專利名稱：：聚乙二醇化淫羊藿苷、制備方法及用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于藥物領(lǐng)域,具體地說是涉及一種中草藥有效成分一淫羊藿苷的聚乙二醇化制備方法及其在制備心腦血管疾病藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：淫羊藿苷(icariin，ICA)是從中草藥淫羊藿莖葉中提取的總黃酮的主要有效成分。ICA具有廣泛的藥理作用，如調(diào)節(jié)免疫、抗腫瘤、抗衰老、保護心腦血管系統(tǒng)等作用(綜述文章見中成藥，2005，27，719-721;中國藥房，2005，16，952-954)。其中，抗心肌缺血是近年來人們較為關(guān)注的研究熱點之一。ICA的水溶性很差，給藥劑型通常為口服制劑。在口服過程中苷類化合物易被胃酸水解，其生物利用度有不同程度降低，這限制了它在臨床的應(yīng)用。聚乙二醇(PEG)是中性、無毒且具有獨特理化性質(zhì)和良好的生物相溶性的高分子聚合物，也是經(jīng)FDA批準的極少數(shù)能作為體內(nèi)注射藥用的合成聚合物之一。聚乙二醇化技術(shù)是一種改善藥物溶解性及其在體內(nèi)傳輸?shù)挠行Х椒?，如美國FDA目前批準的聚乙二醇化治療性蛋白有2種(Clin.Pha函cokinet.2001，40，539-551);中國專利申請00109748.2報道了聚乙二醇支載的紫杉醇或多烯紫杉醇前藥的發(fā)明。為了發(fā)展更為高效的給藥方法，將難溶性ICA制成溶于水的粉針劑，解決其給藥過程中溶解性的問題，提高其生物利用度，我們制備了聚乙二醇化淫羊藿苷，并研究了其在制備治療心腦血管疾病藥物中的應(yīng)用。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種可以用于治療心腦血管疾病的聚乙二醇化淫羊藿苷。本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的本發(fā)明所述的聚乙二醇化淫羊藿苷，其化學(xué)結(jié)構(gòu)為如下通式I或II:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>其中R=Me或H上述通式中，n=10-450,所對應(yīng)的聚乙二醇的分子量約為400-20000。上述通式中丁二酸殘基一端與聚乙二醇相連，另一端與淫羊s苷分子中葡萄糖或鼠李糖環(huán)上的任一羥基相連。上述通式中聚乙二醇與淫羊藿苷的摩爾比為1:1或1:2。本發(fā)明還提供一種具有上述化學(xué)結(jié)構(gòu)的聚乙二醇化淫羊藿苷化合物的制備方法，即首先將mPEG(聚乙二醇單甲醚)或PEG活化，形成端基為羧基的mPEG或PEG化合物，然后在極性溶劑中使用縮合試劑將其與一個或兩個淫羊藿苷分子通過酯鍵相連接，得到聚乙二醇化淫羊藿苷。以mPEG為起始原料，合成路線見圖1。本發(fā)明中所述的極性溶劑為N，N-二甲基曱酰胺(DMF)、二氯曱烷(DCM)、四氫吹喃(THF)等，優(yōu)選為DMF。本發(fā)明中所述的縮合試劑為N，N，-二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺(EDC)、2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，fT，N^四曱基脲六氟磷酸酯(HATU)等，優(yōu)選為DCC。本發(fā)明測試了尾靜脈注射給藥對垂體后葉素所致大鼠實驗性心肌缺血、線栓法致大鼠實驗性腦缺血以及大鼠動靜脈旁路血栓形成的影響。實驗結(jié)果顯示本發(fā)明制備的聚乙二醇化淫羊藿苷可降低T波變化絕對值和心率變化百分率，表明其具有抗心月幾缺血的作用；可明顯改善腦缺血大鼠神經(jīng)缺損癥狀，減少腦梗死范圍，表明其具有腦保護作用；能明顯降低動靜脈旁路血栓的濕重和干重，表明其具有抗血栓形成作用。因此，聚乙二醇化淫羊藿苷尾靜脈注射給藥對垂體后葉素所致大鼠實驗性心肌缺血及線圖i聚乙二醇化淫羊藎苦合成路線栓法致大鼠實驗性腦缺血有預(yù)防保護作用，并具有顯著的抗血栓形成作用，可應(yīng)用于制備治療心血管疾病以及腦血管疾病的藥物。本發(fā)明針對淫羊藿苷水溶性差的問題,用不同分子量的聚乙二醇進行修飾，得到了水溶性良好的聚乙二醇化淫羊藿苷化合物，有效解決了淫羊藿苷應(yīng)用于臨床的一些關(guān)鍵問題。具體實施例方式實施例1利用分子量為5000的聚乙二醇單曱醚制備聚乙二醇化淫羊藿苷ICA-mPEG5000。稱取5.Og(1.Ommol)的聚乙二醇單甲醚-5000溶于lOmL吡咬中，而后再加入丁二酸酐0.llg(1.lmmol)和4-二甲氨基吡咬(DMAP)61mg(0.5mmo1)。50°C下攪拌反應(yīng)5h。減壓蒸除溶劑后，殘余物真空干燥，直接用于下面的反應(yīng)。取上面制備的聚乙二醇單曱醚-5000衍生物336mg(~0.067mmol)和淫羊藿苷50mg(0.074mmol)溶于2mLDMF中，而后加入DCC28mg(0.14mmol)和DMAP9mg(0.074mmo1)。室溫攪拌發(fā)應(yīng)24h后，濾除反應(yīng)液中的不溶物，加入無水乙醚，有白色沉淀產(chǎn)生，過濾得淺黃色固體。此產(chǎn)物進一步用透析的方法純化將其先用5mL去離子水溶解，不溶物濾除，然后用截止分子量為3500的透析膜透析3天。透析后的溶液冷凍干燥得淡黃色絮狀物318mg即為ICA-mPEG5000,產(chǎn)率84%。室溫下水中溶解度約為"0mg/mL。此化合物結(jié)構(gòu)經(jīng)過質(zhì)譜、核f茲共振語、紅外光i普等確證。從4-NMR譜計算出其淫羊藿苷的含量為9%。經(jīng)凝膠排阻色語(GPC)分析，其Mn(數(shù)均分子量)為7548，Mw(重均分子量)為7810。實施例2利用分子量為2000的聚乙二醇單甲醚制備聚乙二醇化淫羊藿苷ICA-mPEG2000。重復(fù)實施例1的制備步驟，用聚乙二醇單甲醚-2000代替聚乙二醇單甲醚-5000，使用截止分子量為1000的透析膜純化產(chǎn)物，制得ICA-mPEG2000，產(chǎn)率78%。室溫下水中溶解度約為650mg/mL。此化合物結(jié)構(gòu)經(jīng)過質(zhì)譜、核磁共振i普、紅外光譜等確證。從^-NMR譜計算出其淫羊藿苷的含量為22°/。經(jīng)凝膠排阻色譜(GPC)分析，其Mn(數(shù)均分子量)為3398,Mw(重均分子量)為3708。實施例3利用分子量為750的聚乙二醇單曱醚制備聚乙二醇化淫羊藿苷ICA-mPEG750。重復(fù)實施例1的制備步驟，用聚乙二醇單甲醚-750代替聚乙二醇單曱醚-5000，使用截止分子量為500的透析膜純化產(chǎn)物，制得ICA-mPEG750,產(chǎn)率85%。此化合物結(jié)構(gòu)經(jīng)過質(zhì)鐠、核磁共振錯、紅外光語等確證。從^-NMR譜計算出淫羊藿苷的含量為47%。室溫下水中溶解度約為260mg/mL。此化合物經(jīng)凝膠排阻色錯(GPC)分析，其Mn(數(shù)均分子量)為2134，Mw(重均分子量)為2383。實施例4利用分子量為15000的聚乙二醇單甲醚制備聚乙二醇化淫羊藿苷ICA-mPEG15000。重復(fù)實施例1的制備步驟，用聚乙二醇單曱醚-15000代替聚乙二醇單甲醚-5000，用DCM代替DMF,用HATU代替DCC,使用截止分子量為10000的透析膜純化產(chǎn)物，制得ICA-mPEG15000,產(chǎn)率76%。室溫下水中溶解度約為440mg/mL。此化合物結(jié)構(gòu)經(jīng)過質(zhì)譜、核,茲共振譜、紅外光譜等確證。從^-NMR譜計算出其淫羊藿苷的含量為3%。實施例5利用分子量為4000的聚乙二醇制備聚乙二醇化淫羊藿苷ICA-PEG4000。稱取4.0g(1.0mmol)的聚乙二醇-4000溶于10mL吡啶中，而后再加入丁二酸酐O.llg(1.lmmol)和4-二曱氨基吡梵(DMAP)61mg(0.5mmo1)。50r下攪拌反應(yīng)5h。減壓蒸除溶劑后，殘余物真空千燥，直接用于下面的反應(yīng)。取上面制備的聚乙二醇-4000衍生物417mg(~0.l訓(xùn)ol)和淫羊藿苦135mg(0.20腿ol)溶于2mLTHF中，而后加入EDCHC119mg(0.lOmmol)和DMAP12mg(0.lOmmol)。室溫攪拌發(fā)應(yīng)24h后，濾除反應(yīng)液中的不溶物，加入無水乙醚，有白色沉淀產(chǎn)生，過濾得淺黃色固體。此產(chǎn)物進一步用透析的方法純化將其先用5mL去離子水溶解，不溶物濾除，然后用截止分子量為3500的透析膜透析三天。透析后的溶液冷凍干燥得淡黃色絮狀物即為ICA-PEG4000,產(chǎn)率81%。室溫下水中溶解度約為490mg/mL。此化合物結(jié)構(gòu)經(jīng)i^f鐠、核磁共振鐠、紅外光諳等確證。從屮-NMR鐠計算出其淫羊藿苷的含量為6%。實施例6利用分子量為4000的聚乙二醇制備聚乙二醇化二淫羊藿苷BisICA-PEG徹O。稱取4.0g(1.0mmol)的聚乙二醇-4000溶于10mL吡咬中，而后再加入丁二酸酐0.22g(2.2ramol)和DMAP122mg(1.Ommol)。50。C下攪拌反應(yīng)5h。減壓蒸除溶劑后，殘余物真空干燥，直接用于下面的反應(yīng)。取上面制備的聚乙二醇-4000衍生物420mg(~0.lmmol)和淫羊藿苷150mg(0.22隨o1)溶于4mLDMF中，而后加入DCC84mg(0.40mmo1)和DMAP27mg(0.22mmo1)。室溫攪拌發(fā)應(yīng)24h后，濾除反應(yīng)液中的不溶物，加入無水乙醚，有白色沉淀產(chǎn)生，過濾得淺黃色固體。此產(chǎn)物進一步用透析的方法純化將其先用5mL去離子水溶解，不溶物濾除，然后用截止分子量為3500的透析膜透析三天。透析后的溶液冷凍干燥得淡黃色絮狀物即為BisICA-PEG4000,產(chǎn)率62%。室溫下水中溶解度約為380mg/mL。此化合物結(jié)構(gòu)經(jīng)過質(zhì)鐠、核磁共振譜、紅外光i普等確證。從H-NMR語圖計算出其淫羊藿苷的含量為14%。經(jīng)凝膠排阻色譜(GPC)分析，其Mn(數(shù)均分子量)為6052，Mw(重均分子量)為6311。實施例7聚乙二醇化淫羊藿苷ICA-mPEG2000尾靜脈注射給藥抗心肌缺血藥效學(xué)研究試驗一聚乙二醇化淫羊藿苷ICA-mPEG2000尾靜脈注射給藥對垂體后葉素所致大鼠實驗性心肌缺血的影響將Wistar大鼠40只，隨機分為4組，每組10只分別為空白對照組，模型組，陽性藥硝酸甘油注射液組(0.3mg/kg)和ICA-mPEG2000組(10mg/kg)。釆用舌下靜脈注射垂體后葉素建立大鼠急性心肌缺血模型，造模前30min各組采取尾靜脈注射給藥一次，以造才莫前后T波變化絕對值、心率及其變化百分率為觀測指標，研究藥物對該模型大鼠的影響。實驗結(jié)果見表l、2。表1聚乙二醇化淫羊藿苷ICA-mPEG2000尾靜脈注射給藥對垂體后葉素所致急性心肌缺血大鼠模型心率變化百分率(％)的影響(5±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>注與空白對照組比較，▲，.05"▲M001;表2聚乙二醇化淫羊度苷ICA-mPEG2000尾靜脈注射給藥對垂體后葉素所致急性心肌缺血大鼠模型II導(dǎo)聯(lián)心電圖T波變化絕對值的影響(i±s，單位mV)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>注與空白對照組比較，a^O.05或"AO.01;與模型組比較，*A0.05或**/C0.01由表l可知，舌下靜脈注射垂體后葉素后，與空白對照組比較，模型組在各時間點均顯著降低心率，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理差異具有非常顯著性(P<0.001);與模型組比較，硝酸甘油注射液組和ICA-inPEG2000組在各時間點對心率變化百分率沒有明顯影響，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理差異均無顯著性(P>0.05)。表2顯示，舌下靜脈注射垂體后葉素后，與空白對照組比較，模型組在各時間點均顯著升高T波變化絕對值，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理差異具有非常顯著性(P<0.05或P<0.01);與模型組比較，辨酸甘油注射液組在15s—15min時均顯著降低T波變化絕對值，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理差異具有顯著性(P<0.05);ICA-mPEG2000組在15s、60s—15min時均顯著降低T波變化絕對值，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理差異具有顯著性(P<0.05或P<0.01)。垂體后葉素能夠收縮小動脈，使冠狀動脈痙攣，造成急性心肌供血不足及外周阻力增加，導(dǎo)致心臟負荷加重，心電圖可見心肌缺血的典型變化，類似于人體急性心肌缺血損傷，是研究防治心肌缺血藥物的常用方法。本次實驗結(jié)果提示ICA-mPEG2000尾靜脈注射給藥對垂體后葉素所致大鼠急性心肌缺血有顯著的預(yù)防保護作用。試驗二聚乙二醇化淫羊藎苷ICA-raPEG2000尾靜脈注射給藥對冠脈結(jié)扎致大鼠實驗性心肌梗死的治療作用Wistar大鼠64只，體重260280g,雌雄兼用。隨機分為4組，每組16只，分別為假手術(shù)組、模型組、陽性藥組(鹽酸地爾疏卓3mg/kg)、ICA-mPEG2000(10mg/kg)組。腹腔注射烏拉坦(1000mg/kg)麻醉，各組分別記錄標準II導(dǎo)聯(lián)ECG1min。胸部常規(guī)消毒，左鎖骨中線第四肋間開胸，暴露心臟，距左冠狀動脈前降支根部約2mm處結(jié)扎，送回心臟，關(guān)閉胸腔。記錄冠脈結(jié)扎后II導(dǎo)聯(lián)心電圖，以T波高卑伴有ST段抬高為結(jié)扎成功的標志。結(jié)扎冠脈15min后記錄ECG，作為給藥前值，然后經(jīng)舌下靜脈給藥一次，劑量如前所述。結(jié)扎后5h,處死大鼠，將心臟4黃切成5片置于0.1%的NBT(用pH7.4~7.8的0.2mol/LTris液配制)溶液中，37。C水浴35min，洗去多余的染料可見梗死區(qū)不著色，非梗死區(qū)被NBT染為紫藍色，將心臟切片并照相，用圖形分析軟件比較心肌梗死面積。實驗結(jié)果如下1.ICA-tnPEG2000對冠脈結(jié)扎大鼠心電圖T波變化絕對值的影響見表3。表3ICA-mPEG2000對冠脈結(jié)扎大鼠心電圖T波變化絕對值的影響(;±&單位raV,n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>注與假手術(shù)組比較，a代0.05或"代0.01;與模型組比較，*代0.05或**/^0.01由上表可見，冠脈結(jié)扎后，與假手術(shù)組比較，模型組在15m、30m、lh、2h各點均顯著升高T波變化絕對值，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理差異具有顯著性(代O.05或代O.01);與模型組比較，地爾硫卓組在30min、lh各點均顯著降低T波變化絕對值，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理差異具有顯著性(代O.01)。與模型組比較，ICA-mPEG2000(10mg/kg)組在30rain、lh各點均顯著降低T波變化絕對值，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理差異具有顯著性(P<0.05或P<0.01)。2.ICA-mPEG2000對冠脈結(jié)扎大鼠心肌梗死面積占全心面積的比例的影響見表4。表4ICA-mPEG2000對冠脈結(jié)扎大鼠心肌梗死面積占全心面積的比例的影響(n=9)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>ICA-mPEG2000纟且1010.41±7.50**注與模型組比較，**代0.01由上表可見，冠脈結(jié)扎后，與模型組比較，陽性藥組能顯著降低梗死面積，梗死區(qū)實測值和所占全心面積百分率差異具有顯著性(代O.05)。與模型組比較，ICA-mPEG2000(10mg/kg)組能顯著降低梗死面積，梗死區(qū)所占全心面積百分率差異具有顯著性(代O.01)。綜上所述實驗結(jié)果表明，ICA-mPEG200010mg/kg能減小冠脈結(jié)扎所致大鼠心肌梗死面積、降低心電圖T波變化絕對值，對大鼠實驗性心肌梗死具有較好的治療作用。實施例8聚乙二醇化淫羊藿苷ICA-PEG4000尾靜脈注射給藥抗腦缺血及血栓形成作用的研究試驗一聚乙二醇化淫羊藿苷ICA-PEG4000尾靜脈注射給藥對大鼠腦缺血/再灌注損傷的保護作用SD大鼠隨機分為假手術(shù)組、模型組、ICA-PEG40005mg/kg、10mg/kg、20mg/kg組、陽性對照藥尼莫地平15mg/kg組。采用尾靜脈注射途徑給藥，每日一次，連續(xù)2日。第3日手術(shù)前0.5h、手術(shù)后6h分別給藥l次，假手術(shù)組及模型組注射等量生理鹽水。手術(shù)造模方法為大鼠麻醉，仰臥位固定。分離右側(cè)頸總動脈、頸內(nèi)動脈及頸外動脈，穿線備用，結(jié)扎頸外動脈與頸總動脈，以動脈夾夾閉頸內(nèi)動脈遠心端后，于頸外動脈與頸內(nèi)動脈分叉處作一切口，從切口處插入頭端磨成王求形的光滑尼龍線(直徑O.285mm),有阻力感時停止進線并記錄缺血時間，插入深度18mm左右，實現(xiàn)大腦中動脈阻塞導(dǎo)致腦缺血。結(jié)扎切口處，縫合皮趺。3h后將尼龍線輕輕抽到近切口處，實現(xiàn)再灌注。假手術(shù)組只結(jié)扎右側(cè)頸總動脈。按ZeaLonga5級評分法，分別于術(shù)后3h和再灌注21h進行評定，O分及昏迷不醒者剔除。評分標準無明顯神經(jīng)病學(xué)癥狀，0分；不能完全伸展左側(cè)前爪，l分；向左側(cè)旋轉(zhuǎn)，2分；行走時向左側(cè)傾倒，3分；不能自行行走，4分。于術(shù)后24h評分后斷頭取腦，去掉嗅球、小腦和低位腦干后的剩余部分在4。C冠狀切為6片，并迅速將腦片置于TTC染液中(每5mL染液中含4%TTC1.5mL，1MK2HP040.lmL，其余加蒸餾水至刻度)，37。C避光溫醉30分鐘，取出后置于10。/。甲醛液中避光保存24h。經(jīng)染色后非缺血區(qū)為玫瑰紅色，梗死區(qū)為白色。將白色組織仔細挖下稱重，以梗死組織重量占全腦重量的百分比作為腦梗死范圍。所有數(shù)值以3f土^表示，組間比較采用,檢^r。結(jié)果如下1.ICA一PEG4000對大腦中動脈缺血再灌注大鼠神經(jīng)癥狀評分的影響假手術(shù)組大鼠沒有神經(jīng)功能缺損表現(xiàn)，造;f莫后出現(xiàn)了不同程度的神經(jīng)功能缺損癥狀。各給藥組可明顯改善模型大鼠神經(jīng)缺損癥狀，尤以ICA-PEG400020mg/kg組和尼莫地平15mg/kg組改善最為顯著。結(jié)果見表5。表5ICA-PEG4000對tMCAO大鼠神經(jīng)癥狀評分的影響(jf±j)組別f逢/7缺血3力/7再灌21力假手術(shù)-120±0120±0模型-152.73±0.70"122.33±0.65"尼莫地平15162.00±0.73**131.54±0.66**5152.33±0.62121.83±0.83ICA-PEG400010152.20±0.56*131.77±0.60*20161.94±0.77**131.44±0.66**注與模型組比較,**0.01,*戶<0.05;與假手術(shù)組比較,"P<0.01.2.ICA-PEG4000對大腦中動脈缺血再灌注大鼠腦梗死范圍的影響TTC染色表明，模型組腦梗死范圍達13.6%，各給藥組均可減小tMCAO大鼠腦梗死范圍。同模型組相比，ICA-PEG400010mg/kg組、ICA-PEG400020mg/kg組和尼莫地平15mg/kg組具有顯著性差異。結(jié)果見表6。<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>注與模型組比較，**尸<0.01,*<0.05;與假手術(shù)組比較，▲▲<0.01.大腦中動脈是腦卒中發(fā)生的常見部位，其阻斷模型被普遍認為是局灶性腦缺血的代表性動物模型。本部分采用線栓法致大鼠暫時性大腦中動脈阻塞模型觀察ICA-PEG4000對腦缺血再灌注大鼠神經(jīng)病學(xué)評分、腦梗死范圍的影響。結(jié)果表明大鼠造模后出現(xiàn)了明顯的神經(jīng)缺損癥狀和大面積腦梗死。ICA-PEG400010mg/kg、20mg/kg可明顯改善才莫型大鼠神經(jīng)缺損癥狀，減少腦梗死范圍，顯示出一定的腦保護作用。試驗二聚乙二醇化淫羊藿苷ICA-PEG4000尾靜脈注射給藥對大鼠動靜脈旁路血栓形成的影響雄性SD大鼠隨機分為5組，即空白組、阿斯匹林40mg/kg組、ICA-PEG40005mg/kg、10mg/kg、20mg/kg組,采用尾靜脈注射途徑給藥，每日一次，連續(xù)3日。第4日手術(shù)前0.5h給藥1次，空白對照組給予等容積蒸餾水。動靜脈旁路血栓制作手術(shù)方法如下大鼠以1.0%水合氯醛溶液(0.35g/kg)麻醉，仰臥位固定，分離右側(cè)頸總動脈和左側(cè)頸外靜脈，將三段聚乙烯管相連，一端插入右頸總動脈，另一端插入左頸外靜脈，中間段長10cm，放入一根長為8cm的0號手術(shù)線(已稱重)，管內(nèi)注滿生理鹽水，建立動靜脈旁路。20rain后取下套管，取出血栓，去除多余浮血，置已稱重的硫酸紙上稱取血栓濕重。然后置于烘箱內(nèi)60。C烘烤lh至恒重，假手術(shù)模型尼莫地平ICA-PEG4000冷卻后稱量血^f全干重。結(jié)果如下ICA-PEG400010mg/kg、20mg/kg能明顯降低動靜脈旁路血栓的濕重和千重。結(jié)果見表7。表7ICA-PEG4000對大鼠動-靜脈旁路血栓形成的影響(n-12，3f±"<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>注與空白組比較，**0.01,*戶<0.05.血栓形成是缺血性腦血管病的重要病理過程之一。本實驗采用的大鼠頸總動脈-頸外靜脈血流旁路法形成的血栓結(jié)構(gòu)類似于血小板血栓。動脈血流中的血小板，接觸到絲線的粗糙面時粘附于絲線表面而形成血栓，故從血栓的重量可以測知血小板的粘附聚集功能。結(jié)果表明ICA-PEG400010mg/kg、20mg/kg均能明顯降低動靜脈旁路血栓的濕重和干重，顯示出其抗血4全形成作用。權(quán)利要求1.一種聚乙二醇化淫羊藿苷化合物，其特征在于，其化學(xué)結(jié)構(gòu)為以下通式I或II其中R＝Me或H。2.如權(quán)利要求1所述的聚乙二醇化淫羊藿苷化合物，其特征是聚乙二醇的分子量約為400-20000。3如權(quán)利要求1或2所述的聚乙二醇化淫羊藿苷化合物，其中丁二酸殘基一端與聚乙二醇相連，另一端與淫羊藿苷分子中葡萄糖或鼠李糖環(huán)上的任一羥基相連。4.如權(quán)利要求3所述的聚乙二醇化淫羊藿苷化合物，聚乙二醇與淫羊藿苷的摩爾比為1:1或1:2。5.如權(quán)利要求2所述的聚乙二醇化淫羊藿苷化合物，其特征是所述聚乙二醇為聚乙二醇750、2000、4000、5000或15000。6.—種聚乙二醇化淫羊藿苷化合物的制備方法，其特征在于首先將mPEG(聚乙二醇單甲醚)或PEG(聚乙二醇)活化，形成端基為羧基的mPEG或PEG化合物，然后在極性溶劑中使用縮合試劑將其與一個或兩個淫羊藿苷分子通過酯鍵相連接，得到聚乙二醇化的淫羊藿苷，其中，極性溶劑選自N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、二氯曱烷(DCM)或四氬呋喃(THF)，縮合試劑選自N,N，-二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)、l-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺(EDC)或2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，『，N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)。7.如權(quán)利要求6所述的制備方法，其中的極性溶劑為N,N-二甲基曱酰胺。8.如權(quán)利要求6所述的制備方法，其中的縮合試劑為N，N，-二環(huán)己基碳二亞胺。9.權(quán)利要求1所述的聚乙二醇化淫羊藿苷化合物在制備治療心腦血管疾病藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明涉及一種中草藥有效成分—淫羊藿苷的聚乙二醇化制備方法及其應(yīng)用。本發(fā)明所述的聚乙二醇化淫羊藿苷化合物，以淫羊藿苷為母體，針對其水溶性差的問題，用不同分子量的聚乙二醇進行修飾，得到了水溶性良好的聚乙二醇化淫羊藿苷化合物，解決了淫羊藿苷應(yīng)用于臨床的一些關(guān)鍵問題。本發(fā)明所述的聚乙二醇化淫羊藿苷化合物可用于制備治療心腦血管疾病的藥物。文檔編號A61K47/34GK101297974SQ20071009729公開日2008年11月5日申請日期2007年4月30日優(yōu)先權(quán)日2007年4月30日發(fā)明者周亞偉,邢國文申請人:周亞偉