專利名稱：無結(jié)晶型態(tài)鹽酸萬古霉素及其制備方法和用途、以及它的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種鹽酸萬古霉素，具體地說，涉及一種高密度無結(jié) 晶型態(tài)鹽酸萬古霉素及其制備方法、和該鹽酸萬古霉素用于口服或注 射給藥的用途、以及含有該鹽酸萬古霉素的藥物組合物。
背景技術(shù)：
鹽酸萬古霉素是東方諾卡氏菌在控制發(fā)酵條件下產(chǎn)生的一種兩性糖肽類抗生素，其化學(xué)式為C66H75C12N9CVHC1，分子量為1，486。 通過發(fā)酵微生物Amycolatopis orientalis (以前的Nocardia orientalis) 制備萬古霉素的方法已經(jīng)在美國(guó)專利3,067,099 (1955年申請(qǐng))和 WO91/08,300中更為詳細(xì)的描述。鹽酸萬古霉素的凍干粉呈現(xiàn)米白 色，其水溶液為透明溶液，pH為2.5-4.5。臨床上，鹽酸萬古霉素從20世紀(jì)50年代末開始有商業(yè)銷售。已 知鹽酸萬古霉素與黏肽的前質(zhì)末端D-Ala-D-Ala結(jié)合，抑制細(xì)菌細(xì)胞 壁的合成。此外，鹽酸萬古霉素還可以改變細(xì)胞膜的滲透性和RNA 的合成。鹽酸萬古霉素特別用于由抗P-乳胺抗生素的葡萄球菌引起的嚴(yán) 重或重癥感染的初步治療，也用于治療對(duì)青霉素過敏或使用青霉素和 頭孢菌素沒有效果的患者。商業(yè)銷售的鹽酸萬古霉素有口服(溶液和 膠囊/子彈型膠囊)和注射(小瓶的消毒靜脈溶液)形式。鹽酸萬古霉素單獨(dú)使用或與其它氨基葡糖苷結(jié)合使用可以治療由葡萄球菌、鏈球菌、腸球菌或白喉?xiàng)U菌引起的心內(nèi)膜炎。只有在注射鹽酸萬古霉素對(duì)葡萄球菌引起的小腸結(jié)腸炎沒有效果的情況下，才允許口服鹽酸萬古霉素。只有注射用鹽酸萬古霉素適用于其它所有的適應(yīng)癥。目前在臨床上用的鹽酸萬古霉素都是用凍干粉為原料來制備口服和注射劑型，在口服劑型的膠囊劑型中，因凍干粉的密度比較小，制備膠囊顆粒較大，不易服用。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種高密度無結(jié)晶型態(tài)的鹽 酸萬古霉素及其制備方法和藥學(xué)上的應(yīng)用，不但可以注射用，還可用 于口服，尤其可應(yīng)用于膠囊。根據(jù)本發(fā)明的一方面，本發(fā)明提供了一種無結(jié)晶型態(tài)鹽酸萬古霉 素，其特征在于，所述鹽酸萬古霉素為無結(jié)晶型態(tài)，其具有與附圖1所示的x射線粉末晶體衍射圖譜基本相同的特征。所述鹽酸萬古霉素的x-射線衍射圖譜不含有任何峰形。所述鹽酸萬古霉素的松密度為0.45 0.65g/ml，緊密度為0.65~0.85 g/ml 。根據(jù)本發(fā)明的另一方面，本發(fā)明還提供了一種藥物組合物，所述 藥物組合物包括治療有效量的無結(jié)晶型態(tài)鹽酸萬古霉素、以及藥學(xué)上 可接受的載體、賦形劑、稀釋劑或輔料。其中，該鹽酸萬古霉素的治 療有效量為0.5 5g。其中，該種藥物組合物可制成注射劑給藥，也可制成口服制劑給 藥。注射劑主要制成注射用凍干粉針劑，所用的藥用輔料包括葡萄糖、 蔗糖、乳糖、果糖、甘露醇、木糖醇等多元醇類作賦形劑，還包括5 %葡萄糖注射液及0.9%氯化鈉注射液作臨床給藥時(shí)的稀釋劑。注射劑主要用于治療對(duì)甲氧西林耐藥的葡萄球菌引起的感染，對(duì)青霉素過 敏的患者及不能使用其他抗生素包括青霉素、頭孢菌素類，或使用后 治療無效的葡萄球菌、腸球菌和棒狀桿菌、類白喉?xiàng)U菌屬等感染患者， 如心內(nèi)膜炎、骨髓炎、敗血癥或軟組織感染等，也可用于防治血液透 析患者發(fā)生的葡萄球菌屬所致的動(dòng)、靜脈血分流感染?？诜苿┲饕?制成片劑和膠囊劑，所用的藥用輔料包括賦形劑和填充劑如微晶纖維素、羥丙纖維素、淀粉、乳糖、糊精等，粘合劑如聚維酮K30、羥丙 甲纖維素等，崩解劑如羧甲淀粉鈉、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、交聯(lián)聚維 酮等，助流劑或潤(rùn)滑劑如微粉硅膠、硬脂酸鎂、硬脂酸、硬脂酸鈣等。 本品口服用于治療由于長(zhǎng)期服用廣譜抗生素所致的甲硝唑治療無效 的難辨梭狀桿菌引起的偽膜性結(jié)腸炎或葡萄球菌性腸炎。根據(jù)本發(fā)明的再一方面，本發(fā)明還提供了所述鹽酸萬古霉素的制備方法，其特征在于，包括以下步驟(1) 具有萬古霉素色譜純度不低于80%的萬古霉素粗品在含有 NH4HC03流動(dòng)相的層析柱中進(jìn)行柱層析，得到色譜純度不低于93% 的有效層析液或效層析液；(2) 向有效層析液或效層析液加入碳酸鹽，產(chǎn)生沉淀；(3) 采用乙醇進(jìn)行頂洗，干燥得到鹽酸萬古霉素。最好，所述有效層析液經(jīng)過超濾、納濾后可得到有效層析液的濃 縮液，以通過碳酸鹽產(chǎn)生沉淀。其中，所述超濾的回流溫度控制在 10~20°C，并用純化水洗滌濾渣，超濾膜選用10000Da 50000Da。最好，所述有效層析液或有效層析液的濃縮液通過0.45pm和 0.2pm的濾芯過濾后再進(jìn)行沉淀。所述納濾溶液的溫度控制在10~20°C，并分步加入純化水和 0.04%~0.06°/。的乙二胺四乙酸(W/bons)，納濾膜選用200Da 600Da。其中，所述碳酸鹽包括(NH4)2CO;j， NH4HC03， Na2C03和 NaHC03。最好，向有效層析液或有效層析液的濃縮液中加入碳酸鹽 所得到碳酸鹽濃度為3%~7% (W/V)。其中，加入碳酸鹽后，調(diào)節(jié)pH-2.0 3.5,不斷攪拌30 90分鐘， 混合液溫度控制在5 25 °C,并靜置24 48小時(shí)。最好，采用卯％的乙醇水溶液進(jìn)行多次頂洗，頂洗至電導(dǎo)率 ^1000ns/cm時(shí)停止加入90%的乙醇水溶液。最好，采用的層析介質(zhì)為葡聚糖凝膠Sephadex CM-25、瓊脂糖 SP Sepharose或瓊脂糖CM Sepharose，流動(dòng)相為4~6% (w/v) NH4HC03。其中，流動(dòng)相以流量為0.5-1.5柱體積/小時(shí)進(jìn)行洗脫。最好，還包括在柱層析前，將萬古霉素粗品溶于純水中，攪拌， 用2 6 mol/LNaOH溶液調(diào)整至pH= 9~10，待完全溶解后過濾，收集 濾液，用2~6 mo1/ L HC1溶液調(diào)整濾液至pH=4.5 6.0。最好，還包括在用含有NH4HC03流動(dòng)相洗脫前，先用純水和低 濃度的NH4HC03溶液進(jìn)行預(yù)洗。根據(jù)本發(fā)明的最后一方面，本發(fā)明提供了一種鹽酸萬古霉素用于 口服或注射給藥的用途。本發(fā)明所提供的工藝流程具體描述如下。萬古霉素發(fā)酵液在堿性條件下過濾，得到的澄清濾液通過大孔吸附樹脂，萬古霉素被吸附在樹脂，樹脂水洗后用含有溶劑的酸性水溶 液洗脫，典型的洗脫液為含乙醇的鹽酸水溶液。萬古霉素被洗脫下來， 含有萬古霉素的洗脫液加入活性炭脫色，過濾得到的濾液濃縮得到鹽 酸萬古霉素水溶液，水溶液的濃度大約在100mg/mL。濃縮結(jié)束后，接著進(jìn)行沉淀操作。在含有鹽酸萬古霉素的水溶液中加入NH4HC03 (數(shù)量為濃縮液體積的6%~10% (W/V))，然后用氨水調(diào)節(jié)萬古霉素濃縮液pH至 7.5~8.5，攪拌45 60min使其混合均勻，大量的萬古霉素從溶液中沉 淀出來。沉淀過程的溫度必須控制在10~20°C，靜置16士2小時(shí)后，把 混合液固液分離，使萬古霉素沉淀從溶液中分離出來得到固體萬古霉 素堿，然后用乙醇頂洗，頂去固體中殘留液，分離后得到萬古霉素粗 品。得到的萬古霉素堿中萬古霉素色譜純度不低于80% (HPLC)， 一 般在85%以上。萬古霉素粗品在水溶液里溶解后過濾，上層析柱層析純化得到萬 古霉素色譜純度93%以上的有效層析液。有效層析液經(jīng)過超濾、納濾 后得到鹽酸萬古霉素濃縮液。鹽酸萬古霉素濃縮液通過0.45pm和 0.2pm的濾膜過濾后進(jìn)行沉淀。向含有鹽酸萬古霉素的濃縮液中加入碳酸鹽，例如NaHC03、 (NH4)2C03、 NH4HC03、或Na2C03，使?jié)饪s液中碳酸鹽[NaHC03或 (NH4)2C03或NH4HC03或Na2C03]的濃度為3% 7% (W/V)，此時(shí)濃 縮液中有氣泡產(chǎn)生，再向溶液中加入適量的HCl調(diào)節(jié)pH值到2.0-3.5， 并持續(xù)攪拌60±30分鐘，控制混合液溫度在5 25°C，靜置24 48 小時(shí)后固液分離。鹽酸萬古霉素濾餅先用90%的乙醇水溶液進(jìn)行第一 次頂洗，頂洗至電導(dǎo)率^1000^is/cm時(shí)停止加入90%的乙醇水溶液。 再用經(jīng)0.45pm膜過濾后的無水乙醇進(jìn)行第二次頂洗，頂洗后即得鹽 酸萬古霉素沉淀濕品(乙醇水溶液是由0.45pm膜過濾后的無水乙醇 與純化水配制而成)。沉淀濕品通過干燥去除殘留乙醇及水分，獲得 鹽酸萬古霉素成品。通過本發(fā)明得到的鹽酸萬古霉素有效組份大大得到提高，其它雜 質(zhì)大大降低，純度很高，色譜純度可達(dá)到95%以上，該鹽酸萬古霉素 的松密度為0.45 0.65g/ml，緊密度為0.65~0.85 g/ml。該密度比常規(guī)凍干工藝要高，不但可以用于注射劑，還可用于膠囊等固體制劑。同 時(shí)產(chǎn)品外觀顏色得到明顯改觀，適于口服或注射給藥。


圖l為本發(fā)明高密度無結(jié)晶型態(tài)的鹽酸萬古霉素的x射線粉末衍射譜圖。
具體實(shí)施方式
通過以下實(shí)施例來對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步具體說明，但并不僅限于以 下實(shí)施例和實(shí)施例中的工藝參數(shù)范圍。實(shí)施例l:萬古霉素粗品的制備萬古霉素發(fā)酵液在堿性條件下過濾，得到的澄清濾液通過大孔吸 附樹脂XAD-1600，萬古霉素被吸附在樹脂，樹脂水洗后用40%乙醇 的酸性水溶液洗脫，萬古霉素被洗脫下來，含有萬古霉素的洗脫液加 入活性炭脫色，過濾得到的濾液濃縮得到鹽酸萬古霉素水溶液，接著 加入NH4HC03進(jìn)行沉淀，得到萬古霉素粗品。萬古霉素粗品中萬古 霉素B含量為86.8%，效價(jià)為599u/mg。取此粗品2500g，加純化水20.0L,加NaOH溶液調(diào)節(jié)pH到10.0， 用0.2M2的0.5pm孔徑的陶瓷膜過濾得到25.0L萬古霉素濾液，溶液 效價(jià)為51224IU/ml，萬古霉素B含量為86.5%,濾液pH為9.72，濾 液用HC1水溶液調(diào)節(jié)pH到4.82后上柱層析，層析柱填料為瓊脂糖凝 膠。上柱結(jié)束后層析柱用純化水洗柱6BV，然后用O.lmol/1的 NH4HC03水溶液洗柱10BV，然后用0.6mol/l的NH4HC03水溶液層 析，收集其中萬古霉素含量在93n/。以上以及效價(jià)在2000IU/ml的部分，得到有效層析液。有效層析液中加入HC1，調(diào)節(jié)pH到2.76，然后用 50000Da的超濾膜超濾得到濾液，然后用200Da孔徑的納濾膜濃縮脫 鹽，最后獲得濃度為200mg/mL的鹽酸萬古霉素水溶液體積4500mL, 含萬古霉素色譜純度為95.6%,溶液pH為2.85。
實(shí)施例2:鹽酸萬古霉素的沉淀
取實(shí)施例1中的濃縮液500mL，通過0.45pm和0.2jim的濾膜過 濾后邊攪拌邊加入25gNaHC03，萬古霉素從中析出，形成了漿狀物， 加入HCl水溶液調(diào)節(jié)pH到2.80，繼續(xù)攪拌60MIN，使其混合均勻， 停攪拌靜置38小時(shí)，過程溫度控制在14 15 'C?；旌衔锿ㄟ^過濾分 離并先用用200mL90。/。乙醇頂洗，頂洗結(jié)束是頂洗液電導(dǎo)率為 385us/cm，然后用200mL無水乙醇頂洗，得到了鹽酸萬古霉素濕品 99.7g，濕品通過干燥去除殘留乙醇后得到中間體72.5g，再通過高真 空干燥后得到鹽酸萬古霉素成品63.2g，成品水分為3.4%，鹽酸萬古 霉素其松密度為0.62g/ml，緊密度為0.81g/ml 。該無結(jié)晶型態(tài)鹽酸萬 古霉素，其具有與附圖1所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相同 的特征。請(qǐng)參見圖1。
實(shí)施例3:鹽酸萬古霉素的沉淀
取實(shí)施例1中的濃縮液500mL，通過0.45pm和0.2pm的濾膜過 濾后邊攪拌邊加入15gNaHC03，萬古霉素從中析出，形成了漿狀物， 加入HCl水溶液調(diào)節(jié)pH到3.50，繼續(xù)攪拌30MIN，使其混合均勻， 停攪拌靜置48小時(shí)，過程溫度控制在5~6°C?；旌衔锿ㄟ^過濾分離 并先用用200mL 90%乙醇頂洗，頂洗結(jié)束是頂洗液電導(dǎo)率為 293us/cm，然后用200mL無水乙醇頂洗，得到了鹽酸萬古霉素濕品92.3g，濕品通過干燥去除殘留乙醇后得到中間體68.5g，再通過高真 空干燥后得到鹽酸萬古霉素成品58.6g，成品水分為3.1%，鹽酸萬古 霉素其松密度為0.45g/ml，緊密度為0.69 g/ml 。該無結(jié)晶型態(tài)鹽酸萬 古霉素，其具有與附圖1所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相同 的特征。請(qǐng)參見圖1。
實(shí)施例4:鹽酸萬古霉素的沉淀
取實(shí)施例1中的濃縮液500mL,通過0.45jam和0.2pm的濾膜過 濾后邊攪拌邊加入35gNaHC03，萬古霉素從中析出，形成了漿狀物， 加入HC1水溶液調(diào)節(jié)pH到2.01，繼續(xù)攪拌30MIN,使其混合均勻， 停攪拌靜置48小時(shí)，過程溫度控制在24 25°C。混合物通過過濾分 離并先用用200mL90。/。乙醇頂洗，頂洗結(jié)束是頂洗液電導(dǎo)率為 396us/cm，然后用200mL無水乙醇頂洗，得到了鹽酸萬古霉素濕品 102.1g，濕品通過干燥去除殘留乙醇后得到中間體81.3g，再通過高 真空干燥后得到鹽酸萬古霉素成品64.1g，成品水分為3.5%，鹽酸萬 古霉素其松密度為0.63g/ml，緊密度為0.82 g/ml 。該無結(jié)晶型態(tài)鹽酸 萬古霉素，其具有與附圖l所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相
同的特征。請(qǐng)參見圖1。
實(shí)施例5:鹽酸萬古霉素的沉淀
取實(shí)施例1中的濃縮液500mL，通過0.45pm和0.2pm的濾膜過 濾后邊攪拌邊加入25gNaHC03，萬古霉素從中析出，形成了漿狀物， 加入HC1水溶液調(diào)節(jié)pH到3.00,繼續(xù)攪拌卯MIN，使其混合均勻， 停攪拌靜置24小時(shí)，過程溫度控制在15 16°C?；旌衔锿ㄟ^過濾分 離并先用用200mL90。/。乙醇頂洗，頂洗結(jié)束是頂洗液電導(dǎo)率為351us/cm，然后用200mL無水乙醇頂洗，得到了鹽酸萬古霉素濕品 98.1g，濕品通過干燥去除殘留乙醇后得到中間體72.2g，再通過高真 空干燥后得到鹽酸萬古霉素成品63.3g，成品水分為3.2%，鹽酸萬古 霉素其松密度為0.59g/ml，緊密度為0.79 g/ml 。該無結(jié)晶型態(tài)鹽酸萬 古霉素，其具有與附圖1所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相同 的特征。請(qǐng)參見圖1。
實(shí)施例6:鹽酸萬古霉素的沉淀
取實(shí)施例1中的濃縮液500mL，通過0.45nm和0.2pm的濾膜過 濾后邊攪拌邊加入25gNa2C03，萬古霉素從中析出，形成了漿狀物， 加入HC1水溶液調(diào)節(jié)pH到2.82,繼續(xù)攪拌60MIN，使其混合均勻， 停攪拌靜置36小時(shí)，過程溫度控制在14 15 °C?；旌衔锿ㄟ^過濾分 離并先用用200mL90。/。乙醇頂洗，頂洗結(jié)束是頂洗液電導(dǎo)率為 405us/cm，然后用200mL無水乙醇頂洗，得到了鹽酸萬古霉素濕品 101.5g，濕品通過干燥去除殘留乙醇后得到中間體73.0g，再通過高 真空干燥后得到鹽酸萬古霉素成品62.4g，成品水分為2.8%，鹽酸萬 古霉素其松密度為0.64g/ml，緊密度為0.85 g/ml 。該無結(jié)晶型態(tài)鹽酸 萬古霉素，其具有與附圖l所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相 同的特征。請(qǐng)參見圖1。
實(shí)施例7:鹽酸萬古霉素的沉淀
取實(shí)施例1中的濃縮液500mL，通過0.45pm和0.2pm的濾膜過 濾后邊攪拌邊加入15gNa2C03，萬古霉素從中析出，形成了漿狀物， 加入HC1水溶液調(diào)節(jié)pH到3.50,繼續(xù)攪拌60MIN，使其混合均勻， 停攪拌靜置48小時(shí)，過程溫度控制在5~6 °C ?；旌衔锿ㄟ^過濾分離并先用用200mL90%乙醇頂洗，頂洗結(jié)束是頂洗液電導(dǎo)率為 325us/cm，然后用200mL無水乙醇頂洗，得到了鹽酸萬古霉素濕品 91.3g，濕品通過干燥去除殘留乙醇后得到中間體62.5g，再通過高真 空干燥后得到鹽酸萬古霉素成品50.8g，成品水分為2.9%，鹽酸萬古 霉素其松密度為0.46g/ml，緊密度為0.65 g/ml 。該無結(jié)晶型態(tài)鹽酸萬 古霉素，其具有與附圖1所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相同 的特征。請(qǐng)參見圖1。
實(shí)施例8:鹽酸萬古霉素的沉淀
取實(shí)施例1中的濃縮液500mL，通過0.45pm和0.2pm的濾膜過 濾后邊攪拌邊加入35gNa2C03,萬古霉素從中析出，形成了漿狀物， 加入HC1水溶液調(diào)節(jié)pH到2.02，繼續(xù)攪拌30MIN,使其混合均勻， 停攪拌靜置48小時(shí)，過程溫度控制在24~25 °C ?；旌衔锿ㄟ^過濾分 離并先用用200mL90。/。乙醇頂洗，頂洗結(jié)束是頂洗液電導(dǎo)率為 413us/cm，然后用200mL無水乙醇頂洗，得到了鹽酸萬古霉素濕品 103.8g，濕品通過干燥去除殘留乙醇后得到中間體73.9g，再通過高 真空干燥后得到鹽酸萬古霉素成品63.6g，成品水分為3.0%，鹽酸萬 古霉素其松密度為0.63g/ml，緊密度為0.83 g/ml 。該無結(jié)晶型態(tài)鹽酸 萬古霉素，其具有與附圖1所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相 同的特征。請(qǐng)參見圖1。
實(shí)施例9:鹽酸萬古霉素的沉淀
取實(shí)施例1中的濃縮液500mL，通過0.45pm和0.2pm的濾膜過 濾后邊攪拌邊加入25gNa2C03，萬古霉素從中析出，形成了漿狀物， 加入HC1水溶液調(diào)節(jié)pH到3.10,繼續(xù)攪拌90MIN，使其混合均勻，停攪拌靜置24小時(shí)，過程溫度控制在14 15 °C?；旌衔锿ㄟ^過濾分 離并先用用200mL90。/。乙醇頂洗，頂洗結(jié)束是頂洗液電導(dǎo)率為 394us/cm，然后用200mL無水乙醇頂洗，得到了鹽酸萬古霉素濕品 99.7g，濕品通過干燥去除殘留乙醇后得到中間體72.8g，再通過高真 空干燥后得到鹽酸萬古霉素成品62.8g，成品水分為3.0%,鹽酸萬古 霉素其松密度為0.61g/ml，緊密度為0.84 g/ml 。該無結(jié)晶型態(tài)鹽酸萬 古霉素，其具有與附圖1所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相同 的特征。請(qǐng)參見圖1。
實(shí)施例10:鹽酸萬古霉素的沉淀
取實(shí)施例1中的濃縮液500mL，通過0.45pm和0.2pm的濾膜過 濾后邊攪拌邊加入25gNH4HC03，萬古霉素從中析出，形成了漿狀 物，加入HC1水溶液調(diào)節(jié)pH到2.78，繼續(xù)攪拌60MIN，使其混合均 勻，停攪拌靜置30小時(shí)，過程溫度控制在11 12 °C?；旌衔锿ㄟ^過 濾分離并先用用200mL90。/。乙醇頂洗，頂洗結(jié)束是頂洗液電導(dǎo)率為 524us/cm，然后用200mL無水乙醇頂洗，得到了鹽酸萬古霉素濕品 103.7g,濕品通過干燥去除殘留乙醇后得到中間體74.5g，再通過高 真空干燥后得到鹽酸萬古霉素成品64.5g，成品水分為3.2%，鹽酸萬 古霉素其松密度為0.64g/ml，緊密度為0.82 g/ml 。該無結(jié)晶型態(tài)鹽酸 萬古霉素，其具有與附圖l所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相 同的特征。請(qǐng)參見圖1。
實(shí)施例ll:鹽酸萬古霉素的沉淀
取實(shí)施例1中的濃縮液500mL,通過0.45pm和0.2pm的濾膜過 濾后邊攪拌邊加入35gNH4HC03，萬古霉素從中析出，形成了漿狀物，加入HC1水溶液調(diào)節(jié)pH到3.48,繼續(xù)攪拌60MIN，使其混合均 勻，停攪拌靜置48小時(shí)，過程溫度控制在5~6 °C?；旌衔锿ㄟ^過濾 分離并先用用200mL90。/。乙醇頂洗，頂洗結(jié)束是頂洗液電導(dǎo)率為 531us/cm，然后用200mL無水乙醇頂洗，得到了鹽酸萬古霉素濕品 104.3g，濕品通過干燥去除殘留乙醇后得到中間體75.8g，再通過高 真空干燥后得到鹽酸萬古霉素成品66.9g，成品水分為3.1%，鹽酸萬 古霉素其松密度為0.65g/ml，緊密度為0.85 g/ml 。該無結(jié)晶型態(tài)鹽酸 萬古霉素，其具有與附圖1所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相 同的特征。請(qǐng)參見圖1。
實(shí)施例12:鹽酸萬古霉素的沉淀
取實(shí)施例1中的濃縮液500mL，通過0.45pm和0.2fim的濾膜過 濾后邊攪拌邊加入15g NH4HC03，萬古霉素從中析出，形成了漿狀 物，加入HC1水溶液調(diào)節(jié)pH到2.04,繼續(xù)攪拌30MIN，使其混合均 勻，停攪拌靜置24小時(shí)，過程溫度控制在24~25 °C ?；旌衔锿ㄟ^過 濾分離并先用用200mL90M乙醇頂洗，頂洗結(jié)束是頂洗液電導(dǎo)率為 524us/cm，然后用200mL無水乙醇頂洗，得到了鹽酸萬古霉素濕品 88.2g，濕品通過干燥去除殘留乙醇后得到中間體61.7g，再通過高真 空干燥后得到鹽酸萬古霉素成品49.8g，成品水分為2.8%，鹽酸萬古 霉素其松密度為0.45g/ml，緊密度為0.66 g/ml 。該無結(jié)晶型態(tài)鹽酸萬 古霉素，其具有與附圖1所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相同 的特征。請(qǐng)參見圖1。
實(shí)施例13:鹽酸萬古霉素的沉淀
取實(shí)施例1中的濃縮液500mL，通過0.45|xm和0.2pm的濾膜過濾后邊攪拌邊加入25gNH4HC03，萬古霉素從中析出，形成了漿狀 物，加入HC1水溶液調(diào)節(jié)pH到3.02,繼續(xù)攪拌90MIN，使其混合均 勻，停攪拌靜置48小時(shí)，過程溫度控制在12 13 °C?；旌衔锿ㄟ^過 濾分離并先用用200mL90。/。乙醇頂洗，頂洗結(jié)束是頂洗液電導(dǎo)率為 385us/cm，然后用200mL無水乙醇頂洗，得到了鹽酸萬古霉素濕品 101.8g，濕品通過干燥去除殘留乙醇后得到中間體72.9g，再通過高 真空干燥后得到鹽酸萬古霉素成品62.8g，成品水分為2.9%，鹽酸萬 古霉素其松密度為0.59g/ml，緊密度為0.78 g/ml 。該無結(jié)晶型態(tài)鹽酸 萬古霉素，其具有與附圖i所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相 同的特征。請(qǐng)參見圖1。
實(shí)施例14:鹽酸萬古霉素的沉淀
取實(shí)施例1中的濃縮液500mL，通過0.45|xm和0.2pm的濾膜過 濾后邊攪拌邊加入25g (NH4)2C03，萬古霉素從中析出，形成了漿狀 物，加入HCl水溶液調(diào)節(jié)pH到2.82，繼續(xù)攪拌60MIN,使其混合均 勻，停攪拌靜置40小時(shí)，過程溫度控制在8~9 °C。混合物通過過濾 分離并先用用200mL90。/Q乙醇頂洗，頂洗結(jié)束是頂洗液電導(dǎo)率為 352us/cm，然后用200mL無水乙醇頂洗，得到了鹽酸萬古霉素濕品 104.2g，濕品通過干燥去除殘留乙醇后得到中間體75.1g，再通過高 真空干燥后得到鹽酸萬古霉素成品6S.3g，成品水分為3.3%，鹽酸萬 古霉素其松密度為0.65g/ml，緊密度為0.84 g/ml 。該無結(jié)晶型態(tài)鹽酸 萬古霉素，其具有與附圖1所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相 同的特征。請(qǐng)參見圖1。
實(shí)施例15:鹽酸萬古霉素的沉淀取實(shí)施例1中的濃縮液500mL，通過0.45nm和0.2pm的濾膜過 濾后邊攪拌邊加入15g (NH4)2C03，萬古霉素從中析出，形成了漿狀 物，加入HC1水溶液調(diào)節(jié)pH到3.47應(yīng)續(xù)攪拌30MIN,使其混合均 勻，停攪拌靜置48小時(shí)，過程溫度控制在5 6 °C ?；旌衔锿ㄟ^過濾 分離并先用用200mL90。/。乙醇頂洗，頂洗結(jié)束是頂洗液電導(dǎo)率為 318us/cm，然后用200mL無水乙醇頂洗，得到了鹽酸萬古霉素濕品 94.5g，濕品通過干燥去除殘留乙醇后得到中間體69.2g，再通過高真 空干燥后得到鹽酸萬古霉素成品5S.0g，成品水分為3.2%，鹽酸萬古 霉素其松密度為0.51g/ml，緊密度為0.69 g/ml 。該無結(jié)晶型態(tài)鹽酸萬 古霉素，其具有與附圖1所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相同 的特征。請(qǐng)參見圖l。
實(shí)施例16:鹽酸萬古霉素的沉淀
取實(shí)施例1中的濃縮液500mL，通過0.45pm和0.2pm的濾膜過 濾后邊攪拌邊加入35g (NH4)2C03，萬古霉素從中析出，形成了漿狀 物，加入HC1水溶液調(diào)節(jié)pH到2.00，繼續(xù)攪拌30MIN，使其混合均 勻，停攪拌靜置48小時(shí)，過程溫度控制在24 25 °C ?；旌衔锿ㄟ^過 濾分離并先用用200mL90Q/。乙醇頂洗，頂洗結(jié)束是頂洗液電導(dǎo)率為 502us/cm，然后用200mL無水乙醇頂洗，得到了鹽酸萬古霉素濕品 108.2g，濕品通過干燥去除殘留乙醇后得到中間體78.4g，再通過高 真空干燥后得到鹽酸萬古霉素成品69.0g，成品水分為2.9%，鹽酸萬 古霉素其松密度為0.62g/ml，緊密度為0.80 g/ml 。該無結(jié)晶型態(tài)鹽酸 萬古霉素，其具有與附圖1所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相 同的特征。請(qǐng)參見圖1。實(shí)施例17:鹽酸萬古霉素的沉淀
取實(shí)施例1中的濃縮液500mL，通過0.45jxm和0.2pm的濾膜過 濾后邊攪拌邊加入25g (NH4)2C03,萬古霉素從中析出，形成了漿狀 物，加入HC1水溶液調(diào)節(jié)pH到3.05,繼續(xù)攪拌90MIN,使其混合均 勻，停攪拌靜置24小時(shí)，過程溫度控制在20-21 °C?；旌衔锿ㄟ^過 濾分離并先用用200mL90。/。乙醇頂洗，頂洗結(jié)束是頂洗液電導(dǎo)率為 401us/cm，然后用200mL無水乙醇頂洗，得到了鹽酸萬古霉素濕品 101.9g，濕品通過干燥去除殘留乙醇后得到中間體73.2g，再通過高 真空干燥后得到鹽酸萬古霉素成品66.5g，成品水分為2.7%，鹽酸萬 古霉素其松密度為0.61g/ml，緊密度為0.79 g/ml 。該無結(jié)晶型態(tài)鹽酸 萬古霉素，其具有與附圖1所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相 同的特征。請(qǐng)參見圖1。
本發(fā)明通過上面的實(shí)施例進(jìn)行舉例說明，但是，應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā) 明并不限于這里所描述的特殊實(shí)例和實(shí)施方案。在這里包含這些特殊 實(shí)例和實(shí)施方案的目的在于幫助本領(lǐng)域中的技術(shù)人員實(shí)踐本發(fā)明。任 何本領(lǐng)域中的技術(shù)人員很容易在不脫離本發(fā)明精神和范圍的情況下 進(jìn)行進(jìn)一步的改進(jìn)和完善，因此本發(fā)明只受到本發(fā)明權(quán)利要求的內(nèi)容 和范圍的限制，其意圖涵蓋所有包括在由附錄權(quán)利要求所限定的本發(fā) 明精神和范圍內(nèi)的備選方案和等同方案。
權(quán)利要求
1、一種無結(jié)晶型態(tài)鹽酸萬古霉素，其特征在于，所述鹽酸萬古霉素為無結(jié)晶型態(tài)，其具有與附圖1所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相同的特征。
2、 如權(quán)利要求1所述的鹽酸萬古霉素，其特征在于，所述鹽酸 萬古霉素的X-射線衍射圖譜不含有任何峰形。
3、 如權(quán)利要求1或2所述的鹽酸萬古霉素，其特征在于，所述 鹽酸萬古霉素的松密度為0.45 0.65g/ml，緊密度為0.65~0.85 g/ml 。
4、 一種藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物包括權(quán)利要 求1~3中任一的權(quán)利要求所述的治療有效量的無結(jié)晶型態(tài)鹽酸萬古 霉素、以及藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑、稀釋劑或輔料。
5、 如權(quán)利要求4所述的藥物組合物，其特征在于，該鹽酸萬古 霉素的治療有效量為0.5 5g。
6、 一種如權(quán)利要求1~3所述的鹽酸萬古霉素的制備方法，其特 征在于，包括以下步驟(1) 具有萬古霉素色譜純度不低于80%的萬古霉素粗品在含有 NH4HCCb流動(dòng)相的層析柱中進(jìn)行柱層析，得到色譜純度不低于93%的有效層析液或有效層析液的濃縮液；(2) 向有效層析液或有效層析液的濃縮液加入碳酸鹽，產(chǎn)生沉淀；(3) 采用乙醇進(jìn)行頂洗，干燥得到鹽酸萬古霉素。
7、 如權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述有效層析 液經(jīng)過超濾、納濾后可得到有效層析液的濃縮液，以通過碳酸鹽產(chǎn)生 沉淀。
8、 如權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征在于，所述有效層析 液或有效層析液的濃縮液通過0.45pm和0.2pm的濾芯過濾后再進(jìn)行 沉淀。
9、 如權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述碳酸鹽包 括(NH4)2C03， NH4HCO;j， Na2C03和NaHC03。
10、 如權(quán)利要求9所述的制備方法，其特征在于，向有效層析液 或有效層析液的濃縮液中加入碳酸鹽所得到碳酸鹽的濃度為3%~7%(W/V)。
11、 如權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，加入碳酸鹽后， 調(diào)節(jié)pH=2.0 3.5，不斷攪拌30~90分鐘，混合液溫度控制在5 25°C ， 并靜置24~48小時(shí)。
12、 如權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，還包括采用 90%的乙醇水溶液進(jìn)行多次頂洗，頂洗至電導(dǎo)率2000ias/cm時(shí)停止加 入90%的乙醇水溶液。
13、 如權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，采用的柱層析 介質(zhì)為葡聚糖凝膠Sephadex CM-25、瓊脂糖SP Sepharose或瓊脂糖 CMSepharose，流動(dòng)相為4 6% (w/v) NH4HC03。
14、 如權(quán)利要求13所述的制備方法，其特征在于，流動(dòng)相以流 量為0.5-1.5柱體積/小時(shí)進(jìn)行洗脫。
15、 如權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征在于，所述超濾的回 流溫度控制在10~20°C，并用純化水洗滌濾渣，超濾膜選用 10000Da~50000 Da。
16、 如權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征在于，所述納濾溶液 的溫度控制在10 20°C，并分步加入純化水和0.04% 0.06°/。的乙二胺 四乙酸(W/bons)，納濾膜選用200Da 600Da。
17、 如權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，還包括在柱層析前，將萬古霉素粗品溶于純水中，攪拌，用2 6 mol/L NaOH溶液 調(diào)整至pH-9 10，待完全溶解后過濾，收集濾液，用2 6mol/LHCl 溶液調(diào)整濾液至pH=4.5 6.0。
18、 如權(quán)利要求6所述的制備方法，還包括在用含有NH4HC03 流動(dòng)相洗脫前，先用純水和低濃度的NH4HC03溶液進(jìn)行預(yù)洗。
19、 一種如權(quán)利要求1 3任一所述的鹽酸萬古霉素用于口服或注 射給藥的用途。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種高密度無結(jié)晶型態(tài)鹽酸萬古霉素及其制備方法、和該鹽酸萬古霉素用于口服或注射給藥的用途、以及含有該鹽酸萬古霉素的藥物組合物。所述鹽酸萬古霉素為無結(jié)晶型態(tài)，其具有與附圖1所示的X射線粉末晶體衍射圖譜基本相同的特征。通過本發(fā)明得到的鹽酸萬古霉素有效組份大大得到提高，其它雜質(zhì)大大降低，純度很高，色譜純度可達(dá)到95％以上，不但可以用于注射劑，還可用于膠囊等固體制劑，同時(shí)產(chǎn)品外觀顏色得到明顯改觀，適于口服或注射給藥。
文檔編號(hào)C07K9/00GK101613396SQ20081012643
公開日2009年12月30日 申請(qǐng)日期2008年6月26日 優(yōu)先權(quán)日2008年6月26日
發(fā)明者勞學(xué)軍, 孫新強(qiáng), 張國(guó)鈞, 王小勇 申請(qǐng)人:浙江醫(yī)藥股份有限公司新昌制藥廠