專利名稱：一種穩(wěn)定的噻丁啶喹啉羧酸鹽在制備抗感染藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的噻丁啶喹啉羧酸鹽及其醫(yī)藥抗菌素制劑，包含該醫(yī)藥抗菌素制劑的試劑盒，和該新的噻丁啶喹啉羧酸鹽在制備一種抗細(xì)菌感染藥物中的應(yīng)用。具體說，特別涉及一種新的供注射用可穩(wěn)定貯存的化學(xué)名稱為(±)6-氟-1-甲基-7-(1-哌嗪基)-4-氧-4氫-[1，3]噻丁啶[3，2-α]喹啉-3-羧酸鹽的藥物制劑。
背景技術(shù)：
各種微生物感染是引起人類疾病的主要因素之一，自從人類發(fā)明了抗菌藥物以來，人類戰(zhàn)勝了許多細(xì)菌引起的疾病。幾十年來，人類發(fā)明了大量的抗菌藥物，目前臨床應(yīng)用的已經(jīng)不下200種，其中環(huán)丙沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星、培氟沙星等已廣泛應(yīng)用于臨床，已經(jīng)成為臨床上重要的一類抗菌藥。然而，這些抗菌藥并不能滿足近年來正在增長的、且為難治性疾病即慢性綠膿菌感染癥和革蘭氏陰性菌感染癥的治療，而且隨著抗菌藥物的廣泛應(yīng)用，細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生已成為臨床治療中的難題。
目前上市的有些抗菌藥物，本身無抗菌活性，只能口服，口服經(jīng)腸道吸收后轉(zhuǎn)化為活性形式而發(fā)揮抗菌作用，其生物利用度低。
因此，人們?nèi)栽诓粩嗟睾铣梢志钚愿?、抗菌譜更廣的抗菌素藥物，并提供更多的劑型以滿足臨床的需要。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的就是克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供一種抑菌活性更高、抗菌譜更廣且生物利用度高的新一類噻丁啶喹啉羧酸鹽抗菌素藥物。
該藥物對(duì)多數(shù)革蘭氏陽性菌的活性與環(huán)丙沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星及司帕沙星相當(dāng)，對(duì)革蘭氏陰性菌的活性強(qiáng)于環(huán)丙沙星、氧氟沙星或相當(dāng)。該藥物具有優(yōu)良的殺菌作用，對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸埃希氏菌、粘質(zhì)沙雷氏菌、銅綠假單胞菌，即使在1/2MIC下短時(shí)間內(nèi)即呈殺菌作用，優(yōu)于氧氟沙星和環(huán)丙沙星，特別是對(duì)綠膿桿菌為首的革蘭氏陰性菌的抗菌力遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過其他沙星類，也超過目前上市的其他抗生素藥。
本發(fā)明一方面提供了一種具有抗菌作用的噻丁啶喹啉羧酸鹽，其化學(xué)名稱為(±)6-氟-1-甲基-7-(1-哌嗪基)-4-氧-4氫-[1，3]噻丁啶[3，2-α]喹啉-3-羧酸鹽(暫命名為普原利沙星)，本發(fā)明的具有抗菌作用的噻丁啶喹啉羧酸鹽，其結(jié)構(gòu)式如下 (I)其中R為藥物可接受的可提供酸根或堿基的使式(I)成為穩(wěn)定的鹽的酸或堿，優(yōu)選的是酸，包括有機(jī)酸或無機(jī)酸，所述酸選自枸櫞酸、酒石酸、琥珀酸、富馬酸、馬來酸、草酸、鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硝酸、磷酸、硫酸、亞硫酸，乳酸、乳糖酸、甲磺酸、苯磺酸或天門冬氨酸。優(yōu)選的是乳酸、鹽酸、甲磺酸、天門冬氨酸，更優(yōu)選的是乳酸。
所述的堿是堿金屬或堿土金屬形式的堿，如鈉、鉀、鈣、鎂、鋅的堿性物質(zhì)，如氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣、氫氧化鎂、氫氧化鋅，優(yōu)選的是氫氧化鈉、氫氧化鉀。
本發(fā)明還提供含有(±)6-氟-1-甲基-7-(1-哌嗪基)-4-氧-4氫-[1，3]噻丁啶[3，2-α]喹啉-3-羧酸鹽化合物的藥物組合物，優(yōu)選的是含有其乳酸鹽、鹽酸鹽、甲磺酸鹽和天門冬氨酸鹽化合物作為藥物活性成分的藥物組合物。該藥物組合物，按重量計(jì)，由0.1％-99.9％的(±)6-氟-1-甲基-7-(1-哌嗪基)-4-氧-4氫-[1，3]噻丁啶[3，2-α]喹啉-3-羧酸鹽化合物和0.1％-99.9％的藥物可接受的載體組成。
本發(fā)明還提供(±)6-氟-1-甲基-7-(1-哌嗪基)-4-氧-4氫-[1，3]噻丁啶[3，2-α]喹啉-3-羧酸鹽化合物，特別是其乳酸鹽、鹽酸鹽、甲磺酸鹽和天門冬氨酸鹽及其藥物組合物的制備方法以及用它們制備抗菌藥物的應(yīng)用。
本發(fā)明優(yōu)選的藥物組合物是作為胃腸外給藥的藥物制劑形式，特別是注射給藥的制劑形式。本發(fā)明的鹽(暫命名為Pyilifloxacin，普原利沙星)及其注射劑可有效廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥領(lǐng)域。
本發(fā)明提供了一種可穩(wěn)定貯存且溶于水的本發(fā)明的鹽(暫命名為Pyilifloxacin，普原利沙星)制成的以粉末或水溶液制劑形式給藥的藥物制劑，以便由醫(yī)學(xué)領(lǐng)域?qū)＜覒?yīng)用于臨床治療。
本發(fā)明所述注射劑可以是粉針劑或者水針劑或者0.9％氯化鈉的輸液注射劑，或者含有不同含量葡萄糖溶液的輸液注射劑，對(duì)于注射劑，制備的液體單位劑量含有本發(fā)明的原料和無菌載體。根據(jù)載體和濃度，可以將此化合物懸浮或者溶解。溶液的制備通常是通過將原料溶解在一種載體中，在將其裝入一種適宜的小瓶或安瓿前過濾消毒，然后密封。輔料例如一種局部麻醉劑、防腐劑和緩沖劑也可以溶解在這種載體中。為了提高其穩(wěn)定性，可在裝入小瓶以后將這種組合物冰凍，并在真空下將水除去。
本發(fā)明也包括粉針劑和注射溶劑組成的試劑盒。該試劑盒，內(nèi)含本發(fā)明的粉針劑和一種可注射用的溶劑，粉針劑和可注射用的溶劑是分立的，包裝在同一包裝盒內(nèi)，粉針劑與可注射用的溶劑量的配比是按照使用方法配置的，每100mg劑量的粉針劑配以5ml-500ml可注射用的溶劑。所述可注射用溶劑選自注射用水，注射用氯化鈉輸液劑，注射用葡萄糖輸液劑。
具體可以是100mg或200mg粉針劑5ml或10ml水100ml或250ml或500ml的0.9％氯化鈉注射液或5％葡萄糖注射液。
本發(fā)明提供的干粉注射劑的制備方法，包括將本發(fā)明的化合物原料經(jīng)冷凍干燥法制成凍干無菌粉末，加塞并用鋁蓋密封制得。
本發(fā)明提供的注射液的制備方法，包括將本發(fā)明的化合物原料加注射用水溶解后，調(diào)pH至5.0-7.0，脫色、熱原，經(jīng)粗濾和精濾后，灌裝、塞塞、軋蓋、滅菌、放冷后，即得。
本發(fā)明提供的靜脈滴注用輸液的制備方法，包括將本發(fā)明的化合物原料和葡萄糖或者是氯化鈉加注射用水溶解后，調(diào)pH至5.0-7.0，脫色、熱原，經(jīng)粗濾和精濾后，灌裝、塞塞、軋蓋、滅菌、放冷后，即得。
本發(fā)明的注射劑，每一制劑單位可以含有本發(fā)明的化合物10-500mg，其余為藥物可接受的載體，所述藥物可接受的載體可以是制劑學(xué)通用的載體。所述的載體選自甘露醇、山梨醇、焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、鹽酸半胱氨酸、巰基乙酸、蛋氨酸、維生素C、EDTA二鈉、EDTA鈣鈉，一價(jià)堿金屬的碳酸鹽、醋酸鹽、磷酸鹽或其水溶液、鹽酸、醋酸、硫酸、磷酸、氨基酸、氯化鈉、氯化鉀、乳酸鈉、木糖醇、麥芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纖維素及其衍生物、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、土溫80、瓊脂、碳酸鈣、碳酸氫鈣、表面活性劑、聚乙二醇、環(huán)糊精、β-環(huán)糊精、磷脂類材料、高嶺土、滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂等。
本發(fā)明的制劑在使用時(shí)根據(jù)病人的情況確定用法用量，可每日服1-3次，每次1-20劑，如1-20針。
以下通過實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)說明本發(fā)明的有益效果表1不同鹽的溶解度比較樣品名稱 溶解度(mg/ml)噻丁啶喹啉羧酸 2.64馬來酸普原利沙星 46.28富馬酸普原利沙星 94.12草酸普原利沙星 88.13酒石酸普原利沙星 73.63乳酸普原利沙星 125.38鹽酸普原利沙星 135.79甲磺酸普原利沙星 139.67天門冬氨酸普原利沙星 126.78從表1可明顯得出這樣的結(jié)論噻丁啶喹啉羧酸(即(±)6-氟-1-甲基-7-(1-哌嗪基)-4-氧-4氫-[1，3]噻丁啶[3，2-α]喹啉-3-羧酸)幾乎不溶于水，其成鹽后(即普原利沙星)，水溶性大大增加。
穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)研究將普原利沙星鹽加入棕色玻璃瓶中，加入5％水，封口，置于60℃干燥箱中10天，隨后隨后用高效液相色譜(HPLC)在256nm處進(jìn)行分析雜質(zhì)含量。
表2穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明普原利沙星鹽具有良好的穩(wěn)定性。
以下為乳酸普原利沙星的基本實(shí)驗(yàn)(1)水溶性試驗(yàn)取乳酸普原利沙星適量，研細(xì)，稱取適量，置于加有10ml水的試管中，在25±2℃每隔5分鐘振搖30秒，30分鐘觀察溶解情況，如看不到溶質(zhì)顆粒時(shí)，即為完全溶解。結(jié)果加入溶質(zhì)的總量為1.25g。按照中國藥典2000年版二部的規(guī)定，試驗(yàn)結(jié)果表明本品在水中易溶。
(2)溶液的pH值取乳酸普原利沙星約0.2g，加水40ml溶解，照中國藥典2000年版二部附錄VIH測(cè)定pH值，結(jié)果為5.4。
(3)乳酸普原利沙星的異常毒性試驗(yàn)取乳酸普原利沙星適量，加0.9％氯化鈉注射液制成每1ml中含本品30mg的供試品溶液。供試用小鼠健康合格，體重17-20g，試驗(yàn)前按正常飼養(yǎng)條件飼養(yǎng)。取小鼠10只，雌雄各半，每只小鼠分別自尾靜脈注射供試品溶液0.5ml后，正常飼養(yǎng)，觀察小鼠在48小時(shí)內(nèi)的生存情況。結(jié)果全部小鼠在48小時(shí)內(nèi)未見死亡，異常毒性檢查符合規(guī)定。本品制劑用于臨床的劑量為一次200mg，即2.86mg/kg(以平均體重70kg計(jì)算)；該試驗(yàn)劑量大于人用劑量的200倍以上，本品制劑臨床使用安全。
乳酸普原利沙星粉針劑的用法用量將本品(規(guī)格200mg/瓶)用注射用水充分溶解，配制成每1ml含20mg的溶液，再加入到100ml的0.9％氯化鈉注射液或5％葡萄糖注射液中，30-60min內(nèi)靜脈快速滴注。
乳酸普原利沙星注射液的用法用量取本品1瓶，加入到100ml的0.9％氯化鈉注射液或5％葡萄糖注射液中，30-60min內(nèi)靜脈快速滴注。
輸液取本品，直接于30-60min內(nèi)靜脈快速滴注。
劑量成人常用量為一次200mg。
本發(fā)明的化合物及其藥物制劑，具有的優(yōu)點(diǎn)包括抑菌活性高、抗菌譜廣且生物利用度高，該藥物安全有效，特別是對(duì)呼吸系統(tǒng)感染很有效；另外，其對(duì)尿路感染及外科、婦產(chǎn)科、皮膚科、眼科、牙科等感染亦有效。本發(fā)明的鹽，特別是其乳酸鹽、鹽酸鹽、甲磺酸鹽和天門冬氨酸鹽，其水溶性相當(dāng)好，從而有利于制成注射用制劑。該藥以活性形式直接注入體內(nèi)，提高了生物利用度，且起效迅速，其臨床療效也將大大增強(qiáng)，一些原來通過口服給藥無法達(dá)到治療效果的疾病可以通過注射劑來改善，因此本制劑亦可擴(kuò)大了口服制劑的適應(yīng)癥范圍。普原利沙星乳酸鹽、鹽酸鹽、甲磺酸鹽及天門冬氨酸鹽注射劑的發(fā)明將為廣大感染性疾病患者帶來巨大的社會(huì)效益。目前國內(nèi)外均無噻丁啶喹啉羧酸鹽以注射劑形式應(yīng)用于臨床的文獻(xiàn)報(bào)道。
具體實(shí)施例方式制備例1(±)6-氟-1-甲基-7-(1-哌嗪基)-4-氧-4氫-[1，3]噻丁啶[3，2-α]喹啉-3-羧酸的制備1)3，4-二氟-二硫代甲酸-苯胺·三乙胺鹽(中間體I)的制備于1000ml反應(yīng)瓶中依次加入150g(1.16mol)二氟苯胺，290g(2.87ml)三乙胺，冰水冷卻至5℃，滴加97g(1.27mol)二硫化碳，滴加結(jié)束，控溫5～10℃，攪拌反應(yīng)過夜，過濾，乙醚淋洗濾餅，干燥，得淡黃色固體338.2g，收率為95.0％。
TLC展開劑石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1，Rf＝0.702)3，4-二氟-異硫氰酸苯酯(中間體II)的制備于1000ml反應(yīng)瓶中依次加入335g(1.09mol)自制中間體I，500ml二氯甲烷，攪拌均勻，冷卻至5℃，滴加130g(1.20mol)氯甲酸乙脂，滴加結(jié)束，反應(yīng)3小時(shí)，將反應(yīng)物倒入冰水混合物中，攪勻，分層，水層用二氯甲烷(80ml×3)萃取，合并有機(jī)相，分別用稀鹽水和水洗滌，干燥，濾除干燥劑，減壓蒸餾，收集68-70℃/4mmHg餾分。得淡黃色液狀物146.2g，收率為78.1％。
TLC展開劑石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1，Rf＝0.743)6，7二氟-4-氧代-2-乙硫基喹啉-3-羧酸乙脂(中間體III)的制備于2000ml反應(yīng)瓶中依次加入52g(0.93mol)氫氧化鉀，700ml二氧六環(huán)，冷卻，攪拌，于5℃左右滴加148.5g(0.93mol)丙二酸二乙酯，滴加結(jié)束，攪拌30分鐘，控溫5～10℃，滴加100g(0.92mol)溴乙烷，反應(yīng)5小時(shí)，升溫至60℃，反應(yīng)30分鐘，稍冷，過濾，濾液減壓濃縮，加入540g冰鹽水，攪拌均勻，再加540ml乙酸乙酯萃取，分層，水層用乙酸乙酯(150ml×2)提取，合并有機(jī)相，用飽和食鹽水(150ml×2)洗滌，干燥，回收溶劑，殘余物加入550ml二甲苯，回流48小時(shí)，稍冷，加入石油醚460g，攪拌10分鐘，冷卻，過夜，過濾，石油醚淋洗，干燥，得淡黃色(或類白色)針狀結(jié)晶粉末80.7g，收率為30.4％，mp127.4-128.1℃。
TLC展開劑石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1，Rf＝0.514)6，7二氟-4-乙酰氧基-2-乙硫基喹啉-3-羧酸乙脂(中間體IV)的制備于1000ml反應(yīng)瓶中依次加入80g(0.26mol)自制中間體III，400ml三乙胺，685ml二氯甲烷，冷卻至5℃，加入32ml(0.34mol)乙酸酐，攪拌2小時(shí)，將反應(yīng)液倒入冰水中，分層，水相用二氯甲烷(150ml×2)萃取，合并有機(jī)相，水洗，干燥，濾除干燥劑，減壓蒸除二氯甲烷，得白色晶體粉末76.8g，收率84.6％。mp64.1-66.3℃。
TLC展開劑石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1，Rf＝0.585)6，7二氟-1-甲基-4氧代-4H-(1，3)-硫氮雜環(huán)丁烷并(3，2-a)喹啉-3-羧酸乙脂(中間體V)的制備于2000ml反應(yīng)瓶中依次加入76g(0.21mol)自制中間體IV，615ml正乙烷，攪拌升溫至回流，滴加65g(0.48mol)磺酰氯的正乙烷(270ml)溶液，滴加結(jié)束，回流3小時(shí)，減壓濃縮，的淡黃色油狀物，加入683ml四氫呋喃，177g(1.28mol)無水碳酸鉀，回流4小時(shí)，冷卻，倒入冰水中，過濾，水洗至中性，干燥，得淺紫色晶體粉末59.5g，收率89.4％。mp204.4～207.8℃。
TCL展開劑石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1，Rf＝0.316)6-氟-1-甲基-7-哌嗪基4-氧代-4H-[1，3]硫氮雜環(huán)丁烷并[3，2-α]喹啉-3-羧酸乙酯(中間體VI)的制備于1000ml反應(yīng)瓶中依次加入59g(0.19mol)自制中間體V，57g(0.66mol)無水哌嗪，545ml DMF，加熱至80℃反應(yīng)2小時(shí)，冷卻，倒入冰水中，析晶，過濾，水洗至中性，干燥，得淡黃色粉末42.7g，收率為59.7％。mp212.3～212.6℃(分解)。
TCL展開劑氯仿∶甲醇＝1∶1，Rf＝0.537)(±)6-氟-1-甲基-7-(1-哌嗪基)4-氧代-4H-[1，3]噻丁啶[3，2-α]喹啉-3-羧酸的制備于1000ml反應(yīng)瓶中依次加入42g(0.11mol)自制中間體VI，叔丁醇526ml，氫氧化鉀水溶液74ml(0.75mol)，攪拌，升溫至70℃反應(yīng)2小時(shí)，過濾，濾液倒入冰水中，用濃鹽酸調(diào)pH＝7，析晶，過濾，水洗，干燥，得淡黃色粉末32.6g，收率為83.8％。
TCL展開劑氯仿∶甲醇∶氨水＝1∶1∶0.1，Rf＝0.64實(shí)施例1a.乳酸普原利沙星的制備在1000ml三頸瓶中加入10g制備例1制得的噻丁啶喹啉羧酸和500ml乙醇，室溫?cái)嚢璋胄r(shí)后，繼續(xù)攪拌下分三次加入乳酸3.0ml，每次加入乳酸后需反應(yīng)半小時(shí)。加畢乳酸后，再加入100ml乙醇和活性炭1.0g，逐漸升溫至回流，保溫2h。反應(yīng)基本完全，溶液變得澄清，趁熱過濾，所得濾液置冰箱冷藏過夜，大量晶體析出，抽濾，濾餅用乙醇洗滌兩次，每次25ml，濾液回收，固體在40℃下減壓干燥10h，得類白色或淺黃色固體10.10g，收率80％，mp.216-219℃。
b.注射用乳酸普原利沙星的制備取乳酸普原利沙星原料50g，置于適當(dāng)無菌容器中，加無菌注射用水到1000ml，攪拌使溶解，然后加配制量的0.05％活性炭，攪拌10分鐘，用無菌抽濾漏斗鋪滅菌濾紙濾過，再用經(jīng)滅菌的G6垂熔玻璃漏斗精濾，測(cè)定含量，濾液分裝成1000瓶，經(jīng)冷凍干燥法制成冷凍粉，加塞并用鋁蓋密封制得。
c.乳酸普原利沙星注射液的制備取200g乳酸普原利沙星原料置濃配缸中，加注射用水適量，充分?jǐn)嚢枋怪耆芙?；?.1mol/L鹽酸調(diào)pH至5.0-7.0，加入配液量0.05％(w/v)的針用活性炭，回流15min；用0.6μm鈦濾棒過濾脫碳后，將藥液送入稀配缸中，補(bǔ)加注射用水至1000ml，攪拌15min。取樣測(cè)pH值、含量合格后，用0.45μm聚砜過濾器粗濾和0.22μm聚砜過濾器精濾后，將藥液送入下道工序灌裝成1000瓶、熔封，經(jīng)115℃熱壓滅菌30分鐘后，放冷。檢查合格后，包裝即得。
d.乳酸普原利沙星輸液的制備取400g乳酸普原利沙星原料、氯化鈉(或者是葡萄糖)置濃配缸中，加注射用水適量，充分?jǐn)嚢枋怪耆芙?；?.1mol/L鹽酸調(diào)pH至5.0-7.0，加入配液量0.05％(w/v)的針用活性炭，回流15min；用0.6μm鈦濾棒過濾脫碳后，將藥液送入稀配缸中，補(bǔ)加注射用水至100000ml，攪拌15min。取樣測(cè)pH值、含量合格后，用0.45μm聚砜過濾器粗濾和0.22μm聚砜過濾器精濾后，將藥液送入下道工序灌裝成1000瓶、塞塞、軋蓋，經(jīng)115℃熱壓滅菌30分鐘后，放冷。檢查合格后，包裝即得。
試驗(yàn)1實(shí)施例1制備的乳酸普原利沙星對(duì)大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯桿菌感染小鼠的體內(nèi)保護(hù)作用以噻丁啶喹啉羧酸為對(duì)照，比較研究了乳酸普原利沙星對(duì)大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯桿菌感染小鼠的體內(nèi)保護(hù)作用。本研究以昆明種小鼠為試驗(yàn)對(duì)象，試驗(yàn)菌株(大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯桿菌)自醫(yī)院臨床分離得到。動(dòng)物分成8組，各組動(dòng)物給予試驗(yàn)藥的劑量分別為5、3.5、2.45、1.715、1.20、0.84、0.59和0.41mg/kg體重(以噻丁啶喹啉羧酸計(jì))，小鼠腹腔注射應(yīng)用菌液10分鐘后，皮下注射給藥。試驗(yàn)期間小鼠按正常條件飼養(yǎng)，觀察給藥后小鼠48小時(shí)內(nèi)的生存情況。
乳酸普原利沙星對(duì)大腸埃希氏菌感染小鼠的體內(nèi)保護(hù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.試驗(yàn)藥(乳酸普原利沙星)
2.對(duì)照藥(噻丁啶喹啉羧酸)
注ED50的計(jì)算方法為采用bliss法的程序處理，計(jì)算而得。計(jì)算時(shí)采用了0.41mg/kg～3.5mg/kg 7個(gè)劑量組的數(shù)據(jù)。
乳酸普原利沙星對(duì)肺炎克雷伯桿菌感染小鼠的體內(nèi)保護(hù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.試驗(yàn)藥(乳酸普原利沙星)
2.對(duì)照藥(噻丁啶喹啉羧酸)
注ED50的計(jì)算方法為采用bliss法的程序處理，計(jì)算而得。計(jì)算時(shí)采用了0.41mg/kg～3.5mg/kg 7個(gè)劑量組的數(shù)據(jù)。
結(jié)果各劑量組中，試驗(yàn)藥與對(duì)照藥組間小鼠的存活率無顯著性差異。本品治療大腸埃希氏菌和肺炎克雷伯桿菌感染小鼠的ED50分別為0.975mg/kg和1.041mg/kg；對(duì)照藥噻丁啶喹啉羧酸治療大腸埃希氏菌和肺炎克雷伯桿菌感染小鼠的ED50則分別為0.967mg/kg和1.077mg/kg。試驗(yàn)表明在小鼠中，乳酸普原利沙星對(duì)大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯桿菌所致感染有明顯治療效果。
實(shí)施例2a.鹽酸普原利沙星的制備在1000ml三頸瓶中加入10g制備例1制得的噻丁啶喹啉羧酸和500ml乙醇，室溫?cái)嚢璋胄r(shí)后，繼續(xù)攪拌下分三次加入2mol/L鹽酸15ml，每次加入鹽酸后需反應(yīng)半小時(shí)。加畢鹽酸后，再加入40ml蒸餾水和活性炭1.0g，逐漸升溫至回流，保溫2h。反應(yīng)基本完全，溶液變得澄清，趁熱過濾，濾液置冰箱冷藏過夜，大量晶體析出，抽濾，濾餅用乙醇洗滌兩次，每次25ml。所得固體在40℃下減壓干燥10h，得類白色或淺黃色固體9.12g，收率82.6％。
b.注射用鹽酸普原利沙星的制備取鹽酸普原利沙星原料50g，置于適當(dāng)無菌容器中，加無菌注射用水足量，攪拌使溶解，然后加配制量的0.05％活性炭，攪拌10分鐘，用無菌抽濾漏斗鋪滅菌濾紙濾過，再用經(jīng)滅菌的G6垂熔玻璃漏斗精濾，測(cè)定含量，濾液經(jīng)分裝，冷凍干燥法制成冷凍粉1000瓶，加塞并用鋁蓋密封制得。
c.鹽酸普原利沙星注射液的制備取200g鹽酸普原利沙星原料置濃配缸中，加注射用水適量，充分?jǐn)嚢枋怪耆芙猓挥?.1mol/L鹽酸調(diào)pH至5.0-7.0，加入配液量0.05％(w/v)的針用活性炭，回流15min；用0.6μm鈦濾棒過濾脫碳后，將藥液送入稀配缸中，補(bǔ)加注射用水至1000ml，攪拌15min。取樣測(cè)pH值、含量合格后，用0.45μm聚砜過濾器粗濾和0.22μm聚砜過濾器精濾后，將藥液送入下道工序灌裝成1000瓶、熔封，經(jīng)115℃熱壓滅菌30分鐘后，放冷。檢查合格后，包裝即得。
d.鹽酸普原利沙星輸液的制備取400g鹽酸普原利沙星原料、氯化鈉(或者是葡萄糖)置濃配缸中，加注射用水適量，充分?jǐn)嚢枋怪耆芙?；?.1mol/L鹽酸調(diào)pH至5.0-7.0，加入配液量0.05％(w/v)的針用活性炭，回流15min；用0.6μm鈦濾棒過濾脫碳后，將藥液送入稀配缸中，補(bǔ)加注射用水至100000ml，攪拌15min。取樣測(cè)pH值、含量合格后，用0.45μm聚砜過濾器粗濾和0.22μm聚砜過濾器精濾后，將藥液送入下道工序灌裝成1000瓶、塞塞、軋蓋，經(jīng)115℃熱壓滅菌30分鐘后，放冷。檢查合格后，包裝即得。
試驗(yàn)2實(shí)施例2制備的鹽酸普原利沙星對(duì)大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯桿菌感染小鼠的體內(nèi)保護(hù)作用以噻丁啶喹啉羧酸為對(duì)照，比較研究了鹽酸普原利沙星對(duì)大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯桿菌感染小鼠的體內(nèi)保護(hù)作用。本研究以昆明種小鼠為試驗(yàn)對(duì)象，試驗(yàn)菌株(大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯桿菌)自醫(yī)院臨床分離得到。動(dòng)物分成7組，各組動(dòng)物給予試驗(yàn)藥的劑量分別為3.5、2.45、1.715、1.20、0.84、0.59和0.41mg/kg體重(以噻丁啶喹啉羧酸計(jì))，小鼠腹腔注射應(yīng)用菌液10分鐘后，皮下注射給藥。試驗(yàn)期間小鼠按正常條件飼養(yǎng)，觀察給藥后小鼠48小時(shí)內(nèi)的生存情況。
鹽酸普原利沙星對(duì)大腸埃希氏菌感染小鼠的體內(nèi)保護(hù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.試驗(yàn)藥(鹽酸普原利沙星)
2.對(duì)照藥(噻丁啶喹啉羧酸)
注ED50的計(jì)算方法為采用bliss法的程序處理，計(jì)算而得。
鹽酸普原利沙星對(duì)肺炎克雷伯桿菌感染小鼠的體內(nèi)保護(hù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.試驗(yàn)藥(鹽酸普原利沙星)
2.對(duì)照藥(噻丁啶喹啉羧酸)
注ED50的計(jì)算方法為采用bliss法的程序處理，計(jì)算而得。
結(jié)果各劑量組中，試驗(yàn)藥與對(duì)照藥組間小鼠的存活率無顯著性差異。本品治療大腸埃希氏菌和肺炎克雷伯桿菌感染小鼠的ED50分別為1.049mg/kg和1.160mg/kg；對(duì)照藥噻丁啶喹啉羧酸治療大腸埃希氏菌和肺炎克雷伯桿菌感染小鼠的ED50則分別為1.042mg/kg和1.242mg/kg。試驗(yàn)表明在小鼠中，鹽酸普原利沙星對(duì)大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯桿菌所致感染有明顯治療效果。
實(shí)施例3.
a.甲磺酸普原利沙星)的制備在1000ml三頸瓶中加入10g制備例1制得的噻丁啶喹啉羧酸和500ml乙醇，室溫?cái)嚢?0分鐘，繼續(xù)攪拌下加入甲磺酸2.70g，攪拌30分鐘，加入50ml蒸餾水和活性炭1.0g，逐漸升溫至回流，保溫2h。反應(yīng)基本完全，溶液變得澄清，趁熱過濾，濾液置冰箱冷藏過夜，大量晶體析出，抽濾，濾餅用乙醇洗滌兩次，每次25ml。所得固體在40℃下減壓干燥10h，得類白色或淺黃色固體10.63g，收率83.4％。
b.注射用甲磺酸普原利沙星的制備取甲磺酸普原利沙星原料50g，置于適當(dāng)無菌容器中，加無菌注射用水到1000ml，攪拌使溶解，然后加配制量的0.05％活性炭，攪拌10分鐘，用無菌抽濾漏斗鋪滅菌濾紙濾過，再用經(jīng)滅菌的G6垂熔玻璃漏斗精濾，濾液經(jīng)冷凍干燥法制成冷凍粉1000瓶，加塞并用鋁蓋密封制得。
c.甲磺酸普原利沙星注射液的制備取200g甲磺酸普原利沙星原料置濃配缸中，加注射用水適量，充分?jǐn)嚢枋怪耆芙猓挥?.1mol/L鹽酸調(diào)pH至5.0-7.0，加入配液量0.05％(w/v)的針用活性炭，回流15min；用0.6μm鈦濾棒過濾脫碳后，將藥液送入稀配缸中，補(bǔ)加注射用水至1000ml，攪拌15min。取樣測(cè)pH值、含量合格后，用0.45μm聚砜過濾器粗濾和0.22μm聚砜過濾器精濾后，將藥液送入下道工序灌裝成1000瓶、熔封，經(jīng)115℃熱壓滅菌30分鐘后，放冷。檢查合格后，包裝即得。
d.甲磺酸普原利沙星輸液的制備取400g甲磺酸普原利沙星原料、氯化鈉(或者是葡萄糖)置濃配缸中，加注射用水適量，充分?jǐn)嚢枋怪耆芙猓挥?.1mol/L鹽酸調(diào)pH至5.0-7.0，加入配液量0.05％(w/v)的針用活性炭，回流15min；用0.6μm鈦濾棒過濾脫碳后，將藥液送入稀配缸中，補(bǔ)加注射用水至100000ml，攪拌15min。取樣測(cè)pH值、含量合格后，用0.45μm聚砜過濾器粗濾和0.22μm聚砜過濾器精濾后，將藥液送入下道工序灌裝成1000瓶、塞塞、軋蓋，經(jīng)115℃熱壓滅菌30分鐘后，放冷。檢查合格后，包裝即得。
試驗(yàn)3實(shí)施例3制備的甲磺酸酸普原利沙星對(duì)大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯桿菌感染小鼠的體內(nèi)保護(hù)作用以噻丁啶喹啉羧酸為對(duì)照，比較研究了甲磺酸普原利沙星對(duì)大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯桿菌感染小鼠的體內(nèi)保護(hù)作用。本研究以昆明種小鼠為試驗(yàn)對(duì)象，試驗(yàn)菌株(大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯桿菌)自醫(yī)院臨床分離得到。動(dòng)物分成7組，各組動(dòng)物給予試驗(yàn)藥的劑量分別為3.5、2.45、1.715、1.20、0.84、0.59和0.41mg/kg體重(以噻丁啶喹啉羧酸計(jì))，小鼠腹腔注射應(yīng)用菌液10分鐘后，皮下注射給藥。試驗(yàn)期間小鼠按正常條件飼養(yǎng)，觀察給藥后小鼠48小時(shí)內(nèi)的生存情況。
甲磺酸普原利沙星對(duì)大腸埃希氏菌感染小鼠的體內(nèi)保護(hù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.試驗(yàn)藥(甲磺酸普原利沙星)
2.對(duì)照藥(噻丁啶喹啉羧酸)
甲磺酸普原利沙星對(duì)肺炎克雷伯桿菌感染小鼠的體內(nèi)保護(hù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.試驗(yàn)藥(甲磺酸普原利沙星)
2.對(duì)照藥(噻丁啶喹啉羧酸)
結(jié)果各劑量組中，試驗(yàn)藥與對(duì)照藥組間小鼠的存活率無顯著性差異。本品治療大腸埃希氏菌和肺炎克雷伯桿菌感染小鼠的ED50分別為0.828mg/kg和1.154mg/kg；對(duì)照藥噻丁啶喹啉羧酸治療大腸埃希氏菌和肺炎克雷伯桿菌感染小鼠的ED50則分別為0.871mg/kg和1.111mg/kg。試驗(yàn)表明在小鼠中，甲磺酸普原利沙星對(duì)大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯桿菌所致感染有明顯治療效果。
實(shí)施例4.
a.天門冬氨酸普原利沙星的制備在1000ml三頸瓶中加入10g制備例1制得的噻丁啶喹啉羧酸和500ml乙醇，室溫?cái)嚢?0分鐘，加入天門冬氨酸3.82g和蒸餾水50ml后，繼續(xù)攪拌半小時(shí)，再加入活性炭1.0g，逐漸升溫至回流，保溫2h。反應(yīng)基本完全，溶液變得澄清，趁熱過濾，濾液置冰箱冷藏過夜，大量晶體析出，抽濾，濾餅用乙醇洗滌兩次，每次25ml。所得固體在40℃下減壓干燥10h，得淺黃色固體11.22g，收率81.2％。
b.注射用天門冬氨酸普原利沙星的制備取天門冬氨酸普原利沙星原料50g，置于適當(dāng)無菌容器中，加無菌注射用水至1000ml，攪拌使溶解，然后加配制量的0.05％活性炭，攪拌10分鐘，用無菌抽濾漏斗鋪滅菌濾紙濾過，再用經(jīng)滅菌的G6垂熔玻璃漏斗精濾，濾液經(jīng)冷凍干燥法制成冷凍粉1000瓶，加塞并用鋁蓋密封制得。
c.天門冬氨酸普原利沙星注射液的制備取200g天門冬氨酸普原利沙星原料置濃配缸中，加注射用水適量，充分?jǐn)嚢枋怪耆芙?；?.1mol/L鹽酸調(diào)pH至5.0-7.0，加入配液量0.05％(w/v)的針用活性炭，回流15min；用0.6μm鈦濾棒過濾脫碳后，將藥液送入稀配缸中，補(bǔ)加注射用水至1000ml，攪拌15min。取樣測(cè)pH值、含量合格后，用0.45μm聚砜過濾器粗濾和0.22μm聚砜過濾器精濾后，將藥液送入下道工序灌裝成1000瓶、熔封，經(jīng)115℃熱壓滅菌30分鐘后，放冷。檢查合格后，包裝即得。
d.天門冬氨酸普原利沙星輸液的制備取400g天門冬氨酸普原利沙星原料、氯化鈉(或者是葡萄糖)置濃配缸中，加注射用水適量，充分?jǐn)嚢枋怪耆芙?；?.1mol/L鹽酸調(diào)pH至5.0-7.0，加入配液量0.05％(w/v)的針用活性炭，回流15min；用0.6μm鈦濾棒過濾脫碳后，將藥液送入稀配缸中，補(bǔ)加注射用水至100000ml，攪拌15min。取樣測(cè)pH值、含量合格后，用0.45μm聚砜過濾器粗濾和0.22μm聚砜過濾器精濾后，將藥液送入下道工序灌裝成1000瓶、塞塞、軋蓋，經(jīng)115℃熱壓滅菌30分鐘后，放冷。檢查合格后，包裝即得。
試驗(yàn)4實(shí)施例4制備的天門冬氨酸普原利沙星對(duì)大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯桿菌感染小鼠的體內(nèi)保護(hù)作用以噻丁啶喹啉羧酸為對(duì)照，比較研究了天門冬氨酸普原利沙星對(duì)大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯桿菌感染小鼠的體內(nèi)保護(hù)作用。本研究以昆明種小鼠為試驗(yàn)對(duì)象，試驗(yàn)菌株(大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯桿菌)自醫(yī)院臨床分離得到。動(dòng)物分成7組，各組動(dòng)物給予試驗(yàn)藥的劑量分別為3.5、2.45、1.715、1.20、0.84、0.59和0.41mg/kg體重(以噻丁啶喹啉羧酸計(jì))，小鼠腹腔注射應(yīng)用菌液10分鐘后，皮下注射給藥。試驗(yàn)期間小鼠按正常條件飼養(yǎng)，觀察給藥后小鼠48小時(shí)內(nèi)的生存情況。
天門冬氨酸普原利沙星對(duì)大腸埃希氏菌感染小鼠的體內(nèi)保護(hù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.試驗(yàn)藥(天門冬氨酸普原利沙星)
2.對(duì)照藥(噻丁啶喹啉羧酸)
天門冬氨酸普原利沙星對(duì)肺炎克雷伯桿菌感染小鼠的體內(nèi)保護(hù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.試驗(yàn)藥(天門冬氨酸普原利沙星)
2.對(duì)照藥(噻丁啶喹啉羧酸)
結(jié)果各劑量組中，試驗(yàn)藥與對(duì)照藥組間小鼠的存活率無顯著性差異。本品治療大腸埃希氏菌和肺炎克雷伯桿菌感染小鼠的ED50分別為0.956mg/kg和1.183mg/kg；對(duì)照藥NM394治療大腸埃希氏菌和肺炎克雷伯桿菌感染小鼠的ED50則分別為0.915mg/kg和1.195mg/kg。試驗(yàn)表明在小鼠中，天門冬氨酸普原利沙星對(duì)大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯桿菌所致感染有明顯治療效果。
權(quán)利要求
1.一種具有抗菌作用的噻丁啶喹啉羧酸鹽化合物，結(jié)構(gòu)如式(I)， 其中R選自枸櫞酸、酒石酸、琥珀酸、富馬酸、馬來酸、草酸、鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硝酸、磷酸、硫酸、亞硫酸，乳酸、乳糖酸、甲磺酸、苯磺酸、天門冬氨酸、氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣、氫氧化鎂或氫氧化鋅。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R代表乳酸、鹽酸、甲磺酸、天門冬氨酸。
3.一種藥物組合物，其特征在于，由權(quán)利要求1的化合物和藥物可接受的載體組成，所述權(quán)利要求1的化合物在組合物中的重量百分比是0.1％-99.9％，藥物可接受的載體在組合物中的重量百分比是0.1％-99.9％。
4.權(quán)利要求3的組合物，其特征在于，其中所述權(quán)利要求1的化合物是(±)6-氟-1-甲基-7-(1-哌嗪基)-4-氧-4氫-[1，3]噻丁啶[3，2-α]喹啉-3-羧酸的乳酸鹽。
5.權(quán)利要求3的組合物，其特征在于，其是注射劑。
6.權(quán)利要求5組合物，其特征在于，所述注射劑選自粉針劑，水針劑，氯化鈉注射劑或葡萄糖注射劑。
7.權(quán)利要求5所述的組合物，其特征在于，單位劑量的注射劑中，藥物活性成分權(quán)利要求2化合物的劑量為10-500mg，其余為藥物可接受的載體。
8.一種試劑盒，內(nèi)含權(quán)利要求6的粉針劑和一種可注射用的溶劑，粉針劑和可注射用的溶劑是分立的，包裝在同一包裝盒內(nèi)，粉針劑與可注射用的溶劑量的配比是按照使用方法配置的，每100mg劑量的粉針劑配以5ml-500ml可注射用的溶劑。
9.權(quán)利要求8的試劑盒，其中可注射用溶劑選自注射用水，注射用氯化鈉輸液劑，注射用葡萄糖輸液劑或其組合。
10.權(quán)利要求9的試劑盒，其中粉針劑與注射液的配比是100mg或200mg粉針劑∶5ml或10ml水∶100ml或250ml或500ml的0.9％氯化鈉注射液或5％葡萄糖注射液。11.權(quán)利要求1-2的化合物或含有它們的組合物在制備一種抗細(xì)菌感染藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及新的噻丁啶喹啉羧酸鹽及其醫(yī)藥抗菌素制劑，包含該醫(yī)藥抗菌素制劑的試劑盒，和該新的噻丁啶喹啉羧酸鹽在制備一種抗細(xì)菌感染藥物中的應(yīng)用。具體說，特別涉及一種新的供注射用可穩(wěn)定貯存的化學(xué)名稱為(±)6－氟－1－甲基－7－(1－哌嗪基)－4－氧－4氫－[1，3]噻丁啶[3，2－α]喹啉－3－羧酸鹽的藥物制劑。本發(fā)明采用以活性形式直接注射給藥，克服了生物利用率低的問題，提高了治療效果。
文檔編號(hào)A61K9/08GK1559411SQ20041003064
公開日2005年1月5日 申請(qǐng)日期2004年4月2日 優(yōu)先權(quán)日2004年3月3日
發(fā)明者魏敏吉, 方利明, 劉玉輝 申請(qǐng)人:劉玉輝