本實用新型涉及醫(yī)療器械及其制備領(lǐng)域，特別是涉及一種凝血酶緩釋腔鏡下止血夾。

背景技術(shù)：

目前，隨著醫(yī)療技術(shù)的飛速發(fā)展與創(chuàng)新，各種腔鏡技術(shù)、微創(chuàng)技術(shù)等診療合一的醫(yī)學(xué)手段逐步成為主流醫(yī)療技術(shù)不斷出現(xiàn)，但腔鏡與微創(chuàng)器械也帶來一些上消化道出血是常見的消化道疾病，同時也是腔鏡下治療中常見的手術(shù)并發(fā)癥。對于上消化道出血的傳統(tǒng)內(nèi)科治療手段主要有局部噴灑或注射止血、靜脈應(yīng)用止血藥物等，目前腔鏡下止血廣泛應(yīng)用靶向藥物凝血酶局部作用于病灶表面，血液很快形成穩(wěn)定的凝血塊。但靶向噴灑后存在凝血酶被組織液快速稀釋的問題，使藥效降低。后隨著腔鏡下器械的不斷發(fā)展與改良，用于局部止血及封閉穿孔的各種吻合夾開始出現(xiàn)。鈦夾作為腔鏡下治療的重要器械之一，目前只對局部損傷承擔(dān)物理封閉治療作用。很多學(xué)者嘗試在醫(yī)用金屬基材上靶向緩釋凝血酶，目前所有的緩釋研究都基于生物惰性材料表面，不但生物活性差，而且重金屬離子毒性會造成凝血酶失效。羥基磷灰石(hydroxyapatite，簡寫為HA或HAP，分子式為Ca₁₀(OH)₂(PO₄)₆)是牙齒和骨骼的主要(無機(jī))成分，在前沿醫(yī)學(xué)上也作為人造骨的最佳成分。羥基磷灰石生物兼容性好，是能刺激或者誘導(dǎo)骨組織生長并能與骨組織形成骨性結(jié)合的天然陶瓷材料，生物兼容性及生物活性均優(yōu)于磷酸三鈣及其它磷鈣陶瓷材料。羥基磷灰石的使用，有助于細(xì)胞的粘附、增殖及功能發(fā)揮，在直接作為骨、牙等替代或缺損修復(fù)材料的基礎(chǔ)上，不但是優(yōu)異的骨組織工程載體材料，也可作為其它醫(yī)學(xué)功能材料或藥物的載體材料。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本實用新型的目的是解決現(xiàn)有凝血酶緩釋醫(yī)療器械領(lǐng)域中存在的部分問題，提供一種凝血酶緩釋腔鏡下止血夾。

本實用新型的目的是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的：

一種凝血酶緩釋腔鏡下止血夾，包括腔鏡下止血夾的金屬基底，所述金屬基底的金屬表面上依次覆蓋有化學(xué)轉(zhuǎn)換膜層、磷酸鹽層、羥基磷灰石層和凝血酶層。

優(yōu)選地，所述金屬基底的厚度為0.1-0.8毫米，磷酸鹽層的厚度為4-40微米，化學(xué)轉(zhuǎn)換膜層的厚度為1-10納米，羥基磷灰石層的厚度為0.02-0.06毫米，凝血酶層的厚度為0.1-1微米。

優(yōu)選地，所述金屬基底為不銹鋼，碳鋼，螺紋鋼，冷軋鋼，熱軋鋼，錳鋼，鋁，鋁合金，鈦，鈦合金，鈷合金，鎂鋁合金的一種。

本實用新型的有益效果：

1.本實用新型實現(xiàn)了腔鏡下止血夾金屬基的生物活性表面的凝血酶緩釋涂層制備，可實現(xiàn)從單純“裸”器械到“功能性”藥物復(fù)合器械的升級。

2.本實用新型可實現(xiàn)凝血酶等僅能局部應(yīng)用的藥物的靶向緩釋，可用于制備的“功能性”藥物復(fù)合腔鏡下止血夾可直接放置于人體靶器官以及手術(shù)靶部位。

3.本實用新型可實現(xiàn)凝血酶等藥物在金屬基涂層體系上的穩(wěn)定緩釋，藥物可實現(xiàn)在指定部位緩釋從而可持續(xù)增加周圍組織濃度，解決了局部噴灑的藥物被組織液快速稀釋而影響藥效的問題。

附圖說明

圖1是本申請凝血酶緩釋腔鏡下止血夾的產(chǎn)品圖示；

圖2是制備的穩(wěn)定羥基磷灰石納米/亞微米涂層；

圖3是羥基磷灰石納米/亞微米涂層表面的凝血酶層；

圖4是羥基磷灰石層的XPS曲線；

圖5是凝血酶層的XPS曲線；

圖6是不同時間下凝血酶平均濃度曲線圖；

圖7是不同時間段凝血酶的柱圖。

具體實施方式

為了更好地說明本實用新型，下面結(jié)合本實用新型實施例中的附圖，對本實用新型實施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述。

本實用新型的凝血酶緩釋腔鏡下止血夾，如圖1所示，包括腔鏡下止血夾的金屬基底12、金屬表面13、磷酸鹽層15、化學(xué)轉(zhuǎn)換膜層14、羥基磷灰石層16和凝血酶層17。所述金屬基底12的厚度為0.1-0.8毫米，磷酸鹽層15的厚度為4-40微米，化學(xué)轉(zhuǎn)換膜層14的厚度為1-10納米，羥基磷灰石層16的厚度為0.02-0.06毫米，凝血酶層17的厚度為0.1-1微米。

具體實施例1：

1.SU304奧氏體不銹鋼金屬基底12用去離子水超聲洗滌5分鐘，清除金屬表面13的油污或銹蝕。待金屬表面13干凈后，放置于干燥箱中60℃干燥8分鐘，以表面無殘留水滴為合格。

2.將5mol/l的羥基乙叉二膦酸溶所述溶液的1份為1l，雙氧水1份為1g。將不銹鋼金屬基底12浸泡于25℃上述混合溶液中2分鐘，進(jìn)行金屬表面13的磷酸鹽層15和化學(xué)轉(zhuǎn)換膜層14的制備。

3.取出后待多余溶液流下后，放置于干燥箱中60℃干燥8分鐘，使制備的磷酸鹽層15和化學(xué)轉(zhuǎn)換膜層14干燥。所述化學(xué)轉(zhuǎn)換膜層14為金屬表面13上很薄的一層薄膜。

4.待樣品表面無明顯液體或膠體，用去離子水對金屬表面13沖洗5分鐘，沖洗掉多余的磷化結(jié)晶殘留，剩下不易被沖洗掉的化學(xué)轉(zhuǎn)換膜層14表面的磷酸鹽層15，其厚度為10納米，磷酸鹽層的厚度為0.1微米。放置于25g/l不斷進(jìn)行攪拌的羥基磷灰石(HA)懸濁液中，28℃浸泡8分鐘。完成金屬表面化學(xué)裝換薄膜上的羥基磷灰石涂層的自組裝制備。保留一部分樣品進(jìn)行羥基磷灰石涂層的光電子能譜與原子力顯微鏡表征，見附圖2-5。

5.取出步驟4制備好的產(chǎn)品放入干燥箱中60℃干燥8分鐘，待表面無殘留水滴后。放入凝血酶凍干粉與0.9％生理鹽水制備4800U/l凝血酶溶液中，25℃浸泡1.5小時。

6.取出在30℃空氣中干燥2小時，進(jìn)行光電子能譜與原子力顯微鏡表征，原子力顯微鏡表征測試結(jié)果見附圖2-3,從AFM對比圖可以看出，制備前后表面出現(xiàn)明顯變化，淺色區(qū)域為凝血酶分子。光電子能譜表征測試結(jié)果見附圖4-5，經(jīng)過XPS對比可以看出，(1)凝血酶分子成功涂覆在羥基磷灰石表面，且有一定厚度；(2)從高分辨XPS解譜來看，沒有新的化學(xué)鍵和產(chǎn)生，緩釋產(chǎn)物是凝血酶。上述結(jié)果說明凝血酶涂層前后成分與形貌產(chǎn)生了明顯的變化，形成了穩(wěn)定的涂層，涂層為凝血酶層；沒有新的化學(xué)鍵結(jié)合產(chǎn)生，說明凝血酶無其它污染物產(chǎn)生。

7.取出步驟5樣品在30℃空氣中干燥2小時，每組取6塊樣品，利用酶標(biāo)儀在450nm波長下分別測定不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度，根據(jù)不同標(biāo)準(zhǔn)品濃度及對應(yīng)的吸光度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。在此基礎(chǔ)上不同時間下計算的出的平均凝血酶濃度如附圖6所示，從附圖6可知在0-60分鐘內(nèi)凝血酶釋放迅速，從60-180分鐘凝血酶釋放十分緩慢但仍可維持一定的濃度。

將鍍有凝血酶的金屬板(共6塊)分別浸泡于盛有200ml生理鹽水的燒杯中，分別于0h、1h、2h、3h、4h、5h取樣本液100ul置于標(biāo)記好的EP管中，每次取樣后棄去原有生理鹽水，利用酶標(biāo)儀測定不同時間下六組溶液的吸光度并計算平均值。不同時間下棄去浸泡溶液測得的吸光度應(yīng)用t檢驗兩兩組間比較P值均大于0.05，差異無統(tǒng)計學(xué)意義，每隔1小時棄去浸泡溶液前測得的溶液的吸光度無顯著差異，我們可以認(rèn)為相同時間段內(nèi)藥物涂層金屬板可穩(wěn)定持續(xù)釋放凝血酶。具體結(jié)果如附圖7所示。

上述結(jié)果說明凝血酶在1小時候達(dá)到穩(wěn)定緩釋值，而在持續(xù)變化的溶液中可以穩(wěn)定的緩釋凝血酶。

上述試驗研究表明“凝血酶-羥基磷灰石-無氧化物層-金屬”鋼板于生理鹽水溶液中可持續(xù)穩(wěn)定地釋放凝血酶，從而保證溶液中凝血酶的濃度，具有凝血酶緩釋效果，即，如此制備的凝血酶緩釋金屬基質(zhì)腔鏡下止血夾也具有良好的凝血酶緩釋效果。

以上所述，僅為本實用新型較佳的具體實施方式，但本實用新型的保護(hù)范圍并不局限于此，任何熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本實用新型披露的技術(shù)范圍內(nèi)，可輕易想到的變化或替換，都應(yīng)該涵蓋在本實用新型的保護(hù)范圍之內(nèi)。因此，本實用新型的保護(hù)范圍應(yīng)該以權(quán)利要求書的保護(hù)范圍為準(zhǔn)。