專利名稱：N－(2－苯并噻唑基)－1－哌啶乙胺衍生物,其制備方法及其在治療中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及通式(I)化合物，
其中n代表0，1，2或3，R1代表氫或鹵原子或甲基或甲氧基，R2代表氫原子或甲基，及R3代表氫原子或一個或兩個鹵原子。
本發(fā)明化合物可以游離堿或其酸加成鹽狀態(tài)存在。
根據(jù)本發(fā)明，通式(I)化合物可以根據(jù)下列流程所示方法制備。
根據(jù)流程1，對于其中R2代表氫原子的化合物的情況，將通式(II)化合物(其中R1定義如上)與式(III)的氯代乙酰氯在類似《法國化學(xué)學(xué)會簡報》(Bull.Soc.Chim.France)(1962)736-737所述條件，即在質(zhì)子惰性溶劑中，例如二噁烷，20-100℃溫度下反應(yīng)。
將所得通式(IV)的酰胺與其中n和R3定義如上的通式(V)的哌啶在質(zhì)子情性溶劑，例如N，N-二甲基甲酰胺中，在50-80℃溫度下和在無機堿。例如碳酸鉀的存在下反應(yīng)，得到通式(VI)的酰胺。最后用簡單或復(fù)合還原劑如堿金屬氫化物或其它金屬氫化物如氫化鋁鋰，氫化硼，氫化硼/四氫呋喃或氫化硼/二甲硫醚復(fù)合物或氫化鋁，在芳香烴或醚惰性溶劑如甲苯，二甲苯，乙醚，四氫呋喃或二噁烷中，在30-140℃(取決于溶劑)溫度下將其還原為通式(I)的胺(其中R2＝H)。
流程1
根據(jù)流程2，對于其中R2代表甲基的化合物的情況，將通式(II)化合物(其中R1定義如上)首先與乙酸酐和甲酸的混合物在類似《四面體通訊》(TetrahedronLetters)(1982)23(33)3313-3318和《藥物化學(xué)雜志》(J.Med.Chem.)(1966)9830-832所述條件，即在惰性溶劑中，例如四氫呋喃，20-40℃溫度下反應(yīng)，然后將得到的N-甲?；虚g體按上述對通式(VI)化合物的還原方法進行還原，得到通式(VII)N-甲基-2-苯并噻唑胺。
或者，將其中n和R3定義如上的通式(V)的哌啶與1-溴-2-氯乙烷在該類反應(yīng)的標準條件下，即在極性溶劑中，例如N，N-二甲基甲酰胺，在無機堿存在下，例如碳酸鉀，在50-80℃溫度下反應(yīng)。
最后將所得通式(IX)的氯代衍生物與通式(VII)的N-甲基-2-苯并噻唑胺在極性溶劑中，例如N，N-二甲基甲酰胺，在無機堿存在下，例如碳酸鉀，在80-100℃溫度下反應(yīng)，得到通式(I)化合物(其中R2＝CH3)。
流程2
起始化合物通式(II)化合物可以在市場上得到。
起始化合物通式(V)化合物可以在市場上得到或者按專利申請EP-0109317和EP-0524846所述制備。
下列實施例詳細說明本發(fā)明少數(shù)幾個化合物的制備。元素分析和IR及NMR光譜確認所得化合物的結(jié)構(gòu)。
在標題后面括號中所示化合物的編號對應(yīng)后面表中化合物的編號。
實施例1(化合物1)N-(2-苯并噻唑基)-4-苯基-1-哌啶乙胺1.1.N-(2-苯并噻唑基)-2-氯乙酰胺鹽酸鹽將15g(0.1mol)2-苯并噻唑胺和200ml二噁烷裝入1升圓底燒瓶中，攪拌混合物直到溶解完全。加入11.3g(0.1mol)氯代乙酰氯并將混合物在50℃油浴上加熱24小時。再加入5.6g(0.05mol)溶解在50ml二噁烷的氯乙酰氯并繼續(xù)在50℃加熱過夜。冷卻混合物，過濾分離沉淀。依次用少量二噁烷和石油醚洗滌并在五氧化磷存在下干燥，得到25.49g產(chǎn)物。不用進一步處理即可直接用于下步反應(yīng)。
1.2.N-(2-苯并噻唑基)-4-苯基-1-哌啶乙酰胺將2.63g(0.01mol)N-(2-苯并噻唑基)-2-氯乙酰胺鹽酸鹽，1.61g(0.01mol)4-苯基哌啶，2.76g碳酸鉀和80ml N，N-二甲基甲酰胺裝入500ml圓底燒瓶中，將該混合物在50℃加熱3小時30分鐘。冷卻混合物，加入160ml水，過濾收集沉淀并干燥，得到3.15g產(chǎn)物。不用進一步處理即可直接用于下步反應(yīng)。
1.3. N-(2-苯并噻唑基)-4-苯基-1-哌啶乙胺依次將430mg(0.0112mol)氫化鋁鋰和60ml四氫呋喃裝入500ml圓底燒瓶中，并將該懸浮液加熱回流。滴加溶解在30ml四氫呋喃中的2g(0.0056mol)N-(2-苯并噻唑基)-4-苯基-1-哌啶乙酰胺，保持加熱15分鐘。冷卻混合物，加入56ml乙酸乙酯和22ml水，出現(xiàn)沉淀后分離有機相，減壓蒸發(fā)溶劑并減壓干燥油狀剩余物，得到2.48g粗產(chǎn)物。用硅膠柱色譜純化該產(chǎn)物，用9∶1二氯甲烷和甲醇洗脫，得到1.6g淡黃色油，將其結(jié)晶。從2-丙醇中重結(jié)晶及減壓干燥后，最終分離出0.81g化合物。
熔點140-141℃。
實施例2(化合物3)N-(2-苯并噻唑基)-4-[(4-氟苯基)甲基]-1-哌啶乙胺乙二酸鹽2.1. N-(2-苯并噻唑基)-4-[(4-氟苯基)甲基]-1-哌啶乙酰胺將2.26g(0.0086mol)N-(2-苯并噻唑基)-2-氯乙酰胺鹽酸鹽，2.29g(0.01mol)4-[(4-氟苯基)甲基]-1-哌啶鹽酸鹽，4.14g(0.03mol)碳酸鉀和80ml N，N-二甲基甲酰胺裝入500ml圓底燒瓶中，將該混合物在50℃加熱2小時30分鐘。冷卻混合物，加入240ml水。在冰浴中冷卻混合物，并過濾收集白色沉淀，用水充分洗滌并在五氧化磷存在下干燥，得到2.9g產(chǎn)物。將該產(chǎn)物從30ml乙醇中重結(jié)晶。干燥后得到2.42g化合物。
熔點141-142℃。
2.2 N-(2-苯并噻唑基)-4-[(4-氟苯基)甲基]-1-哌啶乙胺乙二酸鹽將1.3g(0.00349mol)溶解在25ml無水四氫呋喃中的N-(2-苯并噻唑基)-4-[(4-氟苯基)甲基]-1-哌啶乙酰胺裝入250ml三頸圓底燒瓶中，加入1.09ml即3當量硼/二甲硫醚復(fù)合物并將該混合物加熱回流4小時。冷卻混合物至室溫，加入53ml 2N鹽酸和25ml甲醇的混合物，將該混合物再加熱回流1小時30分鐘并放置過夜。加入濃氫氧化鈉至混合物中直到pH為堿性，用乙酸乙酯萃取該混合物三次。用水洗滌有機相，硫酸鈉干燥，過濾并減壓蒸發(fā)濾液，得到1.6g油狀產(chǎn)物。用硅膠柱色譜純化該產(chǎn)物，用95∶5的二氯甲烷和甲醇的混合物洗脫，得到0.83g不透明油。將該油溶解在含有1當量草酸的2-丙醇中。重結(jié)晶后，過濾并干燥，最后分離得到0.73g化合物。
熔點155-156℃。
實施例3(化合物4)N-(2-苯并噻唑基)-N-甲基-4-(苯基甲基)-1-哌啶乙胺乙二酸鹽3.1.N-甲基-2-苯并噻唑胺將10.2ml乙酸酐裝入圓底燒瓶中，滴加4.3ml甲酸同時攪拌，并將混合物在50℃加熱2小時。冷卻混合物至室溫，加入10ml無水四氫呋喃，然后滴加11.25g(0.075mol)2-苯并噻唑胺的30ml無水四氫呋喃溶液并且使溫度不超過40℃，將混合物放置2天。減壓蒸發(fā)溶劑，用石油醚洗滌結(jié)晶的剩余物二次并在五氧化磷存在下干燥，得到13g中間體N-(2-苯并噻唑基)甲酰胺。
制備0.854g(0.00224mol)氫化鋁鋰的50ml四氫呋喃懸浮液并加熱回流，加入2g(0.0112mol)甲?；虚g體的100ml四氫呋喃溶液并繼續(xù)加熱30分鐘。冷卻混合物，加入100ml乙酸乙酯，滴加38ml水，沉淀出現(xiàn)后分離有機相并減壓蒸發(fā)，在石油醚中研磨結(jié)晶的剩余物，過濾并在五氧化磷存在下干燥，得到1.5g化合物。
3.2.1-(2-氯乙基)-4-(苯基甲基)哌啶將溶解在50ml N，N-二甲基甲酰胺中的3.5g(0.02mol)4-(苯基甲基)哌啶裝入圓底燒瓶中，加入2.86g(0.02mol)1-溴-2-氯乙烷和2.76g(0.02mol)碳酸鉀并在室溫劇烈攪拌混合物1小時。將混合物到入250ml冰冷卻的水中，用150ml乙酸乙酯萃取二次。用鹽水洗滌有機相并減壓蒸發(fā)溶劑，得到7g油狀產(chǎn)物，用硅膠柱色譜純化該產(chǎn)物，用乙酸乙酯洗脫，得到2.1g油狀純化的產(chǎn)物。
3.3.N-(2-苯并噻唑基)-N-甲基-4-(苯基甲基)-1-哌啶乙胺乙二酸鹽將1g(0.00421mol)1-(2-氯乙基)-4-(苯基甲基)哌啶溶解在25mlN，N-二甲基甲酰胺中，加入0.7g(0.00426mol)N-甲基-2-苯并噻唑胺和0.8g碳酸鉀并將混合物在100℃加熱1小時。冰浴中冷卻，加入50ml水，用100ml乙酸乙酯萃取二次，用鹽水洗滌有機相并蒸發(fā)，得到油狀剩余物。將其用兩個連續(xù)硅膠柱色譜純化，第一個用90∶10二氯甲烷和甲醇的混合物洗脫，第二個用乙酸乙酯洗脫，得到0.3g化合物。取出其中0.1g在乙醇中形成草酸鹽。
熔點164-166℃。
實施例4(化合物11)N-(2-苯并噻唑基)-4-[2-(4-氟苯基)乙基]-1-哌啶乙胺4.1 N-(2-苯并噻唑基)-4-[2-(4-氟苯基)乙基]-1-哌啶乙酰胺將2.63g(0.01mol)N-(2-苯并噻唑基)-2-氯乙酰胺鹽酸鹽，2.44g(0.01mol)4-[2-(4-氟苯基)乙基]-1-哌啶鹽酸鹽，4.14g(0.03mol)碳酸鉀和80ml N，N-二甲基甲酰胺裝入500ml圓底燒瓶中，將該混合物在50℃加熱3小時30分鐘。冷卻混合物，加入240ml水并用300ml乙酸乙酯萃取化合物。依次用水和飽和氯化鈉溶液洗滌有機相，硫酸鎂干燥，過濾并減壓蒸發(fā)濾液。得到棕色油狀產(chǎn)物，不用處理將其用于下步。
4.2 N-(2-苯并噻唑基)-4-[2-(4-氟苯基)乙基]-1-哌啶乙胺將0.96g(0.025mol)氫化鋁鋰和140ml無水四氫呋喃在氮氣氛下裝入500ml三頸圓底燒瓶中，加熱回流懸浮液，滴加5.0g(0.01mol)溶解在60ml無水四氫呋喃中的N-(2-苯并噻唑基)-4-[2-(4-氟苯基)乙基]-1-哌啶乙酰胺并繼續(xù)加熱30分鐘。冷卻混合物，加入140ml乙酸乙酯和51ml水，分離有機相，減壓蒸除溶劑并用硅膠柱色譜純化剩余物，用9∶1二氯甲烷和甲醇的混合物洗脫，得到1.6g油。將其結(jié)晶，從乙醇和水的混合物中重結(jié)晶接著減壓干燥后分離得到1.23g化合物。
熔點107-108℃。
下表中說明本發(fā)明幾個化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)和物理性質(zhì)。在“鹽”欄中，“-”指化合物為堿狀態(tài)，“ox.”指草酸鹽或乙二酸鹽，“fum.”指富馬酸鹽或(E)-2-丁二酸鹽。酸/堿的摩爾比如括號中所示。表
<p>對本發(fā)明化合物進行試驗以說明它們作為治療用活性物質(zhì)的價值。
因此，根據(jù)類似《中風(fēng)》(stroke)(1989)20 84-91中所述方法，通過鼠的中腦動脈管閉塞產(chǎn)生的永久性病灶缺血模型對本發(fā)明化合物的神經(jīng)保護活性進行研究。
美索比妥鈉麻醉條件下結(jié)扎翼突腭動脈，主頸(common carotid)動脈和左外側(cè)頸動脈，將聚酰胺線引入長約18mm的內(nèi)部頸動脈，對應(yīng)于內(nèi)部頸動脈起點與中腦動脈起點的距離。
閉塞后用所研究的化合物進行靜脈內(nèi)給藥。
中腦動脈閉塞24小時后殺死動物，取出腦子。
通過測量沾有2，3，5-三苯基四唑金翁氯化物的6個冠狀扇區(qū)上壞死的面積來估算腦梗塞范圍/體積的大小。例如，上面表中化合物11在閉塞后10分鐘，1小時30分鐘，3小時和6小時后以1mg/kg劑量靜脈內(nèi)給藥可以明顯減小梗塞體積約48％。
還用本發(fā)明化合物進行了鼠的整個大腦缺血試驗。
缺血是由于迅速靜脈注射氯化鎂引起的心動停止。在這個試驗中，要測量“存活時間”，即每個鼠被注射氯化鎂與最后能觀察到呼吸活動之間的時間間隔。這個最后的活動被認為是中樞神經(jīng)系統(tǒng)具有功能的最后標志。注射氯化鎂約19秒后出現(xiàn)呼吸停止情況。
分10組來研究雄鼠(Charles River CD1)。試驗前隨意供應(yīng)它們食物和水。腹膜內(nèi)使用本發(fā)明化合物后10分鐘測量存活時間。結(jié)果以一組10只使用了化合物的鼠的存活時間與一組10只僅注射了載體液體的鼠的存活時間之差表示。存活時間的改進與化合物劑量之間的關(guān)系用半對數(shù)曲線圖記錄下來。
該曲線使“3秒有效劑量”(ED3，，)，即相對于對照組10只未處理的鼠可使存活時間增加3秒的劑量(mg/kg)得以計算。增加3秒存活時間既是統(tǒng)計性顯著又是可重復(fù)的。通過腹膜內(nèi)途徑給藥，本發(fā)明最活躍的化合物的ED3，，小于5mg/kg。
關(guān)于本發(fā)明化合物對D4多巴胺能受體的親和力的體外研究基本按Van Tol.等人，《自然》(Nature)(1991)350 610-614和Van Tol.等人《自然》(Nature)(1992)358 149-152所述進行，通過將人體D4.4受體轉(zhuǎn)染到CHO細胞中得到上述受體。
實驗?zāi)翘?，將存儲?80℃的膜制品(Receptor Biology，Inc.，Glen Echo，MD20812，USA)迅速融化，然后稀釋在20倍體積的培養(yǎng)液(50mM Tris-HCl，120mM NaCl，5mM KCl，2mM CaCl2，5mM MgCl2，pH＝7.5)。
將膜懸浮液(100μL，78μg的膜)在25℃和0.5nM[3H]螺旋哌丁苯(具體活性為17-20 Ci/mmol，New England Nuclear/Du Pont de Nemours，Boston，MA，USA)存在下在最終體積為1 mL的有或沒有試驗化合物的培養(yǎng)液中培養(yǎng)60分鐘。
用事先經(jīng)聚乙烯亞胺(0.5％)處理的Whatman GF/B濾膜過濾培養(yǎng)液(結(jié)束培養(yǎng)過程)。每個反應(yīng)試管用3mL Tris-NaCl緩沖液(50mM Tris-HCl，120mMNaCl，pH＝7.5)清洗3次。
在120℃爐中干燥濾膜5分鐘。用液閃計數(shù)器測定留在濾膜上的放射性。在1μM氟哌丁苯存在下測定非特定結(jié)合。
對于所研究的各種化合物的濃度，首先要計算[3H]螺環(huán)哌丁苯對特定結(jié)合抑制能力的百分比，然后測定IC50，即抑制50％結(jié)合的濃度。
本發(fā)明化合物的IC50值在3-30nM量級。
試驗結(jié)果表明，在體內(nèi)，本發(fā)明化合物有神經(jīng)保護性能，而在體外，它們代替了[3H]螺環(huán)哌丁苯與人體D4.4多巴胺能受體的特定結(jié)合。
因此，它們一方面可以被用來治療和預(yù)防由缺血或缺氧引起的腦血管疾病(大腦梗塞，顱腦或脊椎外傷，心跳或呼吸停止，瞬間缺血發(fā)作，產(chǎn)期窒息)，青光眼，漸進性神經(jīng)變性疾病(老年性癡呆，如阿爾茨海默病，脈管性癡呆，帕金森病，亨延頓病，橄欖體腦橋小腦萎縮癥，肌萎縮側(cè)硬化癥，由病毒引起的神經(jīng)變性疾病，等等)，以及預(yù)防伴隨心臟和血管手術(shù)或血管內(nèi)治療出現(xiàn)的腦缺血意外事故。
另一方面，它們可以被用來治療精神病，特別是精神分裂癥(缺乏型和產(chǎn)生型)，以及由neuroleptics或帕金森病的結(jié)果引起的急性和慢性錐體束外綜合征，可以治療各種形式的焦慮，恐慌發(fā)作，恐怖癥，強迫觀念性疾病，治療不同形式的抑郁癥，包括精神抑郁癥，治療煙癮和酒精上癮，以及下丘腦垂體功能性疾病，和治療伴隨年齡增長或阿爾茨海默病的識別性疾病。
為了達到這個目的，它們可以所有藥劑形式出現(xiàn)，與適當賦形劑結(jié)合，用于內(nèi)服，非腸道(胃腸外)或經(jīng)皮膚給藥，例如，以片劑，糖錠劑，囊劑(包括硬明膠囊劑)，用于口服或注射給藥的溶液或懸浮液，栓劑，貼劑(patch)等，所含劑量為日給藥1-500mg活性物質(zhì)。
權(quán)利要求
1.通式(I)化合物，
其中n代表0，1，2或3，R1代表氫或鹵原子或甲基或甲氧基，R2代表氫原子或甲基，及R3代表氫原子或一個或兩個鹵原子。
2.制備權(quán)利要求1化合物的方法，其特征在于-制備R2代表氫原子的式(I)化合物，即將通式(II)化合物
其中R1定義同權(quán)利要求1，與氯乙酰氯反應(yīng)，得到通式(IV)的酰胺，
然后將其與通式(V)的哌啶反應(yīng)，
其中n和R3定義同權(quán)利要求1，得到通式(VI)的酰胺，
最后，將其還原成通式(I)的胺(R2＝H)，
或者，-制備R2代表甲基的式(I)化合物，即將通式(II)化合物
其中R1定義同權(quán)利要求1，首先與乙酸酐和甲酸反應(yīng)，然后將所得N-甲?；虚g體還原，得到通式(VII)的N-甲基-2-苯并噻唑胺，
另外，將通式(V)的哌啶
其中n和R3定義同權(quán)利要求1，同1-溴-2-氯乙烷反應(yīng)，得到通式(IX)的含氯衍生物，
最后，將其通式(VII)的N-甲基-2-苯并噻唑胺反應(yīng)，得到通式(I)化合物(R2＝CH3)，
3.一種藥物，其特征在于它含有權(quán)利要求1或2的化合物。
4.一種藥物組合物，其特征在于它含有權(quán)利要求1或2的化合物，及與其混合的賦形劑。
全文摘要
通式(Ⅰ)的化合物及其在治療中的應(yīng)用,其中,n代表0,1,2或3,R
文檔編號A61P25/00GK1230959SQ9719811
公開日1999年10月6日 申請日期1997年9月26日 優(yōu)先權(quán)日1996年10月1日
發(fā)明者吉哈德·達戈贊里, 帕斯卡爾·喬治, 帕德里克·拉德努瓦, 喬納森·弗羅斯特, 約翰內(nèi)斯·舍馬克, 瑪麗亞－卡門·雷尼奧內(nèi)斯, 帕斯卡爾·馬加特 申請人:合成實驗室公司