專利名稱：一種噴司他丁的提取純化方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種噴司他丁的提取純化方法，特別是一種噴司他丁的去除雜質(zhì)脫色方法。
背景技術(shù)：
噴司他丁的化學名為(8R) -3- (2-脫氧-β -D-赤-戊呋喃糖基)_3，4，7，8_四氫 咪唑并[4，5-d][l，3] 二氮雜草-8-醇，是擬嘌呤類的抗腫瘤藥，主要用于毛細胞白血病 (hairy cell leukemia，縮寫 HCL)等的治療。噴司他丁的生產(chǎn)方法有發(fā)酵法和合成法，以發(fā)酵法更為經(jīng)濟。發(fā)酵過程中產(chǎn)生了 大量深褐色的色素等雜質(zhì)，因此需要用適當?shù)姆椒ㄟM行去除雜質(zhì)、脫色處理。現(xiàn)有的生產(chǎn)工 藝采用活性炭去除雜質(zhì)，但實際效果并不理想，處理后溶液顏色并沒有顯著變化，而且活性 炭選擇性差，對噴司他丁有較強的吸附作用，致使收率較低，因此需要尋找更有效的提純方 法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種噴司他丁的提取純化的方法，以降低噴司他丁發(fā)酵液中 的雜質(zhì)，使后續(xù)提取純化工序更容易進行。本發(fā)明提供的噴司他丁的提取純化方法，包括以下步驟1)、發(fā)酵液預(yù)處理用堿性溶液將噴司他丁發(fā)酵液的pH調(diào)至7. 8 10. 2，加入助 濾劑，過濾，得到噴司他丁濾液；2)、去除雜質(zhì)噴司他丁濾液以每分鐘0. 005 0. 05倍填充床體積的速率泵入填 裝了經(jīng)預(yù)處理的強堿性陰離子交換樹脂的層析柱，收集流出液A ；3)、淋洗濾液全部上完后再泵入0 4倍填充床體積純化水，淋洗層析柱，收集流 出液B ；4)、合并流出液A、B。其中步驟1中所述pH優(yōu)選調(diào)至8.0 9.0。助濾劑可以為硅藻土助濾劑、珍珠巖 助濾劑，其中珍珠巖助濾劑助濾效果更好，而且價格更低廉，因此優(yōu)選珍珠巖助濾劑。其中步驟2中所述的強堿性陰離子交換樹脂為苯乙烯-二乙烯苯共聚體上帶有季 銨基[N-(CH3)2C2H4OH]的陰離子交換樹脂。比如D201樹脂、D241樹脂、D202樹脂或D261樹 脂中的一種。其預(yù)處理為常規(guī)的酸堿處理，其中堿性溶液可以為氫氧化鈉溶液、氫氧化鉀溶 液。其中氫氧化鈉溶液價格更低廉，所以優(yōu)選氫氧化鈉溶液。其中步驟2中的速率優(yōu)選為每分鐘0. 01 0. 02倍填充床體積。其中步驟3中的純化水可以不加，層析柱直接漏空；如果為了完全回收有效成分， 可以增加純化水的體積，純化水的體積優(yōu)選為1 2倍填充床體積。噴司他丁濾液呈深褐色，經(jīng)過強堿性陰離子交換樹脂的吸附層析處理后，得到淺 黃色溶液，而噴司他丁的回收率達到95%以上，這說明強堿性陰離子交換樹脂對噴司他丁濾液中的色素等雜質(zhì)具有高度的選擇性，而基本上不吸附噴司他丁。本發(fā)明還從利于產(chǎn)業(yè) 化出發(fā)，選擇的各個物料在保證脫色效果最佳的同時，還具有成本優(yōu)勢。
具體實施例方式實施例1用氫氧化鈉溶液將噴司他丁發(fā)酵液的pH調(diào)至7.9，加入3% (w/v)珍珠巖助濾劑， 經(jīng)板框過濾，得到噴司他丁濾液。將700ml D261樹脂(上海華震科技貿(mào)易公司生產(chǎn))裝入 O 50X400mm的層析柱中，對樹脂進行酸洗(2升2mol/L鹽酸浸泡6小時)、水洗(純化水洗 滌至中性)、堿洗(2升2mol/L氫氧化鈉浸泡6小時)、水洗(純化水洗滌至中性)，得到預(yù) 處理的D261樹脂。取5升噴司他丁濾液，以每分鐘25ml的速率泵入層析柱，收集流出液A。 濾液全部上完后再泵入1300ml升純化水，淋洗層析柱，收集流出液B。合并流出液A、B，呈 淺黃色，而噴司他丁的回收率為96. 8%。實施例2用氫氧化鈉溶液將噴司他丁發(fā)酵液的pH調(diào)至8. 9，加入4% (w/v)硅藻土助濾劑， 經(jīng)板框過濾，得到噴司他丁濾液。將700ml D201樹脂(上海華震科技貿(mào)易公司生產(chǎn))裝入 0 50X400mm的層析柱中，按常規(guī)方法用酸堿對樹脂進行處理，得到預(yù)處理的D201樹脂。取 5升噴司他丁濾液，以每分鐘8ml的速率泵入層析柱進行脫色處理，收集流出液A。濾液全 部上完后再泵入800ml升純化水，淋洗層析柱，收集流出液B。合并流出液A、B，流出液呈淺 黃色，噴司他丁的回收率為95. 3%。
權(quán)利要求
一種提取純化噴司他丁的方法，包括以下步驟1)、發(fā)酵液預(yù)處理用堿性溶液將噴司他丁發(fā)酵液的pH調(diào)至7.8～10.2，加入助濾劑，過濾，得到噴司他丁濾液；2)、去除雜質(zhì)噴司他丁濾液以每分鐘0.005～0.05倍填充床體積的速率泵入填裝了經(jīng)預(yù)處理的強堿性陰離子交換樹脂的層析柱，收集流出液A；3)、淋洗濾液全部上完后再泵入0～4倍填充床體積純化水，淋洗層析柱，收集流出液B；4)、合并流出液A、B。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征是步驟1中所述的pH調(diào)至8.0 9. 0。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征是所述的步驟1中所述的助濾劑為珍珠巖助濾劑 或硅藻土助濾劑。
4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征是所述的步驟2中所述的強堿性陰離子交換樹脂 為苯乙烯-二乙烯苯共聚體上帶有季銨基[N-(CH3)2C2H4OH]的陰離子交換樹脂。
5.如權(quán)利要求1或4所述的方法，其特征是所述的強堿性陰離子交換樹脂為D201樹 月旨、D241樹脂、D202樹脂或D261樹脂中的一種。
6.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征是步驟2中所述速率為每分鐘0.01 0. 02倍填 充床體積。
7.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征是步驟3中所述的純化水體積為1 2倍填充床 體積。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種提取純化噴司他丁的方法，采用強堿性陰離子交換樹脂進行吸附層析去除雜質(zhì)，且噴司他丁的回收率達到95％以上。本發(fā)明還從利于產(chǎn)業(yè)化出發(fā)，選擇的各個物料在保證脫色效果最佳的同時，具有成本優(yōu)勢。
文檔編號B01D15/36GK101798330SQ200910096059
公開日2010年8月11日 申請日期2009年2月6日 優(yōu)先權(quán)日2009年2月6日
發(fā)明者朱亮, 朱健, 謝祥茂, 陳俊勇 申請人:杭州華東醫(yī)藥集團生物工程研究所有限公司