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一種野大麥成熟胚愈傷組織誘導(dǎo)及再生體系建立方法與流程

文檔序號(hào):11781206閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種野大麥成熟胚愈傷組織誘導(dǎo)及再生體系建立方法,其特征在于:步驟如下:

(1)選擇野大麥種子并消毒;

(2)誘導(dǎo)培養(yǎng)基、分化增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基的篩選:

誘導(dǎo)培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+0.1-0.5 mg·L-1 6-BA +1.0-2.0 mg·L-1 2,4-D;

分化增殖培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+0.5-1.5mg/L 6-BA + 0.2-0.4mg/L NAA,

生根培養(yǎng)基:1/2基礎(chǔ)培養(yǎng)基;

所述基礎(chǔ)培養(yǎng)基為:MS培養(yǎng)基+蔗糖30g·L-1+瓊脂10g·L-1;

(3)成熟胚的處理和誘導(dǎo)分化:取步驟(1)中消毒的野大麥種子,置于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng),繼代幾次后轉(zhuǎn)入分化和增殖培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng),繼代幾次后轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng),待分化苗的根長(zhǎng)4-6cm時(shí),將瓶苗移出培養(yǎng)室,自然光下閉瓶煉苗,2d后注入自來(lái)水,自然光下開(kāi)瓶煉苗3d,然后洗凈根部,滅菌,用基質(zhì)培養(yǎng),獲得完整的再生植株。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(2)中,

所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基為:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+0.3 mg·L-1 6-BA +1.5 mg·L-1 2,4-D;

所述分化增殖培養(yǎng)基為:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+0.5mg/L6-BA + 0.2mg/L NAA;

所述生根培養(yǎng)基為:1/2基礎(chǔ)培養(yǎng)基;

所述基礎(chǔ)培養(yǎng)基為:MS培養(yǎng)基+蔗糖30g·L-1+瓊脂10g·L-1。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法,其特征在于:步驟(3)中所述誘導(dǎo)培養(yǎng)的條件為:于恒溫25±2℃條件下黑暗培養(yǎng)30d。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法,其特征在于:步驟(3)中所述分化增殖培養(yǎng)的條件為:光照培養(yǎng),光照強(qiáng)度1500-2000Lux,每天光照16 h·d-1,培養(yǎng)溫度為25℃。

5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法,其特征在于:步驟(3)中所述生根培養(yǎng)的培養(yǎng)條件為:在 25±2℃、光照強(qiáng)度為2000-3000lx、光照時(shí)間16h·d-1條件下培養(yǎng)。

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