本發(fā)明屬于分析化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種改善煙氣余味的香氣成分的檢測(cè)及判定方法。

背景技術(shù)：

吡嗪類物質(zhì)是卷煙煙氣中一類重要風(fēng)味物質(zhì)，賦予煙氣濃郁的烤香、香草香等怡人的香味，與煙草固有的香氣非常容易協(xié)調(diào)，能很好修飾和提高卷煙的自然煙香，而且能掩蓋部分雜氣，因此可增強(qiáng)和改進(jìn)卷煙香氣，改善吃味。吡嗪類物質(zhì)的含量、比例與煙氣的香吃味有關(guān)，通常吡嗪類物質(zhì)含量高時(shí)表現(xiàn)為濃香型，含量低時(shí)表現(xiàn)為清香型。

2,6-二甲基吡嗪為白色固體，溶于乙醇等有機(jī)溶劑，存在于肉、可可、咖啡、土豆片、威士忌中，具有烤香、咖啡、花生、土豆氣味，用于調(diào)配肉類、巧克力、咖啡、堅(jiān)果香型的食用香精中，適用于烘烤食品、堅(jiān)果類食品、乳制品、肉類、煙草等。因此，研究吸煙者唾液中2,6-二甲基吡嗪的含量，尋找吸煙者唾液中2,6-二甲基吡嗪的含量與感官評(píng)價(jià)結(jié)果的關(guān)系對(duì)卷煙產(chǎn)品開發(fā)及維護(hù)具有重要的意義。

2,6-二甲基吡嗪沸點(diǎn)較低，容易氣化，目前主要采用gc-ms法進(jìn)行分析檢測(cè)，靈敏度高。但目前未見唾液中2,6-二甲基吡嗪測(cè)定方法的報(bào)道，唾液中的2,6-二甲基吡嗪含量低，且唾液的主要基質(zhì)為水，難于用氣相色譜直接進(jìn)樣分析，因此，需要開發(fā)一種簡(jiǎn)單快速、高靈敏度、定量準(zhǔn)確的唾液中2,6-二甲基吡嗪的測(cè)定方法。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供了一種改善煙氣余味的香氣成分2,6-二甲基吡嗪的檢測(cè)及判定方法，用于唾液中改善煙氣余味的香氣成分2,6-二甲基吡嗪的檢測(cè)及判定，具有快速、準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)。

本發(fā)明所采用的技術(shù)方案如下：

一種改善煙氣余味的香氣成分2,6-二甲基吡嗪的檢測(cè)方法如下：

用唾液收集管收集吸煙者唾液1~2ml，離心后，取0.5~1ml上層清液經(jīng)超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀分析，根據(jù)組分峰面積定量，檢測(cè)2,6-二甲基吡嗪含量；

所述的液相色譜條件如下：色譜柱選用watersacquityuplchsst3柱(1.8μm，2.1×100mm)或等效柱，流動(dòng)相選用甲醇/0.1-0.5%的乙酸水溶液=10/90，柱溫30-39℃，流速0.1-0.5ml/min，進(jìn)樣量5~10μl；

所述的質(zhì)譜條件如下：離子源：電噴霧電離源（esi），掃描方式：正離子掃描，檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（mrm），電噴霧電壓：4000~5500v，離子源溫度：400~650℃，輔助氣gas1壓力：0.238~0.349mpa，輔助氣gas2壓力：0.364~0.483mpa；選擇離子監(jiān)測(cè)模式，離子選擇參數(shù)：2,6-二甲基吡嗪定量離子對(duì)為108.1/40.2，dp電壓為10~15v，ce電壓為8~13v，cxp電壓為1.5~2.0v；定性離子對(duì)為108.1/42.1，dp電壓為12~17v，ce電壓為15~25v，cxp電壓為1.0~1.5v。

一種改善煙氣余味的香氣成分2,6-二甲基吡嗪的判定方法如下：

用相關(guān)性分析方法，分析吸煙者唾液中2,6-二甲基吡嗪的含量與感官評(píng)價(jià)結(jié)果的關(guān)系；用逐步回歸分析法分析吸煙者唾液中2,6-二甲基吡嗪的含量與余味之間的關(guān)系。

本發(fā)明的有益效果如下：

（1）、處理步驟簡(jiǎn)單，只需樣品捕集、離心后即可進(jìn)樣分析，樣品中待測(cè)組分損失較少；

（2）、選擇性好，該方法采用串聯(lián)質(zhì)譜定量，減少了干擾離子，樣品分析選擇性得到了提高。

（3）、用唾液收集管收集1~2ml唾液易于保存和進(jìn)行前處理，液相色譜條件使2,6-二甲基吡嗪色譜峰保持最佳峰型且保證雜質(zhì)峰干擾最小，質(zhì)譜條件使2,6-二甲基吡嗪檢測(cè)的靈敏度達(dá)到最佳。

附圖說明

圖1為唾液中2,6-二甲基吡嗪與余味的回歸圖。

圖2是實(shí)施例1測(cè)定2,6-二甲基吡嗪的超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜色譜圖（其中，保留時(shí)間為5.52min的色譜峰代表2,6-二甲基吡嗪）。

具體實(shí)施方式

下面將結(jié)合實(shí)施例中對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是對(duì)本發(fā)明一部分實(shí)例，而不是全部的實(shí)例?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有付出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。

實(shí)施例中未注明具體技術(shù)或條件者，按照本領(lǐng)域內(nèi)的文獻(xiàn)所描述的技術(shù)或條件或者按照產(chǎn)品說明書進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過購買獲得的常規(guī)產(chǎn)品。

實(shí)施例1

用唾液收集管收集吸煙者唾液2ml，離心后，取1ml上層清液經(jīng)超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀分析，根據(jù)組分峰面積定量（外標(biāo)法定量），檢測(cè)2,6-二甲基吡嗪含量；

所述的液相色譜條件如下：色譜柱選用watersacquityuplchsst3柱(1.8μm，2.1×100mm)或等效柱，流動(dòng)相選用甲醇/0.5%的乙酸水溶液=10/90，柱溫39℃，流速0.5ml/min，進(jìn)樣量10μl。

所述的質(zhì)譜條件如下：離子源：電噴霧電離源（esi），掃描方式：正離子掃描，檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（mrm），電噴霧電壓：5500v，離子源溫度：650℃，輔助氣gas1壓力：0.349mpa，輔助氣gas2壓力：0.483mpa；選擇離子監(jiān)測(cè)模式，離子選擇參數(shù)：2,6-二甲基吡嗪定量離子對(duì)為108.1/40.2，dp電壓為15v，ce電壓為13v，cxp電壓為2.0v；定性離子對(duì)為108.1/42.1，dp電壓為17v，ce電壓為25v，cxp電壓為1.5v。

按照上述方法，同一樣品5次平行測(cè)定，2,6-二甲基吡嗪的平均值為0.0251mg/l，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.47%。如表1所示。

表1卷煙樣品吸食者唾液中2,6-二甲基吡嗪含量檢測(cè)結(jié)果

實(shí)施例2

用唾液收集管收集吸煙者唾液1ml，離心后，取0.5ml上層清液經(jīng)超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀分析，根據(jù)組分峰面積定量（外標(biāo)法定量），檢測(cè)2,6-二甲基吡嗪含量；

所述的液相色譜條件如下：色譜柱選用watersacquityuplchsst3柱(1.8μm，2.1×100mm)或等效柱，流動(dòng)相選用甲醇/0.1%的乙酸水溶液=10/90，柱溫30℃，流速0.1ml/min，進(jìn)樣量5μl。

所述的質(zhì)譜條件如下：離子源：電噴霧電離源（esi），掃描方式：正離子掃描，檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（mrm），電噴霧電壓：4000v，離子源溫度：400℃，輔助氣gas1壓力：0.238mpa，輔助氣gas2壓力：0.364mpa；選擇離子監(jiān)測(cè)模式，離子選擇參數(shù)：2,6-二甲基吡嗪定量離子對(duì)為108.1/40.2，dp電壓為10v，ce電壓為8v，cxp電壓為1.5v；定性離子對(duì)為108.1/42.1，dp電壓為12v，ce電壓為15v，cxp電壓為1.0v。

按照上述方法，選擇6個(gè)樣品，每個(gè)樣品平行測(cè)定5次，每個(gè)樣品中2,6-二甲基吡嗪5次測(cè)定的平均含量和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差如表2所示。

表2不同卷煙樣品吸食者唾液中2,6-二甲基吡嗪含量檢測(cè)結(jié)果

組織7名相關(guān)人員對(duì)樣品進(jìn)行感官評(píng)析，取7名人員評(píng)價(jià)的平均值，結(jié)果如下表3所示。

表3感官評(píng)價(jià)結(jié)果

用相關(guān)性分析方法，分析吸煙者唾液中2,6-二甲基吡嗪的含量與感官評(píng)價(jià)結(jié)果的關(guān)系，結(jié)果如表4所示，2,6-二甲基吡嗪與余味呈現(xiàn)顯著性(p<0.05)高度(|ρ|>0.7)正相關(guān)關(guān)系，說明隨著吡嗪類化合物中的2,6-二甲基吡嗪的增加，感官中的余味得分會(huì)呈現(xiàn)隨之升高的趨勢(shì)。

表4唾液吡嗪類化合物與感官得分的相關(guān)系數(shù)信息

注:*表示在0.05水平（雙側(cè)）上顯著相關(guān)。

用逐步回歸分析法分析吸煙者唾液中2,6-二甲基吡嗪的含量與余味之間的關(guān)系，得到的回歸模型r²為0.677，模型p<0.05，即發(fā)現(xiàn)2,6-二甲基吡嗪的變化對(duì)余味得分具有顯著的貢獻(xiàn)，結(jié)果如表5和圖1所示。

表5唾液2,6-二甲基吡嗪與余味的逐步回歸分析信息