技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種用于制備線性單鏈DNA的方法，其包括：構(gòu)建可表達(dá)Cas切口酶的Cas表達(dá)元件，整合入質(zhì)粒；構(gòu)建可在大腸桿菌細(xì)胞中與上述Cas表達(dá)元件兼容的sgRNA基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)元件，并構(gòu)建成質(zhì)粒，得到sgRNA表達(dá)質(zhì)粒；將Cas切口酶表達(dá)質(zhì)粒和sgRNA表達(dá)質(zhì)粒共同轉(zhuǎn)化到大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞中；培養(yǎng)大腸桿菌至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，誘導(dǎo)Cas切口酶基因表達(dá)和自殺性sgRNA表達(dá)，Cas切口酶協(xié)同sgRNA自剪切sgRNA表達(dá)質(zhì)粒的雙鏈DNA并形成單鏈斷裂，產(chǎn)生線性單鏈DNA；提取線性單鏈DNA。

技術(shù)研發(fā)人員：張平靜;馮文建;楊揚(yáng);王晉康;朱遠(yuǎn)源
受保護(hù)的技術(shù)使用者：百奧邁科生物技術(shù)有限公司
文檔號(hào)碼：201610464596
技術(shù)研發(fā)日：2016.06.23
技術(shù)公布日：2016.11.16