本發(fā)明屬于固定在二氧化硅載體上的酶，具體地，涉及一種以含氫硅油疏水改性的二氧化硅為載體的固定化脂肪酶及其制備方法。

背景技術(shù)：
脂肪酶（Lipase,EC3.1.1.3）全稱甘油三酯水解酶，其基本功能是催化甘油酯水解為甘油和脂肪酸，能在油水界面上催化酯水解和醇解、酯合成、酯交換、內(nèi)酯合成、高聚物合成及立體異構(gòu)體拆分等有機(jī)合成反應(yīng)。脂肪酶作為一種重要的工業(yè)酶類，已廣泛應(yīng)用于食品與營養(yǎng)、化學(xué)工業(yè)、造紙工業(yè)以及藥物合成等諸多領(lǐng)域。由于游離酶在催化過程中存在穩(wěn)定性差、易失活、不能重復(fù)使用，且反應(yīng)后混入產(chǎn)品，造成產(chǎn)物分離、純化困難等，酶固定化技術(shù)被引入到脂肪酶的應(yīng)用研究之中。20世紀(jì)60年代出現(xiàn)的酶的固定化技術(shù)克服了游離酶的許多不足，提高了酶的穩(wěn)定性；酶促反應(yīng)結(jié)束后，固定化酶與底物和產(chǎn)物易于分離；同時(shí)可回收及重復(fù)使用，反應(yīng)條件容易控制，可實(shí)現(xiàn)連續(xù)自動(dòng)化生產(chǎn)，有效降低了成本。傳統(tǒng)的酶固定化方法主要有吸附法、包埋法、交聯(lián)法及共價(jià)結(jié)合法。其中吸附法由于操作簡單，固定化過程對(duì)酶活影響小，容易實(shí)現(xiàn)工業(yè)化，成為最常用的固定化方法。由于SiO2具有廉價(jià)易得、機(jī)械強(qiáng)度好、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛用在酶固定化領(lǐng)域，并且SiO2表面含有大量的Si-OH，可以進(jìn)行各種表面改性，因此我們選用廉價(jià)易得的SiO2為載體來固定脂肪酶。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，疏水性較強(qiáng)的載體有利于底物在酶周圍環(huán)境的分配及產(chǎn)物的擴(kuò)散，改善酶的催化性質(zhì)（M.Shakeri,K.Kawakami.EnhancementofRhizopusoryzaelipaseactivityimmobilizedonalkyl-functionalizedsphericalmesocellularfoam:Influenceofalkylchainlength.MicroporousandMesoporousMaterials,2008,118:115-120），同時(shí)載體表面的疏水基團(tuán)與酶相互結(jié)合，防止酶在使用過程中流失，可以提高酶的重復(fù)使用性。但是由于無機(jī)硅膠疏水性很差，既不利于脂肪酶在載體上的正確折疊，也不利于水不溶性酯類在載體上的傳質(zhì)和催化，從而使催化速率和產(chǎn)率出現(xiàn)下降，因此，我們要對(duì)SiO2進(jìn)行疏水處理，以改善固定化酶的催化性質(zhì)。如公開號(hào)為CN102250871A的中國專利申請(qǐng)，加入表面活性劑（如十六烷基三甲基溴化銨等）對(duì)膨潤土的表面結(jié)構(gòu)及疏水性能調(diào)節(jié)，改善固定化脂肪酶的催化效果及穩(wěn)定性，但其改善效果并不理想。使用這種固定方法，固定化酶重復(fù)使用6次后固載酶相對(duì)活力已降至80%以下。目前，商品化的固定化酶LipozymeTLIM，其固定化載體為SiO2，酶源為米曲霉脂肪酶，其水解三硬脂酸甘油酯的活力為170IUN/gl(GuatK.K.etal,ThermodynamicsandinhibitionstudiesoflipozymeTLIMinbiodieselproductionviaenzymatictransesterification,BioresourceTechnology2010,101:6558–6561)。Sigma公司出售的固定化酶Lipaseimmobilizedonimmobead150，其固定化載體為Immobead150，酶源為米根霉脂肪酶，其水解三丁酸甘油酯的活力大于300U/g。Wang等用大孔樹脂來固定米根霉脂肪酶重組體，其水解橄欖油的活力為168U/g(WangY.-d.etal.ImmobilizedrecombinantRhizopusoryzaelipasefortheproductionofbiodieselinsolventfreesystem,JournalofMolecularCatalysisB:Enzymatic2010,67:45–51)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種的催化效果及穩(wěn)定性均較好的固定化脂肪酶及其制備方法。本發(fā)明解決上述問題所采用的技術(shù)方案是：一種固定化脂肪酶，包括以含氫硅油改性的SiO2為載體，以及固定在所述SiO2上的脂肪酶。其中，所述含氫硅油為含Si-H鍵的液態(tài)聚硅氧烷，其結(jié)構(gòu)如下：其中，-R為C1-C22烷基、芳烷基、環(huán)烷基、或以上基團(tuán)中任意兩種或兩種以上的組合；-R’為C1-C22烷基，芳烷基，環(huán)烷基，氫基，或以上基團(tuán)中任意兩種或兩種以上的組合；m為0-420，n為0-350。其中，-R優(yōu)選：-CH3、-C2H5、-C8H17、-C6H5、-C6H10、-C12H25、-C16H33、-C18H37，或以上基團(tuán)中任意兩種或兩種以上的組合。其中，-R’優(yōu)選：-H、-CH3、-C2H5、-C8H17、-C6H5、-C6H10、-C12H25、-C16H33、-C18H37，或以上基團(tuán)中任意兩種或兩種以上的組合。具體地，所述含氫硅油優(yōu)選自以下物質(zhì)中的至少一種：甲基含氫硅油、乙基含氫硅油、苯基含氫硅油、辛基含氫硅油。其中，本發(fā)明所述的固定化脂肪酶的酶固載量為100-300mg/g，酶固載量指的是單位重量的載體上固定的酶的重量。其中，所述含氫硅油改性的SiO2由以下步驟制備得到：將SiO2加入到包括含氫硅油和惰性溶劑的混合溶液中，所述混合溶液的濃度為0.1-10wt%，攪拌均勻后，加入與SiO2質(zhì)量比為0-1000ppm的Karstedt催化劑，0-100℃攪拌反應(yīng)1-6h；離心，去除惰性溶劑，得到含氫硅油改性的SiO2。其中，含氫硅油與SiO2的質(zhì)量比為0.025-2.5。其中，所用含氫硅油的含氫量為0.01-1.60wt%。其中，所用含氫硅油的數(shù)均分子量為800-26000g/mol。其中，所述惰性溶劑為正己烷或正庚烷。其中，用于固定化的脂肪酶包括：米根霉脂肪酶（ROL），華根霉脂肪酶（RCL），德氏根霉脂肪酶（RDL），雪白根霉脂肪酶（RNL）等根霉脂肪酶以及豬胰脂肪酶（PPL），洋蔥假單胞菌脂肪酶（PCL），南極假絲酵母脂肪酶（CALB）、米曲霉脂肪酶（AOL）等，特別優(yōu)選是：米根霉脂肪酶（ROL）及華根霉脂肪酶（RCL）。一種固定化脂肪酶的制備方法，包括如下步驟：將脂肪酶溶于磷酸緩沖液中，配制得到脂肪酶溶液；將SiO2加入含氫硅油中進(jìn)行疏水改性；將改性后的SiO2浸泡在脂肪酶溶液中，改性后的SiO2與脂肪酶的質(zhì)量比為2：1-8：1，振蕩反應(yīng)，離心分離，磷酸緩沖液洗滌，室溫干燥，得到固載在疏水改性的SiO2上的固定化脂肪酶。所述固定化脂肪酶的制備方法，可以具體為包括如下步驟：將脂肪酶溶于0.02-1.50mol/LpH=6.0-9.0的磷酸緩沖液中，配制濃度為5-15mg/ml的脂肪酶溶液；將SiO2粒子加入到包括有含氫硅油和惰性溶劑的混合溶液中，所述混合溶液的濃度為0.1-10wt%，攪拌均勻后，加入與SiO2質(zhì)量比為0-1000ppm的Karstedt催化劑，0-100℃攪拌反應(yīng)1-6h；離心，去除惰性溶劑，得到含氫硅油改性的SiO2；將改性后的SiO2浸泡在脂肪酶溶液中，改性后的SiO2與脂肪酶的質(zhì)量比為2：1-8：1，0-40℃振蕩反應(yīng)0.5-12h，離心分離，磷酸緩沖液洗滌，室溫干燥，得到固載在疏水改性的SiO2上的固定化脂肪酶。本發(fā)明中所述ppm指的是百萬分之一。本發(fā)明中采用含氫硅油疏水改性SiO2，Karstedt催化劑催化含氫硅油與SiO2表面的Si-OH反應(yīng)以達(dá)到疏水處理的效果，改性劑用量少且改性效果明顯，采用該種改性方式改性的SiO2為載體來固定化脂肪酶，明顯改善了現(xiàn)有技術(shù)中制備的固定化酶的催化效果及穩(wěn)定性較差的缺陷，得到催化效果及穩(wěn)定性均較好的固定化脂肪酶。綜上，本發(fā)明的有益效果是：1、使用新穎的含氫硅油疏水改性劑來改性SiO2，改性劑及催化劑用量小，改性效果明顯，載體結(jié)構(gòu)可設(shè)計(jì)，操作簡單，能耗低，便于實(shí)現(xiàn)工業(yè)化。2、以含氫硅油疏水改性的SiO2為載體，所制備的固定化脂肪酶具有良好的重復(fù)使用性。3、本發(fā)明提供的固定化酶制備方法簡單，不需要特殊的設(shè)備，適合大規(guī)模工業(yè)化操作。附圖說明圖1為使用含氫硅油改性SiO2的過程示意圖；圖2為以SiO2為載體的固定化脂肪酶的重復(fù)使用次數(shù)-相對(duì)酶活的曲線圖，其中，A為以未改性的SiO2為載體固定化的脂肪酶，B為以甲基含氫硅油改性的SiO2為載體固定化的脂肪酶。具體實(shí)施方式下面結(jié)合實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步地的詳細(xì)說明，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此。本發(fā)明中所采用的原料均為市售產(chǎn)品，其中，甲基含氫硅油：成都晨光化工研究院生產(chǎn)；乙基含氫硅油：成都晨光化工研究院生產(chǎn)；苯基含氫硅油：成都晨光化工研究院生產(chǎn)；辛基含氫硅油：成都晨光化工研究院生產(chǎn)；正己烷：成都科龍?jiān)噭S生產(chǎn)；Karstedt催化劑：Aldrich公司生產(chǎn)；磷酸二氫鉀：成都科龍?jiān)噭S生產(chǎn)；氫氧化鈉：成都科龍?jiān)噭S生產(chǎn)。本發(fā)明中制得的固化脂肪酶采用以下標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行性能測(cè)試：酶活力：參考國標(biāo)《GB/T1803-93工業(yè)酶制劑通用試驗(yàn)方法》中指示劑滴定法測(cè)定。酶固載量：以紫外吸收法測(cè)酶固載量；（1）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制a.3.75g純的米根脂肪酶,溶解定容至250ml磷酸緩沖溶液中（pH=8，0.05mol/L），配成15mg/ml的酶溶液；b.分別取2,4,6,8,10ml稀釋定容至100ml,測(cè)稀釋液在265nm處的吸光度，做標(biāo)準(zhǔn)曲線;以磷酸緩沖液為空白。(2)測(cè)酶固載量通過固定化前后溶液中酶濃度差求固載量a．固定化前酶溶液中蛋白質(zhì)含量的測(cè)定8ml原酶液，定容至100ml，測(cè)265nm的吸光度(A1)b．固定化后酶溶液中蛋白質(zhì)含量的測(cè)定8ml固定后的酶液+洗滌液定容至100ml，測(cè)265nm的吸光度(A2)c．根據(jù)固定化前后吸光度差，求酶固載量A。其計(jì)算公式如下：A=(cV-c0V0)/m其中，c,c0—固定化前及固定化后酶溶液濃度（mg/ml）；V,V0—固定化前及固定化后酶溶液體積（ml）；m—載體質(zhì)量（g）。以下根據(jù)具體的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明。以下實(shí)施例及對(duì)比例中的脂肪酶均采用米根霉脂肪酶，其酶活力指的是水解橄欖油的活力，采用本發(fā)明中其他的脂肪酶同樣能得到以下的有益效果，在此不一一闡述。實(shí)施例1將脂肪酶溶于0.02mol/LpH=7.0的磷酸緩沖液中，配制濃度為15mg/ml的脂肪酶溶液；2gSiO2粒子分散于含氫量為0.1wt%的甲基含氫硅油（PMHS）的正己烷溶液中，該溶液的濃度為0.1wt%，PMHS的質(zhì)量為0.05g，攪拌均勻，加入與SiO2質(zhì)量比為1000ppm的Karstedt催化劑，30℃反應(yīng)3h，離心，正己烷抽提，得PMHS疏水改性的SiO2粒子。將0.24gPMHS疏水改性的SiO2粒子分散于8ml濃度為15mg/ml的脂肪酶溶液中，25℃振蕩12h，磷酸緩沖液洗滌4次，得固定化酶，測(cè)試酶活力為181.3U/g，酶固載量為232.5mg/g。重復(fù)使用12次后，酶活力為最初的79.6%。實(shí)施例2將脂肪酶溶于1.10mol/LpH=6.0的磷酸緩沖液中，配制濃度為15mg/ml的脂肪酶溶液；2gSiO2粒子分散于含氫量為1.5wt%的乙基含氫硅油（PEHS）的正己烷溶液中，該溶液的濃度為0.5wt%，PEHS的質(zhì)量為0.05g，攪拌均勻，加入與SiO2質(zhì)量比為450ppm的Karstedt催化劑，30℃反應(yīng)3h，離心，正己烷抽提，得PEHS疏水改性的SiO2粒子。將0.24gPEHS疏水改性的SiO2粒子分散于8ml濃度為15mg/ml的脂肪酶溶液中，25℃振蕩12h，磷酸緩沖液洗滌4次，得固定化酶，測(cè)試酶活力為221.2U/g，酶固載量為210.0mg/g。重復(fù)使用12次后，酶活力為最初的80.0%。實(shí)施例3將脂肪酶溶于1.50mol/LpH=9.0的磷酸緩沖液中，配制濃度為15mg/ml的脂肪酶溶液；2gSiO2粒子分散于含氫量為0.2wt%的苯基含氫硅油的正己烷溶液中，該溶液的濃度為0.5wt%，苯基含氫硅油的質(zhì)量為0.05g，攪拌均勻，加入與SiO2質(zhì)量比為1000ppm的Karstedt催化劑，30℃反應(yīng)3h，離心，正己烷抽提，得苯基含氫硅油改性的SiO2粒子。將0.24g苯基含氫硅油疏水改性的SiO2粒子分散于8ml濃度為15mg/ml的脂肪酶溶液中，25℃振蕩12h，磷酸緩沖液洗滌4次，得固載酶。測(cè)試酶活力為207.6U/g，酶固載量為202.5mg/g。重復(fù)使用12次后，酶活力為最初的81.3%。實(shí)施例4采用與實(shí)施例1相同的方法配制脂肪酶溶液；2gSiO2粒子分散于含氫量為0.2wt%的辛基含氫硅油的正己烷溶液中，該溶液的濃度為0.3wt%，辛基含氫硅油的質(zhì)量為0.05g，攪拌均勻，加入與SiO2質(zhì)量比為1000ppm的Karstedt催化劑，30℃反應(yīng)3h，離心，正己烷抽提，得辛基含氫硅油疏水改性的SiO2粒子。將0.24g辛基含氫硅油疏水改性的SiO2粒子分散于8ml濃度為15mg/ml的脂肪酶溶液中，25℃振蕩12h，磷酸緩沖液洗滌4次，得固定化酶，測(cè)試酶活力為256.6U/g，酶固載量為190.5mg/g。重復(fù)使用12次后，酶活力為最初的82.4%。實(shí)施例5采用與實(shí)施例1相同的方法配制脂肪酶溶液；2gSiO2粒子分散于含氫量為1.5wt%的PMHS的正己烷溶液中，該溶液的濃度為0.5wt%，PMHS的質(zhì)量為0.05g，攪拌均勻，加入與SiO2質(zhì)量比為100ppm的Karstedt催化劑，30℃反應(yīng)3h，離心，正己烷抽提，得PMHS改性的SiO2粒子。0.24gPMHS疏水改性的SiO2粒子分散于8ml濃度為15mg/ml的脂肪酶溶液中，25℃振蕩12h，磷酸緩沖液洗滌4次，得固載酶。測(cè)試酶固載量為232.5mg/g，酶活力為277.8U/g。重復(fù)使用12次后，酶活力為最初的75.9%。實(shí)施例6采用與實(shí)施例1相同的方法配制脂肪酶溶液；2gSiO2粒子分散于含氫量為1.0wt%的PMHS的正己烷溶液中，該溶液的濃度為0.3wt%，PMHS的質(zhì)量為0.2g，攪拌均勻，加入與SiO2質(zhì)量比為1000ppm的Karstedt催化劑，30℃反應(yīng)3h，離心，正己烷抽提，得PMHS疏水改性的SiO2粒子。將0.24gPMHS疏水改性的SiO2粒子分散于8ml濃度為15mg/ml的脂肪酶溶液中，25℃振蕩12h，磷酸緩沖液洗滌4次，得固定化酶，測(cè)試酶活力為265.6U/g，酶固載量為196.5mg/g。重復(fù)使用12次后，酶活力為最初的83.6%。實(shí)施例7采用與實(shí)施例1相同的方法配制脂肪酶溶液；2gSiO2粒子分散于含氫量為1.0wt%的PMHS的正己烷溶液中，該溶液的濃度為10wt%，PMHS的質(zhì)量為5g，攪拌均勻，加入與SiO2質(zhì)量比為1000ppm的Karstedt催化劑，30℃反應(yīng)3h，離心，正己烷抽提，得PMHS疏水改性的SiO2粒子。將0.24gPMHS疏水改性的SiO2粒子分散于8ml濃度為15mg/ml的脂肪酶溶液中，25℃振蕩12h，磷酸緩沖液洗滌4次，得固定化酶，測(cè)試酶活力為305.6U/g，酶固載量為199.5mg/g。重復(fù)使用12次后，酶活力為最初的80.2%。對(duì)比例1采用與實(shí)施例1相同的方法配制脂肪酶溶液；0.15gHMDS（六甲基二硅胺）溶于100ml濃度為3wt%的二氧化硅乙醇溶膠中，加入0.5ml的氨水做催化劑，30℃攪拌2h，室溫陳化7天，旋蒸，抽提，得HMDS疏水改性的SiO2。將0.24gHMDS疏水改性的SiO2粒子分散于8ml濃度為15mg/ml的脂肪酶溶液中，25℃振蕩10h，磷酸緩沖液洗滌4次，得固定化酶，酶活力為127.1U/g。酶固載量為139.3mg/g。重復(fù)使用12次后，酶活力為最初的55.4%。對(duì)比例2采用與實(shí)施例1相同的方法配制脂肪酶溶液；0.30g辛基三乙氧基硅烷（NOEO）溶于100ml濃度為3wt%的二氧化硅乙醇溶膠中，加入1ml的氨水做催化劑，30℃攪拌2h，室溫陳化7天，旋蒸，抽提，得辛基三乙氧基硅烷疏水改性的SiO2。將0.24g辛基三乙氧基硅烷疏水改性的SiO2粒子分散于8ml濃度為15mg/ml的脂肪酶溶液中，25℃振蕩10h，磷酸緩沖液洗滌4次，得固定化酶，酶活力為189.5U/g。酶固載量為126.3mg/g。重復(fù)使用12次后，酶活力為最初的65.5%。對(duì)比例3采用與實(shí)施例1相同的方法配制脂肪酶溶液；向100ml濃度為3wt%的SiO2乙醇溶膠中，加入濃度為5wt%的γ-縮水甘油醚氧丙基三甲氧基硅烷(KH560)做改性劑，1g氨水做催化劑，30℃攪拌3h，室溫陳化3天，旋蒸出乙醇，用乙醇洗滌固體，除去未反應(yīng)的KH560，得KH560改性的SiO2。將0.24gKH560疏水改性的SiO2粒子分散于8ml濃度為15mg/ml的脂肪酶溶液中，25℃振蕩10h，磷酸緩沖液洗滌4次，得固定化酶，酶活力為320.8U/g。酶固載量為130.0mg/g。重復(fù)使用12次后，酶活力為最初的32.9%。對(duì)比例4采用與實(shí)施例1相同的方法配制脂肪酶溶液；向100ml濃度為3wt%的SiO2的乙醇溶膠中，加入濃度為5wt%的γ-氨丙基三乙氧基硅烷(KH550)做改性劑，30℃攪拌3h，室溫陳化3天，旋蒸出乙醇，用乙醇洗滌固體，除去未反應(yīng)的KH550,得KH550改性的SiO2。將0.24gKH550疏水改性的SiO2粒子分散于8ml濃度為15mg/ml的脂肪酶溶液中，25℃振蕩10h，磷酸緩沖液洗滌4次，得固定化酶，酶活力為177.8U/g。酶固載量為103.0mg/g。重復(fù)使用12次后，酶活力為最初的46.3%。如圖1所示，為本發(fā)明采用含氫硅油改性SiO2粒子，該改性后的SiO2粒子表面覆有一層疏水的含氫硅油層，利于酶的固化及分散，含氫硅油用量小，改性效果明顯。如實(shí)施例1-7所示，本發(fā)明所述的含氫硅油改性后的SiO2固載的脂肪酶，酶活力達(dá)到180U/g以上，酶固載量達(dá)到190mg/g以上，重復(fù)使用12次后，相對(duì)酶活為75%以上，更進(jìn)一步地為80%以上。對(duì)比例1-4為現(xiàn)有技術(shù)中較常采用的硅烷偶聯(lián)劑來改性SiO2載體，可以看出，雖然其得到的固定化脂肪酶的酶活力能達(dá)到120U/g以上，較佳時(shí)能達(dá)到300U/g以上，但其酶固載量及多次使用后的酶活力較差，尤其是重復(fù)使用12次后，相對(duì)酶活降低尤為明顯，而本發(fā)明所述的固定化脂肪酶則能明顯改善上述問題，得到綜合性能均較好的固定化脂肪酶。從上述實(shí)施例1-7與對(duì)比例1-4對(duì)比，可以看出，本發(fā)明所述的含氫硅油改性后的SiO2固載的脂肪酶，無論是在固載酶活力、酶固載量以及重復(fù)使用性上都有較好的效果，且從綜合來看，甲基含氫硅油（PMHS）改性后的SiO2固載的脂肪酶效果最佳?，F(xiàn)有技術(shù)中還常采用PEG（聚乙二醇）等來改性SiO2載體，但該種改性方法不是直接反應(yīng)改性，而是通過包埋固載脂肪酶，與本案的固定化方法在概念、制備方法上均有所不同。另一種采用如十六烷基三甲基溴化銨等表面活性劑來改性SiO2載體，得到的固定化脂肪酶酶活力及重復(fù)使用性均較本發(fā)明所述的固定化脂肪酶酶活力及重復(fù)使用性明顯降低。以上實(shí)施例1-7中的改性后的SiO2與脂肪酶的質(zhì)量比均為2：1，發(fā)明人經(jīng)過多次試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，改性后的SiO2與脂肪酶的質(zhì)量比在2-8的范圍內(nèi)，改變改性后的SiO2與脂肪酶的質(zhì)量比，對(duì)固定化脂肪酶的酶活力、酶固載量以及重復(fù)使用性的影響并不顯著，因此，并不一一闡述。本發(fā)明所制得的固定化酶載體為含氫硅油疏水改性的SiO2，酶源為米根霉脂肪酶，其水解橄欖油（主要成分是三油酸甘油酯）活力最佳達(dá)305U/g，具有良好的水解活力。重復(fù)使用性實(shí)驗(yàn)表明，在最優(yōu)條件下，以含氫硅油疏水改性的SiO2為載體的固定化酶重復(fù)使用12次后，酶活仍保持最初的80%以上，同樣的方法，測(cè)以未修飾的SiO2為載體的固定化酶，重復(fù)使用12次后，酶活降為最初的50%以下，疏水改性有效的提高了固定化酶的重復(fù)使用性。圖2是PMHS改性前后固載酶的重復(fù)使用情況，縱坐標(biāo)為重復(fù)使用后的酶活力與初始酶活力的百分比。其中A為未改性的二氧化硅固載的米根霉脂肪酶重復(fù)使用情況，B為PMHS改性二氧化硅固載米根霉脂肪酶重復(fù)使用情況。從圖2，可以看出，多次重復(fù)使用后未改性的二氧化硅固載的脂肪酶活力迅速下降，而PMHS改性的二氧化硅固載的脂肪酶活力下降較為平緩。經(jīng)過12次重復(fù)使用，PMHS改性的固定化酶相對(duì)酶活為80.2%，未改性的固定化酶相對(duì)酶活為45.5%，提高了接近一倍，因此，采用含氫硅油改性的SiO2的穩(wěn)定性有顯著改善。本發(fā)明中所述的穩(wěn)定性指的是經(jīng)過多次使用后，仍能保持較高的酶活力。如上所述，可較好的實(shí)現(xiàn)本發(fā)明。以上所述，僅是本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并非對(duì)本發(fā)明作任何形式上的限制，依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實(shí)質(zhì)，在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，對(duì)以上實(shí)施例所作的任何簡單的修改、等同替換與改進(jìn)等，均仍屬于本發(fā)明技術(shù)方案的保護(hù)范圍之內(nèi)。