專利名稱：四氫咔唑衍生物的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一些用于治療以極度血管舒張為特征的疾病，特別是用于治療偏頭痛的四氫咔唑衍生物。
偏頭痛是一種非致死性疾病，但十分之一的人患有偏頭痛。其主要癥狀是頭痛;其它癥狀包括嘔吐和畏光。當(dāng)前，使用最廣的偏頭痛的治療方法包括施用麥角胺、二氫麥角胺或羥甲內(nèi)基甲基麥角酰胺，它們也可用作預(yù)防性藥物。這些藥物特別是5HT1一樣受體激動(dòng)劑并且還具有其它作用;用它們治療會(huì)產(chǎn)生與其有關(guān)的很多相反的副作用。另外，隨著用麥角產(chǎn)物，例如麥角胺的治療停止，一些患者感受到一種“脫癮性頭痛”，使他們重復(fù)這種治療，結(jié)果導(dǎo)致成癮。最近已有建議有可能用各種色胺衍生物來治療偏頭痛。
鑒于以上所述，更有必要提供安全、有效的治療偏頭痛的藥物。
美國專利號4，257，952，4，172，834，4，062，864和3，959，309公開了一大類下式的四氫咔唑
其中N＝B特別是-NHR′或-NR′R″，其中R′和R″是低級烷基、芳基-低級烷基或一起形成一個(gè)雜環(huán);R特別是氫;Q1特別是氫、鹵素、低級烷氧基、氰基、-CO2R1或-CONR2R3(其中R1可以是氫、低級烷基或-CH2Ar并且R2和R3是氫、低級烷基或一起形成一個(gè)雜環(huán));Q2特別是氫、芳基-(低級烷氧基)、羥基、三鹵甲基、硝基或鏈烷酰氨基，并且Q3和Q4特別是每一個(gè)都是氫。所述這些化合物具有止痛、影響精神和anthistaminic的作用。
現(xiàn)已驚奇地發(fā)現(xiàn)某些四氫咔唑是5HT1一樣受體激動(dòng)劑和部分激動(dòng)劑并且認(rèn)為可用于治療其中表明5-HT1一樣激動(dòng)或部分激動(dòng)的疾病，特別是治療與頭痛如偏頭痛、偏頭神經(jīng)痛和與血管疾病有關(guān)的頭痛的疾病。在本說明書中，在下文所用的術(shù)語“5-HT1一樣激動(dòng)劑”包括對此受體的部分激動(dòng)劑。
因此，本發(fā)明提供了通式(Ⅰ)化合物及其生理上可接受的鹽在生產(chǎn)用于治療其中表明5-HT1一樣激動(dòng)的疾病，特別是用于治療或預(yù)防偏頭痛藥物上的應(yīng)用，
其中R1表示氫、鹵素、三氟甲基、硝基、羥基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、芳基C1-6烷氧基、-CO2R4、-(CH2)nCN、-(CH2)nCONR5R6、-(CH2)nSO2NR5R6、C1-6鏈烷酰氨基(CH2)n或C1-6烷基磺酰氨基(CH2)nR4表示氫、C1-6烷基或芳基C1-6烷基;
R5和R6分別表示氫或C1-6烷基，或者R5和R6與它們所連接的氮原子一起形成一個(gè)環(huán);
n表示0、1、或2;和R2和R3分別表示氫、C1-6烷基或芐基或者與它們所連接的氮原子一起形成吡咯烷基、哌啶基或六氫化吖庚因基環(huán)。
本發(fā)明還提供了治療其中表明5-HT1一樣激動(dòng)的疾病，特別是偏頭痛的方法，其包括給受治療者施予所需有效量的式(Ⅰ)化合物或其生理上可接受的鹽。
較合適地是，R′表示氫、鹵素、氰基、羥基、C1-6烷氧基、芳基C1-6烷氧基、-CO2R4、-(CH2)nCONR5R6或-(CH2)nSO2NR5R6;以及R2和R3分別表示氫或C1-6烷基。
可以理解地是，式(1)化合物可以含有一個(gè)或多個(gè)不對稱中心，并且此化合物將以光學(xué)異構(gòu)體(對映異構(gòu)體)存在。這樣，本發(fā)明包括所有此種對映異構(gòu)體以及包括其外消旋混合物的混合物。
在式(Ⅰ)化合物中，鹵原子可以是氟、氯、溴或碘原子。烷基基團(tuán)或烷基部分可以具有直鏈或支鏈。合適的芳基包括例如至多12個(gè)碳原子的未飽和單環(huán)或雙環(huán)和部分飽和的雙環(huán)，如苯基，萘基和四氫萘基。當(dāng)R5和R6與氮原子一起形成一個(gè)環(huán)時(shí)，較優(yōu)選地是其可以任意地進(jìn)一步含有選自氧、硫或氮的雜原子的5-7元飽和雜環(huán)。合適的雜環(huán)包括吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基和嗎啉基。
在上述化合物中，R1較優(yōu)選地表示鹵素(例如溴)、CF3、C1-6烷氧基(如甲氧基)、(CH2)nCN、-(CH2)nCONR5R6、-(CH2)nSO2NR5R6或C1-6鏈烷酰氨基。最優(yōu)選地是R1表示基團(tuán)-(CH2)nCONR5R6，其中n表示0以及R5和R6分別表示氫、甲基、乙基或丙基。更可取地是R5和R6分別表示氫或甲基。
當(dāng)R1表示-CO2R4時(shí)，則R4優(yōu)選地表示C1-6烷基。
R2和R3分別表示氫、甲基或乙基。更優(yōu)選地是NR2R3是-NH2。
根據(jù)本發(fā)明，式(Ⅰ)化合物較優(yōu)選地是用作部分激動(dòng)劑。
合適的生理上可接受的鹽是本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見的，包括例如酸加成鹽如與無機(jī)酸例如鹽酸、硫酸或磷酸以及有機(jī)酸例如琥珀酸、馬來酸、乙酸或富馬酸形成的鹽。其它非生理上可接受的鹽例如草酸鹽可以用于例如分離式(Ⅰ)化合物，并且它們包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。式(Ⅰ)化合物的溶劑化物和水合物也包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
可以確信，其中R2和R3兩者都表示氫的式(Ⅰ)化合物是新的。這樣，在另一方面本發(fā)明提供了式(ⅠA)化合物及其鹽
其中R1如上定義。
本發(fā)明進(jìn)一步提供了下列也被確信是新的具體的化合物3-氨基-6-氰基-1，2，3，4-四氫咔唑鹽酸化物，(+)-3-氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑鹽酸化物，(-)-3-氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑鹽酸化物，3-氨基-6-甲氧基-1，2，3，4-四氫咔唑鹽酸化物，3-氨基-6-溴-1，2，3，4-四氫咔唑鹽酸化物，3-氨基-6-甲基-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽，3-氨基-6-乙氧羰基-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽，3-氨基-6-(N-甲基甲酰氨基)-1，2，3，4-四氫咔唑半草酸鹽，3-氨基-6-氰甲基-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽，3-氨基-6-(N-甲基亞磺酰氨基甲基)-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽，3-氨基-6-氯-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽，3-氨基-6-三氟甲基-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽，3-氨基-6-正丁氧基-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽，3-氨基-6-亞磺酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽，3-氨基-6-硝基-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽，3-氨基-6-(N，N-二甲基甲酰氨基)-1，2，3，4-四氫咔唑半草酸鹽，
3-氨基-6-(哌啶-1-基羰基)-1，2，3，4-四氫咔唑鹽酸化物，3-氨基-6-(吡咯烷-1-基羰基)-1，2，3，4-四氫咔唑鹽酸化物，3-氨基-6-(N，N-二乙基甲酰氨基)-1，2，3，4-四氫咔唑鹽酸化物，3-氨基-6-(乙酰氨基)-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽，3-氨基-6-甲亞磺酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽，3-氨基-6-甲酰氨基甲基-1，2，3，4-四氫咔唑鹽酸化物，3-甲氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽，3-乙氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽，3-正丙基氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽，3-異丙基氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽，3-二甲氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽，3-芐氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽，3-吡咯烷基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽，和
3-(N-(甲基)乙氨基)-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽，3-氨基-6-(2-甲酰氨基乙基)-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽。
另一方面，本發(fā)明提供了新的式(Ⅰ)化合物例如式(ⅠA)化合物或上述任一化合物(以游離堿的形式和作為生理上可接受的鹽)用作治療劑，特別是用作5-HT1一樣激動(dòng)劑或部分激動(dòng)劑，例如治療偏頭痛的治療劑。
本發(fā)明還提供了新的式(Ⅰ)化合物的制備方法。
式(Ⅰ)化合物可以通過本領(lǐng)域制備四氫咔唑的已知方法制備，例如A)將式(Ⅱ)化合物
(其中R1如上定義)或其酸加成鹽與式(Ⅲ)化合物
(其中R2和R3如上定義)或其N-被保護(hù)的衍生物反應(yīng);或B)將式(Ⅳ)化合物
(其中R1如式(Ⅰ)中定義和Z是離去基團(tuán))與式HNR2R3化合物反應(yīng);
C)將式(Ⅴ)化合物
與?；蚧酋；瘎┓磻?yīng);
D)將一種式(Ⅰ)化合物轉(zhuǎn)變成另一種式(Ⅰ)化合物例如(ⅰ)水解其中R1表示-(CH2)nCN的式(Ⅰ)化合物或其N-被保護(hù)的衍生物以制備其中R1表示-(CH2)nCONH2或CO2R4的式(Ⅰ)化合物;
(ⅱ)胺化其中R1表示-CO2H的式(Ⅰ)化合物或其N-被保護(hù)的衍生物以制備其中R1表示-CONR5R6的式(Ⅰ)化合物;或(ⅲ)將其中R2和R3均為氫的化合物(Ⅰ)烷基化以制備其中R2和R3中的一個(gè)是氫和另一個(gè)是C1-6烷基的式(Ⅰ)化合物;
(ⅳ)將其中R1表示烷氧基或芳烷氧基的化合物解離以制備其中R1表示羥基的式(Ⅰ)化合物;
隨即如果必要將任意保護(hù)的氮原子脫保護(hù)和如果需要生成鹽。
方法(A)是費(fèi)歇爾吲哚合成法的一種形式，其可以用本領(lǐng)域公知的方法進(jìn)行。這樣，反應(yīng)可以在溶劑中，例如醇如乙醇或丁醇;或乙酸和在0-150℃范圍內(nèi)的溫度下完成。
通常以鹽酸鹽形式使用的式(Ⅱ)的肼是已知化合物或者可以通過常規(guī)方法制備。
用氧化劑例如吡啶鎓氯鉻酸鹽、吡啶鎓二鉻酸鹽、二吡啶Cr(Ⅵ)氧化物、次氯酸鈉、次氯酸鈣或二氧化錳，通過氧化相應(yīng)的環(huán)狀醇可以制得式(Ⅲ)的環(huán)己酮。
式(Ⅳ)化合物中的離去基團(tuán)Z可以是例如鹵原子或磺酰氧基例如對甲苯磺酰氧基或甲磺酰氧基。方法(B)可以在惰性有機(jī)溶劑中，如醇例如甲醇或醚例如四氫呋喃，和在0-150℃范圍內(nèi)的溫度下進(jìn)行。式(Ⅳ)化合物可以通過將式(Ⅱ)的肼與合適取代的環(huán)己酮化合物反應(yīng)獲得。當(dāng)Z是酰氧基或磺酰氧基時(shí)，其可以用常規(guī)方法由其中Z是羥基的式(Ⅳ)化合物制備?？捎糜诜椒?C)中的酰化劑和磺?；瘎┌Ｂ群突酋Ｂ?例如乙酰氯或甲磺酰氯)、烷基脂、活化的酯以及對稱和混合的酸酐。反應(yīng)可以在有機(jī)溶劑中，如鹵代烷(例如二氯甲烷)、酰胺(例如N，N-二甲基甲酰胺);醚(例如四氫呋喃)或如吡啶的叔胺中進(jìn)行。通常還使用堿，例如三乙胺、二甲氨基吡啶或堿金屬碳酸鹽或碳酸氫鹽。反應(yīng)可以在-10-100℃范圍內(nèi)的溫度下進(jìn)行。
式(Ⅴ)化合物可以通過與前文所述的方法(A)和(B)相類似的方法制備。或者式(Ⅴ)化合物可以通過其中R1是硝基的式(Ⅰ)化合物的還原反應(yīng)，例如通過催化氫化獲得。
腈的水解最初是形成酰胺，其可以被進(jìn)一步水解成酸，這是化學(xué)領(lǐng)域公知的。因此可以理解地是方法(Dⅰ)的確切產(chǎn)物將依賴于所選擇的水解反應(yīng)的條件。為了獲得其中R1表示H2NCO-的化合物，水解較優(yōu)選地是用過氧化氫，在堿性氫氧化物例如氫氧化鈉存在下，在溶劑中如醇例如甲醇中進(jìn)行。其它合適的水解方法包括乙酸和BF3;或甲酸和氫溴酸或鹽酸，為了制備其中R1表示-COOH的化合物，可以使用酸或堿催化水解。
方法(Dⅱ)可以在偶合劑例如二環(huán)己基碳二亞胺或N，N′-羰基二咪唑存在下通過其中R1是-CO2H的式(Ⅰ)化合物與胺HNR5R6反應(yīng)進(jìn)行。或者羧酸原料可以首先反應(yīng)以生成羧基被活化的衍生物，例如酰氯、酸酐或活性酯，然后再直接與胺HNR5R6反應(yīng)。羧酸也可以例如通過用六甲基亞磷酸三酰胺處理就地被活化。
根據(jù)方法(Dⅲ)的烷基化反應(yīng)可以通過式(Ⅰ)的胺與?；瘎├缢狒?，如乙酸酐或丙酸酐反應(yīng)以形成其中R2或R3中的一個(gè)是-C(O)C1-6烷基的中間體，隨即通過所述中間體的還原作用給出所需的產(chǎn)物而完成。其它的試劑和條件對本領(lǐng)域技術(shù)人員是顯而易見的。
根據(jù)方法(Dⅳ)的解離反應(yīng)可以用本領(lǐng)域公知的方法通過還原作用完成。
可以理解地是在上述許多反應(yīng)中，當(dāng)基團(tuán)R2和R3中的一個(gè)或兩個(gè)表示氫時(shí)，有必要保護(hù)基團(tuán)-NR2R3。合適的N-保護(hù)基是本領(lǐng)域公知的并且包括例如酰基如乙?；⑷阴；?、苯甲?；?、甲氧羰基、叔丁氧羰基、芐氧羰基或鄰苯二甲?；?以及芳烷基如芐基、二苯甲基或三苯甲基。當(dāng)R2和R3兩者都表示氫時(shí)，氮原子較優(yōu)選地是被保護(hù)成鄰苯二甲酰亞胺。保護(hù)基應(yīng)當(dāng)在反應(yīng)的最后很容易地脫除。N-脫保護(hù)反應(yīng)可以通過常規(guī)方法進(jìn)行，例如鄰苯二甲?；梢酝ㄟ^與肼的反應(yīng)而被除去;酰基如苯甲酰基可以通過水解而被解離以及芳烷基如芐基可以通過氫解而被解離。
當(dāng)式(Ⅰ)化合物是以對映異構(gòu)體混合物形式獲得時(shí)，它們可以通過常規(guī)方法分離，例如通過混合物與適宜的光學(xué)活性酸如d-酒石酸、1-蘋果酸、1-扁桃酸、1-古洛糖酸或2，3∶4，6-二-O-異亞丙基-酮-L-古洛糖酸反應(yīng)得到兩個(gè)非對映異構(gòu)體鹽，其可以通過例如結(jié)晶而被分離?；蛘?，對映異構(gòu)體混合物可以通過色譜法，例如在手性HPLC柱上被分離。
已發(fā)現(xiàn)式(Ⅰ)化合物是5HT1一樣受體激動(dòng)劑和部分激動(dòng)劑并被認(rèn)為可用于治療和/或預(yù)防偏頭痛以及與頭痛有關(guān)的其它疾病。
對于在醫(yī)藥上的應(yīng)用，本發(fā)明化合物通常是以常規(guī)的藥物組合物施用。因此，本發(fā)明另一方面提供了一種由新的式(Ⅰ)化合物或其生理上可接受的鹽和生理上可接受的載體構(gòu)成的藥物組合物。
式(Ⅰ)化合物可以通過任何常規(guī)立法施用，例如通過口服，非腸道、頰、舌下、鼻、直腸或經(jīng)皮給藥并因此適合的是藥物組合物。
式(Ⅰ)化合物和它們的有活性的生理上可接受的鹽當(dāng)經(jīng)口服給藥時(shí)可以配制成液體，例如糖漿、懸浮液或乳劑，片劑，膠囊和錠劑。
通常液體配劑是由在合適的液體載體(一種或幾種)例如水性溶劑如水、乙醇或甘油，或者非水性溶劑如聚乙烯二醇或油中的化合物或生理上可接受的鹽的懸浮液或溶液構(gòu)成。配劑還可以含有懸浮試劑、防腐劑、芳香劑或著色劑。
片劑形式的組合物可以用常規(guī)用于制備固體配劑的任何合適的一種或多種藥物載體制備。此類載體的實(shí)例包括硬脂酸鎂、淀粉、乳糖、蔗糖和纖維素。
膠囊形式的組合物可以用常規(guī)的包囊法制備。例如用常規(guī)載體可以制備含有活性成分的顆粒并然后裝入硬膠囊中;或者，用任何一種或多種合適的藥物載體，例如水性樹膠、纖維素、硅酸鹽或油制備分散體或懸浮液并將分散體或懸浮液裝入軟膠囊中。
典型的非腸道組合物是由在無菌水性載體或非腸道可接受的油，例如聚乙烯二醇、聚乙烯吡咯烷酮、卵磷脂、花生油或芝麻油中的化合物或生理上可接受的鹽的溶液或懸浮劑構(gòu)成?；蛘?，將溶液冷凍干燥并然后在施用藥之前與合適的溶劑再構(gòu)成溶液。
適于鼻施用的組合物通?？梢耘渲瞥蓺忪F劑、滴劑、凝膠和粉劑。典型地是，氣霧劑是由在生理上可接受的水性或非水性溶劑中活性物質(zhì)的溶液或均勻的懸浮劑構(gòu)成，其通常是在密閉容器中以單劑量或多重劑量的無菌形式存在，其可以是藥筒的形式或用霧化器再充填成所用的形式?；蛘?，密閉溶器是一個(gè)單位調(diào)劑器如單劑量鼻吸入器或者裝有可預(yù)示容器內(nèi)容物是否缺乏的測量閥的氣霧劑調(diào)劑器。當(dāng)劑量形式是由氣霧劑調(diào)劑器構(gòu)成時(shí)，其可以含有一種推進(jìn)劑，此推進(jìn)劑可以是壓縮的氣體如壓縮的空氣或者一種有機(jī)推進(jìn)劑如氟氯代烴。氣霧劑劑量形式也可以是泵-氣霧器形式。
適于經(jīng)頰或舌下用藥的組合物包括片劑、錠劑和芳香熏劑，其中活性成分是與如糖和阿拉伯膠、黃蓍膠或明膠和甘油的載體配制而成。
適于直腸用藥的組合物通常是一種含有如可可脂的栓劑基質(zhì)的栓劑形式。
適于經(jīng)皮用藥的組合物包括軟膏、凝膠和patches。
較優(yōu)選的組合物是如片劑、膠囊或安瓿的單位劑量形式。
按游離堿計(jì)算，口服的每一劑量單位優(yōu)選地是含有1-250mg(非腸道用藥優(yōu)選地是含有0.1-25mg)式(Ⅰ)化合物或其生理上可接受的鹽。
按游離堿計(jì)算，本發(fā)明生理上可接受的化合物通常施用的日劑量標(biāo)準(zhǔn)(對于成年患者)例如口服劑量是1mg至500mg之間，優(yōu)選地是10mg至400mg之間，例如10-250mg或靜脈內(nèi)、皮下或肌內(nèi)劑量是0.1mg至100mg，優(yōu)選地是0.1mg至50mg之間，例如1-25mg的式(Ⅰ)化合物或其生理上可接受的鹽，化合物每日施用1-4次。較合適地是，應(yīng)在一個(gè)連續(xù)的治療期內(nèi)，例如一個(gè)星期或更長的時(shí)間內(nèi)施用化合物。
生物數(shù)據(jù)5-HT1一樣受體檢測狗隱靜脈于37℃改性的Krebs溶液中制成支撐力為10mN的狗隱靜脈螺旋體。此溶液還含有每種1μmol/l的Ketanserin哌唑嗪、阿托品和新安替根，6μmol/l的可卡因以及200μmol/l抗壞血酸。在多種波動(dòng)描述器上用力換能器近似地測定等長收縮。將組織對5-羥色胺(5-HT)2μmol/l暴露兩次隨即洗滌。測定累積濃度效應(yīng)曲線，隨即在所用最高濃度的試驗(yàn)化合物存在下測定對5-HT的曲線。將試驗(yàn)化合物引起的收縮與5-HT引起的收縮進(jìn)行比較。由試驗(yàn)化合物誘導(dǎo)的最大效應(yīng)對2μmol/l 5-HT引起的效應(yīng)的比率計(jì)算得試驗(yàn)化合物的因有活性。由相應(yīng)的效應(yīng)曲線估算出試驗(yàn)化合物的EC50。相應(yīng)的平衡分離常數(shù)Kp通過Marano和Kaumann的方法(1976，J.pharmacol.Exp.Ther.198，518-525)估算出。
在此檢測中，實(shí)施例2、4、5、6、9、10、11、13、17、18、21、和24化合物具有的EC50在0.1-15μmol范圍內(nèi)。
兔基底動(dòng)脈方法按照與以前描述的相似的方法(Parsons和Whalley，1989，Eur J pharmacol 174，189-196)由兔顱內(nèi)動(dòng)脈內(nèi)分離的基底動(dòng)脈進(jìn)行試驗(yàn)。
簡言之，通過用過量的麻醉劑(戊巴比妥鈉)將兔殺死。迅速分出全腦并浸漬于冰泠卻的改性的Krebs溶液中，并借助于解剖顯微鏡再分出基底動(dòng)脈。Krebs溶液由下列成分構(gòu)成(mM)Na+(120);K+(5);Ca2+(2.25);Mg2+(0.5);Cl-(98.5);SO2-4(1);EDTA(0.04)，用95%O2/5%CO2平衡。用光滑的金屬線通過溫和地摩擦腔除去內(nèi)皮。然后將動(dòng)脈切成環(huán)狀節(jié)(約4-5mm寬)并在50ml組織浴器中在另外補(bǔ)充了(mM)Na+(20);延胡索酸(10);丙酮酸鹽(5);L-谷氧酸(5)以及葡萄糖(10)的改性的Krebs溶液中記錄等張力。然后在維持37℃下支撐力3-4mN情況下放好動(dòng)脈并用95%O2/5%CO2吹過溶液。
用90mMKCl去極化溶液試驗(yàn)最初的反應(yīng)性以及5-HT(10mM)收縮前由乙酰膽堿缺少誘導(dǎo)的舒張?jiān)囼?yàn)后，在抗壞血酸200mM，可卡因6mM，消炎痛2.8mM，Ketanserin 1mM和哌唑嗪1mM存在下做對5-HT的累積濃度效應(yīng)曲線(2nM-60mM)。
洗滌45-60分鐘后，隨即在抗壞血酸、消炎痛、可卡因、Ketanserin哌唑嗪存在下做對試驗(yàn)化合物或5-HT的累積濃度效應(yīng)曲線(作時(shí)間競爭對照)。
在此檢測中，實(shí)施例2、5、6、15、17、24、25、26、28和29化合物具有的EC50在0.04-15μmol范圍內(nèi)。
實(shí)施例13-氨基-6-氰基-1，2，3，4-四氫咔唑鹽酸化物用碳酸氫鈉水溶液將4-氨基環(huán)己醇鹽酸化物(6.08g，0、04mole)的水(60ml)溶液調(diào)至PH8，加入N-乙酯基-鄰苯二甲酰亞胺(8.76g，0.04mole)，隨即加入四氫呋喃(直至得到均勻溶液)。將澄清的溶液于室溫?cái)嚢柽^夜。此間有白色固體沉淀。真空下除去四氫呋喃并將剩余的水溶液用乙酸乙酯萃取直至溶液澄清。將乙酸乙酯萃取液合并，用水洗滌，干燥(MgSO4)并濃縮得白色固狀4-鄰苯二甲酰亞氨基環(huán)己醇(7.1g)。
將4-鄰苯二甲酰亞氨基環(huán)己醇(7.1g，0.029mole)的二氯甲烷(250ml)溶液用吡啶鎓氯鉻酸(8.6g，0.04mole)處理并將獲得的黑色混合物于室溫?cái)嚢柽^夜。加入乙醚(50ml)，混合物通過硅藻土過濾，濾液于真空下濃縮，殘余物通過柱色譜(SiO2;CHCl3/EtOAc)純化，得白色固狀4-鄰苯二甲酰亞氨基環(huán)己酮(6.4g)。
將4-氰苯基肼鹽酸化物(4.41g，0.026mole)溶于乙酸(100ml)中并加入乙酸鈉(2g)。加入4-鄰苯二甲酰亞氨基環(huán)己酮(6.4g，0.026mole)并將混合物回流加熱過夜。真空下除去溶劑，殘余物用甲醇研制，得灰棕色固狀3-鄰苯二甲酰亞氨基-6-氰基-1，2，3，4，-四氫咔唑(5.3g)。
將上述產(chǎn)物(1g)的乙醇(40ml)懸浮液用水(10ml)中肼處理，反應(yīng)混合物于室溫?cái)嚢柽^夜，此間反應(yīng)物溶解。真空下除去溶劑，殘余物于碳酸氫鉀水溶液和乙酸乙酯間配分。乙酸乙酯溶液用水洗滌，干燥并真空濃縮，得灰棕色固狀3-氨基-6-氰基-1，2，3，4-四氫咔唑(500mg)。將此產(chǎn)物轉(zhuǎn)變成鹽酸鹽得標(biāo)題化合物，mp289℃(分解)。
1H NMR〔250 MHz，CD3OD〕δ1.98-2.18(1H，m)，2.25-2.40(1H，m)，2.77(1H，dd)，2.98(2H，m)，3.22(1H，dd)，3.68(1H，m)，7.34(1H，d)，7.43(1H，d)，7.82(1H，s)。
實(shí)施例23-氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑鹽酸化物將實(shí)施例1的產(chǎn)物(400mg)溶于四氫呋喃中，加入二叔丁基二碳酸酯(500mg)?；旌衔镉谑覝?cái)嚢柽^夜，真空下除去溶劑，殘余物通過柱色譜(SiO2;CHCl3/EtOAc)純化，得3-叔丁氧羰基氨基-6-氰基-1，2，3，4-四氫咔唑(40mg)。
將上述產(chǎn)物的腈(440mg)、過氧化氫水溶液(30%，0.5ml)和氫氧化鈉(水溶液)(20%，0.5ml)在甲醇(25ml)中的混合物于室溫?cái)嚢柽^夜。加入焦亞硫酸氫鈉(100mg)，真空下除去溶劑。將殘余物溶于乙酸乙酯，分出乙酸乙酯層，干燥并真空濃縮，得膠狀固體，將其通過柱色譜(SiO2;CHCl3/EtOAc)純化，得白色固狀3-叔丁氧羰基氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑(400mg)，mp270℃(分解)。
將上述產(chǎn)物(400mg，0.0012mole)溶于二噁烷(100ml)中，將HCl氣吹過溶液20分鐘。此間有白色固體沉淀，通過吹入N2由溶液中除去過量的氯化氫，并通過過濾收集固體產(chǎn)物3-氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑鹽酸化物，用乙醚洗滌并干燥，得白色固狀標(biāo)題化合物(300mg)，mp.270(分解)。
1H NMR〔250 MHz，DMSO-d6〕δ1.96(1H，m)，2.16-2.30(1H，m)，2.74(1H，dd)，2.85(2H，m)，3.12(1H，dd)，在約3.6被水模糊的一個(gè)單峰，7.08(1H，brd.s)，7.27(1H，d)，7.61(1H，d)，7.87(1H，brd.s)，7.99(1H，s)，8.39(3H，brd.s).
實(shí)施例33-氨基-6-甲氧基-1，2，3，4-四氫咔唑鹽酸化物在乙醇(20ml)中將4-甲氧苯基肼鹽酸化物(0.87g，5.0mmol)與4-鄰苯二甲酰亞氨基-環(huán)己酮(1.22g，5.0mmol)回流下加熱反應(yīng)2小時(shí)，隨即冷卻并通過過濾除去沉淀的固體，得到3-鄰苯二甲酰亞氨基-6-甲氧基-1，2，3，4-四氫咔唑(1.62g)。
將上述產(chǎn)物(1.57g、4.5mmol)懸浮于乙醇(100ml)中并在室溫?cái)嚢柘掠秒滤衔?23ml)處理。30分鐘后，真空下除去溶劑并將殘余物于K2CO3(水溶液)和EtOAc間配分。將EtOAc層分離，用水洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)至干。將此殘余物溶于乙醇中并用醚的HCl處理直至混濁，然后靜置過夜，產(chǎn)生標(biāo)題化合物(0.95g)mp＞250℃。1H NMR〔250 MHz，DMSO-d6〕δ1.81-2.02(1H，m)，2.10-2.28(1H，m)，2.65(1H，dd)，2.82(2H，m)，3.02(1H，dd)，在約3.5被H2O模糊的一個(gè)單峰，3.74(3H，s)，6.66(1H，d)，6.84(1H，d)，7.14(1H，d)，8.16(3H，brd.s).
實(shí)施例43-氨基-6-溴-1，2，3，4-四氫咔唑鹽酸化物在回流的正丁醇中將4-溴苯基肼鹽酸化物(4.0g，18.1mmol)與4-鄰苯二甲酰亞氨基-環(huán)己酮(4.39g，18.1mmol)反應(yīng)20分鐘，隨即冷卻，過濾，將濾液蒸發(fā)至干，得橙色固狀3-鄰苯二甲酰亞氨基-6-溴-1，2，3，4-四氫咔唑(7.45g)。
將此產(chǎn)物(0.33g，0.83mmol)懸浮于乙醇(13ml)中并用肼水合物處理，然后于室溫?cái)嚢柽^夜。濾除固體沉淀，將濾液蒸發(fā)至干，并于K2CO3(水溶液)和乙酸乙酯間配分。分出有機(jī)層后，用水洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)至干，殘余物溶于MeOH中并用HCl氣處理。真空下除去溶劑，殘余物于乙醇/乙酸乙酯中結(jié)晶，得淺黃色固狀標(biāo)題化合物(0.15g)，mp308-310℃。
1H NMR〔250 MHz，DMSO-d6〕δ1.91(1H，m)，2.10-2.26(1H，m)，2.63(1H，dd)，2.84.(2H，m)，3.04(1H，dd)，3.50(1H，m)，7.12(1H，d)，7.24(1H，d)，7.55(1H，s)，8.15(2H，brd.s)11.12(1H，s)。
實(shí)施例53-氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑?qū)?-甲酰氨基苯基肼鹽酸化物(2.87g)和4-鄰苯二甲酰亞氨基環(huán)己酮(3.00g)在乙酸中混合，混合物于回流下加熱2小時(shí)。冷卻后，混合物用碳酸鉀水溶液中和，將獲得的黃色固體過濾用水洗滌并干燥。通過柱色譜(SiO2;CHCl3/CH3OH)純化，得3-鄰苯二甲酰亞氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑(2.8g)。
將上述產(chǎn)物(1.0g)懸浮于乙醇(10ml)中并加入肼水合物(5ml)，得到澄清的溶液，令混合物攪拌過夜，產(chǎn)生沉淀。將全部混合物蒸發(fā)至干，用K2CO3水溶液和水洗滌，得標(biāo)題化合物3-氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑(0.44g)，一水合物，mp.146-148℃。
1H NMR〔250 MHz，DMSO-d6〕δ1.49-1.77(1H，m)，1.83-2.03(1H，m)，2.17-2.40(1H，m)，2.62-2.80(2H，m)，2.90(1H，dd)，在約3.1被水模糊的一個(gè)單峰，7.03(1H，brd.s)，7.18(1H，d)，7.58(1H，d)，7.83(1H，brd.s)，7.98(1H，s)。
實(shí)施例6(+)-和(-)-3-氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑鹽酸化物方法1用手性HPLC(手性O(shè)D4.6mm柱，用己烷/乙醇85∶15洗脫)將(+)和(±)-3-叔丁氧羰基氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑分離成其對映異構(gòu)體。首先收集(+)-對映異構(gòu)體，mp＝150-152℃和〔α〕25D＝+70.1(甲醇中，0.41%w/v)。(-)一對映異構(gòu)體mp＝150-152℃和〔α〕25D＝-79.4(甲醇中，0.40%w/v)。在二噁烷中用HCl氣處理將(+)一對映異構(gòu)體轉(zhuǎn)變成母體胺鹽酸化物，以得到3-氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑鹽酸化物的(+)一對映異構(gòu)體，mp＝248-251℃，〔α〕25D＝+26.2(甲醇中，0.50%w/v)。類似地，將3-叔丁氧羰基氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑的(-)一對映異構(gòu)體轉(zhuǎn)變成3-氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑鹽酸化物的(-)一對映異構(gòu)體，mp＝248-251℃，〔α〕25D＝-28.6(甲醇中，0.50%w/v)。
方法2將(±)-6-甲酰氨基-3-氨基-1，2，3，4-四氫咔唑用一當(dāng)量在甲醇中的2，3∶4，6-二-O-異亞丙基-2-酮-L-古洛酸處理，得(+)一對映異構(gòu)體的鹽，產(chǎn)率38%(相對于外消旋物)和對映異構(gòu)體過量(ee)84%。此原料于甲醇中重結(jié)晶兩次，得(+)一對映異構(gòu)體的鹽，總產(chǎn)率25%(相對于外消旋物)并且＞98%ee。首先用堿性水溶液處理將產(chǎn)物轉(zhuǎn)變成鹽酸鹽，并將沉淀的游離堿在乙醇中用2M HCl水溶液處理，得(+)-3-氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑鹽酸化物。
實(shí)施例73-氨基-6-甲基-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽將4-鄰苯二甲酰亞氨基環(huán)己酮(2.16g)與4-甲苯/肼鹽酸化物(1.41g)反應(yīng)，并隨即按照實(shí)施例3中描述的方法將產(chǎn)物脫保護(hù)，得標(biāo)題化合物游離堿，將其轉(zhuǎn)變成草酸鹽(0.23g)，mp 272-5℃。
實(shí)施例83-氨基-6-乙氧羰基-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽將4-鄰苯二甲酰亞氨基環(huán)己酮(0.37g)與4-乙氧羰基苯基肼鹽酸化物(0.33g)反應(yīng)，并隨即按照實(shí)施例3中描述的方法脫保護(hù)，得標(biāo)題化合物游離堿。將此化合物轉(zhuǎn)變成草酸鹽(0.11g)，mp 230-240℃分解。
實(shí)施例93-氨基-6-(N-甲基甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑半草酸鹽將4-鄰苯二甲酰亞氨基環(huán)己酮(1.20g)與4-(N-甲基甲酰氨基)-苯基肼鹽酸化物(1.00g)反應(yīng)，并隨即按照實(shí)施例3中描述的方法脫保護(hù)，得標(biāo)題化合物游離堿。將此化合物轉(zhuǎn)變成半草酸鹽(0.22g)，mp227℃分解。
實(shí)施例103-氨基-6-氰甲基-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽將4-鄰苯二甲酰亞氨基環(huán)己酮(1.05g)與4-氰甲基苯基肼鹽酸化物(0.79g)反應(yīng)，并隨即按照實(shí)施例3中描述的方法脫保護(hù)，得標(biāo)題化合物游離堿，將其用草酸處理得草酸鹽(0.49g)，mp 219-224℃分解。
實(shí)施例113-氨基-6-(N-甲亞磺酰氨基甲基)-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽將4-鄰苯二甲酰亞氨基環(huán)己酮(0.42g)與4-(N-甲基亞磺酰氨基甲基)苯基肼鹽酸化物(0.44g)反應(yīng)，并隨即按照實(shí)施例3中描述的方法脫保護(hù)，得標(biāo)題化合物游離堿。將此化合物用草酸處理得草酸鹽(0.15g)，mp 218-222℃分解。
實(shí)施例123-氨基-6-氯-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽將4-鄰苯二甲酰亞氨基環(huán)己酮(6.7g)與4-氯苯基肼鹽酸化物(4.93g)反應(yīng)，并隨即按照實(shí)施例3中描述的方法脫保護(hù)，得標(biāo)題化合物游離堿，將其用草酸處理得草酸鹽(2.77g)，分解＞220℃。
實(shí)施例133-氨基-6-三氟甲基-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽將4-鄰苯二甲酰亞氨基環(huán)己酮(1.14g)與4-三氟甲基苯基肼鹽酸化物(1.00g)反應(yīng)，并隨即按照實(shí)施例3中描述的方法脫保護(hù)，得標(biāo)題化合物游離堿(0.40g)。將此化合物用草酸處理得草酸鹽，mp212-213℃。
實(shí)施例143-氨基-6-正丁氧基-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽將4-鄰苯二甲酰亞氨基環(huán)己酮(1.12g)與4-正丁氧基苯基肼鹽酸化物(1.00g)反應(yīng)，并隨即按照實(shí)施例3中描述的方法脫保護(hù)，得標(biāo)題化合物游離堿。此化合物用草酸處理得草酸鹽(0.47g)，mp227-229℃。
實(shí)施例153-氨基-6-亞磺酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽將4-鄰苯二甲酰亞氨基環(huán)己酮(1.00g)與4-亞磺酰氨基苯基肼鹽酸化物(1.08g)反應(yīng)，并隨即按照實(shí)施例3中描述的方法脫保護(hù)，得標(biāo)題化合物游離堿。將此化合物轉(zhuǎn)變成草酸鹽(0.090g)，分解＞200℃。
實(shí)施例163-氨基-6-硝基-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽將4-鄰苯二甲酰亞氨基環(huán)己酮(1.28g)與4-硝基苯基肼鹽酸化物(1.00g)反應(yīng)，并隨即按照實(shí)施例3中描述的方法脫保護(hù)，得標(biāo)題化合物游離堿，將其轉(zhuǎn)變成草酸鹽(0.25g)，mp275-277℃。
實(shí)施例173-氨基-6-(N，N-二甲基甲酰氨基)-1，2，3，4-四氫咔唑半草酸鹽將3-氨基-6-乙氧羰基-1，2，3，4-四氫咔唑(260mg，1.0mmol)懸浮于無水THF(5ml)中，加入二-叔丁基二碳酸酯(320mg，1.5mmol)。10分鐘后獲得一澄清溶液，令混合物攪拌20小時(shí)，然后除去溶劑，并將殘余物溶于乙酸乙酯中，用碳酸氫鈉水溶液洗滌，并干燥(Mg SO4)。除去乙酸乙酯后，殘余物用乙醚和己烷研制，得3-叔丁氧羰基氨基-6-乙氧羰基-1，2，3，4-四氫咔唑(310mg)。
將上述產(chǎn)物(556mg，1.55mmol)懸浮于乙醇(5ml)中并加入2M NaOH(3ml)?；旌衔镉诨亓飨录訜?小時(shí)并蒸發(fā)至干，將殘余物溶于水并用乙酸中和，沉淀出白色固狀3-叔丁氧羰基氨基-6-羧基-1，2，3，4-四氫咔唑(425mg)。將上述產(chǎn)物(400mg，1.2mmol)的無水DMF(8ml)溶液用六甲基亞磷酸三酰胺(198mg，1.2mmol)處理，并冷卻至-10℃。在此溫度下向混合物中吹入二乙胺氣10分鐘，然后于氮?dú)夥障碌渭铀穆然?185mg，1.2mmol)。令混合物于室溫下攪拌1小時(shí)，然后真空下除去DMF。殘余物于乙酸乙酯和水之間配分，有機(jī)層用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，然后用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。真空下除去溶劑，殘余的油用乙醚和己烷研制，并由甲苯中重結(jié)晶出固體，得3-叔丁氧羰基氨基-6-(N，N-二甲基甲酰氨基)-1，2，3，4-四氫咔唑(198mg)。
將此產(chǎn)物(180mg，0.53mmol)溶于二噁烷(5ml)中并吹入HCl氣以沉淀出油。真空下除去溶劑，將油溶于水中，并用K2CO3溶液處理以調(diào)節(jié)PH至12。然后胺游離堿用乙酸乙酯萃取，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)至干。將獲得的油溶于甲醇中并用草酸處理，得淡粉紅色固狀標(biāo)題化合物(140mg)mp＝190-195℃。
實(shí)施例183-氨基-6-(哌啶-1-基羰基)-1，2，3，4-四氫咔唑鹽酸化物將3-叔丁氧羰基氨基-6-羧基-1，2，3，4-四氫咔唑(175mg)與哌啶反應(yīng)，并隨即按照實(shí)施例17中描述的方法將產(chǎn)物脫保護(hù)，得標(biāo)題化合物，mp＝246-249℃(55mg)。
實(shí)施例193-氨基-6-(吡咯烷-1-基羰基)-1，2，3，4-四氫咔唑鹽酸化物將3-叔丁氧羰基氨基-6-羧基-1，2，3，4-四氫咔唑(140mg)與吡咯烷反應(yīng)，并隨即按照實(shí)施例17中描述的方法將產(chǎn)物脫保護(hù)，得標(biāo)題化合物，mp＝201-212℃(81mg)。
實(shí)施例203-氨基-6-(N，N-二乙基甲酰氨基)-1，2，3，4-四氫咔唑鹽酸化物將3-叔丁氧羰基氨基-6-羧基-1，2，3，4-四氫咔唑(105mg)與二乙胺反應(yīng)，反應(yīng)，如實(shí)施例17所述將產(chǎn)物脫保護(hù)，得標(biāo)題化合物，mp＝200-215℃(50mg)。
實(shí)施例213-氨基-6-(乙酰氨基)-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽將4-鄰苯二甲酰亞氨基環(huán)己酮(1.2g)與4-(乙酰氨基)一苯基肼鹽酸化物(1.0g)反應(yīng)，并隨即按照實(shí)施例3中描述的方法將產(chǎn)物脫保護(hù)，得標(biāo)題化合物游離堿(570mg)。將此產(chǎn)物(50mg)的一部分在甲醇中用草酸處理，得草酸鹽，軟化＞170℃(38mg)。
實(shí)施例223-氨基-6-甲亞磺酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽將3-鄰苯二甲酰亞氨基-6-硝基-1，2，3，4-四氫咔唑(4.00g)溶于熱乙酸乙酯(130ml)中。向冷卻的溶液中加入阮內(nèi)鎳，并于室溫最初的39psi壓力下將混合物氫化4小時(shí)。濾除不溶物后，將濾液蒸發(fā)至干，并兩次萃取到20%甲醇水溶液中，將萃取液合并，減小體積，得3-鄰苯二甲酰亞氨基-6-氨基-1，2，3，4-四氫咔唑(0.31g)。
將上述產(chǎn)物(0.50g)溶于新蒸得的吡啶(30ml)中，加入甲磺酰氯(0.28g)和4-二甲氨基吡啶(46mg)。攪拌下將混合物于50℃加熱5小時(shí)，然后蒸發(fā)至干。殘余物溶于氯仿，用水、鹽水和碳酸氫鈉水溶液洗滌，然后干燥(MgSO4)，并蒸發(fā)至干，得淺黃色固體，將其于含水乙醇中重結(jié)晶，得3-鄰苯二甲酰亞氨基-6-甲亞磺酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑(0.27g)。
將上述化合物懸浮于乙醇(15ml)中并加入肼水合物(2.72g)。室溫?cái)嚢?5分鐘后，將混合物蒸發(fā)至干，于水和乙酸乙酯間配分，水層用乙酸乙酯再萃取。將有機(jī)萃取液合并，用水洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)得淺黃色固體。將其溶于甲醇并用草酸處理(89mg)。加入乙醚得標(biāo)題化合物結(jié)晶(50mg)，mp230-233℃。
實(shí)施例233-氨基-6-甲酰氨基甲基-1，2，3，4-四氫咔唑鹽酸化物將于THF(56ml)中的3-氨基-6-氰甲基-1，2，3，4-四氫咔唑(2.5g)和二-叔丁基二碳酸酯(3.63g)攪拌2小時(shí)。蒸除THF，殘余物于碳酸氫鈉水溶液和乙酸乙酯間配分。水相用乙酸乙酯再萃取，并將合并的有機(jī)相用水洗滌，干燥(MgSO4)，并蒸發(fā)至干，得一固體，將其用乙醚/己烷(20%)研制，得灰白色固狀3-叔丁氧羰基氨基-6-氰甲基-1，2，3，4-四氫咔唑(3.44g)。
將上述產(chǎn)物(7.0g)溶于DMSO(70ml)中并加入過氧化氫(100體積，3.5ml)。攪拌1小時(shí)后，加入另外的過氧化物(8.5ml)，于室溫下將混合物攪拌2小時(shí)。加入碳酸鉀(0.84g)，混合物攪拌過夜并再攪拌20小時(shí)。將反應(yīng)混合物傾入水(500ml)中，將生成的白色固體過濾，并于甲醇中重結(jié)晶，得3-叔丁氧羰基氨基-6-甲酰氨基甲基-1，2，3，4-四氫咔唑(5.42g)。
將上述產(chǎn)物(500mg)溶于無水二噁烷(30ml)中，并吹入HCl氣20分鐘。將獲得的溶液和沉積的膠蒸發(fā)至干，并用碳酸鉀水溶液處理。將其用乙酸乙酯萃取，將萃取液合并，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)至干。殘余物溶于甲醇并用過量的草酸處理。加入乙醚，得標(biāo)題化合物結(jié)晶(250mg)，mp257-260℃。
實(shí)施例243-甲氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑鹽酸化物將4-氰基苯基肼鹽酸化物(20.2g)和4-苯甲酰氧基環(huán)己酮(25.9g)溶于冰醋酸(400ml)中并將混合物回流加熱1.5小時(shí)。冷卻后，將混合物過濾，濾液蒸發(fā)至干，并用碳酸氫鈉水溶液中和，得到一固體沉淀，將其通過色譜法(SiO2;己烷/乙酸乙酯)純化，得3-苯甲酰氧基-6-氰基-1，2，3，4-四氫咔唑(18g)。將此產(chǎn)物(11.6g)懸浮于乙醇(230ml)中并用2.5%的氫氧化鉀水溶液(120ml)處理，回流加熱1小時(shí)。將冷卻的混合物用冰醋酸中和并蒸發(fā)成固體殘余物，將其用水洗滌，并干燥，得3-羥基-6-氰基-1，2，3，4-四氫咔唑(6.6g)。
將上述產(chǎn)物(3.57g)溶于無水吡啶(35ml)中并用在無水吡啶(35ml)中的甲苯磺酰氯(3.51g)處理，混合物于100℃攪拌2小時(shí)。冷卻后，將溶液倒入水(500ml)中，用乙酸乙酯萃取，將后者萃取液用2M HCl洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)至干。通過色譜法(SiO2;己烷/乙酸乙酯)純化得3-甲苯磺酰氧基-6-氰基-1，2，3，4-四氫咔唑(0.53g)。
將上述產(chǎn)物(0.40g)溶于33%甲胺的醇(25ml)中并在一密閉的鐵容器中于100℃加熱1.5小時(shí)。冷卻后，混合物蒸發(fā)至干并通過色譜法(SiO2;氯仿/甲醇)純化，得3-甲氨基-6-氰基-1，2，3，4-四氫咔唑(0.13g)。
將上述產(chǎn)物(0.12g)溶于THF(10ml)中并于室溫下與THF(3ml)中的二-叔丁基二碳酸酯反應(yīng)過夜。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干，于2M碳酸氫鈉溶液和乙酸乙酯間配分，將有機(jī)萃取液干燥并蒸發(fā)，得一白色固體。將其用乙醚/己烷研制，得3-叔丁氧羰基甲氨基-6-氰基-1，2，3，4-四氫咔唑(0.14g)。
將上述產(chǎn)物(0.14g)溶于甲醇(15ml)中并用20%氫氧化鈉水溶液(0.20ml)和30%過氧化氫(0.20ml)的混合物處理，將全部混合物于室溫?cái)嚢柽^夜。加入偏亞硫酸氫鈉(38mg)，并將溶液蒸發(fā)至干，用色譜法(SiO2;氯仿/10%甲醇中NH4OH)得3-甲氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑(0.12g)。將上述化合物(0.11g)溶于甲醇(10ml)中并于室溫下用3M鹽酸處理。將混合物蒸發(fā)至干，與乙醇共沸得一固體，將其于甲醇/乙醚中重結(jié)晶，得標(biāo)題化合物，mp327-328℃(80mg)。
1H NMR〔250MHz，MeOH-d4〕d1.98-2.20(1H，m)，2.29-2.49(1H，m)，2.75-2.90(5H，s+m)，2.90-3.09(2H，m)，3.52-3.69(1H，m)，7.31(1H，d)，7.63(1H，d)，8.05(1H，s)。
實(shí)施例253-乙氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽將1，4-環(huán)己二酮單-2′，2′-二甲基-1，3-亞丙基縮酮(2.00g)與無水乙胺(10.0g)和苯(10ml)混合，并將混合物冷至5℃。滴加四氯化鈦(0.95g)的苯溶液(10ml)，混合物于室溫下攪拌1小時(shí)。將混合物過濾，并蒸發(fā)至干得一油狀物，將其溶于乙醇(30ml)中。向此溶液中加入鈀/碳催化劑(100mg)，于50psi壓力下將混合物氫化過夜。濾掉催化劑，蒸發(fā)乙醇，得油狀4-乙氨基環(huán)己酮2′，2′-二甲基-1，3-亞丙基縮酮(2.0g)將此化合物(0.80g)溶于甲酸(20ml)中并將溶液加熱至90℃1小時(shí)。蒸發(fā)甲酸，殘余物于氯仿和1M鹽酸間配分。將水層蒸干得4-乙氨基環(huán)己酮(0.40g)。
將上述產(chǎn)物(0.40g)和4-甲酰氨基苯基肼鹽酸化物(0.60g)于冰醋酸(20ml)中的混合物回流加熱1小時(shí)。真空下將酸蒸發(fā)成一油狀物，將其通過色譜法(SiO2;CHCl3/10%MeOH中NH3)純化，得一油狀物(0.50g)。將此產(chǎn)物的一部分(150mg)溶于甲醇并用草酸處理。溶液用乙醚處理，得結(jié)晶固狀標(biāo)題化合物，mp165-170℃(100mg)。
1H NMR〔250 MHz，DMSO-d6〕d1.25(3H，t)，1.81-2.05(1H，m)，2.20-2.38(1H，m)，2.61-2.79(1H，m)，2.79-2.94(2H，m)，2.98-3.28(3H，dd+s)，3.41-3.60(1H，m)，7.08(1H，brd.s)，7.28(1H，d)，7.60(1H，d)，7.82(1H，brd.s)，8.00(1H，s)，11.12(1H，s)。
實(shí)施例263-正丙氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽將丙胺(1.81g)溶于甲醇(12.5ml)中，并冷卻下加入甲醇(6.6ml)中的1.5M HCl。1分鐘后加入1，4-環(huán)己二酮單2′，2′-二甲基-1，3-亞丙基縮酮(1.0g)，再過10分鐘后，隨即加入氰氫硼化鈉(0.23g)。將混合物于室溫?cái)嚢?天，將獲得和混合物過濾，濾液蒸發(fā)并冷卻下用1M HCl(10ml)處理。將殘余物煮解成溶液，將其用乙醚洗滌，用氫氧化鈉水溶液堿化至PH12，并用二氯甲烷萃取。此萃取液用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，干燥(MgSO4)，并蒸干。進(jìn)行色譜分離(SiO2;氯仿/甲醇/氨)，得4-正丙氨基環(huán)己酮2′，2′-二甲基-1，3-亞丙基縮酮(0.72g)。
將此產(chǎn)物(0.66g)水解成酮，將其與4-甲酰氨基苯基肼鹽酸化物反應(yīng)并如實(shí)施例25所述轉(zhuǎn)變成草酸鹽，得標(biāo)題化合物(0.44g)，mp＞168℃分解。
實(shí)施例273-異丙氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽按照實(shí)施例25中描述的方法，將異丙胺(9.54g)與1，4-環(huán)己二酮單2′，2′-二甲基-1，3-亞丙基縮酮(2.0g)反應(yīng)，得4-異丙氨基環(huán)己酮2′，2′-二甲基-1，3-亞丙基縮酮(2.38g)。將此產(chǎn)物(0.66g)水解并與4-甲酰氨基苯基肼鹽酸化物(0.45g)反應(yīng)，混合物如上述處理，得標(biāo)題化合物游離堿(0.34g)。將其轉(zhuǎn)變成草酸鹽，mp＞235℃分解。
實(shí)施例283-二甲氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽按照實(shí)施例25中描述的方法，將二甲胺(10.0g)與1，4-環(huán)己二酮單2′，2′-二甲基-1，3-亞丙基縮酮(2.0g)反應(yīng)，得4-二甲氨基環(huán)己酮2′，2′-二甲基-1，3-亞丙基縮酮(0.72g)。將此產(chǎn)物(0.72g)水解并與4-甲酰氨基苯基肼鹽酸化物(0.47g)反應(yīng)，并如上所述將產(chǎn)物轉(zhuǎn)變成草酸鹽，得標(biāo)題化合物(0.20g)，mp99-101℃。
1H NMR〔250MHz，DMSO-d6〕d1.83-2.05(1H，m)，2.27-2.40(1H，m)2.72-3.00(9H，2m+s)，3.07-3.22(1H，dd)，3.50-3.68(1H，m)，7.05(1H，brd.s)，7.27(1H，d)，7.60(1H，d)，7.81(1H，brd.s)，8.00(1H，s)，11.11(1H，s)。
實(shí)施例293-芐氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽按照實(shí)施例26中描述的方法，將芐胺(0.59g)與1，4一環(huán)己二酮單2′，2′-二甲基-1，3-亞丙基縮酮(1.0g)反應(yīng)并隨即用氰氫硼化鈉將亞氨還原，得4-芐氨基環(huán)己酮2′，2′-二甲基-1，3-亞丙基縮酮(0.54g)。將此產(chǎn)物(0.52g)與4-甲酰氨基苯基肼鹽酸化物(0.34g)反應(yīng)，產(chǎn)物用草酸處理，得標(biāo)題化合物，mp＞190℃分解(0.11g)。
實(shí)施例303-吡咯烷基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽按照實(shí)施例25中描述的方法，將吡咯烷(15.6g)與1，4一環(huán)己二酮單-2′，2′-二甲基-1，3-亞丙基縮酮(2.0g)反應(yīng)，得4-吡咯烷基-環(huán)己酮2′，2′-二甲基-1，3-亞丙基縮酮(1.74g)。將此產(chǎn)物(1.70g)水解并與4-甲酰氨基苯基肼鹽酸化物(1.70g)反應(yīng)，如上所述產(chǎn)物用草酸處理，得標(biāo)題化合物(32mg)mp＞190℃分解。
實(shí)施例31
3-(N-甲基乙氨基)-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽按照實(shí)施例25中描述的方法，將N-甲基乙胺(13.0g)與1，4一環(huán)己二酮單-2′，2′-二甲基-1，3-亞丙基縮酮(2.0g)反應(yīng)，得4-(N-甲基乙氨基)一環(huán)己酮-2′，2′-二甲基-1，3-亞丙基縮酮(1.71g)。將此產(chǎn)物(0.86g)水解并與4-甲酰氨基苯基肼鹽酸化物(0.52g)反應(yīng)，如上所述處理，得標(biāo)題化合物(76mg)，mp＞130℃分解。
實(shí)施例323-氨基-6-(2-甲酰氨基乙基)-1，2，3，4-四氫咔唑草酸鹽將4-硝基肉桂酸(22.5g)和亞硫酰氯(20.8g)在苯(160ml)中的混合物回流加熱4小時(shí)。將獲得的橙色混合物過濾并蒸發(fā)得酰氨(22.9g)。將其溶于二氯甲烷(11)中，在冷卻至低于20℃并攪拌下，吹入氨氣。真空下除去溶劑，殘余物溶于熱的乙酸乙酯中，將溶液與1M氫氧化鈉溶液震搖，將獲得的有機(jī)相干燥，過濾并蒸發(fā)得一殘余物，將其與乙酸乙酯混合成漿，得結(jié)晶固狀4-硝基肉桂酰胺(18.6g)。將此產(chǎn)物(18.6g)懸浮于乙醇(11)中并于50psi下用Pd-C催化劑(6.6g)氫化1小時(shí)。將獲得的混合物過濾并蒸干，得4-氨基苯基丙酰胺(17.1g)。
冷卻和攪拌下將濃鹽酸(4ml)慢慢加到4-氨基苯基丙酰胺(0.80g)中，維持溫度低于5℃。在大于15分鐘內(nèi)向此漿狀物中滴加亞硝酸鈉(0.37g)的水(2ml)溶液，隨即再攪拌15分鐘。將如此形成的混濁溶液分批加到冷卻的攪拌下的氯化亞錫(2.19g)濃HCl(4ml)溶液中，并將獲得的混合物攪拌1小時(shí)。過濾后，減小溶液的體積直至有無機(jī)沉淀生成。將其過濾，并將濾液蒸干。殘余的膠狀物于乙酸中結(jié)晶，得4-肼基苯基丙酰胺鹽酸化物粗品(1.05g)。
將上述產(chǎn)物(1.05g)和4-鄰苯二甲酰亞氨基環(huán)己酮(1.18g)在乙酸(40ml)中的混合物回流加熱40分鐘。真空下除去溶劑并將殘余物于碳酸鉀水溶液和乙酸乙酯間配分，將有機(jī)相干燥(MgSO4)并蒸干，殘余物經(jīng)色譜分離(SiO2;CH2Cl2/MeOH)得3-鄰苯二甲酰亞氨基-6-甲酰氨基乙基-1，2，3，4-四氫咔唑(0.70g)。
將此產(chǎn)物(0.70g)溶于甲醇(50ml)中，并用肼水合物(1.0ml)處理，回流加熱30分鐘。將混合物蒸干，然后于乙酸乙酯和碳酸鉀水溶液間配分。將有機(jī)相干燥(MgSO4)并蒸干，殘余物溶于乙醇并用乙醇中的草酸(83mg)處理，生成一固體，將其于乙醇中重結(jié)晶，得標(biāo)題化合物(110mg)，mp 232-5℃。
藥物配劑實(shí)施例A將下列成分合并成9mm的藥片以制備適于口服的片劑mg/片式(Ⅰ)化合物 100乳糖 153淀粉 33Crospovidone 12
mg/片微晶纖維素 30硬脂酸鎂 2330mg實(shí)施例B適于非腸道給藥的注射液由下列成分制備% W∶W式(Ⅰ)化合物 0.50%(W∶V)1M檸檬酸 30%(V∶V)氫氧化鈉(適量) 至pH3.2注射用水(英國藥典) 至100ml將式(Ⅰ)化合物溶于檸檬酸中并用氫氧化鈉溶液慢慢地將PH調(diào)至PH3.2。然后用水將溶液配至100ml，經(jīng)過濾滅菌并封貯于合適尺寸的安瓿和藥瓶中。
權(quán)利要求
1.新的式(Ⅰ)化合物或其生理上可接受的鹽的制備方法
其中R1表示氫、鹵素、三氟甲基、硝基、羥基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、芳基C1-6烷氧基、-CO2R4、-(CH2)nCN、-(CH2)nCONR5R6、-(CH2)nSO2NR5R6、C1-6鏈烷酰氨基(CH2)n或C1-6烷基磺酰氨基(CH2)n；R4表示氫、C1-6烷基或芳基C1-6烷基；R5和R6分別表示氫或C1-6烷基，或R5和R6與它們所連結(jié)的氮原子一起形成一個(gè)環(huán)；n表示0、1或2；和R2和R3分別表示氫、C1-6烷基或芐基或與它們所連接的氮原子一起形成吡咯烷基、哌啶基或六氫化吖庚因基環(huán)；其包括A)將式(Ⅱ)化合物
(其中R1如上定義)或其酸加成鹽與式(Ⅲ)化合物
(其中R2和R3如上定義)或其N-被保護(hù)的衍生物反應(yīng)；或B)將式(Ⅳ)化合物
(其中R1如式(Ⅰ)中定義和Z是離去基團(tuán))與式HNR2R3的化合物反應(yīng)；C)將式(Ⅴ)化合物
與?；蚧酋；瘎┓磻?yīng)；D)將一種(Ⅰ)化合物轉(zhuǎn)變成另一種式(Ⅰ)化合物例如(ⅰ)水解其中R1表示-(CH2)nCN的式(Ⅰ)化合物或其N-被保護(hù)的衍生物以制備其中R1表示-(CH2)nCONH2或CO2R4的式(Ⅰ)化合物；(ⅱ)胺化其中R1表示-CO2H的式(Ⅰ)化合物或其N-被保護(hù)的衍生物以制備其中R1表示-CONR5R6的式(Ⅰ)化合物；或(ⅲ)將其中R2和R3均為氫的化合物(Ⅰ)烷基化以制備其中R2和R3中的一個(gè)是氫另一個(gè)是C1-6烷基的式(Ⅰ)化合物；(ⅳ)將其中R1表示烷氧基或芳烷氧基的化合物解離以制備其中R1表示羥基的式(Ⅰ)化合物；隨即如果必要將任意保護(hù)的氮原子脫保護(hù)和如果需要生成鹽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中R1表示囟素、CF3、C1-6烷氧基、-(CH2)nCN、-(CH2)nCONR5R6、-(CH2)nSO2NR5R6或C1-6鏈烷酰氨基，和R5和R6如上定義。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的方法，其中R1是基團(tuán)-(CH2)nCONR5R6，其中n是零和R5和R6分別表示氫、甲基或乙基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一權(quán)利要求的方法，其中R2和R3分別表示氫、甲基或乙基。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的制備式(ⅠA)化合物或其鹽的方法
其中R1如上定義。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的制備選自下列式(Ⅰ)化合物或其鹽的方法3-氨基-6-氰基-1，2，3，4-四氫咔唑;(+)-3-氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑;(-)-3-氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑;3-氨基-6-甲氧基-1，2，3，4-四氫咔唑;3-氨基-6-溴-1，2，3，4-四氫咔唑;3-氨基-6-甲基-1，2，3，4-四氫咔唑;3-氨基-6-甲基-1，2，3，4-四氫咔唑;3-氨基-6-乙氧羰基-1，2，3，4-四氫咔唑;3-氨基-6-(N-甲基甲酰氨基)-1，2，3，4-四氫咔唑;3-氨基-6-氰甲基-1，2，3，4-四氫咔唑;3-氨基-6-(N-甲基亞磺酰氨基甲基)-1，2，3，4-四氫咔唑;3-氨基-6-氯-1，2，3，4-四氫咔唑;3-氨基-6-三氟甲基-1，2，3，4-四氫咔唑;3-氨基-6-正丁氧基-1，2，3，4-四氫咔唑;3-氨基-6-亞磺酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑;3-氨基-6-硝基-1，2，3，4-四氫咔唑;3-氨基-6-(N，N-二甲基甲酰氨基)-1，2，3，4-四氫咔唑;3-氨基-6-(哌啶-1-基羰基)-1，2，3，4-四氫咔唑;3-氨基-6-(吡咯烷-1-基羰基)-1，2，3，4-四氫咔唑;3-氨基-6-(N，N-二乙基甲酰氨基)-1，2，3，4-四氫咔唑;3-氨基-6-(乙酰氨基)-1，2，3，4-四氫咔唑;3-氨基-6-甲亞磺酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑;3-氨基-6-甲酰氨基甲基-1，2，3，4-四氫咔唑;3-甲氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑;3-乙氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑;3-正丙氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑;3-異丙氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑;3-二甲氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑;3-芐氨基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑;3-吡咯烷基-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑;3-(N-(甲基)乙氨基)-6-甲酰氨基-1，2，3，4-四氫咔唑;和3-氨基-6-(2-甲酰氨基乙基)-1，2，3，4-四氫咔唑。
7.一種含有式(Ⅰ)化合物或其生理上可接受的鹽的藥物組合物的制備方法，其包括將式(Ⅰ)化合物或其生理上可接受的鹽與生理上可接受的載體結(jié)合。
全文摘要
通式(I)化合物或其生理上可接受的鹽的制備方法其中R
文檔編號C07D209/88GK1069726SQ9210883
公開日1993年3月10日 申請日期1992年6月25日 優(yōu)先權(quán)日1991年6月26日
發(fā)明者F·D·金, L·M·加斯特, A·J·考曼, R·C·楊格 申請人:史密絲克萊恩比徹姆有限公司