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一種基于誘導(dǎo)型啟動(dòng)子的質(zhì)粒消除模塊的應(yīng)用的制作方法

文檔序號(hào):40577300發(fā)布日期:2025-01-07 20:17閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種基于誘導(dǎo)型啟動(dòng)子的質(zhì)粒消除模塊的應(yīng)用,其特征在于,用于一種指定對(duì)象質(zhì)粒的選擇性消除或幾種指定對(duì)象質(zhì)粒的選擇性同步消除。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用,其特征在于,質(zhì)粒消除模塊括兩類相互獨(dú)立的表達(dá)區(qū)域,其中一類區(qū)域?yàn)檎T導(dǎo)因子轉(zhuǎn)錄區(qū)域,由轉(zhuǎn)錄因子片段自帶的組成型啟動(dòng)子,包括其rna聚合酶結(jié)合位點(diǎn)及轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)、核糖體結(jié)合位點(diǎn)、誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子翻譯區(qū)、終止子構(gòu)成;另一類區(qū)域?yàn)榉戳xrna表達(dá)區(qū)域,包括與誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子相對(duì)應(yīng)的誘導(dǎo)因子啟動(dòng)子、反義rna及終止子構(gòu)成;所述反義rna為代謝關(guān)鍵基因mrna的反義rna,能與代謝關(guān)鍵基因mrna結(jié)合阻礙代謝關(guān)鍵基因mrna翻譯的rna片段。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用,其特征在于,所述的誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子為能與特定化合物結(jié)合后,誘導(dǎo)結(jié)合位點(diǎn)下游基因轉(zhuǎn)錄的蛋白質(zhì);或未與特定化合物結(jié)合前能誘導(dǎo)下游基因轉(zhuǎn)錄,與特定化合物結(jié)合后無法誘導(dǎo)結(jié)合位點(diǎn)下游基因轉(zhuǎn)錄的蛋白質(zhì)。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用,其特征在于,所述的轉(zhuǎn)錄因子片段自帶的組成型啟動(dòng)子為阿拉伯糖轉(zhuǎn)錄因子自帶組成型啟動(dòng)子。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用,其特征在于,所述的反義rna表達(dá)區(qū)域搭載于待消除質(zhì)粒中。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用,其特征在于,所述的待消除質(zhì)粒為細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定游離余基因組之外的能獨(dú)立復(fù)制,或隨基因組復(fù)制并被傳遞給子代細(xì)胞的環(huán)狀或線性dna。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用,其特征在于,所述的待消除質(zhì)粒包括pet28a、pec-xk99e、酵母2μ質(zhì)粒中任意一項(xiàng)。

8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用,其特征在于,所述的反義rna干擾的基因?yàn)榇x關(guān)鍵基因。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用,其特征在于,所述的代謝關(guān)鍵基因?yàn)閠ca循環(huán)相關(guān)基因、蛋白質(zhì)合成相關(guān)基因、有氧呼吸相關(guān)基因、無氧呼吸相關(guān)基因、脂質(zhì)合成相關(guān)基因、細(xì)胞壁合成相關(guān)基因、糖類轉(zhuǎn)運(yùn)途徑相關(guān)基因、氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)途徑相關(guān)基因、atp合成相關(guān)基因、細(xì)胞骨架合成相關(guān)基因、nadph/nadp+合成相關(guān)基因、nadh/nad+合成相關(guān)基因、維生素合成相關(guān)基因、一碳轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)相關(guān)基因、二氧化碳固定相關(guān)基因、dna/rna合成相關(guān)基因、氨基酸合成相關(guān)基因、核糖合成相關(guān)基因、核糖體合成相關(guān)基因、核糖體組裝相關(guān)基因、氨酰trna合成酶相關(guān)基因及上述基因的同工酶基因。

10.根據(jù)權(quán)利要求1~9任意一項(xiàng)所述的應(yīng)用,其特征在于,所述質(zhì)粒消除模塊的消除對(duì)象為所有具備穩(wěn)定游離質(zhì)粒、游離質(zhì)粒有一定概率不會(huì)分配給子細(xì)胞、且游離質(zhì)粒消除后不會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡或無法增殖的微生物、動(dòng)物或植物細(xì)胞。


技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及基因工程領(lǐng)域,特別是針對(duì)一種基于誘導(dǎo)型啟動(dòng)子的質(zhì)粒消除模塊的應(yīng)用,用于一種指定對(duì)象質(zhì)粒的選擇性消除或幾種指定對(duì)象質(zhì)粒的同步消除。本發(fā)明消除效率高,可根據(jù)需要自由設(shè)置消除對(duì)象,可實(shí)現(xiàn)多種質(zhì)粒的選擇性或同步消除。

技術(shù)研發(fā)人員:請(qǐng)求不公布姓名
受保護(hù)的技術(shù)使用者:杭州元騰生物工程股份有限公司
技術(shù)研發(fā)日:
技術(shù)公布日:2025/1/6
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