本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及桑葚顆粒在制備防治糖尿病及其并發(fā)癥藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

桑椹，又名桑椹子、桑果、桑子、是?？粕賛ulberry(Morus alba L.)植物的果實，桑椹的成熟鮮果味甜汁多，是人們常食的水果之一。本屬植物全球約有16種，分布于北溫帶、亞洲熱帶和非洲熱帶及美洲地區(qū)。我國約有11種，分布于全國大部分地區(qū)，以江蘇、浙江等南方養(yǎng)蠶地區(qū)產(chǎn)量較大。桑椹中含有豐富的糖類、有機(jī)酸、脂類、維生素、色素、非色素酚和礦物質(zhì)等成分。在藥效方面，桑椹性味甘寒，具有補(bǔ)肝益腎、生津潤燥、烏發(fā)明目等功效。綠原酸是其中含量較高的有機(jī)酸，同時其具廣泛的藥理作用，即①心血管保護(hù)作用；②抗誘變及抗癌作用；③抗菌及抗病毒作用；④降脂作用；⑤抗白血病作用；⑥免疫調(diào)節(jié)作用等。在現(xiàn)代中藥學(xué)中，桑椹通常加工成桑椹顆粒。

目前臨床盡管有些化學(xué)藥物在治療糖尿病的同時對其并發(fā)癥有一定的作用，但因其作用過于強(qiáng)烈，使體內(nèi)血糖水平變化較大，易加重心腦等重要器官損傷，所以在中藥中尋找藥性溫和，作用持久的治療藥物迫在眉睫。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的第一個目的是提供桑椹顆粒在制備防治糖尿病藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明的第二個目的是提供桑葚顆粒在制備防治糖尿病及其并發(fā)癥藥物中的應(yīng)用。

其中，所述糖尿病為I型或II型糖尿病。

其中，所述并發(fā)癥為心血管疾病、腦血管疾病、腎損傷、血管損傷中的一種。

其中，所述并發(fā)癥為心血管疾病。

其中，所述心血管疾病為心律失常、心室纖維化、冠心病、心絞痛、心力衰竭、充血性心力衰竭、心肌缺血、心肌缺血再灌注、心肌炎、動脈粥樣硬化、外周組織器官或四肢缺血、休克、缺血或再灌注引起的組織器官急慢性損傷、失調(diào)或間接后遺癥中的一種。

其中，所述心血管疾病為心肌缺血。

其中，所述心血管疾病為心肌缺血引起的心功能紊亂、心肌損傷或心肌梗死。

其中，所述心血管疾病為心肌缺血引起的心功能紊亂。

其中，所述腦血管疾病為腦缺血。

本發(fā)明所述的桑葚顆粒是以桑葚為活性成分，采用本領(lǐng)域公知造粒手段制備而成。

優(yōu)選地，本發(fā)明所述的桑葚顆粒通過如下方法制備得到：

取桑葚，用水煎煮1-3次，每次1-3h，合并煎煮液，過濾，取濾液濃縮成稠膏，制粒，即得。

在造粒過程中，可以加入本領(lǐng)域常用的藥用輔料。

本領(lǐng)域技術(shù)人員知曉，以制備而成的桑葚顆粒為原料，采用常規(guī)的制劑工藝，單獨使用或與其他藥物配合制備成在臨床上可以使用的各種不同劑型，如散劑、丸劑、膠囊劑、片劑、微囊劑、軟膠囊劑、沖劑等內(nèi)服制劑。

本發(fā)明測定了不同劑量組(低劑量組10mg/kg/day、中劑量組20mg/kg/day、高劑量組30mg/kg/day)桑椹顆粒對C57BL/6糖尿病小鼠體內(nèi)血糖、血脂和胰島素含量的影響，發(fā)現(xiàn)其可以明顯降低糖尿病小鼠高血糖和高血脂水平，升高胰島素水平，并有一定的劑量依賴效應(yīng)。

進(jìn)一步地，在糖尿病小鼠上制作心肌缺血再灌注模型，測定了桑椹顆粒對心功能參數(shù)以及心肌酶譜的影響，發(fā)現(xiàn)其可以改善心肌缺血再灌注引起的心肌功能紊亂，減小心肌梗死面積，降低血清中LDH和CK-MB等心肌酶表達(dá)，并有一定的劑量依賴效應(yīng)。

為了進(jìn)一步闡明其作用機(jī)制，測定了血清中氧化損傷指標(biāo)(MDA)和抗氧化酶(GSH，SOD，CAT和GR)水平，發(fā)現(xiàn)其能有效的減少M(fèi)DA水平，減輕脂質(zhì)過氧化情況，并且發(fā)現(xiàn)其可以升高GSH，SOD，CAT和GR水平，應(yīng)對氧化損傷。

本發(fā)明的桑葚顆粒能夠有效控制糖尿病體內(nèi)血糖和血脂水平，可以改善糖尿病合并心肌缺血引起的心功能紊亂，桑葚顆粒能夠有效抑制氧化應(yīng)激。

附圖說明

圖1是桑葚顆粒對小鼠空腹血糖、空腹胰島素水平以及胰島素敏感指數(shù)的影響結(jié)果圖；

圖2為桑椹顆粒對小鼠甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白以及高密度脂蛋白水平的影響結(jié)果圖；

圖3為桑椹顆粒對糖尿病合并心肌缺血再灌注小鼠心功能參數(shù)的影響結(jié)果圖；

圖4為桑椹顆粒對糖尿病合并心肌缺血再灌注小鼠心肌梗死面積及心肌酶譜的影響結(jié)果圖；

圖5為桑椹顆粒對糖尿病合并心肌缺血再灌注小鼠體內(nèi)抗氧化酶水平的影響結(jié)果圖。

具體實施方式

以下實施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。實施例中涉及到的試劑或原料均為已知產(chǎn)品，可市購獲得。涉及到的桑葚顆粒，通過如下方法制備得到：取桑葚500g，加水煎煮2次，每次2h，合并煎煮液，過濾，濾液濃縮成稠膏，制粒，即得。

實施例1 桑椹顆粒對糖尿病血糖、血脂和胰島素水平的影響

桑椹顆粒，由陜西君碧莎制藥有限公司提供。用時以生理鹽水配制成所需濃度。試驗動物為雄性C57BL/6小鼠，非近交系封閉群，體重23-25g，由第四軍醫(yī)大學(xué)實驗動物中心提供。實驗室室溫20-22℃，相對濕度40％-60％，換氣扇通氣，自然光源12h/日，籠養(yǎng)，每籠8只，每三日清掃籠舍一次。

小鼠糖尿病模型：成年C57BL/6小鼠隨機(jī)分為正常組和糖尿病組，每組10只小鼠；正常組喂正常飼料，糖尿病組喂高脂飼料。喂養(yǎng)三周后，禁食12小時，糖尿病組腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ，50mg/kg)，正常組注射0.1mol/L枸櫞酸緩沖液，正常組繼續(xù)喂正常飼料，糖尿病組喂養(yǎng)高脂高糖飼料，四周后，測定小鼠血糖水平，濃度>11.1mM即認(rèn)為模型成功。

對造模成功后的小鼠分為3組，分別為低劑量組，中劑量組和高劑量組，每組6只小鼠，其中，三組給藥劑量分別為：低劑量組10mg/kg/day、中劑量組20mg/kg/day、高劑量組30mg/kg/day；給藥時間：四周。最后一次給藥后，測定小鼠血糖、胰島素、脂質(zhì)水平。

桑椹顆粒對血糖和胰島素影響結(jié)果見圖1；桑椹顆粒對脂質(zhì)水平影響結(jié)果見圖2。

圖1中，Control：正常組；model組：糖尿病組；與control組相比:##P＜0.01；與model組相比：*P＜0.05，**P＜0.01。

圖2中，TG：甘油三酯；TC：總膽固醇；LDL-c：低密度脂蛋白；HDL-c：高密度脂蛋白；Control：正常組；model組：糖尿病組；與control組相比:##P＜0.01；與model組相比：*P＜0.05，**P＜0.01。

實施例2：桑椹顆粒對糖尿病合并心肌缺血再灌注損傷的作用

桑椹顆粒，由陜西君碧莎制藥有限公司提供。用時以生理鹽水配制成所需濃度。試驗動物為雄性C57BL/6糖尿病小鼠，非近交系封閉群，體重23-25g，由第四軍醫(yī)大學(xué)實驗動物中心提供。實驗室室溫20-22℃，相對濕度40％-60％，換氣扇通氣，自然光源12h/日，籠養(yǎng)，每籠8只，每三日清掃籠舍一次。

糖尿病合并心肌缺血再灌注模型：腹腔注射75mg/kg氯胺酮麻醉小鼠以后，將小鼠仰臥位在鼠板上固定好，剪去頸部毛，在中線位置作一長約0.5cm的縱向切口，然后頓性分離筋膜及肌肉，致使氣管暴露，插入適合的氣管套管，確定氣管插管通暢后連接小動物呼吸機(jī)，潮氣量控制在250-300ml/min，呼吸頻率為114次/分鐘，呼吸比為1.5∶1。頸部右側(cè)作一約0.5cm大小切口，鈍性分離皮下組織，暴露頸靜脈，置入一大小為24G的靜脈留置針，并肝素化備用。胸前手術(shù)區(qū)備皮去毛，左胸近中線作一長約1.0cm的斜型切口，然后鈍性分離胸部的肌肉，分離第四或第五肋間肌，用拉鉤拉開肋間隙并使用眼瞼撐開器撐開固定，剪開心包使暴露心臟，重點暴露左心耳與肺動脈圓錐之間的心大靜脈，以此靜脈為標(biāo)志，在左心耳下方約2mm處用無創(chuàng)小圓針8-0絲線穿過心肌表層，于肺動脈圓錐旁出針。缺血/再灌注模型采用推管法，將穿過心肌的絲線兩端從一管徑約2mm的聚乙烯管中穿過，推管壓迫心肌造成左主冠狀動脈閉塞形成心肌缺血，30min后松開絲線，再灌注24h。實驗開始的同時，分別將針形電極插入小鼠四肢皮下監(jiān)測II導(dǎo)聯(lián)心電圖，出現(xiàn)ST段抬高0.2mV以上，心臟表面相應(yīng)部位原色變蒼白說明缺血成功，LAD重新開放后，當(dāng)ST段驟降，心臟表面由蒼白變?yōu)轷r紅標(biāo)志再灌注成功。假手術(shù)組(sham組)只穿線而不收緊線，觀察時間與缺血30min組相同。

造模成功后，將小鼠分為3組，分別為低劑量組，中劑量組和高劑量組，本實驗給藥劑量分別為：低劑量組10mg/kg/day、中劑量組20mg/kg/day、高劑量組30mg/kg/day；給藥時間：四周。最后一次給藥后，測定心功能參數(shù)、心梗面積、心肌酶譜和抗氧化酶。

桑椹顆粒對心功能參數(shù)的影響結(jié)果見圖3；桑椹顆粒對心梗面積及心肌酶譜的影響結(jié)果見圖4；桑椹顆粒對體內(nèi)抗氧化酶影響結(jié)果見圖5。

圖3中，Sham:正常組；I/R組：糖尿病合并心肌缺血再灌注組；與sham組相比:##P＜0.01；與I/R組相比：*P＜0.05，**P＜0.01；

圖4中，Sham:正常組；I/R組：糖尿病合并心肌缺血再灌注組；與sham組相比:##P＜0.01；與I/R組相比：*P＜0.05，**P＜0.01。

圖5中，Sham:正常組；I/R組：糖尿病合并心肌缺血再灌注組；與sham組相比:##P＜0.01；與I/R組相比：*P＜0.05，**P＜0.01。

實驗結(jié)果證明：桑椹顆?？梢杂行У目刂菩∈篌w內(nèi)血糖、血脂和胰島素水平；桑椹顆粒可以有效的穩(wěn)定糖尿病合并心肌缺血再灌注小鼠引起的心功能紊亂；桑椹顆粒可以有效的減輕糖尿病合并心肌缺血再灌注小鼠引起的心肌損傷；桑椹顆粒可以明顯升高糖尿病合并心肌缺血再灌注小鼠體內(nèi)抗氧化酶水平。

雖然，上文中已經(jīng)用一般性說明、具體實施方式及試驗，對本發(fā)明作了詳盡的描述，但在本發(fā)明基礎(chǔ)上，可以對之作一些修改或改進(jìn)，這對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。因此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎(chǔ)上所做的這些修改或改進(jìn)，均屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。