專利名稱：一種酒石酸托特羅定原料或制劑的有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種酒石酸托特羅定原料或制劑的有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
托特羅定為競(jìng)爭(zhēng)性M受體拮抗劑，對(duì)膀胱的選擇性明顯強(qiáng)于對(duì)唾液腺的選擇性， 其對(duì)膀胱收縮的抑制約為對(duì)唾液腺的20倍。用于治療由膀胱刺激而引起的小便失禁、尿頻和尿急等癥狀。目前，酒石酸托特羅定原料和制劑有關(guān)物質(zhì)測(cè)定方法已經(jīng)收載于國(guó)家轉(zhuǎn)正標(biāo)準(zhǔn)， 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)號(hào)分別為WSl-(X-181)-2003Z、WSl-(X-182)-2003Z，其中有關(guān)物質(zhì)測(cè)定方法以甲醇-磷酸緩沖鹽(取水500ml，加磷酸3ml，用二乙胺調(diào)節(jié)pH值至7. 2) (80 20)為流動(dòng)相， 檢測(cè)波長(zhǎng)為282nm。在此條件下，酒石酸托特羅定保留時(shí)間約4. Omin，用DAD檢測(cè)器顯示主峰峰純度不合適，隨后降低流動(dòng)相中有機(jī)相的比例，峰形較差，且峰純度仍不合適，同時(shí)試驗(yàn)結(jié)果表明選擇的波長(zhǎng)不合理在波長(zhǎng)282nm下，一些雜質(zhì)不易檢出。由于涉及酒石酸托特羅定原料和制劑有關(guān)物質(zhì)測(cè)定方法的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)存在上述缺點(diǎn)，研究一種專屬性強(qiáng)、靈敏度高的酒石酸托特羅定原料和制劑中有關(guān)物質(zhì)的檢測(cè)方法顯得至關(guān)重要。

發(fā)明內(nèi)容
鑒于現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷，本發(fā)明的目的在于通過對(duì)流動(dòng)相、固定相、檢測(cè)波長(zhǎng)等方面進(jìn)行改進(jìn)，提供了一種酒石酸托特羅定原料或制劑的有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)方法，可用于酒石酸托特羅定及其制劑生產(chǎn)中的質(zhì)量控制。該方法具有流動(dòng)相的配制操作簡(jiǎn)單，分析方法穩(wěn)定，靈敏度高的特點(diǎn)。為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，發(fā)明人通過大量試驗(yàn)，最終獲得如下技術(shù)方案—種酒石酸托特羅定原料或制劑的有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)方法，其特征在于用高效液相色譜法進(jìn)行檢測(cè)，固定相是氰基鍵和硅膠為填料的色譜柱，流動(dòng)相是磷酸鹽緩沖液與乙腈的混合液，檢測(cè)波長(zhǎng)為215nm。進(jìn)一步，所述的磷酸鹽緩沖液含0. 05mol/L的磷酸鹽及0. 5%的三乙胺，pH值為 2. O 3. O。再進(jìn)一步，所述的流動(dòng)相中乙腈與磷酸鹽緩沖液的比例為20 35 65 80。再進(jìn)一步，所述的磷酸鹽選自磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、 磷酸二氫胺或磷酸氫二胺。本發(fā)明的目的還可以這樣實(shí)現(xiàn)所述的流動(dòng)相中乙腈與磷酸鹽緩沖液30 70，磷酸鹽緩沖液的PH為2. 5。上述酒石酸托特羅定原料或制劑的有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)方法，取每Iml中含酒石酸托特羅定與雜質(zhì)N，N 二異丙基-3- (2-甲氧基-5甲基苯基)-3-苯丙胺富馬酸鹽各0. 25mg的混合溶液各10μ 1，依法測(cè)定，其分離度不低于10。主峰與雜質(zhì)A之間的分離度大于10，能保
3證酸、堿破壞性試驗(yàn)中主峰與雜質(zhì)A相似位置峰之間的三個(gè)雜質(zhì)檢出；破壞性試驗(yàn)中主峰與其后相鄰雜質(zhì)峰的分離度均大于4. 0，并且主峰的峰純度均符合規(guī)定；各起始物、中間體均不干擾本品有關(guān)物質(zhì)的測(cè)定。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明涉及的酒石酸托特羅定原料或制劑中有關(guān)物質(zhì)的檢測(cè)方法具有如下優(yōu)點(diǎn)和顯著的進(jìn)步(1)可以很好地將酒石酸托特羅定與其它雜質(zhì)有效分離，同時(shí)在215nm下可以全面的檢出雜質(zhì)，準(zhǔn)確地測(cè)定其雜質(zhì)的含量。(2)采用本發(fā)明的檢測(cè)方法，酒石酸托特羅定主峰保留時(shí)間約9min，主峰與雜質(zhì)A之間的分離度大于10，能保證酸、堿破壞性試驗(yàn)中主峰與雜質(zhì)A相似位置峰之間的三個(gè)雜質(zhì)檢出；破壞性試驗(yàn)中主峰與其后相鄰雜質(zhì)峰的分離度均大于4. 0，并且主峰的峰純度均符合規(guī)定；各起始物、中間體均不干擾本品有關(guān)物質(zhì)的測(cè)定，適合酒石酸托特羅定原料或制劑中有關(guān)物質(zhì)的檢測(cè)。(3)本發(fā)明所建立的高效液相色譜法具有操作簡(jiǎn)單、靈敏度高、結(jié)果準(zhǔn)確可靠、專一性強(qiáng)的特點(diǎn)。


圖1酒石酉髮托特羅定系統(tǒng)適用性HPLC圖譜
圖2酒石酉髮峰定位HPLC圖譜
圖3酒石酉髮托特羅定原料有關(guān)物質(zhì)HPLC圖譜
圖4酒石酉髮托特羅定原料酸破壞HPLC圖譜
圖5酒石酉髮托特羅定原料堿破壞HPLC圖譜
圖6酒石酉髮托特羅定有關(guān)物質(zhì)定量限HPLC圖譜
圖7酒石酉髮托特羅定有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)限HPLC圖譜
圖8酒石酉髮托特羅定片空白輔料HPLC圖譜
圖9酒石酉髮托特羅定片樣品有關(guān)物質(zhì)HPLC圖譜
具體實(shí)施例方式以下是本發(fā)明的具體實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案做進(jìn)一步的描述，但是本發(fā)明的保護(hù)范圍并不限于這些實(shí)施例。凡是不背離本發(fā)明構(gòu)思的改變或等同替代均包括在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。實(shí)施例1系統(tǒng)適用性、樣品測(cè)定及其強(qiáng)制降解試驗(yàn)儀器與條件=Waters液相色譜系統(tǒng)，DAD檢測(cè)器，色譜柱=AgilentCN(250 X 4. 6mm, 5 μ m)；檢測(cè)波長(zhǎng)215nm ；以磷酸鹽緩沖液(磷酸二氫鈉7. 8g，加水IOOOml使溶解，加三乙胺5ml，用磷酸調(diào)節(jié)pH至2. 5)-乙腈(70 30)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為215nm。試驗(yàn)步驟1、系統(tǒng)適用性試驗(yàn)取酒石酸托特羅定與雜質(zhì)A(N，N 二異丙基-3-(2-甲氧基_5甲基苯基)-3-苯丙胺富馬酸鹽)各適量，精密稱定，加乙腈-水(3 7)溶解并稀釋制成每Iml中均含0. 25mg的混合溶液，精密量取10 μ 1注入液相色譜儀，記錄色譜圖，HPLC圖譜見附圖1。由圖1可見酒石酸托特羅定主峰的保留時(shí)間約為9min，與雜質(zhì)A之間的分離度為 11. 6。2、酒石酸峰定位取酒石酸約15. 8mg,置于IOOml加乙腈-水(3 7)溶解并稀釋至刻度，搖勻，依法測(cè)定，HPLC圖譜見附圖2。由圖2可見酒石酸峰在215nm下吸收較大，因此，計(jì)算有關(guān)物質(zhì)時(shí)應(yīng)該予以扣除。3、酒石酸托特羅定原料有關(guān)物質(zhì)的測(cè)定取酒石酸托特羅定原料約12.5mg，置 25ml量瓶中，加乙腈-水(3 7)溶解并稀釋至刻度，搖勻，依法測(cè)定，HPLC圖譜見附圖3。由圖3可見托特羅定峰與各雜質(zhì)峰能很好分離，同時(shí)，主峰的峰純度符合規(guī)定。4、酒石酸托特羅定原料酸破壞取酒石酸托特羅定約25mg，置于50ml量瓶中，加lmol/L的鹽酸溶液8ml，室溫放置22小時(shí)，加lmol/L的氫氧化鈉溶液中和，再加乙腈-水(3 7)溶解并稀釋至刻度，搖勻，依法測(cè)定，HPLC圖譜見附圖4。由圖4可見原料在堿破壞條件下，降解產(chǎn)物較多，主峰與相鄰雜質(zhì)峰均能很好分離，同時(shí)，主峰的峰純度均符合規(guī)定。5、酒石酸托特羅定堿破壞取酒石酸托特羅定約25mg，置于50ml量瓶中，加lmol/L的氫氧化鈉溶液8ml，室溫放置21小時(shí)，加lmol/L的鹽酸溶液中和，再加乙腈-水(3 7)溶解并稀釋至刻度，搖勻，依法測(cè)定，HPLC圖譜見附圖5。由圖5可見原料在酸破壞條件下，降解產(chǎn)物較多，主峰與相鄰雜質(zhì)峰均能很好分離，同時(shí)，主峰的峰純度均符合規(guī)定。由上述試驗(yàn)結(jié)果可知利用本發(fā)明的檢測(cè)方法能將酒石酸托特羅定與其雜質(zhì)峰很好分離、檢測(cè)波長(zhǎng)選擇合理、主峰的峰純度符合要求，因此本方法可用于酒石酸托特羅定及其制劑的質(zhì)量控制。實(shí)施例2靈敏度、制劑專屬性及樣品測(cè)定實(shí)驗(yàn)儀器與條件=Agilent 1200液相色譜系統(tǒng)，DAD檢測(cè)器，色譜柱=Agilent CN(250 X 4. 6mm, 5 μ m)；檢測(cè)波長(zhǎng)215nm ；以磷酸鹽緩沖液(磷酸二氫鈉7. 8g，加水IOOOml 使溶解，加三乙胺5ml，用磷酸調(diào)節(jié)pH至2. 5)-乙腈(70 30)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為 215nm。1、靈敏度試驗(yàn)取酒石酸托特羅定對(duì)照品適量，加乙腈-水(3 7)逐步稀釋制成每Iml中含0.25 μ g (0.05% )、0. 05 μ g (0.01% )的溶液，精密量取10 μ 1，依法檢查，結(jié)果見附圖6、7。由圖6、圖7可見當(dāng)濃度為0. 25 μ g/ml，信噪比S/N = 36，濃度為0. 05 μ g/ml，信噪比S/N = 6，結(jié)果表明本方法的靈敏度高，0. 005%的雜質(zhì)也能檢出。證明該方法靈敏度較好。2、取酒石酸托特羅定片空白輔料適量(約相當(dāng)于酒石酸托特羅定12.5mg)置于 25ml量瓶中，加乙腈-水(3 7)溶解并稀釋至刻度，搖勻，依法測(cè)定，HPLC圖譜見附圖8。由圖8可見空白輔料對(duì)樣品的有關(guān)物質(zhì)測(cè)定無干擾。3、取酒石酸托特羅定片適量(約相當(dāng)于酒石酸托特羅定12. 5mg)置于25ml量瓶中，加乙腈-水(3 7)溶解并稀釋至刻度，搖勻，依法測(cè)定，HPLC圖譜見附圖9。 由圖9可見酒石酸托特羅定片樣品有關(guān)物質(zhì)檢查符合規(guī)定，同時(shí)酒石酸托特羅
定峰的峰純度符合要求。 實(shí)施例3方法耐用性試驗(yàn)Agilent 1200 液相色譜系統(tǒng)，VWD 檢測(cè)器，色譜柱Agilent CN(250X4. 6mm,5 μ m)；檢測(cè)波長(zhǎng)215nm ；以磷酸鹽緩沖液(磷酸二氫鉀6. 8g，加水IOOOml使溶解，加三乙胺5ml，用磷酸調(diào)節(jié)pH至3.0)-乙腈(80 20)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為215nm。取酒石酸托特羅定與雜質(zhì)A (N，N 二異丙基-3-(2-甲氧基-5甲基苯基)-3-苯丙胺富馬酸鹽)各適量，精密稱定，加乙腈-水O 幻溶解并稀釋制成每Iml中均含0.25mg的混合溶液，精密量取該溶液10 μ 1注入液相色譜儀，記錄色譜圖，酒石酸托特羅定與雜質(zhì)A的分離度應(yīng)大于10，酒石酸托特羅定峰的拖尾因子應(yīng)小于2. 0。系統(tǒng)適用性試驗(yàn)取酒石酸托特羅定與雜質(zhì)A (N，N 二異丙基-3-(2-甲氧基_5甲基苯基)-3-苯丙胺富馬酸鹽)各適量，精密稱定，加乙腈_水O 8)溶解并稀釋制成每Iml中均含0. 25mg的混合溶液，精密量取10 μ 1注入液相色譜儀，記錄色譜圖。在此條件下，酒石酸托特羅定主峰的保留時(shí)間約為12min，與雜質(zhì)A之間的分離度為 15. 1。實(shí)施例4方法耐用性試驗(yàn)Agilent 1200 液相色譜系統(tǒng)，VWD 檢測(cè)器，色譜柱Agilent CN(250X4. 6mm,5ym)；檢測(cè)波長(zhǎng)215nm;以磷酸鹽緩沖液(磷酸氫二鉀11. 4g，加水IOOOml使溶解，加三乙胺5ml，用磷酸調(diào)節(jié)pH至2.0)-乙腈(65 35)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為215nm。取酒石酸托特羅定與雜質(zhì)A (N, N 二異丙基-3- (2-甲氧基-5甲基苯基)-3-苯丙胺富馬酸鹽)各適量，精密稱定，加乙腈-水(3.5 6.5)溶解并稀釋制成每Iml中均含0.25mg的混合溶液，精密量取該溶液10 μ 1注入液相色譜儀，記錄色譜圖，酒石酸托特羅定與雜質(zhì)A的分離度應(yīng)大于10，酒石酸托特羅定峰的拖尾因子應(yīng)小于2. 0。系統(tǒng)適用性試驗(yàn)取酒石酸托特羅定與雜質(zhì)A (N，N 二異丙基-3-(2-甲氧基_5甲基苯基)-3-苯丙胺富馬酸鹽)各適量，精密稱定，加乙腈-水(3.5 6. 5)溶解并稀釋制成每Iml中均含0. 25mg的混合溶液，精密量取10 μ 1注入液相色譜儀，記錄色譜圖。在此色譜條件下酒石酸托特羅定主峰的保留時(shí)間7min，與雜質(zhì)A之間的分離度為 10. 2。由試驗(yàn)結(jié)果可知利用本發(fā)明的檢測(cè)方法酒石酸托特羅定與雜質(zhì)A之間的分離度均能大于10. 0，能很好的保證破壞性試驗(yàn)中主峰與雜質(zhì)A相似位置峰之間的三個(gè)雜質(zhì)檢出；破壞性試驗(yàn)中主峰與其后相鄰雜質(zhì)峰的分離度均大于4.0，并且主峰的峰純度均符合規(guī)定；各起始物、中間體均不干擾本品有關(guān)物質(zhì)的測(cè)定，同時(shí)主峰的峰純度符合要求，本方法可用于酒石酸托特羅定及其制劑的質(zhì)量控制。
權(quán)利要求
1.一種酒石酸托特羅定原料或制劑的有關(guān)物質(zhì)的檢測(cè)方法，其特征在于用高效液相色譜法進(jìn)行檢測(cè)，固定相是氰基鍵和硅膠為填料的色譜柱，流動(dòng)相是磷酸鹽緩沖液與乙腈的混合液，檢測(cè)波長(zhǎng)為215nm。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述的磷酸鹽緩沖液含0.05mol/L的磷酸鹽及0. 5%的三乙胺，pH值為2. 0 3. 0。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述的流動(dòng)相中乙腈與磷酸鹽緩沖液的比例為20 35 65 80。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述的磷酸鹽選自磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、磷酸二氫銨或磷酸氫二銨。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一所述的方法，其特征在于所述的流動(dòng)相中乙腈與磷酸鹽緩沖液30 70，磷酸鹽緩沖液的pH為2.5。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一所述的方法，其特征在于取每ImL中含酒石酸托特羅定與雜質(zhì)N，N 二異丙基-3- (2-甲氧基-5甲基苯基)-3-苯丙胺富馬酸鹽各0. 25mg的混合溶液各10 μ L，依法測(cè)定，其分離度不低于10。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種酒石酸托特羅定原料或制劑的有關(guān)物質(zhì)的檢測(cè)方法，采用高效液相色譜法進(jìn)行檢測(cè)，固定相是氰基鍵和硅膠為填料的色譜柱，流動(dòng)相是磷酸鹽緩沖液與乙腈的混合液，檢測(cè)波長(zhǎng)為215nm。本發(fā)明的檢測(cè)方法可以很好地將酒石酸托特羅定與其它雜質(zhì)有效分離，在215nm下可以全面的檢出雜質(zhì)，準(zhǔn)確地測(cè)定其雜質(zhì)的含量，具有操作簡(jiǎn)單、靈敏度高、結(jié)果準(zhǔn)確可靠、專一性強(qiáng)的特點(diǎn)。
文檔編號(hào)G01N30/60GK102368061SQ201110068270
公開日2012年3月7日 申請(qǐng)日期2011年3月22日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月22日
發(fā)明者劉阿利, 崔祥禎, 趙志全 申請(qǐng)人:魯南制藥集團(tuán)股份有限公司