xì)胞與權(quán)利要求1或2的化合物接觸。
12.抑制或降低細(xì)胞中微管蛋白聚合或微管蛋白穩(wěn)定性并抑制細(xì)胞中PDE4活性的方法，所述方法包括將細(xì)胞與權(quán)利要求1或2的化合物接觸。
13.抑制或降低細(xì)胞中微管蛋白聚合或微管蛋白穩(wěn)定性并抑制細(xì)胞中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)活性的方法，所述方法包括將細(xì)胞與權(quán)利要求1或2的化合物接觸。
14.治療或改善炎性病癥的方法，所述方法包括將有效量的權(quán)利要求1或2的化合物給予需要的個(gè)體。
15.權(quán)利要求14的方法，其中所述炎性病癥是哮喘、變應(yīng)性病癥、以1型介導(dǎo)的炎癥為特征的炎性病癥、以2型介導(dǎo)的炎癥為特征的炎性病癥、纖維化疾病、肺纖維化、銀屑病、多發(fā)性硬化、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、慢性梗阻性肺病(COPD)、腦炎、炎性腸病、克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)腸炎性病、缺血性再灌注損傷、痛風(fēng)、白塞氏病、膿毒性休克、未分化脊椎關(guān)節(jié)病、未分化關(guān)節(jié)病、關(guān)節(jié)炎、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(少年和成人)、骨關(guān)節(jié)炎、牛皮癬關(guān)節(jié)炎、炎性骨質(zhì)溶解、膿毒癥、腦膜炎和慢性病毒或細(xì)菌感染導(dǎo)致的慢性炎癥。
16.治療或改善癌癥的方法，所述方法包括將有效量的權(quán)利要求1或2的化合物給予需要的個(gè)體。
17.抑制癌細(xì)胞增殖的方法，所述方法包括將癌細(xì)胞與有效量的權(quán)利要求1或2的化合物接觸。
18.抑制對(duì)多種藥物具有耐藥性的癌細(xì)胞增殖的方法，所述方法包括將對(duì)多種藥物具有耐藥性的癌細(xì)胞與有效量的權(quán)利要求1或2的化合物接觸。
19.靶向、阻斷或破壞腫瘤血管系統(tǒng)的功能的方法，所述方法包括將腫瘤與有效量的權(quán)利要求1或2的化合物接觸。
20.靶向、阻斷或破壞腫瘤血管內(nèi)皮的方法，所述方法包括將腫瘤與有效量的權(quán)利要求1或2的化合物接觸。
21.靶向、阻斷或破壞腫瘤血管系統(tǒng)的功能并抑制腫瘤內(nèi)血管生成的方法，所述方法包括將腫瘤與有效量的權(quán)利要求1或2的化合物接觸。
22.治療或改善中樞神經(jīng)系統(tǒng)病癥的方法，所述方法包括將有效量的權(quán)利要求1或2的化合物給予需要的個(gè)體。
23.權(quán)利要求22的方法，其中所述中樞神經(jīng)系統(tǒng)病癥為帕金森氏病、運(yùn)動(dòng)徐緩、肌體強(qiáng)直、帕金森氏病樣震顫、帕金森氏病樣步態(tài)障礙、運(yùn)動(dòng)凍結(jié)(motion freezing)、抑郁癥、長(zhǎng)期記憶缺失、魯賓斯坦-泰比綜合征(RTS)、癡呆、睡眠障礙、姿勢(shì)不穩(wěn)、運(yùn)動(dòng)功能減退癥、炎癥、突觸核蛋白異常、多系統(tǒng)萎縮、紋狀體黑質(zhì)變性、橄欖體腦橋小腦萎縮、Shy-Drager綜合征、具有帕金森氏特征的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元疾病、路易小體癡呆、Tau病理病癥、進(jìn)行性核上性麻痹、皮質(zhì)基底核變性、額顳葉型癡呆、淀粉狀蛋白病變病癥、輕度認(rèn)知機(jī)能障礙、阿爾茨海默病、具有帕金森氏神經(jīng)機(jī)能障礙的阿爾茨海默病、可具有帕金森氏病特征的遺傳病癥、Wilson氏病、Hallervorden-Spatz疾病、Chediak-Hagashi疾病、SCA-3脊髓小腦性共濟(jì)失調(diào)、X-連鎖肌張力障礙帕金森氏綜合征、亨廷頓病、朊病毒病、運(yùn)動(dòng)過(guò)度癥、舞蹈病、顫搐、張力障礙性震顫、肌萎縮性脊髓側(cè)索硬化癥(ALS)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)創(chuàng)傷或肌陣攣。
24.治療或改善難以治愈的癌癥的方法，所述方法包括將有效量的權(quán)利要求1或2的化合物給予需要的個(gè)體。
25.權(quán)利要求24的方法，其中所述化合物為E異構(gòu)體。
26.權(quán)利要求24的方法，其中所述化合物為Z異構(gòu)體。
27.權(quán)利要求24的方法，其中所述癌癥用秋水仙堿、紫杉烷類(lèi)藥物(taxane)或長(zhǎng)春堿難以治愈。
28.權(quán)利要求權(quán)利要求16或24的方法，所述方法還包括將有效量的一種或多種其它抗癌劑給予所述個(gè)體。
29.權(quán)利要求28的方法，其中所述至少一種抗癌劑為紫杉醇、紫杉萜(taxotere)、順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、多柔比星、吉西他濱、卡培他濱、5-氟尿嘧啶、依托泊苷、環(huán)磷酰胺、長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春堿、托泊替康或伊立替康。
30.權(quán)利要求28的方法，其中所述至少一種抗癌劑為抗血管生成劑、血管靶向制劑、免疫調(diào)節(jié)劑或抗炎劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及取代的雜環(huán)化合物和包含取代的雜環(huán)化合物的組合物。本發(fā)明還涉及通過(guò)將一種或多種取代的雜環(huán)化合物給予需要它們的個(gè)體來(lái)預(yù)防或治療各種疾病或病癥的方法。本發(fā)明尤其涉及通過(guò)將一種或多種取代的雜環(huán)化合物給予需要它們的個(gè)體來(lái)預(yù)防或治療癌癥或炎性病癥的方法。本發(fā)明還涉及制造用物品和包括一種或多種取代的雜環(huán)化合物的試劑盒。
文檔編號(hào)C07D239/74GK101052630SQ200580037704
公開(kāi)日2007年10月10日 申請(qǐng)日期2005年8月31日 優(yōu)先權(quán)日2004年9月3日
發(fā)明者喬治·W·穆勒, 漢華·曼 申請(qǐng)人:細(xì)胞基因公司