一種利用菠蘿莖提取菠蘿蛋白酶的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種利用菠蘿莖提取菠蘿蛋白酶的方法，屬于菠蘿蛋白酶提取技術領域。本發(fā)明利用菠蘿莖為原料制作菠蘿蛋白酶，制作工藝簡單可靠，通過此工藝可提高酶的活性和延長活性保存時間,酶活性從70萬U/g提高到160萬U/g，常溫下保質期6個月提高到20個月，制作的菠蘿蛋白酶最適pH值為7.0，分子量為33000，毒性較低，菠蘿蛋白酶在生物體中具有溶解纖維蛋白及血凝塊的作用，臨床上用于治療一些炎癥，能迅速溶痂，對正常組織無害，不影響植皮，性質穩(wěn)定，使用方便，適用于中小面積深度燒傷的治療。由菠蘿蛋白酶制成的制劑對急慢性支氣管炎、哮喘、多痰頑咳、百日咳、等病癥療效明顯。
【專利說明】
一種利用菠蘿莖提取菠蘿蛋白酶的方法
技術領域
[0001]本發(fā)明涉及菠蘿蛋白酶提取技術領域，具體涉及一種利用菠蘿莖提取菠蘿蛋白酶的方法。
【背景技術】
[0002]菠蘿蛋白酶是一種天然的無毒、無副作用的蛋白質，作為一種疏基水生成肽或氨基酸形成具有獨特風味的蛋白質水解液，主要應用于食品和醫(yī)藥中。在食品中的應用有:可水解動物蛋白，水解羊胎素及大豆等，使食品的蛋白質水解成小分子肽或氨基酸大分子蛋白質，水解為易吸收的小分子氨基酸和蛋白質肉制品的精加工，可制成相應餅干松化劑、嫩肉粉等，更廣泛的應用于肉類嫩化、餅干松脆、酒類澄清、面粉改良、大豆分解、高級口服液、保健廣品等，可增加食品中氣基酸含量，改良食品風味，降低成本，且能大大提尚食品營養(yǎng)價值，幷作為非生物穩(wěn)定劑制成的啤酒飲料澄清劑、酒類發(fā)酵劑等應用于酒類I釀造工業(yè)、醬油釀造工業(yè)、飲料生產工業(yè)等。
[0003]在醫(yī)藥中的應用有:1)抑制腫瘤細胞的生長。2)對心血管疾病的防治是有益的，能抑制血小板聚集引起的心臟病發(fā)作和中風，緩解心絞痛癥狀，緩和動脈收縮，加速纖維蛋白原的分解。3)抑制毒素分泌；實驗證明菠蘿酶能降低毒素結合活性并能抑制熱不穩(wěn)定毒素(LI)、霍亂毒素(CT)及熱穩(wěn)定毒素(ST)的分泌效應。4)用于燒傷脫痂；菠蘿酶能選擇性地除去死皮，使新皮移植得以盡早進行。動物實驗證明，菠蘿酶對鄰近的正常皮膚無不良影響。局部使用抗生素不影響菠蘿酶的效果。5)消炎作用；菠蘿酶在各種組織中能有效地治療炎癥和水腫(包括血栓靜脈炎、骨骼肌損傷、血腫、口腔炎、糖尿病人潰瘍及運動損傷)；菠蘿酶具有激活炎癥反應的潛力。據統(tǒng)計資料推測，含有菠蘿酶的混合物(含菠蘿酶、胰蛋白酶、蕓香苷)在療效和安全性方面，更優(yōu)于類固醇的消炎藥，將菠蘿酶與低劑量的抗菌素及其它酶混用的方法治療風濕性關節(jié)炎有望取得好的療效；菠蘿酶還可治療腹瀉。6)增進藥物吸收；將菠蘿酶與各種抗生素(如四環(huán)素，阿莫西林等)聯(lián)用，能提高其療效。相關研究表明，它能促進抗生素在感染部位的傳輸，從而減少抗生素的用藥量。據推斷，對于抗癌藥物，也有類似的作用。此外，菠蘿酶能促進營養(yǎng)物質的吸收。
[0004]申請?zhí)枮?012102064456公布了菠蘿蛋白酶提取工藝，此方法過程繁瑣，造價高，不適合工業(yè)化生產。

【發(fā)明內容】

[0005]本發(fā)明針對現(xiàn)有菠蘿蛋白酶制作工藝技術過程繁瑣，各環(huán)節(jié)不宜控制的問題，目的是提供一種提取率高、工藝流程簡單、易操控的菠蘿蛋白酶提取方法。
[0006]為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術方案予以實現(xiàn):
[0007]—種利用菠蘿莖提取菠蘿蛋白酶的方法，具體步驟:
[0008]I)取菠蘿去皮，收集菠蘿莖，切成小塊用壓榨機壓出汁液；
[0009]2)將汁液移入搪瓷缸中，邊攪拌邊加入汁液重10%的固體氯化鈉，然后置10°C條件下放13h，過濾分出濾液；
[0010]3)殘渣加入等量水后，用檸檬酸調節(jié)pH值至4.5 (先加10 %固體氯化鈉)，攪拌均勻，浸泡40min，過濾分離出濾液(合并兩次濾液)；
[0011]4)將澄清液移入搪瓷桶中，在攪拌條件下，按澄清液體積加入0.05% EDTA-2Na、
0.06%的二氧化硫、0.02%的維生素C (做穩(wěn)定劑)及0.6%的鞣酸，在4°C條件下靜置，在離心機上分出沉淀物，棄去上清液；
[0012]5)將沉淀物放入搪瓷桶中，加入2?3倍量pH值4.5的抗壞血酸溶液，攪拌洗脫40min，然后過濾，收集濾液，常溫減壓干燥，即得本發(fā)明產品。
[0013]所述步驟5)中加入的抗壞血酸最優(yōu)倍量為2.4倍。
[0014]有益效果:本發(fā)明利用菠蘿莖為原料制作菠蘿蛋白酶，制作工藝簡單可靠，通過此工藝可提高酶的活性和延長活性保存時間，酶活性從70萬U/g提高到160萬U/g，常溫下保質期6個月提高到20個月，制作的菠蘿蛋白酶最適pH值為7.0，分子量為33000，毒性較低，菠蘿蛋白酶在生物體中具有溶解纖維蛋白及血凝塊的作用，臨床上用于治療一些炎癥，能迅速溶痂，對正常組織無害，不影響植皮，性質穩(wěn)定，使用方便，適用于中小面積深度燒傷的治療。由菠蘿蛋白酶制成的制劑對急慢性支氣管炎、哮喘、多痰頑咳、百日咳、等病癥療效明顯。
【具體實施方式】
[0015]結合實施例對本發(fā)明進一步闡述，不構成對本發(fā)明的范圍限制。
[0016]本【具體實施方式】采用以下技術方案:它的工藝流程:
[0017]I)取菠蘿去皮，收集菠蘿莖，切成小塊用壓榨機壓出汁液；
[0018]2)將汁液移入搪瓷缸中，邊攪拌邊加入汁液重10%的固體氯化鈉，然后置10°C條件下放13h，過濾分出濾液；
[0019]3)殘渣加入等量水后，用檸檬酸調節(jié)pH值至4.5 (先加10 %固體氯化鈉)，攪拌均勻，浸泡40min，過濾分離出濾液(合并兩次濾液)；
[0020]4)將澄清液移入搪瓷桶中，在攪拌條件下，按澄清液體積加入0.05 % EDTA_2Na、
0.06%的二氧化硫、0.02%的維生素C (做穩(wěn)定劑)及0.6%的鞣酸，在4°C條件下靜置，在離心機上分出沉淀物，棄去上清液；
[0021]5)將沉淀物放入搪瓷桶中，加入2.4倍量pH值4.5的抗壞血酸溶液，攪拌洗脫40min，然后過濾，收集濾液，常溫減壓干燥，即得本發(fā)明產品。
【主權項】
1.一種利用菠蘿莖提取菠蘿蛋白酶的方法，其特征在于，工藝流程為: 1)取菠蘿去皮，收集菠蘿莖，切成小塊用壓榨機壓出汁液； 2)將汁液移入搪瓷缸中，邊攪拌邊加入汁液重10%的固體氯化鈉，然后置10°C條件下放13h，過濾分出濾液； 3)殘渣加入等量水后，先加10%固體氯化鈉，用檸檬酸調節(jié)pH值至4.5，攪拌均勻，浸泡40min，過濾分離出濾液，合并兩次濾液；4)將澄清液移入搪瓷桶中，在攪拌條件下，按澄清液體積加入0.05 % EDTA-2Na、0.06%的二氧化硫、0.02%的維生素C及0.6%的鞣酸，在4°C條件下靜置，在離心機上分出沉淀物，棄去上清液； 5)將沉淀物放入搪瓷桶中，加入2?3倍量pH值4.5的抗壞血酸溶液，攪拌洗脫40min，然后過濾，收集濾液，常溫減壓干燥，即得本發(fā)明產品。2.根據權利要求1所述的一種利用菠蘿莖提取菠蘿蛋白酶的方法，其特征在于，所述步驟4)中0.02%的維生素C做穩(wěn)定劑。3.根據權利要求1所述的一種利用菠蘿莖提取菠蘿蛋白酶的方法，其特征在于，所述步驟5)中加入的抗壞血酸最優(yōu)倍量為2.4倍。
【文檔編號】C12N9/50GK106032530SQ201510113318
【公開日】2016年10月19日
【申請日】2015年3月16日
【發(fā)明人】譚凌暉
【申請人】譚凌暉