聯(lián)合應(yīng)用對(duì)大豆毛油進(jìn)行脫膠的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種固定化磷脂酶C和固定化磷脂酶A1聯(lián)合應(yīng)用對(duì)大豆毛油進(jìn)行脫膠的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]植物油精煉一般包括脫膠、中和、脫色和脫臭等工序。兩個(gè)主要的工藝可分為化學(xué)精煉和物理精煉。脫膠是毛油精煉的第一工序，用于從毛油除去磷脂和粘液物質(zhì)。酶法有其獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)，如專(zhuān)一的反應(yīng)，反應(yīng)條件溫和，和較少的環(huán)境污染，使其在具有更高的附加值或獨(dú)特的營(yíng)養(yǎng)和功能性方面的新產(chǎn)品開(kāi)發(fā)方面更具有競(jìng)爭(zhēng)力。與傳統(tǒng)的水化脫膠工藝相比，酶法脫膠減少大量的酸和堿的使用，減少精煉過(guò)程中產(chǎn)生的廢水，提高產(chǎn)品質(zhì)量和降低操作成本。
[0003]傳統(tǒng)的酶法脫膠是水解磷脂的脂肪酸鏈而生成溶血性磷脂，可以通過(guò)水化的方法除去。因此，磷脂酶脫膠是油脂脫膠的一種新方法，同傳統(tǒng)的脫膠方法相比，酶法脫膠可大大節(jié)約化學(xué)物質(zhì)的消耗量，幾乎不產(chǎn)生廢水，在環(huán)保、經(jīng)濟(jì)、質(zhì)量等方面具有潛在的優(yōu)勢(shì)。磷脂酶A1適用于磷脂乳化液的改性和植物油的脫膠，磷脂酶A i特定水解磷脂生成Sn-1溶血磷脂。而磷脂酶C卻能特異性水解磷酸基與甘油基之間的磷氧鍵，生成甘油二酯，甘油二酯溶于油中成為食用油的一部分。因此，采用磷脂酶C和磷脂酶A1脫膠，不僅能實(shí)現(xiàn)物理精煉，還可提高脫膠油的得率。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明根據(jù)ΡΙΧ、ΡΙΛ的各自特點(diǎn)，開(kāi)發(fā)出磷脂酶C-磷脂酶A1雙酶脫膠技術(shù)，利用磷脂酶C脫膠提高油脂得率這一特點(diǎn)，先采用少量PLC進(jìn)行常規(guī)酶法脫膠操作，而后利用磷脂酶AJA膠徹底速度快的特點(diǎn)，加入適量PLA i實(shí)施脫膠操作，考察PLC和PLA 加入時(shí)間，加入量之比以及之間的關(guān)系。為PLC和PLA1在毛油脫膠中的應(yīng)用提供了條件。用固定化磷脂酶C和固定化磷脂酶&來(lái)進(jìn)行脫膠的方法通過(guò)以下步驟實(shí)現(xiàn):一、磷脂酶C和磷脂酶&的固定化；二、固定化磷脂酶C和固定化磷脂酶A1K合脫膠；三、磷含量測(cè)定；四、固定化磷脂酶C和固定化磷脂酶&重復(fù)利用次數(shù)的研宄。
【具體實(shí)施方式】
[0005]【具體實(shí)施方式】一:一種固定化磷脂酶仏和固定化磷脂酶C聯(lián)合應(yīng)用對(duì)大豆毛油進(jìn)行脫膠的方法，其特征在于用固定化磷脂酶仏和固定化磷脂酶C大豆毛油脫膠的方法通過(guò)以下步驟實(shí)現(xiàn):一、磷脂酶仏和磷脂酶C的固定化:首先稱(chēng)取一定量的海藻酸鈉于40°C水浴保溫溶解，同時(shí)稱(chēng)取一定量的殼聚糖于5%的醋酸溶液中，40°C水浴保溫溶解；再向溶解的殼聚糖醋酸溶液中加入一定量的CaCl2溶液，混勻，稱(chēng)取一定量的磷脂酶A i，加入到10 mL海藻酸鈉溶液中，攪拌均勻，靜置一段時(shí)間，用滅菌后的注射器吸取混合液，以約5滴/s的速度注入殼聚糖醋酸溶液、CaCl2混合溶液中，以180 r/min轉(zhuǎn)速攪拌，將其置于4°C環(huán)境固定化10 h，以同樣的方法對(duì)磷脂酶C進(jìn)行固定；二、固定化磷脂酶C和固定化磷脂酶A1聯(lián)合脫膠:取水化大豆毛油300 g，預(yù)熱至75°C，加入45%檸檬酸0.6 mL混合攪拌維持30 min ；冷卻至溫度為30~40°C左右，加入4mol/L NaOH溶液和一定量的蒸餾水混合均勻，固定化磷脂酶C在固定化酶添加量0.14g/kg，初始PH值為7.0，反應(yīng)溫度為50°C，攪拌速度為250r/min，反應(yīng)時(shí)間為1.5h。然后加入磷脂酶A1在固定化酶添加量0.12g/kg，初始PH值為6.0，反應(yīng)溫度為50°C，攪拌速度為250r/min，反應(yīng)時(shí)間為1.0h。在此最佳條件下測(cè)得脫膠油中的磷含量為4.3mg/kg，DAG增加率為1.3%，節(jié)省時(shí)間約兩小時(shí)同時(shí)確定了固定化磷脂酶C和固定化磷脂酶A1連續(xù)用于對(duì)大豆毛油的脫膠，使用6個(gè)批次后，測(cè)定固定化酶相對(duì)活力，結(jié)果酶活力仍保持在80%左右。
[0006]【具體實(shí)施方式】二:本實(shí)施方式與【具體實(shí)施方式】一的不同點(diǎn)在于步驟二中固定化酶脫膠條件進(jìn)行進(jìn)一步確定，結(jié)果為磷脂酶A1反應(yīng)后的反應(yīng)體系的起始pH值為6.5?8.0，反應(yīng)時(shí)間0.5-2.5h，反應(yīng)溫度為30?80°C，固定化酶添加量0.08-0.16g/kg，用優(yōu)化結(jié)果進(jìn)行固定化磷脂酶4對(duì)大豆毛油脫膠，在最優(yōu)條件下測(cè)的磷含量為4.3mg/kg，同時(shí)確定了固定化磷脂酶C和固定化磷脂酶A1連續(xù)用于對(duì)大豆毛油的脫膠，使用6個(gè)批次后，測(cè)定固定化酶相對(duì)活力，結(jié)果酶活力仍保持在80%左右，將固定化酶脫膠后的油脂得率與常規(guī)酶法脫膠或者是兩種酶單獨(dú)脫膠后油脂得率進(jìn)行比較，得到固定化磷脂酶C和固定化磷脂酶A1聯(lián)合應(yīng)用對(duì)大豆毛油脫膠后的油脂得率增長(zhǎng)1.3倍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種固定化磷脂酶C和固定化磷脂酶A 合應(yīng)用對(duì)大豆毛油進(jìn)行脫膠的方法，其特征在于用固定化磷脂酶C和固定化磷脂酶A1大豆毛油脫膠的方法通過(guò)以下步驟實(shí)現(xiàn):一、磷脂酶C和磷脂酶仏的固定化:首先稱(chēng)取一定量的海藻酸鈉于40°C水浴保溫溶解，同時(shí)稱(chēng)取一定量的殼聚糖于5%的醋酸溶液中，40 °C水浴保溫溶解；再向溶解的殼聚糖醋酸溶液中加入一定量的CaCl2溶液，混勻，稱(chēng)取一定量的磷脂酶A1，加入到10 mL海藻酸鈉溶液中，攪拌均勻，靜置一段時(shí)間，用滅菌后的注射器吸取混合液，以約5滴/s的速度注入殼聚糖醋酸溶液、CaCl2混合溶液中，以180 r/min轉(zhuǎn)速攪拌，將其置于4°C環(huán)境固定化10 h，以同樣的方法對(duì)磷脂酶C進(jìn)行固定；二、固定化酶脫膠:取水化大豆毛油300 g，預(yù)熱至75°C，加入45%檸檬酸0.6 mL混合攪拌維持30 min ;冷卻至溫度為30~40°C左右，加入4 mo I/L NaOH溶液和一定量的蒸餾水混合均勻，固定化磷脂酶C在固定化酶添加量0.14 g/kg，初始PH值為7.0，反應(yīng)溫度為50 °C，攪拌速度為250 r/min，反應(yīng)時(shí)間為1.5 h，然后加入磷脂酶八1在固定化酶添加量0.12 g/kg，初始PH值為6.0，反應(yīng)溫度為50°C，攪拌速度為250 r/min，反應(yīng)時(shí)間為1.0 h，在此最佳條件下測(cè)得脫膠油中的磷含量為4.3 mg/kg，DAG增加率為1.3%，節(jié)省時(shí)間約兩小時(shí)，同時(shí)確定了固定化磷脂酶C和固定化磷脂酶仏連續(xù)用于對(duì)大豆毛油的脫膠，使用6個(gè)批次后，測(cè)定固定化酶相對(duì)活力，結(jié)果酶活力仍保持在80%左右。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用固定化磷脂酶C和固定化磷脂酶Ai聯(lián)合應(yīng)用對(duì)大豆毛油脫膠的方法，其特征在于步驟二中固定化酶脫膠條件進(jìn)行進(jìn)一步確定，結(jié)果為磷脂酶仏反應(yīng)后的反應(yīng)體系的起始pH值為6.5?8.0，反應(yīng)時(shí)間0.5~2.5 h，反應(yīng)溫度為30?80 °C，固定化酶添加量0.08~0.16 g/kg，用優(yōu)化結(jié)果進(jìn)行固定化磷脂酶仏對(duì)大豆毛油脫膠，在最優(yōu)條件下測(cè)的磷含量為4.3 mg/kg,同時(shí)確定了固定化磷脂酶C和固定化磷脂酶A1連續(xù)用于對(duì)大豆毛油的脫膠，使用6個(gè)批次后，測(cè)定固定化酶相對(duì)活力，結(jié)果酶活力仍保持在80%左右，將固定化酶脫膠后的油脂得率與常規(guī)酶法脫膠或者是兩種酶單獨(dú)脫膠后油脂得率進(jìn)行比較，得到固定化磷脂酶C和固定化磷脂酶A1聯(lián)合應(yīng)用對(duì)大豆毛油脫膠后的油脂得率增長(zhǎng)1.3倍。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明是一種固定化磷脂酶C和固定化磷脂酶A1聯(lián)合應(yīng)用對(duì)大豆毛油進(jìn)行脫膠的方法。利用磷脂酶C脫膠提高油脂得率這一特點(diǎn)，先采用少量PLC進(jìn)行常規(guī)酶法脫膠操作，而后利用磷脂酶A1脫膠徹底速度快的特點(diǎn)，加入適量PLA1實(shí)施脫膠操作，考察PLC和PLA1的加入時(shí)間，加入量之比以及之間的關(guān)系。最終確定的最佳條件為：固定化磷脂酶C在固定化酶添加量0.14g/kg，初始PH值為7.0，反應(yīng)溫度為50℃，攪拌速度為250r/min，反應(yīng)時(shí)間為1.5h。然后加入磷脂酶A1在固定化酶添加量0.12g/kg，初始PH值為6.0，反應(yīng)溫度為50℃，攪拌速度為250r/min，反應(yīng)時(shí)間為1.0h，在此最佳條件下測(cè)得脫膠油中的磷含量為4.3mg/kg，DAG增加率為1.3%，節(jié)省時(shí)間約兩小時(shí)，為以后工業(yè)化生產(chǎn)脫膠工藝提供了依據(jù)。
【IPC分類(lèi)】C11B3-00
【公開(kāi)號(hào)】CN104593145
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510028129
【發(fā)明人】于殿宇, 江連洲, 解桂東, 王立琦, 劉飛, 杜華楠, 許多現(xiàn), 李俊
【申請(qǐng)人】東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【公開(kāi)日】2015年5月6日
【申請(qǐng)日】2015年1月21日