本發(fā)明屬于醫(yī)藥生產(chǎn)工業(yè)領(lǐng)域。具體地，本發(fā)明涉及一種分離測定藥物制劑中防腐殺菌劑和抗氧化劑的方法。
背景技術(shù)：
：防腐殺菌劑和抗氧化劑是指天然或合成的化學(xué)成分，用于加入食品、藥品中，以延遲微生物生長或化學(xué)變化引起的腐敗變質(zhì)，從而延長其保質(zhì)期。尼泊金酯類是國際上公認(rèn)的廣譜性高效食品藥品防腐殺菌劑，尼泊金酯類包含尼泊金甲酯(也稱對羥基苯甲酸甲酯)、尼泊金丙酯(也稱對羥基苯甲酸丙酯)等，根據(jù)物化特性的不同應(yīng)用于食品、醫(yī)藥以及其他行業(yè)的防腐殺菌，應(yīng)用非常廣泛。常用的抗氧化劑有間甲酚、苯甲酸等，抗氧化劑能夠保護(hù)食品、藥品免受氧化損傷而變質(zhì)。實際藥品生產(chǎn)中，為了保證藥品取得更好的穩(wěn)定效果，一般會把防腐殺菌劑和抗氧化劑配合使用。而抗氧化劑和防腐殺菌劑的使用不當(dāng)會造成一定的副作用，長期過量使用更會對人體健康造成及其不良的影響。因此控制藥品制劑中防腐殺菌劑和抗氧化劑的限度是必須的。然而現(xiàn)有的檢測方法對于同時存在多種添加劑的樣品還無法將它們很好地分離并實現(xiàn)對其各自濃度的測定。因而，開發(fā)一種可以有效地同時測定藥物制劑中防腐殺菌劑和抗氧化劑的方法非常有必要。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是提供一種同時分離測定藥物制劑(例如凝膠劑、軟膏劑等制劑類型)中的防腐殺菌劑(對羥基苯甲酸甲酯、對羥基甲酸丙酯)和抗氧化劑(間甲酚)的方法。本發(fā)明的另一目的是提供一種測定藥物制劑中對羥基苯甲酸甲酯、間甲酚和對羥基苯甲酸丙酯含量的方法。在本發(fā)明的第一方面中，提供了一種分離測定藥物制劑中防腐殺菌劑和抗氧化劑的方法，包括步驟：將藥物制劑樣品溶液注入高效液相色譜儀，并采用如下流動相和色譜條件對藥物制劑樣品中防腐殺菌劑和抗氧化劑進(jìn)行分離測定；流動相：流動相A：100％有機溶劑；流動相B：0.1％～1％酸性的水溶液；色譜條件：十八烷基硅烷鍵合硅膠柱；流速：0.9～1.1mL/分鐘；柱溫：30～40℃；檢測波長：270～280nm；進(jìn)樣體積：10～50μl；運行時間：20～30分鐘；梯度洗脫程序:時間(分鐘)流動相A％(體積百分比)流動相B％(體積百分比)045555455588010158010174555204555。在另一優(yōu)選例中，所述藥物制劑為外用制劑。在另一優(yōu)選例中，所述藥物制劑包括凝膠劑、軟膏劑、涂劑、氣霧劑、滴眼劑。在另一優(yōu)選例中，所述藥物制劑是凝膠劑。在另一優(yōu)選例中，所述凝膠劑是貝卡普勒明凝膠。在另一優(yōu)選例中，所述防腐殺菌劑為尼泊金酯類。在另一優(yōu)選例中，所述尼泊金酯類包括尼泊金甲酯、尼泊金丙酯等。在另一優(yōu)選例中，所述尼泊金甲酯是對羥基苯甲酸甲酯。在另一優(yōu)選例中，所述尼泊金丙酯是對羥基苯甲酸丙酯。在另一優(yōu)選例中，所述抗氧化劑包括間甲酚、苯甲酸。在另一優(yōu)選例中，所述抗氧化劑是間甲酚。在另一優(yōu)選例中，所述流動相A為100％甲醇或100％乙腈。在另一優(yōu)選例中，所述流動相A為100％乙腈。在另一優(yōu)選例中，所述流動相B選自下組：0.1％～1％甲酸的水溶液、0.1％～1％乙酸的水溶液，0.1％～1％三氟乙酸的水溶液。在另一優(yōu)選例中，所述流動相B為0.1％～1％甲酸的水溶液。在另一優(yōu)選例中，所述流動相B為0.5％酸性的水溶液。在另一優(yōu)選例中，流速：1.0mL/分鐘。在另一優(yōu)選例中，柱溫：35℃。在另一優(yōu)選例中，檢測波長：278nm。在另一優(yōu)選例中，進(jìn)樣體積：25μL。在另一優(yōu)選例中，運行時間：20分鐘。本發(fā)明第二方面提供了一種分離測定凝膠劑中防腐殺菌劑和抗氧化劑的方法，包括步驟：將凝膠劑樣品溶液注入液相色譜儀，并采用如下流動相和色譜條件對凝膠劑樣品中對羥基苯甲酸甲酯、間甲酚和對羥基苯甲酸丙酯的含量進(jìn)行測定；流動相：流動相A：100％乙腈；流動相B：0.5％甲酸的水溶液；色譜條件：十八烷基硅烷鍵合硅膠柱；流速：1.0mL/分鐘；柱溫：35℃；檢測波長：278nm；進(jìn)樣體積：25μL；運行時間：20分鐘；梯度洗脫程序:時間(分鐘)流動相A(體積百分比)流動相B％(體積百分比)045％55％545％55％880％10％1580％10％1745％55％2045％55％。在另一優(yōu)選例中，所述凝膠劑樣品溶液中，對羥基苯甲酸甲酯濃度為0.0317～0.0950mg/ml、間甲酚濃度為0.0178～0.0534mg/ml和對羥基苯甲酸丙酯濃度為0.0036～0.0107mg/ml。在另一優(yōu)選例中，所述藥物制劑樣品溶液是藥物制劑樣品和稀釋劑配制的；和/或所述凝膠劑樣品溶液是凝膠劑樣品和稀釋劑配制的。在另一優(yōu)選例中，所述稀釋劑為甲醇和水的混合物。在另一優(yōu)選例中，所述稀釋劑為甲醇和水體積比為1：1的混合物。在另一優(yōu)選例中，配制凝膠劑樣品溶液包括步驟：稱取凝膠劑樣品約2g置于50ml容量瓶，加30ml稀釋劑震搖使凝膠劑分散，超聲10分鐘，放冷至室溫，再用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，得到凝膠劑樣品溶液。在另一優(yōu)選例中，采用外標(biāo)法測定凝膠劑樣品中對羥基苯甲酸甲酯、間甲酚、對羥基苯甲酸丙酯的含量。在另一優(yōu)選例中，所述方法還包括步驟：配制含對羥基苯甲酸甲酯、間甲酚和對羥基苯甲酸丙酯的對照品溶液。在另一優(yōu)選例中，所述對照品溶液是采用對羥基苯甲酸甲酯、間甲酚和對羥基苯甲酸丙酯和稀釋劑配制的。在另一優(yōu)選例中，所述稀釋劑為甲醇和水的混合物。在另一優(yōu)選例中，所述稀釋劑為甲醇和水體積比為1：1的混合物。在另一優(yōu)選例中，配制對照品溶液包括步驟：稱取對羥基苯甲酸甲酯約160mg、間甲酚約90mg、對羥基苯甲酸丙酯約18mg分別置于50ml容量瓶，加稀釋劑溶解并稀釋至刻度，搖勻；然后分別從三個容量瓶中移取1ml置于另一個50ml容量瓶，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，得到對照品溶液。在另一優(yōu)選例中，所述十八烷基硅烷鍵合硅膠柱為AgilentC184.6×250mm；和/或所述高效液相色譜儀為Agilent1260。應(yīng)理解，在本發(fā)明范圍內(nèi)中，本發(fā)明的上述各技術(shù)特征和在下文(如實施例)中具體描述的各技術(shù)特征之間都可以互相組合，從而構(gòu)成新的或優(yōu)選的技術(shù)方案。限于篇幅，在此不再一一累述。附圖說明圖1顯示了對羥基苯甲酸甲酯的測試峰面積和其濃度的線性關(guān)系圖。圖2顯示了間甲酚的測試峰面積和其濃度的線性關(guān)系圖。圖3顯示了對羥基苯甲酸丙酯的測試峰面積和其濃度的線性關(guān)系圖。圖4顯示了凝膠劑中對羥基苯甲酸甲酯、間甲酚和對羥基苯甲酸丙酯的測試峰分離情況圖。圖5顯示了軟膏劑中對羥基苯甲酸甲酯、間甲酚和對羥基苯甲酸丙酯的測試峰分離情況圖。具體實施方式本發(fā)明人經(jīng)過廣泛而深入的研究，通過充分的方法優(yōu)化，條件篩選，調(diào)整梯度洗脫條件，提供一種全新的分離凝膠劑中的對羥基苯甲酸甲酯、間甲酚和對羥基苯甲酸丙酯的方法，該方法實現(xiàn)三者的完全分離，分離度大于1.5，而且該方法避免了凝膠劑中其他成分的干擾，具有精密度高，重復(fù)性好等優(yōu)點。在此基礎(chǔ)上，發(fā)明人完成了本發(fā)明。分離測定藥物制劑中防腐殺菌劑和抗氧化劑的方法本發(fā)明提供了一種分離測定藥物制劑中防腐殺菌劑和抗氧化劑的方法，包括步驟：將藥物制劑樣品溶液注入高效液相色譜儀，并采用如下流動相和色譜條件對藥物制劑樣品中防腐殺菌劑和抗氧化劑進(jìn)行分離測定；流動相：流動相A：100％有機溶劑；流動相B：0.1％～1％酸性的水溶液；色譜條件：十八烷基硅烷鍵合硅膠柱；流速：0.9～1.1mL/分鐘；柱溫：30～40℃；檢測波長：270～280nm；進(jìn)樣體積：10～50μl；運行時間：20～30分鐘；梯度洗脫程序:時間(分鐘)流動相A％(體積百分比)流動相B％(體積百分比)045555455588010158010174555204555。所述藥物制劑包括外用制劑(包括凝膠劑(如貝卡普勒明凝膠)、軟膏劑、涂劑、氣霧劑、滴眼劑等)、注射劑、口服制劑。所述防腐殺菌劑為尼泊金酯類。所述尼泊金酯類包括尼泊金甲酯、尼泊金丙酯等。所述尼泊金甲酯是對羥基苯甲酸甲酯。所述尼泊金丙酯是對羥基苯甲酸丙酯。所述抗氧化劑包括間甲酚、苯甲酸。所述流動相A為100％甲醇或100％乙腈。所述流動相B選自下組：0.1％～1％甲酸的水溶液、0.1％～1％乙酸的水溶液，0.1％～1％三氟乙酸的水溶液。在另一優(yōu)選例中，所述流動相B為0.5％酸性的水溶液。在另一優(yōu)選例中，流速：1.0mL/分鐘。在另一優(yōu)選例中，柱溫：35℃。在另一優(yōu)選例中，檢測波長：278nm。在另一優(yōu)選例中，進(jìn)樣體積：25μL。在另一優(yōu)選例中，運行時間：20分鐘。分離測定凝膠劑中防腐殺菌劑和抗氧化劑的方法本發(fā)明提供了一種分離測定凝膠劑中防腐殺菌劑和抗氧化劑的方法，包括步驟：將凝膠劑樣品溶液注入液相色譜儀，并采用如下流動相和色譜條件對凝膠劑樣品中對羥基苯甲酸甲酯、間甲酚和對羥基苯甲酸丙酯的含量進(jìn)行測定；流動相：流動相A：100％乙腈；流動相B：0.5％甲酸的水溶液；色譜條件：十八烷基硅烷鍵合硅膠柱；流速：1.0mL/分鐘；柱溫：35℃；檢測波長：278nm；進(jìn)樣體積：25μL；運行時間：20分鐘；梯度洗脫程序:時間(分鐘)流動相A(體積百分比)流動相B％(體積百分比)045％55％545％55％880％10％1580％10％1745％55％2045％55％。在另一優(yōu)選例中，所述凝膠劑樣品溶液中，對羥基苯甲酸甲酯濃度為0.0317～0.0950mg/ml、間甲酚濃度為0.0178～0.0534mg/ml和對羥基苯甲酸丙酯濃度為0.0036～0.0107mg/ml。上述方法中，還包括步驟：配制藥物制劑樣品溶液和凝膠劑樣品溶液。所述藥物制劑樣品溶液是藥物制劑樣品和稀釋劑配制的。所述凝膠劑樣品溶液是凝膠劑樣品和稀釋劑配制的。所述稀釋劑為甲醇和水的混合物。在另一優(yōu)選例中，所述稀釋劑為甲醇和水體積比為1：1的混合物。在另一優(yōu)選例中，配制凝膠劑樣品溶液包括步驟：稱取凝膠劑樣品約2g置于50ml容量瓶，加30ml稀釋劑震搖使凝膠劑分散，超聲10分鐘，放冷至室溫，再用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，得到凝膠劑樣品溶液。本發(fā)明的方法中，可采用外標(biāo)法測定凝膠劑樣品中對羥基苯甲酸甲酯、間甲酚、對羥基苯甲酸丙酯的含量。上述方法中，還包括步驟：配制含對羥基苯甲酸甲酯、間甲酚和對羥基苯甲酸丙酯的對照品溶液。所述對照品溶液是采用對羥基苯甲酸甲酯、間甲酚和對羥基苯甲酸丙酯和稀釋劑配制的。在另一優(yōu)選例中，所述稀釋劑為甲醇和水的混合物。在另一優(yōu)選例中，所述稀釋劑為甲醇和水體積比為1：1的混合物。在另一優(yōu)選例中，配制對照品溶液包括步驟：稱取對羥基苯甲酸甲酯約160mg、間甲酚約90mg、對羥基苯甲酸丙酯約18mg分別置于50ml容量瓶，加稀釋劑溶解并稀釋至刻度，搖勻；然后分別從三個容量瓶中移取1ml置于另一個50ml容量瓶，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，得到對照品溶液。在另一優(yōu)選例中，所述十八烷基硅烷鍵合硅膠柱為AgilentC184.6×250mm；和/或所述高效液相色譜儀為Agilent1260。本發(fā)明的主要優(yōu)點包括：1.提供了一種用液相色譜法分離凝膠劑中對羥基苯甲酸甲酯、間甲酚和對羥基苯甲酸丙酯的方法。2.提供了一種用液相色譜法測定凝膠劑中對羥基苯甲酸甲酯、間甲酚和對羥基苯甲酸丙酯含量的方法。以上方法采用了特定的流動相和色譜條件：采用十八烷基硅烷鍵合硅膠的色譜柱，以100％乙腈作為流動相A，以0.5％甲酸的水溶液作為流動相B，進(jìn)行梯度洗脫程序，流速為1.0mL/分鐘，柱溫為35℃，檢測波長為278nm，進(jìn)樣體積為25μL，運行時間為20分鐘。3.本發(fā)明的方法可以有效控制凝膠劑(尤其是藥用凝膠劑)中對羥基苯甲酸甲酯、間甲酚和對羥基苯甲酸丙酯的含量，從而可以有效地保障藥品質(zhì)量。下面結(jié)合具體實施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常按照常規(guī)條件，或按照制造廠商所建議的條件。除非另外說明，否則百分比和份數(shù)按重量計算。試劑與原料對羥基苯甲酸甲酯購自國藥化學(xué)試劑集團(tuán)；間甲酚購自國藥化學(xué)試劑集團(tuán)；對羥基苯甲酸丙酯購自國藥化學(xué)試劑集團(tuán)；實施例1用液相色譜法分離測定凝膠劑中對羥基苯甲酸甲酯、間甲酚和對羥基苯甲酸丙酯。步驟如下：1.空白溶液：稀釋劑(甲醇：水＝50：50)；2.對照品溶液的配制：稱取對羥基苯甲酸甲酯158.4mg、間甲酚89.01mg、對羥基苯甲酸丙酯17.9mg分別置于50ml容量瓶，分別加稀釋劑溶解并稀釋至刻度，搖勻。然后分別從三個容量瓶中移取1ml置于另一個50ml容量瓶，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。3.供試品溶液的配制：稱取供試品(貝卡普勒明凝膠)2.0359g置于50ml容量瓶，加30ml稀釋劑震搖使凝膠劑分散，超聲10分鐘，放冷至室溫，再用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。4.空白輔料溶液的配制：取空白凝膠劑(與供試品的區(qū)別在于：不含對羥基苯甲酸甲酯、間甲酚、對羥基苯甲酸丙酯)約2g置于50ml容量瓶，加10ml稀釋劑震搖使凝膠劑分散，再加入約30ml稀釋劑，超聲10分鐘，放冷至室溫，再用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，作為空白輔料溶液。5.流動相流動相A：100％乙腈；流動相B：0.5％甲酸的水溶液。6.色譜條件：十八烷基硅烷鍵合硅膠柱(AgilentC184.6×250mm)；流速：1.0mL/分鐘；柱溫：35℃；檢測波長：278nm；進(jìn)樣體積：25μL；運行時間：20分鐘。梯度洗脫程序：時間(分鐘)流動相A％(體積百分比)流動相B％(體積百分比)0455554555880101580101745552045557.分析與計算：分別精密量取25μL上述配制的空白溶液、空白輔料溶液、對照品溶液和供試品溶液，注入液相色譜儀(儀器型號：Agilent1260)，并記錄色譜圖。圖4顯示了凝膠劑中對羥基苯甲酸甲酯、間甲酚和對羥基苯甲酸丙酯的測試峰分離情況圖。以外標(biāo)法測定供試品凝膠劑中對羥基苯甲酸甲酯、間甲酚和對羥基苯甲酸丙酯的含量。結(jié)果詳見表1和表2。含量計算公式：其中：A對—對照品溶液中峰面積；A供—供試品溶液中峰面積；m對—對照品稱樣量(mg)；m供—供試品稱樣量(mg)；P對—對照品純度(％)。檢驗分析表1注：NA表示不適用；由表1可知：由對照品溶液的保留時間可以準(zhǔn)確定位出樣品溶液中的三種目標(biāo)成分，分離度均大于1.5，本方法能使對照品溶液和樣品溶液中的對羥基苯甲酸甲酯、間甲酚和對羥基苯甲酸丙酯達(dá)到很好分離；通過外標(biāo)法計算，能準(zhǔn)確計算出樣品溶液中的成分含量。數(shù)據(jù)分析表2由表2可知：對照品溶液連續(xù)重復(fù)進(jìn)樣，對羥基苯甲酸甲酯、間甲酚和對羥基苯甲酸丙酯面積的RSD均小于2.0％；重復(fù)進(jìn)樣的樣品溶液的三種成分含量，相對平均偏差均小于5.0％；本方法的精密度高，重復(fù)性良好。實施例2用液相色譜法分離測定軟膏劑中對羥基苯甲酸甲酯、間甲酚和對羥基苯甲酸丙酯。步驟如下：1.空白溶液：稀釋劑(甲醇：水＝50：50)；2.對照品溶液的配制：稱取對羥基苯甲酸甲酯158.4mg、間甲酚89.01mg、對羥基苯甲酸丙酯17.9mg分別置于50ml容量瓶，分別加稀釋劑溶解并稀釋至刻度，搖勻。然后分別從三個容量瓶中移取1ml置于另一個50ml容量瓶，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。3.供試品溶液的配制：稱取供試品(環(huán)孢素A軟膏)2.0428g置于50ml容量瓶，加30ml稀釋劑震搖使軟膏分散，超聲10分鐘，放冷至室溫，再用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。4.空白輔料溶液的配制：取空白軟膏(與供試品溶液的區(qū)別在于：不含對羥基苯甲酸甲酯、間甲酚、對羥基苯甲酸丙酯)約2g置于50ml容量瓶，加10ml稀釋劑震搖使軟膏分散，再加入約30ml稀釋劑，超聲10分鐘，放冷至室溫，再用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，作為空白輔料溶液。5.流動相流動相A：100％乙腈；流動相B：0.5％甲酸的水溶液。6.色譜條件：十八烷基硅烷鍵合硅膠柱(AgilentC184.6×250mm)；流速：1.0mL/分鐘；柱溫：35℃；檢測波長：278nm；進(jìn)樣體積：25μL；運行時間：20分鐘。梯度洗脫程序：時間(分鐘)流動相A％(體積百分比)流動相B％(體積百分比)0455554555880101580101745552045557.分析與計算：分別精密量取25μL上述配制的空白溶液、空白輔料溶液、對照品溶液和供試品溶液，注入液相色譜儀(儀器型號：Agilent1260)，并記錄色譜圖。圖5顯示了軟膏劑中對羥基苯甲酸甲酯、間甲酚和對羥基苯甲酸丙酯的測試峰分離情況圖。以外標(biāo)法測定供試品軟膏劑中對羥基苯甲酸甲酯、間甲酚和對羥基苯甲酸丙酯的含量。結(jié)果詳見表3和表4。含量計算公式：其中：A對—對照品溶液中峰面積；A供—供試品溶液中峰面積；m對—對照品稱樣量(mg)；m供—供試品稱樣量(mg)；P對—對照品純度(％)。檢驗分析表3注：NA表示不適用；由表3可知：由對照品溶液的保留時間可以準(zhǔn)確定位出樣品溶液中的三種目標(biāo)成分，分離度均大于1.5，本方法能使對照品溶液和樣品溶液中的對羥基苯甲酸甲酯、間甲酚和對羥基苯甲酸丙酯達(dá)到很好分離；通過外標(biāo)法計算，能準(zhǔn)確計算出樣品溶液中的成分含量。數(shù)據(jù)分析表4由表4可知：對照品溶液連續(xù)重復(fù)進(jìn)樣，對羥基苯甲酸甲酯、間甲酚和對羥基苯甲酸丙酯面積的RSD均小于2.0％；重復(fù)進(jìn)樣的樣品溶液的三種成分含量，相對平均偏差均小于5.0％；本方法的精密度高，重復(fù)性良好。實施例3線性曲線測試1.線性測試溶液的配制：稱取對羥基苯甲酸甲酯160mg、間甲酚90mg、對羥基苯甲酸丙酯18mg分別置于50ml容量瓶，加稀釋劑溶解并稀釋至刻度，搖勻，然后分別從三個容量瓶中移取0.5ml、0.8ml、1ml、1.2ml或1.5ml置于另一個50ml容量瓶，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，作為5個不同濃度的對照品線性溶液。分別精密量取25μL上述配制的5個不同濃度的對照品線性溶液，注入液相色譜儀，并采用實施例1中的流動相和色譜條件，并記錄色譜圖。計算測得的峰面積，結(jié)果如表5所示。并根據(jù)測得的峰面積和實際濃度進(jìn)行線性分析，并繪制線性曲線(如圖1、圖2、圖3所示)。數(shù)據(jù)分析表5結(jié)果討論：實施例1：根據(jù)實驗結(jié)果(見表1、表2)可知，本發(fā)明提供的液相色譜方法可以有效地分離樣品(如凝膠劑樣品)中對羥基苯甲酸甲酯、間甲酚和對羥基苯甲酸丙酯，并能有效測定這三種成分的含量，具有精密度高，重復(fù)性好等優(yōu)點。且該方法中，空白溶液、空白輔料溶液對三種目標(biāo)成分不產(chǎn)生干擾。實施例2：發(fā)明人參照實施例1的方法，根據(jù)實驗結(jié)果(見表3、表4)同樣對軟膏劑(如環(huán)孢素A軟膏)樣品進(jìn)行了測試，發(fā)現(xiàn)該方法同樣可以分離測定對羥基苯甲酸甲酯、間甲酚和對羥基苯甲酸丙酯這三種成分的含量。實施例3：根據(jù)實驗結(jié)果(見表5和圖1～圖3)可知，本發(fā)明提供的液相色譜方法對樣品中的對羥基苯甲酸甲酯、間甲酚和對羥基苯甲酸丙酯的分離測定，在對羥基苯甲酸甲酯濃度為0.0317～0.0950mg/ml、間甲酚濃度為0.0178～0.0534mg/ml和對羥基苯甲酸丙酯濃度為0.0036～0.0107mg/ml的范圍內(nèi)，與峰面積具有良好的線性關(guān)系。在本發(fā)明提及的所有文獻(xiàn)都在本申請中引用作為參考，就如同每一篇文獻(xiàn)被單獨引用作為參考那樣。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明的上述講授內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對本發(fā)明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權(quán)利要求書所限定的范圍。當(dāng)前第1頁1 2 3