專利名稱：鹽酸去甲基萬(wàn)古霉素的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥品原料的制備方法，具體地說是屬于鹽酸去甲基萬(wàn)古霉素制備方法。
背景技術(shù)：
鹽酸去甲基萬(wàn)古霉素為糖肽類抗生素，結(jié)構(gòu)式如下 此產(chǎn)品外觀為淡棕色粉末，無(wú)臭，味苦，易溶于水，在甲醇中微溶，在丙酮、丁醇或乙醚中不溶，在溶液中能被多種重金屬鹽類沉淀。
近年來的藥理和臨床研究證明，鹽酸去甲基萬(wàn)古霉素靜脈滴注適用于葡萄球菌屬(包括甲氧西林耐藥菌株和多重耐藥菌株)所致心內(nèi)膜炎、骨髓炎、肺炎、敗血癥或軟組織感染等。也用于對(duì)青霉素過敏者的腸球菌心內(nèi)膜炎、棒狀桿菌屬(類白喉?xiàng)U菌屬)心內(nèi)膜炎治療的首選藥。對(duì)青霉素過敏與青霉素不過敏的血液透析者發(fā)生葡萄球菌屬所致動(dòng)、靜脈分流感染的治療?？诜m用于抗生素相關(guān)性偽膜性結(jié)腸炎或多重耐藥葡萄球菌小腸結(jié)腸炎的治療。(見《中華人民共和國(guó)藥典》2000年版二部臨床用藥須知688頁(yè))鹽酸去甲基萬(wàn)古霉素最常采用的制備方法包括有發(fā)酵、過濾、脫色、樹脂吸附、解析、脫鹽、脫色、噴霧干燥工序，即將所得去甲基萬(wàn)古霉素發(fā)酵液加入硅藻土，攪拌，過濾得到濾液，濾液再經(jīng)活性炭脫色，脫色液濃縮后經(jīng)DK-80樹脂吸附，氫氧化鈉溶液解析，解析液經(jīng)樹脂脫鹽，活性炭脫色，脫色液噴霧干燥得到鹽酸去甲基萬(wàn)古霉素粉。
這種方法存在許多不足之處，例如過濾時(shí)間長(zhǎng)，過濾收率低；采用堿性解析劑易造成去甲萬(wàn)古霉降解，噴霧干燥時(shí)瞬時(shí)溫度過高(瞬時(shí)溫度達(dá)到100℃以上)，使鹽酸去甲基萬(wàn)古霉素部分降解，產(chǎn)品純度低，外觀品質(zhì)差。見附圖1。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種制備鹽酸去甲基萬(wàn)古霉素的新方法，該方法可有效提高鹽酸去甲基萬(wàn)古霉素的品質(zhì)，縮短生產(chǎn)周期，還可有效降低生產(chǎn)成本，減少鹽酸去甲基萬(wàn)古霉素的收率損失。
本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的將去甲基萬(wàn)古霉素發(fā)酵液中加入珍珠巖，攪拌，過濾，脫色，樹脂吸附、酸解析，堿沉，結(jié)晶，干燥，得到鹽酸去甲基萬(wàn)古霉素粉。
該方法包括以下步驟a.將去甲基萬(wàn)古霉素發(fā)酵液按1～5％(w/v)的比例加入珍珠巖，按2～13％(w/v)的比例加入鐵氰化鉀和2～10％(w/v)的比例加入硫酸鋅，攪拌，過濾；珍珠巖的加入比例優(yōu)選2.5～4％，鐵氰化鉀的加入比例優(yōu)選5～9％，硫酸鋅優(yōu)選4～7％，以有效地除去發(fā)酵液中的雜蛋白和金屬離子，保證濾速，并得到澄清濾液。
b.濾液使用大孔脫色樹脂脫色；大孔脫色樹脂可以選D941，也可以選XAD-III或X-5，最好選用D941，以達(dá)到最好的脫色效果。
c.脫色液濃縮到20000～30000ug/ml，用葡聚糖凝膠分離純化，酸性溶液為流動(dòng)相進(jìn)行解吸；葡聚糖凝膠可以選用G-10，也可以選G-15或G-25。但最好選用G-15，以獲得含量高的產(chǎn)品。酸性溶液可以是磷酸水溶液，也可以是鹽酸水溶液，但最好選用磷酸水溶液。
d.解析液用堿性溶液調(diào)pH值6.0～7.8，過濾；堿性溶液是0.5mol/L的氫氧化鈉水溶液。
e.濾餅用濃度為1％(W/V)鹽酸水溶液溶解后加丙酮進(jìn)行結(jié)晶、過濾、洗滌、干燥。
本發(fā)明使用珍珠巖代替硅藻土作助濾劑，用硫酸鋅和鐵氰化鉀作凈化劑，使過濾時(shí)間縮短了2/3，過濾收率由60％提高到90％以上，大大縮短了生產(chǎn)周期，提高了產(chǎn)品收率。過濾收率列表見表1表1三批產(chǎn)品的過濾收率

本發(fā)明使用大孔脫色樹脂代替活性炭，有效提高了產(chǎn)品的外觀品質(zhì)，產(chǎn)品外觀由棕褐色變?yōu)轭惏咨Ｆ暇厶悄z代替DK-80樹脂，用酸性解吸系統(tǒng)代替堿性解吸系統(tǒng)，明顯提高了產(chǎn)品的分離效果，減少了對(duì)鹽酸去甲基萬(wàn)古霉素的破壞，使產(chǎn)品的含量由85％提高到90％以上。
本發(fā)明的有益效果還在于采用堿沉、溶媒結(jié)晶和真空干燥的方法，避免了產(chǎn)品瞬時(shí)遭受高溫破壞。見附圖2。


附圖中A為鹽酸去甲基萬(wàn)古霉素，D為雜組分附圖1原方法所得的鹽酸去甲萬(wàn)古霉素的HPLC圖附圖2新方法所得的鹽酸去甲萬(wàn)古霉素的HPLC圖具體實(shí)施方式
下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步詳細(xì)說明本發(fā)明，但它們并非理解成為對(duì)本發(fā)明范圍的任何限制。
另外，本發(fā)明中所用的分析方法均按《中華人民共和國(guó)藥典》2000版(二部)553頁(yè)進(jìn)行。
實(shí)施例1鹽酸去甲萬(wàn)古霉素的制備去甲萬(wàn)古霉素發(fā)酵液加入1～5％珍珠巖(河南中南助濾劑有限公司)，2～13％的鐵氰化鉀(為市售產(chǎn)品)和2～10％硫酸鋅(為市售產(chǎn)品)，攪拌均勻，板框過濾，濾液以1～2BV/小時(shí)的流速通過大孔脫色樹脂X-5(南開大學(xué)樹脂廠)柱，脫色液的單位為3000～5000ug/ml，將其濃縮至20000～30000ug/ml，濃縮液以1～1.5BV/小時(shí)的流速通過葡聚糖凝膠G-10樹脂(南開大學(xué)樹脂廠)柱，飽和葡聚糖凝膠G-10樹脂用0.1mol/L磷酸水溶液洗脫，洗脫速度為0.5～1BV/小時(shí)，HPLC檢測(cè)有鹽酸去甲基萬(wàn)古霉素流出時(shí)開始收集，向解析液中緩慢加入0.5mol/L氫氧化鈉(為市售產(chǎn)品)水溶液，調(diào)pH6.0～7.8，邊加邊攪拌30分鐘，停止攪拌，靜置24小時(shí)，板框過濾，濾餅用1％鹽酸(重量百分比)(為市售產(chǎn)品)水溶液溶解，加入過量的1％鹽酸(W/V)水溶液使去甲萬(wàn)古霉素完全成鹽，在攪拌下緩慢加入5～10倍體積的工業(yè)用丙酮至結(jié)晶析出，靜置24小時(shí)，板框壓濾，濾餅用丙酮洗滌2～3次，真空干燥，得到鹽酸去甲萬(wàn)古霉素精粉。產(chǎn)品含量達(dá)90％以上。
實(shí)施例2鹽酸去甲萬(wàn)古霉素的制備同實(shí)施例1，只是珍珠巖的加入量為3％，7％的鐵氰化鉀和5％硫酸鋅，大孔脫色樹脂為D941(南開大學(xué)樹脂廠)，脫色液的單位為3672ug/ml，將其濃縮至23500ug/ml，濃縮液以1BV/小時(shí)的流速通過葡聚糖凝膠G-15樹脂柱，飽和葡聚糖凝膠G-15樹脂用0.1mol/L磷酸水溶液洗脫，解析速度為0.5BV/小時(shí)，解析液用0.5mol/L氫氧化鈉水溶液調(diào)pH7.0～7.4，靜置24小時(shí)，板框過濾，濾餅用1％鹽酸水溶液溶解，用5倍體積的工業(yè)用丙酮至結(jié)晶析出，靜置24小時(shí)，板框壓濾，洗滌.，真空干燥，得到鹽酸去甲萬(wàn)古霉素精粉。產(chǎn)品含量達(dá)96.4％，產(chǎn)品外觀為類白色。
實(shí)施例3鹽酸去甲萬(wàn)古霉素的制備同實(shí)施例1，只是珍珠巖的加入量為5％，13％的鐵氰化鉀和2％硫酸鋅，使用XAD-III大孔脫色樹脂(南開大學(xué)樹脂廠)脫色，脫色液的單位為4120ug/ml，將其濃縮至27800ug/ml，濃縮液以1BV/小時(shí)的流速通過葡聚糖凝膠G-25樹脂柱，飽和葡聚糖凝膠G-25樹脂用0.1mol/L鹽酸水溶液解析，解析速度為0.5BV/小時(shí)，解析液用0.5mol/L氫氧化鈉水溶液調(diào)pH7.8，靜置24小時(shí)，板框過濾，濾餅用1％鹽酸水溶液溶解，用10倍體積的工業(yè)用丙酮至結(jié)晶析出，靜置24小時(shí)，板框壓濾，洗滌，真空干燥，得到鹽酸去甲萬(wàn)古霉素精粉。產(chǎn)品含量達(dá)91.2％，產(chǎn)品外觀為類白色。
實(shí)施例4鹽酸去甲萬(wàn)古霉素的制備同實(shí)施例1，只是珍珠巖的加入量為1％，鐵氰化鉀2％和硫酸鋅10％，脫色液的單位為4300ug/ml，將其濃縮至25700ug/ml，濃縮液以1BV/小時(shí)的流速通過葡聚糖凝膠G-15樹脂柱，飽和葡聚糖凝膠G-15樹脂用0.1mol/L鹽酸水溶液解析，解析速度為0.5BV/小時(shí)，解析液用0.5mol/L氫氧化鈉水溶液調(diào)pH6.0，靜置24小時(shí)，板框過濾，濾餅用1％鹽酸水溶液溶解，用5倍體積的工業(yè)用丙酮至結(jié)晶析出，靜置24小時(shí)，板框壓濾，洗滌.，真空干燥，得到鹽酸去甲萬(wàn)古霉素精粉。產(chǎn)品含量達(dá)92.5％，產(chǎn)品外觀為類白色。
權(quán)利要求
1.一種鹽酸去甲基萬(wàn)古霉素制備方法，其特征在于它包括以下步驟a.將鹽酸去甲基萬(wàn)古霉素發(fā)酵液按1～5％(w/v)的比例加入珍珠巖，按2～13％(w/v)的比例加入鐵氰化鉀和2～10％(w/v)的比例加入硫酸鋅，攪拌，過濾；b.濾液使用大孔脫色樹脂脫色；c.脫色液使用葡聚糖凝膠為吸附劑，酸性解吸系統(tǒng)進(jìn)行解吸；d.解析液用堿調(diào)pH值6.0～7.8，過濾；e.濾餅用鹽酸水溶液溶解、丙酮結(jié)晶、干燥。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鹽酸去甲基萬(wàn)古霉素制備方法，其特征在于所說的a步驟助濾劑珍珠巖的用量?jī)?yōu)選為3％。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鹽酸去甲基萬(wàn)古霉素制備方法，其特征在于所說的a步驟中鐵氰化鉀的用量為5～9％，優(yōu)選為7％，硫酸鋅的用量為4～7％，優(yōu)選為5％。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鹽酸去甲基萬(wàn)古霉素制備方法，其特征在于所說的b步驟中使用的大孔脫色樹脂為D941、XAD-III或X-5，優(yōu)選為D941脫色樹脂。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鹽酸去甲基萬(wàn)古霉素制備方法，其特征在于所說的c步驟中使用的葡聚糖凝膠為G-10、G-15或G-25，優(yōu)選為G-15。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鹽酸去甲基萬(wàn)古霉素制備方法，其特征在于所說的c步驟中使用的解析液為磷酸或鹽酸水溶液，優(yōu)選為磷酸水溶液，濃度為0.1mol/L。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鹽酸去甲基萬(wàn)古霉素制備方法，其特征在于所說的d步驟中pH控制優(yōu)選為7.0～7.4。
全文摘要
本發(fā)明為一種鹽酸去甲基萬(wàn)古霉素制備方法，包括以下步驟a.將去甲基萬(wàn)古霉素發(fā)酵液按1～5％(w/v)的比例加入珍珠巖，按2～13％(w/v)的比例加入鐵氰化鉀和2～10％(w/v)的比例加入硫酸鋅，攪拌，過濾；b.濾液使用大孔脫色樹脂脫色；c.脫色液使用葡聚糖凝膠為吸附劑，酸性解吸系統(tǒng)進(jìn)行解吸；d.解析液用堿調(diào)pH值6.0～7.8，過濾；e.濾餅用鹽酸水溶液溶解、丙酮結(jié)晶、干燥。通過采取上述步驟，可有效提高鹽酸去甲基萬(wàn)古霉素的品質(zhì)，縮短生產(chǎn)周期，還可有效降低生產(chǎn)成本，減少鹽酸去甲基萬(wàn)古霉素的收率損失。
文檔編號(hào)C07H15/20GK1626542SQ200310109688
公開日2005年6月15日 申請(qǐng)日期2003年12月9日 優(yōu)先權(quán)日2003年12月9日
發(fā)明者姜楊, 張雪霞, 劉剛?cè)? 蔣沁, 修林坡, 李淑蘭, 王琳, 張志江, 賀廣峰 申請(qǐng)人:華北制藥集團(tuán)有限責(zé)任公司