專利名稱：比阿培南凍干制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體來說涉及一種注射用比阿培南凍干脂質(zhì)體制劑， 同時(shí)本發(fā)明還涉及一種比阿培南凍干脂質(zhì)體制劑的制備方法。
背景技術(shù)：
比阿培南，化學(xué)名稱為(-)6-[ [ (4R, 5S，6S) _2_羧基_6_[ (IR) 羥乙基]_4_甲 基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)[3. 2. 0]庚-2-烯-3-基]硫]-6，7-二氫-5H-吡唑[l，2_a][l， 2,4]三唑-4-鐺內(nèi)鹽。比阿培南為碳青霉稀類合成抗生素，是新型甲基碳青霉稀類 抗生素，本品是在2位硫上有雙環(huán)三唑的1 β -甲基碳青霉稀，具有廣泛的抗菌譜，對(duì)革蘭氏 陰性菌、革蘭氏陽性菌、需氧菌和厭氧菌均有良好的殺菌作用；抗革蘭氏陰性菌，特別是抗 綠膿桿菌的活性比亞胺培南強(qiáng)；對(duì)需氧性革蘭陽性菌的抗菌活性稍低于亞胺培南；抗厭氧 菌的活性與亞胺培南相同。對(duì)本品敏感的菌株有葡萄球菌屬、鏈球菌屬、肺炎球菌、腸球菌 屬(屎腸球菌除外)、莫拉氏菌屬、大腸菌、檸檬酸菌屬、克雷伯氏菌屬、腸桿菌屬、沙雷氏菌 屬、變形桿菌屬、流感嗜血桿菌、綠膿桿菌、放線菌屬、消化鏈球菌屬、擬桿菌屬、普氏菌屬、 梭形桿菌屬等。比阿培南藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)優(yōu)良，毒性低，對(duì)腎脫氫肽酶(DHP-I)和β -內(nèi)酰胺酶較 其他已上市的碳青酶烯類抗生素穩(wěn)定，無需與DHP-I抑制劑合用(eg.亞胺培南/西司他 丁)；該藥可用于治療并發(fā)性腹腔內(nèi)感染、下呼吸道感染(包括細(xì)菌性肺炎)以及并發(fā)性尿 道感染，除此之外，由于具有良好的外膜滲透性，增強(qiáng)了抗菌活性，同時(shí)對(duì)腎臟、中樞神經(jīng)系 統(tǒng)的毒性較亞胺培南輕，不誘發(fā)癲癇發(fā)作，因而還可用于細(xì)菌性腦膜炎的治療；本品抑制綠 膿桿菌和厭氧菌的活性比亞胺培南(Imipenem)強(qiáng)2 4倍，抑制耐藥綠膿桿菌活性比美羅 培南(Meropenem)強(qiáng)4 8倍，對(duì)不動(dòng)桿菌、厭氧菌等比頭孢他定有效?？梢灶A(yù)見它將成為 治療重癥感染的新的一線藥物。目前比阿培南上市銷售的劑型為無菌分裝制劑，是由無菌原料藥直接分裝獲得的 粉針劑，該劑型對(duì)原料和環(huán)境要求較高，成本較大；而比阿培南在水溶液中穩(wěn)定性又較差， 不適合做成水針制劑。中國發(fā)明專利(CN10054^95C)公開了一種氨曲南脂質(zhì)體凍干制劑，是將氨曲南 用含有抗氧劑的中性磷脂、負(fù)電荷磷脂和膽固醇形成的脂質(zhì)體包封得到的凍干制劑。這種 脂質(zhì)體凍干制劑質(zhì)量穩(wěn)定，并且由于采用脂質(zhì)體將氨曲南進(jìn)行包封，毒副作用相對(duì)減少，藥 效作用也并未降低。但采用該技術(shù)方案，其粒徑位于50-300nm間，其粒徑分布范圍大，不均 勻。

發(fā)明內(nèi)容
為解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足，本發(fā)明提供了一種粒徑分布均勻、且穩(wěn)定性較高 的比阿培南凍干脂質(zhì)體制劑。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的比阿培南凍干脂質(zhì)體制劑，以2500ml注射液計(jì)，含有如下組分比阿培南50-150份；中性磷脂 200 800份；負(fù)電荷磷脂 100 400份；膽固醇 150-650份；抗氧化劑0. 5 2份。此外，還可在上述組分基礎(chǔ)上，進(jìn)一步包括糖100 300份；緩沖劑65 155份。作為上述方式的最優(yōu)選組分比阿培南100份沖性磷脂500份；負(fù)電荷磷脂 275份；膽固醇 300份；抗氧化劑1份；糖250份；緩沖劑128份。進(jìn)一步講，上述的緩沖劑可以選自甘氨酸、精氨酸、琥珀酸、枸櫞酸鈉、谷氨酸鈉、 碳酸氫鈉、無水碳酸鈉和氫氧化鈉中的一種或幾種；所述的糖可以選自蔗糖、海藻糖、乳糖、 麥芽糖、葡萄糖和綿白糖中的一種或幾種；所述的中性磷脂可以選自蛋黃卵磷脂、氫化蛋黃 卵磷脂、雙硬脂酸卵磷脂、大豆卵磷脂、氫化大豆卵磷脂、雙軟脂酸卵磷脂和雙肉豆蔻酸卵 磷脂中的一種或幾種；負(fù)電荷磷脂可以選自雙肉豆蔻酸磷脂酰甘油、雙月桂酸磷脂酰甘油、 雙硬脂酸磷脂酰甘油、雙肉豆蔻算磷脂酸、雙硬脂酸磷脂酸、雙月桂酸磷脂酸、雙軟脂酸磷 脂酸、雙油酸磷脂酰絲氨酸或雙亞油酸磷脂酰肌醇中的一種或幾種；所述的抗氧劑優(yōu)選為 維生素E。此外，本發(fā)明同時(shí)提供了一種比阿培南脂質(zhì)體凍干制劑的制備方法，其特征在于 包括如下步驟(1)制備空白脂質(zhì)體用適量的氯仿或氯仿-甲醇混合溶劑將所述量的中性磷脂、 負(fù)電荷磷脂、膽固醇和抗氧劑溶解成溶液，減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶液中的溶劑，制成均勻干燥 的脂質(zhì)薄膜；加入0.01 0. 5mol/L有機(jī)酸溶液來水化脂質(zhì)薄膜，水化溫度在30°C 58°C 之間，得空白脂質(zhì)體懸浮液；(2)均化脂質(zhì)體用高壓均質(zhì)機(jī)制備脂質(zhì)體，將上述空白脂質(zhì)體懸浮液在115MPa 壓力下通過濾膜，均質(zhì)2次，所得脂質(zhì)體的平均粒徑為100 llOnm，粒徑分布窄，在60 230nm之間；(3)制備含比阿培南的脂質(zhì)體將比阿培南溶于注射用水中，加熱到30°C 58°C， 用0. 1 2. Omol/L堿水溶液調(diào)節(jié)空白脂質(zhì)體懸浮液至堿性，再將比阿培南溶液和堿性空白 脂質(zhì)體懸浮液混合均勻并在30°C 58°C下保溫40分鐘；(4)制備比阿培南脂質(zhì)體混懸液按重量比配制濃度為3% 10%的糖水溶液并 加入緩沖劑調(diào)節(jié)PH值至5. 5 6. 5，緩沖劑的含量為1 % 3 %，得脂質(zhì)體分散液，然后用 本分散液洗滌含比阿培南的脂質(zhì)體，利用滲析過濾法使比阿培南脂質(zhì)體溶液置換為PH值 5. 5 6. 5的脂質(zhì)體分散液，使比阿培南脂質(zhì)體分散在與人體生理環(huán)境類似的糖水溶液中， 得比阿培南脂質(zhì)體混懸液；(5)定容、除菌、分裝、凍干加注射用水定容，將比阿培南脂質(zhì)體懸浮液用微孔濾 膜過濾除菌，分裝，冷凍干燥得成品。進(jìn)一步講，上述步驟O)中脂質(zhì)體的平均粒徑控制在100 llOnm。上述的有機(jī)酸為檸檬酸、琥珀酸、枸櫞酸、乙酸、草酸、葡萄酸、乳糖酸、葡萄糖醛酸 或半乳糖醛酸中的一種或幾種；步驟(3)中所述的堿可以選自磷酸鈉、磷酸鉀、碳酸鈣、碳 酸鈉、碳酸氫鈉或氫氧化鈉中的一種或幾種。
本發(fā)明的技術(shù)方案是根據(jù)脂質(zhì)體的特性，選用一定比例的磷脂混合物制備包裹比 阿培南的空白脂質(zhì)體，加入膽固醇和抗氧劑來增加脂質(zhì)體比阿培南的穩(wěn)定性，通過凍干形 成的脂質(zhì)體凍干制劑，可以通過靜脈給藥，其有效的解決了質(zhì)量穩(wěn)定性的問題，并且由于采 用脂質(zhì)體將比阿培南進(jìn)行包封，同時(shí)毒副作用也相對(duì)減少，藥效作用也并未降低。本發(fā)明提 供的比阿培南脂質(zhì)體制劑，進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)、慢性毒性試驗(yàn)、異常毒性試驗(yàn)和熱源檢查， 均符合規(guī)定，安全性得到證明。本發(fā)明中優(yōu)選了比阿培南的重量份數(shù)為50-150份，脂質(zhì)體工業(yè)化的最大障礙是 其體內(nèi)外不穩(wěn)定性和包封率低，而脂質(zhì)體的不穩(wěn)定性又易導(dǎo)致藥物滲漏，從而導(dǎo)致藥物包 封率更低。比阿培南的含量過于大，不能完全被脂質(zhì)體包裹，包封率低，粒徑大且分布寬，會(huì) 影響藥物的靶向性及穩(wěn)定性，降低生物利用度，增加毒副作用。而載藥量的大小直接影響到 藥物的臨床應(yīng)用劑量，載藥量愈大，愈易滿足臨床需要。如果比阿培南的含量過小，不能達(dá) 到臨床所需劑量，將導(dǎo)致藥效不佳，所以最終優(yōu)選了比阿培南的重量份數(shù)為50-150份這個(gè) 范圍。本發(fā)明中加入了重量百分比為150-650份的膽固醇，目的是提高包封率和穩(wěn)定 性。因?yàn)檫m當(dāng)比例的膽固醇可以增加脂質(zhì)雙分子膜中脂質(zhì)分子排列的緊密程度，有助于減 輕加熱時(shí)脂質(zhì)分子排列的緊密程度和脂質(zhì)分子彎曲度的增加，從而起到穩(wěn)定脂膜和減少滲 漏作用。更優(yōu)選的重量百分比是300份，制備的脂質(zhì)體包封率最高，粒徑分布窄且均勻，產(chǎn) 品穩(wěn)定性好。本發(fā)明采用低溫水化，需要嚴(yán)格控制溫度在58°C以下，以防止比阿培南溶液和堿 性空白脂質(zhì)體懸浮液混合時(shí)藥物發(fā)生聚合，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。這主要是由于比阿培南雖不 易在水溶液中聚合，但受熱后會(huì)產(chǎn)生高分子聚合物，而這種雜質(zhì)正是β -內(nèi)酰胺類抗生素 發(fā)生變態(tài)反應(yīng)的根源所在，因而將水化溫度限定為30°C 58°C。本發(fā)明在高壓均質(zhì)制備脂質(zhì)體時(shí)，選擇在115Mpa壓力下均質(zhì)2次，主要由于均質(zhì) 壓力過低，粒徑不能達(dá)到要求，壓力過高，脂質(zhì)體發(fā)生聚集，均質(zhì)次數(shù)過多，會(huì)使脂質(zhì)體發(fā)生 滲漏，導(dǎo)致包封率下降。最終優(yōu)選了在115Mpa壓力下均質(zhì)2次，所得脂質(zhì)體的平均粒徑為 100 llOnm，粒徑分布窄，在60 230nm之間，包封率在90%以上。本發(fā)明中選擇最終調(diào)節(jié)比阿培南脂質(zhì)體混懸液的pH范圍為5. 5-6. 5，是由于比阿 培南的PH值為4. 5-5. 8，使藥物處于一個(gè)與自身pH值接近的環(huán)境中，更穩(wěn)定。粒徑圖顯示，脂質(zhì)體粒徑位于60 200nm之間，大部分脂質(zhì)體的粒徑聚集在 90-120nm范圍內(nèi)，平均粒徑為lOOnm，分布窄且均勻，且藥物包裹率可達(dá)90%以上，包裹率 高、成本低，適宜進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)。


下面結(jié)合附圖及具體實(shí)施方式
對(duì)本發(fā)明作更進(jìn)一步詳細(xì)說明圖1為本發(fā)明的粒徑分布圖。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1比阿培南50g
大豆卵磷脂200g
雙硬脂酸磷脂酰甘油120g
膽固醇160g
維生素E500mg
枸櫞酸鈉3. 5g
無水碳酸鈉3g
蔗糖IOOg
甘氨酸60g
注射用水2500ml
制備工藝
(1)根據(jù)配方將大豆卵磷脂、雙 更脂酸磷脂酰甘油、膽固醇和維生素E溶于氯仿中
混合均勻，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將溶液中溶劑減壓除去，形成脂質(zhì)薄膜，配制0. 5mol/L的枸櫞酸 溶液，用枸櫞酸溶液來水化脂質(zhì)薄膜，水化溫度一般在45°C 55°C之間，得空白脂質(zhì)體懸 浮液。(2)水化完全后，用高壓均粒機(jī)制備脂質(zhì)體，并在高壓下通過SO-IOOnm孔徑的濾 膜，將脂質(zhì)體的平均粒徑控制在100 llOnm，脂質(zhì)體粒徑和均勻度可用多角度納米粒子分 析器來檢測。(3)將比阿培南溶于新鮮的注射用水中，加熱到45°C 55，用lmol/L的無水碳酸 鈉水溶液調(diào)節(jié)空白脂質(zhì)體懸浮液至7. 2，將比阿培南溶液和堿性空白脂質(zhì)體懸浮液混合均 勻并在45°C 55°C下保溫40分鐘。(4)按重量比配制9%的蔗糖水溶液并加入1.0%的甘氨酸，得脂質(zhì)體分散液，然 后用本分散液洗滌含比阿培南的脂質(zhì)體，利用滲析過濾法使比阿培南脂質(zhì)體溶液置換為PH 值5. 5 6. 5的脂質(zhì)體分散液。(5)加注射用水定容，將比阿培南脂質(zhì)體懸浮液用微孔濾膜過濾除菌，分裝，冷凍 干燥得成品。實(shí)施例2比阿培南蛋黃卵磷脂雙肉豆蔻酸磷脂酰甘油膽固醇維生素E琥珀酸碳酸氫鈉蔗糖精氨酸2200g注射用水50000ml制備工藝參照實(shí)施例1各步驟進(jìn)行操作，(1)中用0. 25mol/L的琥珀酸溶液來水 化脂質(zhì)薄膜；( 水化完全后用高壓均粒機(jī)制備脂質(zhì)體，并在高壓下通過SO-IOOnm孔徑的 濾膜，將脂質(zhì)體的平均粒徑控制在100 IlOnm ； (3)中用0. 25mol/L的碳酸氫鈉水溶液調(diào)
2000g IOOOOg 5500g 6000g 20g 200g 160g 5000g節(jié)空白脂質(zhì)體懸浮液至PH值為7.6 ;(4)中配制5%的蔗糖水溶液并加入1.0%的精氨酸， 作為脂質(zhì)體分散液。實(shí)施例3
比阿培南250g
氫化大豆卵磷脂1200g
雙硬脂酸磷脂酰甘油630g
膽固醇900g
維生素E4g
枸櫞酸28g
無水碳酸鈉25g
葡萄糖600g
甘氨酸250g
注射用水5000ml
制備工藝參照實(shí)施例1各步驟進(jìn)行操作，(1)中用0. 3mol/L的枸櫞酸來水化脂質(zhì)薄膜；(2)水化完全后用高壓均粒機(jī)制備脂質(zhì)體，并在高壓下通過SO-IOOnm孔徑的濾膜，
將脂質(zhì)體的平均粒徑控制在100 IlOnm ； (3)中用0. 5mol/L的無水碳酸鈉水溶液調(diào)節(jié)空 白脂質(zhì)體懸浮液至7. 4 ； (4)中配制5%的葡萄糖水溶液并加入2. 0%的甘氨酸，作為脂質(zhì)體
分散液。實(shí)施例4比阿培南IOOOg雙硬脂酸卵磷脂6000g雙硬脂酸磷脂酰甘油3200g膽固醇5000g維生素EIOg枸櫞酸IOOg氫氧化鈉80g乳糖2000g甘氨酸800g注射用水20000ml制備工藝參照實(shí)施例1各步驟進(jìn)行操作，(1)中用0. 5mol/L的枸櫞酸溶液來水 化脂質(zhì)薄膜；( 水化完全后用高壓均粒機(jī)制備脂質(zhì)體，并在高壓下通過SO-IOOnm孔徑的 濾膜，將脂質(zhì)體的平均粒徑控制在100 IlOnm ； (3)中0. 25mol/L的氫氧化鈉水溶液調(diào)節(jié) 空白脂質(zhì)體懸浮液至7. 5 ； (4)中配制10%的乳糖水溶液并加入的甘氨酸，作為脂質(zhì)體 分散液。實(shí)施例5質(zhì)量研究考察對(duì)以上四個(gè)實(shí)施例中制得的樣品進(jìn)行質(zhì)量檢測，并同時(shí)進(jìn)行高溫40°C、相對(duì)濕度 75% 士5%條件下加速試驗(yàn)6個(gè)月和溫度25°C、相對(duì)濕度60% 士 10%條件下長期試驗(yàn)18 個(gè)月，得到數(shù)據(jù)結(jié)果如下加速質(zhì)量檢測結(jié)果如下表所示
權(quán)利要求
1.一種比阿培南凍干制劑，其特征在于以2500ml注射液計(jì)，含有如下組分比阿培南50-150份；中性磷脂 200 800份；負(fù)電荷磷脂 100 400份；膽固醇 150-650份；抗氧化劑0.5 2份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的比阿培南凍干制劑，其特征在于包括以下組分糖100 300份；緩沖劑65 155份。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的比阿培南凍干制劑，其特征在于包括以下組分比阿培南100份沖性磷脂500份；負(fù)電荷磷脂 275份；膽固醇 300份；抗氧化劑1份；糖250份；緩沖劑1 份。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的比阿培南凍干制劑，其特征在于所述的緩沖劑可以選自甘 氨酸、精氨酸、琥珀酸、枸櫞酸鈉、谷氨酸鈉、碳酸氫鈉、無水碳酸鈉和氫氧化鈉中的一種或 幾種；所述的糖可以選自蔗糖、海藻糖、乳糖、麥芽糖、葡萄糖和綿白糖中的一種或幾種；所 述的中性磷脂可以選自蛋黃卵磷脂、氫化蛋黃卵磷脂、雙硬脂酸卵磷脂、大豆卵磷脂、氫化 大豆卵磷脂、雙軟脂酸卵磷脂和雙肉豆蔻酸卵磷脂中的一種或幾種；負(fù)電荷磷脂可以選自 雙肉豆蔻酸磷脂酰甘油、雙月桂酸磷脂酰甘油、雙硬脂酸磷脂酰甘油、雙肉豆蔻算磷脂酸、 雙硬脂酸磷脂酸、雙月桂酸磷脂酸、雙軟脂酸磷脂酸、雙油酸磷脂酰絲氨酸或雙亞油酸磷脂 酰肌醇中的一種或幾種；所述的抗氧劑優(yōu)選為維生素E。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的比阿培南凍干制劑的制備方法，其特征在于包括如 下步驟(1)制備空白脂質(zhì)體用適量的氯仿或氯仿-甲醇混合溶劑將所述量的中性磷脂、負(fù)電 荷磷脂、膽固醇和抗氧劑溶解成溶液，減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶液中的溶劑，制成均勻干燥的脂 質(zhì)薄膜；加入0. 01 0. 5mol/L有機(jī)酸溶液來水化脂質(zhì)薄膜，水化溫度在30°C 58°C之間， 得空白脂質(zhì)體懸浮液；(2)均化脂質(zhì)體用高壓均質(zhì)機(jī)制備脂質(zhì)體，將上述空白脂質(zhì)體懸浮液在115MI^壓力 下通過濾膜，均質(zhì)2次，所得脂質(zhì)體的平均粒徑為100 llOnm，粒徑分布窄，在60 230nm 之間；(3)制備含比阿培南的脂質(zhì)體將比阿培南溶于注射用水中，加熱到30°C 58°C，用 0. 1 2. Omol/L堿水溶液調(diào)節(jié)空白脂質(zhì)體懸浮液至堿性，再將比阿培南溶液和堿性空白脂 質(zhì)體懸浮液混合均勻并在30°C 58°C下保溫40分鐘；(4)制備比阿培南脂質(zhì)體混懸液按重量比配制濃度為3% 10%的糖水溶液并加入 緩沖劑調(diào)節(jié)PH值至5. 5 6. 5，緩沖劑的含量為 3 %，得脂質(zhì)體分散液，然后用本分 散液洗滌含比阿培南的脂質(zhì)體，利用滲析過濾法使比阿培南脂質(zhì)體溶液置換為PH值5. 5 6. 5的脂質(zhì)體分散液，使比阿培南脂質(zhì)體分散在與人體生理環(huán)境類似的糖水溶液中，得比阿 培南脂質(zhì)體混懸液；(5)定容、除菌、分裝、凍干加注射用水定容，將比阿培南脂質(zhì)體懸浮液用微孔濾膜過 濾除菌，分裝，冷凍干燥得成品。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的比阿培南凍干制劑的制備方法，其特征在于步驟O)中脂 質(zhì)體的平均粒徑控制在100 llOnm。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的比阿培南凍干制劑的制備方法，其特征在于所述的有機(jī)酸 為檸檬酸、琥珀酸、枸櫞酸、乙酸、草酸、葡萄酸、乳糖酸、葡萄糖醛酸或半乳糖醛酸中的一種或幾種；步驟(3)中所述的堿可以選自磷酸鈉、磷酸鉀、碳酸鈣、碳酸鈉、碳酸氫鈉或氫氧化 鈉中的一種或幾種。
全文摘要
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體來說涉及一種注射用比阿培南凍干脂質(zhì)體制劑及其制備方法。該制劑包括比阿培南、中性磷脂、負(fù)電荷磷脂、膽固醇、抗氧化劑，使其平均粒徑為100nm，分布窄且均勻，且藥物包裹率可達(dá)90％以上，包裹率高、成本低，適宜進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)A61K9/19GK102068413SQ20101062131
公開日2011年5月25日 申請(qǐng)日期2010年12月31日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月31日
發(fā)明者姚榮章, 杜鵑, 王燕燕, 董朝蓬, 郭慧娟, 馬慧麗 申請(qǐng)人:石藥集團(tuán)中諾藥業(yè)(石家莊)有限公司