專利名稱：亞乙烯基氮雜吲哚衍生物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的亞乙烯基氮雜吲哚衍生物、其制備方法、含此衍生物的藥物組合物和其作為治療劑的應(yīng)用。
本發(fā)明提供了具有如下通式Ⅰ化合物及其藥用鹽。
其中，X1到X4基團(tuán)之一為N，其它為CH;R為式(a)、(b)、(c)、(d)或(e)基團(tuán)。
其中，n為O或1-5的整數(shù);
R1為氫、鹵素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、硝基或-NR4R5基團(tuán)，其中R4和R5是相互獨(dú)立的氫或C1-C6烷基。
R2為氫、C1-C6烷基或C1-C6烷?；?br> R3為氫、鹵素、羥基、C1-C6烷氧基、羧基、硝基或-NR4R5基團(tuán)，其中的R4和R5如上述定義。
在本發(fā)明的化合物中，取代基R和R1可獨(dú)立位于氮雜吲哚雙環(huán)的吡啶部分或吡咯部分上。
本發(fā)明范圍包括所有可能的異構(gòu)體，立體異構(gòu)體，特別是Z和E異構(gòu)體及它們的混合物和式Ⅰ化合物的代謝物和代謝前體物或生物前體(也稱為藥物前體)。
取代基R優(yōu)選在氮雜吲哚環(huán)的2或3位，特別是3位。
取代基R1優(yōu)選在吡啶部分上，特別是在與環(huán)上氮原子相鄰的碳上。當(dāng)R1和R3之一為硝基或如上述定義的-NR4R5基團(tuán)時(shí)，則另一個(gè)優(yōu)選為不同的基團(tuán)。R3取代基優(yōu)選在羥吲哚環(huán)(式e)上的5位。
烷基和在烷氧基和烷?；械耐榛糠挚蔀橹ф溁蛑辨溚榛?。
C1-C6烷基優(yōu)選為C1-C4烷基，如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、仲丁基或叔丁基，特別是甲基或乙基。
C1-C6烷氧基優(yōu)選為C1-C3烷氧基，特別為甲氧基、乙氧基或正丙氧基。
C2-C6烷?；鶅?yōu)選為C2-C3烷?；?，特別為乙?；虮；?。
鹵素優(yōu)選為氟、氯或溴，特別為氯。
本發(fā)明化合物的藥用鹽包括用無機(jī)酸(如硝酸、鹽酸、氫溴酸、硫酸、高氯酸和磷酸)和有機(jī)酸(如，乙酸、丙酸、羥基乙酸、乳酸、草酸、丙二酸、羥基丁二酸、馬來酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸和水楊酸)制成的酸加成鹽和用無機(jī)堿(如，堿金屬，特別是鈉或鉀，或堿土金屬，特別是鈣或鎂)或有機(jī)堿(如，烷基胺，特別為三乙基胺)制成的鹽。
如上所述，本發(fā)明的范圍也包括式Ⅰ化合物的藥用生物前體(也稱藥物前體)即那些分子式與或Ⅰ不同但經(jīng)人體給藥后直接或間接地轉(zhuǎn)變?yōu)槭舰窕衔锏幕衔铩?br> 本發(fā)明優(yōu)選的化合物為這樣的式Ⅰ化合物及其藥用鹽，其中，X1-X4基團(tuán)如上述定義;
R為上述定義，且連在氮雜吲哚環(huán)上的2位或3位;
n為0;
R1為氫或鹵素或C1-C3烷氧基，且連接在吡啶部分中與氮原子相鄰的碳原子上。
R2為氫或C1-C4烷基;當(dāng)R為基團(tuán)(e)時(shí)，R3為連接在羥基吲哚環(huán)5位上的氫或羥基。
本發(fā)明更為優(yōu)選的化合物為這樣的式Ⅰ化合物及其藥用鹽，其中，X1-X4基團(tuán)如上述定義;
R如上述定義，且連接在氮雜吲哚環(huán)上的3位;
n為0;
R1和R2為氫原子;當(dāng)R為基團(tuán)(e)時(shí)，R3為氫或連接在羥基吲哚環(huán)上5位的氫或羥基。
本發(fā)明的特例化合物為如下化合物及其藥用鹽，這些化合物可為Z-或E-非對映體或這些非對映體的Z、E混合物2-氰基-3-(7-氮雜吲哚-3-基)丙烯酰胺;
2-氰基-3-(7-氮雜吲哚-3-基)-N-丙烯酰苯胺;
2-氰基-3-(7-氮雜吲哚-3-基)硫代丙烯酰胺;
2-氰基-3-(7-氮雜吲哚-3-基)丙烯腈;
3-[(7-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚;
5-羥基-3-[(7-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚，2-氰基-3-(6-氮雜吲哚-3-基)丙烯酰胺;
2-氰基-3-(6-氮雜吲哚-3-基)-N-丙烯酰苯胺;
2-氰基-3-(6-氮雜吲哚-3-基)硫代丙烯酰胺;
2-氰基-3-(6-氮雜吲哚-3-基)丙烯腈;
3-[(6-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚;
5-羥基[(6-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚，2-氰基-3-(5-氮雜吲哚-3-基)丙烯酰胺;
2-氰基-3-(5-氮雜吲哚-3-基)-N-丙烯酰苯胺;
2-氰基-3-(5-氮雜吲哚-3-基)硫代丙烯酰胺;
2-氰基-3-(5-氮雜吲哚-3-基)丙烯腈;
3-[(5-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚;
5-羥基-3-[(5-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚，2-氰基-3-(4-氮雜吲哚-3-基)丙烯酰胺;
2-氰基-3-(4-氮雜吲哚-3-基)-N-丙烯酰苯胺;
2-氰基-3-(4-氮雜吲哚-3-基)硫代丙烯酰胺;
2-氰基-3-(4-氮雜吲哚-3-基)丙烯腈;
3-[(4-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚;
5-羥基-3-[(4-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚，本發(fā)明的化合物及其藥用鹽可通過將式Ⅱ的醛
式中X1-X4、R1和R2如上述定義，與式(a′)、(b′)、(c′)、(d′)或(e′)化合物之一一起縮合的方法得到NC-CH2-CONH2(a’)
NC-CH2-CSNH2(c’)NC-CH2-CN(d’)
式中R3和n如上述定義，如有必要，將一個(gè)式Ⅰ化合物轉(zhuǎn)變?yōu)榱硪皇舰窕衔?，而?或者，如有必要，將一式Ⅰ化合物轉(zhuǎn)變?yōu)橐粋€(gè)藥用鹽;而且/或者，如有必要，將鹽變?yōu)橛坞x化合物，而且/或者，如有必要，將式Ⅰ化合物的異構(gòu)體混合物分離為單一異物體。
在式Ⅱ化合物中的取代基R1和-CHO可獨(dú)立在氮雜吲哚環(huán)的吡啶或吡咯部分上。
式Ⅱ化合物和式(a′)、(b′)、(c′)、(d′)或(e′)化合物的反應(yīng)可按如下所述的已知方法進(jìn)行，優(yōu)選加入堿性催化劑;如，吡啶、哌啶、二甲胺，或適當(dāng)?shù)膲A金屬氫氧化物或醇鹽。
例如，式Ⅱ化合物與式(a′)、(b′)、(c′)、(d′)或(e′)化合物之一的反應(yīng)可在Knoevenagel反應(yīng)條件下進(jìn)行，Jones在Organic Reaction 15，204(1967)對該反應(yīng)有所敘述，適用的催化劑為有機(jī)堿，如，吡啶、哌啶或二乙胺。
該縮合反應(yīng)可在惰性有機(jī)溶劑(如，吡啶、乙醇、甲醇、苯或二惡烷)和0°-100℃溫度下完成。
該反應(yīng)優(yōu)選在溫?zé)嵋掖既芤褐?、在哌啶催化劑存在下進(jìn)行。
一種式Ⅰ化合物可按已知方法轉(zhuǎn)變?yōu)榱硪环N式Ⅰ化合物，例如，為獲得式Ⅰ化合物(其中R1和/或R3為羥基)而將式Ⅰ化合物(其中R1和/或R3為甲氧基)脫醚化的反應(yīng)，可如J.F.N.Mc Ormie在Tetrahedron 24，2289(1968)中所述，用三溴化硼進(jìn)行，本反應(yīng)在惰性有機(jī)溶劑(如，二氯甲烷、戊烷或苯)中，通惰性氣體(如，氮?dú)?，在-78℃至室溫的溫度下進(jìn)行。
式Ⅰ化合物(其中R3為硝基)轉(zhuǎn)變?yōu)橄鄳?yīng)的式Ⅰ化合物(其中R3為氨基)的反應(yīng)可按下述已知方法在低氫壓和在惰性有機(jī)溶劑中進(jìn)行，如，用各種還原劑，如在醇水溶液中的硫化鈉、在水性溶劑中的含金屬鐵的氯化銨或，如用催化氫化法，如披鈀木炭催化劑。
為得到相應(yīng)的式Ⅰ化合物(其中R2為C1-C6烷基)而進(jìn)行的式Ⅰ化合物(其中R2為氫)烷基化反應(yīng)，可在高沸點(diǎn)芳香溶劑(如二甲苯)中與氫化鈉和C1-C6烷基碘化物反應(yīng)而完成。
為得到相應(yīng)的式Ⅰ化合物(其中R2為C1-C6烷?；?而進(jìn)行的式Ⅰ化合物(其中R2為氫)?；磻?yīng)，可在堿性試劑存在下、在室溫到回流)溫度之間的溫度下與適當(dāng)?shù)聂人狒磻?yīng)而完成。
為得到相應(yīng)的式Ⅰ化合物(其中R1為C1-C6烷氧基)而進(jìn)行的式Ⅰ化合物(其中R1為鹵素且與吡啶上的N相鄰)烷氧化反應(yīng)，可在DMF回流溶液中與烷氧化鈉反應(yīng)而完成。
為得到相應(yīng)的式Ⅰ化合物(其中R1為-NR4R5基團(tuán)，基團(tuán)中的R4、R5之一或二者都為C1-C6烷基)而進(jìn)行的式Ⅰ化合物(其中R1為鹵素且與吡啶上的N相鄰)的胺基化反應(yīng)，在回流溫度下與相應(yīng)的分子式為NHR3R4的胺反應(yīng)而完成。
式Ⅰ化合物的任意成鹽、將鹽轉(zhuǎn)變?yōu)橛坞x化合物和由異構(gòu)體混合物到單一異構(gòu)體的分離可按常規(guī)方法進(jìn)行，例如幾何異構(gòu)體(如順式一和反式異構(gòu)體)混合物的分離可通過從一適當(dāng)溶劑中部分結(jié)晶或包括柱色譜或高壓液相色譜的色譜法而進(jìn)行。
式Ⅱ化合物可按已知方法從式Ⅲ化合物制得。
其中，X1-X4、R1和R2基團(tuán)如上述定義。
例如，式Ⅱ的3-甲?；s吲哚衍生物可按已知的Vilsmeyer-Haack方法(綜述見W.G.Jackson et al.，J.Arn，Chcm.Soc103，533，1981)，將式Ⅲ化合物用N-甲基-N-甲酰苯胺或DMF和三氯氧化磷甲?；玫?。當(dāng)3位被占據(jù)時(shí)可得到2-甲酰氮雜吲哚衍生物。
式Ⅲ化合物是已知的且可通過已知方法從已知化合物得到，例如，根據(jù)R.R.Loreng et al.(J.Org.Chem，30，2531，1965)，各種母體氮雜吲哚(ⅢA)可經(jīng)下述的三步反應(yīng)而得到，即從氨基甲基吡啶(Ⅳ)經(jīng)甲?；虚g體formimidates(Ⅴ)和甲?；虚g體formimidines(Ⅵ)而得到式Ⅲ化合物。
因而7-氮雜吲哚(ⅢA，X4＝N，X1＝X2＝X3＝CH)從2-氨基-3-甲基吡啶(Ⅳ，X4＝N，X1＝X2＝X3＝CH)得到，而4-氨基-3-甲基吡啶(Ⅳ，X2＝N，X1＝X3＝X4＝CH)得到5-氮雜吲哚(ⅢA，X2＝N，X1＝X3＝X4＝CH)。4-氮雜吲哚(ⅢA，X1＝N，X2＝X3＝X4＝CH)可從3-氨基-2-甲基吡啶(Ⅳ，X1＝N，X2＝X3＝X4＝CH)得到。
式(a′)、(b′)、(c′)、(d′)或(e′)的化合物為已知產(chǎn)物或可通過已知方法從已知化合物得到。
在本發(fā)明的新化合物中和用于制備這些化合物的中間產(chǎn)物中，當(dāng)有那些在它們發(fā)生上述反應(yīng)前需保護(hù)的基團(tuán)時(shí)，可按有機(jī)化學(xué)的已知方法，在反應(yīng)發(fā)生前將它們保護(hù)起來，然后在反應(yīng)結(jié)束后除去保護(hù)。
藥理本發(fā)明的化合物具有特別的酪氨酸激酶抑制活性，酪氨酸激酶抑制劑被認(rèn)為對失控的細(xì)胞繁殖(即細(xì)胞繁殖紊亂)具有重要的控制作用。所以本發(fā)明所涉及的化合物可用于治療哺乳動(dòng)物，包括人，治療病理增殖紊亂，這種紊亂的典型例子是腫瘤，包括白血病和牛皮癬。本化合物也可用于抑制粉瘤斑的生長。除此之外，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的化合物還具有血管生長抑制劑的活性。
血管生長抑制劑是一種能抑制新生血管生長的藥物。所以，本發(fā)明的化合物用于治療包括人類在內(nèi)的哺乳動(dòng)物，其體內(nèi)新生血管的生長是有害的病理狀態(tài)。例如，慢性炎癥、糖尿病引起的視網(wǎng)膜病、牛皮癬、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、腫瘤，特別是固態(tài)瘤和瘤轉(zhuǎn)移擴(kuò)散。
此外，本發(fā)明的化合物具有免疫調(diào)節(jié)功能，特別是作為免疫抑制劑應(yīng)用于哺乳動(dòng)物，包括人，以防治組織和器官移植出現(xiàn)的排異現(xiàn)象、graft-versus-host病和自身免疫病。
近期對腫瘤轉(zhuǎn)變的分子基礎(chǔ)的研究鑒別出一類基因，即致腫瘤基因，其異常表達(dá)導(dǎo)致腫瘤發(fā)生。
例如，RNA腫瘤病毒具有這樣一個(gè)致腫瘤基因序列，其表達(dá)決定了感染細(xì)胞的腫瘤轉(zhuǎn)化。一些它們的致腫瘤基團(tuán)編碼蛋白質(zhì)，如pp60v-src，p70gag-yes，p130gag-fps和p70gag-fgr，表現(xiàn)出蛋白質(zhì)酪氨酸激酶活性，即它們催化r-磷酸鹽的從三磷酸腺苷(ATP)到蛋白質(zhì)底物中的酪氨酸殘基之間的轉(zhuǎn)變，在正常細(xì)胞中，一些生長因子受體，如PDGF、EGF、α-TGF和胰島素的受體，呈現(xiàn)出酪氨酸激酶活性。
生長因子(GF)的結(jié)合可激活受體酪氨酸激酶以進(jìn)行自動(dòng)磷酸化和將酪氨酸上相鄰分子磷酸化，所以，據(jù)認(rèn)為這些酪氨酸激酶受體的磷酸化對信號轉(zhuǎn)錄起重要作用，在正常細(xì)胞中的酪氨酸激酶功能的主要作用是調(diào)節(jié)細(xì)胞生長。由過剩的或呈現(xiàn)可變的底物專一性的致腫瘤基因酪氨酸激酶產(chǎn)生的該功能的紊亂可導(dǎo)致生長抑制失控和/或腫瘤形成。因而，酪氨酸激酶的特殊抑制作用可用于研究癌發(fā)生、細(xì)胞增生和變異的機(jī)理，對癌的預(yù)防和化學(xué)治療癌癥及其他如上所述的病理增生情況是很有效的。
例如，下述體外實(shí)驗(yàn)表明了這些化合物的酪氨酸特殊蛋白質(zhì)激酶活性。
酪氨酸激酶純化本實(shí)驗(yàn)選用的酶為p45v-abl酪氨酸激酶，其代表Abelson酪氨酸激酶(從Abelson小白鼠白血病病毒分離即得)的催化部分。按Wang et al.在J.Biol.Chem.260，64(1985)與Fesgwson et al.在J.Biol，Chem，260，3652(1985)和在Biochem.J.257，321(1989)所述方法制備和分離出p45v-abl激酶。
外源底物激酶測定在50ml含Tris-HCl 25mM，pH8.0，MgCl210mM和二硫蘇糖醇0.1mM的緩沖液(激酶緩沖液)中，用40ng純化的abl-激酶和(r-32p)-ATP孵育而完成(Val5)-血管緊張肽Ⅱ磷酸化，反應(yīng)混合物在30℃下孵育一定時(shí)間，加入50ml.5%的三氯乙酸終止反應(yīng)。
在冰上短暫孵育后，離心試管。將上清液滴在磷酸纖維素紙平面(Whatmen P-81)上，并用乙酸徹底洗滌。用液相閃爍計(jì)數(shù)器測量附在干燥后的磷酸纖維素平面的放射性、從每個(gè)實(shí)驗(yàn)點(diǎn)的三次測定計(jì)算出IC50。在固定濃度的肽(2mM)和ATP(50mM)存在下，在濃度0-400mg范圍內(nèi)測定每個(gè)試驗(yàn)化合物抑制作用。
本發(fā)明的兩個(gè)代表性化合物的活性數(shù)據(jù)列于表1表1p45V-abl 激酶抑制 IC50(um)3-[(7-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚 0.052-氰基-3-(7-氮雜吲哚-3-基)丙烯酰胺 4.7本發(fā)明的化合物由于其高活性和低毒性，可安全地用于臨床。例如，在老鼠體內(nèi)以增加的藥量一次投藥并給藥后第七天測量，結(jié)果表明本發(fā)明的化合物的亞急性毒性(LD50)可以忽略。
本發(fā)明的化合物可以多種劑型給藥，如口服給藥，包括片劑、膠囊劑、糖衣或薄膜衣片，溶液劑或混懸劑;直腸給藥，包括栓劑;腸道外給藥，如肌肉注射或靜脈注射或輸液;或局部給藥。
劑量決定于病人的年齡、體重、身體條件和給藥途徑;例如，成人口服劑量為每次10mg左右到150-200mg左右，每天1-5次，當(dāng)然，這些劑量設(shè)定可以調(diào)整以收到最佳療效。
本發(fā)明包括含與藥用賦形劑(可為載體或稀釋劑)混合的式Ⅰ化合物或其藥用鹽的藥物組合物。
含本發(fā)明化合物的藥用組合物通常用下述常規(guī)方法制備并以適當(dāng)?shù)乃幬飫┬徒o藥。
例如，含活性化合物的固體口服制劑包括稀釋劑，如，乳糖，葡萄糖、蔗糖，纖維素，玉米淀粉或馬鈴薯淀粉潤滑劑，如，硅石，滑石粉，硬脂酸，硬脂酸的鎂鹽或鈣鹽，和/或聚乙二醇;粘合劑，如，淀粉，阿拉伯膠，明膠，甲基纖維素，羧甲基纖維素或聚乙烯吡咯烷酮;崩解劑，如，淀粉，藻酸，藻酸鹽或羥乙酸淀粉鈉鹽，沸騰復(fù)合劑;染色劑;甜味劑;濕潤劑，如卵磷酯，聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯，月桂硫酸鹽;總之，為用于藥物制劑的，無毒、無藥物活性物質(zhì)，可按已知方法進(jìn)行上述藥物制備生產(chǎn)，如，使用混合，制粒，壓片，糖包衣或薄膜包衣方法。
例如，口服給藥的液相分散劑可為糖漿，乳劑和混懸劑。
糖漿可含載體，例如蔗糖或含甘油蔗糖和/或甘露醇和/或山梨醇，混懸劑和乳劑可包括載體，例如天然膠，瓊脂，藻酸鈉，果膠，甲基纖維素，羧甲基纖維素或聚乙烯醇。
用于肌肉注射、含活性化合物的混懸劑或溶液包含藥用載體，如無菌水，橄欖油，油酸乙酯，乙二醇，如，丙二醇，如有必要，還可用適量利多卡因鹽酸鹽。
用于靜脈注射和輸液的溶劑可包括載體，如，無菌水，它們可優(yōu)選無菌含水的等滲生理鹽水溶液。
含活性化合物的栓劑可包含藥用載體，如，可可油，聚乙烯二醇，聚氧乙脫水山梨糖醇脂肪酸酯表面活性劑或卵磷脂。
用于局部給藥的組合物，如，膏劑，洗劑，或糊劑，可通過將此活性組分與常規(guī)的油質(zhì)和/或乳化的賦形劑混合而成。
本發(fā)明的另一目標(biāo)是治療包括人在內(nèi)的哺乳動(dòng)物的且需治療的癌癥的綜合方法，該方法包括如下給藥1)式Ⅰ化合物，或其藥用鹽2)附加抗癌試劑，其用量與作用時(shí)間要足夠，以達(dá)到有效的治療效果。
本發(fā)明的目標(biāo)還包括提供包含式Ⅰ化合物或其藥用鹽和附加抗癌藥物的產(chǎn)品，其在抗癌治療中以結(jié)合制劑形式同時(shí)、分別、或按順序使用。
“抗癌藥物”是指單一抗癌藥和“雞尾酒”，即按臨床實(shí)踐而制備的這些藥的混合物。
可與本發(fā)明化合物配伍或在聯(lián)合治療中施用的抗癌藥物為如，亞德里亞霉素，道諾霉素，epirubicin，去甲氧柔紅霉素，鬼臼乙叉甙，5-氟尿嘧啶;mephalan，環(huán)磷酰胺，博萊霉素，長春花堿和絲裂霉素或其中兩種或多種的混合物。
因此，本發(fā)明化合物可在治療中使用以改善癌癥病理狀態(tài)。它們可與抗腫瘤藥物一起給藥于用抗腫瘤藥物治療的癌癥患者，抗腫瘤藥物如上述的蒽環(huán)類甙，如亞德里亞霉素，道諾霉素，epirubicin或去甲氧柔紅霉素。
本發(fā)明化合物和諸如蒽環(huán)類甙的抗腫瘤劑可被施用以改善患白血病(如，成骨髓細(xì)胞白血病)、淋巴瘤、肉瘤、神經(jīng)細(xì)胞瘤、Wilm′s瘤或膀胱、乳房、肺或甲狀腺的惡性腫瘤的病人的身體狀況。
下面的實(shí)例是對本發(fā)明的解釋說明而并無限制意義實(shí)例1(Z)-3-[(7-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚(Ⅰ，X4＝N，X1＝X2＝X3＝CH，R＝e，R1＝R2＝R3＝H)將3-甲?；?7-氮雜吲哚(1.46g，0.010mol)、2-羥基吲哚(1.332g，0.010mol)和哌啶(0.555g，0.03mol)在無水乙醇(50ml)溶液在回流溫度加熱3小時(shí)，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，過濾沉淀物，用冰冷卻后的乙醇洗滌殘留物并在真空下干燥。因而得到產(chǎn)率為81%的幾乎純標(biāo)題化合物(2.126g)。
在乙醇結(jié)晶可得到高純度的化合物，m·p＞280℃C16N11N3O 理論值: C73.55 H4.24 N16.08實(shí)際值: C73.33 H4.29 N16.05MS m/z: 261NMRδppm(DMSO)6.84(1H，d，J＝7.6Hz)，6.99(1H，t，J＝7.6 Hz)，7.15(1H，t，J＝7.6 Hz)，7.27(1H，dd，J＝4.7，8.0 Hz)，7.87(1H，d，J＝7.6 Hz)，8.13(1H，S)，8.33(1H，dd，J＝1.5，4.7 Hz)，8.60(1H，dd，J＝1，5，8.0 Hz)，9.50(1H，S)，10.57(1H，bs)，12.5(1H，bs).
按上述方法，人們可以從式Ⅱ化合物和式(a′)、(b′)、(c′)、(d′)和(e′)化合物之一制備作為單一E-或Z-異構(gòu)體及其E，Z-混合物的下列化合物2-氰基-3-(7-氮雜吲哚-3-基)丙烯酰胺MS m/z212NMR δ ppm(DMSO)7.30(1H，dd，J＝4.9，7.8 Hz)，7.55，7.80(two bs，2H)，8.35-8.50(4H，m)，12.9(1H，bs);
2-氰基-3-(7-氮雜吲哚-3-基)-N-丙烯酰苯胺;
2-氰基-3-(7-氮雜吲哚-3-基)硫代丙烯酰胺;
2-氰基-3-(7-氮雜吲哚-3-基)丙烯腈;
5-羥基-3-[(7-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚;
2-氰基-3-(6-氮雜吲哚-3-基)丙烯酰胺;
2-氰基-3-(6-氮雜吲哚-3-基)-N-丙烯酰苯胺;
2-氰基-3-(6-氮雜吲哚-3-基)硫代丙烯酰胺;
2-氰基-3-(6-氮雜吲哚-3-基)丙烯腈;
3-[(6-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚;
5-羥基[(6-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚;
2-氰基-3-(5-氮雜吲哚-3-基)丙烯酰胺;
2-氰基-3-(5-氮雜吲哚-3-基)-N-丙烯酰苯胺;
2-氰基-3-(5-氮雜吲哚-3-基)硫代丙烯酰胺;
2-氰基-3-(5-氮雜吲哚-3-基)丙烯腈;
3-[(5-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚;
5-羥基-3-[5-氮雜吲哚-3-基]-2-羥基吲哚;
2-氰基-3-(4-氮雜吲哚-3-基)丙烯酰胺;
2-氰基-3-(4-氮雜吲哚-3-基)-N-丙烯酰苯胺;
2-氰基-3-(4-氮雜吲哚-3-基)硫代丙烯酰胺;
2-氰基-3-(4-氮雜吲哚-3-基)丙烯腈;
3-[(4-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚;和5-羥基-3-[(4-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚;
實(shí)例25-羥基-3-[(7-氮雜吲哚-3-基)亞甲基-2-羥基吲哚](I，X4＝N，X1＝X2＝X3＝CH，R＝e，R′＝R3＝H，R3＝5-OH在通氮情況下，在-78℃、在20分鐘內(nèi)向攪拌著的5-甲氧基-3-[(7-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚(2.91g，0.010mol)的無水二氯甲烷(100ml)溶液加入1M三溴化硼的二氯甲烷(30ml，0.030mol)溶液。將得到的混合物在-78℃繼續(xù)攪拌1小時(shí)，然后使其上升至室溫。在室溫?cái)嚢?.5小時(shí)后，將混合物冷卻至-10℃并在10分鐘內(nèi)滴加水(100ml)使其反應(yīng)終止。加入乙酸乙酯(100ml)，分離出有機(jī)相，用水洗滌，用Na2SO4干燥，在真空下蒸干。殘留物從乙醇中結(jié)晶而得到產(chǎn)率為70%純的標(biāo)題化合物(1.94g)。
C16H11N3O2理論值: C69.31 H4.00 N15.15實(shí)際值: C69.15 H4.10 N15.05MS m/z277從按實(shí)例1所述制備方法得到的式Ⅰ的酚甲醚起始，上述制備方法可得到相應(yīng)的式Ⅰ酚化合物。
實(shí)例35-氨基-3-[(7-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚(Ⅰ，X4＝N，X1＝X2＝X3＝CH，R＝e，R1＝R2＝H，R3＝5-NH2)向5-硝基-3-[(7-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚(3.06g，0.010mol)的無水乙醇(200ml)溶液加入披鈀木炭(100mg)，混合物在室溫和大氣壓下氫化，直到3當(dāng)量的氫發(fā)生反應(yīng)。
氫的攝取量作為時(shí)間的函數(shù)作圖。過濾催化劑，溶劑在真空干燥下濃縮至出現(xiàn)結(jié)晶，然后將混合物冷卻至0-5℃，過濾，用冰冷卻過的乙醇洗滌殘留物并在真空下干燥。
因此得到產(chǎn)率為80%的純的標(biāo)題化合物(2.21g)
C16H12N4O 理論值: C69.55 H4.38 N20.28實(shí)際值: C69.47 H4.25 N20.30MS m/z276從可按實(shí)例1所述方法得到的式Ⅰ硝基化合物起始，用類似的方法得到相應(yīng)的式Ⅰ氨基化合物。
實(shí)例4(Z)-3-[(1-甲基-7-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚(Ⅰ，X4＝N，X1＝X2＝X3＝CH，R＝e，R1＝R3＝H，R2＝CH3)向用冰-正丙醇浴冷卻的DMF(100ml)中的95%氫化鈉(0.280g，0.011mol)懸浮液，在15分鐘內(nèi)，在攪拌下加入(Z)-3-[(7-氮雜吲哚-3-基)亞甲基-2-羥基蚓哚(2.61g，0.010mol)的DMF(50ml)溶液。當(dāng)停止放出氫氣時(shí)，在15分鐘內(nèi)加入碘代甲烷(1.56g，0.011mol)的DMF(50ml)溶液，混合物在室溫下攪拌3小時(shí))，大部分DMF被減壓蒸出，然后將水加入殘留物中，產(chǎn)物用乙酸乙酯萃取。含有所需產(chǎn)物的有機(jī)溶液被干燥(Na2SO4)，蒸去溶劑，用乙醇研制殘留油狀物使其結(jié)晶，因此得到產(chǎn)率60%的純標(biāo)題化合物。
C17H13N3O 理論值: C74.19 H4.73 N15.27實(shí)際值: C74.05 H4.55 N15.05MS m/z275
通過此方法，可從R2為氫的式Ⅰ化合物制備R2為C1-C6烷基的式Ⅰ化合物。
實(shí)例5(Z)-3-[(1-乙?；?7-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚(Ⅰ，X4＝N，X1＝X2＝X3＝CH，R＝e，R1＝R3＝H，R2＝COCH3)將(Z)-3-[(7-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚(2.61g，0.010mol)，乙酸鉀(0.98g，0.010mol)和乙酸酐(100ml)組成的混合物在回流溫度加熱15小時(shí)，然后在真空下濃縮。用乙酸乙酯和水處理殘留物，分離出有機(jī)相，用水洗滌，在Na2SO4上干燥并在真空下蒸發(fā)。該殘留物從乙醇中結(jié)晶而得到產(chǎn)率為65%的純標(biāo)題化合物。
C18H13N3O2理論值: C71.28 H4.32 N13.85實(shí)際值: C71.15 H4.25 N13.65MS m/z303從R2為氫的式Ⅰ化物，通過此方法可制備R2為乙?；氖舰窕衔铩?br> 實(shí)例63-[(4-二甲基氨基-1-甲基-5-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚(Ⅰ，X2＝N，X1＝X3＝X4＝CH，R＝e，R1＝4-NMe2，R2＝Me，R3＝H)在-壓力容器中，將3-[(4-氯-1-甲基-5-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚(3.095g，0.010mol)和二甲基胺(4.51g，0.1mol)組成的混合物在150℃左右加熱20小時(shí)，在真空下蒸去過量的二甲基胺，殘留物先用氫氧化鈉溶液堿化后用乙酸乙酯處理，分離出有機(jī)相，用水洗滌，干燥并在真空下蒸發(fā)。殘留物用二氯甲烷-乙醇混合物為洗脫液，在硅膠柱上進(jìn)行層析，從而得到純標(biāo)題化合物。
C19H18N4O 理論值: C71.68 H5.70 N17.60實(shí)際值: C71.51 H5.65 N17.55-MS m/z318從R1為氯的式Ⅰ化合物，通過類似方法可得到R1為-NR4R5基團(tuán)的式Ⅰ化合物。
實(shí)例73-[(4-甲氧基-1-甲基-5-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚(I，X2＝N，X1＝X3＝X4＝CH，R＝e，R1＝OMe，R2＝Me，R3＝H)在一封閉管中將3-[(4-氯-1-甲基-5-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚(3.095g，0.010mol)和甲氧基鉀(0.70g，0.010mol)的甲醇(50ml)溶液在120℃左右加熱6小時(shí)。在真空中濃縮此溶液，用水稀釋，用乙酸乙酯提取產(chǎn)物，洗滌有機(jī)相，并在真空下干燥蒸發(fā)。殘留物用二氯甲烷-甲醇作洗脫液，在硅膠上進(jìn)行柱層析，由此得到產(chǎn)率為80%的純標(biāo)題化合物。
C18H15N3O2理論值: C70.81 H4.95 N13.76實(shí)際值: C70.75 H4.90 N13.72MS m/z305按照此方法，從R1為氯的式Ⅰ化合物并用相應(yīng)的鉀的C1-C6烷氧化物可制備R1為C1-C6烷氧基的式Ⅰ化合物。
實(shí)例87-氮雜吲哚-3-羧基醛(Ⅱ，X4＝N，X1＝X2＝X3＝CH，R1＝R2＝H)將7-氮雜吲哚(23.6g，0.20mol)和六亞甲基四胺(42g，0.30mol)組成的33%乙酸(84g，1.4mol和168ml水)溶液回流6小時(shí)。用水將所得的澄清黃色溶液稀釋，將產(chǎn)物置于冰箱過夜使其結(jié)晶。將粗產(chǎn)物在水中重結(jié)晶而得到產(chǎn)率為80%的純標(biāo)題化合物(14.9g)m·p 216-218℃C8H6N2O 理論值: C65.74 H4.13 N19.17實(shí)際值: C65.65 H4.05 N19.05MS m/z146
從4-、5-或6-氮雜吲哚通過上述方法可相應(yīng)制得異構(gòu)的4-、5-或6-氮雜吲哚-3-羧基醛。
實(shí)例9每片重0.150g并含有25mg活性物質(zhì)的片劑可如下生產(chǎn)。
配方(以10，000片計(jì))3-[(7-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚 250g乳糖 800g玉米淀粉 415g滑石粉 30g硬脂酸鎂 5g將3-[(7-氮雜吲哚-3-基)亞甲基-2-羥基吲哚、乳糖和半量玉米淀粉混合;用孔徑為0.5mm的篩子將混合物加力過篩。玉米淀粉在(10g)熱水(90ml)中混懸，得到的糊狀物用于粉末制粒。干燥顆粒，在一個(gè)孔徑為1.4mm的篩上將顆粒弄碎，然后加入剩余的淀粉、滑石粉和硬脂酸鎂，小心混勻并制成片劑。
實(shí)例10每粒劑量為0.2mg并含20mg的活性物質(zhì)的膠囊可被制備。
配方(以500粒膠囊計(jì))
2-氰基-3-(7-氮雜吲哚-3-基)丙烯酰胺 10g乳糖 80g玉米淀粉 5g硬脂酸鎂 5g本制劑由兩段硬脂膠囊制成膠囊，每粒膠囊劑量為0.200g。
權(quán)利要求
1.式Ⅰ化合物及其藥用鹽
式中X1-X4基團(tuán)之一為N而其他基團(tuán)為CH；R為式(a)、(b)、(c)、(d)或(e)基團(tuán)，
式中m為0或1-5的整數(shù)，R1為氫、鹵素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、硝基或-NR4R5基團(tuán)，其中R4和R5獨(dú)立為氫或C1-C6烷基；R2為氫，C1-C6烷基或C2-C6烷?；?；R3為氫、鹵素、C1-C6烷氧基、羧基、硝基或-NR4R5基團(tuán)，其中R4和R5如上述定義。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的式Ⅰ化合物及其藥用鹽，其中，X1-X4基團(tuán)如權(quán)利要求1所述定義;R為權(quán)利要求1所述定義，且連接在氮雜吲哚環(huán)上2位或3位上;n為0;R1為連接在吡啶部分與N原子相鄰的C原子上的氫、鹵素或C1-C3烷氧基;R2為氫或C1-C4烷基;當(dāng)R為基團(tuán)(e)時(shí);R3為連接在羥基吲哚環(huán)上5位上的氫或羥基。
3.一種從下列一組化合物選出的化合物及其藥用鹽，也包括Z-或E-非對映體或所述非對映體的Z，E混合物2-氰基-3-(7-氮雜吲哚-3-基)丙烯酰胺;2-氰基-3-(7-氮雜吲哚-3-基)-N-丙烯酰苯胺;2-氰基-3-(7-氮雜吲哚-3-基)硫代丙烯酰胺;2-氰基-3-(7-氮雜吲哚-3-基)丙烯腈;3-[(7-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚;5-羥基-3-[(7-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚;2-氰基-3-(6-氮雜吲哚-3-基)丙烯酰胺;2-氰基-3-(6-氮雜吲哚-3-基)-N-丙烯酰苯胺;2-氰基-3-(6-氮雜吲哚-3-基)硫代丙烯酰胺;2-氰基-3-(6-氮雜吲哚-3-基)丙烯腈;3-[(6-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚;5-羥基-[(6-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚;2-氰基-3-(5-氮雜吲哚-3-基)丙烯酰胺;2-氰基-3-(5-氮雜吲哚-3-基)-N-丙烯酰苯胺;2-氰基-3-(5-氮雜吲哚-3-基)硫代丙烯酰胺;2-氰基-3-(5-氮雜吲哚-3-基)丙烯腈;3-[(5-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚;5-羥基-3-[(5-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚;2-氰基-3-(4-氮雜吲哚-3-基)丙烯酰胺;2-氰基-3-(4-氮雜吲哚-3-基)-N-丙烯酰苯胺;2-氰基-3-(4-氮雜吲哚-3-基)硫代丙烯酰胺;2-氰基-3-(4-氮雜吲哚-3-基)丙烯腈;3-[(4-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚;和5-羥基-3-[(4-氮雜吲哚-3-基)亞甲基]-2-羥基吲哚;
4.權(quán)利要求1的式Ⅰ化合物及其藥用鹽的制備方法，該方法包括將式Ⅱ醛
其中基團(tuán)X1-X4、R1和R2如權(quán)利要求1中定義，與式(a′)、(b′)、(c′)、(d′)或(e′)的化合物縮合NC-CH2-CONH2(a’)
NC-CH2-CSNH2(c’)NC-CH2-CN(d’)
其中R3和n如權(quán)利要求1所述定義，如有必要，將一種式Ⅰ化合物轉(zhuǎn)為另一種式Ⅰ化合物，和/或如有必要，將一種式Ⅰ化合物轉(zhuǎn)變?yōu)橐环N藥用鹽，和/或如有必要，將鹽變?yōu)橛坞x化合物，和/或如有必要，將式Ⅰ化合物的異構(gòu)體混合物分離為單一異構(gòu)體。
5.含有適當(dāng)載體和/或稀釋劑和作為活性成分的權(quán)利要求1的式Ⅰ化合物及其藥用鹽的藥物組合物。
6.權(quán)利要求1的式Ⅰ化合物及其藥用鹽作為酪氨酸激酶抑制劑的用途。
7.權(quán)利要求1定義的式Ⅰ化合物及其藥用鹽在制備作為酪氨酸激酶抑制劑的藥物中的應(yīng)用。
8.權(quán)利要求1的式Ⅰ化合物及其藥用鹽，用于抗增生藥物的用途。
9.權(quán)利要求1定義的式Ⅰ化合物及其藥用鹽在制備作為抗增生藥物中的應(yīng)用。
10.權(quán)利要求1的式Ⅰ化合物及其藥用鹽作為抗癌藥物在治療冠狀動(dòng)脈疾病或抑制血管增生的應(yīng)用。
11.權(quán)利要求1所述的式Ⅰ化合物及其藥用鹽在制備作為抗癌藥物中或在治療冠狀動(dòng)脈疾病或抑制血管增生中的應(yīng)用。
12.含有權(quán)利要求1所述的式Ⅰ化合物及其藥用鹽和抗癌藥物的產(chǎn)品，作為聯(lián)合制劑可分別或按順序用于抗癌治療中。
全文摘要
本發(fā)明涉及式I化合物及其藥用鹽，式中各基團(tuán)定義詳見說明書。式I化合物用作酪氨酸激酶抑制劑。
文檔編號A61P35/02GK1093707SQ93112970
公開日1994年10月19日 申請日期1993年12月22日 優(yōu)先權(quán)日1992年12月23日
發(fā)明者F·布澤蒂, A·克拉格諾拉, D·巴利納里, F·格雷科 申請人:法米塔利亞·卡洛·埃巴有限責(zé)任公司