本發(fā)明涉及藥物制劑領(lǐng)域，具體涉及一種鹽酸阿霉素自組裝聚合物納米粒及其制備方法。
背景技術(shù)：
：阿霉素(dox)是常用一線化療藥物，具有極強的藥理活性，抗腫瘤譜廣，對乳腺癌、肺癌等多種實體腫瘤均具有顯著療效，其作用機制主要是阿霉素分子嵌入dna，抑制核酸的合成。但是該藥靜脈注射后，毒副作用大，存在嚴重的劑量依賴的心臟毒性以及骨髓抑制等不良反應(yīng)，且長期應(yīng)用阿霉素易出現(xiàn)耐藥性，而且給藥后血漿半衰期極短，降低了療效，導(dǎo)致治療指數(shù)偏低，使鹽酸阿霉素的臨床應(yīng)用受到了很大限制。因此，構(gòu)建一種新型腫瘤靶向遞藥系統(tǒng)，增加阿霉素在腫瘤組織的富集，降低阿霉素在正常組織的分布，降低藥物不良反應(yīng)，延緩藥物在體釋放，減少阿霉素的毒性，有效提高阿霉素的療效是十分必要的。自組裝聚合物納米粒，即聚合物膠束給藥系統(tǒng)，是近年來研究十分活躍的抗腫瘤納米給藥系統(tǒng)。它是由兩親性聚合物在水中達到臨界膠束濃度后自組裝形成具有疏水性內(nèi)核和親水性外殼的自組裝聚合物納米粒。作為藥物載體，其提供的親水外殼可以維持在水性環(huán)境中的穩(wěn)定性，將藥物與外界環(huán)境隔離開，防止藥物泄露，提高載藥系統(tǒng)的穩(wěn)定性。聚合物中還可以引入對ph敏感的化學(xué)鍵，制備得到具有ph響應(yīng)的智能自組裝聚合物納米粒，對腫瘤環(huán)境的低ph敏感使制劑在腫瘤給藥方面具有明顯優(yōu)越性。由于其粒徑小且分散均勻，很容易通過“滲透和滯留”(epr)效應(yīng)聚集在腫瘤組織，具有天然的被動靶向作用，能夠提高腫瘤部位的藥物，減少化療藥物的不良反應(yīng)，可以顯著地改進腫瘤的臨床治療，具有廣闊的發(fā)展前景。目前，現(xiàn)有的鹽酸阿霉素注射劑毒副作用嚴重，除骨髓抑制，胃腸道毒性以及脫發(fā)外，還可引起嚴重的心臟毒性，表現(xiàn)為各種心率失常，累積量大時可發(fā)生不可逆的心肌損傷，且分子結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，給藥后血漿半衰期極短，嚴重降低了其療效。所以研究一種鹽酸阿霉素的新制劑改善藥物體內(nèi)分布、增強其選擇性，減少藥物的不良反應(yīng)，降低藥物自身的毒性，并提高藥物穩(wěn)定性，延長在體內(nèi)的循環(huán)時間，提高藥效，改善藥物的藥動學(xué)性質(zhì)，具有極高的應(yīng)用價值。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明目的是提供一種可降低藥物毒性同時減少給藥頻率，提高藥物穩(wěn)定性，延緩藥物的在體釋放時間，改善藥物體內(nèi)分布、增強其選擇性，減少藥物不良反應(yīng)的鹽酸阿霉素自組裝聚合物納米粒及其制備方法，以提高藥物生物利用度及藥效，發(fā)揮更好的治療效果。本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：一種鹽酸阿霉素自組裝聚合物納米粒，由鹽酸阿霉素和一種兩親性高分子聚合物plga制成；所述plga是由乳酸la和羥基乙酸ga兩種單體構(gòu)成。所述的一種鹽酸阿霉素自組裝聚合物納米粒，在共聚物組成的配比中，兩種單體乳酸與羥基乙酸比例不大于90/10且不小于40/60。所述的一種鹽酸阿霉素自組裝聚合物納米粒，乳酸與羥基乙酸比例為50/50。一種所述鹽酸阿霉素自組裝聚合物納米粒的制備方法，包括以下步驟：1)將藥物鹽酸阿霉素溶于極性有機溶劑a中，得鹽酸阿霉素溶液；2)將plga溶于極性有機溶劑b中，得plga溶液；3)將鹽酸阿霉素溶液和plga溶液混合均勻，得共溶液，在攪拌條件下，將共溶液滴加到水相中，持續(xù)攪拌，揮去有機溶劑；4)將揮發(fā)完畢后的溶液用離心機15000×g，25℃條件高速離心30min，收集沉淀即得鹽酸阿霉素自組裝聚合物納米粒。所述的制備方法，步驟1)所述極性有機溶劑a為二甲基亞砜。所述的制備方法，步驟2)所述極性有機溶劑b為乙腈、丙酮或二氯甲烷。優(yōu)選地，所述極性有機溶劑b為乙腈。所述的制備方法，按質(zhì)量比，鹽酸阿霉素：plga＝1:25～1:5。優(yōu)選地，鹽酸阿霉素：plga＝1:10。所述的制備方法，步驟3)中按體積比，有機相有機溶劑b：水＝1:2～1:4。優(yōu)選地，有機溶劑b：水＝1:3。所述的制備方法，步驟3)中攪拌速度為20-40r/min。優(yōu)選地，攪拌速度為30r/min。本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明制備的鹽酸阿霉素自組裝聚合物納米粒，借助無毒、無刺激性的高分子材料plga作為包封載體包裹鹽酸阿霉素，將藥物包封于其中，提高藥物穩(wěn)定性，可實現(xiàn)調(diào)節(jié)藥物釋放速率，并且可以降低藥物毒性同時減少給藥頻率。改變藥物在體內(nèi)的分布、增強其選擇性，降低藥物的不良反應(yīng)以及毒副作用，提高藥物生物利用度及藥效。應(yīng)用的高分子材料乳酸-羥基乙酸共聚物(plga)是美國fda認證并批準收錄為藥用輔料，其降解產(chǎn)物乳酸和羥基乙酸可參與人體的新陳代謝,最終形成二氧化碳和水被排出體外，具有良好的生物相容性和生物降解性，并且聚合物中的酯鍵水解對腫瘤環(huán)境的低ph敏感，使制劑在腫瘤給藥方面具有明顯優(yōu)越性。本發(fā)明使用的是乳化溶劑揮發(fā)法，過程中用到的有機溶劑，屬于ichq3c二類溶劑，是制藥行業(yè)里廣泛使用的溶劑，價廉易得。處方中未使用任何表面活性劑，使得毒性降低。本發(fā)明制備的鹽酸阿霉素自組裝聚合物納米粒，處方工藝簡單，處方中未使用任何表面活性劑，安全性高，無刺激性，無生理毒性，具有良好的生物相容性，成本較低，易于工業(yè)化。附圖說明圖1是實施例5制備的鹽酸阿霉素-plga自組裝聚合物納米粒的粒徑分布圖。圖2是實施例5制備的鹽酸阿霉素-plga自組裝聚合物納米粒的透射電鏡圖。圖3是實施例5制備的鹽酸阿霉素-plga自組裝聚合物納米粒體外釋放曲線。具體實施方式實施例1鹽酸阿霉素自組裝聚合物納米粒的制備處方組成：鹽酸阿霉素作為主藥，plga作為聚合物載體。具體制備方法如下：1)精密稱取鹽酸阿霉素0.1mg溶于1ml二甲基亞砜(dmso)中，得到鹽酸阿霉素濃度為0.1mg/ml的dmso溶液。2)精密稱取1mgplga溶于1ml乙腈中制成濃度為1mg/ml的plga溶液。3)精密移取25μl鹽酸阿霉素溶液逐滴加入plga溶液中，混合均勻，得共溶液。取3ml去離子水置于燒杯中，磁力攪拌條件下，將共溶液緩慢逐滴滴加到去離子水中，在室溫下用不同的攪拌速度20r/min，30r/min，40r/min持續(xù)攪拌4h，使有機溶劑逐漸揮發(fā)。4)待有機溶劑揮發(fā)完畢后，將溶液用離心機15000×g，25℃高速離心30min，收集沉淀即得鹽酸阿霉素-plga自組裝聚合物納米粒。測試其粒徑、pdi、包封率，結(jié)果如表1。表1攪拌速度(r/min)粒徑/nmpdi包封率(ee％)2076.590.16377.13075.450.15777.64075.170.16077.8由表1可見，不同的攪拌速度20r/min，30r/min，40r/min對于載藥納米粒的粒徑和包封率并無顯著影響，有機溶劑揮發(fā)速度隨著攪拌速度的增大而加快，但是攪拌速度過快溶液較易濺出，因此優(yōu)選攪拌速度30r/min。實施例2鹽酸阿霉素自組裝聚合物納米粒的制備處方組成：鹽酸阿霉素作為主藥，plga作為聚合物載體。具體制備方法同實施例1，保持其它條件不變，攪拌速度選擇30r/min，只是改變步驟2)plga溶液的溶劑種類，即分別精密稱取1mgplga溶于1ml乙腈、1ml丙酮、1ml二氯甲烷中制成濃度為1mg/ml的plga溶液，測得鹽酸阿霉素-plga自組裝聚合物納米粒的粒徑、pdi，結(jié)果如表2。表2有機溶劑粒徑/nmpdi丙酮137.680.189乙腈75.450.157二氯甲烷168.920.367由表2可見，有機溶劑選擇乙腈時得到的納米粒粒徑及分布均較小，較為滿意，因此有機溶劑優(yōu)選乙腈。實施例3鹽酸阿霉素自組裝聚合物納米粒的制備處方組成：鹽酸阿霉素作為主藥，plga作為聚合物載體。具體制備方法同實施例1，保持其它條件不變，攪拌速度選擇30r/min，只是改變步驟1)中鹽酸阿霉素的投入量，即分別按鹽酸阿霉素與plga的質(zhì)量比為1:25、1:20、1:10、1:5的比例進行投料，測得鹽酸阿霉素-plga自組裝聚合物納米粒的粒徑、pdi、包封率，結(jié)果如表3。表3鹽酸阿霉素：plga粒徑/nmpdi包封率(ee％)1:2598.310.18968.11:2085.720.20173.91:1075.450.15777.61:580.250.14271.8由表3可見，鹽酸阿霉素與plga的比例由1:25增加到1:10，包封率逐漸增大，在比例1:10時達到最大，繼續(xù)增加藥物的量至比例為1:5，包封率反而下降。因此，優(yōu)選鹽酸阿霉素和plga的質(zhì)量投料比1:10。實施例4鹽酸阿霉素自組裝聚合物納米粒的制備處方組成為：鹽酸阿霉素作為主藥，plga作為聚合物載體。具體制備方法同實施例1，保持其它條件不變，攪拌速度選擇30r/min，只是改變油水相體積比，即將處方量1mgplga分別溶于1.5ml、1ml、0.75ml乙腈中，使有機相與水相體積比分別為1:2、1:3、1:4。測得鹽酸阿霉素-plga自組裝聚合物納米粒的粒徑、pdi、包封率，如表4。表4有機相：水相粒徑/nmpdi包封率(ee％)1:280.210.17472.31:375.450.15777.61:473.460.16277.9由表4可見，隨著水相比例的增大，plga載藥納米粒的粒徑逐漸減小，且其比例增大到1:3時，粒徑降低的速率減小，對包封率的影響也減小。因此，油水相體積比優(yōu)選1:3。實施例5鹽酸阿霉素自組裝聚合物納米粒的制備處方組成為：鹽酸阿霉素0.1mg作為主藥，plga1mg作為聚合物載體。(一)制備方法如下：1)精密稱取鹽酸阿霉素0.1mg溶于1ml二甲基亞砜(dmso)中，得到鹽酸阿霉素濃度為0.1mg/ml的dmso溶液。2)精密稱取1mgplga溶于1ml乙腈中制成濃度為1mg/ml的plga溶液。3)精密移取25μl鹽酸阿霉素溶液逐滴加入plga溶液中，混合均勻，得共溶液。取3ml去離子水置于燒杯中，磁力攪拌條件下，將共溶液緩慢逐滴滴加到去離子水中，在室溫下，用攪拌速度為30r/min，持續(xù)攪拌4h，使有機溶劑逐漸揮發(fā)。4)待有機溶劑揮發(fā)完畢后，將溶液用離心機15000×g，25℃高速離心30min，收集沉淀即得鹽酸阿霉素-plga自組裝聚合物納米粒。(二)采用馬爾文nano-zs90納米粒度及zeta電位分析儀檢測鹽酸阿霉素-plga自組裝聚合物納米粒zeta電位、粒徑及其分布。圖1為粒徑分布圖。結(jié)果表明，制備的鹽酸阿霉素-plga自組裝聚合物納米粒平均粒徑為77.6nm，多分散系數(shù)pdi為0.157，zeta電位為-21.4mv，分散均勻穩(wěn)定。(三)采用透射電鏡觀察鹽酸阿霉素-plga自組裝聚合物納米粒形態(tài)。圖2為透射電鏡圖。由圖2可見，制得的自組裝聚合物納米粒呈球形，大小均一。實施例6鹽酸阿霉素-plga自組裝聚合物納米粒的體外釋放實驗將實施例5制備的鹽酸阿霉素-plga自組裝聚合物納米粒進行體外釋放實驗，獲得的體外釋放曲線如圖3。由圖3可見，鹽酸阿霉素-plga納米粒具有明顯且良好的緩釋性能，且具有ph敏感特性，在ph6.8條件下釋放較快，而在ph7.4的生理環(huán)境下釋放相對較慢。此結(jié)果表明本制劑在腫瘤給藥方面具有明顯優(yōu)越性，較適合用于腫瘤方面的給藥與應(yīng)用。實施例7鹽酸阿霉素-plga自組裝聚合物納米粒的穩(wěn)定性試驗將實施例5制備的鹽酸阿霉素-plga自組裝聚合物納米粒，4℃下放置一個兩周，分別于0、1、5、7、10、14天后對其粒徑、pdi以及包封率進行參數(shù)測定，對穩(wěn)定性進行考察。結(jié)果見表5。表5天粒徑(nm)pdi包封率ee(％)075.450.15777.6175.980.17577.9575.040.17276.8777.870.18578.21078.210.19179.11478.920.20377.4由表5可見，樣品常溫放置兩周，粒徑及pdi保持穩(wěn)定，包封率也無明顯變化，整個體系在較長時間內(nèi)保持良好的穩(wěn)定性。當前第1頁12