專利名稱：14α，15α-亞甲基雌二醇類化合物的口服有效的雌激素酯的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及14α，15α-亞甲基雌二醇-酯，尤其在口服應(yīng)用時，與乙炔基雌二醇或天然雌激素相比，該酯具有可確切定義的雌激素作用。
雌激素是包含在大多數(shù)性功能和許多新陳代謝功能調(diào)節(jié)過程中的激素物質(zhì)。雌激素可由特定的前體在人體不同的器官和組織中合成。
成年婦女血液中循環(huán)的絕大部分雌激素來自卵巢。如果這種分泌停止，例如由于用藥物抑制新卵泡的生成，或由于卵泡成熟的自發(fā)性中止，那么就會面臨欠缺狀態(tài)，這在部分情況下可引起疾病。
這涉及到狀態(tài)紊亂、各種循環(huán)功能紊亂、由于動脈硬化癥發(fā)展而致的血脂水平(Spiegel)的不利改變和骨骼的分解代謝過程乃至明顯的骨質(zhì)疏松癥。
卵巢的激素生產(chǎn)結(jié)束時月經(jīng)周期停止。如果由于采用激素制品防止受孕而抑制了排卵，則激素避孕藥本身含有的雌激素就罅了雌激素缺乏現(xiàn)象的出現(xiàn)。
在出現(xiàn)更年期的雌激素缺乏現(xiàn)象時，通常采用天然雌激素來治療這種紊亂。
該藥物可以單獨間歇使用，也可以與孕激素相結(jié)合使用以抑制子宮中增生過程。
雌激素對特定的性功能和代謝功能有很寬的作用范圍。與以各種激素療法形式使用雌激素有關(guān)的不利的作用范圍也相當(dāng)寬。與疾病對應(yīng)的紊亂是各種各樣的。在治療的初始階段常常會觀察到出現(xiàn)惡心，在治療過程中這種痛苦會消失。嚴(yán)重的紊亂可由各種代謝作用引起。使用雌激素會改變調(diào)節(jié)凝血的因素。相應(yīng)的改變可能與各種其它因素(例如個體性情、手術(shù)、多夢、抽煙)一起共同作用，促進(jìn)血栓栓塞過程。這種血栓事件可能導(dǎo)致嚴(yán)重的后果，例如心肌梗塞或中風(fēng)發(fā)作。
所舉實例表明，雌激素對于治療雌激素缺乏狀態(tài)是很有效的，絕大多數(shù)替代治療的效果是毫無問題的。另一方面，激素避孕的已知副作用表明，治療時引入的雌激素也可能引起危險。
所有觀察到的副作用的原因在于在引入專業(yè)文獻(xiàn)中已知的雌激素的情況下，難于看出在超過精確測定的生物活性物質(zhì)含量時在生物體中將要達(dá)到的確定的最終效果。
例如，按照Goldzieher等人的觀點(American Journal of Ostetrics and Gynecology，Vol.160/5，1260-64頁，1989)，口服一定劑量的乙炔基雌二醇后，即使對試驗的女性健康受檢志愿者已嚴(yán)格統(tǒng)一了服藥條件，各人也會出現(xiàn)不同的生物活性物質(zhì)水平。
由確定隨個體改變的血液中乙炔基雌二醇濃度(在其它藥物動力學(xué)研究中也出現(xiàn)這種濃度)可能引出某些技術(shù)難題，減少這種難題正是本發(fā)明的主題。
為了達(dá)到血液中特定的乙炔基雌二醇水平，必須用不同劑量的這種雌激素對婦女進(jìn)行治療。但這在實際上是不可能的。合理的假定是，在激素避孕藥中存在的劑量只對服用該藥劑的特定一部分婦女是最佳的。對于大多數(shù)用藥者來說，規(guī)定的劑量不是太高就是太低了。
用避孕藥時經(jīng)常看到的穿破性子宮出血和經(jīng)間期出血證明了這樣一種觀點，即用藥的相關(guān)婦女服用的雌激素劑量太低了。而另一方面，雌激素帶來的副作用如惡心、胸悶和滯液則傾向于另一種假定，即在這些情況下達(dá)到的雌激素濃度超過了最佳水平。上述概況似乎是合理的，因為乙炔基雌二醇或其前藥(Frodrug)激素避孕劑是唯一的雌激素，它們至今包含在合成的口服避孕藥中。
對于在更年期替代療法中所用的物質(zhì)，由于其總體的口服生物有效性低而可變，同樣存在難于精確地確定正確的治療用劑量的困難。
本發(fā)明的任務(wù)在于，開發(fā)新的具有精確確定的雌激素效力的活性物質(zhì)。
本發(fā)明的另一個任務(wù)在于，開發(fā)新的活性物質(zhì)的口服給藥的藥品。
該任務(wù)可由以下技術(shù)方案完成，即制備14α，15α-亞甲基雌二醇-酯，其中17-羥基和/或3-羥基被酯化。
本發(fā)明的優(yōu)選方案是下列的化合物通式Ⅰ的14α，15α-亞甲基雌二醇-酯， 其中R為-COR1，其中R1為烷基、環(huán)烷基、芳基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、烷氧基、烯氧基或芳氧基，
或者R為-SO2R2，其中R2為烷基、環(huán)烷基、芳基、二烷基氨基或亞甲基亞氨基，以及R′為氫原子或-COR1，其中R1為烷基、環(huán)烷基、芳基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、烷氧基、烯氧基或芳氧基。
本發(fā)明酯的制備可按下列方式進(jìn)行1).使式Ⅱ所示的14α，15α-亞甲基-雌二醇 與烷烴-、環(huán)烷烴-、芳烴-、烷基氨基-、二烷基氨基-、芳基氨基-、二芳基氨基-、烷氧基-、烯氧基-或芳氧基羧酸的一種活性衍生物進(jìn)行反應(yīng);
2).使通式Ⅰ所示的14α，15α-亞甲基-雌二醇的酯與烷基-、環(huán)烷基-、芳基-、二烷基氨基或亞甲基亞氨基磺酸的一種活性衍生物反應(yīng)，其中式Ⅰ中R為氫原子和R′為-COR1，其中R1具有上述含義;
3).使通式Ⅲ所示的14α，15α-亞甲基-雌酮類的酯
式中R為-COR1或-SO2R2，其中R1和R2具有上述含義;
用一種還原劑轉(zhuǎn)化成其中17-羥基和/或3-羥基被酯化的14α，15α-亞甲基-雌二醇類的酯，其中R為-COR1或-SO2R2，其中R1和R2具有上述含義，R′為氫原子;
并在必要時與烷烴-、環(huán)烷烴-、芳烴-、烷基氨基-、二烷基氨基-、芳基氨基-、二芳基氨基-、烷氧基-、烯氧基-或芳氧基羧酸的一種活性衍生物進(jìn)行反應(yīng);和4).酯化反應(yīng)是借助于相轉(zhuǎn)移催化作用進(jìn)行的。
14α，15α-亞甲基雌二醇-酯在用作口服避孕藥和抗更年期癥藥品時具有特殊的優(yōu)點。
例如，本發(fā)明的活性物質(zhì)組合物優(yōu)選以適于口服的蓋倫氏制劑的劑型使用。作為口服的劑型，可以考慮例如片劑、糖衣藥丸、丸劑或膠囊劑?？梢员旧硪阎姆绞街苽溥@些劑型，例如用“Remington's Pharmaceutical Sciences Handbook，Hack Pub.Co.，N.Y.，USA”中所述的方法。
由于開發(fā)了14α，15α-亞甲基雌二醇-酯，本發(fā)明主要產(chǎn)生了以一優(yōu)點-造成的穿破性出血和經(jīng)間期出血及或輕或重的健康故障均低于含乙炔基雌二醇的傳統(tǒng)避孕藥，前提條件是有可能精確地確定正確的劑量;
-由于在更年期替代治療中可以精確地調(diào)節(jié)替代劑量，因而具有比在替代療法中廣泛應(yīng)用的雌二醇更好確定的雌激素作用;
-有助于決定性地改進(jìn)雌激素療法;
-與迄今為止不太可能調(diào)節(jié)在血液中確定的藥物水平相比，該藥在應(yīng)用中可以使更大范圍的應(yīng)用者滿意。
借助于下列化合物證明本發(fā)明酯的優(yōu)秀的雌激素作用17β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基苯甲酸酯(代碼J821)17β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基環(huán)已烷羧酸酯(代碼J883)17β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基環(huán)戊烷羧酸酯(代碼J884)17β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基戊酸酯(代碼J885)14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二基二環(huán)已烷羧酸酯(代碼J886)17β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基N，N-二甲基氨基羧酸酯(代碼J893)17β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基乙氧基羧酸酯(代碼J918)17β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基叔丁氧基羧酸酯(代碼J921)
17β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基(1-甲基)丙氧基羧酸酯(代碼J922)17β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基(2-甲基)丙氧基羧酸酯(代碼J923)17β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基N-苯基氨基羧酸酯(代碼J925)17β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基異丙烯氧基羧酸酯(代碼J953)

圖1至6均表示本發(fā)明化合物的劑量-作用曲線。
圖1和2以乙炔基雌二醇(EE)和14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇(代碼J824)為對比物，圖3至6以乙炔基雌二醇、14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇和雌二醇(E2)作對比物。
通過測量一次口服藥物后的子宮濕物質(zhì)及藥物的劑量-作用分析來測定雌激素作用。
圖1至6表明，基本結(jié)構(gòu)J824的酯化可強(qiáng)化口服雌激素作用。另外，J824的雌激素作用明顯優(yōu)于EE(圖1和2)及EE和E2(圖3至6)。
在圖1、3和5中，用“對比(Kontr.)”所代表的矩形圖，正象在圖2、4和6中用OVX所代表的曲線圖那樣表示了未處理的、施行了閹割術(shù)(kastrierter)的鼠的劑量-作用曲線。
由于本發(fā)明化合物被解釋成J824的藥物前質(zhì)，由其釋放J824作為活性成分，所得到的與起始物質(zhì)相比的優(yōu)越性只能通過藥物動力學(xué)影響程度的改變來解釋。與起始物質(zhì)和乙炔基雌二醇相比(圖1至6)以及有時也與雌二醇(圖3至6)相比，統(tǒng)計數(shù)字確切地證明了本發(fā)明化合物的優(yōu)越性。尤其引人注意的是本發(fā)明化合物與乙炔基雌二醇相比(圖2)以及與乙炔基雌二醇和雌二醇相比(圖4和6)，具有更為陡峭的劑量-作用曲線。
乙炔基雌二醇平坦的劑量-作用曲線對應(yīng)于在人體中藥物動力學(xué)參數(shù)隨個體變化這一已知現(xiàn)象。這說明在很寬的劑量范圍內(nèi)都存在反應(yīng)和不反應(yīng)的個體。
要求保護(hù)的14α，15α-亞甲基雌二醇類的酯類化合物在口服有效性方面都明顯地優(yōu)于乙炔基雌二醇和天然雌激素。
觀察到的藥理學(xué)行為表明，所述類型的酯在口服施用時比乙炔基雌二醇更容易確定生物利用度和雌激素有效性，同樣，所述酯類具有口服雌激素療法(避孕和更年期替代療法)的優(yōu)點。
下面用實施例進(jìn)一步說明本發(fā)明。
實施例117β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基苯甲酸酯a)在攪拌下，向由2g(7.03mmol)14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇在20ml氯仿中所形成的懸浮液中先后加入2ml水、1.5ml(12.92mmol)苯甲酰氯和0.33ml(2.38mmol)三乙胺。
添加1ml90%的氫氧化鉀溶液后，在20°至25℃下繼續(xù)攪拌15分鐘，此后處理沉積物。
為此將水相和有機(jī)相分開，再用5ml氯仿萃取。合并有機(jī)相，依次用稀鹽酸、水、飽和碳酸氫鈉水溶液和水洗至中性，此后在真空下濃縮至干。用硅膠(粒度0.063至0.2mm)色譜法純化所得到的粗產(chǎn)物。用1∶1的甲苯和氯仿的混合液洗脫后并緊接著用丙酮重結(jié)晶后，得到17β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基苯甲酸酯，熔點為180至183℃。20D+97°(氯仿;c＝1.0);UVλmaxnm(ε)231(18765)，甲醇。
b)向由0.5g(1.28mmol)14α，15α-亞甲基-17-氧代-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基苯甲酸酯在80ml甲醇中形成的溶液中加入一種由0.154g(3.85mmol)硼氫化鈉在1ml水中形成的溶液，在20°至25℃總共攪拌5小時。爾后用100ml水稀釋反應(yīng)沉積物，用醋酸酸化并用氯仿萃取數(shù)次。合并有機(jī)相，用水洗滌至中性，用硫酸鈉干燥，然后在真空下濃縮至干。用硅膠(粒度0.063至0.2mm)色譜法純化得到的粗產(chǎn)物，用7∶3環(huán)已烷/醋酸乙酯洗脫并用丙酮重結(jié)晶后，得到17β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基苯甲酸酯，熔點為179至182℃。
實施例217β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基環(huán)戊烷羧酸酯在攪拌條件下向由1g(3.52mmol)14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇在10ml氯仿中形成的懸浮液中先后摻入1ml水、1.6ml(13.16mmol)環(huán)戊烷羧酰氯、0.17ml(1.19mmol)三乙胺和1.7ml90%的氫氧化鉀溶液。在20°至25℃繼續(xù)攪拌沉積物，用薄層色譜法監(jiān)視反應(yīng)過程。起始原料完全反應(yīng)后，在實施例1a的條件下處理。用硅膠(粒度0.063至0.2mm)色譜法純化粗產(chǎn)物、用6∶3∶1的甲苯/醋酸乙酯/氯仿洗脫并接著在甲醇中結(jié)晶后，得到17β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基環(huán)戊烷羧酸酯，熔點為130至134℃;[α]20D+108°(氯仿;c＝1.0);UVλmaxnm(ε)268(799);276(780)，甲醇。
實施例317β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基環(huán)已烷羧酸酯a)將1.5g(5.27mmol)14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇懸浮于15ml氯仿中，在攪拌條件下先后向其中摻入1.5ml水、1.32ml(9.70mmol)環(huán)已烷羧酰氯、0.25ml(1.78mmol)三乙胺和0.75ml90%的氫氧化鉀溶液。在20°至25℃下繼續(xù)攪拌沉積物，并用薄層色譜法監(jiān)視反應(yīng)過程。完全反應(yīng)后在實施例1a的條件下處理。用硅膠(粒度0.063至0.2mm)色譜法純化粗產(chǎn)物、用6∶3∶1的甲苯/醋酸乙酯/氯仿洗脫后，用甲醇重結(jié)晶得到17β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基環(huán)已烷羧酸酯。
熔點179至181℃;[α]25D+98°(氯仿;c＝1.0);UVλmaxnm(ε)268(789);276(789)，甲醇。
b)向由0.8g(2.04mmol)14α，15α-亞甲基-17-氧代-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基環(huán)已烷羧酸酯在100ml甲醇中形成的溶液中加入在1ml水中的0.246g(6.15mmol)硼氫化鈉，并在20°至25℃共攪拌4小時。
然后用水稀釋反應(yīng)沉積物，用醋酸酸化，并用氯仿萃取。如實施例1b所述進(jìn)一步處理和色譜分離后，用甲醇重結(jié)晶即得17β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基環(huán)已烷羧酸酯，熔點為180至182℃。
實施例417β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基戊酸酯在攪拌條件下，向由1g(3.52mmol)14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇在10ml二氯甲烷中形成的懸浮液中先后摻入2ml水、0.084g(0.368mmol)氯化三乙基芐基銨(TEBAC)和0.67ml(5.75mmol)戊酰氯。添加1ml40%的氫氧化鈉溶液后，在20至25℃下繼續(xù)攪拌沉積物，并用薄層色譜法監(jiān)視反應(yīng)過程。原料完全反應(yīng)后，在如實施例1a所述條件下處理。用硅膠(粒度0.063至0.2mm)色譜法純化粗產(chǎn)物、用6∶3∶1的甲苯/醋酸乙酯/氯仿洗脫并接著用丙酮/正已烷結(jié)晶后，得到17β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基戊酸酯，熔點為78至82℃。[α]25D+104°(氯仿;c＝1.0);UVλmaxnm(ε)269(811);275(811)，甲醇。
實施例517β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基N，N-二甲基氨基羧酸酯在攪拌條件下使1g(3.52mmol)14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇與50ml氯仿及4.86ml(35.2mmol)三乙胺混合。向得到的清液中先后加入0.214g(1.75mmol)4-(二甲基氨基)-吡啶和3.22ml(35.2mmol)二甲基氨基甲酰氯，接著在20至25℃攪拌三小時。反應(yīng)時間過后用30ml水稀釋該反應(yīng)沉積物，分出有機(jī)相，先后用5%鹽酸、水飽和碳酸氫鈉水溶液和水洗滌至中性。接著在真空下濃縮至干。粗產(chǎn)物用甲醇重結(jié)晶，得到17β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基N，N-二甲基氨基羧酸酯，熔點193至196℃;[α]20D+109°(氯仿;c＝1.0);UVλmaxnm(ε)269(818);276(782)，甲醇。
實施例614α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二基二環(huán)已烷羧酸酯將1g(3.52mmol)14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇懸浮于10ml氯仿中，在攪拌條件下先后摻入2ml水、1.76ml(12.93mmol)環(huán)已烷羧酰氯、0.33ml(2.35mmol)三乙胺和1ml 90%的氫氧化鉀溶液。在20至25℃繼續(xù)攪拌沉積物4小時，并用薄層色譜法監(jiān)視反應(yīng)過程。反應(yīng)完成后，在實施例1a條件下處理。
使得到的粗產(chǎn)物溶于甲醇/氯仿混合液中，濃縮至開始結(jié)晶。得到14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二基二環(huán)已烷羧酸酯，熔點為164至168℃;[α]25D+60°(氯仿;c＝1.0);UVλmaxnm(ε)275(808)，甲醇。
實施例717β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基丙烷-2-磺酸酯在攪拌條件下，向由1.2g(4.22mmol)14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇在6ml二氯甲烷中形成的懸浮液中先后摻入1.2ml水、0.95g(4.19mmol)TEBAC和0.7ml(6.23mmol)丙烷-2-磺酰氯。添加1.2ml 40%的氫氧化鈉溶液后，在20至25℃繼續(xù)攪拌沉積物，并用薄層色譜法監(jiān)視反應(yīng)過程。原料完全反應(yīng)后，在如實施例1a的條件下處理。用硅膠(粒度0.063至0.2mm)色譜法純化粗產(chǎn)物，用4∶6的醋酸乙酯/正已烷洗脫，隨后用甲醇重結(jié)晶后，得到17β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基丙烷-2-磺酸酯，熔點為74至79℃;[α]22D+99°(氯仿;c＝1.0);UVλmaxnm(ε)268(705)，甲醇。
實施例817β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基乙氧基羧酸酯將1g(3.52mmol)14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇懸浮在10ml二氯甲烷中，在攪拌下先后摻入2ml水、0.084g(0.368mmol)TEBAC和0.67ml(7.03mmol)氯代蟻酸酯。添加1ml40%的氫氧化鈉溶液后，在20至25℃再攪拌沉積物30分鐘。此后原料就完全反應(yīng)了。接著將水相與有機(jī)相分開，用二氯甲烷萃取兩次，每次用5ml。合并有機(jī)相，用水洗滌至中性，經(jīng)硫酸鈉干燥，此后在真空下濃縮至干。所得粗產(chǎn)物用兩酮/正已烷重結(jié)晶，得到17β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基乙氧基羧酸酯，熔點99至100℃;[α]20D+111°(二噁烷;c＝1.0);UVλmaxnm(ε)268(784);275(749)，乙醇。
實施例917β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基叔丁氧基羧酸酯向由1g(3.52mmol)14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇在20ml四氫呋喃中形成的溶液中先后加入0.7g(5.09mmol)無水碳酸鉀、3.68g(16.86mmol)連二碳酸二叔丁基酯和0.8g(3.03mmol)18-冠醚-6，并在室溫下攪拌2小時。此后濾出碳酸鉀，用二氯甲烷稀釋濾液，接著用水、飽和碳酸氫鈉溶液和水洗滌有機(jī)相。此后干燥有機(jī)提取物并在真空下濃縮至干。
用硅膠(粒度0.063至0.2mm)色譜法純化所得粗產(chǎn)物，用7∶3的環(huán)已烷/醋酸乙酯洗脫，并接著用甲醇/水重結(jié)晶后，得到17β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基叔丁氧基羧酸酯，熔點為111至113℃。[α]22D+74°(吡啶;c＝1.0);UVλmaxnm(ε)268(745)，275(745)，甲醇。
實施例1017β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基(1-甲基)丙氧基羧酸酯在攪拌條件下先后向由1g(3.52mmol)14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇在20ml二氯甲烷中形成的懸浮液中加入4ml水、0.084g(0.368mmol)TEBAC和0.98g(7.17mmol)氯代蟻酸仲丁酯(在4.95ml甲苯中)。添加2ml40%的氫氧化鈉溶液后，在20至25℃繼續(xù)攪拌沉積物，并用薄層色譜法監(jiān)視反應(yīng)過程。原料完全反應(yīng)后，從有機(jī)相中分離出水相，用二氯甲烷萃取。合并有機(jī)相，用水洗滌至中性，干燥并在40℃真空條件下濃縮至干。用硅膠(粒度0.063至0.2mm)色譜法純化粗產(chǎn)物并用7∶3的環(huán)已烷/醋酸乙酯洗脫，隨后用丙酮/正已烷重結(jié)晶后，得到17β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基(1-甲基)丙氧基羧酸酯，熔點93至95℃;[α]20D+105°(氯仿c＝1.0);UVλmaxnm(ε)268(807)，275(769)，甲醇。
實施例1117β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基(2-甲基)丙氧基羧酸酯將1g(3.52mmol)14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇懸浮在10ml二氯甲烷中，在攪拌條件下向其中先后加入2ml水、0.084g(0.368mmol)TEBAC、0.73ml(5.62mmol)氯代蟻酸異丁酯和1ml40%的氫氧化鈉溶液。在20至25℃再攪拌1.5小時。爾后用水稀釋反應(yīng)沉積物，分離有機(jī)相，并用二氯甲烷萃取。合并有機(jī)相，用水洗滌至中性，干燥并在真空下濃縮。殘留物用丙酮/正已烷重結(jié)晶，得到17β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基(2-甲基)丙氧基羧酸酯。熔點129至130℃;[α]20D+105°(氯仿c＝1.0);UVλmaxnm(ε)268(769)，275(769)，甲醇。
實施例1217β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基苯氧基羧酸酯在攪拌條件下，向由1g(3.52mmol)14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇在10ml二氯甲烷中形成的懸浮液中依次加入2ml水、0.084g(0.368mmol)TEBAC、0.71ml(5.62mmol)氯代蟻酸苯酯。添加1ml40%的氫氧化鈉溶液后，在20至25℃再攪拌2小時。此后用水稀釋，分離有機(jī)相，并用二氯甲烷萃取。合并有機(jī)相，用水洗滌至中性，干燥并在真空下濃縮。
用硅膠(粒度0.063至0.2mm)色譜法純化粗產(chǎn)物并用6∶3∶1的甲苯/醋酸乙酯/氯仿洗脫然后用丙酮/正已烷重結(jié)晶后，得到17β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基苯氧基羧酸酯，熔點187至189℃;[α]20D+98°(氯仿c＝1.0);UVλmaxnm(ε)267(884)，275(731)，甲醇。
實施例1317β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基N-苯基氨基羧酸酯使2g(7.04mmol)14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇與100ml甲苯、1.1ml(10.09mmol)異氰酸苯基酯和0.292ml(2.1mmol)三乙胺混合，并在攪拌條件下于1小時內(nèi)加熱至內(nèi)部溫度為80℃。然后使反應(yīng)溶液在真空下濃縮至干，用硅膠(粒度0.063至0.2mm)色譜法純化殘余物。用3∶1的四氯化碳/丙酮洗脫并接著用丙酮/正已烷重結(jié)晶，得到17β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基N-苯基氨基羧酸酯，熔點209至212℃;[α]20D+70°(吡啶;c＝1.0);UVλmaxnm(ε)237(26631)，甲醇。
實施例1417β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基異丙烯氧基羧酸酯在攪拌條件下，向由1g(3.52mmol)14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇在10ml二氯甲烷中形成的懸浮液中先后加入2ml水、0.084g(0.368mmol)TEBAC和0.758ml(7.02mmol)氯代蟻酸異丙烯酯。
添加1ml40%的氫氧化鈉溶液后，在20至25℃再攪拌沉積物60分鐘。此后用水稀釋，分離有機(jī)相，并用二氯甲烷萃取。
合并有機(jī)相，用水洗滌至中性，干燥并在40℃真空下濃縮至干。用硅膠(粒度0.063至0.2mm)色譜法純化并用7∶3的環(huán)已烷/醋酸乙酯洗脫，隨后用丙酮/正已烷重結(jié)晶后，得到17β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基異丙烯氧基羧酸酯。熔點145至146℃;[α]20D+110°(氯仿c＝1.0);UVλmaxnm(ε)268(744)，275(755)，甲醇。
實施例1517β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基N，N-二甲基氨基磺酸酯在攪拌條件下，向由1g(3.52mmol)14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇在30ml二氯甲烷中形成的懸浮液中先后加入3ml水、0.240g(1.05mmol)TEBAC和3.6ml(33.5mmol)N，N-二甲基氨基磺酰氯。添加6ml40%的氫氧化鈉溶液后，在20至25℃再攪拌3小時。然后分離有機(jī)相，用二氯甲烷萃取水相。合并有機(jī)相，用稀鹽酸、水、飽和碳酸氫鈉溶液和水洗滌至中性，干燥并在真空下濃縮。用硅膠(粒度0.063至0.2mm)色譜法提純所得粗產(chǎn)物并用9∶1的氯仿/醋酸乙酯洗脫，用丙酮重結(jié)晶后，得到17β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基N，N-二甲基氨基磺酸酯。熔點193至196℃;[α]20D+108°(氯仿c＝1.0);UVλmaxnm(ε)268(710)，276(665)，甲醇。
實施例1617β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基N，N-二乙基氨基磺酸酯在攪拌條件下，于4小時內(nèi)將3g(7.04mmol)14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇、30ml甲苯、2ml水、0.160g(0.7mmol)TEBAC、1.47ml(10.5mmol)N，N-二乙基氨基磺酰氯和2ml40%氫氧化鈉溶液形成的混合物加熱至內(nèi)部溫度為80℃。冷卻后分離有機(jī)相，用甲苯萃取。合并有機(jī)相，用稀鹽酸、水、飽和碳酸氫鈉溶液及水洗滌至中性，干燥并在真空下濃縮。
用硅膠(粒度0.062至0.2mm)色譜法提純所得粗產(chǎn)物并用9∶1的氯仿/醋酸乙酯洗脫，用甲醇重結(jié)晶后，得到17β-羥基-14α，15α-亞甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基N，N-二乙基氨基磺酸酯。
熔點69至73℃;[α]20D+98°(氯仿c＝1.0);UVλmaxnm(ε)268(713)，276(713)，甲醇。
14α，15α-亞甲基-雌二醇-酯的生物有效性研究方法學(xué)切除卵巢的大鼠不僅子宮而且陰道都隨雌激素的劑量而增加重量。這可歸因于粘膜增生、蛋白質(zhì)合成提高以及積水等原因。
作為本發(fā)明基礎(chǔ)的試驗使用成年的切除卵巢的大鼠。在一項對比研究中，測試了14α，15α-亞甲基-雌二醇類的酯與乙炔基雌二醇(EE)和14α，15α-亞甲基雌二醇(J824)相比較的口服時的雌激素作用。給出的劑量與分子的類甾醇核有關(guān)。一次性口服測試物質(zhì)。在試驗的第4天，測定子宮重量(濕重量)作為雌激素作用的參數(shù)。
試驗用動物將試驗開始時體重200～240g的雌性大鼠[種BORWISW(SPF/Cpb)]切除卵巢，手術(shù)后10天隨機(jī)地安排試驗組。然后使之一次性口服(第1天)測試物質(zhì)。服藥后第4天對試驗動物進(jìn)行解剖。
每組動物數(shù)n＝7動物喂養(yǎng)在慣常條件下(室溫21℃±2℃;光照方式12小時亮，12小時暗)喂養(yǎng)動物。大鼠和小鼠得到的動物喂養(yǎng)食品來自Fa.Altromin，飲用水隨使。
測試物質(zhì)使乙炔基雌二醇(EE)、J824、J821、J883、J884、J885、J886和J893懸浮在MyrjR中。
在3μg/動物、10μg/動物、30μg/動物和100μg/動物劑量下進(jìn)行測試。劑量數(shù)據(jù)與所稱重物質(zhì)量的類甾醇部分有關(guān)。對比組閹割后一次性施用藥物載體MyrjR。
評價參數(shù)用一次口服藥物后測出的子宮濕重量作為評價雌激素作用的標(biāo)志。
-測出子宮重量，并由此算出相對于載體對比組的雌激素效率%。
-對所述物質(zhì)作劑量-作用分析。
權(quán)利要求
1.14α，15α-亞甲基-雌二醇-酯，其中，17-羥基和/或3-羥基被酯化。
2.通式Ⅰ的14α，15α-亞甲基-雌二醇-酯， 其中R為-COR1，其中R1為烷基、環(huán)烷基、芳基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、烷氧基、烯氧基或芳氧基，或者R為-SO2R2，其中R2為烷基、環(huán)烷基、芳基、二烷基氨基或亞甲基亞氨基，以及R′為氫原子或-COR1，其中R1為烷基、環(huán)烷基、芳基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、烷氧基、烯氧基或芳氧基。
3.權(quán)利要求1所述14α，15α-亞甲基-雌二醇-酯的制備方法，其特征在于，使式Ⅱ所示的14α，15α-亞甲基-雌二醇 與烷烴-、環(huán)烷烴-、芳烴-、烷基氨基-、二烷基氨基-、芳基氨基-、二芳基氨基-、烷氧基-、烯氧基-或芳氧基羧酸的一種活性衍生物進(jìn)行反應(yīng)。
4.權(quán)利要求1或2所述的14α，15α-亞甲基-雌二醇-酯的制備方法，其特征在于，使通式Ⅰ所示的14α，15α-亞甲基-雌二醇的酯與烷基-、環(huán)烷基-、芳基-、二烷基氨基或亞甲基亞氨基磺酸的一種活性衍生物反應(yīng)，其中式Ⅰ中R為氫原子和R′為-COR1，其中R1含義與權(quán)利要求2中所給出的含義相同。
5.權(quán)利要求1或2所述的14α，15α-亞甲基-雌二醇-酯的制備方法，其特征在于，使通式Ⅲ所示的14α，15α-亞甲基-雌酮類的酯 式中R為-COR1或-SO2R2，其中R1和R2具有同權(quán)利要求2中所給出的含義，用一種還原劑轉(zhuǎn)化成權(quán)利要求1所述14α，15α-亞甲基-雌二醇類的酯，其中R為-COR1或-SO2R2，其中R1和R2與權(quán)利要求1中所給出的含義相同，R′為氫原子;并在必要時與烷烴-、環(huán)烷烴-、芳烴-、烷基氨基-、二烷基氨基-、芳基氨基-、二芳基氨基-、烷氧基-、烯氧基-或芳氧基羧酸的一種活性衍生物進(jìn)行反應(yīng)。
6.權(quán)利要求1至4中任意一項所述14α，15α-亞甲基-雌二醇-酯的制備方法，其特征在于，酯化反應(yīng)是借助于相轉(zhuǎn)移催化作用進(jìn)行的。
7.權(quán)利要求1的14α，15α-亞甲基-雌二醇-酯作為口服藥物的應(yīng)用。
8.權(quán)利要求1和7中任意一項的14α，15α-亞甲基-雌二醇-酯作為避孕藥和抗更年期癥藥的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及14α，15α-亞甲基雌二醇-酯，其中17-羥基和/或3-羥基被酯化。該酯可與藥物助劑相結(jié)合用作藥品，尤其是用作避孕藥或抗更年期癥藥，與乙炔基雌二醇或天然雌激素相比，該酯顯示了準(zhǔn)確定義的雌激素作用，尤其是采取口服形式效果更好。因此，不僅降低了傳統(tǒng)避孕藥的副作用，也決定性地改善了雌激素替代療法。
文檔編號C07J53/00GK1102830SQ94108120
公開日1995年5月24日 申請日期1994年7月2日 優(yōu)先權(quán)日1993年7月3日
發(fā)明者S·許瓦茲, H·J·塞曼, K·龐索爾德, H·亨凱爾, S·弗里克, M·M·迪特根, G·考夫曼, M·厄特爾, W·施特爾茨納, B·施奈德, W·艾爾格 申請人:耶拿制藥有限公司