專(zhuān)利名稱(chēng)：：含多西他賽和降解抑制劑的藥物組合物及其制備方法含多西他賽和降解抑制劑的藥物組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明的范圍本發(fā)明涉及藥物組合物及其制備方法，該方法特征為釆用降解抑制劑與賦形劑結(jié)合，制備含有無(wú)水4-乙酰氧基-2-a-苯甲酰氧基-5p-20-環(huán)氧-1,7-|5畫(huà)10-|5畫(huà)三羥基-9國(guó)氧代-紫杉(tax)-ll-烯-13a-基(2R，3S)3畫(huà)叔-丁氧羰基氨基-2-羥基-3-苯基丙酸酯，無(wú)水多西他賽(I)或其三水合物的無(wú)菌和穩(wěn)定的溶液。由此制備的溶液穩(wěn)定性得到改善，且降低了主要降解產(chǎn)物即4-乙酰氧基-2-a-苯甲酰氧基-5P-20-環(huán)氧-1,7-01-10^-三羥基-9-氧代-紫杉-11-烯-1301-基(2R，3S)3-叔-丁氧羰基氨基-2-羥基-3-苯基丙酸酯，7-表-多西他賽(II)的水平。III本發(fā)明的第一個(gè)實(shí)施方案涉及制備在15-30'C,士rc保存時(shí)至少30個(gè)月保持穩(wěn)定的高穩(wěn)定藥物組合物。本發(fā)明的第二個(gè)實(shí)施方案涉及顯著減少在含多西他賽(I)或其三水合物的最終劑型中存在的主要降解產(chǎn)物7-表-多西他賽(II)。顯著降低了7-表-多西他賽(II)的形成。與現(xiàn)有技術(shù)中描述的制備相比，采用本發(fā)明方法制備的制劑中7-表-多西他賽(II)的含量降低至1-5%。這通過(guò)加入降解抑制劑，理想的是pKa為2.5-4.5的有機(jī)酸和/或抗氧化劑而得以實(shí)現(xiàn)。通過(guò)下列步驟制備本發(fā)明描述的溶液將活性成分(I)或其三水合物溶于生物兼容的賦形劑，優(yōu)選經(jīng)降解抑制劑處理過(guò)的聚山梨酯80，然后經(jīng)孔隙小于或等于0.22nm的膜過(guò)濾，然后裝入適當(dāng)?shù)娜萜?。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，無(wú)菌溶液在室溫(本文將其定義為i5-3o°c，士rc的范圍)高度穩(wěn)定，因?yàn)槠渲屑尤肓酥辽僖环N抑制活性成分的降解及7-表-多西他賽(II)的形成的化學(xué)物質(zhì)。現(xiàn)有技術(shù)活性化合物4-乙酰氧基-2-a-苯甲酰氧基-5p-20-環(huán)氧-l,7-p-10-P-三羥基-9-氧代-紫杉-ll-烯-13a-基(2R，3S)3-叔-丁氧羰基氨基-2-羥基-3-苯基丙酸酯，無(wú)水多西他賽，(I)和其三水合物是經(jīng)化學(xué)半合成獲得并呈現(xiàn)出抗癌和抗白血病性質(zhì)的紫杉烷衍生物。上述化合物對(duì)多種腫瘤和贅生物具有藥理活性。美國(guó)專(zhuān)利第5,504,102號(hào)(Bristol-MyersSquibb02/04/1996)描述了制備低堿度的聚氧乙烯蓖麻油(CremophorELBASF)的方法，改方法將Crem叩horEL與氧化鋁床接觸…或加入酸，特別是，諸如HC1或HN03的無(wú)機(jī)酸，以及在該溶媒中制備抗腫瘤劑的溶液的方法。在本發(fā)明的上下文中，特別地，當(dāng)意指多西他賽(I)或其三水合物時(shí)，采用無(wú)機(jī)酸是無(wú)效的甚至是不利的，無(wú)機(jī)酸可引起其他不利的降解產(chǎn)物生成。美國(guó)專(zhuān)利第5,698,582號(hào)(Rhone-Poulenc-Rorer，16/12/1997)描方法制備灌注劑。該專(zhuān)利未考慮使用任何酸。在制備灌注劑前得到的溶液在室溫下在本發(fā)明范圍內(nèi)要求要求保護(hù)的存放期內(nèi)是不穩(wěn)定的。法國(guó)專(zhuān)利第FR9408479號(hào)(Rhone-PoulencRorerS.A.)描述了4-乙酰氧基-2-a-苯甲酰氧基-5p-20-環(huán)氧-l，7-P-10-p-三羥基-9-氧代-紫杉-11-烯-1301-基(2R，3S)3-叔-丁氧羰基氨基-2-羥基-3-苯基丙酸酯的三水合物的制備方法，其利用"在水和含1-3個(gè)碳原子的脂肪醇的混合物中重結(jié)晶，然后在確定溫度、壓力和濕度條件下干燥所得產(chǎn)物"。該專(zhuān)利要求保護(hù)在結(jié)晶多西他賽三水合物步驟過(guò)程中加入抗壞血酸。但該參考文獻(xiàn)沒(méi)有預(yù)見(jiàn)或建議通過(guò)加入有機(jī)酸使包含無(wú)水多西他賽(I)或其三水合物的藥物制劑具有附加的穩(wěn)定性。未決專(zhuān)利PCT/BR/2004/000242(QuiralQuimicadoBrasil)要求保護(hù)使用存在于酸化的聚山梨酯80中的活性成分(I)的方法、產(chǎn)物及該產(chǎn)物在治療虛弱病癥中的用途。盡管上述文獻(xiàn)提及制備生成熱不穩(wěn)定水合物的化合物，該水合物僅在冷藏情況下穩(wěn)定，但在現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)中沒(méi)有預(yù)見(jiàn)與保存溫度和時(shí)間相關(guān)的提高的穩(wěn)定性，特別是在室溫觀察到的提高的穩(wěn)定性。另夕卜，在本領(lǐng)域中已經(jīng)描述的藥物制劑中沒(méi)有提及顯著降低主要降解產(chǎn)物7-表-多西他賽(II)的形成。發(fā)明詳述本發(fā)明的方法及通過(guò)該方法所得產(chǎn)物與現(xiàn)有技術(shù)中所述的方法及產(chǎn)物相比具有優(yōu)勢(shì)，因?yàn)樗鼈冏C實(shí)在室溫具有優(yōu)異的穩(wěn)定性，并且顯著減少活性成分無(wú)水4-乙酰氧基-2-<x-苯甲酰氧基-5(3-20-環(huán)氧-1，7-0-10-|5-三羥基-9-氧代-紫杉-11-烯-1301-基(2R，3S)3-叔-丁氧羰基氨基-2-羥基-3-苯基丙酸酯，(I)或其三水合物降解生成其差向異構(gòu)體(II)。優(yōu)于類(lèi)似制劑，所得藥物組合物具有高純度。在過(guò)去的25年中，紫杉烷的化學(xué)活性和構(gòu)效關(guān)系得到充分研究。綜合性綜述參見(jiàn)Kingston,D.G.I.7>eA5zW"/mo/.1994,"，222.;Kingston,D.G.I.RecentAdvancesintheChemistryandStructure-ActivityRelationshipsofPaclitaxel。Inrfljcur/ie必as/ciSc/e"ce(7w/7WiZ5"似,ws，Goerg,G.I.;Chen,T.T.;Ojima，I.;Vyas，D.M.，Eds.;ACSSymposiumSeries583，AmericanChemicalSociety:Washington,DC，1995，pp.203.andGueritte-Vogelin，F(xiàn).;Guenard，D;Dubois,J.;Marder，R.;Thoret，S.;andPotier,P.CAe附/s,/jflwdj"/v%rawV/s,AdvancesinNaturalSciences,Vol.2，No.2,2001，pp.81-85。在此通過(guò)引用將這些出版物并入本文，因?yàn)槠浒仙纪榈幕瘜W(xué)轉(zhuǎn)化及其構(gòu)效關(guān)系的相關(guān)信息。應(yīng)當(dāng)著重指出的是多西他賽(I)和其三水合物，以及其他紫杉烷，在不同情況下可經(jīng)歷降解，其活性和/或毒性有相應(yīng)的變化，有時(shí)是巨大的變化，例如，溫度、酸性和堿性溶媒、氧化劑和還原劑、光等。現(xiàn)有技術(shù)涉及的主要已知途徑如圖1所示。圖1:多西他賽骨架中發(fā)生主要化學(xué)轉(zhuǎn)化的位置的編號(hào)多西他賽的降解一取決于所使用的條件，在酸性媒質(zhì)中或在親電試劑存在下，可觀察到D環(huán)和B環(huán)的開(kāi)環(huán)和/或重排?！趬A性媒質(zhì)中，可觀察到2，4和/或13位的酯基的裂解。一在堿性，中性或強(qiáng)酸性媒質(zhì)中觀察到的主要降解途徑之一是7位羥基的差向異構(gòu)化，其通過(guò)逆醛醇反應(yīng)生成7-表-多西他賽(II)。多西他賽的降解導(dǎo)致產(chǎn)物活性降低或完全沒(méi)有活性。其還表現(xiàn)出與活性成分完全不同的藥理和毒理性質(zhì)?？紤]到所述藥物制劑預(yù)定用于人類(lèi)受試者時(shí)，上述復(fù)雜轉(zhuǎn)化的重要性有嚴(yán)重的后果。作為實(shí)例，引用Bornique和Lemari6的文獻(xiàn)，Dr"gMe似6oZ/s/w"m/2)^7os/"Vm,Vol.30,No.11，pp.1149-1152，2002。該研究中，考察了多西他賽(I)和其差向異構(gòu)體7-表-多西他賽(II)與重組人細(xì)胞色素P4501B1(hCYPlBl)的相互作用。多種人腫瘤含這種細(xì)胞色素，推測(cè)其負(fù)責(zé)產(chǎn)生腫瘤細(xì)胞對(duì)化學(xué)治療劑包括多西他賽(I)的耐藥性。通過(guò)使用7-乙氧(9-羥基-3-異吩噁唑酮)O-脫乙基酶(EROD活性)作為量度，作者觀察到在體外，多西他賽沒(méi)有被hCYPlBl代謝。但是，濃度為10pM的7-表-多西他賽(II)使hCYPlBl的活性增加了7倍多，這證實(shí)了(II)是這種酶的有力誘導(dǎo)物?；谏鲜鲇^察結(jié)果，本發(fā)明的作者鑒定藥物制劑或由該制劑制成的制備物中出現(xiàn)的7-表-多西他賽(II)是產(chǎn)生腫瘤細(xì)胞對(duì)活性成分，多西他賽(I)和/或其三水合物的耐藥性的主要因素，因此，減小或消除含有多西他賽(I)和/或其三水合物的藥物制劑中7-表-多西他賽(II)的存在是理想的。通過(guò)本發(fā)明，實(shí)現(xiàn)這一目的。盡管現(xiàn)有技術(shù)提及在活性成分多西他賽三水合物的重結(jié)晶過(guò)程中加入抗壞血酸，但本發(fā)明的特別創(chuàng)新方面在于在無(wú)水多西他賽(I)或其三水合物的藥物溶液的制備中加入至少一種弱有機(jī)酸和/或抗氧化劑是有優(yōu)勢(shì)的。該添加抑制差向異構(gòu)生成具有前文所述不利作用的7-表-多西他賽(II)。通過(guò)實(shí)時(shí)穩(wěn)定性檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，加入降解抑制劑能夠增加制成的劑型在室溫(15-30°C)貯存時(shí)的存放期，同時(shí)抑制(I)和/或其三水合物通過(guò)差向異構(gòu)化生成7-表-多西他賽(II)。上述檢測(cè)結(jié)果的優(yōu)點(diǎn)是明顯的除避免了不利的降解產(chǎn)物生成以外，還增加了藥物制劑的保存期并因此增加了其穩(wěn)定性。研究結(jié)果如表1和2所示。采用的降解抑制劑包括但不限于檸檬酸、酒石酸和抗壞血酸或其他pKa為2.5-4.5的有機(jī)酸。<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>注釋1:DCTX-無(wú)水多西他賽；DCTX-3H20=;西他賽三水合物；7-表=7-表-多西他賽注釋2:采用事先用對(duì)應(yīng)的酸將聚山梨酯80的pH調(diào)為3.5-4.5制備所有的溶液。然后溶解無(wú)水多西他賽(I)或其三水合物，使最終濃度為以無(wú)水物為基礎(chǔ)的40mg/mL。注釋3:在3o土ix:將樣品保存在干凈的n型硼硅玻璃管中。注釋4:在下列分析條件下采用HPLC測(cè)定(I)和(II)的含量柱SpherisorbRP184.6x250mm，粒徑5jim;流動(dòng)相，釆用溶液A-乙腈H20(2:3v/v)，溶液B乙腈，100%進(jìn)行梯度洗脫。在70分鐘內(nèi)梯度開(kāi)始采用100。/o溶液A，直到10。/。溶液A和90。/o溶液B。流速1.5mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)227nm;環(huán)20^1，；用未校正的面積％表示數(shù)據(jù)。注釋5:用于定義藥物組合物穩(wěn)定性的可接受極限是"含有至少90%標(biāo)簽所示量(40mg/mL)"。根據(jù)表1和2的數(shù)據(jù)明顯看出加入至少一種具有本發(fā)明提出的特征的降解抑制劑諸如某些有機(jī)酸對(duì)所述組合物的穩(wěn)定性有顯著效果并且抑制7-表-多西他賽(II)的生成。釆用酒石酸、檸檬酸和抗壞血酸得到最好效果，其允許在30士rC的溫度下貯存至少30個(gè)月，并且使7-表-多西他賽(II)的水平顯著低于不添加任何降解抑制劑的組合物。采用維他命E的試驗(yàn)表明，只添加抗氧化劑作為降解抑制劑是不足以得到預(yù)期效果的。該事實(shí)結(jié)合上述觀察結(jié)果即不是所有被測(cè)試的酸都足以得到比現(xiàn)有技術(shù)中所描述的穩(wěn)定性更好的穩(wěn)定性，表明為了得到附加穩(wěn)定性，必需加入具有獨(dú)特特征的一種或幾種酸。這是組合物中各成分的復(fù)雜相互作用的結(jié)果，涉及若干因素，諸如pKa，氧化還原電勢(shì)，立體位阻，親核性，溶解性和反應(yīng)性。實(shí)施例1:制備加有作為降解抑制劑的酒石酸的含有在聚山梨酯80中的無(wú)水多西他賽的藥物組合物在氮?dú)獗Ｗo(hù)下向配有螺旋氣動(dòng)攪拌的燒杯中加入100mL的聚山梨酯80，然后用酒石酸酸化，將pH調(diào)為3.9。緩慢加入4.00g無(wú)水4畫(huà)乙酰氧基-2畫(huà)a畫(huà)苯甲酰氧基畫(huà)5卩-20畫(huà)環(huán)氧-l，7-卩-10-P-三羥基-9-氧代畫(huà)紫杉-ll-烯-13a-基(2R，3S)3-叔-丁氧羰基氨基-2-羥基-3-苯基丙酸酯，維持?jǐn)嚢柚钡酵耆芙狻⑺萌芤阂迫爰訅喝萜?，采?.22jun的滅菌膜在無(wú)菌環(huán)境下減壓過(guò)濾，接著使用常用方法將濾液裝入小瓶。如表1所示，在15-30。C，士1。C保存時(shí)在30個(gè)月期間，由此所制備的溶液是穩(wěn)定的。實(shí)施例2:制備加有作為降解抑制劑的檸檬酸的含有在聚山梨酯80中的無(wú)水多西他賽的藥物組合物通過(guò)與實(shí)施例l相似的方法，用檸檬酸調(diào)節(jié)pH至4.1。如表l所示，在15-30。C,士1。C保存時(shí)在30個(gè)月期間，由此所制備的溶液是穩(wěn)定的。實(shí)施例3:制備加有作為降解抑制劑的抗壞血酸的含有在聚山梨酯80中的無(wú)水多西他賽的藥物組合物通過(guò)與實(shí)施例1相似的方法，用抗壞血酸調(diào)節(jié)pH至3.8。如表l所示，在15-30。C，士rc保存時(shí)在3o個(gè)月期間，由此所制備的溶液是穩(wěn)定的。實(shí)施例4:制備加有作為降解抑制劑的酒石酸的含有在聚山梨酯80中的多西他賽三水合物的藥物組合物在氮?dú)獗Ｗo(hù)下向配有螺旋氣動(dòng)攪拌的燒杯中加入100mL的聚山梨酯80,然后用酒石酸酸化，將pH調(diào)為3.9。緩慢加入4.27g4-乙酰氧基-2-01-苯甲酰氧基-5卩-20-環(huán)氧-1，7^-10^-三羥基-9-氧代-紫杉-11-烯-13a-基(2R，3S)3-叔-丁氧羰基氨基-2-羥基-3-苯基丙酸酯三水合物，維持?jǐn)嚢柚钡酵耆芙狻⑺萌芤阂迫爰訅喝萜?，采?.22jun的滅菌膜在無(wú)菌環(huán)境下減壓過(guò)濾，接著使用常用方法將濾液裝入小瓶。如表2所示，在15-30。C，士rC保存時(shí)在30個(gè)月期間，由此所制備的溶液是穩(wěn)定的。實(shí)施例5:制備加有作為降解抑制劑的檸檬酸的含有在聚山梨酯80中的多西他賽三水合物的藥物組合物通過(guò)與實(shí)施例4相似的方法，用檸檬酸調(diào)節(jié)pH至4.1。如表2所示，在15-30'C，士1'C保存時(shí)在30個(gè)月期間，由此所制備的溶液是穩(wěn)定的。實(shí)施例6:制備加有作為降解抑制劑的抗壞血酸的含有在聚山梨酯80中的多西他賽三水合物的藥物組合物通過(guò)與實(shí)施例4相似的方法，用抗壞血酸調(diào)節(jié)pH至3.8。如表2所示，在15-30'C，士rc保存時(shí)在3o個(gè)月期間，由此所制備的溶液是穩(wěn)定的。所引用的實(shí)施例是為了說(shuō)明，但不用于限制本發(fā)明的范圍。權(quán)利要求1.藥物組合物，它含有無(wú)水多西他賽(I)或其三水合物、聚山梨酯80和至少一種降解抑制劑，該組合物在15℃和30℃，±1℃之間的溫度下貯存時(shí)至少30個(gè)月是無(wú)菌的和穩(wěn)定的。2.根據(jù)權(quán)利要求1的藥物組合物，其中所述的降解抑制劑選自pKa為2.5至4.5的有才幾酸。3.根據(jù)權(quán)利要求1的藥物組合物，其中所述的降解抑制劑選自酒石酸、檸檬酸和抗壞血酸-或它們的混合物-或也可以是這些酸與其它pKa為2.5至4.5的酸的混合物。4.根據(jù)權(quán)利要求3的藥物組合物，其中所述混合物的最終pH為3.5至.4.5。5.制備根據(jù)權(quán)利要求1的藥物組合物的方法，該藥物組合物含有多西他賽(I)或其三水合物、聚山梨酯80和至少一種降解抑制劑，該方法的特征為如下步驟(a)向聚山梨酯80中加入足以將聚山梨酯80的pH調(diào)至3.5至4.5范圍內(nèi)的量的降解抑制劑；(b)加入多西他賽(I)或其三水合物，以達(dá)到10至100mg/mL聚山梨酯80(以無(wú)水物為基礎(chǔ)計(jì)算)的最終濃度；(c)攪拌所得混合物直到多西他賽(I)(或其三水合物)和降解抑制劑完全溶解；(d)通過(guò)滅菌膜過(guò)濾所得溶液；(e)將所述溶液灌裝到無(wú)菌容器中。6.根據(jù)權(quán)利要求5的方法，其中所述的降解抑制劑選自酒石酸、檸檬酸或抗壞血酸，并且以無(wú)水物為基礎(chǔ)多西他賽(I)的濃度是40mg/mL。全文摘要含聚山梨酯80，無(wú)水多西他賽(I)或其三水合物和pKa為2.5-4.5作為降解抑制劑的有機(jī)酸的藥物組合物。由此獲得的組合物在室溫(對(duì)應(yīng)于15-30℃，±1℃)保存時(shí)直到30個(gè)月是無(wú)菌和穩(wěn)定的，并且含有低水平的7-表-多西他賽(II)。文檔編號(hào)A61K31/337GK101415416SQ200680054069公開(kāi)日2009年4月22日申請(qǐng)日期2006年2月9日優(yōu)先權(quán)日2006年1月30日發(fā)明者A·瑪蘭杜巴,A·瑪查多,E·古爾瑪勒斯,L·瑪查多,M·圣地亞哥朱尼奧,M·賽爾瓦申請(qǐng)人:基拉爾化學(xué)巴西私人控股公司;生物有機(jī)有限公司