專利名稱：用作治療愛滋病的人免疫缺陷病毒蛋白酶抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是關(guān)于下述式Ⅰ化合物及其藥學(xué)上適用的鹽，它們可抑制由人免疫缺陷病毒(HIV)1型(HIV-1)或2型(HIV-2)編碼的蛋白酶。所述化合物可用于治療或預(yù)防HIV感染或者治療或預(yù)防產(chǎn)生的獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)，即愛滋病。本發(fā)明化合物、它們的藥學(xué)上適用的鹽及本發(fā)明的藥用組合物可以單獨(dú)地應(yīng)用，或者與其他的抗病毒劑、免疫調(diào)節(jié)劑、抗菌素或疫苗合并使用。本發(fā)明公開了治療或預(yù)防愛滋病的方法、治療或預(yù)防HIV感染的方法以及抑制HIV復(fù)制的方法。
一種稱為人免疫缺陷病毒(HIV)的逆轉(zhuǎn)錄病毒是名為獲得性免疫缺陷綜合征的復(fù)雜疾病的致病因子，并且它是逆轉(zhuǎn)錄病毒慢病毒家族的一個(gè)成員。M.A.Gonda，F(xiàn).Wong-Staal，R.C.Gallo，“Sequence Homology and Morphological Similarity of HTLV III and Visna Virus，A Pathogenic Lentivirus”，Science，227，173，(1985);P.Sonigo，N.Alizon等，“Nucleotide Sequence of the Visna LentivirusRelationship to the AIDS Virus”，Cell，42，369，(1985)。復(fù)雜疾病愛滋病包括進(jìn)行性的免疫系統(tǒng)的破壞和中樞及外周神經(jīng)系統(tǒng)的變性。HIV病毒早先稱為或被認(rèn)為是LAV、HTLV-III或ARV。
逆轉(zhuǎn)錄病毒復(fù)制的一般特征是，由病毒編碼的蛋白酶對(duì)前體聚蛋白進(jìn)行翻譯后加工生成病毒裝配和作用所需要的成熟的病毒蛋白。打斷該過(guò)程看來(lái)可以阻止通常具有傳染性的病毒的產(chǎn)生。在從病人分離出的無(wú)傳染性的HIV株的克隆中也觀察到未加工的結(jié)構(gòu)蛋白。該結(jié)果提示，抑制HIV蛋白酶能為愛滋病的治療或預(yù)防，和/或治療或預(yù)防HIV感染提供一種可行的方法。
HIV基因組編碼稱為gag和pol的結(jié)構(gòu)蛋白前體，它們經(jīng)加工提供蛋白酶、逆轉(zhuǎn)錄酶和核酸內(nèi)切酶/剪接酶。這些蛋白酶進(jìn)一步切割gag和gag-pol聚蛋白，得到病毒核成熟的結(jié)構(gòu)蛋白。
人們盡了相當(dāng)大的努力用結(jié)構(gòu)蛋白前體控制HIV，結(jié)構(gòu)蛋白前體經(jīng)加工得到逆轉(zhuǎn)錄病毒蛋白酶、逆轉(zhuǎn)錄酶和核酸內(nèi)切酶/剪接酶。例如，現(xiàn)今應(yīng)用的治療藥AZT是病毒逆轉(zhuǎn)錄酶的抑制劑。H.Mitsuya，NS.Broder，“Inhibition of the In Vitro Infectivity in Cytopathic Effects of HTLV III”，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，83，1911(1986)。
人們的研究工作還針對(duì)HIV蛋白酶抑制劑方面。例如歐洲專利申請(qǐng)346847公開了一些化合物，據(jù)說(shuō)這些化合物可用作HIV蛋白酶抑制劑。
不幸的是許多已知的HIV蛋白酶抑制劑存在毒性問(wèn)題、缺乏生物利用度或在體內(nèi)半衰期短。尤其是由于該疾病的特點(diǎn)是慢性病，因此據(jù)信口服具有生物利用度是HIV蛋白酶抑制劑的必須具備的特點(diǎn)。但是眾所周知，肽和肽類似物不能經(jīng)口服吸收。因此，盡管已認(rèn)識(shí)到治療作用與蛋白酶抑制劑有關(guān)，并且研究工作迄今還在進(jìn)行，但是仍未找到可用的治療藥物。
因此，本發(fā)明的第一個(gè)目的是，提供可用于治療或預(yù)防HIV感染和/或治療或預(yù)防產(chǎn)生的獲得性免疫缺陷綜合征的新的HIV蛋白酶抑制劑。
本發(fā)明提供了式Ⅰ化合物及其藥學(xué)上適用的鹽
其中R和R0系獨(dú)立地選自氫、C1-C6烷基、芳基(C1-C4)烷基、雜環(huán)(C1-C4)烷基或不飽和的雜環(huán)(C1-C4)烷基;或者R和R0與它們所連接的氮原子一起形成一雜環(huán)或不飽和的雜環(huán)，條件是該氮原子不被季銨化;
Z是具有下述結(jié)構(gòu)的基團(tuán)
q為0、1、2、3或4;
r為0、1、2或3;
s為0、1或2;
R2為氫、鹵素、C1-C6烷基、芳基(C1-C4)烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、氨基、C1-C4烷氨基、二(C1-C4)烷氨基、氨基甲?；騈-(C1-C4)烷基氨基甲?；?
R1為芳基、雜環(huán)、不飽和的雜環(huán)、C5-C7環(huán)烷基或-S-R1a，這里R1a為芳基、雜環(huán)、不飽和的雜環(huán)或C5-C7環(huán)烷基;
X是具有下述結(jié)構(gòu)的基團(tuán)，
Y為芳基或不飽和的雜環(huán);
Y1為雜環(huán);
R3a為具有下述結(jié)構(gòu)的基團(tuán)，1)-C(O)-NR4R4，
R3b為具有下述結(jié)構(gòu)的基團(tuán)，
p為4或5;
l為3、4或5;
各個(gè)R4獨(dú)立地為氫、C1-C6烷基或羥基(C1-C4)烷基;
R5和R6系獨(dú)立地選自氫、羥基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、氨基、C1-C4烷氨基、羥基(C1-C4)烷基、羧基、C1-C4烷氧基羰基、氨基甲?；?、N-(C1-C4)烷基氨基甲?；?、芳基、雜環(huán)或不飽和的雜環(huán)。
本文中敘述的所有溫度是指攝氏度(℃)。除了液體以體積單位表示外，本申請(qǐng)中應(yīng)用的所有度量單位均以重量單位表示。
這里所應(yīng)用的術(shù)語(yǔ)“C1-C6烷基”是指有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的烷基。常用的C1-C6烷基包括甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、新戊基、己基等。在術(shù)語(yǔ)“C1-C6”烷基的定義中包括術(shù)語(yǔ)“C1-C4”烷基。
“鹵素”是指氯、氟、溴或碘。
“鹵素(C1-C4)烷基”是指有1-4個(gè)碳原子并有1-3個(gè)鹵原子與其連接的直鏈或支鏈烷基。常用的鹵素(C1-C4)烷基包括氯甲基、2-溴甲基、1-氯異丙基、3-氟丙基、2，3-二溴丁基、3-氯異丁基、碘-叔丁基、三氟甲基等。
“羥基(C1-C4)烷基”是指有1-4個(gè)碳原子并有一羥基與其連接的直鏈或支鏈的烷基。常用的羥基(C1-C4)烷基包括羥甲基、2-羥基乙基、3-羥基丙基、2-羥基異丙基、4-羥基丁基等。
“C1-C6烷硫基”是指有1-6個(gè)碳原子并有一硫原子與其連接的直鏈或支鏈的烷基。常用的C1-C6烷硫基包括甲硫基、乙硫基、丙硫基、異丙硫基、丁硫基、仲丁硫基、叔丁硫基、戊硫基、己硫基等。
“C1-C4烷氨基”是指有1-4個(gè)碳原子并有一氨基與其連接的直鏈或支鏈的烷基。常用的C1-C4烷氨基包括甲氨基、乙氨基、丙氨基、異丙氨基、丁氨基、仲丁氨基等。
“二(C1-C4)烷氨基”是指各有1-4個(gè)碳原子并有一公用氨基的兩個(gè)直鏈或支鏈的烷基。常用的二(C1-C4)烷氨基包括二甲氨基、乙基甲基氨基、甲基丙基氨基、乙基異丙基氨基、丁基甲基氨基、仲丁基乙基氨基等。
“C1-C6烷氧基”是指有1-6個(gè)碳原子并有一氧原子與其連接的直鏈或支鏈的烷基。常用的C1-C6烷氧基包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、己氧基等。在術(shù)語(yǔ)“C1-C6烷氧基”中包括術(shù)語(yǔ)“C1-C4烷氧基”。
“C1-C4烷氧基羰基”是指有1-4個(gè)碳原子并有一羰基與其連接的直鏈或支鏈的烷氧基。常用的C1-C4烷氧基羰基包括甲氧基羰基、乙氧基羰基、丙氧基羰基、異丙氧基羰基、丁氧基羰基等。
“N-(C1-C4)烷基氨基甲?；笔侵赣?-4個(gè)碳原子并有氨基甲酰基的氮原子與其連接的直鏈或支鏈的烷基。常用的N-(C1-C4)烷基氨基甲?；∟-甲基氨基甲?；-乙基氨基甲?；?、N-丙基氨基甲?；?、N-異丙基氨基甲?；?、N-丁基氨基甲?；蚇-叔丁基氨基甲?；?。
“C5-C7環(huán)烷基”是指含5-7個(gè)碳原子的飽和烴環(huán)結(jié)構(gòu)，它可以是未被取代的，或者由1、2或3個(gè)獨(dú)立地選自以下的取代基取代鹵素、鹵素(C1-C4)烷基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、羧基、C1-C4烷氧基羰基、氨基甲?；-(C1-C4)烷基氨基甲?；?、氨基C1-C4烷氨基、二(C1-C4)烷氨基或有-(CH2)a-R7結(jié)構(gòu)的基團(tuán)，這里a為1、2、3或4;R7為羥基、C1-C4烷氧基、羧基、C1-C4烷氧基羰基、氨基、氨基甲酰基、C1-C4烷氨基或二(C1-C4)烷氨基。常用的環(huán)烷基包括環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、3-甲基環(huán)戊基、4-乙氧基環(huán)己基、5-羧基環(huán)庚基、6-氯環(huán)己基等。
術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)”是指穩(wěn)定的未被取代或取代的五至七元單環(huán)或七至十元雙環(huán)雜環(huán)，它們可以是飽和的，并且由碳原子和1-3個(gè)選自氮、氧或硫的雜原子組成，這里雜原子氮和硫可以任意地被氧化，雜原子氮也可以任意地被季銨化，并且所述雜環(huán)還包括其中以上定義的任一雜環(huán)與苯環(huán)稠合的雙環(huán)基。所述雜環(huán)可以連接在任一能提供穩(wěn)定結(jié)構(gòu)的雜原子或碳原子上。所述雜環(huán)可以是未被取代的、或者由1、2或3個(gè)獨(dú)立地選自以下的取代基取代鹵素、鹵素(C1-C4)烷基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、羧基、C1-C4烷氧基羰基、氨基甲?；-(C1-C4)烷基氨基甲?；被1-C4烷氨基、二(C1-C4)烷氨基或有-(CH2)a-R7結(jié)構(gòu)的基團(tuán)，這里a為1、2、3或4，R7為羥基、C1-C4烷氧基、羧基、C1-C4烷氧基羰基氨基、氨基甲?；?、C1-C4烷氨基或二(C1-C4)烷氨基。
術(shù)語(yǔ)“不飽和的雜環(huán)”是指有1或多個(gè)雙鍵并且由碳原子和選自以下1-3個(gè)雜原子組成的穩(wěn)定的未被取代或取代的五至七元單環(huán)或七至十元雙環(huán)雜環(huán)，雜原子系選自氮、氧或硫，并且其中雜原子氮和硫可以任意地被氧化，雜原子氮也可以任意地被季銨化，所述不飽和的雜環(huán)還包括其中以上定義的任一雜環(huán)與苯環(huán)稠合的雙環(huán)基。不飽和的雜環(huán)可以與能提供穩(wěn)定結(jié)構(gòu)的任一雜原子或碳原子相連。該不飽和的雜環(huán)是未被取代的，或由獨(dú)立地選自以下1、2或3個(gè)取代基取代鹵素、鹵素(C1-C4)烷基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、羧基、C1-C4烷氧基羰基、氨基甲?；?、N-(C1-C4)烷基氨基甲酰基、氨基、C1-C4烷氨基、二(C1-C4)烷氨基或具有結(jié)構(gòu)式-(CH2)a-R7的基團(tuán)，這里a為1、2、3或4，R7為羥基、C1-C4烷氧基、羧基、C1-C4烷氧基羰基、氨基、氨基甲?；?、C1-C4烷氨基或二(C1-C4)烷氨基。
上述雜環(huán)和不飽和的雜環(huán)的實(shí)例包括哌啶基、哌嗪基、氮雜
基、吡咯基、吡咯烷基、吡唑基、吡唑烷基、咪唑基、咪唑啉基、咪唑烷基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、噁唑基、噁唑烷基、異噁唑基、異噁唑烷基、嗎啉基、噻唑基、噻唑烷基、異噻唑基、奎寧環(huán)基、異噻唑烷基、吲哚基、喹啉基、異喹啉基、苯并咪唑基、噻二唑基、苯并吡喃基、苯并噻唑基、苯并吡咯基、呋喃基、四氫呋喃基、四氫吡喃基、噻吩基、苯并噻吩基、硫雜嗎啉基、硫雜嗎啉基-亞砜、硫雜嗎啉基-砜、噁二唑基、三唑基、四氫喹啉基、四氫異喹啉基、3-甲基咪唑基、3-甲氧基吡啶基、4-氯喹啉基、4-氨基噻唑基、8-甲基喹啉基、6-氯喹喔啉基、3-乙基吡啶基、6-甲氧基苯并咪唑基、4-羥基呋喃基、4-甲基異喹啉基、6，8-二溴喹啉基、4，8-二甲基萘基、2-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉基、N-甲基-喹啉-2-基、2-叔丁氧基羰基-1，2，3，4-四氫異喹啉-7-基等。
“雜環(huán)(C1-C4)烷基”是指有1-4個(gè)碳原子并有一雜環(huán)基與其相連的直鏈或支鏈烷基?！安伙柡偷碾s環(huán)(C1-C4)烷基”是指有1-4個(gè)碳原子并有一不飽和的雜環(huán)與其相連的直鏈或支鏈的烷基。常用雜環(huán)(C1-C4)烷基和不飽和雜環(huán)(C1-C4)烷基包括吡咯基甲基、喹啉基甲基、1-吲哚基乙基、2-呋喃基乙基、3-噻吩-2-基丙基、1-咪唑基異丙基、4-噻唑基丁基等。
“芳基”是指由獨(dú)立地選自以下的1、2或3個(gè)取代基任意取代的苯基或萘基環(huán)，取代基系選自鹵素、嗎啉代(C1-C4)烷氧基羰基、吡啶基(C1-C4)烷氧基羰基、鹵素(C1-C4)烷基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、羧基、C1-C4烷氧基羰基、氨基甲酰基、N-(C1-C4)烷基氨基甲酰基、氨基、C1-C4烷氨基、二(C1-C4)烷氨基或式-(CH2)a-R7基團(tuán)，這里a為1、2、3或4，R7為羥基、C1-C4烷氧基、羧基、C1-C4烷氧基羰基、氨基、氨基甲?；?、C1-C4烷氨基或二(C1-C4)烷氨基。
“芳基(C1-C4)烷基”是指有1-4個(gè)碳原子并有一芳基與其相連的直鏈或支鏈烷基。常用的芳基(C1-C4)烷基包括苯基甲基、2-苯基乙基、3-萘基丙基、1-萘基異丙基、4-苯基丁基等。
本文中所用的術(shù)語(yǔ)“氨基保護(hù)基”是指當(dāng)化合物上的其他官能團(tuán)進(jìn)行反應(yīng)時(shí)，通常用于屏蔽或保護(hù)氨基官能團(tuán)的氨基取代基。所述氨基保護(hù)基的實(shí)例包括甲?；?、三苯甲基、苯二甲酰亞氨基、三氯乙?；?、氯乙酰基、溴乙酰基、碘乙酰基、或氨基甲酸乙酯類型的保護(hù)基團(tuán)，如芐氧基羰基、4-苯基芐氧基羰基、2-甲基芐氧基羰基、4-甲氧基芐氧基羰基、4-氟芐氧基羰基、4-氯芐氧基羰基、3-氯芐氧基羰基、2-氯芐氧基羰基、2，4-二氯芐氧基羰基、4-溴芐氧基羰基、3-溴芐氧基羰基、4-硝基芐氧基羰基、4-氰基芐氧基羰基、2-(4-聯(lián)苯基)異丙氧基羰基、1，1-二苯基乙-1-基氧羰基、1，1-二苯基丙-1-基氧羰基、2-苯基丙-2-基氧羰基、2-(對(duì)甲苯甲?；?丙-2-基氧羰基、環(huán)戊烷基氧羰基、1-甲基環(huán)戊烷基氧羰基、環(huán)己烷基氧羰基、1-甲基環(huán)己烷基氧羰基、2-甲基環(huán)己烷基氧羰基、2-(4-甲苯甲?；酋；?乙氧基羰基、2-(甲基磺酰基)乙氧基羰基、2-(三苯膦)乙氧基羰基、芴基甲氧基羰基(“FMOC”)、2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基、烯丙氧基羰基、1-(三甲基硅烷基甲基)丙-1-烯基氧羰基、5-苯并異唑基甲氧基羰基、4-乙酰氧基芐氧基羰基、2，2，2-三氯乙氧基羰基、2-乙炔基-2-丙氧基羰基、環(huán)丙基甲氧基羰基、4-(癸氧基)芐氧基羰基、異冰片基氧羰基、1-哌啶基氧羰基等，或者為苯甲?；谆酋；?、2-硝基苯基亞磺?；⒀趸交⒁约邦愃频陌被Ｗo(hù)基。應(yīng)用的氨基保護(hù)基的種類并不嚴(yán)格，只要該衍生的氨基對(duì)中間體分子其他位置的反應(yīng)條件是穩(wěn)定的，并且在適當(dāng)?shù)臅r(shí)候能夠有選擇地脫去而不破壞分子的其余部分(包括任何其他的氨基保護(hù)基)即可。優(yōu)選的氨基保護(hù)基有叔丁氧基羰基(t-Boc)和芐氧基羰基(CbZ)。適用于上述術(shù)語(yǔ)的其他基團(tuán)的實(shí)例見J.W.Barton，“Protective Groups in Organic Chemistry”，J.G.W.McOmie，Ed.，Plenum Press，New York，N.Y.，1973，Chapter 2，and T.W.Greene，“Protective Groups in Organic Synthesis”，John Wiley and Sons，New York，N.Y.，1981，Chapter 7。
本文中所用的術(shù)語(yǔ)“羧基保護(hù)基”是指當(dāng)化合物上的其他官能團(tuán)進(jìn)行反應(yīng)時(shí)，通常用于屏蔽或保護(hù)羧基官能團(tuán)的羧基的取代基。所述羧基保護(hù)基的實(shí)例包括甲基、對(duì)硝基芐基、對(duì)甲基芐基、對(duì)甲氧基芐基、3，4-二甲氧基芐基、2，4-二甲氧基芐基、2，4，6-三甲氧基芐基、2，4，6-三甲基芐基、五甲基芐基、3，4-亞甲基-二氧芐基、二苯甲基、4，4′-二甲氧基二苯甲基、2，2′，4，4′-四甲氧基二苯甲基、叔丁基、叔戊基、三苯甲基、4-甲氧基三苯甲基、4，4′-二甲氧基三苯甲基、4，4′，4″-三甲氧基三苯甲基、2-苯基丙-2-基、三甲基硅烷基、叔丁基二甲基硅烷基、苯甲酰甲基、2，2，2-三氯乙基、β-(二(正丁基)甲基硅烷基)乙基、對(duì)甲苯磺?；一?-硝基芐基磺?；一⑾┍?、肉桂基、1-(三甲基硅烷基甲基)丙-1-烯-3-基等。優(yōu)選的羧基保護(hù)基是二苯甲基。上述基團(tuán)的其他實(shí)例可以在以下書中找到E.Haslam，“Protective Groups in Organic Chemistry”，J.G.W.McOmie，Ed.，Plenum Press，New York，N.Y.，1973，Chapter 5，and T.W.Greene，“Protective Groups in Organic Sythesis”，John Wiley and Sons，New York，N.Y.，1981，Chapter 5。
本發(fā)明化合物至少有兩個(gè)不對(duì)稱中心，它們?cè)谙率街幸孕翘?hào)表示，
由于上述不對(duì)稱中心，因此本發(fā)明化合物能夠以非對(duì)映異構(gòu)體的混合物形式、外消旋混合物以及各個(gè)單一對(duì)映體的形式出現(xiàn)。所有的不對(duì)稱形式、各個(gè)單一異構(gòu)體及其它們的組合物均在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
如以上所述，本發(fā)明包括式Ⅰ所定義化合物的藥學(xué)上適用的鹽。雖然本發(fā)明化合物通常為中性，但是本發(fā)明化合物具有充足的酸性基團(tuán)、堿性基團(tuán)或兩性的官能團(tuán)，因此它可以與許多無(wú)機(jī)堿、無(wú)機(jī)和有機(jī)酸反應(yīng)，形成藥學(xué)上適用的鹽。
本文中所用的術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上適用的鹽”是指上式化合物的鹽，該鹽對(duì)活的有機(jī)體實(shí)質(zhì)上是無(wú)毒的。常用的藥學(xué)上適用的鹽包括通過(guò)本發(fā)明化合物與無(wú)機(jī)或有機(jī)酸或者與無(wú)機(jī)堿反應(yīng)制得的鹽。該鹽稱作為酸加成鹽或堿加成鹽。
形成酸加成鹽通常應(yīng)用的酸包括無(wú)機(jī)酸，例如鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、磷酸等，有機(jī)酸，例如對(duì)甲苯磺酸、甲磺酸、草酸、對(duì)溴苯磺酸、碳酸、琥珀酸、檸檬酸、苯甲酸、乙酸等。
上述藥學(xué)上適用的鹽的實(shí)例有硫酸鹽，焦硫酸鹽、硫酸氫鹽、亞硫酸鹽、亞硫酸氫鹽、磷酸鹽、磷酸一氫鹽、磷酸二氫鹽、偏磷酸鹽、焦磷酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸鹽、丙酸鹽、癸酸鹽、辛酸鹽、丙烯酸鹽、甲酸鹽、異丁酸鹽、己酸鹽、庚酸鹽、丙炔酸鹽、草酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸鹽、辛二酸鹽、癸二酸鹽、富馬酸鹽、馬來(lái)酸鹽、丁炔-1，4-二酸鹽、己炔-1，6-二酸鹽、苯甲酸鹽、氯苯甲酸鹽、甲基苯甲酸鹽、二硝基苯甲酸鹽、羥基苯甲酸鹽、甲氧基苯甲酸鹽、鄰苯二甲酸鹽、磺酸鹽、二甲苯磺酸鹽、苯乙酸鹽、苯丙酸鹽、苯丁酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、γ-羥基丁酸鹽、羥基乙酸鹽、酒石酸鹽、甲磺酸鹽、丙磺酸鹽、萘-1-磺酸鹽、萘-2-磺酸鹽、扁桃酸鹽等。優(yōu)選的藥學(xué)上適用的酸加成鹽是與無(wú)機(jī)酸如鹽酸和氫溴酸形成的鹽，以及與有機(jī)酸如馬來(lái)酸和甲磺酸形成的鹽。
堿加成鹽包括由無(wú)機(jī)堿如氫氧化銨、或堿金屬或堿土金屬氫氧化物、碳酸鹽、碳酸氫鹽等得到的堿加成鹽。因此用于制備本發(fā)明該類鹽的上述堿包括氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化銨、碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、氫氧化鈣、碳酸鈣等。尤其優(yōu)選鉀和鈉鹽形式。
應(yīng)該認(rèn)識(shí)到，形成本發(fā)明任一鹽部分的具體相反離子不是關(guān)鍵性的，只要該鹽作為一個(gè)整體來(lái)說(shuō)是藥學(xué)上適用的，以及作為一個(gè)整體來(lái)說(shuō)只要該相反離子不將非所要求的性質(zhì)提供給鹽。
本發(fā)明優(yōu)選的化合物是下述式Ⅰ化合物及其藥學(xué)上適用的鹽，其中Z為
R1為芳基或-S-Rla，其中Rla為芳基，R2為氫或C1-C6烷基，q為0或1，X為
R3a為-C(O)-NR4R4，其中R4的定義同上。
在上述優(yōu)選化合物中，更優(yōu)選的是下述化合物及其藥學(xué)上適用的鹽，其中Y為苯基，Y1為十氫-(4aS，8aS)-異喹啉基，R3為-C(O)NH(叔丁基)。
在上述優(yōu)選化合物中，特別優(yōu)選的是下述化合物及其藥學(xué)上適用的鹽，其中R和R0與它們所連接的氮原子一起形成雜環(huán)或不飽和的雜環(huán)，條件是該氮原子不被季銨化。
最優(yōu)選的化合物是下述化合物及其藥學(xué)上適用的鹽， -N-[1′-氧代-1′-(3″-[1″′-氧代-2″′-氮雜-3″′苯基甲基-4″′-羥基-5″′-(2″″-N-叔丁基脲基)苯基]戊基-4″-甲基)苯基]甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉; -2-[2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′，2″′，3″′，4″′-四氫異喹啉-2-″′-基羰基]-6″-甲基)苯基]戊基-十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺;以及 -2-[2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′-氧代-2″′-N-甲基氮雜-3″′-喹啉-2″″-基丙基]-6″-甲基)苯基]戊基-十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺。
提供下列化合物及其藥學(xué)上適用的鹽，以便進(jìn)一步解釋本發(fā)明范圍內(nèi)的式Ⅰ化合物[3″′S-(3″′R＊，4″′S＊)]-N-[1′-氧代-1′-(3″-[1″′-氧代-2″′-氮雜-3″′-苯基甲基-4″′-羥基-5″′-(2″″-N-叔丁基脲基)苯基]戊基-4″-溴]苯基)甲基]-1，2，3，4-四氫異喹啉;-N-[1′-氧代-1′-(3″-[1″′-氧代-2″′-氮雜-3″′-萘基甲基-4″′-羥基-5″′-(2″″-N-叔丁基脲基)苯基]戊基-4″-甲基]苯基)甲基]-1，2，3，4-四氫異喹啉;-N-[1′-氧代-1′-(3″-[1″′-氧代-2″′-氮雜-3″′-萘硫基甲基-4″′-羥基-5″′-(2″″-N-叔丁基脲基)苯基]戊基-4″-甲基]苯基)甲基]-1，2，3，4-四氫異喹啉;-N-[1′-氧代-1′-(3″-[1″′-氧代-2″′-氮雜-3″′-苯基甲基-4″′-羥基-5″′-(2″″-N-叔丁基脲基)苯基]戊基-4″-甲氧基]苯基)甲基]-1，2，3，4-四氫異喹啉;-N-[1′-氧代-1′-(3″-[1″′-氧代-2″′-氮雜-3″′-苯基甲基-4″′-羥基-5″′-(2″″-N-叔丁基脲基)苯基]戊基-4″-甲硫基]苯基)甲基]-1，2，3，4-四氫異喹啉;-N-[1′-氧代-1′-(3″-[1″′-氧代-2″′-氮雜-3″′-環(huán)己基甲基-4″′-羥基-5″′-(2″″-N-叔丁基脲基)苯基]戊基-4″-甲硫基]苯基)甲基]-1，2，3，4-四氫異喹啉;-N-[1′-氧代-1′-(3″-[1″′-氧代-2″′-氮雜-3″′-苯基甲基-4″′-羥基-5″′-(2″″-N-叔丁基脲基)苯基]戊基-4″-氨基]苯基)甲基]-1，2，3，4-四氫異喹啉;-N-[1′-氧代-1′-(3″-[1″′-氧代-2″′-氮雜-3″′-苯基甲基-4″′-羥基-5″′-(2″″-N-叔丁基脲基)苯基]戊基-4″-氨基甲酰]苯基)甲基]-1，2，3，4-四氫異喹啉;-2-[2′-羥基-3′-萘-2-基硫甲基-4-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′，2″′，3″′，4″′-四氫異喹啉-2″′-基羰基]-6″-甲基)苯基]-戊基十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺;-2-[2′-羥基-3′-苯硫基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′，2″′，3″′，4″′-四氫異喹啉-2″′-基羰基]-6″-甲基)苯基]戊基十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺;-2-[2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-(8″′-甲基-1″′，2″′，3″′，4″′-四氫異喹啉-2″′-基羰基]-6″-甲基)苯基]戊基十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺;-2-[2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′，2″′，3″′，4″′-四氫異喹啉-2-″′-基羰基]-6″-氯)苯基]戊基十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺;-2-[2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-(1″′，2″′，3″′，4″′-四氫異喹啉-2″′-基羰基)-6″-甲氧基)苯基]-戊基十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺;-2-[2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-(1″′，2″′，3″′，4″′-四氫異喹啉-2″′-基羰基)-6″-三氟甲基)苯基]戊基十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺;-2-[2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-(1″′，2″′，3″′，4″′-四氫異喹啉-2-″′-基羰基)-6″-甲硫基)苯基]戊基十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺;-2-[2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′-氧代-2″′-N-甲基氮雜-3″′喹啉-2″″-基丙基]-6″-溴)苯基]戊基十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺;-2-[2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′-氧代-2″′-N-甲基氮雜-3″′-喹啉-2″″-基丙基]-6″-乙氧基)苯基]戊基十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺;-2-[2′-羥基-3′-萘-1-基硫甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′-氧代-2″′-N-甲基氮雜-3″′-喹啉-2″″-基丙基]-6″-溴)苯基]戊基十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺;-2-[2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′-氧代-2″′-N-乙基氮雜-3″′-喹啉-2″″-基丙基]-6″-溴)苯基]戊基十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺;-2-[2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′-氧代-2″′-N-甲基氮雜-4″′-喹啉-2″″-基丁基]-6″-溴)苯基]戊基十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺;-2-[2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′-氧代-2″′-N-甲基氮雜-3″′-喹啉-8″″-基丙基]-6″-甲基)苯基]戊基十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺;-2-[2′-羥基-3′-萘-2-基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′-氧代-2″′-N-甲基氮雜-3″′-喹啉-2″″-基丙基]-6″-溴)苯基]戊基十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺;-2-[2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′-氧代-2″′-氮雜-3″′-喹啉-2″″-基丙基]-6″-溴)苯基]戊基十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺;-2-[2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′-氧代-2″′-氮雜-3″′-萘-2″″-基丙基]-6″-甲基)苯基]戊基十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺;-2-[2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-(1″′-氧代-2″′-氮雜-3″′萘-2″″-基)丙基-6″-甲基)苯基]戊基-N-叔丁基苯甲酰胺;-2-[2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-(1″′-氧代-2″′-N-甲基氮雜-3″′-喹啉-2″″-基)丙基-6″-甲基)苯基]戊基-N-叔丁基苯甲酰胺;-2-[2′-羥基-3′-萘基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-(1″′-氧代-2″′-N-甲基氮雜-3″′-喹啉-2″″-基)丙基-6″-甲基)苯基]戊基-N-叔丁基苯甲酰胺;-2-[2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-(1″′-氧代-2″′-N-甲基氮雜-3″′-(8″″-甲基喹啉-2″″-基))丙基-6″-甲基)苯基]戊基-N-叔丁基苯甲酰胺;-2-[2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-(1″′-氧代-2″′-氮雜-3″′-喹啉-2″″-基)丙基-6″-氯)苯基]戊基-N-叔丁基苯甲酰胺;-2-[2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-(1″′-氧代-2″′-氮雜-3″′-喹喔啉-2″″-基)丙基-6″-甲基)苯基]戊基-N-叔丁基苯甲酰胺;-2-[2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-(1″′-氧代-2″′-氮雜-3″′-萘-2″″-基)丙基-6″-甲基)苯基]戊基-4-甲基-N-叔丁基苯甲酰胺;-2-[2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-(1″′-氧代-2″′-N-甲基氮雜-3″′-吡啶-2″″-基)丙基-6″-甲基)苯基]戊基-N-叔丁基苯甲酰胺;-2-[2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-(1″′-氧代-2″′-氮雜-3″′-喹啉-2″″-基)丙基-6″-甲基)苯基]戊基-N-叔丁基脯氨酰胺;-2-[2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-(1″′-氧代-2″′-N-甲基氮雜-3″′-吡啶-2″″-基丙基-6″-甲基)苯基]戊基-十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺;-2-[2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-(1″′-氧代-2″′-N-甲基氮雜-3″′-吡啶-3″″-基)丙基-6″-甲基)苯基]戊基-N-叔丁基甲酰胺;-2-[2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-(1″′-氧代-2″′-N-甲基氮雜-3″′-吡啶-4″″-基)丙基-6″-甲基)苯基]戊基-N-叔丁基苯甲酰胺;-2-[2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-(1″′-氧代-2″′-N-甲基氮雜-3″′-苯基)丙基-6″-甲基)苯基]戊基-N-叔丁基苯甲酰胺;-2-[2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-(1″′-氧代-2″′-N-甲基氮雜-3″′-萘-2″″-基)丙基-6″-甲基)苯基]戊基-N-叔丁基苯甲酰胺。
式Ⅰ化合物可以按下述反應(yīng)式Ⅰ制備。
反應(yīng)式Ⅰ
其中R、R0、R1、X和Z的定義同上。
反應(yīng)式Ⅰ是通常用于合成肽的一般性的偶合反應(yīng)，它可以按下法進(jìn)行使合適的取代胺式ⅠA與合適的反應(yīng)物取代羧酸式ⅠB或其活性衍生物于非質(zhì)子傳遞溶劑或溶劑混合物中反應(yīng)。反應(yīng)最好在偶合試劑存在下進(jìn)行。該反應(yīng)常用的非質(zhì)子傳遞溶劑是四氫呋喃和二甲基甲酰胺，最好是所述溶劑的混合液。反應(yīng)在約-30℃至約25℃進(jìn)行。相對(duì)于反應(yīng)物羧酸，通常應(yīng)用等摩爾比例的反應(yīng)物胺，而所用的偶合劑為等摩爾量至稍微過(guò)量。常用的偶合劑包括碳二亞胺類;如二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)和N，N′-二乙基碳二亞胺;咪唑類，如羰基二咪唑;以及試劑如雙(2-氧-3-唑烷基)膦酰氯(Bop-Cl)或N-乙氧基羰基-2-乙氧基-1，2-二氫喹啉(EEDQ)。該反應(yīng)較好的偶合劑是DCC。該反應(yīng)還可以包括增進(jìn)劑，較好的增進(jìn)劑為羥基苯并三唑水合物(HOBT·H2O)。
在反應(yīng)完成后，如果需要，可以用本技術(shù)領(lǐng)域已知的方法將化合物進(jìn)行分離，例如可以將化合物結(jié)晶，然后過(guò)濾收集，或者可以進(jìn)行萃取、蒸發(fā)或傾析除去反應(yīng)溶劑。如果需要，可以用一般的技術(shù)如結(jié)晶或在固體載體(如硅膠或氧化鋁)上層析使化合物進(jìn)一步純化。
其中X為下式基團(tuán)的式ⅠA化合物可以按下面反應(yīng)式A所示方法進(jìn)行制備
其中Rb為氨基保護(hù)基，R1、R3a和Y的定義同上。
上面反應(yīng)式A可以按1-6反應(yīng)順序完成。在一個(gè)反應(yīng)完成之后，如果需要，可通過(guò)本技術(shù)領(lǐng)域已知的方法將中間體化合物進(jìn)行分離，例如可以將化合物結(jié)晶，然后過(guò)濾收集，或者可以通過(guò)萃取、蒸發(fā)或傾析除去反應(yīng)溶劑。在進(jìn)行下一步反應(yīng)之前，如果需要，可以用一般的技術(shù)如結(jié)晶或在固體載體(如硅膠或氧化鋁)上進(jìn)行層析，將中間體化合物進(jìn)一步純化。
在反應(yīng)式A.1中，反應(yīng)一般進(jìn)行活化，即按照本技術(shù)領(lǐng)域已知的方法和已知的條件，通過(guò)與亞硫酰氯、亞硫酰溴、三氯化磷、三溴化磷、五溴化磷或五氯化磷反應(yīng)，將適當(dāng)取代的芳基或不飽和的雜環(huán)羧酸轉(zhuǎn)變?yōu)橄鄳?yīng)的?；然蝓；?。合適的芳基、雜環(huán)或不飽和的雜環(huán)羧酸類化合物是市場(chǎng)上可以買得到的，或者可以用本技術(shù)領(lǐng)域已知的一般方法制得。
在反應(yīng)式A.2中，將反應(yīng)式A.1中制得的?；然蝓；逵诜菢O性的非質(zhì)子傳遞溶劑或溶劑混合物中，在有酸消除劑或無(wú)酸清除存在下與氨或具有下式的伯胺或仲胺反應(yīng)，得到相應(yīng)的酰胺
H-NR4R4，
其中R4、R5、R6和p與上述式Ⅰ中的定義相同。反應(yīng)通常在約-20℃～約25℃進(jìn)行。該反應(yīng)常用的試劑包括醚類和氯代烴類，最好是乙醚、氯仿或二氯甲烷。該反應(yīng)最好在酸消除劑如叔胺(三乙胺較好)存在下進(jìn)行。
在反應(yīng)式A.3中，將反應(yīng)A.2中制備的酰胺與強(qiáng)堿于加溶劑存在在下進(jìn)行反應(yīng)，得到相應(yīng)的陰離子，然后在反應(yīng)A.4中使其與Wein-reb酰胺反應(yīng)，得到酮。反應(yīng)A.3在非質(zhì)子傳遞溶劑中于約-78℃～約0℃進(jìn)行。反應(yīng)A.3中常用的堿包括氨基化鋰和烷基鋰，最好是C1-C4烷基鋰和二(C1-C4)烷基氨基化鋰。反應(yīng)了常用的加溶劑為四甲基(C1-C4)亞烷基二胺，最好為四甲基二乙胺。反應(yīng)A.4在非質(zhì)子傳遞溶劑中于約-80℃～約-40℃進(jìn)行。反應(yīng)A.3和A.4常用的溶劑包括醚類，最好為四氫呋喃。在反應(yīng)A.4中，相對(duì)于Weinreb酰胺反應(yīng)物，陰離子一般應(yīng)用的量在約等摩爾比例～約過(guò)量3摩爾的范圍內(nèi)，最好陰離子過(guò)量約2摩爾。
在反應(yīng)式A.5中，用合適的還原劑將反應(yīng)A.4中得到的酮還原為相應(yīng)的醇。反應(yīng)在質(zhì)子溶劑中于約-25℃～約25℃進(jìn)行。該反應(yīng)常用的還原劑包括硼氫化鈉、硼氫化鋰、氫化二異丁基鋁和氫化雙(2-甲氧基乙氧基)鈉鋁。較好的還原劑是硼氫化鈉。該反應(yīng)常用的質(zhì)子溶劑包括醇類，最好是乙醇。
反應(yīng)A.6是一般的氨基脫保護(hù)反應(yīng)，可按本技術(shù)領(lǐng)域中已知的方法進(jìn)行，得到用于上述反應(yīng)式Ⅰ相應(yīng)的胺。該胺可以不經(jīng)純化進(jìn)行反應(yīng)，但是最好首先將其純化。
其中X具有下述結(jié)構(gòu)的式ⅠA化合物可按下述反應(yīng)路線B所示的方法制備
〉
其中Rb、R1、Y和R3b的定義同上。
上面反應(yīng)式B可以按1-7反應(yīng)順序完成。在一個(gè)反應(yīng)完成之后，可通過(guò)本技術(shù)領(lǐng)域已知的方法將中間體化合物進(jìn)行分離，例如可以將化合物結(jié)晶，然后過(guò)濾收集，或者可以通過(guò)萃取、蒸發(fā)或傾析除去反應(yīng)溶劑。在進(jìn)行下一步反應(yīng)之前，如果需要，可以用一般的技術(shù)如結(jié)晶或在固體載體(如硅膠或氧化鋁)上進(jìn)行層析，將中間體化合物進(jìn)一步純化。
在反應(yīng)式B.1中，可用本技術(shù)領(lǐng)域已知的氨基保護(hù)基，按一般的條件將合適取代的芳基或不飽和的雜環(huán)胺進(jìn)行保護(hù)。反應(yīng)B.2～B.5基本上按以上反應(yīng)式A.3～A.6所述的方法進(jìn)行，但在反應(yīng)式B中，反應(yīng)B.5需要進(jìn)行另外的脫保護(hù)反應(yīng)，以便脫去反應(yīng)B.1中引入的氨基保護(hù)基。這是一般的氨基脫保護(hù)反應(yīng)，可用本技術(shù)領(lǐng)域中已知的方法進(jìn)行。例如用強(qiáng)酸，最好是三氟乙酸，可以將反應(yīng)式B.1中敘述的t·Boc基團(tuán)脫去。
在反應(yīng)B.6中，用合適的酰基鹵、異氰酸酯或氰甲酸酯，最好在酸消除劑如叔胺(最好是三乙胺)存在下，將所述中間體進(jìn)行?；?。反應(yīng)在約-20℃～約25℃下進(jìn)行。該反應(yīng)常用的溶劑包括醚類如氯代烴類，最好用乙醚、氯仿或二氯甲烷。
反應(yīng)B.7是一般的氨基脫保護(hù)反應(yīng)，可用本技術(shù)領(lǐng)域已知的方法進(jìn)行，得到用于以上反應(yīng)式Ⅰ相應(yīng)的胺。該胺可以不經(jīng)純化進(jìn)行反應(yīng)，但是最好首先將其進(jìn)行純化。
其中X為下述結(jié)構(gòu)的式Ⅰ化合物可以按下述反應(yīng)式C所示的方法制備
其中R1、R3a和Rb的定義同上，G為鹵素。
上面反應(yīng)式C可以按1-7反應(yīng)順序完成。在一個(gè)反應(yīng)完成之后，如果需要，可通過(guò)本技術(shù)領(lǐng)域已知的方法將中間體化合物進(jìn)行分離，例如可以將化合物結(jié)晶，然后過(guò)濾收集，或者可以通過(guò)萃取、蒸發(fā)或傾析除去反應(yīng)溶劑。在進(jìn)行下一步反應(yīng)之前，如果需要，可以用一般的方法如結(jié)晶或在固體載體(如硅膠或氧化鋁)上進(jìn)行層析，將中間體化合物進(jìn)一步純化。
反應(yīng)C.1是進(jìn)行活化，即按照本技術(shù)領(lǐng)域已知的條件，將以下結(jié)構(gòu)的氨基受保護(hù)的羧酸反應(yīng)物轉(zhuǎn)變?yōu)橄鄳?yīng)的混合酸酐。
例如最好在酸消除劑存在下，將氨基受保護(hù)的羧酸反應(yīng)物與C1-C6烷基氯甲酸(如異丁基氯甲酸酯)反應(yīng)。較好的酸消除劑是三烷基胺類，最好是三乙胺。反應(yīng)通常在非質(zhì)子傳遞溶劑如乙酸乙酯中進(jìn)行。溶劑的選擇不是關(guān)鍵性的，只要所應(yīng)用的溶劑對(duì)進(jìn)行的反應(yīng)呈惰性，并且使反應(yīng)物充分地溶解，以便完成所需的反應(yīng)。生成的混合酸酐反應(yīng)物最好不經(jīng)進(jìn)一步分離或純化用于反應(yīng)C.2中。
反應(yīng)C.2以兩步完成。首先，將用醚溶劑(最好是乙醚)層復(fù)蓋的氫氧化鈉溶液與大量過(guò)量的N-甲基-N-硝基-N-亞硝基胍反應(yīng)，生成反應(yīng)物重氮甲烷。氫氧化鈉最好應(yīng)用約4～6摩爾氫氧化鈉/升的水溶液。在該反應(yīng)實(shí)質(zhì)上完成之后，有機(jī)層經(jīng)干燥劑如氫氧化鉀干燥。然后將該溶液與由上述反應(yīng)C.1得到的混合酸酐反應(yīng)，得到相應(yīng)的α-重氮基羰基化合物。在該反應(yīng)中最好應(yīng)用未經(jīng)分離或純化的反應(yīng)物重氮甲烷。反應(yīng)通常在約-50℃～約-20℃，最好在約-30℃進(jìn)行。
在反應(yīng)C.3中，將反應(yīng)C.2中制備的α-重氮基羰基化合物與式H-G(其中G為鹵素)的酸于非質(zhì)子傳遞溶劑(如乙醚)中反應(yīng)，生成α-鹵素羰基化合物。較好的反應(yīng)物酸是可得到相應(yīng)的α-氯羰基化合物的氫氯酸，反應(yīng)通常在約-30℃～約0℃進(jìn)行。溶劑的選擇不是關(guān)鍵性的，只要應(yīng)用的溶劑對(duì)進(jìn)行的反應(yīng)呈惰性，并且使反應(yīng)物充分地溶解，以便完成所需的反應(yīng)。反應(yīng)物酸通常以小的增加量，以無(wú)水的氣體形式加入，直至反應(yīng)基本完成。該反應(yīng)可以用薄層層析(TLC)監(jiān)測(cè)。
在反應(yīng)C.4中，將反應(yīng)C.3中制得化合物上的羰基用本技術(shù)領(lǐng)域已知的一般條件進(jìn)行還原，得到相應(yīng)的α-氯羥基化合物。例如，將反應(yīng)C.3中制得的化合物與還原劑于混合溶劑中進(jìn)行反應(yīng)。一般的還原劑包括硼氫化鈉、硼氫化鋰、硼氫化鋅、二異丁基氫化鋁和氫化雙(2-甲氧基乙氧基)鈉鋁。較好的還原劑是硼氫化鈉。常用的溶劑混合液包括質(zhì)子溶劑和非質(zhì)子傳遞溶劑的混合液，如四氫呋喃/水。溶劑的選擇不是關(guān)鍵性的，只要應(yīng)用的溶劑對(duì)進(jìn)行的反應(yīng)呈惰性，并且使反應(yīng)物充分地溶解，以便完成所需要的反應(yīng)。該反應(yīng)通常在約-10℃～約10℃，最好在約0℃進(jìn)行。
在反應(yīng)C.5中，將反應(yīng)C.4制得的α-氯羥基化合物按本技術(shù)領(lǐng)域已知的一般條件與強(qiáng)堿反應(yīng)，生成相應(yīng)的環(huán)氧化物。例如可以將α-氯羥基化合物與氫氧化鉀/乙醇混合物于有機(jī)溶劑如乙酸乙酯中反應(yīng)。溶劑的選擇不是關(guān)鍵性的，只要應(yīng)用的溶劑對(duì)進(jìn)行的反應(yīng)呈惰性，并且使反應(yīng)物充分地溶解，以便完成所需的反應(yīng)。反應(yīng)通常在約0℃～溶劑的回流溫度下進(jìn)行。最好使該反應(yīng)在室溫下進(jìn)行。
在反應(yīng)C.6中，將反應(yīng)C.5中制得的環(huán)氧化物與下式的雜環(huán)反應(yīng)物在質(zhì)子溶劑中，于約70℃～100℃反應(yīng)。
溶劑的選擇不是關(guān)鍵性的，只要應(yīng)用的溶劑對(duì)進(jìn)行的反應(yīng)呈惰性，并且使反應(yīng)充分地溶解，便完成所需的反應(yīng)。該反應(yīng)常用的溶劑包括醇類，最好是乙醇。反應(yīng)最好在約80℃進(jìn)行。
反應(yīng)C.7是一般的氨基脫保護(hù)反應(yīng)，可按本技術(shù)領(lǐng)域已知的方法進(jìn)行，得到用于上述反應(yīng)式Ⅰ相應(yīng)的胺。該胺可以不經(jīng)純化進(jìn)行反應(yīng)，但最好首先將其純化。
在反應(yīng)A.4和B.3中用作反應(yīng)物的Weinreb酰胺可以按下法制備使氨基受保護(hù)的氨基酸與N-甲氧基-N-甲基胺于增進(jìn)劑、酸消除劑和偶合劑存在下進(jìn)行反應(yīng)。反應(yīng)在非質(zhì)子傳遞溶劑或混合溶劑中，于約-25℃～25℃進(jìn)行。該反應(yīng)較好的增進(jìn)劑是HOBT·H2O。較好的酸消除劑是叔烷基胺類，最好是三乙胺或N-甲基嗎啉。較好的偶合劑是乙基二甲氨基丙基碳二亞胺鹽酸鹽。在上述反應(yīng)提供的Weinreb酰胺用于反應(yīng)A.4和B.3之前，最好將其進(jìn)行分離。
其中R1為基團(tuán)S-Ra(這里Ra為芳基或C5-C7環(huán)烷基)的式ⅠA化合物可以用反應(yīng)A.4和B.3中具有以下結(jié)構(gòu)的Weinreb酰胺進(jìn)行制備。
該Weinreb酰胺可以按下法制備首先，使氨基受保護(hù)的絲氨酸與三苯膦和二乙基偶氮二羧酸酯(DEAD)在非質(zhì)子傳遞溶劑中，于約-80℃～0℃反應(yīng)，生成相應(yīng)的β-內(nèi)酯。反應(yīng)通常在醚類如四氫呋喃中，于約-80℃～-50℃進(jìn)行。然后，將內(nèi)酯環(huán)打開，以便提供具有以下結(jié)構(gòu)的化合物。
打開內(nèi)酯環(huán)的方法是使內(nèi)酸與具有結(jié)構(gòu)-S-R1(這里R1的定義同上述式Ⅰ)的合適取代的硫陰離子反應(yīng)。硫陰離子化合物最好由相應(yīng)的硫醇與強(qiáng)堿(如氫化鈉或氫化鉀)反應(yīng)生成。該反應(yīng)通常在非質(zhì)子傳遞溶劑中，于約0℃～約40℃和惰性氣流(如氮?dú)?下進(jìn)行。反應(yīng)常用的溶劑包括醚類，最好是四氫呋喃。然后，所需的反應(yīng)物酰胺按下法制備基本上按上述方法，使得到的反應(yīng)物羧酸與N-甲氧基-N-甲基胺在增進(jìn)劑、酸消除劑和偶合劑存在下反應(yīng)。
用于上述反應(yīng)C.6具有下式的雜環(huán)反應(yīng)物可以用本技術(shù)領(lǐng)域已知的方法進(jìn)行制備。
例如，該雜環(huán)反應(yīng)物通常從相應(yīng)的氨基受保護(hù)的氨基酸，通過(guò)酸活化，然后再與烷基胺反應(yīng)制備。反應(yīng)通常在酸消除劑如N-甲基嗎啉存在下進(jìn)行。然后應(yīng)用常用的化學(xué)脫保護(hù)技術(shù)脫去氨基保護(hù)基，得到以上反應(yīng)C.6中應(yīng)用的雜環(huán)反應(yīng)物。
例如可按下述方法，應(yīng)用(2S)-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉羧酸，制備[3S-(3R＊，4aR＊，8aR＊)]-十氫異喹啉-3-N-叔丁氧基甲酰胺1)保護(hù)氨基(t-BOC);
2)酸活化/與叔丁胺反應(yīng);
3)催化氫化;
4)氨基脫保護(hù)。
應(yīng)用本技術(shù)領(lǐng)域已知的方法(最好應(yīng)用催化氫化)，通過(guò)將合適取代的吡嗪化合物轉(zhuǎn)變?yōu)橄鄳?yīng)的哌嗪化合物，可以制得哌嗪類反應(yīng)物。例如氫化可以按下法進(jìn)行將反應(yīng)物吡嗪與催化劑一起置于非質(zhì)子傳遞溶劑中，于約0℃～約60℃在氫氣流中完成。合適的催化劑包括鈀/炭、金屬鉑、氧化鉑等。較好的催化劑是氧化鉑。該反應(yīng)常用的溶劑包括四氫呋喃、二甲基甲酰胺或四氫呋喃與二甲基甲酰胺的混合液。
應(yīng)用本技術(shù)領(lǐng)域已知的方法，可以將生成的反應(yīng)物哌嗪上的氮原子烷基化。例如，可以將反應(yīng)物哌嗪與鹵素(C1-C4)烷基或鹵代甲基吡啶(如甲基碘或氯甲基吡啶)反應(yīng)。較好的鹵素取代基包括氯、溴或碘。該反應(yīng)于0℃～60℃在互為惰性的溶劑中，于酸消除劑存在下進(jìn)行。較好的酸消除劑是碳酸鉀。常用的溶劑包括原子和非質(zhì)子傳遞溶劑，如乙腈和水的混合液。溶劑的選擇不是關(guān)鍵性的，只要應(yīng)用的溶劑對(duì)進(jìn)行的反應(yīng)呈惰性，并且使反應(yīng)物充分地溶解，以便進(jìn)行所需要的反應(yīng)。
另外，可以用還原胺化作用制備烷基化的哌嗪反應(yīng)物。例如，可以將上面制得的反應(yīng)物哌嗪與醛(如3-吡啶甲醛、乙醛、丙醛)或酮在還原劑和酸存在下反應(yīng)。反應(yīng)通常在醇溶劑如甲醇、乙醇或異丙醇中進(jìn)行。常用的還原劑包括硼氫化鈉、氰基硼氫化鋰、氰基硼氫化鈉等。較好的還原劑是氰基硼氫化鈉。常用的酸包括質(zhì)子酸，如鹽酸、硫酸、甲磺酸或乙酸。較好的酸是乙酸。
用于反應(yīng)式Ⅰ中市場(chǎng)上買不到的反應(yīng)物羧酸ⅠB，可以用已知的方法制備。尤其是，具有下式的化合物可以按下面反應(yīng)式Ⅱ所示的方法制備

其中Z、R和R0的定義同以上式Ⅰ，E＊為碘或C1-C4烷氧基羰基。
上面反應(yīng)式Ⅱ中，其中E＊為碘的化合物按1-3反應(yīng)順序進(jìn)行制備。在一個(gè)反應(yīng)完成之后，中間體可以用本技術(shù)領(lǐng)域已知的方法分離，例如可以將化合物結(jié)晶，然后過(guò)濾收集，或者可以用萃取、蒸發(fā)或傾析除去反應(yīng)溶劑。如果需要，可以在進(jìn)行下一步反應(yīng)之前，用一般的技術(shù)如結(jié)晶或在固體載體(如硅膠或氧化鋁)上層析將中間體化合物進(jìn)一步純化。
將在反應(yīng)式Ⅱ.1中制得的中間體化合物(其中E＊為C1-C4烷氧基羰基)直接按反應(yīng)式Ⅱ.3所述的方法反應(yīng)，無(wú)需進(jìn)行反應(yīng)式Ⅱ.2的反應(yīng)。
反應(yīng)式Ⅱ.1是常用于合成肽的普通偶合反應(yīng)，它已在上面反應(yīng)式Ⅰ的偶合反應(yīng)中敘述。該反應(yīng)可通過(guò)合適取代的氨基(RR0NH)與具有下式的化合物進(jìn)行簡(jiǎn)單的化合完成。

其中E＊為碘或C1-C4烷氧基羰基，Z同以上式Ⅰ中的定義。反應(yīng)在非極性的非質(zhì)子傳遞溶劑或混合溶劑中，在有或無(wú)酸消除劑存在下進(jìn)行，得到相應(yīng)的酰胺。該反應(yīng)常用的溶劑包括四氫呋喃和二甲基甲酰胺，最好是四氫呋喃。反應(yīng)于約-30℃～約25℃進(jìn)行。相對(duì)于反應(yīng)物羧酸，反應(yīng)物胺通常應(yīng)用等摩爾比例，反應(yīng)是在等摩爾量～略過(guò)量的偶合劑存在下進(jìn)行的。
反應(yīng)式Ⅱ.2是使反應(yīng)式Ⅱ.1制得的化合物進(jìn)行羰基化，結(jié)果導(dǎo)致C1-C4烷氧基羰基(最好是甲氧基羰基)代替碘取代基。反應(yīng)可通過(guò)反應(yīng)式Ⅱ.2的碘中間體、催化劑、于一氧化碳?xì)饬飨?，在醇溶?最好是甲醇)中進(jìn)行簡(jiǎn)單的化合完成，得到所需化合物的烷基酯。該反應(yīng)在酸消除劑(最好是二環(huán)己基胺)存在下進(jìn)行。反應(yīng)在約0℃～約25℃進(jìn)行。較好的催化劑是氯化雙(三苯膦)鈀(Ⅱ)。
反應(yīng)式Ⅱ.3是一般的烷基酯水解反應(yīng)，得到用于反應(yīng)式Ⅰ的反應(yīng)物羧酸。該反應(yīng)可按下法進(jìn)行使反應(yīng)物烷基酯與氫氧化鋰在合適的溶劑中反應(yīng)，然后將反應(yīng)溶液酸化至pH 2-3，得到所需的反應(yīng)物羧酸。常用的溶劑包括醚與水的混合液，最好是四氫呋喃/水混合液。反應(yīng)在約0℃～約35℃進(jìn)行。相對(duì)于反應(yīng)物酯，通常應(yīng)用的反應(yīng)物氫氧化鋰的量為等摩爾比例-2摩爾過(guò)量，最好過(guò)量約1摩爾。
另外，具有下式的化合物可以按下述方法制備

使式RR0NH的氨基與下式化合物按本技術(shù)領(lǐng)域已知方法反應(yīng)

其中R＊為活性基團(tuán)，如五氟苯酚。該反應(yīng)通常在非質(zhì)子傳遞溶劑如四氫呋喃、二甲基甲酰胺或二氯甲烷中，于約0℃～約35℃進(jìn)行。較好的溶劑是二氯甲烷。最好還含有酸消除劑如三乙胺或N-甲基嗎啉。然后將生成的化合物水解，得到所需的反應(yīng)物羧酸(用于以上反應(yīng)式Ⅰ中)。
用于以上反應(yīng)的胺RR0NH，其中R和R0系獨(dú)立地選自C1-C6烷基、芳基(C1-C4)烷基、雜環(huán)(C1-C4)烷基或不飽和的雜環(huán)(C1-C4)烷基，可以用本技術(shù)領(lǐng)域已知的方法制備。例如，可以將氨基受保護(hù)的甲胺于增進(jìn)劑(如碘化鈉或碘化鉀)和強(qiáng)堿(如氫化鈉或正丁基鋰)存在下與R-X(或R0-X)(這里X為鹵素)反應(yīng)，得到式CH3-N(Rb)-R(或CH3-N(Rb)-R0)化合物，這里Rb為氨基保護(hù)基，R和R0的定義同上。常用的溶劑包括非質(zhì)子傳遞溶劑如二甲基甲酰胺或四氫呋喃，最好為二甲基甲酰胺。反應(yīng)在約-10℃～約10℃，最好在約0℃進(jìn)行。然后用本技術(shù)領(lǐng)域已知的方法將受保護(hù)的胺反應(yīng)物脫去保護(hù)，得到可用于上述的游離胺。為了便于分離游離胺，可以制備鹽，例如使脫去保護(hù)的胺與酸如鹽酸反應(yīng)。
制備式RR0NH的胺化合物的另一方法是使氨基受保護(hù)的式R-NH-Rb化合物與合適取代的烷基碘或烷基溴(R0-I或R0-Br)如甲基碘或乙基溴反應(yīng)，得到氨基受保護(hù)的式RR0NH-Rb化合物。然后使該化合物脫去保護(hù)和分離，以便用于上述反應(yīng)。
如以上所述，所有的不對(duì)稱形式、各個(gè)異構(gòu)體以及它們的組合物均被認(rèn)為是本發(fā)明的部分。所述異構(gòu)體可以由它們各自的前體用上面所述方法制得，或者用拆分外消旋體制得，或者用分離非對(duì)映體的方法制得。拆分可以在拆分劑存在下通過(guò)層析，或通過(guò)重復(fù)結(jié)晶，或通過(guò)結(jié)合本技術(shù)領(lǐng)域已知的各種方法進(jìn)行。有關(guān)拆分的進(jìn)一步敘述見Jacques等，Enantiomers，Racemates and Resolutions，John Wiley & Sons 1981。
合成本發(fā)明化合物中應(yīng)用的起始物質(zhì)是已知的，并且市場(chǎng)上買不到的起始物質(zhì)可以用本技術(shù)領(lǐng)域通常應(yīng)用的一般方法容易地進(jìn)行合成。
本發(fā)明的藥學(xué)上適用的鹽通常按下法制備使式Ⅰ化合物與等摩爾或過(guò)量摩爾的酸或堿反應(yīng)。通常將反應(yīng)物于互溶劑中進(jìn)行反應(yīng)，對(duì)于酸加成鹽，互溶劑為例如乙醚或苯;對(duì)于堿加成鹽，互溶劑為水或醇。鹽通常在約1小時(shí)～約10天內(nèi)從溶液中析出，然后可以用過(guò)濾的方法或其他常用的方法進(jìn)行分離。
下面的制備和實(shí)例進(jìn)一步敘述本發(fā)明具體的情況。但是，應(yīng)該明白，被包括在內(nèi)的這些實(shí)例僅是為了敘述的目的，不應(yīng)被認(rèn)為是在任何方面限制本發(fā)明的范圍。
在下面的制備和實(shí)例中，術(shù)語(yǔ)熔點(diǎn)、核磁共振譜、電子撞擊質(zhì)譜、場(chǎng)解吸質(zhì)譜、快速原子轟擊質(zhì)譜、紅外光譜、紫外光譜、元素分析、高效液相色譜和薄層層析的縮寫分別如下m.p.;NMR;EIMS;MS(FD);MS(FAB)、IR、UV、Analysis、HPLC和TLC。此外，所列紅外光譜的最大吸收值僅是重要的部分，不是所有的最大吸收值。
有關(guān)核磁共振譜還應(yīng)用以下的縮寫S表示單峰，d表示二重峰，dd表示雙二重峰，t表示三重峰，q表示四重峰，m表示多重峰，dm表示雙多重峰，br.s、br.d、br.t和br.m分別表示寬單峰、寬雙峰、寬三重峰和寬多重峰?！癑”表示偶合常數(shù)，以赫茲(Hz)表示。除非另有說(shuō)明，否則NMR譜的數(shù)據(jù)是指所屬化合物的游離堿。
NMR譜是在BrüKer公司270MHz儀器上測(cè)得的，或是在General Electric公司QE-300型300MHz儀器上測(cè)得的?；瘜W(xué)位移以δ值表示(以四甲基硅為內(nèi)標(biāo)，以百萬(wàn)分之一為單位)。場(chǎng)解吸質(zhì)譜是Varian-MAT731質(zhì)譜儀上用碳樹枝狀晶體發(fā)射體測(cè)定的。電子撞擊質(zhì)譜是用Consolidated Electrodynamics公司的CEC 21-110儀測(cè)得的。快速原子轟擊質(zhì)譜是用VG ZAB-3質(zhì)譜儀測(cè)得的。紅外光譜是用Perkin-Elmer 281紅外儀測(cè)得的。紫外光譜是用Cary 118紫外儀測(cè)得的。薄層層析是在E.Merck硅膠板上進(jìn)行的。熔點(diǎn)未經(jīng)校正。
制備1A.N-(叔丁基)-2-甲基苯甲酰胺于25℃，在氮?dú)庀孪?39.2g(0.9mol)鄰甲苯酰氯的1200ml二氯甲烷的冷溶液(0℃)中緩慢地加入180.0g(1.8mol)三乙胺，隨后滴加含73.14g(1.0mol)叔丁胺的200ml二氯甲烷溶液。將所得的反應(yīng)混合物溫至室溫，并使其反應(yīng)2.5小時(shí)。反應(yīng)混合物再用1800ml水稀釋。分離得到的有機(jī)層和水層，有機(jī)層依次用2N氫氧化鈉、1.0N鹽酸和鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥，過(guò)濾，然后在減壓下濃縮至干，得到167.6g所需的小標(biāo)題中間體，為類白色固體(m.p.77-78℃)。
產(chǎn)率97%。
1H NMR(CDCl3)δ1.41(s，9H)，2.41(s，3H)，5.54(br.s，1H)，7.13-7.30(m，4H).
IR(CHCl3)3430，3011，2971，2932，1661，1510，1484，1452，1393，1366，1304，1216，876 cm-1.
MS(FD)m/e 191(M+)，191(100).
元素分析 C12H17NO計(jì)算值C，75.35;H，8.76;N，7.32;
實(shí)測(cè)值C，75.10;H，9.11;N，7.20.
B.S-N-叔丁基-2-(3-(N-芐氧基羰基)氨基-2-氧代-4-苯基丁基)苯甲酰胺向7.0g(36.5mmol)制備1A小標(biāo)題中間體的200ml無(wú)水四氫呋喃溶液中通過(guò)注射器加入N，N，N′，N′-四甲基乙二胺(TMEDA)。將得到的溶液冷卻至-78℃，然后通過(guò)注射器滴加55.9ml仲丁基鋰，同時(shí)保持反應(yīng)溫度在-60℃下。將所得的反應(yīng)溶液于-78℃攪拌約1小時(shí)，然后通過(guò)套管加入含有5.00g(14.6mmol)(S)-N-甲氧基-N-甲基-2-(N-芐氧基羰基)氨基-3-苯基丙酰胺的50ml無(wú)水四氫呋喃溶液，同時(shí)保持反應(yīng)溫度在-65℃以下。將反應(yīng)混合物溫至-20℃，加入20ml飽和氯化銨，然后用200ml乙醚稀釋。分離有機(jī)層和水層，有機(jī)層依次用水、0.2N硫酸氫鈉和鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過(guò)濾，然后在減壓下濃縮，得到無(wú)色油狀物。該油狀物經(jīng)快速層析(用25%乙酸乙酯的二氯甲烷溶液洗脫)純化，得到6.08g無(wú)色泡沫狀物。
產(chǎn)率88%。
D-289.26°(c 0.12，MeOH).
1H NMR(CDCl3)δ1.38(s，9H)，2.99(dd，J＝15;6Hz，1H)，3.24(dd，J＝15;6Hz，1H)，3.89(d，J＝18Hz，1H)，4.16(d，J＝18Hz，1H)，4.72(dd，J＝15，6Hz，1H)，5.00-5.09(m，2H)，5.56(d，J＝6Hz，1H)，5.93(br.s，1H)，7.03-7.40(m，14H).
IR(CHCl3)3431，3027，3012，2973，1713，1658，1511，1454，1383，1366，1307，1231，1046 cm-1.
MS(FD) m/e 472(M+)，218(100).
元素分析 C29H32N2O4計(jì)算值C，73.70;H，6.82;N，5.93;
實(shí)測(cè)值C，73.41;H，6.98;N，5.83.
C.[R-(R＊，S＊)]-N-叔丁基-2-(3-(N-芐氧基羰基)氨基-2-羥基-4-苯基丁基)苯甲酰胺在氮?dú)庀?，?.96g(14.7mmol)制備1B小標(biāo)題中間體的200ml無(wú)水乙醇溶液中加入2.78g(73.5mmol)硼氫化鈉。當(dāng)反應(yīng)經(jīng)TLC檢查實(shí)質(zhì)上完成時(shí)，反應(yīng)混合物用200ml乙酸乙酯稀釋，并滴加20ml飽和氯化銨溶液。分離有機(jī)層和水層，有機(jī)層依次用1N鹽酸、飽和碳酸氫鈉溶液和鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過(guò)濾，然后在減壓下濃縮，得到6.4g無(wú)色油狀物。該油狀物經(jīng)快速層析(用2-10%二氯甲烷的乙酸乙酯溶液進(jìn)行梯度洗脫)，得到5.12g小標(biāo)題中間體。
產(chǎn)率74%。
D+10.38°(c 0.10，MeOH).
1H NMR(CDCl3)δ1.40(s，9H)，2.79(dd，J＝12，3Hz，1H)，2.90-2.98(m，2H)，3.04(44，J＝12，3Hz，1H)，3.70-3.81(m，1H)，3.97(m，1H)，4.96-5.08(m，2H)，5.10(d，J＝9Hz，1H)，5.88(d，J＝6Hz，1H)，5.93(s，1H)，7.13-7.42(m，14H).
IR(CHCl3)3431，3028，3012，2971，1773，1643，1515，1454，1367，1229，1028 cm-1.
MS(FD)m/e 475(M+)，475-(100).
元素分析 C29H34N2O4計(jì)算值C，73.39;H，7.22;N，5.99;
實(shí)測(cè)值C，73.12;H，7.48;N，5.62.
D.[R-(R＊，S＊)]-N-叔丁基]-2-(3-氨基-2-羥基-4-苯基丁基)苯甲酰胺制備含有41.0g(120mmol)制備1C小標(biāo)題中間體和500mg 10%鈀-炭的150ml無(wú)水乙醇懸浮液。該懸浮液置于帕爾振搖器中在60psi氫氣下振搖。然后濾除10%鈀炭催化劑。所得的濾液在減壓下濃縮至干，得到31.1g淡黃色的泡沫狀物。應(yīng)用該化合物未經(jīng)進(jìn)一步純化。
產(chǎn)率96%。
D+34.68°(c 1.0，MeOH).
1H NMR(CDCl3)δ1.46(s，9H)，2.71(dd，J＝13.7;9.5Hz，1H)，2.84(dd，J＝13.3;2.51Hz，1H)，2.95-3.06(m，2H)，3.23-3.29(m，1H)，3.84-3.90(m，1H)，6.23(s，1H)，7.19-7.37(m，12H).
IR(CHCl3)3440，3382，3007，2970，2934，1643，1516，1454，1367，1213 cm-1.
MS(FD)m/e 341(M+)，341(100).
制備2A.[3S-[(3R＊，4aR＊，8aR＊，2′S＊，3′R＊)]-2-]3′-N(芐氧基羰基)氨基-2′-羥基-4′-苯基]丁基-N-(叔丁基)十氫異喹啉-3-甲酰胺將[1R-(1R＊，3S＊，1′S＊，4aS＊，8aS＊)]-1-[(1′-N-芐氧基羰基氨基-2′-苯基)-乙基]環(huán)氧乙烷和十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺的無(wú)水乙醇溶液于80℃加熱過(guò)夜。反應(yīng)混合物在減壓下濃縮至干，得到殘余物。該殘余物經(jīng)快速層析(用10-50%乙酸乙酯的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到6.47g類白色的泡沫狀物。
產(chǎn)率75%。
1H NMR(CDCl3)δ1.29(s，9H)，1.25-2.05(m，2H)，2.20-2.35(m，2H)，2.55-2.70(m，11H)，2.85-3.10(m，3H)，3.24(br.s，1H)，3.82(br.s，1H)，3.98(br.s，1H)，4.99(br.s，2H)，5.16-5.18(m，1H)，5.80(br.s，1H)，7.05-7.38(m，10H).
IR(CDCl3)3600-3100(br.)，3031，2929，1714，1673，1512，1455，1368，1232，1199，1047 cm-1.
MS(FD)m/e 536(M+H)，1068(100).
B.[3S-(3R＊，4aR＊，8aR＊，2′S＊，3′R＊)]-2-[3′-氨基-2′-羥基-4′-苯基]丁基-十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺將快速攪拌的6.37g(11.91mmol)制備2A小標(biāo)題中間體和1.2g 10%鈀-炭在200ml無(wú)水乙醇中的懸浮液置于氫氣中。約48小時(shí)后，反應(yīng)混合物經(jīng)硅藻土過(guò)濾，并在減壓下濃縮至干，得到5.09g所需的小標(biāo)題中間體。應(yīng)用該化合物未經(jīng)進(jìn)一步純化。
1H NMR(CDCl3)δ1.33(s，9H)，1.40-1.95(m，10H)，2.25-2.48(m，2H)，2.59-2.75(m，3H)，2.80-3.40(m，7H)，3.75-3.90(m，1H)，6.19(br.s，1H)，7.18-7.35(m，5H).
IR(CDCl3)3600-3100(br.)，2929，2865，1671，1515，1455，1367，1245，1047 cm-1.
MS(FD) m/e 402(M+，100).
制備3A.2R-N(芐氧基羰基)氨基-3-萘-2-基硫基丙酸在氮?dú)庀拢?.28g(8.00mmol)萘-2-硫醇的30ml四氫呋喃溶液中緩慢地加入1.77g(8.11g)60%氫化鈉。攪拌約15分鐘后，緩慢地加入N(芐氧基羰基)絲氨酸-β-內(nèi)酯的20ml四氫呋喃溶液。反應(yīng)混合物于室溫反應(yīng)約1小時(shí)，然后在減壓下濃縮，得到殘余物。將殘余物溶于乙酸乙酯中，并依次用0.5N硫酸氫鈉和飽和鹽水溶液洗滌。分離形成的兩層，有機(jī)層經(jīng)硫酸鈉干燥，過(guò)濾并在減壓下濃縮，得到殘余物。該殘余物經(jīng)快速層析純化，得到2.08g淡黃色固體。
產(chǎn)率68%。
D-55.72°(c 1.0，MeOH).
1H NMR(CDCl3)δ3.42-3.61(br.m，2H)，5.53-5.76(br.s，1H)，4.85-5.08(br.m，2H)，5.54-5.76(br.s，1H)，7.06-7.97(m，12H).
IR(KBr)3348，3048，1746，1715，1674，1560，1550，1269，1200，1060 cm-1.
MS(FD)m/e 381(M+)，381(100).
元素分析 C20H19NO4S計(jì)算值C，66.12;H，5.02;N，3.67;
實(shí)測(cè)值C，66.22;H，5.04;N，3.86.
B.3R-2-氮雜-3-(萘-2-基硫甲基)-4-氧代-5-重氮基戊酸芐基酯在氮?dú)庀?，?5.38g(40.3mmol)制備3A小標(biāo)題中間體的230ml乙酸乙酯的冷溶液(-30℃)中通過(guò)注射器緩慢地加入5.62ml(40.3mmol)三乙胺。然后向得到的溶液中通過(guò)注射器加入7.84ml(60.5mmol)異丁基氯甲酸酯。在另一個(gè)燒瓶中，向170ml乙醚和170ml 5N氫氧化鈉溶液的二層混合物中細(xì)心地加入10g N(甲基)-N(硝基)-N(亞硝基)胍)，生成大量揮發(fā)性氣體。當(dāng)該反應(yīng)實(shí)質(zhì)上完成時(shí)，從水層中將有機(jī)層潷入氫氧化鉀中并干燥。形成重氮甲烷并重復(fù)加入相等量的乙醚、氫氧化鈉和30g N(甲基)-N(硝基)-N(亞硝基)胍這一過(guò)程。然后將生成的重氮甲烷反應(yīng)物加到上面制備的混合酸酐溶液中，使反應(yīng)混合物在冷卻(-30℃)下反應(yīng)約20分鐘。當(dāng)反應(yīng)經(jīng)TLC檢查實(shí)質(zhì)上完成時(shí)，用火拋光的巴斯德吸液管將氮?dú)獬膳荽颠^(guò)溶液，以除去過(guò)量的重氮甲烷，溶液再在減壓下濃縮，得到殘余物。該殘余物經(jīng)快速層析(用10%乙酸乙酯的二氯甲烷溶液洗脫)純化，得到13.62g黃色油狀物。
產(chǎn)率83%。
1H NMR(CDCl3)δ3.32-3.46(m，2H)，4.40-4.67(m，1H)，5.00-5.09(m，2H)，5.44(s，1H)，5.76(d，J＝7.8Hz，1H)，7.25-7.86(m，12H).
C.3R-2-氮雜-3-(萘-2-基硫甲基)-4-氧代-5-氯-戊酸芐基酯將無(wú)水氫氯酸(氣體)短時(shí)間(約2秒鐘)通過(guò)13.62g(33.59mmol)制備3B小標(biāo)題中間體的230ml乙醚的冷溶液(-20℃)中，產(chǎn)生揮發(fā)性氣體。重復(fù)該步驟，但注意不要加過(guò)量的氫氯酸。當(dāng)反應(yīng)經(jīng)TLC檢查實(shí)質(zhì)上完成時(shí)，溶液在減壓下濃縮，得到殘余物。該殘余物經(jīng)快速層析(用10%乙酸乙酯的二氯甲烷溶液洗脫)純化，得到12.05g淡褐2色固體。
產(chǎn)率87%。
1H NMR(CDCl3)δ3.41(dd，J＝12，6Hz，1H)，3.53(dd，J＝12，6Hz，1H)，4.18(AB q，J＝41.9Hz，J＝15.9Hz，2H)，4.77(dd，J＝9，3Hz，1H)，5.04(AB q，J＝12Hz，J＝10.4Hz，2H)，5.59(d，J＝7Hz，1H)，7.24-7.85(復(fù)雜峰，12H). D-80.00°(c 1.0，MeOH).
IR(CHCl3)3426，3031，3012，1717，1502，1340，1230，1228，1045 cm-1.
MS(FD)m/e 413(M+)，413(100).
元素分析 C22H20NO3SCl計(jì)算值C，63.84;H，4.87;N，3.38;
實(shí)測(cè)值C，64.12;H，4.95;N，3.54.
D.[3R-(3R＊，4S＊)]-2-氮雜-3-(萘-2-基硫甲基)-4-羥基-5-氯戊酸芐基酯向530mg(1.28mmol)制備3C小標(biāo)題中間體在10ml四氫呋喃和1ml水的冷溶液(0℃)中加入73mg(1.92mmol)硼氫化鈉。當(dāng)反應(yīng)經(jīng)TLC檢查實(shí)質(zhì)上完成時(shí)，溶液用10ml飽和氯化銨水溶液和500μl 5N鹽酸溶液調(diào)節(jié)至pH3。得到的溶液用二氯甲烷萃取2次，合并的有機(jī)層用水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過(guò)濾并在減壓下濃縮，得到殘余物。該殘余物經(jīng)徑向?qū)游?用二氯甲烷洗脫)純化，得到212mg褐色固體。
產(chǎn)率40%
1H NMR(CDCl3)δ3.40(s，2H)，3.61-3.71(m，2H)，3.97-3.99(m，2H)，4.99(s，2H)，5.16(br.s，1H)，7.21-7.83(復(fù)雜峰，12H).
MS(FD)m/e 415(M+)，415(100). D-47.67°(c 0.86，MeOH).
IR(CHCl3)3630，3412，3011，1720，1502，1236，1044 cm-1.
元素分析 C22H22NO3ClS計(jì)算值C，63.53;H，5.33;N，3.37;
實(shí)測(cè)值C，63.72;H，5.60;N，3.64.
E.[3R-(3R＊，4S＊)]-2-氮雜-3-環(huán)氧乙烷基-4-萘-2-基硫基丁酸芐基酯向190mg(0.46mmol)制備3D小標(biāo)題中間體在6ml1∶2乙醇/乙酸乙酯的溶液中加入31mg(0.55mmol)氫氧化鉀的1ml乙醇溶液。當(dāng)反應(yīng)經(jīng)TLC檢查實(shí)質(zhì)上完成時(shí)，將反應(yīng)混合物倒入水/二氯甲烷的混合液中。分離形成的兩層，有機(jī)層用水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過(guò)濾并在減壓下濃縮，得到殘余物。該殘余物經(jīng)徑向?qū)游?用10%乙酸乙酯的二氯甲烷溶液洗脫)純化，得到172mg淡褐色固體。
產(chǎn)率99%。
1H NMR(CDCl3)δ2.76(br.s，2H)3.01(br.s，1H)，3.31(d，J＝5Hz，2H)，3.77(br.s，1H)，5.05(s，2H)，5.22(d，J＝6Hz，1H)，7.25-7.85(復(fù)雜峰，12H). D-125.42°(c 0.59，MeOH).
MS(FD)m/e 379(M+)，379(100).
IR(CHCl3)3640，3022，2976，1720，1502，1235，1045 cm-1.
元素分析 C22H21NO3S計(jì)算值C，69.63;H，5.58;N，3.69;
實(shí)測(cè)值C，69.41;H，5.53;N，3.64.
F.[3R-(3R＊，4R＊，3′S＊，4a′S＊，8a′S＊)]-[2-氮雜-3-苯硫基甲基-4-羥基-5-(3′-(1″-N(叔丁基)氨基-1″-氧代甲基)八氫異喹啉-2′-基)]戊酸芐基酯基本上按步驟1F中詳述的方法制備所需的小標(biāo)題化合物，用6.3g(19mmol)制備2E小標(biāo)題化合物，用6.3g(19mmol)制備4E小標(biāo)題化合物、5g(21mmol)3-[N(叔丁基)氨基羰基]十氫-(2H)-異喹啉的300ml乙醇溶液得到殘余物。該殘余物經(jīng)快速層析(用0-20%乙酸乙酯的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到4.3g白色固體。
產(chǎn)率40%。
1H NMR(CDCl3)δ1.10-1.73(m，20H)，2.13-2.31(m，2H)，2.44-2.53(m，1H)，2.56-2.68(m，1H)，2.86-2.97(m，1H)，3.52(br.s，2H)，4.02(br.s，2H)，4.98(s，2H)，5.65(s，1H)，5.94(s，1H)，7.25-7.83(復(fù)雜峰，13H).
MS(FD)m/e 629(M+)，138(100). D-92.45°(c 1.06，MeOH).
IR(CHCl3)3429，3010，2929，1713，1670，1514，1455，1047 cm-1.
元素分析 C35H47N3O4S計(jì)算值C，69.98;H，7.67;N，6.80;
實(shí)測(cè)值C，69.86;H，7.78;N，6.58.
G.[2R-(2R＊，3R＊，3′S＊，4a′S＊，8a′S＊)]-N(叔丁基)-2′-[2-羥基-3-氨基-4-(萘-2-基硫基)]丁基十氫異喹啉-3′-甲酰胺制備含有50mg(0.081mmol)制備3F小標(biāo)題中間體和1ml38%氫溴酸水溶液的乙酸溶液。所得的反應(yīng)混合物于室溫反應(yīng)約1小時(shí)，然后在減壓下濃縮，得到殘余物。該殘余物與甲苯一起變成泥漿，然后在減壓下濃縮，得到61mg所需小標(biāo)題中間體。應(yīng)用該化合物未經(jīng)進(jìn)一步純化。
1H NMR(CDCl3)δ1.14(s，1H)，1.17-2.07(復(fù)雜峰，15H)，2.66-2.87(m，2H)，3.21-3.25(m，2H)，3.75(d，J＝12Hz，1H)，3.85(d，J＝6Hz，1H)，4.36-4.47(m，1H)，6.73(s，1H)，7.39-7.90(復(fù)雜峰 7H).
MS(FD)483(M+)，483(100).
制備4A.2R-2-N-(芐氧基羰基)氨基-3-苯硫基丙酸基本上按步驟3A中詳述的方法制備所需的小標(biāo)題中間體，用13.1ml(127mmol)苯硫酚、4.6g(117mmol)60%氫化鈉溶液和25.6g(116mmol)(L)-N-(芐氧基羰基)絲氨酸β-內(nèi)酯在450ml四氫呋喃中的溶液，得到殘余物。該殘余物經(jīng)快速層析(用0-2%乙酸在4∶1二氯甲烷/乙酸乙酯混合液中的溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到27.9g白色固體。
產(chǎn)率72%。
1H NMR(CDCl3)δ7.55-7.18(m，10H)，5.55(d，J＝7Hz，1H)，5.08(s，2H)，4.73-4.60(m，1H)，3.55-3.30(m，2H).
IR(KBr)3304，3035，1687，1532，736 cm-1.
MS(FD)m/e 332，288，271，181.
元素分析 C17H17NO4S計(jì)算值C，61.61;H，5.17;N，4.23;
實(shí)測(cè)值C，61.69;H，5.22;N，4.47.
B.3R-2-氮雜-3-苯硫基甲基-4-氧代-5-重氮基戊酸芐基酯基本上按步驟3B中詳述的方法制備所需的小標(biāo)題化合物，用12.1g(37mmol)制備4A小標(biāo)題化合物、5.09ml(37mmol)三乙胺、7.13ml(55mmol)異丁基氯甲酸酯、146mmol重氮甲烷溶液得到殘余物。重氮甲烷溶液按制備1B中所述的方法，用100ml乙醚、150ml 5N氫氧化鈉溶液和21g(146mmol)N(甲基)-N(硝基)-N(亞硝基)-胍制備。該殘余物經(jīng)快速層析(用0-5%乙酸乙酯的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到黃色油狀物。
產(chǎn)率73%。
1H NMR(CDCl3)δ7.50-7.19(m，10H)，5.62(d，J＝7Hz，1H)，5.47(br.s，1H)，5.11(s，2H)，4.50-4.32(m，1H)，3.33(d，J＝6Hz，1H).
IR(KBr)3012，2115，1720，1501，1367，1228 cm-1.
MS(FD)m/e 356，328，242.
C.3R-2-氮雜-3-苯硫基甲基-4-氧代-5-氯戊酸芐基酯基本上按步驟3C中詳述的方法制備所需的小標(biāo)題化合物，用22.3g(63mmol)制備4B小標(biāo)題化合物和小量氫氯酸(氣體)的400ml乙醚溶液得到21g白色固體。應(yīng)用該固體未經(jīng)進(jìn)一步純化。
1H NMR(CDCl3)δ7.50-7.15(m，10H)，5.56(dd，J＝2，6.7Hz，1H)，5.11(s，2H)，4.78-4.67(m，1H)，4.20(d，J＝15.9Hz，1H)，4.12(d，J＝15.9Hz，1H)，3.48-3.23(m，2H).
IR(KBr)3349，1732，1684，1515，1266 cm-1.
MS(FD)m/e 363(M+).
元素分析 C18H18NO3SCl計(jì)算值C，59.42;H，4.99;N，3.85;
實(shí)測(cè)值C，59.57;H，5.09;N，4.13.
D.[3R-(3R＊，4S＊)]-2-氮雜-3-苯硫基甲基-4-羥基-5-氯戊酸芐基酯基本上按步驟3D中詳述的方法制備小標(biāo)題化合物，用21g(58mmol)制備4C小標(biāo)題化合物、2.4g(63mmol)硼氫化鈉的300ml四氫呋喃溶液得到殘余物。該殘余物經(jīng)快速層析(用0-2%甲醇的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，隨后再經(jīng)快速層析(用0-2%乙酸乙酯的氯仿溶液進(jìn)行梯度洗脫)，并于-78℃用二氯甲烷重結(jié)晶，得到8.3g所需的小標(biāo)題化合物。
產(chǎn)率39%。
1H NMR(CDCl3)δ7.47-7.19(m，10H)，5.22-5.03(m，1H)，5.09(s，2H)，4.01-3.89(m，2H)，3.75-3.58(m，2H)，3.32(d，J＝4Hz，2H).
IR(KBr)3321，2951，1688，1542，1246，738 cm-1.
MS(FD)m/e 366(M+)，119.
元素分析 C18H20NO3SCl計(jì)算值C，59.09;H，5.51;N，3.83;
實(shí)測(cè)值C，59.03;H，5.50;N，3.96.
E.[3R-(3R＊，4S＊)]-2-氮雜-3-環(huán)氧乙烷基-4-苯硫基丁酸芐基酯基本上按步驟3E中詳述的方法制備所需的小標(biāo)題化合物，用8.3g(23mmol)制備4D小標(biāo)題化合物、1.4g(25mmol)氫氧化鉀的400ml乙醇溶液得到殘余物。該殘余物經(jīng)快速層析(用0-2%乙酸乙酯的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到6.4g白色固體。
產(chǎn)率85%。
1H NMR(CDCl3)δ7.45-7.15(m，10H)，5.12(s，1H)，5.08(s，2H)，3.77-3.62(m，1H)，3.21(d，J＝6Hz，2H)，2.99(m，1H)，2.77(m，2H).
IR(KBr)3303，3067，1694，1538，1257，741 cm-1.
MS(FD)m/e 329.
元素分析 C32H45N3O4S計(jì)算值C，65.63;H，5.81;N，4.25;
實(shí)測(cè)值C，65.48;H，5.82;N，4.29.
F.[3R-(3R＊，4R＊，3′S＊，4a′S＊，8a′S＊)]-[2-氮雜-3-苯硫基甲基-4-羥基-5-(3′-(1″-N(叔丁基)氨基-1″-氧代甲基)十氫異喹啉-2′-基)]戊酸芐基酯基本上按步驟3F中詳述的方法制備所需的小標(biāo)題化合物，用6.3g(19mmol)制備4E小標(biāo)題化合物，用6.3g(19mmol)制備4E小標(biāo)題化合物、5g(21mmol)3-[N(叔丁基)氨基羰基]十氫-(2H)-異喹啉的300ml乙醇溶液得到殘余物。該殘余物經(jīng)快速層析(用0-20%乙酸乙酯的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到4.3g白色固體。
產(chǎn)率40%。
1H NMR(CDCl3)δ7.41-7.11(m，10H)，5.90(d，J＝5Hz，1H)，5.64(s，1H)，5.05(d，J＝4Hz，2H)，4.08-3.90(m，2H)，3.40(d，J＝6，2H)，3.05(s，1H)，2.95-2.85(m，1H)，2.62-2.45(m，2H)，2.28-2.15(m，2H)，2.05-1.88(m，2H)，1.78-1.10(m，7H)，1.29(s，9H).
IR(KBr)3330，2925，2862，1706，1661，1520，1454，1246，738，694 cm-1.
MS(FD)m/e 568(M+)，467.
元素分析 C32H45N3O4S計(jì)算值C，67.69;H，7.99;N，7.40;
實(shí)測(cè)值C，67.64;H，8.20;N，7.45.
G.[2R-(2R＊，3R＊，3′S＊，4a′S＊，8a′S＊)]-N(叔丁基)-2′-[2-羥基-3-氨基-4-苯硫基]丁基十氫異喹啉-3′-甲酰胺基本上按步驟3G中詳述的方法制備所需的小標(biāo)題化合物，用1g(1.8mmol)制備4F小標(biāo)題化合物和40ml 30%氫溴酸的乙酸溶液，但將粗品溶于30ml甲醇中。向所得的溶液中加入2ml二乙胺和2ml濃氫氧化銨，然后混合物在減壓下濃縮得到殘余物。該殘余物再溶于水和乙酸乙酯中。分離形成的兩層，有機(jī)層依次用碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過(guò)濾并在減壓下濃縮至干，得到殘余物。該殘余物經(jīng)快速層析[用0-10%甲醇的氯仿(每1000ml氯仿含3滴氫氧化銨)溶液進(jìn)行梯度洗脫]純化，得到0.54g白色泡沫狀物。
產(chǎn)率71%。
1H NMR(CDCl3)δ7.41-7.16(m，5H)，6.07(s，1H)，3.78-3.70(m，1H)，3.45-3.38(m，1H)，3.03-2.84(m，3H)，2.38-2.20(m，3H)，2.00-1.05(m，12H)，1.33(s，9H).
IR(KBr)2924，2862，1660，1517，1454，1439，737，691 cm-1.
MS(FD)m/e 434(M+)，293.
制備5A.吡嗪-2-N-(叔丁基)甲酰胺向50g(0.403mol)吡嗪-2-羧酸在600ml四氫呋喃和100ml二甲基甲酰胺的泥漿狀物中加入65.9g(0.407mol)羰基二咪唑。所得的反應(yīng)混合物于50℃反應(yīng)直至氣體逸出停止。反應(yīng)混合物冷卻后，緩慢地加入73.5g(1.00mol)叔丁胺。將反應(yīng)混合物反應(yīng)約30分鐘，在減壓下濃縮，再溶于500ml二氯甲烷中，然后依次用水、鹽酸(pH2)、飽和碳酸氫鈉、水、1M氫氧化鉀和鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并濃縮，得到68.5g白色固體。
產(chǎn)率95%。
1H NMR(CDCl3)δ1.51(s，9H)，7.73(br.s，1H)，8.49(m，1H)，8.72(m，1H)，9.38(s，1H).
B.(+/-)-哌嗪-2-N-(叔丁基)甲酰胺在氫氣(60psi)下，68.5g(0.382mol)制備5A小標(biāo)題化合物、70g(0.308mol)氧化鉑在186ml乙醇中的混合物于40℃加熱過(guò)夜。將得到的粗品過(guò)濾，濾液經(jīng)濃縮得到65g白色固體。
產(chǎn)率95%。
MS(FD)m/e 185(M+，100).
C.(+/-)-4-(吡啶-3′-基甲基)哌嗪-2-N-(叔丁基)甲酰胺向5.0g(0.027mol)制備5B小標(biāo)題化合物和160ml1∶1水/乙腈混合物的溶液中加入18.65g(0.135mol)碳酸鉀。所得的混合物在加入4.43g(0.027mol)3-氯甲基吡啶鹽酸鹽期間劇烈攪拌，然后將其反應(yīng)過(guò)夜。反應(yīng)混合物在減壓下濃縮，置于20%異丙醇氯仿溶液中使成漿狀，并依次用水和鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過(guò)濾，然后濃縮，得到殘余物。該殘余物經(jīng)快速層析(用含1%氫氧化銨的5%甲醇的二氯甲烷溶液洗脫)純化，得到1.34g澄清的黃色油狀物。
產(chǎn)率18%。
1H NMR(CDCl3)δ1.10(s，9H)，1.89-2.01(m，2H)，2.35(m，1H)，2.57-2.74(m，4H)，3.09(m，1H)，3.27(s，2H)，6.71(br.s，1H)，7.03(m，1H)，7.44(m，1H) 8.26(m，2H).
IR(KBr)3691，3611，3366，2974，1666，1602，1521，1479，1456，1427，1393，1366，1324，1139，1047，839 cm-1.
MS(FD)m/e 276(M+，100).
D.[2S-(2R＊，2′S＊，3′R＊)]-1-[2′-羥基-3′-(N-芐氧基羰基)氨基-4′-苯基丁基]-4-(吡啶-3″-基甲基)哌嗪-2-N-(叔丁基)甲酰胺將含0.377g(1.27mmol)[1S-(1R＊，1′R＊)]-1-[(1′-N-芐氧基羰基)氨基-2′-苯基)乙基]環(huán)氧乙烷和0.350g(1.27mmol)制備5C小標(biāo)題化合物的12ml異丙醇溶液于45℃反應(yīng)約48小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻，然后在減壓下濃縮，得到粗品。該物質(zhì)經(jīng)徑向?qū)游?6mm板;用5-10%異丙醇的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到120mg異構(gòu)體A和68mg異構(gòu)體B。
產(chǎn)率總計(jì)為26%。
異構(gòu)體A
1H NMR(CDCl3)δ1.33(s，9H)，2.26-2.89(m，13H)，3.29(m，1H)，3.45(s，2H)，3.79-3.95(m，3H)，4.73(br.s，1H)，4.97(br.s，2H)，5.20(m，1H)，7.14-7.29(m，6H)7.57(m，1H)，7.82(br.s，1H)，8.53(m，2H).
IR(KBr)3692，3434，2970，2829，1714，1661，1604，1579，1512，1455，1427，1393，1365，1231，1149，1029，909 cm-1.
MS(FD)m/e 573(M+，100).
E.[2S-(2R＊，2′S＊，3′R＊)]-1-[2′-羥基-3′-氨基-4′-苯基]丁基-4-(吡啶-3″-基甲基)哌嗪-2-N-(叔丁基)甲酰胺將含有0.062g(0.11mmol)制備5D(異構(gòu)體A)小標(biāo)題化合物的1.5ml 30%氫溴酸乙酸溶液攪拌約90分鐘。所得混合物經(jīng)濃縮、與甲苯一起共沸3次、再溶于各含1ml二乙胺和氫氧化銨的甲醇中，并在減壓下濃縮，得到殘余物。該殘余物經(jīng)徑向?qū)游?2mm板;用含1%氫氧化銨的15-20%甲醇的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到13mg白色固體。
產(chǎn)率28%。
1H NMR(CDCl3)δ1.33(s，9H)，2.36-3.21(m，15H)，3.47(d，2H)，3.75(m，1H)，7.19-7.30(m，6H) 7.57(m，2H)，8.52(m，2H).
MS(FD)m/e 440(M+，100).
制備6A.[2S-(2R＊，2′S＊，3′S＊)]-1-[3′-N-(芐氧基羰基)氨基-2′-羥基-4′-苯硫基丁基]-4-[吡啶-3″-基甲基]哌嗪-2-N-叔丁基甲酰胺[異構(gòu)體B]將596mg(1.81mmol)[1S-(1R＊，1′S＊)]-1-[1′-N-(芐氧基羰基)氨基-2′-(苯硫基)乙基]環(huán)氧乙烷和500mg(1.81mmol)制備5C小標(biāo)題化合物在15ml異丙醇中的溶液于43℃加熱約48小時(shí)。反應(yīng)用TLC(含1%氫氧化銨的10%異丙醇的二氯甲烷溶液;異構(gòu)體A R＝0.7;異構(gòu)體B R＝0.6)監(jiān)測(cè)。當(dāng)反應(yīng)實(shí)質(zhì)上完成時(shí)，將反應(yīng)混合物在減壓下濃縮，得到殘余物。該殘余物經(jīng)徑向?qū)游?6mm板;用含1%氫氧化銨的5-15%異丙醇的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到200mg異構(gòu)體A，為淡褐色泡沫狀物和119mg類白色泡沫狀物(異構(gòu)體B)。
異構(gòu)體A產(chǎn)率18%。
1H NMR(CDCl3)δ1.31(s，9H)，2.25-2.62(m，7H)，2.78-2.95(m，2H)，2.98-3.08(m，1H)，3.10-3.25(m，2H)，3.40-3.55(m，2H)，3.72-3.85(m，1H)，3.90-4.00(m，1H)，5.05(s，2H)，7.01(br.s，1H)，7.10-7.40(m，11H)，7.62(d，J＝7.8Hz，1H)，8.49(s，2H).
MS(FD)m/e 606(M+，100).
元素分析 C33H43N5O4S計(jì)算值C，65.42;H，7.15;N，11.56;
實(shí)測(cè)值C，65.38;H，7.27;N，11.36.
異構(gòu)體B產(chǎn)率11%。
1H NMR(CDCl3)δ1.33(s，9H)，2.25-2.85(m，8H)，3.20-3.32(m，3H)，3.47(s，2H)，3.78-3.95(m，2H)，5.06(s，2H)，5.30-5.38(m，1H)，7.10-7.42(m，12H)，7.55-7.85(m，2H)，8.50-8.60(m，2H).
MS(FD)m/e 606(M)，497(100).
HR MS(FAB)for C33H44N5O4S計(jì)算值606.3114;
實(shí)測(cè)值606.3141.
B.[2S-(2R＊，2′S＊，3′S＊)]-1-[2′-羥基-3′-氨基-4′-苯硫基丁基]-4-[吡啶-3″-基甲基]哌嗪-2-N-叔丁基甲酰胺將110mg(0.18mmol)異構(gòu)體B(由制備6A得到)的5ml 30%氫溴酸乙酯溶液于室溫?cái)嚢杓s1小時(shí)。反應(yīng)混合物在減壓下濃縮，得到殘余物。該殘余物再溶于4ml氫氧化銨中。所得的溶液用10%異丙醇的氯仿溶液萃取4次，每次10ml。合并的有機(jī)層經(jīng)硫酸鈉干燥、過(guò)濾并在減壓下濃縮，得到殘余物。該殘余物經(jīng)徑向?qū)游?2mm板;用含1%氫氧化銨的10-30%甲醇的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到65mg淡黃色泡沫狀物。
產(chǎn)率72%。
1H NMR(CDCl3)δ1.25(s，9H)，2.25-2.78(m，7H)，3.00-3.32(m，4H)，3.47(s，2H)，3.60-3.75(m，1H)，4.18-4.35(m，1H)，6.90-7.65(m，9H)，8.40-8.60(m，2H).
MS(FD)m/e 473(M+，100).
制備73-甲氧基羰基-4-甲基苯甲酸五氟苯基酯向1.0g(5.15mmol)3-甲氧基羰基-4-甲基苯甲酸和1.9g(10.3mmol)五氟苯酚的15ml二氯甲烷溶液中加入2.0g(10.30mmol)EDC。將反應(yīng)混合物反應(yīng)約4小時(shí)，然后用二氯甲烷稀釋。反應(yīng)混合物用1M碳酸鉀洗滌4次，經(jīng)硫酸鈉干燥，過(guò)濾并在減壓下濃縮，得到粗制殘余物。該殘余物經(jīng)柱層析(用50%己烷的乙酸乙酯溶液洗脫)純化，得到1.80g白色固體。
產(chǎn)率97%。
實(shí)施例1A.N-[(1′-氧代-1′-(3″-碘-4″-甲基)苯基)甲基]-1，2，3，4-四氫異喹啉在氮?dú)庀?，?.00g(19.1mmol)3-碘-4-甲基苯甲酸和3.40g(21.0mmol)1，1-羰基二咪唑的80ml四氫呋喃溶液中，通過(guò)注射器加入2.7ml(21.0mmol)1，2，3，4-四氫異喹啉。將反應(yīng)混合物反應(yīng)約2小時(shí)，然后在減壓下濃縮至干，得到殘余物。該殘余物再溶于100ml乙酸乙酯中，依次用飽和碳酸氫鈉和鹽水溶液洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過(guò)濾，然后在減壓下濃縮至干，得到淡黃色油狀物。該油狀物經(jīng)快速層析(用14-20%己烷的乙酸乙酯溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到6.92g澄清的油狀物，該油狀物在放置中固化。
產(chǎn)率96%。
1H NMR(CDCl3)δ2.46(s，3H)，2.90(br.s，2H)，3.65(br.s，1H)，3.95(br.s，1H)，4.85(br.s，1H)，7.17-7.34(m，6H)，7.90(s，1H).
IR(CDCl3)3010，1624，1586，1547，1497，1370，1300，1253，1108，1050，1035，831 cm-1.
MS(FD)m/e 377(M+，100).
元素分析 C17H16NOI計(jì)算值C，54.13;H，4.28;N，3.71;I，33.64;
實(shí)測(cè)值C，53.89;H，4.24;N，3.61;I，33.52.
B.N-[1′-氧代-1′-(3″-甲氧基羰基-4″-甲基)苯基]甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉在一氧化碳?xì)怏w下，將6.35g(16.8mmol)實(shí)施例1A小標(biāo)題化合物、3.35ml(16.8mmol)二環(huán)己胺和1.18g(1.68mmol)氯化雙(三苯膦)鈀(Ⅱ)在150ml無(wú)水甲醇中的溶液劇烈攪拌。當(dāng)反應(yīng)經(jīng)薄層層析(TLC)檢查實(shí)質(zhì)上完成時(shí)，混合物在減壓下濃縮至干，得到殘余物。殘余物再溶于200ml乙酸乙酯中，所得的混合物經(jīng)硅藻土過(guò)濾以除去不溶的有機(jī)鹽，然后濾液依次用飽和碳酸氫鈉和鹽水溶液洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過(guò)濾并在減壓下濃縮至干。得到的物質(zhì)經(jīng)快速層析(用14-20%乙酸乙酯的己烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到4.54g所需的小標(biāo)題化合物，為澄清油狀物。
產(chǎn)率87%。
1H NMR(CDCl3)δ2.64(s，3H)，2.90(br.s，2H)，3.89(s，3H)，3.98(br.s，1H)，4.59(br.s，1H)，4.87(br.s，1H)，7.05-7.51(m，6H)，8.03(s，1H).
IR(CDCl3) 3010，1722，1626，1584，1497，1436，1306，1268，1236，1210，1149，1109，1085 cm-1.
MS(FD)m/e 309(M+，100).
元素分析 C19H19NO3計(jì)算值C，73.77;H，6.19;N，4.53;
實(shí)測(cè)值C，73.95;H，6.43;N，4.57.
C.N-[1′-氧代-1′-(3″-羧基-4″-甲基)苯基]甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉向4.25g(13.8mmol)實(shí)施例1B小標(biāo)題化合物和200ml3∶1四氫呋喃/水混合物的溶液中加入661mg(27.6mmol)氫氧化鋰。將反應(yīng)混合物反應(yīng)約24小時(shí)。所得的反應(yīng)混合物在減壓下濃縮，并滴加1N鹽酸酸化(pH2-3)，析出粗產(chǎn)物。形成的懸浮液與75ml乙酸乙酯合并，分離水層和有機(jī)層。水相用乙酸乙酯萃取2次，合并的有機(jī)層再用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過(guò)濾并在減壓下濃縮至干，得到殘余物。該殘余物經(jīng)硅膠過(guò)濾，并用15%甲醇的二氯甲烷溶液為洗脫劑，得到4.05g類白色的泡沫狀物。
1H NMR(CDCl3)δ2.68(s，3H)，2.92(br.s，2H)，3.67(br.s，1H)，4.00(br.s，1H)，4.62(br.s，1H)，4.91(br.s，1H)，7.18-7.58(m，6H)，8.17(s，1H).
IR(CDCl3)3500-2500(br.)，1699，1625，1584，1498，1445，1371，1301，1237，1202，1167，1060，981，934，838 cm-1.
MS(FD)m/e 295(M+，100).
元素分析 C18H17NO3計(jì)算值C，73.20;H，5.80;N，4.74;
實(shí)測(cè)值C，73.14;H，5.90;N，4.44.
D.[3″′S-(3″′R＊，4S＊)]-N-[1′-氧代-1′-(3″-[1″′-氧代-2″′-氮雜-3″′-苯基甲基-4″′-羥基-5″′-(2″″-N-叔丁基脲基)苯基]戊基-4″-甲基)苯基]甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉向59mg(0.2mmol)實(shí)施例1C小標(biāo)題化合物、48mg(0.2mmol)制備1D小標(biāo)題中間體和27mg(0.2mmol)1-羥基苯并三唑水合物(HOBT·H2O)在4ml無(wú)水四氫呋喃的冷(-10℃)溶液中加入41.3mg(0.2mmol)1，3-二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)。大約10分鐘后，將反應(yīng)混合物溫至室溫并反應(yīng)過(guò)夜。然后反應(yīng)混合物用50ml乙酸乙酯稀釋，經(jīng)硅藻土過(guò)濾，并依次用水、飽和碳酸氫鈉和飽和鹽水溶液洗滌。經(jīng)硫酸鈉干燥后，將反應(yīng)混合物過(guò)濾并在減壓下濃縮，得到粗品。該物質(zhì)經(jīng)旋轉(zhuǎn)層析(1mm板;3∶2二氯甲烷/乙酸乙酯)純化，得到30.2mg所需的小標(biāo)題化合物，為白色泡沫狀物。
產(chǎn)率24%。
D-0.99°(c＝1.014，MeOH).
1H NMR(CDCl3)δ1.45(s，9H)，2.21(s，3H)，2.78-3.20(m，7H)，3.53(br.s，1H)，3.89-3.95(m，2H)，4.55-4.62(m，2H)，4.85(br.s，1H)，5.92(s，1H)，6.27(d，J＝9.7Hz，1H)，7.09-7.43(m，16H).
IR(CDCl3)3428，3500-3100(br.)，3010，1644，1514，1455，1395，1368，1300，1237，1223，1210 cm-1.
MS(FD)m/e 618(M+，100).
元素分析 C39H43N3O4計(jì)算值C，75.82;H，7.02;N，6.80;
實(shí)測(cè)值C，75.60;H，6.89;N，6.87.
實(shí)施例2A.5-甲基-3-甲氧基羰基苯甲酸將23.93g(131mmol)5-甲基間苯二酸和18.2ml(137mmol)N，N-二甲基甲酰胺縮二甲醇在200ml二氯甲烷中的溶液加熱回流，并反應(yīng)大約2小時(shí)。反應(yīng)混合物再在減壓下濃縮，粗品經(jīng)快速層析(7%甲醇的二氯甲烷溶液Rf(一酸)＝0.5;Rf(二酸)＝0.1～0.3)，從二酸中分離出一酸。將含一酸的部分合并，并在減壓下濃縮至干，得到殘余物。該殘余物再溶于200ml乙酸乙酯中，用1M碳酸鉀萃取2次，每次150ml。合并有水萃取液用1N鹽酸酸化(pH2)，所得的溶液再用乙酸乙酯萃取3次，每次150ml。合并有機(jī)萃取液，用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過(guò)濾并在減壓下濃縮至干，得到白色固體。該固體用乙酸乙酯/己烷溶液重結(jié)晶純化，得到6.65g小的白色針狀物。
產(chǎn)率26%。
1H NMR(CDCl3)δ2.47(s，3H)，3.95(s，3H)，8.10(br.s，2H)，8.57(s，1H).
IR(CDCl3)3400-2200(br.)，1721，1606，1441，1272，1214，1129，985，757，703，584，475 cm-1.
MS(FD)m/e 194(M+，100).
元素分析 C10H10O4計(jì)算值C，61.85;H，5.19;
實(shí)測(cè)值C，61.83;H，5.31.
B.N-[1′-氧代-1′-(3″-甲氧基羰基-5″-甲基)苯基]甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉基本上按實(shí)施例1A詳述的方法制備小標(biāo)題化合物，用1.0g(5.15mmol)實(shí)施例2A小標(biāo)題化合物、0.88g(5.40mmol)1，1-羰基二咪唑和0.68ml(5.40mmol)1，2，3，4-四氫異喹啉的10ml無(wú)水四氫呋喃溶液，得到殘余物。該殘余物經(jīng)快速層析(用30-45%乙酸乙酯的己烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到1.48g澄清的油狀物。
產(chǎn)率93%。
1H NMR(CDCl3)δ2.43(s，3H)，2.90-3.10(m，2H)，3.62(br.s，1H)，3.91(s，3H)，4.01(br.s，1H)，4.56(br.s，1H)，4.89(br.s，1H)，7.10-7.30(m，4H)，7.47(s，1H)，7.92(d，J＝7.0Hz，2H).
IR(CDCl3)3025，3010，1723，1627，1441，1317，1294，1238 cm-1.
MS(FD)m/e 309(M+，100).
元素分析 C19H19NO3計(jì)算值C，73.77;H，6.19;N，4.53;
實(shí)測(cè)值C，73.55;H，6.19;N，4.55.
C.N-[1′-氧代-1′-(3″-羧基-5″-甲基)苯基]甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉基本上按實(shí)施例1C詳述的方法制備小標(biāo)題化合物，用304mg(12.7mmol)氫氧化鋰、1.31g(4.23mmol)實(shí)施例2B小標(biāo)題中間體和80ml 3∶1四氫呋喃/水混合液，得到殘余物。該殘余物用乙酸乙酯重結(jié)晶純化，得到1.03g白色固體。
產(chǎn)率90%。
1H NMR(CDCl3)δ2.37(s，3H)，2.81(br.s，2H)，3.52(br.s，1H)，3.81(br.s，1H)，4.55(br.s，1H)，4.74(br.s，1H)，6.95-7.30(m，4H)，7.48(s，1H)，7.81(s，1H).
IR(KBr)3600-2200(br)，1715，1577，1485，1438，1280，1208，933，885，837，778，765，748，680，635 cm-1.
MS(FD)m/e 295(M+)，591(100).
元素分析 C18H17NO3計(jì)算值C，73.20;H，5.80;N，4.74;
實(shí)測(cè)值C，73.21;H，5.92;N，4.77.
D.[3″′S-(3″′R＊，4S＊)]-N-[1′-氧代-1′-(3″-[1″′-氧代-2″′-氮雜-3″′-苯基甲基-4″′-羥基-5″′-(2″″-N-叔丁基脲基)苯基]戊基-5″-甲基)苯基]甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉基本上按實(shí)施例1D詳述的方法制備小標(biāo)題化合物，用439mg(1.69mmol)DCC、229mg(1.69mmol)HOBT·H2O、500mg(1.69mmol)實(shí)施例2C小標(biāo)題中間體和349mg(1.22mmol)制備1D小標(biāo)題中間體的10ml無(wú)水四氫呋喃溶液(含0.5ml二甲基甲酰胺)，得到殘余物。該殘余物經(jīng)旋轉(zhuǎn)層析(6mm板;用30-50%乙酸乙酯的己烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到740mg白色泡沫狀物。
產(chǎn)率71%。
D-18.73°(c＝1.004，MeOH).
1H NMR(CDCl3)δ1.42(s，9H)，2.35(s，3H)，2.78-3.05(m，5H)，3.54(br.s，1H)，3.90-4.06(m，1H)，4.48-4.55(m，2H)，4.84(br.s，1H)，5.94-5.99(m，2H)，6.86(br.s，1H)，7.12-7.55(m，15H).
IR(CDCl3)3600-3100(br.)，3028，3008，1642，1600，1515，1455，1369，1233，1050 cm-1.
MS(FD)m/e 618(M+，100).
元素分析 C39H43N3O4計(jì)算值C，75.82;H，7.02;N，6.80;
實(shí)測(cè)值C，76.04;H，7.01;N，6.92.
實(shí)施例3A.N-[1′-氧代-1′-(3″-碘-2″-甲基)苯基]甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉基本上按實(shí)施例1A詳述的方法制備小標(biāo)題化合物，用4.93g(18.82mmol)3-碘-2-甲基苯甲酸、3.36g(20.70mmol)1，1-羰基二咪唑和2.6ml(20.2mmol)1，2，3，4-四氫異喹啉的80ml無(wú)水四氫呋喃溶液，得到殘余物。該殘余物經(jīng)快速層析(用14-50%己烷的乙酸乙酯溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到6.87g淡黃色油狀物，該油狀物放置中固化。
產(chǎn)率97%。
1H NMR(CDCl3)δ2.31，2.40(2s，3H 旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)，2.70-3.05(m，2H)，3.40-3.60(m，1H)，4.95-4.20(m，1H)，4.32-4.42(m，1H)，4.94(dd，J＝35.6;17.3Hz，1H)，6.80-7.40(m，6H)，7.87(d，J＝7.8Hz，1H).
IR(CDCl3)3011，1626，1586，1431，1338，1299，1259，1200，1157，1102，1048，1003，932，910 cm-1.
MS(FD)m/e 377(M+，100).
元素分析 C17H16NOI計(jì)算值C，54.13;H，4.54;N，3.71;
實(shí)測(cè)值C，54.35;H，4.15;N，3.55.
B.N-[1′-氧代-1′-(3″-甲氧基羰基-2″-甲基)苯基]甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉基本上按實(shí)施例1B詳述的方法制備小標(biāo)題化合物，在一氧化碳?xì)怏w下用6.77g(17.9mmol)實(shí)施例3A小標(biāo)題中間體、3.6ml(17.9mmol)二環(huán)己胺和490mg(0.70mmol)氯化雙(三苯膦)鈀(Ⅱ)的230ml無(wú)水甲醇溶液，得到殘余物。該殘余物經(jīng)快速層析(用14-25%乙酸乙酯的己烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到3.15g淡黃色油狀物。
產(chǎn)率57%。
1H NMR(CDCl3)δ2.44，2.52(2s，3H 旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)，2.75-2.85(m，1H)，2.97-3.01(m，1H)，3.41-3.44(m，1H)，3.90(s，3H)，3.92-4.13(m，1H)，4.25-4.40(m，1H)，4.96(dd，J＝40.1;17.4Hz，1H)，6.85(d，J＝7.3Hz，0.5H)，7.10-7.36(m，4.5H)，7.88-7.91(m，1H).
IR(CDCl3)1723，1626.
MS(FD)m/e 309(M+，100).
C.N-[1′-氧代-1′-(3″-羧基-2″-甲基)苯基]甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉基本上按實(shí)施例1C詳述的方法制備小標(biāo)題化合物，用464mg(19.4mmol)氫氧化鋰、2.99g(9.68mmol)實(shí)施例3B小標(biāo)題中間體和200ml 3∶1四氫呋喃/水混合液，得到殘余物。該殘余物經(jīng)快速層析(用含1%乙酸的1∶1乙酸乙酯/二氯甲烷的溶液洗脫)純化，得到2.79g淡棕色的泡沫狀物。
產(chǎn)率98%。
1H NMR(CDCl3)δ2.50，2.58(2s，3H 旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)，2.76-2.81(m，1H)，3.01(t，J＝6.1Hz，1H)，3.43-3.47(m，1H)，3.99-4.08(m，1H)，4.30-4.01(m，1H)，4.98(dd，J＝38.7;17.4Hz，1H)，6.87(d，J＝7.2Hz，0.5H)，7.11-7.43(m，4.5H)，8.04-8.07(m，1H).
IR(CDCl3)3600-2400(br.)，1700，1626，1478，1257，1222，1160，1039 cm-1.
MS(FD)m/e 295(M+，100).
元素分析 C18H17NO3計(jì)算值C，73.20;H，5.80;N，4.74;
實(shí)測(cè)值C，73.45;H，5.66;N，4.80.
D.[3″′S-(3″′R＊，4S＊)]-N-[1′-氧代-1′-(3″-[1″′-氧代-2″′-氮雜-3″′-苯基甲基-4″′-羥基-5″′-(2″′-N-叔丁基脲基)苯基]戊基-2″-甲基)苯基]甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉基本上按實(shí)施例1D詳述的方法制備小標(biāo)題化合物，用176mg(0.85mmol)DCC、250mg(0.85mmol)實(shí)施例3C小標(biāo)題中間體、290mg(1.01mmol)制備1D小標(biāo)題中間體和115mg(0.85mmol)HOBT·H2O的10ml無(wú)水四氫呋喃溶液，得到殘余物。該殘余物經(jīng)旋轉(zhuǎn)層析(4mm板;用30-60%乙酸乙酯的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到373mg白色泡沫狀物。
產(chǎn)率71%。
D-13.34°(c＝1.004，MeOH).
1H NMR(CDCl3)δ1.46(s，9H)，1.91，1.97，2.11，2.20(4s，3H(rotamers))，2.72(br.s，1H)，2.86-3.20(m，6H)，3.39(br.s，1H)，3.80-4.01(m，2H)，4.28(m，1H)，4.59(br.s，1H)，4.78(d，J＝17.2Hz，1H)，4.99(d，J＝17.6Hz，1H)，6.04(br.s，1H)，6.33(br.s，1H)，6.86-7.41(m，16H).
IR(CDCl3)3600-3100(br.)，3009，1642，1514，1455，1369，1300 cm-1.
MS(FD)m/e 618(M+)，220(100).
元素分析 C39H43N3O4計(jì)算值C，75.82;H，7.02;N，6.80;
實(shí)測(cè)值C，75.53;H，7.03;N，6.71.
實(shí)施例4A.N-[1′-氧代-1′-(3″-碘-4″-乙基)苯基]甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉基本上按實(shí)施例1A詳述的方法制備小標(biāo)題化合物，在氮?dú)庀?，?.74g(17.17mmol)4-乙基-3-碘苯甲酸、2.80g(17.17mmol)1，1-羰基二咪唑和2.2ml(17.17mmol)1，2，3，4-四氫異喹啉的70ml無(wú)水四氫呋喃溶液，得到殘余物。該殘余物經(jīng)快速層析(用14%乙酸乙酯的己烷溶液洗脫)純化，得到4.40g淡黃色油狀物，該油狀物在放置中固化。
產(chǎn)率65%。
1H NMR(CDCl3)δ1.22(t，J＝7.5Hz，3H)，2.76(q，J＝7.5Hz，2H)，2.90(br.s，2H)，3.59-4.05(m，2H)，4.50-4.95(m，2H)，6.90-7.38(m，6H)，7.90(s，1H).
IR(CDCl3)3010，2974，1624，1586，1545，1498，1434，1299，1253，1220，1034，840 cm-1.
MS(FD)m/e 391(M+，100).
元素分析 C18H18NOI計(jì)算值C，55.26;H，4.64;N，3.58;I，32.44;
實(shí)測(cè)值C，54.96;H，4.71;N，3.67;I，32.48.
B.N-[1′-氧代-1′-(3″-甲氧基羰基-4″-乙基)苯基]甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉基本上按實(shí)施例1B詳述的方法制備小標(biāo)題化合物，在一氧化碳下，用4.13g(10.56mmol)實(shí)施例4A小標(biāo)題中間體、2.2ml(11.09mmol)二環(huán)己胺和140mg(0.20mmol)氯化雙(三苯膦)鈀(Ⅱ)的200ml無(wú)水甲醇溶液，得到殘余物。該殘余物經(jīng)快速層析(用11-20%乙酸乙酯的己烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到1.76g淡黃色油狀物。
產(chǎn)率52%。
1H NMR(CDCl3)δ1.25(t，J＝7.4Hz，3H)，2.80-3.10(m，4H)，3.60-4.05(m，5H)，4.50-4.95(m，2H)，7.19-7.25(m，4H)，7.34(d，J＝7.9Hz，1H)，7.52(d，J＝7.9Hz，1H)，7.97(s，1H).
IR(CDCl3)3010，1724，1625，1585，1498，1435，1299，1234，1194，1151，1109，1088，1051 cm-1.
MS(FD)m/e 323(M+，100).
元素分析 C20H21NO3計(jì)算值C，74.28;H，6.25;N，4.34;
實(shí)測(cè)值C，74.02;H，6.50;N，4.59.
C.N-[1′-氧代-1′-(3″-羧基-4″-乙基)苯基]甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉;
基本上按實(shí)施例1C詳述的方法制備小標(biāo)題化合物，用357mg(14.91mmol)氫氧化鋰和1.60g(4.97mmol)實(shí)施例4B小標(biāo)題中間體的40ml 3∶1四氫呋喃/水溶液，但將混合物于50℃反應(yīng)過(guò)夜。得到的殘余物經(jīng)柱層析(活性炭)純化，得到1.35g白色泡沫狀物。
產(chǎn)率88%。
1H NMR(CDCl3)δ1.27(t，J＝7.5Hz，3H)，2.96(br.s，2H)，3.10(q，J＝7.4Hz，2H)，3.66(br.s，1H)，3.99(br.s，1H)，4.62(br.s，1H)，4.89(br.s，1H)，7.13-7.25(m，4H)，7.38(d，J＝7.9Hz，1H)，7.58(d，J＝7.2Hz，1H)，8.12(d，J＝1.6Hz，1H).
IR(KBr)3600-2300(br.)，1700，1625，1497，1443，1300，1237，1150，1109，1048，933 cm-1.
MS(FD)m/e 309(M+，100).
D.[3″′S-(3″′R＊，4S＊)]-N-[1′-氧代-1′-(3″-[1″′-氧代-2″′-氮雜-3″-苯基甲基-4″′-羥基-5″′-(2″′-N-叔丁基脲基)苯基]戊基-4″-乙基)苯基]甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉基本上按實(shí)施例1D詳述的方法制備小標(biāo)題化合物，用206mg(1.0mmol)DCC、300mg(0.97mmol)實(shí)施例4C小標(biāo)題中間體、341mg(1.18mmol)制備1D小標(biāo)題中間體和135mg(1.0mmol)HOBT·H2O的6ml冷的(-10℃)無(wú)水四氫呋喃溶液，得到殘余物。該殘余物經(jīng)旋轉(zhuǎn)層析(6mm板;用1-5%甲醇的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到410mg類白色的泡沫狀物。
產(chǎn)率67%。
1H NMR(CDCl3)δ1.07(t，J＝7.6Hz，3H)，1.45(s，9H)，2.54(q，J＝7.5Hz，2H)，2.70-3.30(m，5H)，3.55(br.s，1H)，3.91-3.95(m，1H)，4.40-4.65(m，2H)，4.83(br.s，1H)，5.97(s，1H)，6.32(br.d，J＝9.2Hz，1H)，6.90-7.60(m，16H).
IR(CDCl3)3009，1645，1514，1455，1236，1213 cm-1.
MS(FD)m/e 632(M+，100).
實(shí)施例5A.N-[1′-氧代-1′-(3″-甲氧基羰基-6″-甲基)苯基]甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉基本上按實(shí)施例1A詳述的方法制備小標(biāo)題化合物，用100mg(0.52mmol)6-甲基-3-甲基-1-苯二羧酸酯、84mg(0.52mmol)1，1-羰基二咪唑和0.07ml(0.52mmol)1，2，3，4-四氫異喹啉的4ml四氫呋喃溶液，得到殘余物。該殘余物經(jīng)旋轉(zhuǎn)層析(2mm板;用25-50%己烷的乙酸乙酯溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到109mg澄清的油狀物。
產(chǎn)率71%。
1H NMR(CDCl3)δ2.27，2.38(2s，3H 旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)，2.80-3.00(m，2H)，3.46(br.s，1.5H)，3.90(s，3H)，4.10-4.40(m，1.5H)，5.29(br.s，1H)，6.85(d，J＝7.3Hz，0.5H)，7.11-7.34(m，4.5H)，7.88-7.98(m，2H).
IR(CHCl3)3009，1721，1628，1469，1437，1306，1263，1238，1223，1211，1127 cm-1.
MS(FD)m/e 309(M+，100).
元素分析 C19H19NO3計(jì)算值C，73.77;H，6.19;N，4.53;
實(shí)測(cè)值C，73.53;H，6.35;N，4.46.
B.N-[1′-氧代-1′-(3″-羧基-6″-甲基)苯基]甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉基本上按實(shí)施例1C詳述的方法制備小標(biāo)題化合物，用18mg(0.74mmol)氫氧化鋰、109mg(0.34mmol)實(shí)施例5A小標(biāo)題中間體和10ml 3∶1四氫呋喃/水混合液，但將反應(yīng)混合物酸化后，化合物用3∶1二氯甲烷/異丙醇溶液萃取。所得的殘余物經(jīng)旋轉(zhuǎn)層析(2mm板;用1%乙酸的1∶1乙酸乙酯/二氯甲烷溶液洗脫)純化，得到107mg泡沫狀物。
1H NMR(CDCl3)δ2.28，2.39(2s，3H 旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)，2.80-3.00(m，2H)，3.47(br.s，1H)，3.81(br.s，0.5H)，4.20-4.44(m，1.5H)，4.80-5.06(br.s，1H)，6.85(d，J＝7.3Hz，0.5H)，7.11-7.36(m，4.5H)，7.94-8.02(m，2H).
IR(CHCl3)3600-2400(br.)，1698，1628，1498，1447，1300，1240，1159，1129，1048，910 cm-1.
MS(FD)m/e 295(M+，100).
C.[3″′S-(3″′R＊，4S＊)]-N-[1′-氧代-1′-(3″-[1″′-氧代-2″′-氮雜-3″′-苯基甲基-4″′-羥基-5″′-(2″′-N-叔丁基脲基)苯基]戊基-6″-甲基)苯基]甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉在氮?dú)庀?，?0mg(0.30mmol)實(shí)施例5B小標(biāo)題中間體和52mg(0.32mmol)1，1-羰基二咪唑的3ml四氫呋喃溶液攪拌60分鐘。向該溶液中加入109mg(0.38mmol)制備1D小標(biāo)題中間體，得到澄清的黃色溶液。反應(yīng)過(guò)夜后，該溶液在減壓下濃縮至干，得到殘余物。該殘余物再溶于100ml乙酸乙酯中并經(jīng)硅藻土過(guò)濾。濾液依次用飽和碳酸氫鈉和鹽水溶液萃取，經(jīng)硫酸鈉干燥，過(guò)濾并在減壓下濃縮至干，得到一物質(zhì)。該物質(zhì)經(jīng)旋轉(zhuǎn)層析(2mm板;用50-100%乙酸乙酯的己烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到100mg白色泡沫狀物。
產(chǎn)率54%。
D-21.13°(c＝1.003，MeOH).
1H NMR(CDCl3)δ1.43(s，9H)，2.20，2.31(2s，3H(rotamers))，2.66-3.05(m，6H)，3.39(br.s，1H)，4.05-4.40(m，2H)，3.90(br.s，1H)，4.52(br.s，1H)，4.88(br.s，1H)，6.14(br.s，1H)，6.80-7.65(m，17H).
IR(CHCl3)3600-3100(br.)，3431，3027，3010，1641，1516，1455，1368，1234，1048 cm-1.
MS(FD)m/e 618(M+，100).
元素分析 C39H43N3O4計(jì)算值C，75.82;H，7.02;N，6.80;
實(shí)測(cè)值C，75.58;H，7.27;N，6.71.
實(shí)施例6[3S-(3R＊，4aR＊，8aR＊，2′S＊，3′R＊)]-2-[2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′，2″′，3″′，4″′-四氫異喹啉-1″′-基羰基]-6″-甲基)苯基]戊基-十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺基本上按實(shí)施例1D的方法制備標(biāo)題化合物，用256mg(1.24mmol)DCC、168mg(1.24mmol)HOBT·H2O、366mg(1.24mmol)實(shí)施例1C小標(biāo)題中間體和500mg(1.24mmol)制備2B小標(biāo)題中間體的15ml冷的(-10℃)無(wú)水四氫呋喃溶液，得到殘余物。該殘余物經(jīng)旋轉(zhuǎn)層析(6mm板;用3%甲醇的二氯甲烷溶液洗脫)純化，得到489mg類白色的泡沫狀物。
產(chǎn)率58%。
D-69.1017°(c＝1.013，MeOH).
1H NMR(CDCl3)δ1.13(s，9H)，1.20-2.10(m，14H)，2.20-2.35(m，4H)，2.50-3.05(m，7H)，3.37-3.60(m，2H)，3.80-4.10(m，2H)，4.40-4.70(m，2H)，4.85(br.s，1H)，5.67(br.s，1H)，6.72(br.d，J＝8.4Hz，1H)，6.95-7.34(m，12H，芳香族的).
IR(KBr)3600-3150(br.)，3009，1627，1514，1455，1247，1047 cm-1.
MS(FD)m/e 679(M+)，578(100).
元素分析 C42H54N4O4計(jì)算值C，74.30;H，8.02;N，8.25;
實(shí)測(cè)值C，74.07;H，8.00;N，8.22.
實(shí)施例7A.2-[(2′-N-(甲基)氮雜-3′-氧代-3′-[3″-甲氧基羰基-4″-甲基]苯基)丙基]喹啉在氮?dú)庀?，?.91g(9.86mmol)4-甲基-3-甲氧基羰基苯甲酸、2.6ml(34.8mmol)亞硫酰氯和1滴二甲基甲酰胺的50ml苯溶液加熱回流2小時(shí)。反應(yīng)混合物再在減壓下濃縮至干，得到殘余物，該殘余物再溶于200ml乙酸乙酯中，然后緩慢地加到冷的(-10℃)1.86g(11.6mmol)2-(2-偶氮丙基)喹啉的30ml 1∶2吡啶/二氯甲烷溶液中。所得的混合物逐漸地溫至室溫，然后在減壓下濃縮，得到殘余物。該殘余物再溶于100ml乙酸乙酯中，依次用水、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，然后過(guò)濾。所需的小標(biāo)題化合物經(jīng)快速層析(用1-5%甲醇的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到1.29g淡黃色油狀物。
產(chǎn)率38%。
1H NMR(CDCl3)δ2.57，2.63(2br.s，3H 旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)，3.03，3.15(2br.s，3H 旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)，3.67，3.90(2br.s，3H 旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)，4.77，5.05(2br.s，2H，旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)，7.10-8.25(m，9H).
IR(CHCl3)2977，1724，1631，1239，1047 cm-1.
MS(FD)m/e 347(M+，100).
元素分析 C21H20N2O3計(jì)算值C，72.40;H，5.79;N，8.04;
實(shí)測(cè)值C，72.23;H，5.93;N，8.07.
B.2-[(2′-N-(甲基)氮雜-3′-氧代-3′-[3″-羧基-4″-甲基]苯基)丙基]喹啉基本上按實(shí)施例1C詳述的方法制備所需的小標(biāo)題化合物，用76mg(3.18mmol)氫氧化鋰、367mg(1.06mmol)實(shí)施例7A小標(biāo)題中間體和20ml 2∶1四氫呋喃/水混合物的溶液，得到330mg類白色固體。
產(chǎn)率94%。
1H NMR(DMSO-d6)δ2.40-2.60(m，3H)，2.96(s，3H)，4.69，4.90(2br.s，2H 旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)，7.20-8.00(m，8H)，8.35(br.s，1H).
IR(CHCl3)3600-2400(br.)，1700，1631，1507，1403，1248，1204，1085，830 cm-1.
MS(FD)m/e 335(M+，100).
C.[3S-(3R＊，4aR＊，8aR＊，2′S＊，3′R＊)]-2-[2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′-氧代-2″′-N-(甲基)氮雜-3″′-喹啉-2″″-基丙基]-6″-甲基)苯基]戊基-十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺基本上按實(shí)施例1D詳述的方法制備小標(biāo)題化合物，用126mg(0.61mmol)DCC、83mg(0.61mmol)HOBT·H2O、202mg(0.61mmol)實(shí)施例7B小標(biāo)題中間體和245mg(0.61mmol)制備2B小標(biāo)題中間體的5.5ml無(wú)水四氫呋喃溶液(含0.5ml二甲基甲酰胺)，得到殘余物。該殘余物經(jīng)旋轉(zhuǎn)層析(2mm板;用5%甲醇的二氯甲烷溶液洗脫)純化，得到272mg類白色泡沫狀物。
產(chǎn)率62%。
D-59.0476°(c＝1.05，MeOH).
1H NMR(CDCl3)δ1.16(s，9H)，1.15-3.20(m，24H)，3.90-4.10(m，2H)，4.56(br.s，1H)，4.72，5.03(2br.s，2H，旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)，6.00(br.s，1H)，6.55-6.80(m，1H)，7.00-8.25(m，14H).
IR(CHCl3)3650-3150(br.)，2929，1632(br.)，1509，1455，1245，1047 cm-1.
MS(FD)m/e 719(M+)，617(100).
實(shí)施例8A.N-[1′-氧代-1′-(3″-羧基)苯基甲基]-1，2，3，4-四氫異喹啉向含有350μl二甲基甲酰胺的22.3ml(315mmol)亞硫酰氯的35ml苯的冷(-5℃)溶液中一次加入25.0g(150mmol)間苯二酸。將反應(yīng)混合物回流約16小時(shí)，冷至室溫，然后在減壓下濃縮至干，得到殘余物。該殘余物與苯一起共沸，然后用200ml乙醚稀釋。將所得的溶液冷卻至-10℃，隨后滴加18.8ml(150mmol)1，2，3，4-四氫異喹啉。再加入100ml水中止反應(yīng)。分離有機(jī)層和水層，有機(jī)層經(jīng)硫酸鈉干燥，過(guò)濾并在減壓下濃縮，得到殘余物。該殘余物經(jīng)快速層析純化，得到477mg無(wú)色泡沫狀物。
產(chǎn)率1%。
1H NMR(DMSO-d6)δ2.69-2.87(br.s，2H)，3.83-4.22(br.s，4H)，4.73-4.80(br.s，1H)，7.02-7.27(m，4H)，7.41-7.47(m，2H)，7.94-8.06(m，2H).
MS(FAB)282(M+)，119(100).
B.N-[1′-氧代-1′-(3″-五氟苯氧基羰基)苯基甲基]-1，2，3，4-四氫異喹啉向210mg(0.75mmol)實(shí)施例8A小標(biāo)題中間體和267mg(1.13mmol)五氟苯酚在5ml無(wú)水四氫呋喃的冷(0℃)溶液中加入173mg(0.90mmol)1-乙基-3-[3-二甲氨基丙基]-碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)。將所得的反應(yīng)混合物溫至室溫并反應(yīng)約4小時(shí)，然后用10ml3∶1氯仿/異丙醇溶液稀釋，并依次用飽和碳酸氫鈉和鹽水溶液洗滌。分離形成的二層，有機(jī)層經(jīng)硫酸鈉干燥，過(guò)濾，然后在減壓下濃縮，得到殘余物。該殘余物經(jīng)旋轉(zhuǎn)層析純化，得到74mg無(wú)色泡沫狀物。
產(chǎn)率22%。
1H NMR(CDCl3)δ2.83-3.08(m，2H)，3.62-3.73(br.s，1H)，3.92-4.13(br.s 1H)，4.58-4.63(br.s，1H)，4.82-4.98(br.s，1H)，7.07-7.33(m，4H)，7.59-7.68(m，1H)，7.76-7.81(m，1H)，8.26-8.34(m，2H).
MS(FD)447(M+)，447(100).
C.[3″′S-(3″′R＊，4S＊)]-N-[1′-氧代-1′-(3″-[1″′-氧代-2″′-氮雜-3″′-苯基甲基-4″′-羥基-5″′-(2″″-N-叔丁基脲基)苯基]戊基)苯基]甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉經(jīng)套管將72mg(0.016mmol)實(shí)施例8B小標(biāo)題中間體的3ml無(wú)水二氯甲烷溶液加到52mg(0.15mmol)制備1D小標(biāo)題中間體的5ml無(wú)水二氯甲烷溶液中。向該溶液中用注射器加入19μl(0.18mmol)4-甲基嗎啉，將所得的反應(yīng)混合物反應(yīng)大約16小時(shí)。反應(yīng)混合物再依次用飽和碳酸氫鈉、2N硫酸氫鈉和鹽水溶液洗滌。有機(jī)層經(jīng)硫酸鈉干燥，過(guò)濾，然后在減壓下濃縮，得到殘余物。該殘余物經(jīng)旋轉(zhuǎn)層析純化，得到27mg無(wú)色的泡沫狀物。
產(chǎn)率30%。
1H NMR(CDCl3)δ1.44(s，9H)，2.73-3.11(m，6H)，3.50-3.61(br.s，1H)，3.88-4.00(m，2H)，4.46-4.62(m，2H)，4.83-4.90(br.s，1H)，5.87(d，J＝6Hz，1H)，6.16(s，1H)，7.13-7.56(m，16H)，7.71-7.80(m，2H).
MS(FD)604(M+)，604(100).
實(shí)施例9A.N-(叔丁氧基羰基)甲胺向22g(0.33mmol)甲胺鹽酸鹽在550ml無(wú)水二氯甲烷的冷(0℃)溶液中加入48ml(0.34mol)三乙胺，隨后加入75g(0.34mol)叔丁氧基羰基酐。所得的反應(yīng)混合物于0℃反應(yīng)約1小時(shí)，溫至室溫并使其反應(yīng)過(guò)夜。反應(yīng)混合物再用水稀釋。分離形成的二層，有機(jī)層用水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過(guò)濾并濃縮，得到47.4g澄清的油狀物。
B.2-((N-(甲基)-N-(叔丁氧基羰基)氨基)甲基)吡啶向3.0g(18.30mmol)2-(氯甲基)吡啶和2.0g(15.25mmol)實(shí)施例9A小標(biāo)題化合物在40ml無(wú)水二甲基甲酰胺的冷(0℃)溶液中加入1.12g(27.9mmol)氫化鈉。所得的反應(yīng)混合物溫至室溫后，緩慢地加入5.5g(36.6mmol)碘化鈉。將反應(yīng)混合物反應(yīng)過(guò)夜，然后倒入碳酸氫鈉的飽和溶液中，得到的乳狀液用水稀釋。分離形成的兩層，水層用二氯甲烷萃取二次。合并的有機(jī)萃取液經(jīng)硫酸鈉干燥，過(guò)濾并濃縮，得到粗品。該粗品經(jīng)快速層析(用20-50%乙酸乙酯的己烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到69mg黃色油狀物。
產(chǎn)率20%。
1H NMR(CDCl3)δ1.20-1.75(m，9H)，2.75-3.10(m，3H)，4.40-4.62(m，2H)，7.13-7.31(m，2H)，7.60-7.73(m，1H)，8.53(d，J＝4.38Hz，1H).
IR(CHCl3)3010，2980，2935，1687，1594，1573，1479，1455，1421，1394，1369，1305，1249，1172，1152，1050，879 cm-1.
MS(FD)m/e 223(M+，100).
C.2-((N-(甲基)氨基)甲基)吡啶鹽酸鹽將300mg(1.35mmol)實(shí)施例1B小標(biāo)題化合物和5ml5N鹽酸水溶液在5ml二烷中的溶液反應(yīng)過(guò)夜。所得的反應(yīng)混合物在減壓下濃縮，得到殘余物。該殘余物與甲苯一起共沸，然后在減壓下濃縮至干，得到無(wú)定形的黃色固體。應(yīng)用該固體未經(jīng)進(jìn)一步純化。
1H NMR(DMSO-d6)δ2.50-2.63(m，3H)，4.25-4.45(m，2H)，7.61-7.65(m，1H)，7.86(d，J＝7.84Hz，1H)，8.12-8.14(m，1H)，8.71(d，J＝4.90Hz，1H).
D.2-[(2′-N-(甲基)氮雜-3′-氧代-3′-[3″-甲氧基羰基-4″-甲基]苯基)丙基]吡啶將260mg(1.33mmol)實(shí)施例9C小標(biāo)題化合物、238mg(0.66mmol)制備7標(biāo)題化合物和0.5ml三乙胺的5ml無(wú)水二氯甲烷溶液反應(yīng)過(guò)夜。所得的反應(yīng)混合物用二氯甲烷稀釋，然后用1M碳酸鉀萃取3次。合并的有機(jī)萃取液經(jīng)硫酸鈉干燥，過(guò)濾，然后在減壓下濃縮，得到粗品。該粗品經(jīng)徑向?qū)游?4mm板;用0-5%甲醇的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到154mg黃色油狀物。
產(chǎn)率40%。
1H NMR(CDCl3)δ2.50-2.80(m，3H)，2.90-3.20(m，3H)，3.70-4.00(m，3H)，4.50-4.95(m，2H)，7.05-7.77(m，6H)，8.05(s，1H)，8.57(d，J＝3.91Hz，1H).
IR(CHCl3)3027，3008，2954，1723，1631，1594，1573，1477，1437，1404，1303，1249，1088，1077 cm-1.
MS(FD)m/e 298(M+，100).
元素分析 C17H18N2O3計(jì)算值C，68.44;H，6.08;N，9.39;
實(shí)測(cè)值C，68.64;H，6.21;N，9.27.
E.2-[(2′-N-(甲基)氮雜-3′-氧代-3′-[3″-羧基-4″-甲基]苯基)丙基]吡啶鹽酸鹽基本上按實(shí)施例1C詳述的方法制備所需的小標(biāo)題化合物，用99mg(0.33mmol)實(shí)施例9D小標(biāo)題化合物、16mg(0.66mmol)氫氧化鋰和8ml 3∶1四氫呋喃/水混合液，得到94mg固體，應(yīng)用該固體未經(jīng)進(jìn)一步純化。
1H NMR(DMSO-d6)δ2.40-2.60(m，3H)，2.85-3.10(m，3H)，4.60-5.05(m，2H)，7.20-8.85(m，7H).
IR(CHCl3)3700-1800(br.)，1713，1635，1537，1518，1484，1470，1404，1356，1306，1236，1085，997，981 cm-1.
MS(FD)m/e 285(M+，100).
F.[2′R-(2′R＊，3′S＊)]-2-(2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′-氧代-2″′-N-(甲基)氮雜-3″′-吡啶-2″″-基丙基]-6″-甲基)-苯基]戊基-N-叔丁基苯甲酰胺基本上按實(shí)施例1D詳述的方法，用95mg(0.28mmol)制備1D小標(biāo)題化合物、93mg(0.29mmol)實(shí)施例9E小標(biāo)題化合物、38mg(0.28mmol)HOBT·H2O和58mg(0.28mmol)DCC在5ml四氫呋喃中的溶液制備小標(biāo)題化合物。所得的粗品經(jīng)徑向?qū)游?2mm板;用2-4%甲醇的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到50mg白色固體。
產(chǎn)率28%。
1H NMR(CDCl3)δ1.46(s，9H)，2.10-2.22(m，3H)，2.80-3.22(m，7H)，3.80-3.98(m，1H)，4.48-4.65(m，2H)，4.70-4.95(m，1H)，5.95-6.40(m，3H)，7.05-7.78(m，15H)，8.50-8.62(m，1H).
IR(CHCl3)3600-3100(br.)，2974，2931，1643，1573，1514，1485，1455，1437，1395，1368，1311，1233，1077，1049，910，882 cm-1.
MS(FD)m/e 607(M+，100).
實(shí)施例10[3S-(3R＊，4aR＊，8aR＊，2′S＊，3′R＊)]-2-(2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5-(3″-[1″′-氧代-2″′-N-(甲基)氮雜-3″′-吡啶-2″″-基丙基]-6″-甲基)苯基]戊基十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺基本上按實(shí)施例2D詳述的方法，用124mg(0.31mmol)制備2B小標(biāo)題化合物、44mg(0.33mmol)實(shí)施例9E小標(biāo)題化合物、42mg(0.31mmol)HOBT·H2O和64mg(0.31mmol)DCC在5ml無(wú)水四氫呋喃和0.5ml無(wú)水二甲基甲酰胺中的溶液制備小標(biāo)題化合物。所得的粗品經(jīng)徑向?qū)游?2mm板;用0-5%甲醇的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到111mg類白色的泡沫狀物。
產(chǎn)率50%。
1H NMR(CDCl3)δ1.13(s，9H)，1.20-2.35(m，19H)，2.50-2.70(m，2H)，2.90-3.10(m，4H)，3.25-3.60(m，1H)，3.92-4.10(m，2H)，4.50-4.66(m，2H)，4.80-4.92(m，1H)，5.60-5.76(m，1H)，6.50-6.78(m，1H)，7.06-7.44(m，9H)，7.60-7.80(m，1H)，8.54-8.61(m，1H).
IR(CHCl3)3600-3100(br.)，3000，2929，2865，1669，1632，1572，1512，1455，1437，1394，1368，1305，1277，1148，1077，983，909 cm-1.
MS(FD)m/e 667(M+，100).
元素分析 C40H53N5O4計(jì)算值C，71.93;H，8.00;N，10.49;
實(shí)測(cè)值C，72.17;H，7.71;N，10.40.
實(shí)施例11A.3-((N-(甲基)-N-(叔丁氧基羰基)氨基)甲基)吡啶基本上按實(shí)施例9B詳述的方法，用6.0g(45.7mmol)實(shí)施例9A小標(biāo)題化合物、9.02g(55.0mmol)3-(氯甲基)吡啶、10.3g(68.5mmol)碘化鉀、4.1g(103mmol)60%氫化鈉在100ml二甲基甲酰胺中的溶液制備小標(biāo)題化合物。粗品經(jīng)徑向?qū)游?6mm板;用20-100%乙酸乙酯的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到760mg橙色油狀物。
1H NMR(CDCl3)δ1.48(s，9H)，2.85(br.s，3H)，4.44(s，2H)，7.25-7.32(m，1H)，7.50-7.65(m，1H)，8.50-8.60(m，2H).
MS(FD)m/e 285(M+，100).
B.3-((N-(甲基)氨基)甲基)吡啶基本上按實(shí)施例9C詳述的方法制備小標(biāo)題化合物。
C.3-[(2′-N-(甲基)氮雜-3′-氧代-3′-[3″-甲氧基羰基-4″-甲基]苯基)丙基]吡啶基本上按實(shí)施例9D詳述的方法制備小標(biāo)題化合物，用488mg(4.0mmol)實(shí)施例11B小標(biāo)題化合物、700mg(2.0mmol)制備7標(biāo)題化合物在8ml二氯甲烷中的溶液，但混合物中不加三乙胺。粗品經(jīng)徑向?qū)游?4mm;2-4%甲醇的二氯甲烷溶液)純化，得到495mg澄清的油狀物。
產(chǎn)率83%。
1H NMR(CDCl3)δ2.64(s，3H)，2.90-3.15(s，3H)，3.90(s，3H)，4.50-4.90(m，2H)，7.25-7.40(m，2.5H)，7.40-7.55(m，1H)，7.70-7.85(m，0.5H)，8.03(s，1H)，8.50-9.00(m，1H).
IR(CHCl3)3008，1724，1632，1580，1503，1481，1437，1425，1405，1306，1260，1224，1192，1163，1081，1076，1030，836 cm-1.
MS(FD)m/e 298(M+，100).
元素分析 C17H18N2O3計(jì)算值C，68.44;H，6.08;N，9.39;
實(shí)測(cè)值C，68.16;H，6.35;N，9.42.
D.3-[(2′-N-(甲基)氮雜-3′-氧代-3′-[3″-羧基-4″-甲基]苯基)丙基]吡啶鹽酸鹽基本上按實(shí)施例1C詳述的方法制備所需的小標(biāo)題化合物，用189mg(0.63mmol)實(shí)施例11C小標(biāo)題化合物、46mg(1.9mmol)氫氧化鋰和10ml 3∶1四氫呋喃/水混合液，但反應(yīng)混合物用5N鹽酸酸化至pH2，隨后加入氯化鋰。所得的混合物用異丙醇洗滌數(shù)次，經(jīng)硫酸鈉干燥，過(guò)濾和在減壓下濃縮至干，得到150mg類白色泡沫狀物。
1H NMR(CDCl3)δ2.68(s，3H)，3.03(s，3H)，4.60-5.00(m，2H)，7.10-7.70(m，5H)，7.90-8.10(m，1H)，8.50-9.00(m，1H).
MS(FD)m/e 285(M+，100).
E.[3S-(3R＊，4aR＊，8aR＊，2′S＊，3′R＊)]-2-(2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′-氧代-2″′-N-(甲基)氮雜-3″′-吡啶-3″″-基丙基]-6″-甲基)苯基]戊基十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺基本上按實(shí)施例1D詳述的方法，用177mg(0.44mmol)制備2B小標(biāo)題化合物、143mg(0.45mmol)實(shí)施例11D小標(biāo)題化合物、59mg(0.44mmol)HOBT·H2O和91mg(0.44mmol)DCC在5ml四氫呋喃中的溶液制備小標(biāo)題化合物。所得粗品經(jīng)徑向?qū)游?2mm;用2-5%甲醇的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到119mg白色泡沫狀物。
產(chǎn)率40%。
1H NMR(CDCl3)δ1.14(s，9H)，1.20-2.35(m，18H)，2.48-3.10(m，6H)，3.35-3.55(m，1H)，3.95-4.18(m，2H)，4.55(m，3H)，5.72(br.s，1H)，6.70-6.85(m，1H)，7.04-7.38(m，10.5H)，7.65-7.82(m，0.5H)，8.55-8.65(m，1H).
IR(CHCl3)3691，3600-3100(br.)，3429，3008，2929，1670，1634，1512，1481，1455，1394，1368，1246，1075，1046，910 cm-1.
MS(FD)m/e 668(M+)，567(100).
元素分析 C40H53N5O4計(jì)算值C，71.93;H，8.00;N，10.49.
實(shí)測(cè)值C，71.63;H，7.85;N，10.34.
實(shí)施例12A 4-[(N-(叔丁氧基羰基)氨基)甲基]吡啶向10.0g(92mmol)4-氨甲基吡啶的550ml二氯甲烷溶液中加入21g(97mmol)叔丁氧基羰基酐。將所得的反應(yīng)物反應(yīng)約30分鐘。當(dāng)反應(yīng)混合物經(jīng)TLC檢查實(shí)質(zhì)上完成時(shí)，反應(yīng)混合物依次用飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過(guò)濾，然后濃縮，得到粗品。該粗品經(jīng)快速層析(用50-100%乙酸乙酯的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到15.23g淡黃色固體。
產(chǎn)率80%。
1H NMR(CDCl3)δ1.46(s，9H)，4.33(d，J＝5.91Hz，2H)，4.98(br.s，1H)，7.18-7.26(m，2H)，8.54-8.56(m，2H).
IR(CHCl3)3458，2982，1715，1605，1565，1507，1455，1418，1396，1369，1348，1275，1248，1166，1069，1050，996，862 cm-1.
MS(FD)m/e 209(M+，100).
元素分析 C11H16N2O2計(jì)算值C，63.44;H，7.74;N，13.45;
實(shí)測(cè)值C，63.44;H，7.71;N，13.49.
B.4-((N-(甲基)-N-(叔丁氧基羰基)氨基)甲基)吡啶向8.0g(38mmol)實(shí)施例12A的小標(biāo)題化合物在50ml無(wú)水二甲基甲酰胺的冷(0℃)溶液中加入1.00g(41.8mmol)氫化鈉。將所得的反應(yīng)混合物攪拌大約30分鐘，然后緩慢地加入5.72g(40.3mmol)甲基碘。反應(yīng)混合物倒入二氯甲烷/水混合物液中，然后冷凍。分離形成的兩層，有機(jī)層用1N氫氧化鈉洗滌4次，經(jīng)硫酸鈉干燥，過(guò)濾，然后在減壓下濃縮至干(同時(shí)加熱)，得到7.54g暗橙色油狀物。
產(chǎn)率88%。
1H NMR(CDCl3)δ1.30-1.70(m，9H)，2.75-3.00(m，3H)，4.42(br.s，2H)，7.12(d，J＝4.73Hz，2H)，8.55(d，J＝5.54Hz，2H).
C.4-((N-(甲基)氨基)甲基)吡啶二鹽酸鹽基本上按實(shí)施例9C詳述的方法制備小標(biāo)題化合物，用1.15g(5.17mmol)實(shí)施例12B小標(biāo)題化合物和15ml 5N鹽酸在15ml二烷中的溶液，得到粗品。應(yīng)用該粗品未經(jīng)進(jìn)一步純化。
1H NMR(DMSO-d6)δ2.58(s，3H)，4.40(s，2H)，8.15-8.25(m，1H)，8.90-9.90(m，1H)，10.22(br.s，2H).
IR(KBr)3800-1800(br.)，1638，1599，1503，1428，1233，1193，1145，1067，1002，887，809，766，593，478 cm-1.
D.4-[(2′-N-(甲基)氮雜-3′-氧代-3′-[3″-甲氧基羰基-4″-甲基]苯基)丙基]吡啶基本上按實(shí)施例9D詳述的方法，用實(shí)施例12C小標(biāo)題化合物5.17mmol)、1.12g(3.23mmol)制備7標(biāo)題化合物和2ml三乙胺在20ml無(wú)水二氯甲烷中的溶液制備小標(biāo)題化合物。所得的物質(zhì)經(jīng)徑向?qū)游?6mm;用2-4%甲醇的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到617mg所需的化合物。
產(chǎn)率64%。
1H NMR(CDCl3)δ2.62(s，3H)，2.80-3.20(m，3H)，3.70-4.00(m，3H)，4.40-4.85(m，2H)，7.00-7.60(m，4H)，8.03(s，1H)，8.55-8.70(m，2H).
IR(CHCl3)3009，2955，1724，1634，1604，1565，1503，1483，1449，1437，1404，1363，1305，1261，1089，1077，1069 cm-1.
MS(FD)m/e 298(M+，100).
元素分析 C17H18N2O3計(jì)算值C，68.44;H，6.08;N，9.39;
實(shí)測(cè)值C，68.65;H，6.20;N，9.41.
E.4-[(2′-N-(甲基)氮雜-3′-氧代-3′-[3″-羧基-4″-甲基]苯基)丙基]吡啶鹽酸鹽基本上按實(shí)施例11D詳述的方法，用124mg(0.42mmol)實(shí)施例12D小標(biāo)題化合物、30mg(1.25mmol)氫氧化鋰和10ml 3∶1四氫呋喃/水混合液制備所需的小標(biāo)題化合物，得到120mg白色泡沫狀物，應(yīng)用它未經(jīng)進(jìn)一步純化。
1H NMR(DMSO-d6)δ2.54(s，3H)，2.98(s，3H)，4.65-4.95(m，2H)，7.20-8.00(m，5H)，8.76-8.90(m，2H).
IR(CHCl3)3400-3200(br.)，1711，1636，1506，1484，1452，1401，1203，1087，1005，925，792，744 cm-1.
MS(FD)m/e 285(M+，100).
F.[3S-(3R＊，4aR＊，8aR＊，2′S＊，3′R＊)]-2-(2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′-氧代-2″′-N-(甲基)氮雜-3″′-吡啶-4″″-基丙基]-6″-甲基)苯基]戊基十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺基本上按實(shí)施例1D詳述的方法，用109mg(0.272mmol)制備2B小標(biāo)題化合物、92mg(0.287mmol)實(shí)施例12E小標(biāo)題化合物、37mg(0.272mmol)HOBT·H2O和56mg(0.272mmol)DDC在3ml四氫呋喃中的溶液制備小標(biāo)題化合物。所得的粗品經(jīng)徑向?qū)游?2mm;用2-6%甲醇的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到40mg所需化合物。
產(chǎn)率22%。
1H NMR(CDCl3)δ1.14(s，9H)，1.20-2.35(m，18H)，2.45-2.70(m，2H)，2.80-3.10(m，5H)，3.25-3.55(m，1H)，3.95-4.10(m，2H)，4.38-4.78(m，3H)，5.79(br.s，1H)，6.75-7.40(m，10H)，8.60(br.s，2H).
IR(CHCl3)3600-3100，3008，2929，2865，1728，1669，1635，1604，1513，1482，1455，1447，1393，1367，1275，1117，1076，910 cm-1.
MS(FD)m/e 668(M+，100).
元素分析 C40H53N5O4計(jì)算值C，71.93;H，8.00;N，10.49.
實(shí)測(cè)值C，72.10;H，8.12;N，10.37.
實(shí)施例13A.2-[(3′-N-(甲基)氮雜-4′-氧代-4′-[3″-甲氧基羰基-4″-甲基]苯基)丁基]吡啶基本上按實(shí)施例9D詳述的方法，用803mg(3.84mmol)2-[2-(N-(甲基)氨基)乙基)吡啶二鹽酸鹽、500mg(1.44mmol)制備7標(biāo)題化合物和2ml三乙胺在10ml二氯甲烷中的溶液制備小標(biāo)題化合物。所得的物質(zhì)經(jīng)徑向?qū)游?4mm;用50-100%乙酸乙酯的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到497mg所需化合物。
產(chǎn)率64%。
1H NMR(CDCl3)δ2.62(s，3H)，2.84-3.25(m，5H)，3.62-4.00(m，5H)，6.95-7.98(m，6H)，8.38-8.62(m，1H).
IR(CHCl3)2954，1723，1626，1594，1571，1504，1478，1436，1405，1302，1259，1153，1100，1088，1052，995，919，834 cm-1.
MS(FD)m/e 312(M+，100).
元素分析 C18H20N2O3計(jì)算值C，69.21;H，6.45;N，8.97;
實(shí)測(cè)值C，68.97;H，6.34;N，8.95.
B.2-[(3′-N-(甲基)氮雜-4′-氧代-4′-[3″-羧基-4″-甲基]苯基)丁基]吡啶鹽酸鹽基本上按實(shí)施例11D詳述的方法制備所需的小標(biāo)題化合物，用153mg(0.49mmol)實(shí)施例13A小標(biāo)題化合物、36mg(1.47mmol)氫氧化鋰和10ml 3∶1四氫呋喃/水混合液，得到134mg吸濕的白色泡沫狀物，應(yīng)用該物質(zhì)不需要進(jìn)一步純化。
1H NMR(DMSO-d6)δ2.40-2.55(s，3H)，2.85-3.90(m，8H)，7.20-8.85(m，7H).
IR(CHCl3)3800-1800(br.)，1715，1631，1540，1506，1474，1451，1406，1242，1166，1085，1044，1001，841 cm-1.
MS(FD)m/e 299(M+，100).
C.[3S-(3R＊，4aR＊，8aR＊，2′S＊，3′R＊)]-2-(2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′-氧代-2″′-N-(甲基)氮雜-4″′-吡啶-2″″-基丙基]-6″-甲基)苯基]戊基十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺基本上按實(shí)施例1D詳述的方法制備小標(biāo)題化合物，用69mg(0.17mmol)制備2B小標(biāo)題化合物、60mg(0.18mmol)實(shí)施例13B小標(biāo)題化合物、23mg(0.17mmol)HOBT·H2O和35mg(0.17mmol)DCC在3ml無(wú)水四氫呋喃中的溶液，得到60mg所需化合物。
產(chǎn)率53%。
1H NMR(CDCl3)δ0.8-3.55(m，38H)，3.70-4.10(m，2H)，4.35-4.65(m，1H)，5.78-5.98(m，1H)，6.70-7.40(m，10H)，7.42-7.70(m，1H)，8.28(s，0.5H)，8.55(s，0.5H).
IR(CHCl3)3691，3600-3100，3028，3005，2929，1670，1627，1512，1455，1395，1368，1243，1049，910 cm-1.
MS(FD)m/e 682(M+，100).
元素分析 C41H55N5O4計(jì)算值C，72.22;H，8.13;N，10.27.
實(shí)測(cè)值C，72.00;H，8.15;N，10.18.
實(shí)施例14A.2-[(2′-N-(甲基)氮雜-3′-氧代-3′-[3″-甲氧基羰基-4″-甲基]苯基)丙基]吡嗪基本上按實(shí)施例11C詳述的方法，用204mg(1.66mmol)2-[2-(N-(甲基)氨基)甲基)吡嗪二鹽酸鹽和300mg(0.83mmol)制備7標(biāo)題化合物在10ml二氯甲烷中的溶液制備小標(biāo)題化合物。所得的物質(zhì)經(jīng)徑向?qū)游?4mm;用10-30%丙酮的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，隨后再經(jīng)徑向?qū)游?2mm;用10-30%丙酮的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到212mg淡橙色油狀物。
產(chǎn)率85%。
1H NMR(CDCl3)δ2.61(s，3H)，3.07(s，3H)，3.88(s，3H)，4.55-4.95(m，2H)，7.20-7.38(m，1H)，7.40-7.60(m，1H)，8.04(s，1H)，8.35-8.80(m，1H).
IR(CHCl3)3022，3007，2954，1724，1634，1503，1483，1449，1437，1402，1303，1261，1238，1152，1089，1077，1057，1020 cm-1.
MS(FD)m/e 299(M+，100).
B.2-[(2′-N-(甲基)氮雜-3′-氧代-3′-[3″-羧基-4″-甲基]苯基)丙基]吡嗪基本上按實(shí)施例11D詳述的方法制備所需的小標(biāo)題化合物，用150mg(0.50mmol)實(shí)施例14A小標(biāo)題化合物、36mg(1.50mmol)氫氧化鋰和8ml 3∶1四氫呋喃/水混合液，得到121mg類白色泡沫狀物。
產(chǎn)率85%。
1H NMR(CDCl3)δ2.65(s，3H)，3.11(s，3H)，4.55-4.98(m，2H)，7.20-7.38(m，1H)，7.50-7.62(m，1H)，8.18(s，1H)，8.40-8.85(m，3H).
IR(CHCl3)3700-2400(br.)，1700，1634，1530，1504，1483，1450，1402，1304，1176，1152，1086，1020，923，867，837 cm-1.
MS(FD)m/e 286(M+，100).
C.[3S-(3R＊，4aR＊，8aR＊，2′S＊，3′R＊)]-2-(2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′-氧代-2″′-N-(甲基)氮雜-3″′-吡嗪-2″″-基丙基]-6″-甲基)苯基]戊基十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺基本上按實(shí)施例1D詳述的方法制備小標(biāo)題化合物，用75.1mg(0.187mmol)制備2B小標(biāo)題化合物、59.3mg(0.208mmol)實(shí)施例14B小標(biāo)題化合物、25.3mg(0.187mmol)HOBT·H2O和38.6mg(0.187mmol)DDC在2ml無(wú)水四氫呋喃中的溶液，得到89mg白色泡沫狀物。
產(chǎn)率71%。
1H NMR(CDCl3)δ1.13(s，9H)，1.15-2.30(s，19H)，2.47-2.70(m，2H)，2.90-3.08(m，5H)，3.30-3.50(m，1H)，3.95-4.05(m，1H)，4.50-4.65(m，2H)，4.83(br.s，1H)，5.77(m，1H)，6.70-6.90(m，1H)，7.02-7.38(m，8H)，8.48-8.58(m，2.5H)，8.71(s，0.5H).
IR(CHCl3)3690，3618，3600-3200(br.)，3025，3009，2977，2929，1670，1636，1513，1455，1395，1368，1077，1047，1020，879 cm-1.
MS(FD)m/e 669(M+，100).
實(shí)施例15A.2-[2-(N-(叔丁氧基羰基)偶氮丙基]萘向2.0g(15.25mmol)實(shí)施例9A小標(biāo)題化合物在40ml無(wú)水二甲基甲酰胺的溶液中加入622mg(15.30mmol)60%氫化鈉。約1小時(shí)后加入3.38g(15.30mmol)2-(溴甲基)萘，將所得的反應(yīng)混合物反應(yīng)5小時(shí)，然后倒入二氯甲烷和水的混合物中。分離形成的兩層，有機(jī)相用水洗滌2次，用飽和碳酸鈉洗滌1次，用鹽水洗滌1次，然后經(jīng)硫酸鈉干燥并過(guò)濾。所得的粗品經(jīng)徑向?qū)游?6mm;用0-5%乙酸乙酯的己烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到2.25g澄清的油狀物。
產(chǎn)率54%。
1H NMR(CDCl3)δ1.50(s，9H)，2.75-2.95(m，3H)，4.58(s，2H)，7.30-7.90(m，7H).
IR(CHCl3)3010，2980，2932，1686，1510，1482，1455，1425，1394，1368，1244，1147，1049，875，818 cm-1.
MS(FD)m/e 271(M+，100).
元素分析 C17H21NO2計(jì)算值C，75.25;H，7.80;N，5.16.
實(shí)測(cè)值C，75.42;H，7.98;N，5.08.
B.2-(2-偶氮丙基)萘將505mg(1.86mol)實(shí)施例15A小標(biāo)題化合物和10ml 10%三氟乙酸的二氯甲烷溶液反應(yīng)約1小時(shí)。所得的反應(yīng)混合物經(jīng)濃縮得到殘余物。該殘余物再溶于二氯甲烷中，用飽和碳酸鈉洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過(guò)濾并濃縮，得到300mg黃色油狀物，應(yīng)用該油狀物不需要進(jìn)一步純化。
產(chǎn)率94%。
1H NMR(CDCl3)δ2.49(s，3H)，3.91(s，2H)，7.38-7.55(m，3H)，7.70-7.90(m，4H).
IR(CHCl3)3059，3011，2974，2941，2852，2798，1681，1602，1509，1475，1440，1272，1126，1095，909，894，857，819 cm-1.
MS(FD)m/e 171(M+，100).
C.2-[(2′-N-(甲基)氮雜-3′-氧代-3′-[3″-甲氧基羰基-4″-甲基]苯基)丙基]萘基本上按實(shí)施例11C詳述的方法，用71mg(0.42mmol)實(shí)施例15B小標(biāo)題化合物和100mg(0.28mmol)制備7標(biāo)題化合物在5ml無(wú)水二氯甲烷中的溶液制備小標(biāo)題化合物。所得的粗品經(jīng)徑向?qū)游?1mm;用10-35%乙酸乙酯的己烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到79mg油狀物。
產(chǎn)率81%。
1H NMR(CDCl3)δ2.61(s，3H)，2.75-3.25(m，3H)，3.60-4.00(m，3H)，4.55-5.00(m，2H)，7.08-8.18(m，10H).
IR(CHCl3)3029，3011，2954，2930，1724，1628，1503，1483，1437，1404，1305，1272，1247，1166，1151，1089，1076，817 cm-1.
元素分析 C22H21NO3計(jì)算值C，76.06;H，6.09;N，4.03;
實(shí)測(cè)值C，76.31;H，6.37;N，3.77.
D.2-[(2′-N-(甲基)氮雜-3′-氧代-3′-[3″-羧基-4″-甲基]苯基)丙基]萘基本上按實(shí)施例1C詳述的方法制備小標(biāo)題化合物，用51mg(0.15mmol)實(shí)施例15C小標(biāo)題化合物、8mg(0.30mmol)氫氧化鋰和5ml 3∶1四氫呋喃/水混合液，得到48mg類白色的固體，應(yīng)用該固體未經(jīng)進(jìn)一步純化。
產(chǎn)率96%。
1H NMR(DMSO-d6)δ2.38-2.60(m，3H)，2.76-3.00(m，3H)，4.50-4.90(m，2H)，7.18-8.00(m，10H).
MS(FD)m/e 347(M+，100).
E.[3S-(3R＊，4aR＊，8aR＊，2′S＊，3′R＊]-3-(2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′-氧代-2″′-N-(甲基)氮雜-3″′-萘-2″″-基丙基]-6″-甲基)苯基]戊基十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺基本上按實(shí)施例1D詳述的方法，用46mg(0.11mmol)制備2B小標(biāo)題化合物、38mg(0.11mmol)實(shí)施例15D小標(biāo)題化合物、15mg(0.11mmol)HOBT·H2O和23mg(0.11mmol)DCC在2ml無(wú)水二氯甲烷和0.2ml無(wú)水二甲基甲酰胺中的溶液制備小標(biāo)題化合物。所得的粗品經(jīng)徑向?qū)游?2mm;用0-5%甲醇的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到54mg白色泡沫狀物。
產(chǎn)率68%。
D-65.35(c＝1.01，MeOH).
1H NMR(CDCl3)δ1.13(s，9H)，1.15-2.35(m，15H)，2.45-3.10(m，6H)，3.20-3.55(m，1H)，3.82-4.10(m，2H)，4.50-4.65(m，2H)，4.88(br.s，1H)，5.69(br.s，1H)，6.50-6.83(m，1H)，6.95-7.90(m，15H).
IR(CHCl3)3622，3600-3100(br.)，3024，3008，2976，2929，1670，1630，1512，1455，1394，1368，1246，1200，1076，1047，910，819 cm-1.
MS(FD)m/e 718(M++1)，616(100).
元素分析 C45H56N4O4計(jì)算值C，75.39;H，7.87;N，7.81;
實(shí)測(cè)值C，75.32;H，7.88;N，8.04.
實(shí)施例16A.1-[(2′-N-(甲基)氮雜-3′-氧代-3′-[3″-甲氧基羰基-4″-甲基]苯基)丙基]萘基本上按實(shí)施例9D詳述的方法，用57mg(0.56mmol)三乙胺、87mg(0.42mmol)N-甲基-1-萘甲胺鹽酸鹽和100mg(0.28mmol)制備7標(biāo)題化合物在5ml無(wú)水二氯甲烷中的溶液制備小標(biāo)題化合物。所得的粗品經(jīng)徑向?qū)游?2mm;用30-50%乙酸乙酯的己烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到97mg淡黃色油狀物。
產(chǎn)率100%。
1H NMR(CDCl3)δ2.56(br.s，3H)，2.70-3.30(m，3H)，3.60-4.00(m，3H)，4.85-5.40(m，2H)，7.10-8.30(m，10H).
IR(CHCl3)3029，3010，1723，1623，1511，1483，1436，1405，1304，1252，1222，1212，1210，1192，1090，1076，804 cm-1.
MS(FD)m/e 347(M+，100).
元素分析 C22H21NO3計(jì)算值C，76.06;H，6.09;N，4.03;
實(shí)測(cè)值C，76.33;H，6.28;N，4.14.
B.1-[(2′-N-(甲基)氮雜-3′-氧代-3′-[3″-羧基-4″-甲基]苯基)丙基]萘基本上按實(shí)施例1C詳述的方法制備小標(biāo)題化合物，用89mg(0.26mmol)實(shí)施例16A小標(biāo)題化合物、13mg(0.52mmol)氫氧化鋰和8ml 3∶1四氫呋喃/水混合液，得到86mg白色泡沫狀物，應(yīng)用該泡沫狀物未經(jīng)進(jìn)一步純化。
產(chǎn)率100%。
1H NMR(CDCl3)δ2.64(s，3H)，2.70-3.25(m，3H)，4.80-5.30(m，2H)，7.05-8.35(m，10H)，8.70(br.s，1H).
IR(CHCl3)3700-2300(br.)，1700，1623，1504，1489，1450，1404，1263，1199，1078，1045，878 cm-1.
MS(FD)m/e 333(M+，100).
元素分析 C21H19NO3計(jì)算值C，75.66;H，5.74;N，4.20;
實(shí)測(cè)值C，75.91;H，5.96;N，4.22.
C.[3S-(3R＊，4aR＊，8aR＊，2′S＊，3′R＊)]-2-(2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′-氧代-2″′-N-(甲基)氮雜-3″′-萘-1″″-基丙基]-6″-甲基)苯基]戊基十氫異喹啉-3-N-叔醒基甲酰胺基本上按實(shí)施例1D詳述的方法，用80mg(0.20mmol)制備2B小標(biāo)題化合物、66mg(0.20mmol)實(shí)施例11B小標(biāo)題化合物、27mg(0.20mmol)HOBT·H2O和42mg(0.20mmol)DCC在5ml無(wú)水四氫呋喃和0.5ml無(wú)水二甲基甲酰胺中的溶液制備標(biāo)題化合物。得到的粗品經(jīng)徑向?qū)游?2mm;用0-4%甲醇的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到86mg白色泡沫狀物。
產(chǎn)率86%。
1H NMR(CDCl3)δ1.13(s，9H)，1.10-4.60(m，28H)，4.80-5.40(m，2H)，5.65(m，1H)，6.60-7.60(m，13H)，7.75-7.95(m，2H)，8.10-8.25(m，1H).
IR(CHCl3)3600-3100(br.)，3028，3009，2929，1670，1631，1512，1455，1394，1368，1259，1199，1075，1047，910，837 cm-1.
MS(FD)m/e 718(M++1)，616(100).
元素分析 C45H56N4O4計(jì)算值C，75.39;H，7.87;N，7.81;
實(shí)測(cè)值C，75.59;H，7.79;N，7.63.
實(shí)施例17A.[(2′-N-(甲基)氮雜-3′-氧代-3′-(3″-甲氧基羰基-4″-甲基苯基)丙基]苯基本上按實(shí)施例9D詳述的方法，用N-甲基-N-芐胺和制備7標(biāo)題化合物在無(wú)水二氯甲烷中的溶液制備了標(biāo)題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ2.59(s，3H)，2.75-3.15(m，3H)，3.70-3.95(m，3H)，4.40-4.80(m，2H)，7.00-7.55(m，7H)，8.02(s，1H).
IR(CHCl3)3030，3010，1723，1628，1497，1454，1437，1404，1359，1303，1242，1195，1165，1089，836 cm-1.
MS(FD)m/e 297(M+，100).
元素分析 C18H19NO3計(jì)算值C，72.71;H，6.44;N，4.71;
實(shí)測(cè)值C，72.72;H，6.49;N，4.88.
B.[(2′-N-(甲基)氮雜-3′-氧代-3′-(3″-羧基-4″-甲基苯基)丙基]苯基本上按實(shí)施例1C詳述的方法制備小標(biāo)題化合物，用110mg(0.37mmol)實(shí)施例17A小標(biāo)題化合物、18mg(0.74mmol)氫氧化鋰和10ml 3∶1四氫呋喃/水混合液，但當(dāng)反應(yīng)實(shí)質(zhì)上完成時(shí)，將反應(yīng)混合物在10ml 1N鹽酸和10ml乙酸乙酯之間進(jìn)行分離。分離形成的兩層，水相用10ml乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯萃取液再用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并過(guò)濾。所得的粗品經(jīng)徑向?qū)游?4mm;用10-50%甲醇的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到87mg白色固體。
產(chǎn)率83%。
1H NMR(CD3OD)δ2.51(s，3H)，2.75-3.10(m，3H)，4.40-4.85(m，2H)，6.90-7.90(m，8H).
IR(CHCl3)3800-2300(br.)，1616，1573，1497，1454，1402，1379，1261，1101，1077，833 cm-1.
MS(FD)m/e 283(M+，100).
C.[3S-(3R＊，4aR＊，8aR＊，2′S＊，3′R＊)]-2-(2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′-氧代-2″′-N-(甲基)氮雜-3″′-苯基丙基]-6″-甲基)苯基]戊基十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺基本上按實(shí)施例1D詳述的方法，用99mg(0.25mmol)制備2B小標(biāo)題化合物、70mg(0.25mmol)實(shí)施例17B小標(biāo)題化合物、33mg(0.25mmol)HOBT·H2O和51mg(0.25mmol)DCC在3ml無(wú)水四氫呋喃和1ml無(wú)水二甲基甲酰胺中的溶液制備小標(biāo)題化合物。所得的粗品經(jīng)徑向?qū)游?4mm;用2%甲醇的二氯甲烷溶液洗脫)純化，得到108mg白色泡沫狀物。
產(chǎn)率66%。
1H NMR(CDCl3)δ1.17(s，9H)，1.20-3.10(m，26H)，3.25-3.55(m，1H)，3.90-4.17(m，2H)，4.35-4.80(m，2H)，5.71(br.s，1H)，6.55-6.80(m，1H)，7.00-7.42(m，11H)，8.00(s，1H).
IR(CHCl3)3600-3100(br.)，3011，2931，2861，1672，1631，1515，1455，1391，1368，1250，1079，1047，910 cm-1.
MS(FD)m/e 668(M+，100).
元素分析 C41H54N4O4計(jì)算值C，73.84;H，8.16;N，8.40;
實(shí)測(cè)值C，73.81;H，8.39;N，8.35.
實(shí)施例18A.[(2′-氮雜-3′-氧代-3′-(3″-甲氧基羰基-4″-甲基苯基)丙基]苯基本上按實(shí)施例11C詳述的方法，用150mg(0.416mmol)制備7標(biāo)題化合物和67mg(0.62mmol)芐胺在5ml二氯甲烷中的溶液制備小標(biāo)題化合物。所得的物質(zhì)經(jīng)徑向?qū)游?1mm;用50%己烷的乙酸乙酯溶液洗脫)純化，得到99mg小標(biāo)題化合物。
產(chǎn)率84%。
IR(CHCl3)3452，3031，3012，2954，2954，1724，1660，1612，1522，1491，1454，1437，1400，1309，1249，1191，1152，1083，1029 cm-1.
MS(FD)m/e 283(M+，100).
B.[(2′-氮雜-3′-氧代-3′-(3″-羧基-4″-甲基苯基)丙基]苯按實(shí)施例1C詳述的方法制備小標(biāo)題化合物，用66mg(0.23mmol)實(shí)施例18A小標(biāo)題化合物、17mg(0.70mmol)氫氧化鋰和5ml3∶1四氫呋喃/水混合液，得到64mg白色固體，應(yīng)用該固體未經(jīng)進(jìn)一步純化。
產(chǎn)率100%。
1H NMR(CDCl3)δ2.60(s，3H)，4.50-4.60(m，2H)，7.15-7.40(m，6H)，7.80-7.90(m，1H)，8.39(s，1H)，8.98-9.10(m，1H).
IR(CHCl3)4000-2000(br.)，3296，3070，3031，2977，2930，1700，1636，1610，1570，1545，1497，1416，1310，1264，917，698，671 cm-1.
MS(FD)m/e 269(M+，100).
元素分析 C16H15NO3計(jì)算值C，71.36;H，5.61;N，5.20;
實(shí)測(cè)值C，71.42;H，5.99;N，5.12.
C.[3S-(3R＊，4aR＊，8aR＊，2′S＊，3′R＊)]-2-(2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′-氧代-2″′-氮雜-3″′-苯基丙基]-6″-甲基)苯基]戊基十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺基本上按實(shí)施例1D詳述的方法，用72mg(0.18mmol)制備2B小標(biāo)題化合物、49mg(0.18mmol)實(shí)施例18B小標(biāo)題化合物、24mg(0.18mmol)HOBT·H2O和37mg(0.18mmol)DCC在3ml無(wú)水四氫呋喃中的溶液制備小標(biāo)題化合物。所得的粗品經(jīng)徑向?qū)游?1mm;用0-5%甲醇的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到72mg白色粉末狀物。
1H NMR(CDCl3)δ1.06(s，9H)，1.15-2.70(m，21H)，2.85-3.05(m，2H)，3.48-3.55(m，1H)，3.75-4.00(m，2H)，4.50-4.70(m，3H)，5.68(s，1H)，6.75-7.42(m，12H)，7.76(m，1H).
IR(CHCl3)3429，3600-3100(br.)，3009，2929，2865，1657，1606，1517，1497，1455，1394，1368，1307，1277，1145，1046，910 cm-1.
元素分析 C40H52N4O4計(jì)算值C，73.59;H，8.03;N，8.58;
實(shí)測(cè)值C，73.31;H，7.92;N，8.43.
實(shí)施例19A.1-(N-(甲基)-N-(叔丁氧基羰基)氨基)甲基-4-氟苯基本上按實(shí)施例15A詳述的方法，用3.0g(22.9mmol)實(shí)施例9A小標(biāo)題化合物、3.97g(27.4mmol)4-氟芐基氯、604mg(25.2mmol)氫化鈉、8.2mg(25.2mmol)碘化鈉在6.0ml無(wú)水二甲基甲酰胺中的溶液制備小標(biāo)題化合物。所得的粗品經(jīng)快速層析(用5-10%乙酸乙酯的己烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到3.74g澄清的油狀物。
產(chǎn)率68%。
1H NMR(CDCl3)δ1.47(s，9H)，2.80(br.s，2H)，4.38(s，2H)，6.90-7.25(m，4H).
IR(CHCl3)3010，2981，2932，1686，1607，1510，1481，1455，1428，1394，1368，1314，1300，1294，1173，1147，878，822 cm-1.
MS(FD)m/e 239(M+)，469(100).
元素分析 C13H18NO2F計(jì)算值C，65.25;H，7.58;N，5.85;F，7.94;
實(shí)測(cè)值C，65.10;H，7.48;N，5.81;F，7.81.
B.1-(N-(甲基)氨基)甲基-4-氟苯鹽酸鹽基本上按實(shí)施例9C詳述的方法制備小標(biāo)題化合物，用2.0g(8.36mmol)實(shí)施例19A小標(biāo)題化合物、10ml 5N鹽酸在10ml二烷中的溶液，得到1.38g白色固體。
產(chǎn)率95%。
MS(FD) m/e 139(M++1，100).
IR(CHCl3)2989，2934，2857，2776，2711，2432，1603，1516，1477，1440，1422，1236，1167，838，825，772，548，501 cm-1.
C.1-[(2′-N(甲基)氮雜-3′-氧代-3′-(3″-甲氧基羰基-4″-甲基苯基)丙基]-4-氟苯基本上按實(shí)施例9D詳述的方法，用520mg(1.44mmol)制備7標(biāo)題化合物和351mg(2.17mmol)實(shí)施例19B小標(biāo)題化合物和0.5ml三乙胺在5ml二氯甲烷中的溶液制備了標(biāo)題化合物。所得的物質(zhì)經(jīng)快速層析(用20-30%乙酸乙酯的己烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到376mg所需化合物。
產(chǎn)率83%。
1H NMR(CDCl3)δ2.61(s，3H)，2.80-3.10(m，3H)，3.87(br.s，3H)，4.40-4.80(m，2H)，7.00-7.55(m，6H)，8.02(s，1H).
IR(CHCl3)3029，3009，2954，2931，1724，1629，1511，1484，1437，1404，1355，1305，1157，1089，1076，970，834，824 cm-1.
MS(FD)m/e 315(M+，100).
元素分析 C18H18NO3F計(jì)算值C，68.56;H，5.75;N，4.44;F，6.02;
實(shí)測(cè)值C，68.36;H，5.89;N，4.61;F，6.10.
D.1-[(2′-N(甲基)氮雜-3′-氧代-3′-(3″-羧基-4″-甲基苯基)丙基]-4-氟苯按實(shí)施例1C詳述的方法制備小標(biāo)題化合物，用269mg(0.85mmol)實(shí)施例19C小標(biāo)題化合物、102mg(4.03mmol)氫氧化鋰和10ml 3∶1四氫呋喃/水混合液，得到254mg透明的無(wú)定形固體。
產(chǎn)率99%。
1H NMR(CDCl3)δ2.68(s，3H)，2.80-3.10(m，3H)，4.40-4.80(m，2H)，7.00-7.60(m，6H)，8.17(s，1H).
IR(CHCl3)3700-2300(br.)，1699，1628，1609，1511，1484，1450，1403，1355，1302，1158，1097，1076，924，851，823 cm-1.
MS(FD)m/e 301(M+)，603(100).
E.[3S-(3R＊，4aR＊，8aR＊，2′S＊，3′R＊)]-2-(2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′-氧代-2″′-N-(甲基)氮雜-3″′-(4″″-氟苯基)丙基]-6″-甲基)苯基]戊基十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺基本上按實(shí)施例1D詳述的方法，用76mg(0.19mmol)制備2B小標(biāo)題化合物、57mg(0.19mmol)實(shí)施例18B小標(biāo)題化合物、26mg(0.19mmol)HOBT·H2O和39mg(0.19mmol)DCC在無(wú)水四氫呋喃和無(wú)水二甲基甲酰胺中的溶液制備小標(biāo)題化合物。所得的粗品經(jīng)快速層析(用1-4%甲醇的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到96mg所需化合物。
產(chǎn)率74%。
1H NMR(CDCl3)δ1.14(s，9H)，1.20-2.36(m，19H)，2.50-3.10(m，6H)，3.35-3.60(m，1H)，3.90-4.10(m，2H)，4.35-4.75(m，3H)，5.68(s，1H)，6.65-6.82(m，1H)，6.98-7.40(m，11H).
IR(CHCl3)3613，3600-3100(br.)，3011，2977，2929，2866，1670，1632，1607，1511，1455，1394，1368，1158，1075，1047，879，823 cm-1.
MS(FD)m/e 686(M+，+1)，584(100).
實(shí)施例20A.3-N，N-(二甲基)氨基甲酰-6-甲基苯甲酸甲酯基本上按實(shí)施例9D詳述的方法，用388mg(1.08mmol)制備7標(biāo)題化合物、176mg(2.16mmol)二甲胺鹽酸鹽和0.5ml三乙胺在5ml二氯甲烷中的溶液制備小標(biāo)題化合物。所得的物質(zhì)經(jīng)快速層析(用20%乙酸乙酯的己烷溶液洗脫)純化，得到226mg澄清的油狀物。
產(chǎn)率95%。
1H NMR(CDCl3)δ2.61(s，3H)，2.90-3.20(m，6H)，3.88(s，3H)，7.24-7.30(m，1H)，7.43-7.48(m，1H)，7.98(d，J＝1.63Hz，1H).
IR(CHCl3)3029，3007，2954，1723，1628，1509，1487，1437，1401，1304，1258，1151，1099，1081，1007，978，919，835 cm-1.
MS(FD)m/e 221(M+，100).
元素分析 C12H15NO3計(jì)算值C，65.14;H，6.83;N，6.33;
實(shí)測(cè)值C，65.37;H，6.73;N，6.09.
B.(3-N，N-二甲基氨基甲酰-6-甲基)苯甲酸按實(shí)施例1C詳述的方法制備小標(biāo)題化合物，用186mg(0.84mmol)實(shí)施例20A小標(biāo)題化合物、101mg(4.20mmol)氫氧化鋰和10ml 3∶1四氫呋喃/水混合液，得到158mg白色固體。
產(chǎn)率91%。
1H NMR(CDCl3)δ2.67(s，3H)，2.90-3.40(m，6H)，7.32(d，J＝7.83Hz，1H)，7.45-7.65(m，1H)，8.12(d，J＝1.36Hz，1H).
IR(CHCl3)3700-2300(br.)，1699，1628，1567，1509，1487，1452，1401，1302，1265，1152，1099，1062，922，834 cm-1.
MS(FD)m/e 208(M++1)，415(100).
元素分析 C11H13NO3計(jì)算值C，63.76;H，6.32;N，6.76;
實(shí)測(cè)值C，63.89;H，6.28;N，6.50.
C.[3S-(3R＊，4aR＊，8aR＊，2′S＊，3′R＊)]-2-(2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′-氧代-1″′-N，N-(二甲基)氨基-甲基]-6″-甲基)苯基]戊基十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺基本上按實(shí)施例1D詳述的方法，用165mg(0.41mmol)制備2B小標(biāo)題化合物、85mg(0.41mmol)實(shí)施例20B小標(biāo)題化合物、56mg(0.41mmol)HOBT·H2O和85mg(0.41mmol)DCC在2ml無(wú)水四氫呋喃中的溶液制備小標(biāo)題化合物。所得的粗品經(jīng)徑向?qū)游?1mm，用1-5%甲醇的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度度洗脫)純化，得到76mg所需化合物。
產(chǎn)率31%。
1H NMR(CDCl3)δ1.16(s，9H)，1.20-3.50(m，29H)，3.95-4.22(m，2H)，4.55-4.70(m，1H)，5.83(m，1H)，6.80-7.55(m，8H).
IR(CHCl3)3650-3100，2930，2866，1669，1628，1513，1455，1394，1368，1306，1265，1147，1116，1086，1048，910，837 cm-1.
MS(FD)m/e 591(M+)，490(M+，100).
元素分析 C35H50N4O4計(jì)算值C，71.15;H，8.53;N，9.48;
實(shí)測(cè)值C，71.45;H，8.74;N，9.44.
實(shí)施例21[3S-(3R＊，4aR＊，8aR＊，2′S＊，3′S＊)]-2-(2′-羥基-3′-苯硫基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′-氧代-2″′-N-(甲基)氮雜-3″′吡啶-2″″-基丙基]-6″-甲基)苯基]戊基十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺基本上按實(shí)施例1D詳述的方法，用103mg(0.244mmol)制備4G小標(biāo)題化合物、86mg(0.27mmol)實(shí)施例9E小標(biāo)題化合物、33mg(0.24mmol)HOBT·H2O、50mg(0.24mmol)DCC和102μl三乙胺在無(wú)水四氫呋喃中的溶液制備小標(biāo)題化合物。所得的粗品經(jīng)徑向?qū)游?2mm;用0-6%甲醇的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到147mg所需化合物。
產(chǎn)率86%。
1H NMR(CDCl3)δ1.05(s，9H)，1.10-2.24(m，16H)，2.40-2.60(m，4H)，2.85-2.96(m，1H)，3.04(s，3H)，3.37-3.45(m，1H)，3.50-3.95(m，2H)，4.0-4.10(m，1H)，4.35-4.65(m，2H)，4.70-5.00(m，1H)，5.49(s，1H)，7.14-7.50(m，9H)，7.53-7.63(m，2H)，8.56(d，J＝4.66Hz，1H).
IR(CHCl3)3600-3100(br.)，3028，3007，2976，2929，1670，1633，1573，1514，1481，1455，1439，1394，1368，1276，1247，1077，1047 cm-1.
MS(FD)m/e 700(M+，100).
元素分析 C35H50N4O4計(jì)算值C，71.15;H，8.53;N，9.48;
實(shí)測(cè)值C，71.45;H，8.74;N，9.44.
實(shí)施例22[3S-(3R＊，4aR＊，8aR＊，2′S＊，3′S＊)]-2-(2′-羥基-3′-苯硫基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′-氧代-2″′-N-(甲基)氮雜-3″′-吡啶-4″″-基丙基]-6″-甲基)苯基]戊基十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺基本上按實(shí)施例1D詳述的方法，用56mg(0.13mmol)制備4G小標(biāo)題化合物、50.0mg(0.16mmol)實(shí)施例12E小標(biāo)題化合物、18mg(0.13mmol)HOBT·H2O、27mg(0.13mmol)DCC和54μl三乙胺在2ml四氫呋喃中的溶液制備小標(biāo)題化合物。所得的粗品經(jīng)徑向?qū)游?1mm;用5%甲醇的二氯甲烷溶液洗脫)純化，得到56mg類白色泡沫狀物。
產(chǎn)率50%。
1H NMR(CDCl3)δ1.03(s，9H)，1.10-2.60(m，20H)，2.85-3.05(m，4H)，3.35-3.45(m，1H)，3.55-3.95(m，2H)，4.00-4.10(m，1H)，4.38-4.80(m，3H)，5.54(s，1H)，7.05-7.75(m，10H)，8.52-8.60(m，2H).
MS(FD)m/e 700(M+)599(100).
實(shí)施例23[3S-(3R＊，4aR＊，8aR＊，2′S＊，3′S＊)]-2-(2′-羥基-3′-萘-2-基硫甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′-氧代-2″′-N-(甲基)氮雜-3″′-吡啶-2″″-基丙基]-6″-甲基)苯基]戊基十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺基本上按實(shí)施例1D詳述的方法，用77mg(0.16mmol)制備3G小標(biāo)題化合物、38mg(0.18mmol)實(shí)施例9E小標(biāo)題化合物、22mg(0.16mmol)HOBT·H2O、34mg(0.16mmol)DCC和68μl三乙胺在3ml無(wú)水四氫呋喃中的溶液制備小標(biāo)題化合物。所得的粗品經(jīng)徑向?qū)游?2mm;用0-6%甲醇的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，隨后再經(jīng)徑向?qū)游?2mm;用1-4%甲醇的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到81.6mg所需化合物。
產(chǎn)率67%。
1H NMR(CDCl3)δ1.06(s，9H)，1.10-2.65(m，19H)，2.65-3.05(m，4H)，3.42-4.18(m，5H)，4.40-4.90(m，3H)，5.63(s，1H)，7.10-7.90(m，13H)，8.53(d，J＝3.13Hz，1H).
IR(CHCl3)3600-3100(br.)，3025，3008，2929，1670，1632，1572，1515，1455，1394，1368，1247，1147，1077，1047，944，816 cm-1.
MS(FD)m/e 751(M++1，100).
元素分析 C44H55N5O4S計(jì)算值C，70.46;H，7.39;
實(shí)測(cè)值C，70.46;H，7.19.
實(shí)施例24[2S-(2R＊，2′S＊，3′R＊]-1-[2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″-氧代-2″′-N-(甲基)氮雜-3″′-吡啶-2″″-基丙基]-6″-甲基)苯基]戊基-(吡啶-3″-基甲基)哌嗪-2-N-(叔丁基)甲酰胺基本上按實(shí)施例1D詳述的方法，用67mg(0.18mmol)制備5E小標(biāo)題化合物、59mg(0.15mmol)實(shí)施例9E小標(biāo)題化合物、21mg(0.15mmol)HOBT·H2O、31mg(0.15mmol)DCC和64μl三乙胺在3ml無(wú)水四氫呋喃和0.5ml二甲基甲酰胺中的溶液制備小標(biāo)題化合物。所得的粗品經(jīng)徑向?qū)游?1mm;用5-8%甲醇的二氯甲烷溶液進(jìn)行梯度洗脫)純化，得到93mg所需化合物。
產(chǎn)率87%。
1H NMR(CDCl3)δ1.33(s，9H)，2.10-3.10(m，16H)，3.32-3.55(m，3H)，3.90-4.03(m，1H)，4.38-4.57(m，2H)，4.65-4.92(m，2H)，6.23(d，J＝9.26Hz，1H)，7.03-7.43(m，11H)，7.56-7.91(m，3H)，8.50-8.60(m，2H).
IR(CHCl3)3691，3700-3100(br.)，3025，3007，2976，1634，1553，1512，1480，1455，1427，1405，1366，1237，1151，1077，1048 cm-1.
實(shí)施例25[3S-(3R＊，4aR＊，8aR＊，2′S＊，3′R＊)]-2-(2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′-氧代-2″′-N-(甲基)氮雜-3″′-吡啶-2″″-基丙基]-6″-甲基)苯基]戊基十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺二甲磺酸鹽向100mg(0.15mmol)實(shí)施例10標(biāo)題化合物在2ml無(wú)水二氯甲烷的冷(0℃)溶液中加入0.3ml(0.30mmol)1M 甲磺酸的二氯甲烷溶液。所得的反應(yīng)混合物在減壓下濃縮至干，得到122.7mg所需化合物。
實(shí)施例26[3S-(3R＊，4aR＊，8aR＊，2′S＊，3′S＊)]-2-(2′-羥基-3′-苯硫基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′-氧代-2″′-N-(甲基)氮雜-3″′-吡啶-2″″-基丙基]-6″-甲基)苯基]戊基十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺二甲磺酸鹽基本上按實(shí)施例25詳述的方法，用30mg(0.043mmol)實(shí)施例21的標(biāo)題化合物、172μl(0.085mmol)0.5M 甲磺酸的二氯甲烷溶液和2ml二氯甲烷制備標(biāo)題化合物，得到38mg所需化合物。
實(shí)施例27[3S-(3R＊，4aR＊，8aR＊，2′S＊，3′S＊)]-2-(2′-羥基-3′-萘-2-基硫甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′-氧代-2″′-N-(甲基)氮雜-3″′-吡啶-2″″-基丙基]-6″-甲基)苯基]戊基十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺二甲磺酸鹽基本上按實(shí)施例25詳述的方法，用35mg(0.047mmol)實(shí)施例21標(biāo)題化合物、193μl(0.096mmol)0.5M甲磺酸的二氯甲烷溶液和2ml二氯甲烷制備標(biāo)題化合物，得到35mg所需化合物。
實(shí)施例28[2S-(2R＊，2′S＊，3′R＊]-1-[2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′-氧代-2″′-N-(甲基)氮雜-3″′-吡啶-2″″-基丙基]-6″-甲基)苯基]戊基-(吡啶-3″-基甲基)哌嗪-2-N-(叔丁基)甲酰胺三甲磺酸鹽基本上按實(shí)施例25詳述的方法，用35.9mg(0.051mmol)實(shí)施例21標(biāo)題化合物、312μl(0.156mmol)0.5M甲磺酸的二氯甲烷溶液和1ml二氯甲烷制備標(biāo)題化合物，得到50mg所需化合物。
如以上所述，本發(fā)明化合物可用于抑制HIV蛋白酶，HIV蛋白酶是與病毒成分產(chǎn)生和裝配有關(guān)的酶。本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施例是提供治療或預(yù)防HIV感染的方法，該方法包括給需要的靈長(zhǎng)類動(dòng)物服用有效劑量的式Ⅰ化合物或其藥學(xué)上適用的鹽。本發(fā)明的另一具體實(shí)施例是提供治療或預(yù)防愛滋病的方法，該方法包括給需要的靈長(zhǎng)類動(dòng)物服用的效劑量的式Ⅰ化合物或其藥學(xué)上適用的鹽。本發(fā)明的又一具體實(shí)施例是提供抑制HIV復(fù)制的方法，該方法包括給受HIV感染的細(xì)胞、對(duì)HIV感染敏感的細(xì)胞或需要的靈長(zhǎng)類動(dòng)物服用有效劑量的式Ⅰ化合物或其藥學(xué)上適用的鹽。
本文中所用的術(shù)語(yǔ)“有效劑量”是指能夠抑制引起病毒成分產(chǎn)生和裝配的HIV蛋白酶。本發(fā)明方法所涉及的HIV蛋白酶抑制作用包括治療或者預(yù)防處理，當(dāng)然，為了獲得治療或預(yù)防作用，需服用本發(fā)明化合物的具體劑量將取決于有關(guān)病例的具體情況，例如包括服用的化合物、給藥途徑、需治療的病情以及需治療的個(gè)體的具體情況。通常每天的劑量約0.01mg/kg體重至約50mg/kg體重本發(fā)明有效化合物。每天的優(yōu)選劑量一般為約0.05mg/kg至約20mg/kg，理想的劑量范圍為約0.1mg/kg至約10mg/kg。
本發(fā)明化合物可以通過(guò)多種途徑服用，包括口服、直腸給藥、經(jīng)皮給藥、皮下給藥、靜脈給藥、肌內(nèi)給藥和經(jīng)鼻給藥。本發(fā)明化合物最好在服用之前配制。因此，本發(fā)明的另一具體實(shí)施例是提供藥用組合物，該組合物包括有效劑量的式Ⅰ化合物或其藥學(xué)上適用的鹽，以及藥學(xué)上適用的載體、稀釋劑或賦形劑。
在所述組合物中，有效成分占組合物重量的0.1%～99.9%?！八帉W(xué)上適用的”是指所述載體、稀釋劑或賦形劑與組合物的其它成分是可配伍的，并且對(duì)接受者是無(wú)害的。
本發(fā)明藥用組合物可以按已知的方法，應(yīng)用已知的和容易得到的成分配制。在配制本發(fā)明組合物中，通常將有效成分與載體混合，或者用載體進(jìn)行稀釋，或者將有效成分包括在膠囊、小藥囊、紙或其它包裝物形式的載體內(nèi)。當(dāng)所述載體作為稀釋劑用時(shí)，該稀釋劑可以是固體、半固體或液體物質(zhì)，它們可作為有效成分的媒介物、賦形劑或介質(zhì)。因此，所述組合物可以是片劑、小藥丸劑、粉劑、錠劑、小藥囊劑、扁囊劑、馳劑、混懸劑、乳劑、溶液劑、糖漿劑、氣霧劑(作為固體或在液體介質(zhì)中)、含有例如直到10%重量有效成分的軟膏劑、軟或硬膠囊劑、栓劑、無(wú)菌注射溶液劑、無(wú)菌包裝的粉劑等形式。
下述制劑實(shí)施例僅是為了詳細(xì)敘述本發(fā)明，無(wú)論如何不是限制本發(fā)明的范圍。術(shù)語(yǔ)“有效成分”是指式Ⅰ化合物或其藥學(xué)上適用的鹽。
制劑1用下述成分制備硬膠囊劑量(mg/膠囊)有效成分 250經(jīng)干燥的淀粉 200硬脂酸鎂 10總計(jì) 460mg制劑2用下述成分制備片劑量(mg/片)有效成分 250微晶纖維素 400二氧化硅(煙熏的) 10硬脂酸 5總計(jì) 665mg
將上述成分混合并壓制成片劑，每片重665mg。
制劑3制備含有以下成分的氣霧劑重量有效成分 0.25乙醇 25.75推進(jìn)劑22(氯二氟甲烷) 74.00總計(jì) 100.00將有效成分與乙醇混合，混合物加到部分推進(jìn)劑22中，冷至-30℃，并移至裝填裝置中。將所需的量裝入不銹鋼容器內(nèi)，并加入剩余量的推進(jìn)劑進(jìn)行稀釋。再將閥門裝配到該容器上。
制劑4按下法制備每片含有60mg有效成分的片劑量(mg/片)有效成分 60淀粉 45微晶纖維素 35聚乙稀吡咯烷酮(為10%水溶液) 4羧甲基淀粉鈉 4.5硬脂酸鎂 0.5滑石粉 1總計(jì) 150
將有效成分、淀粉和纖維素通過(guò)美國(guó)標(biāo)號(hào)45目篩，并充分地混合。使含有聚乙烯吡咯烷酮的水溶液與得到的粉末狀物混合，然后將混合物過(guò)美國(guó)標(biāo)號(hào)14目篩。得到的顆粒于50℃干燥，并通過(guò)美國(guó)標(biāo)號(hào)18目篩。羧甲基淀粉鈉、硬脂酸鎂和滑石粉預(yù)先通過(guò)美國(guó)標(biāo)號(hào)60目篩，然后將其加到上述顆粒中，混合之后在壓片機(jī)上壓制成片劑，得到每片重150mg的片劑。
制劑5每粒含80mg有效成分的膠囊劑制備如下量(mg/膠囊)有效成分 80mg淀粉 59mg微晶纖維素 59mg硬脂酸鎂 2mg總計(jì) 200mg將有效成分、纖維素、淀粉和硬脂酸鎂混合，通過(guò)美國(guó)標(biāo)號(hào)45目篩，以200mg的量裝入硬明膠膠囊中。
制劑6每粒含225mg有效成分的栓劑制備如下有效成分 225mg飽和脂肪酸甘油酯 2，000mg總計(jì) 2，225mg將有效成分通過(guò)美國(guó)標(biāo)號(hào)60目篩，并將其混懸于預(yù)先用最小需要的熱使其熔融的飽和脂肪酸甘油酯中。然后將混合物注入標(biāo)定的2g容量的栓劑模中，并使其冷卻。
制劑7每5ml劑量含50mg有效成分的混懸劑制備如下有效成分 50mg羧甲基纖維素鈉 50mg糖漿 1.25ml苯甲酸溶液 0.10ml調(diào)味香料 適量色素 適量純化水至 5ml將有效成分通過(guò)美國(guó)標(biāo)號(hào)45目篩，并與羧甲基纖維素鈉和糖漿混合，生成調(diào)勻的糊劑。苯甲酸溶液、調(diào)味香料和著色劑用部分水稀釋，并于攪拌下加入。然后加入足夠量的水至所需體積。
制劑8靜脈注射劑配制如下有效成分 100mg等滲鹽水 1000ml通常以每分鐘1ml的速度給受試者靜脈注射上述成分構(gòu)成的溶液。
進(jìn)行下面的試驗(yàn)(熒光HIV-1蛋白酶抑制試驗(yàn))，以說(shuō)明本發(fā)明化合物抑制HIV蛋白酶的能力。
本文所用的縮寫定義如下BSA-牛血清白蛋白
BOC-叔丁氧基羰基Brz-2-溴芐氧基羰基2-Clz-2-氯芐氧基羰基DCC-二環(huán)己基碳化二亞胺DIEA-二異丙基乙胺DTT-二硫蘇糖醇EDTA-乙二胺四乙酸FITC-異硫代氨基甲酰熒光素HEPES-4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙磺酸MES-4-嗎啉乙磺酸PAM-苯基乙酰亞氨基甲基TAPS-3-[三(羥甲基)甲基]氨基-1-磺酸TRIS-三(羥甲基)氨基甲烷TOS-對(duì)甲苯磺?；?tosyl)Ⅰ.蛋白酶和Gag組份的制備A.大腸桿菌K12 L507/pHP10D的培養(yǎng)大腸桿菌K12 L507/pHP10D的凍干制劑獲自Northern Regional Research Laboratory(伊利諾斯州，Peoria 61604).登記號(hào)為NRRL B-18560(凍存日期1989，11，14)。將此凍干制劑轉(zhuǎn)種至含有10ml LB培養(yǎng)基(含10g Bacto-胰蛋白酶水解產(chǎn)生的胨、5g Bacto-酵母提取物、NaCl 10g/L)的試管內(nèi)，pH調(diào)至7.5，32℃培養(yǎng)過(guò)夜。
取小量經(jīng)過(guò)夜培養(yǎng)的菌液置于含有12.5μg/ml四環(huán)素的LB瓊脂(LB培養(yǎng)基加15g/L Bacto-瓊脂)平板上，以便獲得大腸桿菌K12L507/pHP10D的單個(gè)菌落。將得到的單個(gè)菌落種入含四環(huán)素(12.5μg/ml)的10ml LB培養(yǎng)基內(nèi)，于32℃強(qiáng)烈振蕩培養(yǎng)過(guò)夜。將此10ml過(guò)夜培養(yǎng)物再轉(zhuǎn)種到含四環(huán)素(12.5μg/ml)的LB培養(yǎng)基內(nèi)，并于32℃強(qiáng)烈振蕩培養(yǎng)，直至細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖至半對(duì)數(shù)期為止。
B.大腸桿菌K12 L507/pHGAG的培養(yǎng)凍干的大腸桿菌K12 L507/pHGAG獲自NRRL，登記號(hào)為NRRL B-18561(凍存日期1989，11，14)。分離經(jīng)純化的大腸桿菌K12 L507/pHGAG菌落，并基本上按上述步驟A培養(yǎng)大腸桿菌K12 L507/pHP10D的方法，將細(xì)菌培養(yǎng)至半對(duì)數(shù)生長(zhǎng)繁殖期用作接種物。
C.蛋白酶組份的制備大腸桿菌K12 L507/pHP10D，用含四環(huán)素(12.5μg/ml)的LB培養(yǎng)基于32℃培養(yǎng)至半對(duì)數(shù)繁殖期后，將培養(yǎng)溫度快速升至40℃誘發(fā)基因表達(dá)，在將培養(yǎng)物置冰上迅速冷卻之前，使細(xì)胞于40℃保溫2.5小時(shí)。離心細(xì)胞，并使細(xì)胞重新懸浮于20ml 50mmol MES 緩沖液(pH6.0，含1mmol EDTA，1mmol DTT，1mmol PMSF和10%甘油-緩沖液A)中。用Fischer300型粉碎儀和一小探頭，通過(guò)超聲使細(xì)胞破碎溶解。隨后，以27，000×g離心，上清液用緩沖液A稀釋至總體積為60ml，并加入經(jīng)緩沖液A平衡的2.0×19cm QAE-Sepharose柱中(1ml/分鐘，4℃)。等濃度地洗柱180分鐘，然后在120分鐘內(nèi)用0-1.0M氯化鈉在緩沖液A中的水溶液進(jìn)行梯度洗脫。用合成多肽Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val，通過(guò)HPLC法測(cè)定酶活性(Margolin等，Biochem.Biophys.Res.Commun.，167，554-560(1990));同時(shí)測(cè)定生成的多肽P1(Ser-Gln-Asn-Tyr)。
合并活性組份，配制1.2M硫酸銨溶液，并加到經(jīng)緩沖液A(含1.2M硫酸銨)平衡的2.0×18cm己基瓊脂糖柱中。于4℃以1ml/分鐘的流速裝填樣品，隨后用平衡緩沖液洗滌240分鐘(1ml/分鐘)，再用1.2～0M硫酸銨在緩沖液A中的溶液以相同的流速反相線性梯度洗脫120分鐘。用緩沖液A等濃度洗柱120分鐘。
合并活性組份，用帶有YM-10膜的Amicon攪拌容器濃縮至10ml，然后加到經(jīng)緩沖液A平衡的MonoS陽(yáng)離子交換柱(1.0×10cm)中。于25℃以1ml/分鐘的流速裝填樣品。等濃度洗滌30分鐘后，在40分鐘內(nèi)用0～0.45M氯化鈉在緩沖液A中的水溶液進(jìn)行線性梯度洗脫，使蛋白酶洗脫下來(lái)。最后，用0.45M氯化鈉在緩沖液A中的水溶液等濃度地洗柱30分鐘。
合并活性組份，并用Amicon攪拌器和YM-10膜濃縮至200μl，然后將蛋白酶加到經(jīng)緩沖液A(含0.1M氯化鈉水溶液)平衡的Sup-erose 6號(hào)篩析柱中。用上述緩沖液以0.5ml/分鐘的流速等濃度地洗滌柱子，隨后HIV蛋白酶被洗脫下來(lái)，呈一單峰。
QAE-Sepharose和己基瓊脂糖購(gòu)自Sigma化學(xué)公司。Superose 6和MonoS購(gòu)自Pharmacia。緩沖液和試劑獲自Sigma。
D.Gag組份的制備按類似方法將大腸桿菌K12 507/pHGAG于32℃培養(yǎng)至半對(duì)數(shù)繁殖期，然后移至40℃處培養(yǎng)約4-5小時(shí)。隨后在冰上冷卻，離心，沉積細(xì)菌重新懸浮于含5mg/ml溶菌酶的8ml溶胞緩沖液中。該溶胞緩沖液的組成為50mM Tris-HCl(pH7.8)、5mM EDTA、1mM DTT、100mM NaCl、1μg/ml E64和2μg/ml抑肽酶。培養(yǎng)物置于4℃保溫約30-60分鐘后，用Branson○細(xì)胞粉碎儀進(jìn)行短暫的超聲波破碎(用60%功率)，每次20秒鐘，共3次，每次破碎之間均需冷卻。然后將培養(yǎng)物以15，000×g離心。含未處理gag蛋白的上清液在Sephadex G-50柱上篩析層析后而部分純化，純化物于-20℃在50%甘油和溶胞緩沖液中貯藏。
Ⅱ.底物的制備Nα-生物素-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-Gly-Lys(N8-FITC)-OH SEQ ID NO1。
A.制備Nα-生物素-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-Gly-Lys-OH SEQ ID NO3在Advanced Chemtech 200型多肽合成儀上用標(biāo)準(zhǔn)的雙偶合程序以1.5mmol的規(guī)模合成受保護(hù)的多肽-樹脂Nα-Boc-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr(Brz)-Pro-Ile-Val-Gly-Lys(2-ClZ)-OCH2-PAM-樹脂SEQ ID NO2。氨基末端的Boc基團(tuán)用50%三氟乙酸的二氯甲烷溶液脫去，所得的樹脂用5%二(異丙基)乙胺(DIEA)的二氯甲烷溶液中和。然后向多肽樹脂中加入1.1g(4.5mmol)生物素的20ml二甲亞砜溶液，接著加入4.5mmol二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)的9ml二氯甲烷溶液。用11ml二氯甲烷將所得的反應(yīng)混合物稀釋至40ml總體積，并使其反應(yīng)約5小時(shí)。濃縮反應(yīng)溶液，樹脂依次用二甲基亞砜、二甲基甲酰胺和二氯甲烷洗滌，然后用5%DIEA的二氯甲烷溶液中和。該反應(yīng)再重復(fù)2次，每次反應(yīng)時(shí)間延長(zhǎng)至12小時(shí)。樹脂的茚三酮分析結(jié)果表明，生物素和甘氨酸胺基反應(yīng)完全。最后的多肽樹脂用二甲基甲酰胺和二氯甲烷充分洗滌并干燥，得4.3g(98%)。
B.脫保護(hù)將上述多肽用50ml氫氟酸/間甲酚溶液于0℃用1小時(shí)脫保護(hù)并從樹脂上裂解下來(lái)。經(jīng)真空蒸餾除去氫氟酸后，用100ml乙醚將間甲酚從反應(yīng)混合物中萃取出來(lái)。然后使多肽溶于50%乙酸水溶液中，經(jīng)冷凍和冷凍干燥得到2.14g。
C.純化將Nα-生物素-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-Gly-Lys-OH SEQ ID NO3粗品溶于200 ml 5%乙腈的水溶液(含0.1%三氟乙酸)中，然后經(jīng)0.22μ濾膜過(guò)濾。得到的溶液置于先用相同緩沖液平衡過(guò)的2.2×25cm十八烷基硅(Vydac C-18)反相柱上。多肽用7.5-25%乙腈以2ml/分鐘的流速進(jìn)行線性梯度洗脫，時(shí)間為855分鐘，收集各組份。各組份用相同的緩沖條件在4.6×250 mm Vydac C-18柱上進(jìn)行HPLC分析。將含有所需物質(zhì)的各組份合并，經(jīng)冷凍和凍干得到1.206g多肽產(chǎn)物(62%)。
分離的Nα-生物素-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-Gly-Lys-OH SEQ ID NO3經(jīng)氨基酸分析得到如下比例Asn 1.1;Ser 0.96;Gln 1.1;Pro 1.1;Gly 2.1;Val 0.80;Ile 0.78;Tyr 1.1;Lys 1.1;與理論值一致。快速原子轟擊質(zhì)譜分析得到分子離子質(zhì)譜峰為1288，與理論值一致。
D.標(biāo)記純化的多肽在C-末端用熒光素標(biāo)記，以便用于Pandex試驗(yàn)。將Nα-生物素-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-Gly-Lys-OH SEQ ID NO3(1.206g，0.936mmol)溶于100ml 0.1M硼酸鈉溶液(pH 9.5)中。然后，向反應(yīng)混合物中加入3g(7.7mmol)異硫氰酸熒光素的15ml二甲基亞砜溶液，熒光素溶液分10等份，在2小時(shí)內(nèi)加完。加完熒光素溶液后，使生成的混合物反應(yīng)1小時(shí)。用5N鹽酸將溶液調(diào)至pH3，產(chǎn)生的沉淀通過(guò)離心除去。
然后，用5N氫氧化鈉將上述多肽溶液調(diào)至pH 7.8，再用0.1M乙酸銨(pH為7.5)稀釋至200ml總體積。得到的溶液經(jīng)0.22μ濾膜過(guò)濾，并置于經(jīng)含5%乙腈的0.1M乙酸銨溶液(pH7.5)平衡過(guò)的2.2×25cm Vydac C-18柱上。用5-25%乙腈以2ml/分鐘的流速將多肽從柱上洗脫下來(lái)，洗脫855分鐘，收集各組份。用HPLC分析各組份。然后將含所需產(chǎn)物的各組分合并，經(jīng)冷凍和凍干得到190.2mg多肽(12%)。
純化多肽的氨基酸分析結(jié)果如下Asn 1.1;Ser 1.0;Gln 1.1;Pro 1.1;Gly 2.1;Val 0.8;Ile 0.8;Tyr 1.1;Lys 1.0;與理論值一致?？焖僭愚Z擊質(zhì)譜分析得到分子離子質(zhì)譜峰為1678，與理論值一致。
E.HIV-1蛋白酶抑制熒光試驗(yàn)下列緩沖液和溶液用于HIV-1蛋白酶抑制劑熒光試驗(yàn)MES-ALB緩沖液0.05 M 4-嗎啉乙磺酸，pH 5.50.02 M NaCl0.002 M EDTA0.001 M DTT1.0 mg/ml BSATBSA緩沖液0.02 M TRIS0.15 M NaCl1.0mg/ml BSA抗生物素蛋白包被的珠子溶液
0.1% Fluoricon溶液抗生物素蛋白試驗(yàn)顆粒(將抗生物素蛋白結(jié)合到直徑為0.6～0.8μ的固體聚苯乙烯珠上，用TBSA緩沖液配制)。
酶溶液27 IU/ml純化的HIV-1蛋白酶用MES-ALB緩沖液配制(1 IU等于在37℃每分鐘水解1微摩爾底物所需要的酶量)。
于圓底96孔板內(nèi)，每孔加20μl酶溶液，隨后加入10μl待評(píng)價(jià)化合物的20%二甲基亞砜水溶液。按上述方法獲得純化的HIV-1蛋白酶。將得到的溶液于室溫培育1小時(shí)后，每孔內(nèi)加入20μl含底物Nα-生物素-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-Gly-Lys(Nε-FITC)-OH SEQ ID NO1的MES-ALB緩沖液溶液(1.5μl/ml)。該溶液于室溫培育16小時(shí)后，每孔加150μl MES-ALB緩沖液進(jìn)行稀釋。
向另一塊圓底96孔Pandex板的各孔中加入25μl抗生物素蛋白包被的珠子溶液。再向每孔中加入25μl上面制備的稀釋的培育溶液。溶液充分混合，將板放入PandexO儀內(nèi)、洗滌、吸干和讀數(shù)。樣品檢測(cè)用485nm波長(zhǎng)的光線激發(fā)，并于535nm處讀出表熒光強(qiáng)度。
由本發(fā)明化合物的熒光試驗(yàn)所獲得的IC50值其結(jié)果列于下表1。全部數(shù)據(jù)均用陽(yáng)性對(duì)照物進(jìn)行標(biāo)化。陽(yáng)性對(duì)照物是[1S-(1R＊，4R＊，5S＊)]-N-(1-(2-氨基-2-氧代乙基)-2-氧代-3-氮雜-4-苯基甲基-5-羥基-6-(2-(1-叔丁氨基-1-氧代甲基)苯基)己基)-2-喹啉基甲酰胺。
表1式Ⅰ化合物的抑制活性熒光檢測(cè)IC50實(shí)施例號(hào) ng/mL對(duì)照 1.01 3.62 3003 10004 355 4006 2.77 0.78 289 19.1*10 5.7*11 4.512 513 13.414 16.115 6.6*16 8.4*17 5.6*18 278*19 5.320 18521 14.8*22 2.823 11.324 4.6＊ 平均IC50N.T. 未試驗(yàn)表1(續(xù))式Ⅰ化合物的抑制活性熒光檢測(cè)IC50實(shí)施例號(hào) ng/mL25 N.T.
26 N.T.
27 N.T.
28 N.T.
＊ 平均IC50N.T. 未試驗(yàn)
權(quán)利要求
1.下式化合物及其藥學(xué)上適用的鹽
其中R和R0系獨(dú)立地選自氫、C1-C6烷基、芳基(C1-C4)烷基、雜環(huán)(C1-C4)烷基或不飽和的雜環(huán)(C1-C4)烷基；或者R和R0與它們所連接的氮原子一起形成雜環(huán)或不飽和的雜環(huán)，條件是該氮原子不被季銨化；Z是具有下述結(jié)構(gòu)的基團(tuán)，
q為0、1、2、3或4；r為0、1、2或3；s為0、1或2；R2為氫、鹵素、C1-C6烷基、芳基(C1-C4)烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、氨基、C1-C4烷氨基、二(C1-C4)烷氨基、氨基甲?；騈-(C1-C4)烷基氨基甲?；?；R1為芳基、雜環(huán)、不飽和的雜環(huán)、C5-C7環(huán)烷基或-S-R1a，其中R1a為芳基、雜環(huán)、不飽和的雜環(huán)或C5-C7環(huán)烷基；X是具有下述結(jié)構(gòu)的基團(tuán)
Y為芳基或不飽和的雜環(huán)；Y1為雜環(huán)；R3a為具有以下結(jié)構(gòu)的基團(tuán)
R3b為具有以下結(jié)構(gòu)的基團(tuán)
p為4或5；l為3、4或5；各個(gè)R4獨(dú)立地為氫、C1-C6烷基或羥基(C1-C4)烷基；和R5和R6系獨(dú)立地選自氫、羥基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、氨基、C1-C4烷氨基、羥基(C1-C4)烷基、羧基、C1-C4烷氧基碳基、氨基甲?；?、N-(C1-C4)烷基氨基甲酰基、芳基、雜環(huán)或不飽和的雜環(huán)。
2.按照權(quán)利要求1的化合物及其藥學(xué)上適用的鹽其中Z為
R1為芳基或-S-R1a，其中R1a為芳基;R2為氫或C1-C6烷基;q為0或1;x為
R3a為具有結(jié)構(gòu)-C(O)-NR4R4的基團(tuán)，其中R4的定義同上。
3.按照權(quán)利要求2的化合物及其藥學(xué)上適用的鹽其中Y為苯基;Y1為十氫-(4aS，8aS)-異喹啉基;R3a為-C(O)NH(叔丁基)。
4.下列化合物及其藥學(xué)上適用的鹽[3S-(3R＊，4aR＊，8aR＊，2′S＊，3′R＊)]-2-[2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′-氧代-2″′-N-(甲基)氮雜-3″′-喹啉-2″″-基丙基]-6″-(甲基)苯基]戊基-十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺;[3″′S-(3″′R＊，4″′S＊)]-N-[1′-氧代-1′-(3″-[1″′-氧代-2″′-氮雜-3″′-苯基甲基-4″′-羥基-5″′-(2″″-N-叔丁基脲基)-苯基]戊基-4″-甲基)苯基]甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉;[3S-(3R＊，4aR＊，8aR＊，2′S＊，3′R＊)]-2-[2′-羥基-3′-苯基甲基-4′-氮雜-5′-氧代-5′-(3″-[1″′，2″′，3″′，4″′-四氫異喹啉-1″′-基羰基]-6″-甲基)苯基]戊基十氫異喹啉-3-N-叔丁基甲酰胺。
5.藥用組合物，該組合物包括權(quán)利要求1-4中任一權(quán)項(xiàng)所述的式Ⅰ化合物或其藥學(xué)上適用的鹽，以及一種或多種藥學(xué)上適用的載體、稀釋劑或賦形劑。
6.用作抗病毒劑的權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的式Ⅰ化合物及其藥學(xué)上適用的鹽。
7.用作抑制HIV復(fù)制的權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的式Ⅰ化合物及其藥學(xué)上適用的鹽。
8.權(quán)利要求1-4中任一權(quán)項(xiàng)所述的式Ⅰ化合物及其藥學(xué)上適用鹽的制備方法，
該方法包括a)使式IA化合物與式IB化合物或其活性衍生物反應(yīng)，
其中R、R0、R1、X和Z的定義同上;b)將生成的產(chǎn)物任意地轉(zhuǎn)變?yōu)槠渌帉W(xué)上適用的鹽。
全文摘要
本發(fā)明提供了新的HIV蛋白酶抑制劑，含有本發(fā)明化合物的藥物制劑，以及治療和/或預(yù)防HIV感染和/或愛滋病的方法。
文檔編號(hào)A61K31/4418GK1092410SQ93112960
公開日1994年9月21日 申請(qǐng)日期1993年12月21日 優(yōu)先權(quán)日1992年12月22日
發(fā)明者B·A·德雷斯曼, M·哈蒙德, S·W·卡爾多 申請(qǐng)人:伊萊利利公司