專利名稱：用于治療對抗血管生成療法有應(yīng)答的疾病的化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及某些化合物用于對抗血管生成療法有應(yīng)答的疾病治療、尤其是抗轉(zhuǎn)移治療或與年齡有關(guān)的黃斑變性治療的用途。
背景技術(shù)：
血管生成(或新血管生成)是從先前存在的血管中萌發(fā)的新血管的形成。健康成年人或成熟組織中通常不存在血管生成。然而，它在健康身體損傷或創(chuàng)傷后愈合傷口和恢復(fù)血流到組織中發(fā)生。血管生成也發(fā)生在婦女每月的生殖周期過程中和懷孕過程中。在這些過程中，新血管的形成是受嚴(yán)格調(diào)節(jié)的。
在很多嚴(yán)重的疾病狀態(tài)下，身體失去了對血管生成的調(diào)控。過度的血管生成發(fā)生在這些疾病例如癌癥、糖尿病失明、與年齡有關(guān)的黃斑變性、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和銀屑病中。在這些疾病中，新血管給患病組織提供營養(yǎng)，破壞正常組織，對于癌癥來說，新血管使得腫瘤細(xì)胞可以逃逸到循環(huán)中，并在其它器官中寄宿(腫瘤轉(zhuǎn)移)。
多年來已經(jīng)積累了實驗證據(jù)顯示限制血管生成的各種策略也減緩或抑制腫瘤生長，這提示了阻斷腫瘤誘導(dǎo)的血管生成對于腫瘤治療是有效的新方法。
與年齡有關(guān)的黃斑變性(AMD)是一種逐漸破壞中央視覺功能的普通眼疾。AMD階段性地發(fā)生，從早期的干型發(fā)展到晚期以及更嚴(yán)重的與眼底的異常新血管形成有關(guān)的濕型。
因此，對于以中斷新血管生長為目標(biāo)的抗血管生成療法有著持續(xù)的需求。
WO 98/47879和WO 00/24707(NeuroSearch A/S)公開了很多作為氯通道阻斷劑的取代的苯基衍生物。
WO 00/76495(Smithkline Beecham Corp.)描述了很多作為IL-8受體拮抗劑的取代的苯基衍生物。
發(fā)明概述本發(fā)明的目的是提供治療對抗血管生成療法有應(yīng)答的疾病的新療法。特別地，本發(fā)明的目的是提供阻止腫瘤生長、預(yù)防轉(zhuǎn)移形成的療法。本發(fā)明的另一個目的是提供治療年齡相關(guān)性黃斑變性的療法。
在其第一個方面，本發(fā)明提供了通式I化合物 或其藥學(xué)可接受的鹽用于制備治療、預(yù)防或減輕哺乳動物包括人類的疾病或失調(diào)或病癥的藥物組合物的用途，該疾病、失調(diào)或病癥對血管生成的抑制有應(yīng)答。
在其第二個方面，本發(fā)明提供了VRAC阻斷劑或其藥學(xué)可接受的鹽用于制備治療、預(yù)防或減輕與年齡有關(guān)的黃斑變性的藥物組合物的用途。
從下列詳細(xì)描述和實施例中，本發(fā)明的其它目的對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說將是顯而易見的。
發(fā)明的詳細(xì)公開按照本發(fā)明，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了某些化合物能用于治療對抗血管生成療法有應(yīng)答的疾病，尤其能用于抗轉(zhuǎn)移治療。
因此，在其第一個方面，本發(fā)明涉及通式I化合物 或其藥學(xué)可接受的鹽其中，R2代表四唑基；并且●R3、R4、R5、R6、R12、R13、R14、R15和R16各自獨(dú)立地代表氫、鹵素、三氟甲基、硝基、烷基、烷基羰基、-NRaRb、-NRa-CO-Rb、苯基或雜芳基；該苯基任選被鹵素、三氟甲基、硝基、-CO-NHRc、-CO-O-Rc或-CO-NR′R″取代；其中，Rc是氫、烷基或苯基；R′和R″各自獨(dú)立地為氫或烷基；或R′和R″與它們連接的氮一起形成5到7元雜環(huán)，該環(huán)可任選含有作為環(huán)成員的一個氧原子，和/或一個另外的氮原子，和/或一個碳-碳雙鍵，和/或一個碳-氮雙鍵；并且該雜環(huán)可任選被烷基取代；Ra和Rb各自獨(dú)立地為氫或烷基；或者●R15和R16，或R14和R15與它們連接的苯環(huán)一起形成萘環(huán)或茚滿環(huán)；并且R3、R4、R5、R6、R12和R13與R14、R15和R16中剩下的一個如上定義；用于制備治療、預(yù)防或減輕哺乳動物包括人類的疾病或失調(diào)或病癥的藥物組合物中的用途，該疾病、失調(diào)或病癥對血管生成的抑制有應(yīng)答。
在一個具體的實施方案中，本發(fā)明涉及通式I化合物 或其藥學(xué)可接受的鹽其中，R2代表四唑基；R3、R4、R5、R6、R12、R13、R14、R15和R16各自獨(dú)立地代表氫、鹵素、三氟甲基、硝基或苯基；該苯基任選被鹵素、三氟甲基、硝基或-CO-NHRc取代；其中，Rc是氫、烷基或苯基；用于制備治療、預(yù)防或減輕哺乳動物包括人類的疾病或失調(diào)或病癥的藥物組合物中的用途，該疾病、失調(diào)或病癥對血管生成的抑制有應(yīng)答。
在另一個方面，本發(fā)明涉及治療、預(yù)防或減輕活動物體包括人類的疾病或失調(diào)或病癥的方法，該疾病、失調(diào)或病癥對血管生成的抑制有應(yīng)答，包括給予有這種治療需求的活動物體包括人類治療有效量的通式I化合物 或其藥學(xué)可接受的鹽其中，R2代表四唑基；并且●R3、R4、R5、R6、R12、R13、R14、R15和R16各自獨(dú)立地代表氫、鹵素、三氟甲基、硝基、烷基、烷基羰基、-NRaRb、-NRa-CO-Rb、苯基或雜芳基；該苯基任選被鹵素、三氟甲基、硝基、-CO-NHRc、-CO-O-Rc或-CO-NR′R″取代；其中，Rc是氫、烷基或苯基；R′和R″各自獨(dú)立地為氫或烷基；或R′和R″與它們連接的氮一起形成5到7元雜環(huán)，該環(huán)可任選含有作為環(huán)成員的一個氧原子，和/或一個另外的氮原子，和/或一個碳-碳雙鍵，和/或一個碳-氮雙鍵；并且該雜環(huán)可任選被烷基取代；Ra和Rb各自獨(dú)立地為氫或烷基；或者●R15和R16，或R14和R15與它們連接的苯環(huán)一起形成萘環(huán)或茚滿環(huán)；并且R3、R4、R5、R6、R12和R13與R14、R15和R16中剩下的一個如上定義。
在一個具體的實施方案中，本發(fā)明涉及治療、預(yù)防或減輕活動物體包括人類的疾病或失調(diào)或病癥的方法，該疾病、失調(diào)或病癥對血管生成的抑制有應(yīng)答，包括給予有這種治療需求的活動物體包括人類治療有效量的通式I化合物 或其藥學(xué)可接受的鹽其中，R2代表四唑基；R3、R4、R5、R6、R12、R13、R14、R15和R16各自獨(dú)立地代表氫、鹵素、三氟甲基、硝基或苯基；該苯基任選被鹵素、三氟甲基、硝基或-CO-NHRc取代；其中，Rc是氫、烷基或苯基。
根據(jù)本發(fā)明，被治療的活動物體優(yōu)選是有這種治療需求的哺乳動物，更優(yōu)選是人類。
在通式I化合物的一個實施方式中，R2代表四唑基；R3、R4、R5、R6、R12、R13、R14、R15和R16各自獨(dú)立地代表氫、鹵素、三氟甲基或硝基。
在通式I化合物的第二個實施方式中，R3、R5和R6代表氫；并且R4代表鹵素，例如溴。
在通式I化合物的第三個實施方式中，R3、R4、R5和R6代表氫。
在通式I化合物的進(jìn)一步的實施方式中，R3、R5和R6代表氫；R4代表-NRaRb，例如氨基。
在通式I化合物的更進(jìn)一步的實施方式中，R3、R5和R6代表氫；R4代表-NRa-CO-Rb，例如乙酰氨基。
在通式I化合物的進(jìn)一步的實施方式中，R3、R5和R6代表氫；R4代表被三氟甲基、硝基或-CO-NHRc取代的苯基；其中，Rc是苯基。具體的實施方式是，R4代表被三氟甲基取代的苯基，例如4-三氟甲基苯基。在進(jìn)一步的具體實施方式
中，R4代表被硝基取代的苯基，例如3-硝基苯基。在進(jìn)一步的實施方式中，R4代表-CO-NHRc取代的苯基，例如苯胺基羰基苯基，尤其是4-苯胺基羰基苯基。
在通式I化合物的進(jìn)一步的實施方式中，R3、R5和R6代表氫；R4代表被-CO-O-Rc或-CO-NR′R″取代的苯基。具體的實施方式是，R4代表被-CO-O-Rc取代的苯基，其中，Rc是氫。具體的實施方式是，R4代表被-CO-NR′R″取代的苯基，例如4-二甲基氨甲?；交?-(4-甲基-1-哌嗪-羰基)-苯基。
在更進(jìn)一步的實施方式中，R15代表三氟甲基。具體的實施方式是，R15代表三氟甲基，并且R12、R13、R14和R16代表氫。在進(jìn)一步的實施方式中，R13代表三氟甲基。具體的實施方式是，R13和R15代表三氟甲基，并且R12、R14和R16代表氫。
在進(jìn)一步的實施方式中，R16代表三氟甲基。具體的實施方式是，R16代表三氟甲基，并且R12、R13、R14和R15代表氫。
在更進(jìn)一步的實施方式中，R15代表鹵素，例如氯或溴。具體的實施方式是，R15代表鹵素，例如氯或溴，并且R12、R13、R14和R16代表氫。
在進(jìn)一步的實施方式中，R13和R15代表鹵素，例如氯，并且R12、R14和R16代表氫。在更進(jìn)一步的實施方式中，R14和R15代表鹵素，例如氯，并且R12、R13和R16代表氫。
在進(jìn)一步的實施方式中，R16代表鹵素，例如氟。具體的實施方式是，R15代表鹵素，例如氟，并且R12、R13、R14和R15代表氫。
在更進(jìn)一步的實施方式中，R16代表烷基，例如甲基或乙基。具體的實施方式是，R16代表烷基，例如甲基或乙基，并且R12、R13、R14和R15代表氫。
在進(jìn)一步的實施方式中，R14代表硝基。具體的實施方式是，R14代表硝基，并且R12、R13、R15和R16代表氫。
在更進(jìn)一步的實施方式中，R14代表烷基羰基，例如乙?；＞唧w的實施方式是，R14代表烷基羰基，例如乙?；?，并且R12、R13、R15和R16代表氫。
在進(jìn)一步的實施方式中，R15代表苯基。在進(jìn)一步的實施方式中，R14代表苯基。具體的實施方式是，R14或R15中的一個代表苯基，R12、R13、R14、R15和R16中剩下的代表氫。
在更進(jìn)一步的實施方式中，R15代表吡啶基，例如吡啶-3-基。具體的實施方式是，R15代表吡啶基，例如吡啶-3-基，并且R12、R13、R14和R16代表氫。
在進(jìn)一步的實施方式中，R15和R16與它們連接的苯環(huán)一起形成萘環(huán)。
在更進(jìn)一步的實施方式中，R14和R15與它們連接的苯環(huán)一起形成茚滿環(huán)。
在進(jìn)一步的實施方式中，通式I化合物是N-4-硝基苯基-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)苯基]脲；N-3，5-二(三氟甲基)苯基-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)苯基]脲；N-3-三氟甲基苯基-N′-[4-(3-硝基苯基)-2-(1-H-四唑-5-基)苯基]脲；N-3-三氟甲基苯基-N′-[4-(4-苯胺基羰基苯基)-2-(1-H-四唑-5-基)苯基]脲；N-3-三氟甲基苯基-N′-[4-(4-三氟甲基苯基)-2-(1-H-四唑-5-基)苯基]脲；N-(3-三氟甲基-苯基)-N′-[2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-三氟甲基-苯基)-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-三氟甲基-苯基)-N′-[4-苯基-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-氯-苯基)-N′-[2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-三氟甲基-苯基)-N′-[4-氨基-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-三氟甲基-苯基)-N′-[4-乙酰氨基-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-三氟甲基-苯基)-N′-[4-氨甲?；?2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-三氟甲基-苯基)-N′-[4-(N″，N″-二甲基氨甲?；?-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；3′-(1-H-四唑-5-基)-4′-[3-(3-三氟甲基-苯基)-脲基]-聯(lián)苯基-4-甲酸；N-(茚滿-5-基)-N′-[2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(聯(lián)苯基-4-基)-N′-[2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(聯(lián)苯基-3-基)-N′-[2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-乙?；?苯基)-N′-[2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(聯(lián)苯基-3-基)-N′-[2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-[3-(吡啶-3-基)-苯基]-N′-[2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-溴-苯基)-N′-[4′-(4-甲基-哌嗪-1-羰基)-3-(1-H-四唑-5-基)-聯(lián)苯基-4-基]脲；N-(3，5-二氯-苯基)-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3，4-二氯-苯基)-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(萘-1-基)-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(2-三氟甲基-苯基)-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(2-氟-苯基)-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(2-乙基-苯基)-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；或其藥學(xué)可接受的鹽。
在更進(jìn)一步的實施方式中，對血管生成抑制有應(yīng)答的疾病、失調(diào)或病癥選自癌癥、前列腺癌、肺癌、乳腺癌、膀胱癌、腎臟癌、結(jié)腸癌、胃癌、胰腺癌、卵巢癌、黑素瘤、肝臟腫瘤、肉瘤、淋巴瘤、滲出性黃斑變性、與年齡有關(guān)的黃斑變性、視網(wǎng)膜病、糖尿病、增殖性糖尿病視網(wǎng)膜病、糖尿病性黃斑水腫(DME)、缺血性視網(wǎng)膜病、早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病、新生血管性青光眼、角膜新血管生成、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和銀屑病。
在本發(fā)明的具體實施方式
中，化合物是N-4-硝基苯基-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)苯基]脲；N-3，5-二(三氟甲基)苯基-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)苯基]脲；N-3-三氟甲基苯基-N′-[4-(3-硝基苯基)-2-(1-H-四唑-5-基)苯基]脲；N-3-三氟甲基苯基-N′-[4-(4-苯胺基羰基苯基)-2-(1-H-四唑-5-基)苯基]脲；N-3-三氟甲基苯基-N′-[4-(4-三氟甲基苯基)-2-(1-H-四唑-5-基)苯基]脲；或其藥學(xué)可接受的鹽，并且治療是抗轉(zhuǎn)移治療。
在另一個方面，本發(fā)明涉及VRAC阻斷劑或其藥學(xué)可接受的鹽用于制備治療、預(yù)防或減輕哺乳動物包括人類的與年齡有關(guān)的黃斑變性的藥物組合物的用途。
在又一個方面，本發(fā)明涉及治療、預(yù)防或減輕活動物體包括人類的與年齡有關(guān)的黃斑變性的方法，包括給予有這種治療需求的活動物體包括人類治療有效量的VRAC阻斷劑或其藥學(xué)可接受的鹽的步驟。
在一個實施方式中，VRAC阻斷劑是通式I化合物 或其藥學(xué)可接受的鹽其中，R2代表四唑基；并且
●R3、R4、R5、R6、R12、R13、R14、R15和R16各自獨(dú)立地代表氫、鹵素、三氟甲基、硝基、烷基、烷基羰基、-NRaRb、-NRa-CO-Rb、苯基或雜芳基；該苯基任選被鹵素、三氟甲基、硝基、-CO-NHRc、-CO-O-Rc或-CO-NR′R″取代；其中，Rc是氫、烷基或苯基；R′和R″各自獨(dú)立地為氫或烷基；或R′和R″與它們連接的氮一起形成5到7元雜環(huán)，該環(huán)可任選含有作為環(huán)成員的一個氧原子，和/或一個另外的氮原子，和/或一個碳-碳雙鍵，和/或一個碳-氮雙鍵；并且該雜環(huán)可任選被烷基取代；Ra和Rb各自獨(dú)立地為氫或烷基；或者●R15和R16，或R14和R15與它們連接的苯環(huán)一起形成萘環(huán)或茚滿環(huán)；并且R3、R4、R5、R6、R12和R13與R14、R15和R16中剩下的一個如上定義；用于制備治療、預(yù)防或減輕哺乳動物包括人類的疾病或失調(diào)或病癥的藥物組合物的用途，該疾病、失調(diào)或病癥對血管生成的抑制有應(yīng)答。
在另一個實施方式中，VRAC阻斷劑是通式I化合物 或其藥學(xué)可接受的鹽其中，R2代表四唑基；R3、R4、R5、R6、R12、R13、R14、R15和R16各自獨(dú)立地代表氫、鹵素、三氟甲基、硝基或苯基；該苯基任選被鹵素、三氟甲基、硝基或-CO-NHRa取代；其中，Ra是氫、烷基或苯基。
在具體的實施方式中，VRAC阻斷劑是N-4-硝基苯基-N′-[4-溴-2-(I-H-四唑-5-基)苯基]脲；N-3，5-二(三氟甲基)苯基-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)苯基]脲；N-3-三氟甲基苯基-N′-[4-(3-硝基苯基)-2-(1-H-四唑-5-基)苯基]脲；N-3-三氟甲基苯基-N′-[4-(4-苯胺基羰基苯基)-2-(1-H-四唑-5-基)苯基]脲；N-3-三氟甲基苯基-N′-[4-(4-三氟甲基苯基)-2-(1-H-四唑-5-基)苯基]脲；N-(3-三氟甲基-苯基)-N′-[2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-三氟甲基-苯基)-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-三氟甲基-苯基)-N′-[4-苯基-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-氯-苯基)-N′-[2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-三氟甲基-苯基)-N′-[4-氨基-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-三氟甲基-苯基)-N′-[4-乙酰氨基-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-三氟甲基-苯基)-N′-[4-氨甲?；?2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-三氟甲基-苯基)-N′-[4-(N″，N″-二甲基氨甲?；?-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；3′-(1-H-四唑-5-基)-4′-[3-(3-三氟甲基-苯基)-脲基]-聯(lián)苯基-4-甲酸；N-(茚滿-5-基)-N′-[2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(聯(lián)苯基-4-基)-N′-[2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(聯(lián)苯基-3-基)-N′-[2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-乙?；?苯基)-N′-[2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(聯(lián)苯基-3-基)-N′-[2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-[3-(吡啶-3-基)-苯基]-N′-[2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-溴-苯基)-N′-[4′-(4-甲基-哌嗪-1-羰基)-3-(1-H-四唑-5-基)-聯(lián)苯基-4-基]脲；N-(3，5-二氯-苯基)-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3，4-二氯-苯基)-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(萘-1-基)-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(2-三氟甲基-苯基)-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(2-氟-苯基)-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(2-乙基-苯基)-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；或其藥學(xué)可接受的鹽。
取代基的定義在本發(fā)明上下文中，鹵素代表氟、氯、溴或碘。
在本發(fā)明上下文中，烷基代表單價飽和的、直鏈或支鏈的烴鏈。烴鏈優(yōu)選含有一到六個碳原子(C1-6-烷基)，包括戊基、異戊基、新戊基、叔戊基、己基和異己基。在一個實施方式中，烷基代表C1-4-烷基，包括丁基、異丁基、仲丁基和叔丁基。在本發(fā)明的另一個具體實施方式
是，烷基代表C1-3-烷基，它尤其可為甲基、乙基、丙基或異丙基。
在本發(fā)明上下文中，雜芳基指的是芳香的單-、二-或多-雜環(huán)基，它在其環(huán)結(jié)構(gòu)中含有一個或多個雜原子。優(yōu)選的雜原子包括氮(N)、氧(O)和硫(S)。本發(fā)明優(yōu)選的單環(huán)雜芳基包括芳香的5和6元雜環(huán)的單環(huán)基團(tuán)，包括呋喃基，尤其是2-或3-呋喃基；噻吩基，尤其是2-或3-噻吩基；吡咯基(吡咯基)，尤其是1、2或3-吡咯基；噁唑基，尤其是噁唑-2，4或5-基；噻唑基，尤其是噻唑-2，4或5-基；咪唑基，尤其是1、2或4-咪唑基；吡唑基，尤其是1、3或4-吡唑基；異噁唑基，尤其是異噁唑-3、4或5-基；異噻唑基，尤其是異噻唑-3、4或5-基；噁二唑基，尤其是1，2，3-、1，2，4-、1，2，5-或1，3，4-噁二唑-3、4或5-基；三唑基，尤其是1，2，3-、1，2，4-、2，1，3-或4，1，2-三唑基；噻二唑基，尤其是噻二唑-3、4或5-基；吡啶基，尤其是2、3或4-吡啶基；噠嗪基，尤其是3或4-噠嗪；嘧啶基，尤其是2、4或5-嘧啶基；吡嗪基，尤其是2或3-吡嗪基；以及三嗪基，尤其是1，2，3-、1，2，4-或1，3，5-三嗪。
含一個氮原子的5到7元雜環(huán)包括例如但并不限于吡咯烷、哌啶、高哌啶、吡咯啉、四氫吡啶、吡唑烷、咪唑烷、哌嗪、高哌嗪和嗎啉。
VRAC體積調(diào)節(jié)的陰離子通道(VRAC)存在于大多數(shù)哺乳動物細(xì)胞中。VRAC的重要功能是細(xì)胞體積的調(diào)節(jié)一旦細(xì)胞在低滲液中膨脹，這些通道就被激活，氯離子流出細(xì)胞，同時鉀離子(通過鉀通道)和水也流出細(xì)胞，從而恢復(fù)原始細(xì)胞體積。
盡管VRAC還沒有被克隆，因此還不能用它們的基因序列來定義，但當(dāng)用完整細(xì)胞膜片鉗技術(shù)觀察時，這些通道有很多可以定義的特征VRAC被細(xì)胞膨脹(細(xì)胞外低滲或細(xì)胞內(nèi)基質(zhì)高滲)所激活，激活的重要觸發(fā)器是細(xì)胞內(nèi)較低的離子強(qiáng)度，而不是體積本身。VRAC的激活必須依賴于細(xì)胞內(nèi)ATP的存在，包括蛋白激酶在內(nèi)的復(fù)雜細(xì)胞內(nèi)信號級聯(lián)支持激活過程。VRAC是電壓依賴的、外向調(diào)節(jié)陰離子選擇通路顯示I型Eisenman鹵化物選擇次序(暗示了例如碘比氯更能通過)，具有允許大量陰離子或中性有機(jī)分子通過的寬孔。VRAC總是被DIDS電壓依賴性地阻斷，NPPB和他莫昔芬是該通道的電壓依賴性阻斷劑。
VRAC阻斷劑VRAC阻斷劑是抑制對細(xì)胞膨脹或細(xì)胞內(nèi)離子強(qiáng)度降低有應(yīng)答的氯或任何其它陰離子或中性分子的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)的化合物。
給定物質(zhì)作為VRAC阻斷劑的效力可用標(biāo)準(zhǔn)實驗室試驗方法測定，例如a)完整細(xì)胞或單一通道膜片鉗技術(shù)，b)微電極電生理學(xué)(滲透的、銳利的電極)，c)通量分析(例如放射性和非放射性同位素)，d)熒光染色(例如膜電位或氯化物濃度指示劑)，e)細(xì)胞體積測量(例如光散射、庫爾特反測量(Coulter countermeasurement)或光學(xué)方法例如圖象分析)。
VRAC阻斷劑尤其可以是二苯基脲衍生物例如公開在WO 98/47879或WO 00/24707(NeuroSearch A/S)中的那些。
在一個實施方式中，按照標(biāo)準(zhǔn)試驗方法，VRAC阻斷劑的體外抑制顯示IC50值小于10μM、優(yōu)選小于1000nM、更優(yōu)選小于100nM，還優(yōu)選小于50nM、最優(yōu)選小于10nM。
在第二個實施方式中，在標(biāo)準(zhǔn)體內(nèi)血管生成模型中，VRAC阻斷劑顯示ED50值小于50mg/kg、優(yōu)選小于10mg/kg、更優(yōu)選小于5mg/kg。
制備方法用于本發(fā)明的化合物可用常規(guī)的化學(xué)合成法制備，例如公開在WO98/47879或WO 00/24707(NeuroSearch A/S)中的那些。
藥學(xué)可接受的鹽用于本發(fā)明的活性化合物可以適合于預(yù)期給藥的任何形式提供。合適的形式包括藥學(xué)(也就是生理學(xué))可接受的鹽，以及本發(fā)明化合物的前藥形式。
藥學(xué)可接受的加成鹽的例子包括但并不限于無毒的無機(jī)和有機(jī)酸加成鹽，例如衍生自氫氯酸的鹽酸鹽、衍生自氫溴酸的氫溴酸鹽、衍生自硝酸的硝酸鹽、衍生自高氯酸的高氯酸鹽、衍生自磷酸的磷酸鹽、衍生自硫酸的硫酸鹽、衍生自甲酸的甲酸鹽、衍生自乙酸的乙酸鹽、衍生自烏頭酸的阿康酸鹽、衍生自抗壞血酸的抗壞血酸鹽、衍生自苯磺酸的苯磺酸鹽、衍生自苯甲酸的苯甲酸鹽、衍生自肉桂酸的肉桂酸鹽、衍生自檸檬酸的檸檬酸鹽、衍生自雙羥萘酸的雙羥萘酸鹽、衍生自庚酸的庚酸鹽、衍生自富馬酸的富馬酸鹽、衍生自谷氨酸的谷氨酸鹽、衍生自乙醇酸的乙醇酸鹽、衍生自乳酸的乳酸鹽、衍生自馬來酸的馬來酸鹽、衍生自丙二酸的丙二酸鹽、衍生自扁桃酸的扁桃酸鹽、衍生自甲磺酸的甲磺酸鹽、衍生自萘-2-磺酸的萘-2-磺酸鹽、衍生自酞酸的酞酸鹽、衍生自水楊酸的水楊酸鹽、衍生自山梨酸的山梨酸鹽、衍生自硬脂酸的硬脂酸鹽、衍生自琥珀酸的琥珀酸鹽、衍生自酒石酸的酒石酸鹽、衍生自對甲苯磺酸的對甲苯磺酸鹽等。這些鹽可用現(xiàn)有技術(shù)熟知或描述過的方法制備。
其它酸例如草酸，其可能不被認(rèn)為是藥學(xué)可接受的鹽，可在獲取用于本發(fā)明的化合物及其藥學(xué)可接受的加成鹽中用于制備用作中間體的鹽。
本發(fā)明化合物的藥學(xué)可接受的陽離子鹽的例子包括但并不限于含有陽離子基團(tuán)的本發(fā)明化合物的鈉、鉀、鈣、鎂、鋅、鋁、鋰、膽堿、賴氨酸和銨鹽等。這樣的陽離子鹽可用現(xiàn)有技術(shù)熟知或描述過的方法制備。
在本發(fā)明的上下文中，含N化合物的“鎓鹽”估計也是藥學(xué)可接受的鹽(氮雜鎓鹽)。優(yōu)選的氮雜鎓鹽包括烷基鎓鹽，尤其是甲基和乙基鎓鹽；環(huán)烷基鎓鹽，尤其是環(huán)丙基鎓鹽；以及環(huán)烷基烷基鎓鹽，尤其是環(huán)丙基甲基鎓鹽。
藥物組合物本發(fā)明用于治療的活性化合物可以是活性成分，任選以藥理學(xué)可接受的鹽形式，藥物組合物與一種或多種輔料、賦形劑、載體、緩沖液、稀釋劑和/或其它常用的藥學(xué)輔助劑。
在優(yōu)選的實施方式中，本發(fā)明提供了藥學(xué)組合物，其含有用于本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或衍生物，還有一種或多種藥學(xué)可接受的載體，和任選的本領(lǐng)域已知和使用的其它治療和/或預(yù)防成分。載體必須是“可接受的”，意思是與制劑的其它成分相容，對其受體無害。在進(jìn)一步的實施方式中，本發(fā)明提供了藥物組合物，其含有多于一種根據(jù)本發(fā)明的化合物或前藥，例如根據(jù)本發(fā)明的兩種不同化合物或前藥。
本發(fā)明的藥物組合物可為適于口服、直腸、支氣管、鼻、肺、局部(包括頰和舌下)、透皮、陰道或胃腸外(包括皮膚、皮下、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、靜脈內(nèi)、動脈內(nèi)、大腦內(nèi)、眼內(nèi)注射或輸注)給藥的那些，或以適于吸入或吹入給藥形式的那些，包括粉末和液體氣霧劑給藥，或通過緩釋系統(tǒng)給藥的那些。緩釋系統(tǒng)的合適例子包括含有本發(fā)明化合物的固體疏水聚合物的半透基質(zhì)，該基質(zhì)可以成型物的形式，例如膜或微膠囊。
本發(fā)明化合物與常用輔料、載體或稀釋劑一起可制成藥物組合物及其單位劑量的形式。這些形式包括固體，尤其是片劑、填充膠囊、粉末和小球形式，以及液體，尤其是水溶液或非水溶液、混懸液、乳液、酏劑和填充有相同的物質(zhì)的膠囊，都用于口服，直腸給藥的栓劑、胃腸外使用的無菌注射液。這些藥物組合物及其單位劑量形式可含有常規(guī)比例的常規(guī)成分，含或不含其它活性化合物或成分，這些單位劑量形式可含任何適合的、與所采用的日劑量范圍相當(dāng)?shù)挠行Я炕钚猿煞帧?br> 本發(fā)明化合物可以多種口服和胃腸外劑量形式給藥。下列劑量形式可包含作為活性成分的本發(fā)明化合物或本發(fā)明化合物的藥學(xué)可接受的鹽，這對本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的。
為了制備本發(fā)明化合物的藥物組合物，藥學(xué)可接受的載體可以是固體或液體。固體形式制劑包括粉末、片劑、藥丸、膠囊、扁膠囊、栓劑和分散顆粒。固體載體可以是一種或多種也可作為稀釋劑、調(diào)味劑、增溶劑、潤滑劑、懸浮劑、粘合劑、防腐劑、片劑崩解劑或包囊材料的物質(zhì)。
對粉末來說，載體是細(xì)微分散的固體，它與細(xì)微分散的活性成分混合。
對片劑來說，活性成分與適當(dāng)比例的具有必要粘合能力的載體混合，并被壓成需要的性狀和大小。
粉末和片劑優(yōu)選含有5或10到大約70％的活性化合物。適合的載體是碳酸鎂、硬脂酸鎂、滑石粉、糖粉、乳糖、膠質(zhì)、糊精、淀粉、明膠、黃蓍膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、低熔點(diǎn)蠟和可可脂等。術(shù)語“制劑”包括活性化合物與作為載體的裝入膠囊的物質(zhì)形成的制劑，它提供了膠囊，其中，活性成分含或不含載體，被載體所包圍，其從而與之關(guān)聯(lián)。類似地，包括扁膠囊和錠劑。片劑、粉末、膠囊、藥丸、扁膠囊和錠劑可以用作適于口服給藥的固體形式。
為了制備栓劑，低熔點(diǎn)蠟例如脂肪酸甘油酯或可可脂的混合物，先被熔化，然后通過攪拌將活性成分均一地分散于其中。然后熔化的均一混合物被傾入方便大小的模具，冷卻，從而固化。
適合于陰道給藥的組合物可為含有除活性成分以外的、現(xiàn)有技術(shù)已知是適當(dāng)載體的子宮托、止血棉塞、霜膏、凝膠、糊劑、泡沫或噴霧劑。
液體制劑包括溶液、混懸液和乳液，例如水或水-丙二醇溶液。例如，胃腸外注射液制劑可制成水性的聚乙二醇溶液。
本發(fā)明化合物可制成胃腸外給藥的(例如注射，如一次性快速靜脈注射或持續(xù)輸注)，可以是含另外的防腐劑的安瓿、預(yù)灌裝的注射器、小容量輸注或多劑量容器的單位劑量形式。組合物可采取如下形式，例如油性或水性賦形劑中的混懸液、溶液或乳液，可含制劑添加劑例如助懸劑、增溶劑和/或分散劑。擇一地，活性成分可以是過無菌固體的無菌分離或通過凍干溶液獲得的粉末形式，以在使用前用適當(dāng)?shù)馁x形劑例如無菌、無熱源的水來配制。
適合于口服使用的水溶液可通過將活性成分溶解在水中并添加所需要的適當(dāng)著色劑、香料、穩(wěn)定劑和增稠劑來獲得。
適合于口服使用的水混懸液可以通過將細(xì)微分散的活性成分分散在含粘性物質(zhì)例如天然或合成膠、樹脂、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉或其它眾所周知的懸浮劑的水中而制備。
還包括在內(nèi)的是固體形式的制劑，打算在它使用之前立即轉(zhuǎn)變成口服給藥的液體形式的制劑。這樣的液體形式包括溶液、混懸液和乳液。除了活性成分以外，這些制劑還可含有著色劑、香料、穩(wěn)定劑、緩沖液、人造和天然甜味劑、分散劑、增稠劑和增溶劑等。
對于對表皮的局部給藥來說，本發(fā)明化合物可制成軟膏、膏霜或乳液，或制成透皮貼劑。軟膏和膏霜可用例如水性或油性基質(zhì)以及另外的合適增稠劑和/或膠凝劑一起制備。乳液可用水性或油性基質(zhì)一起制備，通常還含有一種或多種乳化劑、穩(wěn)定劑、分散劑、懸浮劑、增稠劑或著色劑。
適于口腔局部給藥的組合物包括錠劑，其含有添加了香料的基質(zhì)中的活性成分，通常是蔗糖和阿拉伯樹膠或黃蓍膠；軟錠劑(pastille)，其含有惰性基質(zhì)例如明膠和甘油或蔗糖和阿拉伯樹膠中的活性成分；以及漱口水，其含有適當(dāng)液體載體中的活性成分。
溶液或混懸液通過常規(guī)方法直接應(yīng)用于鼻腔，例如用點(diǎn)滴器、吸液管或噴霧器。組合物可以單劑量或多劑量形式提供。
對呼吸道給藥也可通過氣溶膠來實現(xiàn)，其中，活性成分以加壓包裝的形式提供，其中含有適當(dāng)?shù)膾伾鋭├缏确鸁N(CFC)如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷或二氯四氟乙烷、二氧化碳或其它合適的氣體。氣溶膠也可常規(guī)地含有表面活性劑例如卵磷脂。藥物劑量可通過計量閥的規(guī)定來控制。
可選擇地，活性成分可以干粉形式提供，例如適當(dāng)?shù)姆勰┗|(zhì)例如乳糖、淀粉、淀粉衍生物如羥丙甲基纖維素和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)中的化合物粉末混合物。便利地，粉末載體將在鼻腔中形成凝膠。粉末組合物可呈單位劑量形式，例如明膠膠囊或藥液筒或水泡罩片劑，通過這些劑量形式，粉末可通過吸入器給藥。
在打算對呼吸道給藥的組合物包括鼻內(nèi)組合物中，化合物通常具有較小的粒徑，例如5微米數(shù)量級或更小。這樣的粒徑可通過現(xiàn)有技術(shù)已知的方法例如微粉化而獲得。
如果需要，可采用適于活性成分緩釋的組合物。
藥物制劑優(yōu)選是單位劑量形式。在這種形式中，制劑被再分成含適當(dāng)量活性組分的單位劑量。單位劑量形式可以是經(jīng)包裝的制劑，含有離散量制劑的包裝，例如經(jīng)包裝的片劑、膠囊和小瓶或安瓿中的粉末。單位劑量形式也可以是膠囊、片劑、扁膠囊或錠劑本身，或者它可以是適當(dāng)數(shù)量的經(jīng)包裝形式的任何制劑。
口服片劑或膠囊以及靜脈內(nèi)給藥和持續(xù)輸注的液體是優(yōu)選的組合物。
制劑和給藥的其它技術(shù)細(xì)節(jié)可在最新一版的Remington′sPharmaceutical Sciences(Maack Publishing Co，Easton，PA)中找到。
治療有效量指的是改善癥狀或失調(diào)的活性成分的量。治療效力和毒性例如ED50和LD50，可通過細(xì)胞培養(yǎng)或?qū)嶒瀯游锏臉?biāo)準(zhǔn)藥理學(xué)方法來測定。治療效果和毒性效果之間的劑量比例是治療指數(shù)，它可用LD50/ED50的比率表示。具有較大治療指數(shù)的藥物組合物是優(yōu)選的。
給藥劑量當(dāng)然必須根據(jù)年齡、體重和待治療個體的身體狀況以及給藥途徑、劑形和療法、以及期望的結(jié)果來仔細(xì)調(diào)整，確切劑量當(dāng)然應(yīng)由醫(yī)師決定。
實際劑量取決于待治療的疾病的性質(zhì)和嚴(yán)重程度，它在醫(yī)師的判斷力范圍之內(nèi)，可根據(jù)本發(fā)明產(chǎn)生需要治療效果的特殊情況的劑量滴定而變化。然而，目前可以預(yù)期的是，每單獨(dú)劑量含有大約0.1到大約1000mg、優(yōu)選大約1到大約100mg活性成分的組合物適合于治療。
活性成分可每日一個或多個劑量地給藥。優(yōu)選范圍是10-200mg/天p.o.，給藥一個或兩個劑量，例如25-50mg p.o.每天兩次。
眼科制劑藥物組合物可制成適于局部眼睛使用的單位劑量形式。治療有效量通常是液體制劑中0.0001到5％(w/v)，優(yōu)選0.001到1.0％(w/v)。
對于眼科施用來說，溶液優(yōu)選用生理鹽水溶液作為主要賦形劑來制備。該眼科溶液的pH應(yīng)當(dāng)用適當(dāng)?shù)木彌_系統(tǒng)優(yōu)選維持在4.5到8.0，更優(yōu)選6.5到7.2。制劑也可含有常規(guī)的、藥學(xué)可接受的防腐劑、穩(wěn)定劑和表面活性劑。
防腐劑可選自疏水的或非離子的防腐劑、陰離子防腐劑和陽離子防腐劑?？捎糜诒景l(fā)明藥物組合物的優(yōu)選的防腐劑包括但并不限于苯扎氯銨、氯丁醇、硫柳汞、醋酸苯汞和硝酸苯汞。
優(yōu)選的表面活性劑是例如聚山梨醇酯80。同樣地，各種優(yōu)選的賦形劑可用于本發(fā)明的眼科制劑中。這些賦形劑包括但并不限于聚乙烯醇、聚維酮、羥丙甲基纖維素、泊洛沙姆、羧甲基纖維素、羥乙基纖維素和純凈水。
根據(jù)需要或方便，可加入張力調(diào)節(jié)劑例如非離子張力調(diào)節(jié)劑。它們包括但并不限于鹽、尤其是氯化鈉、氯化鉀、甘露醇和甘油、聚乙二醇(PEG)、聚丙二醇(PPG)或任何其它合適的眼科可接受的張力調(diào)節(jié)劑。
用于調(diào)節(jié)pH的各種緩沖液和方法都可使用，只要得到的制劑是眼科可接受的。因此，緩沖液包括乙酸鹽緩沖液、檸檬酸鹽緩沖液、磷酸鹽緩沖液和硼酸鹽緩沖液。根據(jù)需要，酸或堿可用于調(diào)節(jié)這些制劑的pH。
用于本發(fā)明的眼科可接受的抗氧化劑包括但并不限于偏亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、乙酰半胱氨酸、丁基化的羥基茴香醚和丁基化的羥基甲苯。
其它可包括在眼科制劑中的賦形劑組分是螯合劑。優(yōu)選的螯合劑是依地酸二鈉(edentate disodium)，盡管其它螯合劑也可代替它或與其聯(lián)合使用。
各成分通常按下列量使用

本發(fā)明活性化合物的實際劑量取決于特定化合物和待治療的失調(diào)；適當(dāng)劑量的選擇在熟練技術(shù)人員的知識范圍內(nèi)是容易的。
本發(fā)明眼科制劑可方便地包裝成適于定量施用的形式，例如裝配有點(diǎn)滴器的容器以方便對眼施用。適于逐滴施用的容器通常由合適的惰性、無毒的塑料材料制成，通常含有大約0.5到大約15ml溶液。
對于治療眼科與血管生成相關(guān)的疾病、失調(diào)或病癥例如AMD的情況，本發(fā)明藥物組合物也可以全身給藥(例如口服)的形式給藥，作為眼用軟膏或眼內(nèi)注射劑(眼周或眼內(nèi)注射)。
治療方法本發(fā)明也提供了治療、預(yù)防或減輕活動物體包括人類的疾病或失調(diào)或病癥的方法，該疾病、失調(diào)或病癥對血管生成的抑制有應(yīng)答，該方法包括給予有這種治療需求的活動物體包括人類治療有效量的上述通式I化合物。
對血管生成的抑制有應(yīng)答的疾病、失調(diào)或病癥包括但并不限于-涉及腫瘤細(xì)胞增殖的疾病、失調(diào)或病癥，例如癌癥、前列腺癌、肺癌、乳腺癌、膀胱癌、腎臟癌、結(jié)腸癌、胃癌、胰腺癌、卵巢癌、黑素瘤、肝臟腫瘤、肉瘤和淋巴瘤；-眼科與血管生成有關(guān)的疾病、失調(diào)或病癥，例如滲出性黃斑變性、與年齡有關(guān)的黃斑變性(AMD)、視網(wǎng)膜病、糖尿病性視網(wǎng)膜病、增殖性糖尿病視網(wǎng)膜病、糖尿病性黃斑水腫(DME)、缺血性視網(wǎng)膜病(例如視網(wǎng)膜靜脈或動脈閉塞)、早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病、新生血管性青光眼和角膜新血管生成；以及-類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和銀屑病。
在一個具體的實施方式中，待治療的疾病、失調(diào)或病癥是腫瘤發(fā)生前的疾病狀態(tài)。在進(jìn)一步的的實施方式中，治療是抗轉(zhuǎn)移治療。在更進(jìn)一步的實施方式中，要預(yù)防的疾病、失調(diào)或病癥是轉(zhuǎn)移癌。在進(jìn)一步的實施方式中，要預(yù)防或減輕的疾病、失調(diào)或病癥是DME。
本發(fā)明也提供了治療、預(yù)防或減輕活動物體包括人類的與年齡有關(guān)的黃斑變性的方法，該方法包括給予有治療需求的這樣的活動物體包括人類治療有效量的VRAC阻斷劑或其藥學(xué)可接受的鹽。
在本發(fā)明上下文中，″與年齡有關(guān)的黃斑變性″(AMD)包括干型AMD(非滲出型AMD)和濕型AMD(滲出型AMD)。
在一個具體的實施方式中，本發(fā)明涉及治療、預(yù)防或減輕濕型AMD。
聯(lián)合療法用于本發(fā)明的藥物組合物可包括或可與一種或多種用于治療、預(yù)防或減輕對血管生成抑制有應(yīng)答的疾病的其它藥物聯(lián)合使用或給藥，例如用于抗轉(zhuǎn)移治療的化合物。這樣的其它藥物包括細(xì)胞毒性化合物、抗有絲分裂化合物和抗代謝物。
細(xì)胞毒性化合物(包括細(xì)胞毒性烷化劑)的例子包括卡莫司汀(BCNU)、福莫司汀、替莫唑胺(temodal)、異環(huán)磷酰胺和環(huán)磷酰胺(cyclofosfamide)。
抗有絲分裂化合物的例子包括紫杉醇(紫杉酚)和多西紫杉醇。
抗代謝物的例子包括甲氨蝶呤。
此外，用于本發(fā)明的藥物組合物可與其它治療或療法聯(lián)合使用或給藥。其它治療或療法的例子包括放射線療法和外科手術(shù)。
試驗方法使用本發(fā)明化合物的效力可用例如下面描述的標(biāo)準(zhǔn)體外和體內(nèi)研究來評價。
體外方法細(xì)胞特異性試驗[3H]胸苷的摻入用胰蛋白酶/EDTA溶液分離融合培養(yǎng)的HUVEC、成纖維細(xì)胞、Mel 57和T47D細(xì)胞，允許它們在均添加了10％熱滅活的新出生的小牛血清(NBCS)和青霉素/鏈霉素的M199-HEPES培養(yǎng)基或DMEM-HEPES培養(yǎng)基中以適當(dāng)?shù)募?xì)胞密度在明膠覆蓋的器皿上粘附和分布。18h以后，用含有或不含試驗化合物的兩個平行孔中溶于M199-HEPES中的2.5ng/ml FGF-2、青霉素/鏈霉素、10％NBCS和0.1％DMSO刺激HUVEC和成纖維細(xì)胞。在添加了10％NBCS、青霉素/鏈霉素和0.1％DMSO的DMEM-HEPES中的含或不含試驗化合物的兩個平行孔中培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞。48h的培養(yǎng)周期過后，加入示蹤量(0.5μCi/孔)的[3H]胸苷，再培養(yǎng)細(xì)胞6小時。接下來，用PBS洗滌細(xì)胞，用甲醇固定[3H]-標(biāo)記的DNA，并用5％三氯乙酸沉淀，最后溶于0.5ml 0.3M NaOH中，并用液體閃爍計數(shù)器計數(shù)。
細(xì)胞形態(tài)學(xué)和增殖試驗試驗前一個星期，將含HUVEC(第1節(jié))的小瓶解凍，并培養(yǎng)(分流比1∶3)至融合(第2節(jié))。用胰蛋白酶/EDTA溶液分離融合培養(yǎng)的HUVEC，允許它們在添加了10％熱滅活的NBCS、10％人血清和青霉素/鏈霉素的M199-HEPES培養(yǎng)基中以10、50和100％融合的細(xì)胞密度在明膠覆蓋的器皿上粘附和分布。18h以后，用試驗化合物預(yù)培養(yǎng)HUVEC 4小時。然后洗滌HUVEC，在存在或不存在試驗化合物和參比化合物的情況下，用含或不含試驗化合物的三個平行孔中溶于M199-HEPES的2.5ng/ml FGF-2、青霉素/鏈霉素、10％NBCS、10％人血清和0.1％DMSO中的再次刺激HUVEC 5天(10％融合)或3天(50和100％融合)。用圖象分析(P.Koolwijk，2001)測定細(xì)胞數(shù)目。
觀察、分析和測量所有的結(jié)果測量均單一進(jìn)行，也就是每個培養(yǎng)孔測量一次。HUVEC、成纖維細(xì)胞、Mel 57和T47D腫瘤細(xì)胞的增殖用兩個平行孔的[3H]胸苷摻入(dpm)的平均值±范圍表示。
化合物對FGF-2-誘導(dǎo)的HUVEC和成纖維細(xì)胞增殖的抑制百分?jǐn)?shù)如下計算
HUVEC對照＝未受刺激的HUVECHUVECFGF-2＝FGF-2刺激的HUVECHUVECFGF-2+化合物＝FGF-2刺激的HUVEC+試驗化合物化合物對Mel 57和T47D腫瘤細(xì)胞增殖的抑制百分?jǐn)?shù)如下計算 腫瘤細(xì)胞＝NBCS刺激的腫瘤細(xì)胞腫瘤細(xì)胞+化合物＝NBCS刺激的腫瘤細(xì)胞+試驗化合物體內(nèi)方法小鼠抗血管生成試驗從M&B，Ejby，Lille Skensved，Denmark獲得體重25-27g的NMRI雌性小鼠(SPF BomNMRI)。將它們飼養(yǎng)在實驗室中，那里的光照被控制成12小時明亮-黑暗循環(huán)。熱度-濕度計記錄的室溫和相對濕度分別顯示20.5-24.1℃和40-67％。用丸狀嚙齒動物飲食(Altromin1324， Denmark)隨意喂養(yǎng)動物，可自由攝取自來水。每天觀察所有的動物，進(jìn)行臨床標(biāo)記。
含有400ng人基本成纖維細(xì)胞生長因子(Inno-vative Researchof America，F(xiàn)lorida，USA)的緩釋小丸是圓形的，直徑1.5mm。供應(yīng)商保證血管生成肽持續(xù)10天釋放。
用吸入麻醉法(氟烷/N2O和氧氣)麻醉小鼠。用電動剃須刀刮凈背部皮膚并用70％乙醇消毒。在接近肩胛骨的地方橫著作一個5mm的切口，通過鈍性分離沿著尾部到骨盆區(qū)域作一個2cm的袋，仔細(xì)地將皮膚與筋膜分離。將含有400ng bFGF緩釋小球的直徑8×5×3的聚氨基甲酸酯海綿放在袋的尾部，用Perma-Hand Seide 4/0(Johnson &Johnson，Brussels，Belgium)將切口進(jìn)行單向或雙向顛倒縫合密封。給動物皮下鎮(zhèn)痛注射卡洛芬2mg/kg。
按照前面的描述計量血管生成響應(yīng)(Lichtenberg等人，1997，1999 & 2002)。簡要地說，在安樂死前20分鐘，向尾靜脈內(nèi)靜脈內(nèi)注射1μCi125I標(biāo)記的免疫球蛋白(Amersham，UK)的50μl 0.9％NaCl溶液。通過O2/CO2窒息對動物實施安樂死，取出皮膚覆蓋的海綿植入物。將含小球的海綿植入物放在含4％福爾馬林的塑料小瓶中，在γ計數(shù)器中測量125I活性。用Student氏t-檢驗評價用125I活性(cpm)測量的血管生成響應(yīng)的差異，分組資料，P＜0.05被視為是統(tǒng)計學(xué)顯著的。用平均值±SEM表示數(shù)據(jù)。
小鼠轉(zhuǎn)移試驗由Charles River UK Ltd供應(yīng)并運(yùn)送雌性C57BL/6小鼠。研究開始時，動物大約是6周齡。給藥開始時的體重范圍為10-21g。將小鼠飼養(yǎng)在底部封閉的塑料籠中，其中含木頭刨花，每組至多10只。在環(huán)境適應(yīng)性期間，按有規(guī)律的間隔清潔實驗室和籠子，以保持清潔。隨意喂養(yǎng)小鼠過量的嚙齒動物食物，允許它們自由攝取自來水。飼養(yǎng)室具有12h的明亮-黑暗周期，用設(shè)計成保持氣溫在20±3℃的系統(tǒng)(McKay，2002)進(jìn)行空氣調(diào)節(jié)。
用平均值±SEM表示數(shù)據(jù)，用適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計學(xué)方法分析數(shù)據(jù)。當(dāng)P＜0.05時，假定統(tǒng)計學(xué)顯著。
附圖的簡要說明參考附圖進(jìn)一步闡述本發(fā)明，其中

圖1顯示了化合物a對HUVEC(○)、成纖維細(xì)胞(▲)和腫瘤細(xì)胞(Mel 57(●)以及T47D( ))增殖的影響；圖2顯示了化合物a對10％、50％和100％融合的單層HUVEC的影響。實心符號和柱體持續(xù)的情況；空心符號和柱體預(yù)孵育情況。
實施例參考下列實施例進(jìn)一步闡述本發(fā)明，這并不是想以任何方式限制本發(fā)明的范圍。實施例描述了化合物N-4-硝基苯基-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)苯基]脲(化合物a)和N-3，5-二(三氟甲基)苯基-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)苯基]脲(化合物b)的試驗結(jié)果。
實施例1化合物a在體外細(xì)胞特異性試驗中進(jìn)行的試驗觀察化合物a的細(xì)胞特異性的區(qū)別(參見圖1)。該化合物相對于NBCS-誘導(dǎo)的Mel 57和T47D增殖是更有效的bFGF-誘導(dǎo)的HUVEC和成纖維細(xì)胞增殖的抑制劑。
實施例2在體外細(xì)胞形態(tài)學(xué)和增殖試驗中進(jìn)行的化合物a的試驗為了研究化合物對增殖和非增殖的HUVEC的作用模式，對10％、50％和100％融合的單層HUVEC進(jìn)行實驗。10％和50％融合的HUVEC單層表示受刺激時能增殖和轉(zhuǎn)移的血管生成內(nèi)皮細(xì)胞的狀態(tài)。100％融合的HUVEC單層表示現(xiàn)有血管中內(nèi)皮細(xì)胞的靜止特性。進(jìn)行4小時的預(yù)孵育實驗以區(qū)別一般毒性和誘導(dǎo)凋亡。
當(dāng)加入用于4小時的預(yù)孵育期間然后移走以進(jìn)行剩下的刺激階段時，化合物a不能顯著地抑制HUVEC增殖(參見圖2)。在這個期間沒有觀察到任何細(xì)胞毒性跡象(觀察培養(yǎng)基中漂浮細(xì)胞指示的細(xì)胞死亡)。另外，在剩下的3天或5天孵育期間，預(yù)孵育期間的細(xì)胞死亡或細(xì)胞生長的任何延遲之間沒有區(qū)別。
然而，當(dāng)孵育在持續(xù)存在化合物的情況下進(jìn)行時，在10％融合的HUVEC單層上有顯著的抑制效果。在化合物的兩個最高濃度時觀察到了這一效果，但在較低濃度下卻沒有。在50％融合的單層上也稍微觀察到了化合物誘導(dǎo)的HUVEC增殖的抑制(參見圖2)?；衔飳?00％融合的HUVEC單層沒有效果。
化合物對100％融合的單層沒有細(xì)胞毒性由以下事實證明，即在與化合物培養(yǎng)期間觀察到的培養(yǎng)基中的HUVEC形態(tài)學(xué)和漂浮的死亡細(xì)胞的數(shù)量沒有改變。
實施例3在小鼠體內(nèi)抗血管生成試驗中進(jìn)行的化合物a和b的試驗進(jìn)行三個獨(dú)立的實驗用化合物a進(jìn)行兩個實驗，用化合物b進(jìn)行一個實驗。在用化合物a進(jìn)行的頭兩個實驗中，用0(鹽水)、5和10mg/kg/天劑量水平的化合物a(實驗1)和用20和40mg/kg/天(實驗2)口服處理各含5只動物的3個組。在第三個實驗中，用賦形劑(鹽水)和80mg/kg/天化合物a口服處理各含6只動物的3個組。在所有的實驗中，在第3-9天處理動物，并在第10天處死動物。
所有劑量的化合物a都顯示出劑量反應(yīng)關(guān)系。在10和40mg/kg/天時，獲得了37％和48％新生血管形成的顯著抑制(參見表1)。5mg/kg/天的劑量似乎是沒有效果的水平(NOEL)。
80mg/kg/天劑量的化合物b相對于載體處理的動物抑制大約60％的血管生成響應(yīng)。小鼠很好地耐受了所選擇的劑量水平；沒有觀察到毒性跡象或體重增加的改變(沒有給出數(shù)據(jù))。
表1化合物a和b對小鼠新血管形成的作用(用抑制百分?jǐn)?shù)表示)

*P＜0.05，相對于載體(t-檢驗)實施例4在小鼠體內(nèi)轉(zhuǎn)移試驗中進(jìn)行的化合物a和b的試驗進(jìn)行兩項獨(dú)立的研究用化合物a進(jìn)行一個實驗(實驗1)，用化合物b進(jìn)行一個實驗(實驗2)。每項研究中有4個處理組。處理組如下

通過管飼法口服給藥處理第2-4組。所用的劑量體積為第2和第4組為20ml/kg，第3組為15ml/kg。
在第0天，將0.1ml B16/F10黑素瘤細(xì)胞混懸液(大約3×105細(xì)胞/小鼠)通過尾靜脈對C57BL/6小鼠進(jìn)行靜脈內(nèi)注射。從第-2天至第10天(13次給藥)，除了未處理組以外，根據(jù)它們的分派處理組，每日一次通過管飼法對動物進(jìn)行口服給藥或靜脈內(nèi)給藥在第14天(注射腫瘤細(xì)胞后14天)處死動物。取出每只動物的肺，在用Bouin′s溶液固定前稱重。固定后，肉眼計算每套肺表面的菌落數(shù)量，這些數(shù)據(jù)用于統(tǒng)計分析。
相對于載體處理的小鼠，60和80mg/kg劑量的化合物a的口服給藥導(dǎo)致了黑素瘤肺菌落數(shù)量分別顯著減少了17％和21％(見表2)。
相對于賦形劑處理的小鼠，相似劑量(60和80mg/kg)化合物b的口服給藥導(dǎo)致了黑素瘤肺菌落數(shù)量分別顯著減少了36％和44％(參見表3)。
表2化合物a對C57BL/6小鼠的B16黑素瘤肺菌落發(fā)展的影響。

*P＜0.01，相對于載體(Kruskal-Wallis和Dunnett′s檢驗)
表3化合物b對C57BL/6小鼠的B16黑素瘤肺菌落發(fā)展的影響。

*P＜0.01，相對于載體(Kruskal-Wallis和Dunnett′s檢驗)
權(quán)利要求
1.通式I化合物 或其藥學(xué)可接受的鹽其中，R2代表四唑基；并且●R3、R4、R5、R6、R12、R13、R14、R15和R16各自獨(dú)立地代表氫、鹵素、三氟甲基、硝基、烷基、烷基羰基、-NRaRb、-NRa-CO-Rb、苯基或雜芳基；該苯基任選被鹵素、三氟甲基、硝基、-CO-NHRc、-CO-O-Rc或-CO-NR′R″取代；其中，Rc是氫、烷基或苯基；R′和R″各自獨(dú)立地為氫或烷基；或R′和R″與它們連接的氮一起形成5到7元雜環(huán)，該環(huán)可任選含有作為環(huán)成員的一個氧原子，和/或一個另外的氮原子，和/或一個碳-碳雙鍵，和/或一個碳-氮雙鍵；并且該雜環(huán)可任選被烷基取代；Ra和Rb各自獨(dú)立地為氫或烷基；或者●R15和R16，或R14和R15與它們連接的苯環(huán)一起形成萘環(huán)或茚滿環(huán)；并且R3、R4、R5、R6、R12和R13與R14、R15和R16中剩下的一個如上定義；用于制備治療、預(yù)防或減輕哺乳動物包括人類的疾病或失調(diào)或病癥的藥物組合物的用途，所述疾病、失調(diào)或病癥對血管生成的抑制有應(yīng)答。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，其中R3、R5和R6代表氫；并且R4代表鹵素。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，其中R3、R5和R6代表氫；并且R4代表被三氟甲基、硝基或-CO-NHRc取代的苯基；其中，Rc是苯基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，其中，化合物是N-4-硝基苯基-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)苯基]脲；N-3，5-二(三氟甲基)苯基-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)苯基]脲；N-3-三氟甲基苯基-N′-[4-(3-硝基苯基)-2-(1-H-四唑-5-基)苯基]脲；N-3-三氟甲基苯基-N′-[4-(4-苯胺基羰基苯基)-2-(1-H-四唑-5-基)苯基]脲；N-3-三氟甲基苯基-N′-[4-(4-三氟甲基苯基)-2-(1-H-四唑-5-基)苯基]脲；N-(3-三氟甲基-苯基)-N′-[2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-三氟甲基-苯基)-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-三氟甲基-苯基)-N′-[4-苯基-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-氯-苯基)-N′-[2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-三氟甲基-苯基)-N′-[4-氨基-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-三氟甲基-苯基)-N′-[4-乙酰氨基-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-三氟甲基-苯基)-N′-[4-氨甲?；?2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-三氟甲基-苯基)-N′-[4-(N″，N″-二甲基氨甲?；?-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；3′-(1-H-四唑-5-基)-4′-[3-(3-三氟甲基-苯基)-脲基]-聯(lián)苯基-4-甲酸；N-(茚滿-5-基)-N′-[2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(聯(lián)苯基-4-基)-N′-[2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(聯(lián)苯基-3-基)-N′-[2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-乙?；?苯基)-N′-[2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(聯(lián)苯基-3-基)-N′-[2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-[3-(吡啶-3-基)-苯基]-N′-[2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-溴-苯基)-N′-[4′-(4-甲基-哌嗪-1-羰基)-3-(1-H-四唑-5-基)-聯(lián)苯基-4-基]脲；N-(3，5-二氯-苯基)-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3，4-二氯-苯基)-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(萘-1-基)-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(2-三氟甲基-苯基)-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(2-氟-苯基)-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(2-乙基-苯基)-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；或其藥學(xué)可接受的鹽。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，其中，對血管生成抑制有應(yīng)答的疾病、失調(diào)或病癥選自癌癥、前列腺癌、肺癌、乳腺癌、膀胱癌、腎癌、結(jié)腸癌、胃癌、胰腺癌、卵巢癌、黑素瘤、肝臟腫瘤、肉瘤、淋巴瘤、滲出性黃斑變性、與年齡有關(guān)的黃斑變性、視網(wǎng)膜病、糖尿病性視網(wǎng)膜病、增殖性糖尿病視網(wǎng)膜病、糖尿病性黃斑水腫(DME)、缺血性視網(wǎng)膜病、早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病、新生血管性青光眼、角膜新血管生成、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和牛皮癬。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，其中，化合物是N-4-硝基苯基-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)苯基]脲；N-3，5-二(三氟甲基)苯基-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)苯基]脲；N-3-三氟甲基苯基-N′-[4-(3-硝基苯基)-2-(1-H-四唑-5-基)苯基]脲；N-3-三氟甲基苯基-N′-[4-(4-苯胺基羰基苯基)-2-(1-H-四唑-5-基)苯基]脲；N-3-三氟甲基苯基-N′-[4-(4-三氟甲基苯基)-2-(1-H-四唑-5-基)苯基]脲；或其藥學(xué)可接受的鹽，并且所述治療是抗轉(zhuǎn)移治療。
7.VRAC阻斷劑或其藥學(xué)可接受的鹽用于制備治療、預(yù)防或減輕哺乳動物包括人類的年齡相關(guān)性黃斑變性的藥物組合物的用途。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的用途，其中，VRAC阻斷劑是通式I化合物 或其藥學(xué)可接受的鹽其中，R2代表四唑基；并且●R3、R4、R5、R6、R12、R13、R14、R15和R16各自獨(dú)立地代表氫、鹵素、三氟甲基、硝基、烷基、烷基羰基、-NRaRb、-NRa-CO-Rb、苯基或雜芳基；該苯基任選被鹵素、三氟甲基、硝基、-CO-NHRc、-CO-O-Rc或-CO-NR′R″取代；其中，Rc是氫、烷基或苯基；R′和R″各自獨(dú)立地為氫或烷基；或R′和R″與它們連接的氮一起形成5到7元雜環(huán)，該環(huán)可任選含有作為環(huán)成員的一個氧原子，和/或一個另外的氮原子，和/或一個碳-碳雙鍵，和/或一個碳-氮雙鍵；并且該雜環(huán)可任選被烷基取代；Ra和Rb各自獨(dú)立地為氫或烷基；或者●R15和R16，或R14和R15與它們連接的苯環(huán)一起形成萘環(huán)或茚滿環(huán)；并且R3、R4、R5、R6、R12和R13與R14、R15和R16中剩下的一個如上定義。
9.根據(jù)權(quán)利要求7的用途，其中，化合物是N-4-硝基苯基-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)苯基]脲；N-3，5-二(三氟甲基)苯基-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)苯基]脲；N-3-三氟甲基苯基-N′-[4-(3-硝基苯基)-2-(1-H-四唑-5-基)苯基]脲；N-3-三氟甲基苯基-N′-[4-(4-苯胺基羰基苯基)-2-(1-H-四唑-5-基)苯基]脲；N-3-三氟甲基苯基-N′-[4-(4-三氟甲基苯基)-2-(1-H-四唑-5-基)苯基]脲；N-(3-三氟甲基-苯基)-N′-[2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-三氟甲基-苯基)-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-三氟甲基-苯基)-N′-[4-苯基-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-氯-苯基)-N′-[2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-三氟甲基-苯基)-N′-[4-氨基-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-三氟甲基-苯基)-N′-[4-乙酰氨基-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-三氟甲基-苯基)-N′-[4-氨甲酰基-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-三氟甲基-苯基)-N′-[4-(N″，N″-二甲基氨甲?；?-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；3′-(1-H-四唑-5-基)-4′-[3-(3-三氟甲基-苯基)-脲基]-聯(lián)苯基-4-甲酸；N-(茚滿-5-基)-N′-[2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(聯(lián)苯基-4-基)-N′-[2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(聯(lián)苯基-3-基)-N′-[2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-乙?；?苯基)-N′-[2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(聯(lián)苯基-3-基)-N′-[2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-[3-(吡啶-3-基)-苯基]-N′-[2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3-溴-苯基)-N′-[4′-(4-甲基-哌嗪-1-羰基)-3-(1-H-四唑-5-基)-聯(lián)苯基-4-基]脲；N-(3，5-二氯-苯基)-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(3，4-二氯-苯基)-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(萘-1-基)-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(2-三氟甲基-苯基)-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(2-氟-苯基)-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；N-(2-乙基-苯基)-N′-[4-溴-2-(1-H-四唑-5-基)-苯基]脲；或其藥學(xué)可接受的鹽。
10.治療、預(yù)防或減輕活動物體包括人類的疾病或失調(diào)或病癥的方法，該疾病、失調(diào)或病癥對血管生成的抑制有應(yīng)答，包括給予有這種治療需求的活動物體包括人類治療有效量的通式I化合物 或其藥學(xué)可接受的鹽的步驟其中，R2代表四唑基；并且●R3、R4、R5、R6、R12、R13、R14、R15和R16各自獨(dú)立地代表氫、鹵素、三氟甲基、硝基、烷基、烷基羰基、-NRaRb、-NRa-CO-Rb、苯基或雜芳基；該苯基任選被鹵素、三氟甲基、硝基、-CO-NHRc、-CO-O-Rc或-CO-NR′R″取代；其中，Rc是氫、烷基或苯基；R′和R″各自獨(dú)立地為氫或烷基；或R′和R″與它們連接的氮一起形成5到7元雜環(huán)，該環(huán)可任選含有作為環(huán)成員的一個氧原子，和/或一個另外的氮原子，和/或一個碳-碳雙鍵，和/或一個碳-氮雙鍵；并且該雜環(huán)可任選被烷基取代；Ra和Rb各自獨(dú)立地為氫或烷基；或者●R15和R16，或R14和R15與它們連接的苯環(huán)一起形成萘環(huán)或茚滿環(huán)；并且R3、R4、R5、R6、R12和R13與R14、R15和R16中剩下的一個如上定義。
11.治療、預(yù)防或減輕活動物體包括人類的與年齡有關(guān)的黃斑變性的方法，包括給予有這種治療需求的活動物體包括人類治療有效量的VRAC阻斷劑或其藥學(xué)可接受的鹽的步驟。
全文摘要
本發(fā)明涉及某些化合物治療響應(yīng)抗血管生成療法的疾病的用途。過度的血管生成發(fā)生在一些疾病例如癌癥、糖尿病失明、年齡相關(guān)性黃斑變性、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和銀屑病中。這些化合物尤其用于抗轉(zhuǎn)移治療或用于與年齡有關(guān)的黃斑變性治療。
文檔編號C07D257/04GK1671378SQ03818373
公開日2005年9月21日 申請日期2003年7月31日 優(yōu)先權(quán)日2002年8月1日
發(fā)明者J·利希滕貝格, P·克里斯托弗森, B·H·達(dá)爾 申請人:神經(jīng)研究公司