專利名稱：可用作天冬氨酰蛋白酶抑制劑的2－氨基噻唑化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及可用作天冬氨酰蛋白酶抑制劑的2-氨基噻唑化合物，其可藥用鹽，及其作為β分泌酶(secretase)蛋白酶和HIV蛋白酶抑制劑的應(yīng)用。本發(fā)明的化合物可用于治療阿爾茨海默氏病，用于治療HIV感染，以及用于治療AIDS。
背景技術(shù)：
蛋白酶類或蛋白水解酶類是通常存在于血漿、精液和各種哺乳動(dòng)物組織中的常見的生物控制劑。一些蛋白酶類，如天冬氨酰蛋白酶類β分泌酶蛋白酶和HIV蛋白酶，促進(jìn)人類疾病的病理生理學(xué)。例如，β分泌酶導(dǎo)致在腦中生成淀粉樣蛋白β(Aβ)蛋白，這是阿爾茨海默氏病所特有的。另外，HIV蛋白酶是存在于HIV基因組中的病毒酶，并且是HIV復(fù)制所必需的(Kohl等人，Proc.Nat′l Acad.Sci.1988，854686)。
本發(fā)明的化合物可用作β分泌酶和HIV蛋白酶的抑制劑，因此可用于治療其中牽涉β分泌酶和HIV蛋白酶的疾病，如阿爾茨海默氏病、HIV感染和AIDS。
阿爾茨海默氏病的特征在于腦中淀粉樣蛋白的異常沉積，其為細(xì)胞外斑塊和細(xì)胞內(nèi)神經(jīng)纖絲纏結(jié)形式。淀粉樣蛋白積聚速率是形成速率、聚集速率和從腦外出速率的組合。普遍認(rèn)為淀粉樣蛋白斑塊的主要成分是4kD淀粉樣蛋白質(zhì)(βA4，還稱為Aβ，β-蛋白和βAP)，其是尺寸大得多的前體蛋白的蛋白水解產(chǎn)物。淀粉樣蛋白前體蛋白(APP或者AβPP)具有受體樣結(jié)構(gòu)，其含較大胞外域、跨膜區(qū)和較短胞質(zhì)尾區(qū)。Aβ結(jié)構(gòu)域包括APP的胞外域和跨膜結(jié)構(gòu)域二者的一部分，因此其釋放暗示存在兩個(gè)不同的蛋白水解事件以生成其NH2-和COOH-末端。存在至少兩種分泌機(jī)制從膜釋放APP和產(chǎn)生可溶性COOH-截尾形式的APP(APPs)。從膜釋放APP及其片段的蛋白酶類被成為“分泌酶”。大部分APPs通過假定的α-分泌酶釋放，α分泌酶在Aβ蛋白內(nèi)部裂解以釋放α-APPs并防止完整的Aβ的釋放。少量APPs由β分泌酶(″β-分泌酶″)釋放，其在APP的NH2-末端釋放，并產(chǎn)生含有完整的Aβ結(jié)構(gòu)域的COOH-末端片段(CTFs)。
因此，β-分泌酶或β-部位淀粉樣蛋白前體蛋白裂解酶(“BACE”)的活性導(dǎo)致APP的異常裂解，產(chǎn)生Aβ，和在腦中β淀粉樣蛋白斑塊的積聚，這是阿爾茨海默氏病所特有的(參見R.N.Rosenberg，Arch.Neurol.，vol.59，Sep 2002，pp.1367-1368；H.Fukumoto等人，Arch.Neurol.，vol.59，Sep 2002，pp.1381-1389；J.T.Huse等人，J.Biol.Chem.，vol277，No.18，2002年5月3日版，pp.16278-16284；K.C.Chen和W.J.Howe，Biochem.Biophys.Res.Comm，vol.292，pp702-708，2002)。因此，可以抑制β-分泌酶或BACE的治療劑可用于治療阿爾茨海默氏病。
本發(fā)明的化合物還是HIV蛋白酶的抑制劑，因此可用于治療HIV感染和AIDS。
HIV是包括免疫系統(tǒng)進(jìn)行性破壞(獲得性免疫缺損綜合癥；AIDS)和中央和周圍神經(jīng)系統(tǒng)退化的綜合性疾病的病原體。逆轉(zhuǎn)錄病毒復(fù)制的一般特征是通過病毒編碼的蛋白酶進(jìn)行前體多蛋白的廣泛翻譯后加工以產(chǎn)生病毒裝配和發(fā)揮作用所需的成熟病毒蛋白。抑制這些過程防止通常性傳感病毒的產(chǎn)生。例如，Kohl等人，Proc.Nat′l Acad.Sci.1988，854686闡述了HIV編碼蛋白酶的遺傳滅活導(dǎo)致不成熟的非傳染性病毒顆粒的產(chǎn)生。這些結(jié)果指出了抑制HIV蛋白酶代表了可用于治療AIDS以及預(yù)防或者治療HIV感染的可行性方法。
HIV的核苷酸測序表明在一個(gè)可讀框中存在pol基因[Ratner等人，Nature 1985，313277]。氨基酸序列同源性提供了pol序列編碼逆轉(zhuǎn)錄酶、核酸內(nèi)切酶和HIV蛋白酶的證據(jù)[Toh等人，EMBO J.1985，41267；Power等人，Science 1986，2311567；Pearl等人，Nature1987，329351]。
目前臨床中使用幾種HIV蛋白酶抑制劑用于治療AIDS和HIV感染，包括茚地那韋(參見美國專利5,413,999)、奈非那韋(參見美國專利5,484,926)、沙奎那韋(參見美國專利5,196,438)和利托那韋(參見美國專利5,484,801)。這些蛋白酶抑制劑每個(gè)都是病毒蛋白酶的擬肽(peptidomimetic)競爭性抑制物，其防止HIV gag-pol多蛋白前體的分裂。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及可用作β-分泌酶的抑制劑、作為HIV蛋白酶的抑制劑的2-氨基噻唑化合物。本發(fā)明還涉及包括這些化合物的藥物組合物，和這些化合物和組合物在治療其中牽涉β-分泌酶和HIV蛋白酶的疾病中的應(yīng)用。
發(fā)明詳述本發(fā)明涉及式(I)的化合物 其中R1選自(1)-C1-6烷基，(2)-C2-6烯基，(3)-C0-6烷基-C3-6環(huán)烷基，(4) 和
(5)選自以下的雜芳基呋喃基、吡喃基、苯并呋喃基、異苯并呋喃基、苯并吡喃基、噻吩基、苯并噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、吲哚基、吲唑基、苯并咪唑基、喹啉基和異喹啉基，其中(a)所述烷基、烯基或環(huán)烷基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代鹵素、-C1-6烷基、-C1-6烷氧基、 羥基或氰基，和(b)所述雜芳基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代鹵素、-C1-6烷基、-C1-6烷氧基、苯基、羥基或氰基，和其中R1a、R1b、R1c、R1d和R1e選自(a)氫，(b)鹵素，(c)氰基，(d)羥基，(e)-C1-6烷氧基，(f)-C(＝O)-O-R7a，(g)-O-C0-6烷基-C(＝O)-R7a，(h)-N-R7a-S(O)p-R7b，或R1b和R1c連接在一起形成-O-CH2-O-或-CH＝CH-CH＝CH-；其中所述芳基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代鹵素、-C1-6烷基、-C1-6烷氧基、羥基或氰基；R2選自(1)氫，(2)鹵素，(3)-C0-6烷基-Q1-C1-6烷基，其中Q1為O或S，(4)-C1-6烷基，和(5)羥基；R3選自(1)氫，(2)-C1-6烷基，(3)-C0-6烷基-C3-6環(huán)烷基，(4)-C0-6烷基-Q2-C1-6烷基，其中Q2為O、S或-C(＝O)-O-，和(5) (6)-CH2-雜芳基，其中所述雜芳基選自呋喃基、吡喃基、苯并呋喃基、異苯并呋喃基、苯并吡喃基、噻吩基、苯并噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、吲哚基、吲唑基、苯并咪唑基、喹啉基和異喹啉基，其中所述烷基或環(huán)烷基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(a)鹵素，(b)-C1-6烷基，(c)-C2-6烯基，(d)-C1-6烷氧基，(e)-C6-10芳基，(f)羥基，或(g)氰基，和所述雜芳基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(a)-C1-6烷基，(b)-NR3fR3g，其中R3f和R3g選自(i)氫，(ii)-C1-6烷基，(iii)-C1-6烷基-C6-10芳基，其中所述芳基可以是未取代的或?yàn)辂u素、氰基、C1-6烷基或C1-6烷氧基取代，或(iv)-C1-6烷基-NR7aR7b，或N、R3f和R3g一起形成5或6元雜環(huán)基，其除了與R3f和R3g連接的N原子之外還任選含有N、S或O原子，和R3a、R3b、R3c、R3d和R3e選自(i)氫，
(ii)鹵素，(iii)氰基，(iv)羥基，(v)-C1-6烷基，(vi)-O-R7a，(vii)-(C＝O)-O-R8，(viii)-NR7a-S(O)pOR7b，(ix)-NR7a-S(O)pR7b，(x)-C0-6烷基-S(O)mR7a，(xi)-C(＝O)-NR7aR7b，(xii)-C(＝O)-R8，(xiii)-NH-C(＝O)-R7a，(xiv)-C0-6烷基-NR7aR7b，(xv)-N3，(xvi)-NO2，(xvii)C6-10芳基，其中所述芳基可是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(A)鹵素，(B)氰基，(C)-C1-6烷基，(D)-C1-6烷氧基，(E)-C(＝O)-O-R7a，(F)-C(＝O)-R7a，(G)-NR7aR7b，(H)-NR7a-S(O)p-R7b，(I)-NR7a-C(＝O)-R7b，(J)-NO2，(xvii)選自以下的雜芳基呋喃基、吡喃基、苯并呋喃基、異苯并呋喃基、苯并吡喃基、噻吩基、苯并噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、吲哚基、吲唑基、苯并咪唑基、喹啉基和異喹啉基，其中所述雜芳基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代
(A)-C1-6烷基，或(B)-C1-6烷氧基，或R3c和R3d連接在一起形成苯基或-O-CH2-O-或-CH＝CH-CH＝CH-基團(tuán)；或R2和R3連接形成以下碳環(huán)(A) 其中Q3選自(1)-CR7aR7b-，(2)-CR7aR7bCR7cR7d-，(3)-CR7a＝CR7b-，(4)-CR7aR7bCR7cR7dCR7eR7f-，(5)-CR7a＝CR7bCR7cR7b-，和(6)-CR7aR7bCR7d＝CR7e-；R4選自(1)氫，(2)鹵素，(3)-C1-6烷基，(4)-C2-6烯基，(5)-C2-6炔基，(6)苯基，(7)芐基，和(8)選自以下的雜芳基呋喃基、吡喃基、苯并呋喃基、異苯并呋喃基、苯并吡喃基、噻吩基、苯并噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、吲哚基、吲唑基、苯并咪唑基、喹啉基和異喹啉基，其中所述烷基、烯基、炔基和苯基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(a)鹵素，(b)氰基，
(c)羥基，(d)苯基，(e)-C1-6烷基，(f)-C1-6烷氧基，(g)-C(＝O)-O-R7a，(h)-C(＝O)-R7a，(i)-NR7aR7b，(j)-NR7a-S(O)p-R7b，(k)-NR7a-C(＝O)-R7b，(1)-NO2；和所述雜芳基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(a)-C1-6烷基，(b)-C(＝O)-O-R7a，(c)-C(＝O)-R7a，(d)-NR3fR3g，其中R3f和R3g選自(i)氫，(ii)-C1-6烷基，(iii)-C1-6烷基-C6-10芳基，其中所述芳基可是未取代的或被鹵素、氰基、C1-6烷基或C1-6烷氧基取代，或(iv)-C1-6烷基-NR7aR7b；或R3和R4連接在一起形成6元碳環(huán)(B) 條件是當(dāng)R3和R4連接在一起形成(B)時(shí)，則R1和R2選自氫或C1-6烷基，以及X1、X2、X3、X4、X5和X6選自氫、C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、氰基、烷基芳基或苯基，或R3和R4連接在一起形成7元碳環(huán)(C)
條件是當(dāng)R3和R4連接在一起形成(C)時(shí)，則R1和R2選自氫、C1-6烷基或苯基，或R1和R2可以通過基團(tuán)-CH2CH2CH2CH2-連接在一起，并且Y1、Y2、Y3、Y4、Y5、Y6、Y7和Y8選自氫、C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、氰基、烷基芳基或苯基，或R1和Y5，或R1和Y7通過-CH2-連接在一起，或R1和Y1，或Y1和Y3連接在一起形成苯基或環(huán)戊基環(huán)；R7a、R7b、R7c、R7d、R7e和R7f選自(1)氫，(2)C1-6烷基，和(3)C6-10芳基，其中所述烷基或芳基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代鹵素、-C1-6烷基、-C1-6烷氧基、羥基或氰基；R8選自(1)氫，(2)C1-6烷基，和(3)C6-10芳基，其中所述芳基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代鹵素、-C1-6烷基、-C1-6烷氧基、羥基或氰基；n為0、1、2或3；m為0或1；p為1或2；及其可藥用鹽，及其單獨(dú)的對映異構(gòu)體和非對映體。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及式(I)的化合物其中R2和R3未連接形成環(huán)基，R1、R2和R3各自可以是任何上面定義的基團(tuán)。在優(yōu)選組中，R3選自(1)-C1-6烷基，
(2)-C0-6烷基-C3-6環(huán)烷基，(3) 和(4)-CH2-雜芳基。
在更優(yōu)選的組中，R3為 且n為1。優(yōu)選地，R3為(S)構(gòu)型，如下所示 其中n為1。在更優(yōu)選的組中，R3為上述的(S)構(gòu)型，n為1，且R3a、R3b、R3c、R3d和R3e選自(i)氫，(ii)鹵素，(iii)氰基，(iv)羥基，(v)-C1-6烷基，(vi)-O-R7a，和(vii)-NO2。
在優(yōu)選實(shí)施方案中，R1為
且m為0。優(yōu)選地，R1a、R1b、R1d和R1e為氫，且R1c選自鹵素、C1-6烷基和C1-6烷氧基。
因此優(yōu)選的化合物組是式(II)的化合物 其中R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R3a、R3b、R3c、R3c、R3e、R4和n的定義如上所述。
在進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，R2為氫。在其它優(yōu)選實(shí)施方案中，R4為氫。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及式(III)的化合物 其中R1、R4和Q3的定義如上所述。
在優(yōu)選實(shí)施方案中，Q3選自(1)-CR7aR7b-，(2)-CR7aR7bCR7cR7d-，和(3)-CR7aR7bCR7cR7dCR7eR7f-。優(yōu)選地，Q3選自-CH2CH2-和-CH2CH2CH2-。
在進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，R1為 且m為0。在更優(yōu)選的實(shí)施方案中，R1d選自鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基和氰基，且R1a、R1b、R1c和R1e為氫。在其它優(yōu)選實(shí)施方案中，R1b和R1d選自鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基和氰基，且R1a、R1c和R1e為氫。
在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及式(IV)的化合物 其中R1、R2、X1、X2、X3、X4、X5和X6的定義如上所述。
優(yōu)選地，R1和R2為氫，以及X1、X2、X3、X4、X5和X6選自氫、C1-6烷基、氰基和苯基。
在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及式(V)的化合物
其中R1、R2、Y1、Y2、Y3、Y4、Y5、Y6、Y7和Y8的定義如上所述。
優(yōu)選地，R1和R2選自氫和苯基，以及Y1、Y2、Y3、Y4、Y5、Y6、Y7和Y8選自氫、C1-6烷基、氰基和苯基。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案包括選自以下實(shí)施例中的標(biāo)題化合物及其可藥用鹽的化合物。
本文使用的術(shù)語“烷基”，其本身或作為另一取代基的一部分，是指具有指定碳原子數(shù)的飽和的直鏈或支鏈烴基(如C1-10烷基是指具有1-10個(gè)碳原子的烷基)。本發(fā)明使用的優(yōu)選的烷基為含1-6個(gè)碳原子的C1-6烷基。示例性的烷基包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、戊基、己基等。
C0烷基，其作為另一結(jié)構(gòu)部分如C0-6烷基-C3-6環(huán)烷基的一部分，表示鍵。因此，如果R3在本文中定義為C0烷基-C3-6環(huán)烷基，則R3是-C3-6環(huán)烷基。
本文使用的術(shù)語“烷氧基”，其本身或作為另一取代基的一部分，是指具有指定碳原子數(shù)的-O-烷基，其中烷基如上定義(如C1-10烷氧基是指含1-10個(gè)碳原子的烷氧基)。本發(fā)明使用的優(yōu)選的烷氧基是C1-6烷氧基。示例性的優(yōu)選的烷氧基包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、仲丁氧基和戊氧基。
本文使用的術(shù)語“烯基”，其本身或作為另一取代基的一部分，是指具有單個(gè)碳-碳雙鍵和指定碳原子數(shù)的直鏈或支鏈烴基(如C2-10烯基是指含2-10個(gè)碳原子的烯基)。本發(fā)明使用的優(yōu)選的烯基為含2-6個(gè)碳原子的C2-6烯基。示例性的烯基包括乙烯基和丙烯基。
本文使用的術(shù)語“環(huán)烷基”，其本身或作為另一取代基的一部分，是指具有指定碳原子數(shù)的飽和環(huán)狀烴基(如C3-6環(huán)烷基是指含3-6個(gè)碳原子的環(huán)烷基)。示例性的環(huán)烷基包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基等。
本文使用的術(shù)語“芳基”，其本身或作為另一取代基的一部分，是指具有指定碳原子數(shù)的芳香或者環(huán)狀基團(tuán)(如C6-10芳基是指含6-10個(gè)碳原子的芳基)。本發(fā)明使用的優(yōu)選的芳基包括苯基和萘基。
術(shù)語“鹵代”或“鹵素”包括氟代、氯代、溴代和碘代。
本文使用的術(shù)語“雜芳基”，其自身或作為另一取代基的一部分，是指具有至少一個(gè)環(huán)雜原子(O、N或S)的芳香環(huán)基。本發(fā)明使用的示例性的雜芳基包括呋喃基、吡喃基、苯并呋喃基、異苯并呋喃基、苯并吡喃基、噻吩基、苯并噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、吲哚基、吲唑基、苯并咪唑基、喹啉基和異喹啉基。
當(dāng)本文中定義的雜芳基被取代時(shí)，取代基可連接到雜芳基的環(huán)碳原子上，或可連接到環(huán)雜原子(即氮、氧或者硫)上，所述原子具有可進(jìn)行取代的化合價(jià)。優(yōu)選地，取代基連接到環(huán)碳原子上。
本發(fā)明的一些化合物具有至少一個(gè)不對稱中心。其它的不對稱中心的存在根據(jù)分子上各種取代基的性質(zhì)而定。具有不對稱中心的化合物產(chǎn)生對映異構(gòu)體(光學(xué)異構(gòu)體)、非對映體(構(gòu)象異構(gòu)體)或者二者，所有可能的混合物形式的對映異構(gòu)體和非對映體或純的或部分純形式的化合物都包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。本發(fā)明包括所有的這些化合物的異構(gòu)形式。
非對映體或?qū)τ钞悩?gòu)體富集化合物的獨(dú)立合成或它們的色譜分離可如本領(lǐng)域已知的那樣通過本文公開方法的適當(dāng)改進(jìn)法完成。它們的絕對立體化學(xué)可通過結(jié)晶產(chǎn)物或結(jié)晶中間體的X-射線晶體衍射法進(jìn)行測定，所述產(chǎn)物或中間體如果必要可使用含有已知絕對構(gòu)型的不對稱中心的試劑進(jìn)行衍生化。
如果期望，可將化合物的外消旋混合物分離以便分離出單獨(dú)的對映體。分離可以通過本領(lǐng)域中公知的方法進(jìn)行，如將化合物的外消旋混合物與對映體純的化合物偶聯(lián)以形成非對映體混合物、隨后通過標(biāo)準(zhǔn)方法如分步結(jié)晶或色譜法分離單獨(dú)的非對映體。偶聯(lián)反應(yīng)通常為使用對映體純的酸或堿形成鹽。然后可通過將添加的手性殘基裂解而使非對映體衍生物轉(zhuǎn)化為純的對映體。化合物的外消旋混合物也可通過采用手性固定相的色譜法直接分離，該方法是本領(lǐng)域所公知的。
或者，可通過使用光學(xué)純的起始原料或具有已知構(gòu)型的試劑通過本領(lǐng)域公知的方法進(jìn)行立體選擇合成得到化合物的任何對映體。
本發(fā)明要求保護(hù)的化合物可以根據(jù)以下一般程序方法A-D和具體實(shí)施例1-6制得。
方法A 方法B 可使用方法A和方法B獲得其中R3和R4連接在一起形成式(B)的C6碳環(huán)(當(dāng)q為2)的式(I)的化合物，或獲得其中R3和R4連接在一起形成式(C)的C7碳環(huán)(當(dāng)q為3)的式(I)的化合物。方法A中的氨基噻唑環(huán)系統(tǒng)可以單一步驟通過在裝有硫脲和碘的密封管中加熱含α-亞甲基的適當(dāng)取代的酮的凈混合物制備。替代的兩步法在方法B中示出，包括使用鹵化試劑如N-溴代琥珀酰亞胺或溴在適當(dāng)?shù)娜軇┲袕钠鹗嫉耐纬搔?鹵代酮。
方法C
方法C形成其中R2和R3都不與R4連接形成環(huán)基，R1、R2和R3各自可以是任何上面定義的基團(tuán)的化合物。方法C和方法D還可用于形成其中R2和R3連接形成碳環(huán)的化合物。方法C需要適當(dāng)取代的羧酸作為起始原料。通過已知方法，羧基被轉(zhuǎn)化為活化羧基官能團(tuán)，如?；u或混合酸酐。在環(huán)境溫度下在最長達(dá)72小時(shí)內(nèi)，活化基團(tuán)被含醚的重氮甲烷替換，隨后形成的α-重氮酮通過暴露在HCl氣體的溶液或氫溴酸水溶液中轉(zhuǎn)變?yōu)棣?鹵代酮?？赏ㄟ^在溶劑如甲醇或者乙醇中攪拌鹵代酮和至少一當(dāng)量的硫脲，在有或者沒有除酸劑如碳酸氫鈉的存在下，可以形成噻唑環(huán)系統(tǒng)。噻唑環(huán)的進(jìn)一步官能化可通過與鹵化試劑如N-碘代琥珀酰亞胺在乙腈中反應(yīng)以在5位進(jìn)行鹵化實(shí)現(xiàn)。碳-碳鍵的形成可通過鈀介導(dǎo)的鹵代噻唑與適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)金屬試劑的偶聯(lián)反應(yīng)進(jìn)行。
方法D
或者，在方法D中，可以通過已知方法從羧酸開始然后將羧酸轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的Weinreb氨化物引入R4基團(tuán)。酮的形成可通過使上述氨化物與有機(jī)金屬試劑如有機(jī)鋰或格氏試劑，在溶劑如THF或者乙醚中，在-70℃到室溫下反應(yīng)而進(jìn)行。鹵化可使用試劑如溴在氯仿中在約50℃實(shí)現(xiàn)。噻唑環(huán)系統(tǒng)的形成可通過在溶劑如甲醇或者乙醇中攪拌鹵代酮和至少一當(dāng)量的硫脲，在有或者沒有除酸劑如碳酸氫鈉的存在下進(jìn)行。
術(shù)語“基本上純的”是指分離的物質(zhì)至少是90％純的，優(yōu)選95％純，更優(yōu)選99％純，通過本領(lǐng)域已知的分析技術(shù)測定。
術(shù)語“可藥用鹽”是指從可藥用的無毒的堿或酸(包括無機(jī)堿或者有機(jī)堿以及無機(jī)酸或有機(jī)酸)制備的鹽。本發(fā)明的化合物可以為一、二或三鹽形式，根據(jù)游離堿形式的化合物中存在的酸官能度的數(shù)目而定。游離堿和從無機(jī)堿得到的鹽包括鋁、銨、鈣、銅、鐵、亞鐵、鋰、鎂、錳、亞錳、鉀、鈉、鋅等的鹽。特別優(yōu)選銨、鈣、鎂、鉀、和鈉的鹽。固體形式的鹽可存在超過一個(gè)的晶體結(jié)構(gòu)，還可為水合物形式。從可藥用的無毒有機(jī)堿得到的鹽包括伯胺、仲胺、和叔胺、包括天然存在的取代胺在內(nèi)的取代胺、環(huán)胺、和堿性離子交換樹脂，如精氨酸、甜菜堿、咖啡因、膽堿、N，N’-二芐基乙二胺、二乙胺、2-二乙氨基乙醇、2-二甲氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基嗎啉、N-乙基哌啶、葡糖胺、氨基葡萄糖、組氨酸、哈胺、異丙胺、賴氨酸、甲基葡糖胺、嗎啉、哌嗪、哌啶、多胺樹脂、普魯卡因、嘌呤類、可可堿、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨丁三醇等。當(dāng)本發(fā)明的化合物為堿性時(shí)，可從包括無機(jī)酸和有機(jī)酸在內(nèi)的可藥用的無毒酸制備鹽。這種酸包括乙酸、三氟乙酸、苯磺酸、苯甲酸、樟腦磺酸、檸檬酸、乙磺酸、富馬酸、葡糖酸、谷氨酸、氫溴酸、鹽酸、羥乙磺酸、乳酸、馬來酸、蘋果酸、扁桃酸、甲磺酸、粘酸、硝酸、雙羥萘酸、泛酸、磷酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、對甲苯磺酸等。特別優(yōu)選檸檬酸、氫溴酸、鹽酸、三氟乙酸、馬來酸、磷酸、硫酸、富馬酸和酒石酸。
本發(fā)明涉及本文公開的化合物在有需要的患者或者受試者如哺乳動(dòng)物中作為β-分泌酶活性抑制劑或β-部位淀粉樣蛋白前體蛋白裂解酶(“BACE”)活性抑制劑的應(yīng)用，包括給用有效量的所述化合物。本發(fā)明的化合物可用于通過抑制β-分泌酶或BACE并由此預(yù)防不溶性Aβ的形成和抑制Aβ的產(chǎn)生而治療阿爾茨海默氏病。術(shù)語“β-分泌酶”、“β-部位淀粉樣蛋白前體蛋白裂解酶”和“BACE”在本說明書中可互換使用。除了人之外，可根據(jù)本發(fā)明的方法治療各種其它的哺乳動(dòng)物。
本發(fā)明進(jìn)一步涉及生產(chǎn)用于抑制人和動(dòng)物中的β-分泌酶活性的藥物或組合物的方法，包括將本發(fā)明的化合物與可藥用的載體或者稀釋劑組合。
本發(fā)明的化合物在治療、改善或控制阿爾茨海默氏病或者降低阿爾茨海默氏病的風(fēng)險(xiǎn)中具有實(shí)用性。例如，化合物可用于預(yù)防阿爾茨海默型癡呆，用于治療早期、中期或晚期的阿爾茨海默型癡呆?；衔镞€可用于治療、改善或控制由淀粉樣蛋白前體蛋白(還稱為APP)的異常裂解所介導(dǎo)的疾病以及可通過抑制β-分泌酶進(jìn)行治療或者預(yù)防的其它病況，或者降低所述疾病和病況的風(fēng)險(xiǎn)，這些病況包括輕度認(rèn)知損傷、Trisomy21(唐氏綜合癥)、大腦淀粉樣蛋白血管病、退行性癡呆、帶有Dutch型淀粉樣變性病的遺傳性腦出血(HCHWA-D)、克-雅病、朊病毒障礙、肌萎縮性側(cè)索硬化、進(jìn)行性核上性麻痹、頭創(chuàng)傷、中風(fēng)、唐氏綜合癥、胰腺炎、包含體肌炎、其它外周淀粉樣變性病、糖尿病和動(dòng)脈粥樣硬化。
本發(fā)明的化合物當(dāng)作為化合物或其可藥用鹽或水合物(如果適當(dāng)?shù)脑?，任選作為藥物組合物成分，以及任選與其它HIV蛋白酶抑制劑、抗病毒藥、抗感染藥、免疫調(diào)節(jié)劑、抗生素或者疫苗組合使用時(shí)，還可用于抑制HIV蛋白酶、預(yù)防HIV感染、治療HIV感染和治療AIDS和/或ARC。
本發(fā)明進(jìn)一步涉及生產(chǎn)用于抑制人和動(dòng)物中的HIV蛋白酶活性的藥物或者組合物的方法，包括將本發(fā)明的化合物與可藥用的載體或者稀釋劑組合。
本發(fā)明的化合物在本發(fā)明的化合物具有實(shí)用性的疾病或病況的治療中可與一種或多種其它藥物組合使用，其中藥物組合在一起比使用任一種單獨(dú)的藥物更安全或更有效。另外，本發(fā)明的化合物可用于與一種或多種其它可治療、預(yù)防、控制或改善本發(fā)明化合物的副作用或毒性或者降低本發(fā)明化合物的副作用或毒性的風(fēng)險(xiǎn)的藥物組合使用。這些其它藥物可通過通常使用的給藥途徑或給藥量給用，與本發(fā)明的化合物同時(shí)或者順序地給用。因此，本發(fā)明的藥物組合物包括那些除了本發(fā)明的化合物之外還含有一種或多種其它活性成分的組合物。所述組合可作為單位劑型組合產(chǎn)品的一部分、或作為其中一種或多種其它藥物作為治療方案的一部分以單獨(dú)劑型給用的藥包(kit)或治療規(guī)程進(jìn)行給用。
作為單位劑量形式或藥包形式提供的本發(fā)明的化合物與其它藥物組合的例子包括與以下藥物的組合抗阿爾茨海默氏病藥物如其它β-分泌酶抑制劑或者γ-分泌酶抑制劑；HMG-CoA還原酶抑制劑；NSAID，包括布洛芬；維生素E；抗淀粉樣蛋白抗體，包括抗淀粉樣蛋白人源化單克隆抗體；CB-1受體拮抗劑或者CB-1受體反激動(dòng)劑；抗生素如強(qiáng)力霉素和利福平；N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受體拮抗劑，如美金剛；膽堿酯酶抑制劑如加蘭他敏、利凡斯的明、多奈哌齊和他克林；生長激素促泌劑如ibutamoren、甲磺酸ibutamoren和capromorelin；組胺H3拮抗劑；AMPA激動(dòng)劑；PDE IV抑制劑；GABAA反激動(dòng)劑；神經(jīng)元煙堿激動(dòng)劑；或者其它可影響受體或酶的藥物，所述受體或酶增加本發(fā)明化合物的效力、安全性或便利性或減少本發(fā)明化合物的不需要的副作用或者毒性。上面所列的適于組合使用的抗阿爾茨海默氏病藥僅僅是示例性的，不以任何方式構(gòu)成限制。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明的化合物與一種或多種可用于治療AIDS的藥物的組合。例如，本發(fā)明的化合物可與有效量的AIDS抗病毒藥、免疫調(diào)節(jié)劑、抗感染藥或者疫苗組合而有效給用，無論是否處在暴露之前和/或之后?？捎糜谂c本發(fā)明的化合物組合使用的適當(dāng)?shù)目共《舅幇ǚ呛塑疹怘IV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、核苷類HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、CCR5受體拮抗劑、HIV整合酶抑制劑和細(xì)胞色素P450單加氧酶抑制劑(如茚地那韋或者利托那韋或其可藥用鹽)。
適于組合使用的具體的抗AIDS藥或抗HIV藥(包括抗病毒藥、免疫調(diào)節(jié)劑、抗感染藥和其它藥物)的例子在以下表1-4中列出
表1-抗病毒藥





表2-免疫調(diào)節(jié)劑


表3-抗感染藥


表4-其它

AIDS＝獲得性免疫缺損綜合癥ARC＝AIDS相關(guān)綜合征PI＝蛋白酶抑制劑RTI＝逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑nRTI＝核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑nnRTI＝非核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑PGL＝持續(xù)性廣泛性淋巴結(jié)病PCP＝卡氏肺囊蟲病CMV＝細(xì)胞巨化病毒可理解，本發(fā)明的化合物與AIDS抗病毒藥、免疫調(diào)節(jié)劑、抗感染藥或疫苗組合的范圍不限于上表1-4中所列的，而是原則上包括使用可用于治療AIDS的任何藥物組合物的任何組合。
一個(gè)適當(dāng)?shù)慕M合為本發(fā)明的化合物與核苷類HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑如AZT、3TC、ddC或者ddI的組合。另一個(gè)適當(dāng)?shù)慕M合為本發(fā)明的化合物與非核苷類HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑如依發(fā)韋侖以及任選的核苷類HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑如AZT、3TC、ddC或者ddI的組合。
另一個(gè)適當(dāng)?shù)慕M合為前述段落中任一項(xiàng)組合，并另外包括其它的HIV蛋白酶抑制劑如茚地那韋、奈非那韋、利托那韋、沙奎那韋、安普那韋或者阿巴卡韋。該組合的一方面是其中其它HIV蛋白酶抑制劑為茚地那韋硫酸鹽的組合。在該組合的另一方面是其中其它蛋白酶抑制劑選自奈非那韋和利托那韋的組合。在該組合的另一方面是其中其它HIV蛋白酶抑制劑是沙奎那韋(通常以600或者1200毫克tid的劑量給用)的組合。
其它適當(dāng)?shù)慕M合包括本發(fā)明的化合物與以下的組合(1)任選與AZT和/或3TC和/或ddI和/或ddC組合的，以及任選與茚地那韋組合的依發(fā)韋侖；(2)任選與茚地那韋組合的任一種AZT和/或ddI和/或ddC和/或3TC；(3)d4T和3TC和/或AZT；(4)AZT和3TC；和(5)AZT和d4T。
本發(fā)明的另一方面是本發(fā)明的化合物與細(xì)胞色素P450單加氧酶抑制劑以有效改善化合物的藥物動(dòng)力學(xué)的量共同給用。本發(fā)明的化合物可至少部分地通過細(xì)胞色素P450(CYP3A4)代謝掉。本發(fā)明的化合物與細(xì)胞色素P450抑制劑的共同給藥可以改善受試者(如人)中化合物的藥代動(dòng)力學(xué)特性；即，共同給藥可以增加Cmax(化合物的最大血漿濃度)，AUC(化合物的血漿濃度-時(shí)間曲線下面積)和/或化合物的半衰期。適當(dāng)?shù)腜450抑制劑包括但不限于茚地那韋和利托那韋。應(yīng)理解，茚地那韋和利托那韋在該環(huán)境下的主要作用是作為藥代動(dòng)力學(xué)調(diào)節(jié)劑而并非是蛋白酶抑制劑；即，有效改善化合物的藥物動(dòng)力學(xué)的量的茚地那韋或者利托那韋可以為抗病毒作用提供次要的、乃至微不足道的貢獻(xiàn)。
本發(fā)明的組合物還可與HIV整合酶抑制劑如WO 99/62520、WO99/62513或者WO 99/62897中所述的化合物組合。本發(fā)明的組合物還可與CCR5受體拮抗劑如WO 00/59502或WO 00/59503中所述的化合物組合。
在上述組合中，本發(fā)明的化合物與其它活性劑可以一同或分開給用。另外，一種藥物的給用可以在其它藥物給用之前、同時(shí)或之后進(jìn)行。組合也許對HIV的蔓延和感染程度具有意想不到的或協(xié)同作用。
本發(fā)明的化合物所給用的受試者或患者通常是希望抑制β-分泌酶或HIV蛋白酶活性的人(男性或女性)，但是還可包括其它哺乳動(dòng)物，如狗、貓、小鼠、大鼠、牛、馬、綿羊、兔、猴、猩猩或其它猿或者靈長類動(dòng)物，對于它們希望進(jìn)行天冬氨酰蛋白酶抑制(特別是抑制β-分泌酶活性和/或抑制HIV蛋白酶活性)或治療上述病癥。
本文使用的術(shù)語“組合物”意在包括含預(yù)定量或比例的指定成分的產(chǎn)品，以及由指定量的指定成分的組合直接或間接地得到的任何產(chǎn)品。這種術(shù)語在涉及藥物組合物時(shí)意在包括含一種或多種活性成分和任選的包括惰性成分的載體的產(chǎn)品；以及由任何兩種或多種成分的組合、復(fù)合或集合，或由一種或多種成分的離解，或由一種或多種成分的其它類型的反應(yīng)或相互作用直接或間接地得到的任何產(chǎn)品。通常，藥物組合物可通過使活性成分均一地和緊密地與液體載體或固體載體細(xì)粉或者兩者結(jié)合，然后如有必要使產(chǎn)品成形為所需制劑而制備。活性的主題化合物被以足以對疾病過程或病況產(chǎn)生預(yù)期效果的量被引入到藥物組合物中。因此，本發(fā)明的藥物組合物包括任何通過將本發(fā)明的化合物與可藥用載體混合制備的組合物。
計(jì)劃用于口服給用的組合物可根據(jù)藥物組合物生產(chǎn)領(lǐng)域公知的任何方法制備并且該組合物可含有一種或多種選自甜味劑、調(diào)味劑、著色劑和防腐劑的試劑，以提供藥學(xué)上美觀和適口的制劑。片劑含有與適于生產(chǎn)片劑的可藥用無毒賦形劑混合的活性成分。這些賦形劑可為例如惰性的稀釋劑，如碳酸鈣、碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或者磷酸鈉；造粒劑和崩解劑，如玉米淀粉或者海藻酸；粘合劑，如淀粉、明膠或者阿拉伯膠；和潤滑劑，如硬脂酸鎂、硬脂酸或者滑石。片劑可無包衣，或可通過已知技術(shù)進(jìn)行包衣，從而延遲在胃腸道內(nèi)的崩解和吸收，并從而提供在較長時(shí)段內(nèi)的持續(xù)作用。
用于口服應(yīng)用的組合物也可作為硬明膠膠囊形式存在，其中活性成分與惰性固體稀釋劑如碳酸鈣、磷酸鈣或者高嶺土混合，或者作為軟明膠膠囊形式存在，其中活性成分與水或油介質(zhì)如花生油、液狀石蠟或者橄欖油混合。
其它的藥物組合物包括水懸浮液，其含有與適于生產(chǎn)水懸浮液的賦形劑混合的活性物質(zhì)。另外，油懸浮液可通過將活性成分懸浮在植物油如花生油、橄欖油、芝麻油或者椰子油中，或懸浮在礦物油如液狀石蠟中制備。油懸浮液還可含有各種賦形劑。本發(fā)明的藥物組合物還可為水包油乳劑，其還可含有賦形劑如甜味劑和調(diào)味劑。
藥物組合物可為無菌的可注射水懸浮液或油懸浮液形式，其可根據(jù)本領(lǐng)域已知方法配制，或可以用于藥物直腸給藥的栓劑形式被給用。
本發(fā)明的化合物還可借助本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的吸入裝置吸入、或通過透皮貼片被給用。
“可藥用的”是指必需與制劑中的其它組分是相容的并且對其接受者無害的載體、稀釋劑或者賦形劑。
術(shù)語“給用”或“給藥”化合物可理解為是對需要治療的個(gè)體提供本發(fā)明的化合物，該化合物的形式是可以治療有用形式和治療有用量引入到個(gè)體體內(nèi)的形式，包括但不限于口服劑型，如片劑、膠囊、糖漿劑、懸浮液等等；可注射劑型，如IV、IM或者IP等等；透皮劑型，包括霜?jiǎng)?、膠凍劑、粉末劑或貼片；口頰劑型；吸入粉末、噴霧劑、懸浮液等等；和直腸栓劑。
術(shù)語“有效量”或“治療有效量”是指由研究員、獸醫(yī)、醫(yī)師或者其它臨床人員所尋求的將引起組織、系統(tǒng)、動(dòng)物或人的生物應(yīng)答或醫(yī)學(xué)應(yīng)答的本發(fā)明的化合物的量。本文使用的術(shù)語“治療”是指上述提及的病況，特別是表現(xiàn)疾病或者病癥的癥狀的患者中的上述病況的治療。
本文使用的術(shù)語“治療”是指本發(fā)明的化合物的任何給用并包括(1)抑制正在經(jīng)歷或表現(xiàn)患病的病害或者征候的動(dòng)物中的疾病(即抑制病害和/或征候的進(jìn)一步發(fā)展)，或(2)改善正在經(jīng)歷或表現(xiàn)患病的病害或者征候的動(dòng)物中的疾病(即逆轉(zhuǎn)病害和/或征候的進(jìn)一步發(fā)展)。術(shù)語“控制”包括預(yù)防、治療、根除、改善被控病況或減少被控病況的嚴(yán)重性。
含有本發(fā)明化合物的藥物組合物可方便地以單位劑型存在，并且可通過藥學(xué)領(lǐng)域中公知的任何方法制備。術(shù)語“單位劑型”是指這樣的單一劑量，其中所有的活性和非活性成分組合在適當(dāng)?shù)捏w系中，使得患者或者對患者給藥的人可以打開其中含有整個(gè)劑量的單個(gè)容器或包裝，不需要混合得自兩個(gè)或多個(gè)容器或包裝的任何組分。單位劑量的典型實(shí)例為口服用片劑或者膠囊、注射用單劑量小瓶、或直腸給藥用栓劑。上述單位劑型的列舉不以任何方式構(gòu)成限制，僅代表單位劑型的典型實(shí)例。
含有本發(fā)明化合物的組合物可方便地以藥包形式存在，通過該形式，可能作為活性或非活性成分、載體、稀釋劑等的兩種或多種組分連同關(guān)于由患者或者對患者給藥的人準(zhǔn)備實(shí)際劑型的指導(dǎo)說明一起提供。這種藥包可提供其中所含的所有的必要物質(zhì)和成分，或者它們可含有關(guān)于必須由患者或者對患者給藥的人獨(dú)立獲得的物質(zhì)或組分的使用或準(zhǔn)備的指導(dǎo)說明。
當(dāng)治療、改善、控制阿爾茨海默氏病、AIDS或者其它本發(fā)明化合物適用疾病或者降低阿爾茨海默氏病、AIDS或者其它本發(fā)明化合物適用疾病的風(fēng)險(xiǎn)時(shí)，當(dāng)本發(fā)明的化合物以以下劑量給用時(shí)可獲得通常令人滿意的結(jié)果日劑量每千克動(dòng)物體重約0.1毫克到約100毫克，優(yōu)選單一日劑量或者以每天2-6次分劑量給予，或處于持續(xù)釋放形式下?？偟娜談┝繛槊壳Э梭w重約1.0毫克到約2000毫克，優(yōu)選約0.1毫克到約20毫克。在70千克的成人中，總的日劑量通常為約7毫克到約1,400毫克?？烧{(diào)節(jié)給藥方案以提供最佳的治療應(yīng)答?；衔锟擅刻旖o藥1-4次，優(yōu)選每天1或2次。
本發(fā)明化合物或其可藥用鹽的具體給藥劑量包括1毫克、5毫克、10毫克、30毫克、80毫克、100毫克、150毫克、300毫克和500毫克。本發(fā)明的藥物組合物能以包括以下劑量的制劑被提供約0.5毫克到1000毫克活性成分；更優(yōu)選包括約0.5毫克到500毫克活性成分；或者0.5毫克到250毫克活性成分；或者1毫克到100毫克活性成分。用于治療的特定藥物組合物可包括約1毫克、5毫克、10毫克、30毫克、80毫克、100毫克、150毫克、300毫克和500毫克的活性成分。
然而，可以理解的是，對于任一特定患者的特定劑量水平和給藥頻率可以是不同的并且根據(jù)包括以下的各種因素而定使用的具體化合物的活性，該化合物的代謝性穩(wěn)定性和作用時(shí)間長短，年齡，體重，一般健康狀況，性別，膳食，給藥方式和時(shí)間，排泄速率，藥物組合、具體病況的嚴(yán)重程度，以及經(jīng)歷治療的主體。
本發(fā)明的化合物作為β-分泌酶活性抑制劑的實(shí)用性可通過本領(lǐng)域已知的方法闡明。根據(jù)以下確定β-分泌酶的酶抑制作用。
ECL試驗(yàn)使用生物素?；疊ACE底物進(jìn)行均一終點(diǎn)電化學(xué)發(fā)光(ECL)試驗(yàn)。底物的Km大于100μm，由于底物的溶解度極限而不能檢測到。典型的反應(yīng)物含有約0.1nM酶，0.25μM的底物，緩沖液(50mM NaOAc，pH4.5，0.1mg/ml BSA，0.2％CHAPS，15mMEDTA和1mM去鐵胺)，總反應(yīng)體積為100μl。反應(yīng)進(jìn)行30分鐘，然后通過添加25μL的1M Tris-HCl(pH8.0)而終止。得到的酶產(chǎn)物通過添加特異性識別產(chǎn)物C末端殘基的ruthenylated抗體進(jìn)行檢測。涂有抗生物素蛋白鏈菌素的磁珠被添加到溶液中，樣品經(jīng)歷M-384(Igen Inc.，Gaithersburg，MD)分析。在這些條件下，低于10％的底物被BACE1加工。在這些研究中使用的酶是在桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)中產(chǎn)生的可溶性(跨膜結(jié)構(gòu)域和細(xì)胞質(zhì)延伸部分被排除)人蛋白質(zhì)。為了測量化合物的抑制效力，抑制劑在DMSO(從100μm開始使用三倍系列稀釋制備12個(gè)濃度的抑制劑)中的溶液被引入到反應(yīng)混合物(最終DMSO的濃度為10％)。所有實(shí)驗(yàn)在室溫下使用上述標(biāo)準(zhǔn)的反應(yīng)條件進(jìn)行。為了測定化合物的IC50，使用四參數(shù)方程用于曲線擬合。在再現(xiàn)離解常數(shù)中的誤差通常低于兩倍。
HPLC試驗(yàn)使用底物(香豆素-CO-REVNFEVEFR)進(jìn)行均一終點(diǎn)HPLC試驗(yàn)，所述底物通過BACE1裂解，釋放與香豆素連接的氨基末端碎片。底物的Km大于100μM并且由于底物的溶解度極限不能檢測到。典型的反應(yīng)物含有約2nM酶，1.0μM底物，和緩沖液(50mM NaOAc，pH4.5，0.1mg/ml BSA，0.2％CHAPS，15mMEDTA和1mM去鐵胺)，總反應(yīng)體積為100μl。反應(yīng)進(jìn)行30分鐘，然后通過添加25μL的1M Tris-HCl(pH8.0)而終止。得到的反應(yīng)混合物被加載到HPLC上，使用5分鐘線性梯度從底物上分離出產(chǎn)物。在這些條件下，低于10％的底物被BACE 1加工。在這些研究中使用的酶是在桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)中產(chǎn)生的可溶性(跨膜結(jié)構(gòu)域和細(xì)胞質(zhì)延伸部分被排除)人蛋白質(zhì)。為了測量化合物的抑制效力，抑制劑在DMSO(制備12個(gè)濃度的抑制劑并根據(jù)ECL所示效力決定濃度范圍)中的溶液被引入到反應(yīng)混合物(最終DMSO的濃度為10％)。所有實(shí)驗(yàn)在室溫下使用上述標(biāo)準(zhǔn)的反應(yīng)條件進(jìn)行。為了測定化合物的IC50，使用四參數(shù)方程用于曲線擬合。在再現(xiàn)離解常數(shù)中的誤差通常低于兩倍。
特別地，以下實(shí)施例中的化合物在上述試驗(yàn)中具有的抑制β-分泌酶活性的IC50通常為約1nM到100μM。這種結(jié)果表明化合物在作為β分泌酶活性抑制劑應(yīng)用中的固有活性。
本發(fā)明的化合物作為HIV蛋白酶的抑制劑的實(shí)用性通過本領(lǐng)域已知的方法表明。如下測定HIV蛋白酶的抑制作用HIV蛋白酶試驗(yàn)在初速度和穩(wěn)態(tài)條件下進(jìn)行所有的酶-催化反應(yīng)。具體地，根據(jù)時(shí)間和酶濃度建立MA/CA切割位點(diǎn)肽VSQN-(-萘基丙氨酸)-PIV的酶催化水解條件以得到線性初速度數(shù)據(jù)。試驗(yàn)中使用的酶濃度如下；野生型，5pM；A-44和A-44r，200pM；V-18、K-60和K-60r，10pM；V-18r，20pM(r＝活性部位回復(fù)體)。各個(gè)競爭性抑制物的結(jié)合常數(shù)首先通過使用12個(gè)抑制劑濃度確定IC50值然后使用方程Ki＝IC50×KM/(KM+[S])解析出估測的Ki值。然后在單獨(dú)試驗(yàn)中使用一系列等于估測Ki值的0.5、1、2和3倍的抑制劑濃度重新確定Ki值。每個(gè)抑制劑濃度使用濃度范圍為50到600μm的六個(gè)底物濃度。最終的Ki值來源于KM/Vmax相對于得自雙倒數(shù)圖的抑制劑濃度的重繪圖。具有野生型酶和所選的其它物質(zhì)(如K-60和沙奎那韋對)的每個(gè)抑制劑的Ki值進(jìn)行多次測定，從而得到4.2％的平均S.D.(n＝14)。其它的試驗(yàn)條件如先前所述(Schock，H.等人，(1996)J.Biol.Chem.271，31957-31963)，不同之處在于產(chǎn)物使用熒光檢測(激發(fā)波長270納米，發(fā)射波長330納米)。
特別地，以下實(shí)施例的化合物在上述試驗(yàn)中具有的HIV蛋白酶的抑制活性IC50通常為約1納米到100微米。這種結(jié)果表明化合物在作為HIV蛋白酶活性抑制劑應(yīng)用中的固有活性。
制備本發(fā)明的化合物的若干方法在本文的圖解和實(shí)施例中闡明。根據(jù)本領(lǐng)域已知過程或本文所述過程制備起始原料。提供以下實(shí)施例以更完全地理解本發(fā)明。這些例子僅是說明性的，不以任何方式對本發(fā)明構(gòu)成限制。
實(shí)施例1說明根據(jù)方法A的合成。實(shí)施例2說明根據(jù)方法B的合成。實(shí)施例3-5和7說明根據(jù)方法C的合成。實(shí)施例6說明根據(jù)方法D的合成。
正文中自始至終使用以下縮寫Me甲基Et乙基Ar芳基Ph苯基Ac乙?；鵇MFN，N′-二甲基甲酰胺THF四氫呋喃DMSO二甲亞砜EDTA乙二胺四乙酸Boc叔丁氧羰基BOP苯并三唑-1-基氧基-三(二甲氨基)_六氟磷酸鹽BSA牛血清白蛋白CHAPS3-[(3-膽胺基丙基)二甲基銨基]-2-羥基-1-丙磺酸鹽TEA三乙胺TFA三氟乙酸NISN-碘代琥珀酰亞胺NaHMDS雙(三甲基甲硅烷基)氨基鈉DIPEA二異丙基乙胺DCM二氯甲烷Nu親核試劑AIBN2，2′-偶氮二異丁腈MNNG1-甲基-3-硝基-1-亞硝基胍rt室溫HPLC高效液相色譜LCMS液相色譜質(zhì)譜實(shí)施例1(+/-)5，6，7，8-四氫-4H-4，7-甲撐環(huán)庚烷并[d][1，3]-噻唑-2-胺
將含有124mg(1.0mmol)的二環(huán)[3.2.1]辛-2-酮、253mg(1.0mmol)碘和152mg(2.0mmol)硫脲的混合物在密封管中在110℃加熱17小時(shí)。將黑色反應(yīng)混合物冷卻并溶于2毫升甲醇中，經(jīng)過反相色譜法，得到所需氨基噻唑的三氟乙酸鹽，為白色固體。1H NMR(CD3OD)δ8.65(bs，2H)，3.15(t，1H)，2.79(dd，1H)，2.64(bt，1H)，2.22(d，1H)，2.1-1.7(m，5H)，1.45(dq，1H)。LCMS(M+H)＝181.24。
實(shí)施例2(+/-)6-苯基-4，5，6，7-四氫-1，3-苯并噻唑-2-胺 步驟A向6.0g(34.4mrnol)的4-苯基環(huán)己酮在75mL的CCl4中的溶液中加入5.51g(39.9mmol)的N-溴代琥珀酰亞胺和83mg(0.34mmol)的AIBN?；旌衔锘亓鲾嚢?0分鐘，然后冷卻并過濾。將濾液濃縮并經(jīng)歷柱色譜法(9∶1己烷/EtOAc)，得到2-溴-4-苯基環(huán)己酮。
步驟B含有得自步驟A的6.0g(23.7mmol)的溴代酮的溶液用1.8g(23.7mmol)硫脲處理，得到的混合物在室溫?cái)嚢?8小時(shí)?；旌衔锝?jīng)濃縮并加乙醚研磨，得到所需化合物的HBr鹽形式。1HNMR(DMSO-d6)δ9.21(bs，2H)，7.42-7.21(m，5H)，3.05(m，1H)，2.79(m，1H)，2.6-2.4(m，4H)，2.0-1.8(m，2H)。LCMS(M+H)＝231.23。
實(shí)施例3
4-[1-(3-氟苯基)環(huán)戊基]-1，3-噻唑-2-胺 步驟A向-70℃的含有1.04g(5.00mmol)的1-(3-氟苯基)-1-環(huán)戊烷羧酸在25mL乙醚中的溶液中加入530mg(5.24mmol)的N-甲基嗎啉和716mg(5.24mmol)的氯甲酸異丁酯。反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí)，然后通過細(xì)玻璃料漏斗過濾，濾液冷卻到0℃，將過量的CH2N2(從50毫升乙醚/15毫升40％KOH和4.4gMNNG制備的40毫升的重氮甲烷)通過移液管滴加到含有混合酸酐的燒瓶中。得到的混合物攪拌直到LCMS顯示完全轉(zhuǎn)化為重氮酮(14小時(shí))，然后蒸發(fā)過量的CH2N2。得到的黃色油溶于乙醚中，并冷卻到0℃，用48％HBr(1.5mL)處理。在10秒內(nèi)發(fā)生泡騰，LCMS檢測出在1小時(shí)后完全轉(zhuǎn)化為新的峰。反應(yīng)混合物用50毫升的乙醚稀釋，用飽和碳酸氫鹽(2×10mL)、水(10mL)和鹽水(10mL)洗滌。蒸發(fā)溶劑，得到溴代酮，其無需進(jìn)一步純化即可使用。
步驟B含有1.3g(4.56mmol)的得自步驟3-A的溴代酮和383mg(4.56mmol)的NaHCO3以及347mg(4.56mmol)硫脲在25mLEtOH中的混合物回流攪拌1小時(shí)，反應(yīng)混合物冷卻，濃縮并經(jīng)反相色譜法，得到所需化合物的三氟乙酸鹽，為白色固體。1H NMR(CD3OD)δ7.38(q，1H)，7.17(d，1H)，7.09(d，1H)，7.01(t，1H)，6.76(s，1H)，2.4-2.2(m，4H)。LCMS(M+H)＝263.16。
實(shí)施例4N′-{5-[2-(氨基-1，3-噻唑-4-基)-2-(4-甲氧基苯基)乙基]吡啶-2-基}，N-N-二甲基乙烷-1，2-二胺
步驟A將NaHMDS(8.0mL，8.0mmol)加入到-70℃的4-甲氧基苯基乙酸乙酯(1.55g，8.0mmol)和2-氯-5-氯甲基吡啶(1.29g，8.0mmol)在25mL的THF中的溶液中。反應(yīng)混合物在16小時(shí)內(nèi)攪拌達(dá)到室溫，然后蒸發(fā)溶劑，殘余物在20mL的EtOAc和20mL飽和氯化銨之間分配。水相用EtOAc洗滌(2×25毫升)，合并的有機(jī)提取液用鹽水(20mL洗滌)并通過硫酸鎂干燥。蒸發(fā)溶劑，得到單烷基化目標(biāo)化合物，為無色油狀物。
步驟B向含有851mg(2.66mmol)的得自步驟4-A的酯在20mL二氧雜環(huán)己烷中的溶液中加入8mL(8mmol)的1M LiOH。反應(yīng)攪拌16小時(shí)，蒸發(fā)溶劑，殘余物用3N HCl處理，使得pH＝6。水性混合物用EtOAc提取(3×20mL)，合并的有機(jī)洗液經(jīng)硫酸鎂干燥并濃縮，得到所需羧酸。
步驟C向-70℃的含有760mg(2.61mmol)的得自步驟4-B的羧酸在15mL乙醚中的溶液中加入0.30mL(2.74mmol)的N-甲基嗎啉和374mg(2.74mmol)的氯甲酸異丁酯。反應(yīng)混合物攪拌15分鐘，然后用5mL水淬滅。分離各相，乙醚層經(jīng)干燥和蒸發(fā)。在室溫將過量的CH2N2(從50mL乙醚/15mL40％的KOH和4.4克MNNG制備的40mL的重氮甲烷)通過移液管滴加到含有混合酸酐的燒瓶中，得到的混合物攪拌直到LCMS顯示完全轉(zhuǎn)化為重氮酮(30分鐘到24小時(shí))。蒸發(fā)過量的CH2N2，得到的黃色油重新溶于乙醚中，并冷卻到0℃，用48％HBr(1.5mL)處理。在10秒內(nèi)發(fā)生泡騰，LCMS檢測出在1小時(shí)后完全轉(zhuǎn)化為新的峰。反應(yīng)混合物用50毫升的乙醚稀釋，用飽和碳酸氫鹽(2×10mL)、水(10mL)和鹽水(10mL)洗滌。蒸發(fā)溶劑，得到溴代酮，為白色固體，其無需進(jìn)一步純化即可使用。
步驟D將含有790mg(2.14mmol)的得自步驟4-C的溴代酮在10mLMeOH中的溶液用180mg(2.14mmol)的NaHCO3和163mg(2.14mmol)的硫脲處理，并在50℃加熱1小時(shí)，然后混合物濃縮，用水和EtOAc提取。有機(jī)相干燥，濃縮并進(jìn)行色譜分離(EtOAc)，得到所需的2-氨基噻唑，為灰白色固體。1H NMR(CDCl3)δ8.05(d，J＝2.2Hz，1H)，7.24(dd，J＝2.4，8.2Hz，1H)，7.14(m，2H)，6.80(d，J＝8.6Hz，1H)，6.06(s，1H)，4.80(s，2H)，4.00(t，J＝7.5Hz，1H)，3.77(s，3H)，3.45(dd，J＝7.0，13.7Hz，1H)，3.08(dd，J＝8.6，13.7Hz，1H)。LCMS(M+H)＝346.03。
步驟E含有56mg(0.16mmol)的得自步驟4-D的氯吡啶和301mg(3.40mmol)的N，N-二甲基乙二胺的凈混合物在密封管中在140℃加熱17小時(shí)，反應(yīng)物冷卻并溶于2mL甲醇中，進(jìn)行反相色譜法。蒸發(fā)溶劑，殘余物溶于甲醇中，用HCl氣體處理。蒸發(fā)溶劑。得到所需氨基噻唑的三鹽酸鹽，為黃褐色固體。1H NMR(CD3OD)δ8.90(d，J＝8.9Hz，1H)，7.61(s，1H)，7.12(d，J＝8.7Hz，2H)，7.01(d，J＝9.2Hz，1H)，6.89(d，J＝8.9Hz，2H)，6.71(s，1H)，4.15(t，J＝7.5Hz，1H)，3.77(m，2H)，3.75(s，3H)，3.41(m，3H)，3.28(s，3H)，3.05(m，1H)，2.97(s，3H)。LCMS(M+H)＝398.12。
實(shí)施例54-[(1S)-2-(4-碘代苯基)-1-(4-甲氧基苯基)乙基]-1，3-噻唑-2-胺 步驟A(S)-4-芐基-2-_唑烷酮(8.00g，45.1mmol)和對甲氧基苯基乙酸(15.0g，90.3mmol)溶于90mL的甲苯中，用18.2g(180.5mmol)TEA處理，滴加在50mL甲苯中的新戊酰氯(10.9g，90.2mmol)，得到的溶液加熱回流17小時(shí)，反應(yīng)混合物冷卻，有機(jī)相用1NHCl(2×50mL)、水、飽和NaHCO3(2×50mL)和鹽水洗滌。硫酸鎂干燥后，溶液濃縮并進(jìn)行色譜分離(20％到30％EtOAc/己烷)，得到所需化合物。1H NMR(CDCl3)δ7.4-7.2(m，5H)，7.17(d，J＝7.8Hz，2H)，6.84(d，J＝7.8Hz，2H)，4.64(m，1H)，4.3-4.1(m，2H)，3.81(s，3H)，3.22(dd，J＝3.1，13.3Hz，1H)，2.65(dd，J＝9.5，13.6Hz，1H)。LCMS(M+H)＝326.14。
步驟BNaHMDS(40.5mL，40.5mmol)被加入到-70℃的得自步驟5-A的_惡唑烷酮(10.99g，33.77mmol)和4-碘代芐基溴(20.0g，67.5mmol)在100mL的THF的溶液中，反應(yīng)混合物在該溫度攪拌5小時(shí)，然后用90mL的飽和NH4Cl溶液淬滅。混合物用EtOAc提取三次，合并的有機(jī)物用20mL鹽水洗滌，蒸發(fā)并色譜分離(10％到30％EtOAc/己烷)，得到所需化合物，為單一的非對映體。1H NMR(CDCl3)δ7.60(d，J＝7.8Hz，2H)，7.33(d，J＝7.8Hz，2H)，7.25(m，4H)，6.99(m，3H)，6.84(d，J＝7.8Hz，2H)，5.32(dd，J＝6.2，9.3Hz，1H)，4.58(m，1H)，4.11(m，2H)，3.76(s，3H)，3.42(dd，J＝9.4，13.6Hz，1H)，3.08(dd，J＝3.1，13.3Hz，1H)2.96(dd，J＝6.2，13.5Hz，1H)，2.60(dd，J＝9.0，13.6Hz，1H)。LCMS(M+H)＝542.20。
步驟C得自步驟5-B的_惡唑烷酮(514mg，0.949mmol)在3∶1的THF/水(8mL)中冷卻到0℃，用45mg溶于1.5mL水中的LiOH一水合物處理，然后用0.38mL的過氧化氫處理?；旌衔飻嚢?5分鐘，然后用20mL的飽和Na2SO3淬滅。反應(yīng)混合物用二氯甲烷提取(3×25mL)，合并的有機(jī)提取物棄去。水相用4mL的1N HCl酸化，用DCM洗滌5次，然后用硫酸鎂干燥。蒸發(fā)溶劑，得到所需羧酸。1HNMR(CDCl3)δ7.58(d，J＝7.8Hz，2H)，7.33(d，J＝7.8Hz，2H)，7.25(d，J＝7.6Hz，4H)，6.84(d，J＝7.8Hz，2H)，3.76(s，3H)，3.75(m，1H)，3.24(dd，J＝8.2，13.9Hz，1H)，2.91(dd，J＝7.3，13.9Hz，1H)。
步驟D向0℃的含253mg(0.66mmol)的得自步驟5-C的羧酸在3mL THF中的溶液中加入70mg(0.69mmol)的N-甲基嗎啉和95mg(0.69mmol)的氯甲酸異丁酯。攪拌15分鐘，然后濾除固體NMM鹽，蒸發(fā)濾液。在室溫下過量的CH2N2(從11mL乙醚/3.5mL40％的KOH和976mg的MNNG制備)通過移液管滴加到含有混合酸酐的燒瓶中，得到的混合物攪拌直到LCMS顯示完全轉(zhuǎn)化為重氮酮(16小時(shí))。蒸發(fā)過量的CH2N2，得到的黃色油再溶解乙醚中，冷卻到0℃，用48％HBr(107mg)處理。在10秒內(nèi)發(fā)生泡騰，LCMS檢測到在1小時(shí)后完全轉(zhuǎn)化為新的峰。反應(yīng)混合物用10mL乙醚稀釋，用飽和碳酸氫鹽(2×3mL)、水(3mL)和鹽水(3mL)洗滌。蒸發(fā)溶劑，得到溴代酮，為油狀物，其無需進(jìn)一步純化即可使用。
步驟E將含有307mg(0.669mmol)的得自步驟5-D的溴代酮在3mL MeOH中的溶液用56mg(0.669mmol)的NaHCO3和51mg(0.669mmol)的硫脲處理，并在50℃加熱15分鐘，然后混合物濃縮，用水和EtOAc提取。有機(jī)相干燥，濃縮并進(jìn)行色譜分離(反相LC)，得到所需的2-氨基噻唑的TFA鹽，為灰白色固體。1H NMR(CD3OD)δ7.48(d，J＝7.8Hz，2H)，7.11(d，J＝7.8Hz，2H)，6.88(d，J＝7.6Hz，4H)，6.15(s，1H)，3.99(t，J＝8.5Hz，1H)，3.70(s，3H)，3.74(m，1H)，3.03(dd，J＝7.3，13.9Hz，1H)。LCMS(M+H)＝437.1。
實(shí)施例64-[1-(4-氯苯基)環(huán)戊基]-5-苯基-1，3-噻唑-2-胺 步驟A向0℃的含486mg(2.0mmol)的1-(4-氯苯基)-1-環(huán)戊烷羰基氯和196mg(2.0mmol)的N，O-二甲基羥胺鹽酸鹽在20mL的DCM中的溶液中加入1.4mL(10.0mmol)的TEA，反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?6小時(shí)，用水(2×5mL)、1N HCl(2×5mL)和鹽水洗滌，經(jīng)干燥的有機(jī)提取液進(jìn)行色譜分離(1∶己烷/EtOAc)，得到所需氨基化物。
步驟B向0℃的358mg(1.38mmol)的得自步驟6-A的Weinreb氨基化物在10mL THF中的溶液中加入1.4mL(2.8mmol)的芐基溴化鎂。反應(yīng)在17小時(shí)內(nèi)攪拌達(dá)到室溫，然后用20mL乙醚稀釋，用5mL飽和氯化銨淬滅，有機(jī)相分離并用鹽水洗滌，柱色譜法(4∶1的己烷/EtOAc)，得到所需的酮，其用于下一步。LCMS(M+H)＝299.10。
步驟C含有320mg(1.0mmol)的得自步驟6-B的酮在10mL氯仿中的溶液用171mg(1.0mmol)的溴處理，在50℃加熱30分鐘，反應(yīng)混合物冷卻并用飽和碳酸氫鹽溶液(2×5mL)、水、鹽水洗滌。有機(jī)相用硫酸鎂干燥并蒸發(fā)，得到所需的α-溴代酮，其無需進(jìn)一步純化即可使用。
步驟D含有377mg(1.0mmol)的得自步驟6-C的溴代酮、84mg(1.0mmol)的NaHCO3以及76mg(1.0mmol)硫脲在10mL甲醇中的混合物在50℃加熱16小時(shí)，反應(yīng)混合物冷卻，濃縮到四分之一體積，并經(jīng)反相LC色譜分離，得到所需抑制劑，為單TFA鹽。1H NMR(CDCl3)δ9.02(bs，2H)，7.42-7.17(m，9H)，2.22(m，1H)，2.01(m，1H)，1.65(m，1H)，1.45(m，1H)。LCMS(M+H)＝355.01。
實(shí)施例75-(2-呋喃基)-4-[2-(2-甲氧基-5-硝基苯基)-1-(4-甲氧基苯基)乙基-1，3-噻唑-2-胺 步驟ANaHMDS(30.0mL，30.0mmol)被添加到-70℃的4-甲氧基苯基乙酸乙酯(5.83g，30.0mmol)和2-甲氧基-5-硝基芐基溴(7.38g，30.0mmol)在200mL THF中的溶液中，反應(yīng)混合物在16小時(shí)內(nèi)攪拌達(dá)到室溫，然后蒸發(fā)溶劑，殘余物在150mL EtOAc和20mL飽和氯化銨之間分配。水相用EtOAc洗滌(2×25mL)，合并的有機(jī)提取液用鹽水洗滌(20mL)，經(jīng)硫酸鎂干燥。有機(jī)相干燥，濃縮并色譜分離(0-50％EtOAc/己烷)，得到單烷基化的目標(biāo)化合物。
步驟B向含有6.67g(18.6mmol)的得自步驟1的酯在100mL甲醇和100mL的THF中的溶液中加入37mL(37mmol)的1MLiOH。反應(yīng)攪拌16小時(shí)，蒸發(fā)溶劑，殘余物用3N HCl處理，使得pH＝6。水性混合物用EtOAc提取(3×100mL)，合并的有機(jī)洗液經(jīng)硫酸鎂干燥并蒸發(fā)，得到所需羧酸。
步驟C向-70℃的含有2.5g(7.54mmol)的得自步驟B的羧酸在100mL乙醚中的溶液中加入0.87mL(7.92mmol)的N-甲基嗎啉和1.08g(7.92mmol)的氯甲酸異丁酯，反應(yīng)混合物攪拌15分鐘，然后通過細(xì)玻璃料漏斗過濾。在室溫將過量的CH2N2(從75mL乙醚/23mL40％的KOH和6.64克MNNG制備的75mL的重氮甲烷)通過移液管滴加到含有混合酸酐的燒瓶中，得到的混合物攪拌直到LCMS顯示完全轉(zhuǎn)化為重氮酮(30分鐘到24小時(shí))。蒸發(fā)過量的CH2N2，得到的黃色油再溶解在乙醚中，冷卻到0℃，用48％HBr(2.0mL)處理。在10秒內(nèi)發(fā)生泡騰，LCMS檢測在1小時(shí)后完全轉(zhuǎn)化為新的峰。反應(yīng)混合物用50毫升的乙醚稀釋，用飽和碳酸氫鹽(2×10mL)、水(10mL)和鹽水(10mL)洗滌。蒸發(fā)溶劑，得到溴代酮，為白色固體，其無需進(jìn)一步純化即可使用。
步驟D將含有3.1g(7.54mmol)的得自步驟C的溴代酮在10mLMeOH中的溶液用634mg(7.54mmol)的NaHCO3和574mg(7.54mmol)的硫脲處理，并在50℃加熱1小時(shí)，然后混合物濃縮，用水和CH2Cl2提取。有機(jī)相干燥，濃縮并進(jìn)行色譜分離(EtOAc)，得到所需的氨基噻唑，為灰白色固體。LCMS(M+H)＝386.0.
步驟E向0℃的含710mg(1.84mmol)的得自步驟D的氨基噻唑在3mL CHCl3中的溶液中加入608mg(2.39mmol)的碘。溶液回溫到室溫并攪拌16小時(shí)。溶液用10mL CH2Cl2稀釋，用飽和NaHCO3洗滌。有機(jī)層濃縮并色譜分離(20-100％ EtOAc/己烷)，得到5-碘代氨基噻唑。LCMS(M+H)＝511.9.
步驟F向含有59.8mg(0.12mmol)的得自步驟E的5-碘代氨基噻唑在2mL DMF中的溶液中加入41.8mg(0.12mmol)的三丁基(2-呋喃基)錫，溶液脫氣，加入4.1mg(0.01mmol)雙(三苯基膦)氯化鈀(II)。溶液在90℃加熱16小時(shí)，溶液冷卻并色譜分離(RPLC)，得到所需的氨基噻唑。1H NMR(CD3OD)δ8.01(m，1H)，7.89(d，J＝2.74Hz，1H)，7.45(s，1H)，7.34(d，J＝8.70Hz，2H)，7.00(m，1H)，6.95(m，2H)，6.45(m，1H)，6.31(d，J＝3.4Hz，1H)，3.86(s，3H)，3.81(s，3H)，3.47(m，1H)，3.35(m，1H)。LCMS(M+H)＝451.97。
使用上述方法A-D，以與上述實(shí)施例中類似的方式制備以下實(shí)施例中的化合物。
























盡管在上述表格中所述的一些化合物以其酸形式表示，本發(fā)明意在包括上述化合物的鹽和游離堿的形式。
盡管本發(fā)明已經(jīng)參考其某些具體實(shí)施方案進(jìn)行描述和說明，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解可對方法和規(guī)程進(jìn)行各種調(diào)整、改變、修飾、替換、刪除或添加而不脫離本發(fā)明的精神和范圍。因此，本發(fā)明通過權(quán)利要求進(jìn)行定義，所述權(quán)利要求以在合理情況下盡可能寬的范圍進(jìn)行解釋。
權(quán)利要求
1.式(I)的化合物 其中R1選自(1)-C1-6烷基，(2)-C2-6烯基，(3)-C0-6烷基-C3-6環(huán)烷基，(4) 和(5)選自以下的雜芳基呋喃基、吡喃基、苯并呋喃基、異苯并呋喃基、苯并吡喃基、噻吩基、苯并噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、吲哚基、吲唑基、苯并咪唑基、喹啉基和異喹啉基，其中(a)所述烷基、烯基或環(huán)烷基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代鹵素、-C1-6烷基、-C1-6烷氧基、 羥基或氰基，和(b)所述雜芳基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代鹵素、-C1-6烷基、-C1-6烷氧基、苯基、羥基或氰基，和其中R1a、R1b、R1c、R1d和R1e選自(a)氫，(b)鹵素，(c)氰基，(d)羥基，(e)-C1-6烷氧基，(f)-C(＝O)-O-R7a，(g)-O-C0-6烷基-C(＝O)-R7a，(h)-N-R7a-S(O)p-R7b，或R1b和R1c連接在一起形成-O-CH2-O-或-CH＝CH-CH＝CH-；其中所述芳基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代鹵素、-C1-6烷基、-C1-6烷氧基、羥基或氰基；R2選自(1)氫，(2)鹵素，(3)-C0-6烷基-Q1-C1-6烷基，其中Q1為O或S，(4)-C1-6烷基，和(5)羥基；R3選自(1)氫，(2)-C1-6烷基，(3)-C0-6烷基-C3-6環(huán)烷基，(4)-C0-6烷基-Q2-C1-6烷基，其中Q2為O、S或-C(＝O)-O-，和(5) (6)-CH2-雜芳基，其中所述雜芳基選自呋喃基、吡喃基、苯并呋喃基、異苯并呋喃基、苯并吡喃基、噻吩基、苯并噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、吲哚基、吲唑基、苯并咪唑基、喹啉基和異喹啉基，其中所述烷基或環(huán)烷基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(a)鹵素，(b)-C1-6烷基，(c)-C2-6烯基，(d)-C1-6烷氧基，(e)-C6-10芳基，(f)羥基，或(g)氰基，和所述雜芳基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(a)-C1-6烷基，(b)-NR3fR3g，其中R3f和R3g選自(i)氫，(ii)-C1-6烷基，(iii)-C1-6烷基-C6-10芳基，其中所述芳基可以是未取代的或?yàn)辂u素、氰基、C1-6烷基或C1-6烷氧基取代，或(iv)-C1-6烷基-NR7aR7b，或N、R3f和R3g一起形成5或6元雜環(huán)基，其除了與R3f和R3g連接的N原子之外還任選含有N、S或O原子，和R3a、R3b、R3c、R3d和R3e選自(i)氫，(ii)鹵素，(iii)氰基，(iv)羥基，(v)-C1-6烷基，(vi)-O-R7a，(vii)-(C＝O)-O-R8，(viii)-NR7a-S(O)pOR7b，(ix)-NR7a-S(O)pR7b，(x)-C0-6烷基-S(O)mR7a，(xi)-C(＝O)-NR7aR7b，(xii)-C(＝O)-R8，(xiii)-NH-C(＝O)-R7a，(xiv)-C0-6烷基-NR7aR7b，(xv)-N3，(xvi)-NO2，(xvii)C6-10芳基，其中所述芳基可是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(A)鹵素，(B)氰基，(C)-C1-6烷基，(D)-C1-6烷氧基，(E)-C(＝O)-O-R7a，(F)-C(＝O)-R7a，(G)-NR7aR7b，(H)-NR7a-S(O)p-R7b，(I)-NR7a-C(＝O)-R7b，(J)-NO2，(xvii)選自以下的雜芳基呋喃基、吡喃基、苯并呋喃基、異苯并呋喃基、苯并吡喃基、噻吩基、苯并噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、吲哚基、吲唑基、苯并咪唑基、喹啉基和異喹啉基，其中所述雜芳基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(A)-C1-6烷基，或(B)-C1-6烷氧基，或R3c和R3d連接在一起形成苯基或-O-CH2-O-或-CH＝CH-CH＝CH-基團(tuán)；或R2和R3連接形成以下碳環(huán)(A) 其中Q3選自(1)-CR7aR7b-，(2)-CR7aR7bCR7cR7d-，(3)-CR7a＝CR7b-，(4)-CRa7aR7bCR7cR7dCR7eR7f-，(5)-CR7a＝CR7bCR7cR7d-，和(6)-CR7aR7bCR7d＝CR7e-；R4選自(1)氫，(2)鹵素，(3)-C1-6烷基，(4)-C2-6烯基，(5)-C2-6炔基，(6)苯基，(7)芐基，和(8)選自以下的雜芳基呋喃基、吡喃基、苯并呋喃基、異苯并呋喃基、苯并吡喃基、噻吩基、苯并噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、吲哚基、吲唑基、苯并咪唑基、喹啉基和異喹啉基，其中所述烷基、烯基、炔基和苯基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(a)鹵素，(b)氰基，(c)羥基，(d)苯基，(e)-C1-6烷基，(f)-C1-6烷氧基，(g)-C(＝O)-O-R7a，(h)-C(＝O)-R7a，(i)-NR7aR7b，(j)-NR7a-S(O)p-R7b，(k)-NR7a-C(＝O)-R7b，(l)-NO2；和所述雜芳基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(a)-C1-6烷基，(b)-C(＝O)-O-R7a，(c)-C(＝O)-R7a，(d)-NR3fR3g，其中R3f和R3g選自(i)氫，(ii)-C1-6烷基，(iii)-C1-6烷基-C6-10芳基，其中所述芳基可是未取代的或被鹵素、氰基、C1-6烷基或C1-6烷氧基取代，或(iv)-C1-6烷基-NR7aR7b；或R3和R4連接在一起形成6元碳環(huán)(B) 條件是當(dāng)R3和R4連接在一起形成(B)時(shí)，則R1和R2選自氫或C1-6烷基，以及X1、X2、X3、X4、X5和X6選自氫、C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、氰基、烷基芳基或苯基，或R3和R4連接在一起形成7元碳環(huán)(C) 條件是當(dāng)R3和R4連接在一起形成(C)時(shí)，則R1和R2選自氫、C1-6烷基或苯基，或R1和R2可以通過基團(tuán)-CH2CH2CH2CH2-連接在一起，并且Y1、Y2、Y3、Y4、Y5、Y6、Y7和Y8選自氫、C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、氰基、烷基芳基或苯基，或R1和Y5，或R1和Y7通過-CH2-連接在一起，或R1和Y1，或Y1和Y3連接在一起形成苯基或環(huán)戊基環(huán)；R7a、R7b、R7c、R7d、R7e和R7f選自(1)氫，(2)C1-6烷基，和(3)C6-10芳基，其中所述烷基或芳基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代鹵素、-C1-6烷基、-C1-6烷氧基、羥基或氰基；R8選自(1)氫，(2)C1-6烷基，和(3)C6-10芳基，其中所述芳基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代鹵素、-C1-6烷基、-C1-6烷氧基、羥基或氰基；n為0、1、2或3；m為0或1；p為1或2；及其可藥用鹽，及其單獨(dú)的對映異構(gòu)體和非對映體。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R3選自(1)-C1-6烷基，(2)-C0-6烷基-C3-6環(huán)烷基，(3) 和(4)-CH2-雜芳基。其中所述雜芳基選自呋喃基、吡喃基、苯并呋喃基、異苯并呋喃基、苯并吡喃基、噻吩基、苯并噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、吲哚基、吲唑基、苯并咪唑基、喹啉基和異喹啉基。
3.權(quán)利要求2的化合物，其中R3為 且n為1。
4.權(quán)利要求2的化合物，其中R1為 且m為0。
5.權(quán)利要求4的化合物，其中R1a、R1b、R1d和R1e為氫，R1c選自鹵素、C1-6烷基和C1-6烷氧基。
6.權(quán)利要求2的化合物，其中R2為氫。
7.權(quán)利要求2的化合物，其中R4為氫。
8.權(quán)利要求1的化合物，其為式(III)的化合物
9.權(quán)利要求8的化合物，其中R1為 且m為0。
10.權(quán)利要求9的化合物，其中Q3選自(1)-CR7aR7b-，(2)-CR7aR7bCR7cR7d-，和(3)-CR7aR7bCR7cR7dCR7eR7f-。
11.權(quán)利要求10的化合物，其中R1d選自鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基和氰基，R1a、R7b、R1c和R1e為氫。
12.權(quán)利要求9的化合物，其中R1b和R1d選自鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基和氰基，R1a、R1c和R1e為氫。
13.權(quán)利要求8的化合物，其中Q3選自-CH2CH2-和-CH2CH2CH2-。
14.權(quán)利要求1的化合物，其為式(IV)的化合物
15.權(quán)利要求14的化合物，其中R1和R2為氫。
16.權(quán)利要求1的化合物，其為式(V)的化合物
17.權(quán)利要求1的化合物，其選自 和其可藥用鹽。
18.權(quán)利要求1的化合物，其選自實(shí)施例 結(jié)構(gòu) 實(shí)施例 結(jié)構(gòu) 實(shí)施例 結(jié)構(gòu) 實(shí)施例 結(jié)構(gòu) 實(shí)施例 結(jié)構(gòu) 實(shí)施例 結(jié)構(gòu) 實(shí)施例 結(jié)構(gòu) 實(shí)施例 結(jié)構(gòu) 實(shí)施例 結(jié)構(gòu) 實(shí)施例 結(jié)構(gòu) 實(shí)施例 結(jié)構(gòu) 實(shí)施例 結(jié)構(gòu) 實(shí)施例 結(jié)構(gòu) 實(shí)施例結(jié)構(gòu) 實(shí)施例結(jié)構(gòu) 實(shí)施例 結(jié)構(gòu) 實(shí)施例 結(jié)構(gòu) 實(shí)施例 結(jié)構(gòu) 實(shí)施例 結(jié)構(gòu) 實(shí)施例 結(jié)構(gòu) 實(shí)施例 結(jié)構(gòu) 實(shí)施例 結(jié)構(gòu) 實(shí)施例 結(jié)構(gòu) 實(shí)施例 結(jié)構(gòu) 和其可藥用鹽。
19.藥物組合物，包括治療有效量的權(quán)利要求1的化合物或其可藥用鹽以及可藥用載體。
20.治療有需要的患者中的阿爾茨海默氏病的方法，包括對患者給用治療有效量的權(quán)利要求1的化合物或其可藥用鹽。
21.抑制有需要的受試者中的HIV蛋白酶的方法，包括對受試者給用治療有效量的權(quán)利要求1的化合物或其可藥用鹽。
22.治療有需要的受試者中的HIV感染的方法，包括對受試者給用治療有效量的權(quán)利要求1的化合物或其可藥用鹽。
23.治療有需要的受試者中的AIDS的方法，包括對受試者給用治療有效量的權(quán)利要求1的化合物或其可藥用鹽。
全文摘要
本發(fā)明涉及作為天冬氨酰蛋白酶抑制劑及作為β－分泌酶蛋白酶和HIV蛋白酶抑制劑的2－氨基噻唑化合物，此類化合物可用于治療其中牽涉β－分泌酶和HIV蛋白酶的疾病，如阿爾茨海默氏病、HIV感染和AIDS。本發(fā)明還涉及包括這些化合物的藥物組合物，和這些化合物和組合物在治療其中牽涉β－分泌酶和HIV蛋白酶的疾病中的應(yīng)用。
文檔編號C07D277/60GK1938288SQ200580010390
公開日2007年3月28日 申請日期2005年3月25日 優(yōu)先權(quán)日2004年3月30日
發(fā)明者C·A·科布恩, A·S·埃佩塞思, S·J·斯塔徹, D·B·奧森, D·J·哈祖達(dá), M·K·霍洛韋 申請人:默克公司