專利名稱：一種活性皂苷的制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物活性皂苷的合成和應(yīng)用領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
天然寡糖皂苷作為糖輟合物在生理學和藥理學具有很好的生物活性(Hostettmann，K.；Marston，A.Saponins；Cambridge University Press，1995)。例如，Dioscin，Polyphyllin D，Balanitin 7等皂苷就具有抗癌、殺菌的活性((a)Nakano，K.；Murakami，K.；Takaishi，Y.；Tomimatsu，T.；Nohara，T.Chem.Pharm.Bull.1989，37，116；(b)Hufford，C.D.；Liu，S.；Clark，A.M.J.Nat.Prod.1988，51，94-98；(c)Liu，C.；Chen，Y.Acta Pharm.Sinica 1984，19，799；(d)Namba，T.；Huang，X.；Shu，Y.；Huang，S.；Hattoti，M.；Kakiuchi，N.；Wang，Q.；Xu，G.Plant Medica 1989，55，501-506；(e)Zhou，J.PureAppl.Chem.1989，61，457-460)；從蔥科植物(Allium nutans)的根莖分離提取出的皂苷具有抗腫瘤和降低血清中膽固醇的作用(Akhov，L.S.；Musienko，M.M.；Piacente，S.；Pizza，C.；Oleszek，W.J.Agric.Food Chem.1999，47，3193-3196)；從茄科植物(Solanumindicum)分離提取的皂苷具有抗菌消炎的作用(Yahara，S.；Nakamura，T.；Somera，Y.；Matsumoto，T.；Yamashita，T.；Nohara，T.Phytochemistry，1996，43，1319-1323)；研究表明Solamargine結(jié)構(gòu)中的鼠李糖基結(jié)構(gòu)在引發(fā)細胞死亡過程中起著至關(guān)重要的作用(Chang，L.-C.；Tsai，T-R.；Wang，J.-J.；Lin，C.-N.；Kuo，K.-W.Biochem.Biophys.Res.Commun.1998，242，21-25)。上述的這些具有生物活性的皂苷以及一些N-連接的寡糖和植物多糖的部分片段都含有2-；2，3-或2，4-支化的寡糖結(jié)構(gòu)部分。
圍繞如何簡便高效地合成寡糖和糖輟合物已開展了大量的工作，而且也發(fā)展了許多新穎的、有效的糖基化反應(yīng)和合成策略((a)Toshima，K.；Tasuta，K.Chem.Rev.1993，93，1503-1531；(b)Schmidt，R.R.；Kinzy，W.Adv.Carbohydr Chem.Biochem.1994，50，21；(c)Garegg，P.J.Adv.Carbohydr.Chem.Biochem.1997，52，179)。對含有糖基結(jié)構(gòu)的天然皂苷來說，傳統(tǒng)合成方法有三種。其一，先將還原端糖基接在皂苷元上，然后對糖基部分進行保護-去保護修飾，再進行不同位置的糖基化反應(yīng)，得到2-，2，3-或2，4-支化的天然皂苷。其二，先對還原端糖基進行適當修飾，用具有鄰基參與的酰基保護基修飾糖基C-2位的羥基以保證接皂苷元時β-糖苷鍵的形成。然而，實驗中也發(fā)現(xiàn)脫除C-2位的酰基很困難(Deng，S.；Yu，B.；Hui，Y.；Yu，B.；Han，X.Carbohydr.Res.1999，317，53-62)。而上述兩種方法的缺點是路線冗長而且合成效率低。其三，先合成糖基部分，再與相應(yīng)的皂苷元進行糖苷化反應(yīng)，此方法由于還原端的糖基部分的C-2位上沒有鄰基參與效應(yīng)而容易得到α、β混合物，給分離提純帶來了困難(Ikeda，T.；Miyashita，H.；Kajimoto，T.；Nohara，T.Tetrahedron Lett.2001，42，2353-2356)。考慮到上述方法的缺陷，我們發(fā)明了以下合成皂苷的簡易方法，其核心是用部分保護的硫代糖苷做供體來簡便合成上述含有2-；2，3-或2，4-支化的天然皂苷。
本發(fā)明通過制備相關(guān)寡糖皂苷，有助于開發(fā)抗腫瘤或抗炎癥的藥物，也可用于開發(fā)具有調(diào)節(jié)免疫和防癌功能的食品添加劑。
實施實例一般方法旋光度在25℃時用Perkin-Elmer 241 MC自動旋光儀側(cè)得。1H NMR由Bruker ARX 400在CDCl3中測得，以四甲基硅為內(nèi)標。質(zhì)譜用VG PLATFORM質(zhì)譜儀，用ESI技術(shù)進樣。薄層色譜(TLC)由HF254硅膠板上用30％(v/v)的硫酸甲醇溶液或紫外(UV)檢測器檢測。柱色譜采用100-200目的硅膠，用乙酸乙酯-石油醚(60-90℃)作為淋洗液，溶液在小于60℃時減壓蒸餾，以下未特別說明的化合物都是可商購或可參照文獻制備的物質(zhì)。
一、薯蕷苷元β-D-木吡喃糖基-(1→3)-[α-L-鼠李吡喃糖基-(1→2)]-β-D-半乳吡喃糖的制備10流程1是天然皂苷10的合成路線圖。部分保護的半乳吡喃糖異丙硫苷3是從半乳吡喃糖異丙硫苷1經(jīng)4，6位的選擇性芐叉基保護(→2)及2，3位的選擇性9-芴甲氧基羰基(Fmoc)保護得到。在-42℃，硫代糖苷3和薯蕷皂苷元用氮-碘代琥珀酰亞胺(NIS)和三甲基硅基三氟甲磺酸酯(TMSOTf)催化進行縮合反應(yīng)得約75％的4。在0℃，等當量的化合物4和5用TMSOTf催化反應(yīng)得到二糖皂苷6。不分離往反應(yīng)體系加入20當量三乙胺可脫除C-3位的9-芴甲氧基羰基保護基，一釜反應(yīng)得到二糖皂苷受體7，兩步產(chǎn)率85％。用苯甲?；具拎珌啺孵?做糖基化供體和受體7進行偶聯(lián)得到77％的三糖皂苷9，其木吡喃糖的構(gòu)象發(fā)生翻轉(zhuǎn)(4C1→4C1)。1H NMR譜圖上H-1的化學位移出峰在5.24ppm(J1，21.1Hz)處，H-3的化學位移出峰在5.64ppm(J2，3＝J3，4＝3.2Hz)處；13C NMR譜圖上C-1的化學位移出峰在100.03ppm處，說明木糖與半乳糖間為β(1→3)連接，但木糖的構(gòu)象為4C1而非4C1。在70℃下，化合物9用80％的醋酸水溶液脫除4，6位的芐叉基；然后在無水甲醇中，用1N的氫氧化鈉水溶液(調(diào)pH約9-10)脫除糖基上的?；Ｗo基，得到天然皂苷10。其木吡喃糖環(huán)的構(gòu)象由4C1變?yōu)?C1，可從其1H NMR譜圖上化學位移5.05ppm處的H-1雙峰間的偶合常數(shù)(J1，27.5Hz)看出。從起始原料出發(fā)，天然皂苷10合成流程僅僅需要六步，總產(chǎn)率為34％。

流程1薯蕷苷元β-D-木吡喃糖基-(1→3)-[α-L-鼠李吡喃糖基-(1→2)]-β-D-半乳吡喃糖的制備(1)異丙硫基4，6-二-氧-芐叉基-β-D-半乳吡喃糖苷2的制備將β-D-半乳吡喃異丙硫苷(2.38克，10毫摩爾)溶在10毫升DMF中，加入PhCH(OMe)2(1.82克，12毫摩爾)和催化量的對甲苯磺酸(100毫克)。在65-75℃下，減壓攪拌1.5-2小時，反應(yīng)完畢。用飽和碳酸氫鈉水溶液中和至中性，乙酸乙酯(2×50毫升)萃取，將有機相收集，用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，剩余物用硅膠柱色譜分離純化，以乙酸乙酯淋洗，得白色固體2(2.67克，82％)旋光值[α]D20-62°(c1，CHCl3)；核磁1H NMR(CDCl3)δ1.34，1.38(2d，2×3H，J 6.9Hz，(CH3)2CH)，3.24-3.32(m，1H，(CH3)2CH)，3.53(br d，1H，J 1.2Hz，H-5)，3.68(dd，1H，J 9.3，3.6Hz，H-3)，3.77(t，1H，J 9.3Hz，H-2)，4.02(brd，1H，J 12.5Hz，H-6a)，4.24(br s，1H，H-4)，4.33(br d，1H，J 12.5Hz，H-6b)，4.40(d，1H，J 9.3Hz，H-1)，5.53(s，1H，PhCH)，7.35-7.51(m，5H，Ph)。
(2)異丙硫基3-氧-(9-芴甲氧基羰基)-4，6-二-氧-芐叉基-β-D-半乳吡喃糖苷3的制備在0℃下，將化合物2(1.0克，3.07毫摩爾)溶在5毫升吡啶中，加入9-芴甲氧基羰基氯(872毫克，3.37毫摩爾)和催化量的DMAP(50毫克)。然后升溫至室溫，攪拌12小時，反應(yīng)完畢。減壓蒸除溶劑，剩余物用硅膠柱色譜分離純化，以3∶1石油醚-乙酸乙酯淋洗得泡沫狀3(1.48克，88％)旋光值[α]D20+31°(c1.8，CHCl3)；核磁1H NMR(CDCl3)δ1.36，1.39(2d，2×3H，J 6.9Hz，(CH3)2CH)，3.45-3.35(m，1H，(CH3)2CH)，3.53(br d，1H，J 1.0Hz，H-5)，4.02(dd，1H，J 12.5，1.7Hz，H-6a)，4.12(t，1H，J1，2＝J2，3＝9.6Hz，H-2)，4.29(br t，1H，J 7.6Hz，CH of Fmoc)，4.34(dd，1H，J 12.5，1.5Hz，H-6b)，4.43-4.46(m，3H，H-4，CH2of Fmoc)，4.49(d，1H，J 9.6Hz，H-1)，4.77(dd，1H，J 9.6，3.5Hz，H-3)，5.50(s，1H，PhCH)，7.21-7.76(m，13H，Ph)。
(3)薯蕷苷元3-氧-(9-芴甲氧基羰基)-4，6-二-氧-芐叉基-β-D-半乳吡喃糖苷4
在-40℃，氮氣保護下，將硫代糖苷3(0.2毫摩爾)和薯蕷苷元(0.2毫摩爾)溶在干燥的1毫升二氯甲烷中，分別加入0.2毫摩爾NIS和催化量的TMSOTf。攪拌30分鐘，TLC檢測反應(yīng)完畢。三乙胺中和，減壓濃縮，硅膠柱色譜分離純化濃縮物，用石油醚-乙酸乙酯(6/1～3/1)淋洗，得純化產(chǎn)物4。旋光值[α]D25-34°(c1.3，CHCl3)；核磁1H NMR(CDCl3)δ0.788(s，3H，CH3)，0.789(d，3H，J 6.2Hz，CH3)，0.89-0.96(m，2H)，0.97(d，3H，J 6.9Hz，CH3))，1.03(s，3H，CH3)，1.04-2.38(m，22H)，3.37(t，1H，J10.9Hz，H-26a)，3.46-3.50(m，H-26b，H-5)，3.55-3.66(m，1H，H-3α)，4.04-4.09(m，2H，H-2，H-6a)，4.27-4.34(m，2H，H-6b，CH of Fmoc，4.35-4.50(m，5H，H-16 of diosgenyl，H-1，H-4，CH2of Fmoc)，4.75(dd，1H，J 10.2，3.7Hz，H-3)，5.34(m，H-6 of diosgenyl)，5.51(s，1H，PhCH2)，7.42-8.11(10H，Ph)。
(4)薯蕷苷元2，3，4-三-氧-乙酰基-α-L-鼠李吡喃糖基-(1→2)-4，6-二-氧-芐叉基-β-D-半乳吡喃糖苷7的制備在0℃，氮氣保護下，將化合物4(443毫克，0.50毫摩爾)和乙?；罄钐莵啺孵?(222毫克，0.51毫摩爾)溶于5毫升干燥的二氯甲烷，加入9微升TMSOTf。攪拌1小時后，往反應(yīng)體系加入過量的三乙胺(20當量)，室溫下繼續(xù)攪拌2小時，減壓濃縮，用硅膠柱色譜分離純化濃縮物，以3∶1的石油醚-乙酸乙酯淋洗，得到泡沫狀7(397毫克，兩步產(chǎn)率84.8％)。7的物理數(shù)據(jù)旋光值[α]D25-95°(c0.75，CHCl3)；核磁1H NMR(CDCl3)δ0.786(s，3H，CH3)，0.792(d，3H，J 5.0Hz，CH3)，0.97(d，3H，J 6.9Hz，CH3)，1.07(s，3H，CH3)，1.21(d，3H，J 6.2Hz，H-6′)，1.98，2.00，2.12(3s，3×3H，3CH3CO)，3.37(t，1H，J 10.9Hz，H-26a of diosgenyl)，3.45-3.50(m，H-5，H-26b ofdiosgenyl)，3.58-3.67(n，1H，H-3α diosgenyl)，3.75-3.85(m，2H，H-2 and H-3)，4.07(brd，1H，J 12.3Hz，H-6a)，4.16(d，1H，J 2.4Hz，H-4)，4.31(br d，1H，H-6b)，4.41(q，1H，J 7.5Hz，H-16 of diosgenyl)，4.47-4.54(m，2H，H-1，H-5′)，5.07(t，1H，J 10.0Hz，H-4′)，5.28(dd，1H，J 10.0，3.4Hz，H-3′)，5.32(d，1H，J 1.6Hz，H-1′)，5.36(dd，1H，J 3.4，1.6Hz，H-2′)，5.39(br d，1H，J 5.0Hz，H-6 of diosgenyl)，5.54(s，1H，PhCH)，7.36-7.51(m，5H，Ph).元素分析Anal.Calcd for C52H72O15C，66.65；H，7.74.FoundC，66.83；H，7.66。
(5)薯蕷苷元2，3，4-三-氧-苯甲?；?β-D-木吡喃糖基-(1→3)-[2，3，4-三-氧-乙酰基-α-L-鼠李吡喃糖基-(1→2)]-4，6-二-氧-芐叉基-β-D-半乳吡喃糖苷8在0℃，氮氣保護下，將化合物7(210毫克，0.22毫摩爾)和苯甲?；咎莵啺孵?(264毫克，0.25毫摩爾)溶在4毫升干燥的二氯甲烷，加入5微升TMSOTGf。攪拌2小時后，用三乙胺中和，減壓蒸除溶劑，用硅膠柱色譜分離純化濃縮物，以3∶1的石油醚-乙酸乙酯淋洗得到泡沫狀9(238毫克，76.9％)旋光值[α]D25-102°(c0.5，CHCl3)；核磁1H NMR(CDCl3)δ0.774(s，3H，CH3)，0.780(d，3H，J 4.9Hz，CH3)，0.96(d，3H，J 6.9Hz，CH3)，1.02(s，3H，CH3)，1.10(d，3H，J 6.1Hz，H-6II)，1.87，1.94，2.03(3s，3×3H，3CH3CO)，3.36(t，1H，J 10.9Hz，H-26a)，3.40-3.48(m，2H，H-5I，H-26b)，3.54-3.62(m，1H，H-3α)，3.85(br d，1H，J 12.9Hz，H-5aIII)，3.91(dd，1H，J 9.6，3.5Hz，H-3I)，4.06-4.4.14(m，2H，H-2I，H-6aI)，4.31(br d，1H，J 11.9Hz，H-6bI)，4.40(q，1H，J 8.0Hz，H-16)，4.46(d，1H，J 3.5Hz，H-4I)，4.47-4.53(m，1H，H-5II)，4.57(d，1H，J 7.7Hz，H-1I)，4.69(dd，J 12.9，2.1Hz，H-5bIII)，4.97(t，1H，J3，4＝J4，59.9Hz，H-4II)，5.07(br d，1H，J 3.0Hz，H-2III)，5.20(s，1H，J 1.1Hz，H-1II)，5.24-5.30(m，3H，H-3II，H-1III，H-4III)，5.29(dd，1H，J 3.3，1.1Hz，H-2II)，5.38(brd，1H，J 5.1Hz，H-6)，5.53(s，1H，PhCH)，5.64(br t，1H，J3，4＝J2，33.2Hz，H-3III)，7.08-8.06(m，20H，Ph)；13C NMR(CDCl3)δ14.47，16.23，17.08，17.12，19.26，20.53，20.76，20.80(2C)，28.75，29.38，30.24，31.35，31.38，31.80，32.06，36.90，37.19，38.23，39.71，40.22，41.57，50.06，56.45，58.79，62.07，65.94，66.19，66.32，66.79，67.01，68.28，68.95，69.21，69.94，71.46，71.76，75.94，77.93，80.75，83.54，97.08(C-1II)，98.97(C-1I)，100.03(C-1III)，100.75(PhCH)，109.22(C-22)，121.77(C-6)，140.36(C-5)，164.55，165.05，165.46(3C，PhCO)，169.94，169.97(3 C，CH3CO，some overlapped).元素分析Anal.Calcd for C78H92O22C，67.81；H，6.71.FoundC，67.97；H，6.82。
(6)薯蕷苷元β-D-木吡喃糖基-(1→3)-[α-L-鼠李吡喃糖基-(1→2)]-β-D-半乳吡喃糖10化合物9(183毫克，0.13毫摩爾)溶于15毫升80％醋酸水溶液中，加熱至70℃反應(yīng)。攪拌2小時后，減壓蒸除溶劑，所的剩余物溶在6毫升甲醇/二氯甲烷(2∶1)混合溶劑，加入1 N氫氧化鈉水溶液至pH值約9-10。室溫攪拌6小時，用酸性樹脂IR-120(H+)中和。抽濾，濾液濃縮，用硅膠柱色譜分離純化濃縮物，以3∶1二氯甲烷-甲醇淋洗，得到白色固體10(113毫克，96％)核磁1H NMR(d5-pyridine)δ0.69(d，3H，J 5.3Hz，CH3)，0.87(s，3H，CH3)，1.05(s，3H，CH3)，1.13(d，3H，J 6.9Hz，CH3)，1.69(d，3H，J 6.1Hz，H-6II)，3.49-3.68(m，3H)，3.91(t，1H)，3.98-4.04(m，1H)，4.06-4.15(m，3H)，4.20-4.32(m，3H)，4.38-4.43(m，2H)，4.53(q，1H，H-5II)，4.60(dd，1H)，4.73(t，1H)，4.80(d，1H)，4.90(d，1H)，4.93(dd，1H)，4.99(d，1H，J 7.7Hz，H-1I)，5.05(d，1H，J 7.5Hz，H-1III)，5.31(d，1H，J 4.7Hz，H-6)，6.29(s，1H，H-1II).質(zhì)譜ESI(-)-MS found for C44H70O16877.2(M+Na)+。
二、薯蕷苷元β-D-葡萄吡喃糖基-(1→3)-[α-L-鼠李吡喃糖基-(1→2)]-β-D-半乳吡喃糖的制備10流程2是天然皂苷15的合成路線圖。在0℃，化合物7和1當量11用TMSOTf催化進行區(qū)域選擇性縮合得β(1→3)連接為主的二糖12(88％)。此部分保護的二糖12和薯蕷苷元在NIS/TMSOTf催化下偶聯(lián)，得到約63.4％的二糖皂苷13。其1HNMR譜圖上，H-1的化學位移出峰在4.33 ppm處，偶合常數(shù)為7.5赫茲，說明β糖苷鍵的形成?；衔?3和1.5當量5進行縮合反應(yīng)，得到84％產(chǎn)率的三糖皂苷14。在70℃下，化合物14用80％的醋酸水溶液脫除芐叉基；然后，溶在甲醇中用1N的氫氧化鈉水溶液(調(diào)pH約9-10)來脫除糖基上的酰基保護基，得到天然皂苷15。由此，我們從起始原料出發(fā)，經(jīng)五步反應(yīng)得到天然皂苷15(總產(chǎn)率36％)。
流程2薯蕷苷元β-D-葡萄吡喃糖基-(1→3)-[α-L-鼠李吡喃糖基-(1→2)]-β-D-半乳吡喃糖的制備(1)異丙硫基2，3，4，6-四-氧-苯甲?；?β-D-葡萄吡喃糖基-(1→3)-4，6-二-氧-芐叉基-β-D-半乳吡喃糖苷12在0℃，氮氣保護下，將化合物7(443毫克，0.50毫摩爾)和苯甲酰化葡萄糖亞胺酯11(222毫克，0.51毫摩爾)溶在10毫升干燥的二氯甲烷，加入9微升TMSOTf。攪拌1小時后，用三乙胺中和，減壓蒸除溶劑，用硅膠柱色譜分離純化濃縮物，以41的石油醚-乙酸乙酯淋洗得到泡沫狀12(511毫克，88.3％)旋光值[α]D25-87°(c0.25，CHCl3)；核磁1H NMR(CDCl3)δ1.25，1.31(2d，2×3H，J 6.9Hz，(CH3)2CH)，3.14-3.21(m，1H，(CH3)2CH)，3.27(br s，1H，H-5)，3.75(dd，1H，J 9.4，3.2Hz，H-3)，3.83(br d，1H，J 11.8Hz，H-6a)，3.90(t，1H，J1，2＝J2，39.4Hz，H-2)，4.16-4.24(m，2H，H-6b，H-5′)，4.25(d，1H，J 3.2Hz，H-4)，4.33(d，1H，J 9.4Hz，H-1)，4.54(dd，1H，J 12.2，5.7Hz，H-6a′)，4.68(dd，J 12.2，2.8Hz，H-6b′)，5.39(s，1H，PhCH)，5.40(d，1H，J 7.8Hz，H-1′)，5.58(t，1H，J 9.6，7.8Hz，H-2′)，5.68(t，1H，J3′，4′＝J4′，5′9.6Hz，H-4′)，5.92(t，1H，J3′，4′＝J2′，3′9.6Hz，H-3′)，7.25-7.94(m，25H，Ph).元素分析Anal.Calcd for C50H48O14SC，66.36；H，5.35.FoundC，66.57；H，5.28。
(2)薯蕷苷元2，3，4，6-四-氧-苯甲?；?β-D-葡萄吡喃糖基-(1→3)-4，6-二-氧-芐叉基-β-D-半乳吡喃糖苷13在-42℃，氮氣保護下，將化合物12(452毫克，0.50毫摩爾)和薯蕷皂苷元(207毫克，0.50毫摩爾)溶在干燥的10毫升二氯甲烷中，分別加入124毫克(0.55毫摩爾)NIS和11微升TMSOTf。攪拌45分鐘后，用三乙胺中和，減壓濃縮，硅膠柱色譜分離純化濃縮物，用3∶1石油醚-乙酸乙酯淋洗，得白色固體13(394毫克，63.4％)旋光值[α]D25-24°(c1，CHCl3)；核磁1H NMR(CDCl3)δ0.780(s，3H，CH3)，0.788(d，3 H，J 6.3Hz，CH3)，0.97(d，3H，J 6.9Hz，CH3)，1.00(s，3H，CH3)，3.23(br s，1H，H-5)，3.37(t，1H，J 10.9Hz，H-26a of diosgenyl)，3.45-3.57(m，H-3α and H-26b of diosgenyl)，3.74(dd，1H，J 9.8，3.3Hz，H-3)，3.81-3.88(m，2H，H-2，H-6a)，4.15-4.22(m，3H，H-4，H-5′，H-6b)，4.33(d，1H，J 7.5Hz，H-1)，4.39(q，1H，J 7.5Hz，H-16 of diosgenyl)，4.53(dd，1H，J 12.2，5.3Hz，H-6a′)，4.68(dd，J 12.2，3.0Hz，H-6b′)，5.32(br d，1H，J 5.0Hz，H-6 of diosgenyl)，5.38(d，1H，J 7.9Hz，H-1′)，5.40(s，1H，PhCH)，5.57(dd，J 9.6，7.9Hz，H-2′)，5.69(t，1H，J3′，4′＝J4′，5′9.6Hz，H-4′)，5.91(t，1H，J3′，4′＝J2′，3′9.6Hz，H-3′)，7.25-8.05(m，25H，Ph).元素分析Anal.Calcd for C74H82O17C，71.48；H，6.65.FoundC，71.59；H，6.48。
(3)薯蕷苷元2，3，4，6-四-氧-苯甲酰基-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→3)-[2，3，4-三-氧-乙?；?α-L-鼠李吡喃糖基-(1→2)]-4，6-二-氧-芐叉基-β-D-半乳吡喃糖苷14在0℃，氮氣保護下，將化合物13(323毫克，0.26毫摩爾)和乙?；罄钐莵啺孵?(126毫克，0.29毫摩爾)溶在4毫升干燥的二氯甲烷，加入5微升TMSOTf。攪拌2小時后，用三乙胺中和，減壓蒸除溶劑，用硅膠柱色譜分離純化濃縮物，以3∶1的石油醚-乙酸乙酯淋洗得到泡沫狀14(329毫克，83.6％)旋光值[α]D25-44°(c1，CHCl3)；核磁1H NMR(CDCl3)δ0.783(s，3H，CH3)，0.791(d，3H，J 6.3Hz，CH3)，0.97(d，3H，J 6.9Hz，CH3)，1.01(s，3H，CH3)，1.10(d，3H，J 5.9Hz，H-6II)，2.02，2.08(2s，3×3H，3CH3CO)，3.20(br s，1H，H-5I)，3.38(t，1H，J 10.9Hz，H-26a)，3.45-3.62(m，2H，H-3α，H-26b)，3.91-4.06(m，2H，H-2I，H-6aI)，4.07(dd，1H，J 9.5，3.6Hz，H-3I)，4.18-4.22(m，2H，H-4I，H-6bI)，4.25-4.30(m，1H，H-5III)，4.37(d，1H，J 7.7Hz，H-1I)，4.39-4.47(m，2H，H-5II，H-16)，4.56(dd，1H，J 12.3，4.2Hz，H-6aIII)，4.73(dd，J 12.2，3.3Hz，H-6bIII)，5.06(t，1H，J3，4＝J4，510.0Hz，H-4II)，5.23(br s，1H，H-1II)，5.27(d，1H，J7.8Hz，H-1III)，5.34(dd，1H，J 10.1，3.6Hz，H-3II)，5.36-3.91(m，3H，H-2II，H-6 andPhCH)，5.55(dd，J 9.4，7.8Hz，H-2III)，5.78(t，1H，J3，4＝J4，59.4Hz，H-4III)，5.91(t，1H，J3，4＝J2，39.4Hz，H-3III)，7.20-8.09(m，25H，Ph)；13C NMR(CDCl3)14.47，16.24，17.09(2C)，19.25，20.78(4C)，28.76，29.35，30.24，31.34，31.39，31.80，32.08，36.90，37.16，38.17，39.70，40.22，41.57，50.06，56.25，56.46，62.07，62.56，66.17，66.31，66.79，68.88，69.04，69.67，70.08，71.39，72.22，72.43，72.86，72.98，75.77，76.89，77.62，80.76，96.82(C-1II)，98.89(C-1I)，99.09(C-1III)，100.40(PhCH)，109.24(C-22)，121.62(C-6)，140.52(C-5)，165.18，165.39，165.47，165.93(4C，PhCO)，169.98，170.05，170.44(3C，CH3CO).元素分析Anal.Calcd for C86H98O24C，68.15；H，6.52.FoundC，68.31；H，6.46。
(4)薯蕷苷元β-D-葡萄吡喃糖基-(1→3)-[α-L-鼠李吡喃糖基-(1→2)]-β-D-半乳吡喃糖苷15化合物14(256毫克，0.17毫摩爾)溶于20毫升80％醋酸水溶液中，加熱至70℃反應(yīng)。攪拌3小時后，減壓蒸除溶劑，所的剩余物溶在9毫升甲醇/二氯甲烷(2∶1)混合溶劑中，加入1N氫氧化鈉水溶液至pH值約9-10。室溫攪拌6小時，用酸性樹脂IR-120(H+)中和。抽濾，濾液濃縮，用硅膠柱色譜分離純化濃縮物，以5∶2二氯甲烷-甲醇淋洗，得到白色固體15(113毫克，93％)核磁1H NMR(d5-pyridine)δ0.69(d，3H，J 5.1Hz，CH3)，0.86(s，3H，CH3)，1.04(s，3H，CH3)，1.13(d，3H，J 6.9Hz，CH3)，1.69(d，3H，J 6.1Hz，H-6II)，3.49-3.60(m，2H)，3.92-4.04(m，4H)，4.18-4.26(m，3H)，4.27-4.40(m，4H)，4.47(dd，1H)，4.52(q，1H，H-5II)，4.60(dd，1H)，4.68(t，1H)，4.80(d，1H)，4.90-4.95(m，3H，H-1I)，5.20(d，1H，J 7.8Hz，H-1III)，5.32(d，1H，J 4.2Hz，H-6)，6.30(s，1H，H-1II).質(zhì)譜ESI(-)-MS found for C45H72O17907.5(M+Na)+。
權(quán)利要求
1.具有下列通式的化合物。 通式I通式I中，R為H，Me，SO3-或其它糖單元，R1可為H，CH3，CH2OH，CH2OSO3-，COOH或其它糖單元，R2，R3可為H，OH，OSO3-，或其它糖單元。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中與薯蕷苷元相連的半乳糖的3位連接一個木糖，即通式I中R1＝R2＝H。
3.權(quán)利要求1的化合物，其中與薯蕷苷元相連的半乳糖的3位連接一個葡萄糖，即通式I中R1＝CH2OH，R2＝H，R3＝OH。
4.權(quán)利要求1的化合物，其中與薯蕷苷元相連的半乳糖的3位連接另一個半乳糖，通式I中R1＝CH2OH，R2＝OH，R3＝H。
5.權(quán)利要求1的化合物，其中與薯蕷苷元相連的半乳糖的3位連接一個巖藻糖，通式I中R1＝CH3，R2＝OH，R3＝H。
6.權(quán)利要求1-5所述化合物作為主成分或輔助成分在抗癌藥物及藥物組合物中使用。
7.權(quán)利要求1-5所述化合物作為主成分或輔助成分在抗炎癥藥物及藥物組合物中使用。
8.權(quán)利要求1-5所述化合物作為主成分或輔助成分，以口服或注射劑型在藥物中的使用。
全文摘要
本發(fā)明公開了具有潛在藥用價值的如通式I所示皂苷的合成方法，及其在抗炎、抗癌藥物和組合物中的應(yīng)用。通式I中，R為H，Me，SO
文檔編號A61K31/7048GK1680424SQ20041003088
公開日2005年10月12日 申請日期2004年4月9日 優(yōu)先權(quán)日2004年4月9日
發(fā)明者杜宇國, 顧國鋒 申請人:中國科學院生態(tài)環(huán)境研究中心