專利名稱：一種提取燕麥β－葡聚糖的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種提取燕麥β-葡聚糖的方法。
背景技術(shù)：
燕麥β-葡聚糖是以β-1，3-，β-1，4-糖苷鍵連接起來的粘性多聚葡聚糖，其主要集中于燕麥麩皮的糊粉層。燕麥β-葡聚糖具有多種功能，可以降低血脂、控制血糖、增強(qiáng)免疫力，以及防治便秘、改善腸道微環(huán)境等，廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥和保健食品領(lǐng)域。
目前，制備燕麥β-葡聚糖一般都通過溶劑提取或者采用溫和堿提取法。這些方法都需要引入有機(jī)溶劑，成本高，去除不易；而且，在分離蛋白過程中普遍采用等電點(diǎn)沉淀的方法，去除效率低，去除過程需要離心，不利于工業(yè)化生產(chǎn)；這些提取方法還存在步驟繁瑣，加入試劑多，所得產(chǎn)品純度不高等缺點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種提取燕麥β-葡聚糖的方法。
本發(fā)明所提供的提取燕麥β-葡聚糖的方法，包括如下步驟1)將燕麥麩皮在50-60℃下加水?dāng)嚢?，調(diào)節(jié)pH8-10；2)加入蛋白酶在45-60℃下處理水解燕麥麩皮中的蛋白；3)加入α-淀粉酶在80℃下處理，過濾，得到澄清液體；4)采用截留分子量為30000-50000Da的超濾膜過濾，得到β-葡聚糖溶液，冷凍干燥得到β-葡聚糖產(chǎn)品。
其中，步驟1)所述燕麥麩皮的粒徑優(yōu)選為20-60目。步驟1)所述燕麥麩皮與水的重量比為1∶10-20。
步驟2)蛋白酶為堿性蛋白酶；活力單位為50-200萬U/g，用量為3-5g堿性蛋白酶/100g燕麥麩皮；處理時間為1-4小時。
步驟3)α-淀粉酶的活力單位為2000-5000U/g，用量為1-4g α-淀粉酶/100g燕麥麩皮；處理時間為0.5-2小時。步驟3)過濾為采用板框過濾。板框過濾中還加有硅藻土作為助濾劑。
本發(fā)明提取燕麥β-葡聚糖的方法，不需要有機(jī)試劑，提取分離方法簡便，提取率高達(dá)81％，所得β-葡聚糖產(chǎn)品純度較高，達(dá)到85％，產(chǎn)品質(zhì)量有了很大的提高。


圖1為本發(fā)明提取的β-葡聚糖的工藝流程圖；圖2為皮膚表面的水份含量變化的百分比隨時間的變化曲線；圖3為大鼠皮膚中透明質(zhì)酸含量的變化圖；圖4A和圖4B為使用β-葡聚糖前后大鼠皮膚的照片。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1、提取β-葡聚糖提取β-葡聚糖的工藝流程圖如圖1所示，具體過程如下(1)燕麥麩皮選取選用20目到100目之間的燕麥麩皮，其中可溶性β-葡聚糖含量為8.6％。
(2)β-葡聚糖提取反應(yīng)容器加入去離子水，調(diào)pH值到8-10左右，加熱到50-60℃，加入燕麥麩皮，燕麥麩皮與水的重量比為1∶20，均勻攪拌1-3小時。
(3)蛋白去除提取后反應(yīng)容器內(nèi)的pH值約8.0-8.5，加入活力單位為100萬U/g的堿性蛋白酶(每100g燕麥麩皮使用5g堿性蛋白酶)，在50℃下繼續(xù)攪拌1-2小時。
(4)淀粉去除加入活力單位為4000U/g的α-淀粉酶(每100g燕麥麩皮使用2g堿性蛋白酶)，在80℃下攪拌處理0.5小時，把淀粉分解為小分子量的寡糖。
(5)利用板框過濾機(jī)過濾，加入硅藻土助濾，得到棕色澄清液體。
(6)采用截留分子量為50000Da的超濾膜超濾處理所得棕色澄清液體，收集截流液體，得到液體燕麥β-葡聚糖。
(7)冷凍干燥，得到燕麥β-葡聚糖產(chǎn)品。
產(chǎn)品的純度為85％，提取率為81％。
實(shí)施例2、燕麥β-葡聚糖產(chǎn)品的功能實(shí)驗(yàn)1、保濕功效實(shí)驗(yàn)采用人體測試方式，用水分測試儀測試皮膚的水份含量和TEWL值，選取20個自愿者；志愿者男女各半。采用兩種不同的乳液涂覆于皮膚表面一個含有5％燕麥-β-葡聚糖(β-glucan)，一個含有5％透明質(zhì)酸(HA)；每半小時測試一次，共4小時。皮膚表面的水份含量變化的百分比隨時間的變化曲線如圖2所示，結(jié)果表明與透明質(zhì)酸相比，燕麥β-葡聚糖具有更好的長效保濕效果。
2、燕麥-β-葡聚糖可增加大鼠皮膚透明酯酸的含量2.1實(shí)驗(yàn)藥品燕麥β-葡聚糖采用1％燕麥β-葡聚糖；對照組采用1％透明質(zhì)酸。
2.2實(shí)驗(yàn)動物清潔級Wistar大鼠40只，雄性，體重220～240g，購自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動物中心2.3儀器與試劑北京市新技術(shù)應(yīng)用研究所MB-酶標(biāo)儀；透明質(zhì)酸檢測試劑盒購自北京環(huán)亞泰克生物醫(yī)學(xué)技術(shù)有限公司。
2.4造模及給藥方法將大鼠隨機(jī)分為正常組、對照組和燕麥β-葡聚糖組，每組8只，用寵物推分別在實(shí)驗(yàn)動物大鼠的脊背部兩側(cè)脫毛，脫毛范圍3cm×3cm。
實(shí)驗(yàn)開始時，在背部兩側(cè)無毛區(qū)先用清水清洗，然后選取每只大鼠脊背兩側(cè)無毛區(qū)中間的皮膚，實(shí)驗(yàn)點(diǎn)約2cm×2cm，正常組除清水清洗外不做任何處理；對照組涂以等劑量的對照制劑、燕麥β-葡聚糖組涂以等劑量的燕麥β-葡聚糖制劑，每日一次。涂藥后7天取材。
2.5透明質(zhì)酸含量測定處死大鼠后立即取實(shí)驗(yàn)動物涂抹部位皮膚，標(biāo)記右側(cè)2cm×2cm環(huán)行取皮，去掉脂肪后，精密秤取濕重，將皮膚用眼科小剪剪碎，按1∶10(1g皮膚組織加入10mL生理鹽水)，移入玻璃勻漿器中，勻漿，勻漿過程中不斷冷卻，在4℃下10000rpm離心10min，取100μL勻漿上清液-20℃保存用于指標(biāo)的測定。
采用ELASA法測定皮膚中透明質(zhì)酸含量。大鼠皮膚中透明質(zhì)酸含量的變化結(jié)果如表1和圖3所示，結(jié)果表明燕麥β-葡聚糖組大鼠皮膚中透明質(zhì)酸含量明顯高于正常組，并且差異顯著；高于對照組，差異顯著。
大鼠皮膚中透明質(zhì)酸含量的變化(x±s)

與正常組比較，*P＜0.05，**P＜0.01，與對照組比較，#P＜0.05，##P＜0.01使用皮膚紋理測量儀測定皮膚紋理，比較使用燕麥β-葡聚糖和未使用燕麥β-葡聚糖皮膚紋理變化，使用燕麥β-葡聚糖前的皮膚照片如圖4A，使用燕麥β-葡聚糖一周后的皮膚照片如圖4B，試驗(yàn)表明使用燕麥β-葡聚糖一周后，皮膚紋理得到很大改善。
權(quán)利要求
1.一種提取燕麥β-葡聚糖的方法，包括如下步驟1)將燕麥麩皮在50-60℃下加水?dāng)嚢瑁{(diào)節(jié)pH8-10；2)加入蛋白酶在45-60℃下處理水解燕麥麩皮中的蛋白；3)加入α-淀粉酶在80-100℃下處理，過濾，得到澄清液體；4)采用截留分子量為30000-50000Da的超濾膜過濾，得到β-葡聚糖溶液，冷凍干燥得到β-葡聚糖產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟1)所述燕麥麩皮的粒徑為20-100目。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟1)所述燕麥麩皮與水的重量比為1∶10-20。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟2)蛋白酶為堿性蛋白酶；活力單位為50-200萬U/g，用量為3-5g堿性蛋白酶/100g燕麥麩皮；處理時間為1-4小時。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟3)α-淀粉酶的活力單位為2000-5000U/g，用量為1-4g α-淀粉酶/100g燕麥麩皮；處理時間為0.5-2小時。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟3)過濾為采用板框過濾。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于板框過濾中還加有硅藻土作為助濾劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種提取燕麥β－葡聚糖的方法。本發(fā)明所提供的提取燕麥β－葡聚糖的方法，包括如下步驟1)將燕麥麩皮在50－60℃下加水?dāng)嚢瑁{(diào)節(jié)pH 8－10；2)加入蛋白酶在45－60℃下處理水解燕麥麩皮中的蛋白；3)加入α－淀粉酶在80℃下處理，過濾，得到澄清液體；4)采用截留分子量為30000－50000Da的超濾膜過濾，得到β－葡聚糖溶液，冷凍干燥得到β－葡聚糖產(chǎn)品。本發(fā)明提取燕麥β－葡聚糖的方法，不需要有機(jī)試劑，提取分離方法簡便，提取率高達(dá)81％，所得β－葡聚糖產(chǎn)品純度高，達(dá)到85％以上，產(chǎn)品質(zhì)量有了很大的提高。
文檔編號C08B37/00GK1869077SQ20061008948
公開日2006年11月29日 申請日期2006年6月29日 優(yōu)先權(quán)日2006年6月29日
發(fā)明者董銀卯, 王昌濤, 王友升, 蘭社益, 任清, 趙華, 何聰芬 申請人:北京工商大學(xué)