專利名稱：連接有聚乙二醇的氨基酸及其制法和用途的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及連接了聚乙二醇長鏈的氨基酸、其制備方法及其用于多肽的合成，用于制備帶有聚乙二醇長鏈的多肽。
背景技術：
隨著生物技術的發(fā)展，越來越多的具有生物活性的小肽被研究者發(fā)現(xiàn)具有治療作用，如胸腺肽、生長抑素、血管緊張素、阿基瑞林等等。但小肽應用于臨床也有許多不利之處，例如易產(chǎn)生免疫排斥反應、穩(wěn)定性較差、在體內(nèi)被清除速率較快等。因此，人們采用了各種方法消除上述不利因素，其中手段之一是采用聚乙二醇化技術。聚乙二醇化技術(PEGylation PEG化)又稱為化學修飾，是目前分子變構化學(molecule altering structure chemistry,MASC)中最重要的技術之一。PEG化技術的研 究始于20世紀80年代，Abuchowski等第一次將聚乙二醇共價結合到蛋白質上，以保護蛋白質免遭破壞，結果發(fā)現(xiàn)聚乙二醇修飾不僅可以增加蛋白質的水溶性，還能減緩腎臟的清除，改變了蛋白質的藥代動力學和藥效學性質。經(jīng)過近幾十年的發(fā)展，PEG化技術不僅在蛋白質類藥物的開發(fā)中得到普遍的應用，而且已擴展到新型藥物載體、控釋制劑等各個領域。許多制備聚乙二醇化小肽的方法已被報道，潘和平等在中國專利200310117356. 5中報道了胸腺五肽的聚乙二醇化衍生物，含有它們的藥物組合物及用途；中國專利200410066897. 4中報道了一種人胰高血糖素樣肽-I的復合物及其制備方法，連接了 PEG的人胰高血糖素樣肽-I生物穩(wěn)定性高，體內(nèi)半衰期長，生物利用度高。在傳統(tǒng)的聚乙二醇化技術中，需要對聚乙二醇的端基進行活化，引入適當?shù)幕钚曰鶊F，此活性基團對要結合的藥物分子中的至少一個官能團具有活性，能與之形成穩(wěn)定的化學鍵。但這種方法在用于小肽的PEG化時存在著許多的局限性其一是小肽的氨基酸中可能不具有能與活化的PEG結合的側鏈基團。另外，小肽的分子量較小，PEG化的位點可能覆蓋了活性部位。本發(fā)明提供的帶有PEG的氨基酸用于多肽的合成，可以在設定好的位點引入PEG，避免了傳統(tǒng)PEG化方法的局限性。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種新型的，帶有聚乙二醇的氨基酸，能用于多肽的化學合成。本發(fā)明的技術方案如下一種連接有聚乙二醇的氨基酸，它具有以下結構通式R — PEG — CO-X-氨基酸或R — PEG — X-氨基酸其中PEG為聚乙二醇鏈，R為PEG的羥基或烴氧基，烴氧基可以選自C廣C12烷氧基、環(huán)烷氧基或芳烷氧基，X為氨基酸中除a-羧基和a-氨基外的脫去活性氫的雜原子。
本發(fā)明的連接有聚乙二醇的氨基酸，其中的氨基酸優(yōu)選的是側鏈含雜原子的天然氨基酸。它們中最優(yōu)選的天然氨基酸是賴氨酸、組胺酸、半胱氨酸、酪氨酸或精氨酸，烴氧基為甲氧基，它們有如下幾種結構
權利要求
1.一種連接有聚乙二醇的氨基酸，其特征是它具有以下結構通式 R-PEG-X-氨基酸 其中PEG為聚乙二醇鏈，R為PEG的羥基或烴氧基，烴氧基選自C廣C12烷氧基、環(huán)烷氧基或芳烷氧基，X為氨基酸中除a-羧基和a-氨基外的脫去活性氫的雜原子。
2.根據(jù)權利要求I所述的連接有聚乙二醇的氨基酸，其特征是其中的氨基酸是側鏈含雜原子的天然氨基酸。
3.根據(jù)權利要求2所述的連接有聚乙二醇的氨基酸，其特征是它們中的天然氨基酸是賴氨酸、組胺酸、半胱氨酸、酪氨酸或精氨酸，烴氧基為甲氧基。
4.一種制備權利要求I所述的連接有聚乙二醇的氨基酸的方法，其特征是它包括以下步驟 取單烴氧基聚乙二醇酸，a -叔丁氧羰基氨基酸和二環(huán)己基碳二亞胺溶于二氯甲烷中，所述的氨基酸是除a-羧基和a-氨基外還具有帶活性氫的氮原子的氨基酸，在室溫下攪拌回流4 16小時，將混合物過濾，濾液減壓蒸干并真空干燥，即得連接有聚乙二醇的a-叔丁氧羰基氨基酸，將所得的連接有聚乙二醇的a-叔丁氧羰基氨基酸溶于二氯甲烷中，并加入三氟乙酸，攪拌，然后蒸發(fā)濃縮并真空干燥，所得固體物質用二氯甲烷溶解并用干燥劑干燥，過濾后再加入冷卻乙醚至濾液中，將所得沉淀物過濾后真空干燥，即得連接有聚乙二醇的氨基酸。
5.一種制備權利要求I所述的連接有聚乙二醇的氨基酸的方法，其特征是它包括以下步驟 取單烴氧基聚乙二醇酰氯溶于二氯甲烷中，再加入a-叔丁氧羰基氨基酸和三乙胺，所述的氨基酸是除a-羧基和a-氨基外還具有帶活性氫的雜原子的氨基酸，室溫下攪拌過夜，將反應混合物過濾，濾液蒸發(fā)濃縮并真空干燥，即得連接有聚乙二醇的a -叔丁氧羰基氨基酸，將所得的連接有聚乙二醇的a-叔丁氧羰基氨基酸溶于二氯甲烷中，并加入三氟乙酸，攪拌，然后蒸發(fā)濃縮并真空干燥，所得固體物質用二氯甲烷溶解并用干燥劑干燥，過濾后再加入冷卻乙醚至濾液中，將所得沉淀物過濾后真空干燥，即得連接有聚乙二醇的氨基酸。
6.一種制備權利要求I所述的連接有聚乙二醇的氨基酸的方法，其特征是它包括以下步驟 取單烴氧基聚乙二醇溶于二氯亞砜中，室溫攪拌2小時，旋轉蒸發(fā)除去剩余的二氯亞砜，將所得固體物質溶于二氯甲烷中，再加入a-叔丁氧羰基氨基酸和三乙胺，所述的氨基酸是除a-羧基和a-氨基外還具有帶活性氫的雜原子的氨基酸，室溫下攪拌過夜，過濾反應混合物，濾液蒸發(fā)濃縮并真空干燥，即得連接有聚乙二醇的a -叔丁氧羰基氨基酸，將所得的連接有聚乙二醇的a-叔丁氧羰基氨基酸溶于二氯甲烷中，并加入三氟乙酸，攪拌，然后蒸發(fā)濃縮并真空干燥，所得固體物質用二氯甲烷溶解并用干燥劑干燥，過濾后再加入冷卻乙醚至濾液中，將所得沉淀物過濾后真空干燥，即得連接有聚乙二醇的氨基酸。
7.一種制備權利要求I所述的連接有聚乙二醇的氨基酸的方法，其特征是它包括以下步驟 取單烴氧基聚乙二醇胺，a-叔丁氧羰基氨基酸和二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)溶于二氯甲烷中，所述的氨基酸是除a-羧基和a-氨基外還具有其它羧基的氨基酸，在室溫下攪拌回流4 16小時，將混合物過濾，濾液減壓蒸干并真空干燥，即得連接有聚乙二醇的a-叔丁氧羰基氨基酸，將所得的連接有聚乙二醇的a-叔丁氧羰基氨基酸溶于二氯甲烷中，并加入三氟乙酸，攪拌，然后蒸發(fā)濃縮并真空干燥，所得固體物質用二氯甲烷溶解并用干燥劑干燥，過濾后再加入冷卻乙醚至濾液中，將所得沉淀物過濾后真空干燥，即得連接有聚乙二醇的氨基酸。
8.—種權利要求I所述的連接有聚乙二醇的氨基酸的用途，其特征是將其用于多肽的合成，或將其連接到藥物上。
全文摘要
一種連接有聚乙二醇的氨基酸，它具有以下結構通式R—PEG—X-氨基酸其中PEG為聚乙二醇鏈，R為PEG的羥基或烴氧基，烴氧基可以選自C1~C12烷氧基、環(huán)烷氧基或芳烷氧基，X為氨基酸中除α-羧基和α-氨基外的脫去活性氫的雜原子。用本發(fā)明的連接有聚乙二醇的氨基酸合成多肽，可以得到聚乙二醇鏈在特定位置的多肽，如此的多肽不但改善了它們的藥代動力學，而且不影響多肽原有的治療作用。本發(fā)明公開了其制法。
文檔編號A61K47/48GK102827365SQ20121032168
公開日2012年12月19日 申請日期2006年11月7日 優(yōu)先權日2006年11月7日
發(fā)明者姚文兵, 田浤, 高向東, 陳陽建, 宋瀟達 申請人:中國藥科大學